CN104094979A - 柳叶在制备消毒剂中的应用 - Google Patents

Abstract

本发明属于消毒剂技术领域，具体公开了柳叶在制备消毒剂中的应用。本发明通过研究发现，柳叶的抗菌消炎的功效，尤其是对表皮葡萄球菌、大肠杆菌、链球菌、痢疾杆菌和白色念珠菌具有良好的抑制作用。更重要的是，柳叶或其提取物具有的特殊的化学成分在熏蒸的条件下，表现出良好的理化性质，从而可用于空气消毒。经现代药理学实验证明，柳叶或其提取物可用于空气消毒，尤其在抑菌以及清洁湿润空气方面具有独到的功效。

Description

柳叶在制备消毒剂中的应用

技术领域

本发明涉及消毒剂技术领域，具体公开了柳叶在制备消毒剂中的应用。

背景技术

随着社会的发展，消毒剂在人们日常生活中已经得到越来越广泛的应用，目前市面上存在的消毒剂品种繁多，主要分为以下几类： (1)含氯消毒剂，如漂白粉、漂白精、84消毒液等，此类消毒剂为含氯化合物，具有一定的腐蚀性，长期和大量吸入后，会刺激人体皮肤及呼吸道粘膜，造成眼干涩、口干、干咳、皮肤发炎等症状。 (2)过氧化物类消毒剂，如过氧乙酸、过氧化氢、臭氧等，此类消毒剂的吸入会导致咳嗽、气喘、呼吸困难等，严重者导致化学性支气管炎等症状。 (3)表面活性剂型消毒剂，如碘伏、新洁尔灭、洗必泰等，此类消毒剂若浓度较高，接触皮肤及眼睛会引起灼伤等后果。     

现有的消毒剂多为化学制品，长期使用会给人类健康带来一定的危害。现阶段国内所报道出的中草药消毒制品中，天然安全的纯中药制剂抗菌杀菌效果不理想。目前，现有技术中报道的具有抗菌消毒效果的纯中药有蛇床子、白花蛇舌草、花椒、薄荷、苦参、百部、冰片、薄荷脑、金银花、连翘、黄连、蒲公英、板蓝根、栀子、甘草、麦冬等，至于柳叶是否具有抗菌消毒效果，现有技术中并未见报道。

发明内容

本发明的目的在于克服现有技术中纯中药消毒剂抑菌杀菌效果不明显的缺陷，提供柳叶或柳叶提取物在制备消毒剂中的应用。    

本发明的上述目的通过以下技术方案予以实现。

柳叶或柳叶提取物在制备消毒剂中的应用。

柳叶或柳叶提取物在制备抗菌消炎消毒剂中的应用。

本发明通过研究发现，柳叶或柳叶提取物具有抗菌消炎效果，尤其是对空气中普遍存在的细菌具有优良的抗菌作用，因此，可以将柳叶或柳叶提取物用于制备消毒剂，尤其是空气消毒剂。

优选地，所述的抗菌为抗表皮葡萄球菌、大肠杆菌、链球菌、痢疾杆菌和白色念珠菌。

一种抗菌消炎消毒剂，以15～100 份柳叶为原料药制成药剂。

所述抗菌消炎消毒剂是以柳叶或柳叶提取物为活性成分，加入药学上可接受的辅料制成的药学常用的制剂。优选地，如上所述消毒剂的药剂为液体制剂或固体制剂。

本发明所述的抗菌消炎消毒剂可以用于各种消毒领域，优选用于空气消毒方面。本发明所述消毒剂以柳叶或柳叶提取物为活性成分，其内蕴藏着丰富的杀菌抑菌成分，对细菌耐药具有一定的逆转作用并可以减轻细菌的选择压力，不易产生耐药性。同时，本发明所述消毒剂安全无毒、在消毒时产生的气味还可以提神醒脑，人、畜均无需离开消毒空间，极其适合医院的空气消毒以及密闭的公共场所、家庭及其养殖场的空气消毒。

优选地，所述抗菌消毒剂的制备方法，步骤如下：将柳叶采用煎煮进行提取，收集提取液，减压浓缩至生药浓度在室温下为1～3g/ml备用，向浓缩液中加入辅料制成液体制剂或固体制剂；

或者，将柳叶粉碎成超微粉，向超微粉中加入辅料，过筛、干燥制成颗粒制剂。

如上所述抗菌消炎消毒剂在空气消毒中的应用。

作为一种优选方案，所述煎煮方法可选为将柳叶切段，加入8～12倍量水，浸泡0.5～2h，提取2次，每次提取时间1.5～3h。

作为一种优选方案，所述将柳叶粉碎成超微粉，超微粉的粒径为≤15um。

    其实无论采用什么样的提取方法，只要是获取本发明所述原料药提取物的常规提取方法，按道理都落入本发明的保护范围。

    本发明所述抗菌消炎消毒剂是采用熏蒸方法消毒，微量的水蒸汽会带出大量中药有效成分，它们在空气中与细菌交互，从而起到抑菌杀菌的作用，带出的水蒸汽也会湿润空气、沉淀尘埃。

    与现有技术相比，本发明具有以下有益效果：

本发明通过研究发现，柳叶的抗菌消炎的功效，尤其是对表皮葡萄球菌、大肠杆菌、链球菌、痢疾杆菌和白色念珠菌具有良好的抑制作用。更重要的是，柳叶或其提取物具有的特殊的化学成分在熏蒸的条件下，表现出良好的理化性质，从而可用于空气消毒。经现代药理学实验证明，柳叶或其提取物可用于空气消毒，尤其在抗菌以及清洁湿润空气方面具有独到的功效。

附图说明

    图1急性眼刺激试验结果。

具体实施方式

下面结合说明书附图和具体实施例对本发明作进一步的解释说明，但具体实施例并不对本发明作任何限定。除非特别说明，实施例中所涉及的试剂、方法均为本领域常用的试剂和方法。

实施例1                     

一种消毒剂，其制备方法为：

S1.取60克柳叶采用煎煮进行提取，加入10倍量的蒸馏水提取2小时，过滤，压榨药渣，收集水提液。药渣再加入8倍量的蒸馏水提取1.5个小时。减压浓缩至生药浓度在室温下为1～3g/ml的浓缩提取液；

S2.将S1所述的浓缩提取液过滤，加入辅料，制备成液体制剂。

实施例2                     

一种消毒剂，其制备方法为：

S1.取100克柳叶采用75%乙醇回流提取，加入10倍量的75%乙醇提取2小时，过滤，压榨药渣，收集水提液。药渣再加入8倍量的75%乙醇提取1.5个小时。减压浓缩至生药浓度在室温下为1～3g/ml的浓缩提取液；

S2.将S1所述的浓缩提取液过滤，加入辅料，制备成液体制剂。

实施例3                     

一种消毒剂，其制备方法为：

    S1.取15克柳叶粉碎成超微粉。

S2.向S1中的超微粉中加入适量的淀粉和崩解剂制成软材，过筛制颗粒，50℃下干燥制成颗粒制剂。

对比例1

S1.取100克艾叶采用75%乙醇回流提取，加入10倍量的75%乙醇提取2小时，过滤，压榨药渣，收集水提液。药渣再加入8倍量的75%乙醇提取1.5个小时。减压浓缩至生药浓度在室温下为1～3g/ml的浓缩提取液；

S2.将S1所述的浓缩提取液过滤，加入辅料，制备成液体制剂。

对比例2

S1.取100克吴茱萸采用75%乙醇回流提取，加入10倍量的75%乙醇提取2小时，过滤，压榨药渣，收集水提液。药渣再加入8倍量的75%乙醇提取1.5个小时。减压浓缩至生药浓度在室温下为1～3g/ml的浓缩提取液；

    S2.将S1所述的浓缩提取液过滤，加入辅料，制备成液体制剂。

实施例4    

    药效实验：取实施例1～3和对比例1～2所述消毒剂进行抗菌实验结果如下：

    一、体外抑菌实验：

    1.平板抑菌实验：

细菌培养基的准备：称取蛋白胨10g、牛肉膏粉3g、氯化钠5g、琼脂15g并置于一铁容器内，加入去离子水1000ml，加热至牛肉膏跟琼脂完全溶解，补足蒸发的水分，并调节pH为7.3±0.2；将上述培养基分装至3个300ml的锥形瓶中，套上胶塞，并用报纸包好，121℃湿热灭菌20min。

    菌悬液的制备：取适量菌种悬液接种于5～10ml的营养肉汤培养基中，表皮葡萄球菌、大肠杆菌、痢疾杆菌在37℃摇床振动培养6～8h，链球菌在7℃摇床振动培养16～18h、白色念珠菌在30℃培养箱静止培养48～72h；用接种环取上述第一代菌悬液划线接种于营养琼脂培养基平板上，在上述条件下培养，再挑取典型菌落接种于营养琼脂斜面上培养。用接种环挑取上述斜面培养物于无菌PBS液中，梯度稀释至适宜浓度备用（1×10⁷～5×10⁸cfu/ml）。真菌菌悬液的制备方法同理。将制备好的菌悬液贴好相应的标签放入冰箱4℃下保存，当天使用。

最小抑菌浓度的测定：用二倍稀释法将上述各样品分别稀释成含500mg/ml、250mg/ml、125mg/ml、62.5mg/ml、31.25mg/ml、15.62mg/ml、7.81mg/ml、3.90mg/ml、1.95mg/ml、0.98mg/ml 、0.49mg/ml(原生药浓度)共11种浓度溶液。将直径6mm的圆滤纸片放入不同浓度的溶液中浸泡20min后取出，在无菌条件下晾干。将培养基倒入各平板中，每个平板约15 mL，水平放置冷却后待用。将已制备好的各菌悬液用移液枪吸取0.1 mL，分别注入相应的培养皿中，用已灭菌的涂布棒将菌液均匀涂布于培养基表面。用无菌镊子夹取上述晾干的含药滤纸片对号贴在含菌培养基表面，呈正三角分布，每菌每液做3个平衡样，并做相应的空白对照。把做好的平皿放入培养箱中，细菌37℃下培养24 h，真菌27℃下培养48h，按时取出，测定抑菌圈直径，以产生抑菌圈的最小的浓度为最低抑菌浓度(Minimal inhibitory concentration，MIC)。

实施例1～3所述消毒剂对表皮葡萄球菌、大肠杆菌、链球菌、痢疾杆菌以及白色念珠菌均有良好的抑制作用，抑菌数据见表1。

表1各实例组合物对不同菌种的最低抑菌浓度（mg/mL）结果

 2.对空气消毒技术规范中选定的特定菌种进行杀灭：

取白色葡萄球菌（即表皮葡萄球菌）菌悬液，用无菌脱脂棉过滤后，再用营养肉汤培养基稀释成所需浓度。同时调节两个气雾柜(或室)的温度、相对湿度至试验要求的温度和相对湿度。按设定的压力、气体流量及喷雾时间喷雾染菌。边喷雾染菌，边用风扇搅拌。喷雾染菌完毕，继续搅拌 5 min，而后静置 5 min。同时对对照组（蒸馏水）和试验组（实施例1～3所述消毒剂）气雾柜进行消毒前采样。气雾柜(或室)内空气中各阳性对照菌数达到5*10⁴～5*10⁶ cfu/m³。染菌完毕后，用液体撞击式采样器进行采样，然后在试验组气雾柜(或室)内进行熏蒸消毒。作用至规定时间，对试验组和对照气雾柜(或室)按前述方法同时进行采样。在将用液体撞击式采样器采集的样本，进行活菌培养计数，在 37℃ 培养箱内培养 48h，观察最后结果。

结果显示，经两个小时的熏蒸消毒，消除细菌的自然死亡，实施例1～3所述消毒剂对白色葡萄球菌的杀灭率见表2。

表2 各实例组合物对表皮葡萄球菌的杀灭率

 3.对空气中自然菌的杀灭情况：

选取空间体积为10m3的小房间，消毒剂采用已配置好的实施例1～3所述消毒剂。消毒条件：熏蒸仪T20℃、熏蒸120min。由专人进行消毒，消毒前、后各进入房间进行空气取样。实验前半小时将直径为9cm的普通琼脂平板放在房内、外对角线两点上，内外布点距离墙壁1m，布点的选择要避开障碍物和送风口。采样高度在距离地面80cm的平面上，暴露15min，盖好，并在37℃下培养72h，计算平均细菌菌落数，数值保持小数点后一位。整个操作过程应符合无菌操作。判断指标参考卫生部《消毒技术规范》中各类环境空气卫生标准，Ⅲ类环境包括普通病房、治疗室、换药室、诊室、普通病房等，空气细菌数<500cfu/m3为及格。实施例1~3所述消毒剂对自然菌的杀灭率见表3

表3   各实例组合物对空气中自然菌的杀灭率

    二、急性毒性：      

1.经口毒性：实验用昆明鼠320只，雌雄各半，体重18～22克，实验前禁食不禁水12h，按剂量0.2ml/10g（生药浓度为3.05g/ml）灌胃给与实施例1~3所述消毒剂，一日内灌胃2次，两次相隔8h。给药后常规饲养，观察2周。结果显示给药后小鼠活动正常，自主进食，个别眼睛微闭，呼吸频率加快。第二天上述不良症状消失，体重变化正常，14天内无小鼠死亡，结果见表4。

表4  各实例组合物小鼠急性经口毒性观察结果

 

 2.吸入毒性：实验用昆明鼠160只，雌雄各半，体重18～22克，实验前先置于染毒柜自主活动2小时/天，到第四天，采用静式染毒法染毒。实施例1~3所述消毒剂低毒无毒，故采用一次限量法。在染毒期间小鼠躁动不安，眼睛半闭，呼吸频率稍快，无小鼠死亡。观察期间小鼠状态活跃，体重增加正常，无异常生理现象。结果见表5。第14天处死全部动物，进行大体解剖，脑、心、肺、肝、胃、肾、大肠等主要脏器表面光滑，无出血、淤血、水肿等肉眼可见的异常病理现象。该小鼠4h最大药物吸入浓度为1.91×10⁶mg/ml，LC₅₀4h值大于5000mg / m3，属实际无毒。该实验空白对照为蒸馏水。

表5 各实验组合物吸入毒性试验结果观察

     3.急性眼刺激试验 取家兔 4 只，实验前检查双眼无异常。吸取实施例1-3组合物50ul，滴入家兔一侧眼结膜囊内，另一侧用生理盐水作为正常对照。滴入药物后，将兔眼被动闭合5～7s，确保药液流过整个眼部。30 s 后用生理盐水冲洗，于滴眼后 1 h、24 h、48 h、72 h、7 d、，肉眼观察家兔眼结膜、虹膜、和角膜的损伤和恢复情况（见图1）。结果显示实验后1h内家兔眼睛粘膜泛红，，情绪躁狂，不断抓挠眼周口周皮肤，稍后相对安静,情绪正常能自主进食，3天后兔子眼睛消肿。

Claims (7)

1.柳叶或柳叶提取物在制备消毒剂中的应用。

2.柳叶或柳叶提取物在制备抗菌消炎消毒剂中的应用。

3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述的抗菌为抗表皮葡萄球菌、大肠杆菌、链球菌、痢疾杆菌和白色念珠菌；所述的消炎为消除以上病菌引起的炎症。

4.一种抗菌消炎消毒剂，其特征在于，以15～100 份柳叶为原料药制成药剂。

5.根据权利要求4所述抗菌消炎消毒剂，其特征在于，所述的药剂为液体制剂或固体制剂。

6..权利要求4或5所述抗菌消炎消毒剂的制备方法，其特征在于，将柳叶采用煎煮进行提取，收集提取液，减压浓缩至生药浓度在室温下为1～3g/ml备用，向浓缩液中加入辅料制成液体制剂或固体制剂；

或者，将柳叶粉碎成超微粉，向超微粉中加入辅料，过筛、干燥制成颗粒制剂。

7.权利要求4或5所述抗菌消炎消毒剂在空气消毒中的应用。