CN104066434A - 抗炎和抗氧化组合物和相关使用方法 - Google Patents
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Abstract
提供了具有高抗氧化能力、抗炎作用和/或DNA保护功能的至少一种的组合物。所述组合物包括来自云实属植物例如刺云实的提取物,刺云实亦称为塔拉。塔拉提取物可包括在营养补充剂或其它递送载体中,并给予受试者。还提供了使用所述组合物的方法。
Description
发明背景
本发明涉及可提供抗炎作用、抗氧化功能和/或有助于DNA保护的组合物。
炎症通常与外伤性损伤、衰老相关疾病和/或病况直接有关。炎症有时还与其它病况例如胃肠道疾病、阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease)、免疫系统缺陷、某些癌症形式以及心血管疾病有关。炎症可由各种情况、环境因素和/或遗传引起。某些情况的一些实例包括压力、环境因素、肥胖症、糖尿病、慢性感染等。通常与炎症有关的环境因素包括饮食或营养不良。此外,某些研究表明高单糖和高淀粉饮食以及高饱和反式脂肪饮食,可能与某些炎症类型有关或可引起某些炎症类型。
炎症还可与体内发生的化学氧化有关。例如,多不饱和脂肪的氧化可造成活性氧物类的形成和一氧化氮的产生。这些产物可能与早期炎症有关,并且如果不受控制,则最终可能导致慢性炎症。此外,这种活性氧物类可导致DNA损伤和不良突变。
各种市售的营养补充剂试图提供抗炎和抗氧化功能。许多的这类补充剂利用例如维生素C、多酚、生育酚等化合物和通常来源于植物材料的其它天然成分。虽然有各种各样的这类营养补充剂出售,但是仍有改进空间,特别是有关将天然源掺入可提供抗氧化或抗炎作用的组合物中。
发明概述
组合物提供抗炎作用、抗氧化功能、DNA保护功能的至少一种或前述功能的组合。组合物可包括有效量的来源于植物云实属(Caesalpinia),例如刺云实(Caesalpinia spinosa) (亦称为“塔拉(Tara)”)的提取物。
在一个实施方案中,包括塔拉(例如塔拉提取物)的组合物可用来在体内对抗炎症。任选塔拉可提供提高的抗氧化能力,这进而可中和或减少可能存在于受试者中的自由基,例如活性氧物类。组合物还任选可用于在体内保护DNA免于例如由受试者体内的某些活性氧物类造成的氧化性损伤。
在另一个实施方案中,提供通过以足以抑制或消除受试者不同系统和细胞内的氧化的量将包括塔拉的组合物给予受试者而减轻或消除炎症的方法。任选组合物中和和/或减少受试者不同系统和细胞内的自由基,例如活性氧物类。
在又一个实施方案中,提供通过以足以减轻或消除受试者的炎症的量将组合物给予受试者而治疗炎症的方法。
在再一个实施方案中,提供通过以足以保护DNA的量将组合物给予受试者而保护DNA即防止因某些活性氧物类所致DNA的突变和/或损伤的方法。
参照本发明的实施方案和附图的描述,将更完全面的认识和理解本发明的这些和其它目的、优势和特征。
在详细描述本发明的实施方案前,要了解本发明不限于下列描述给出的或附图中说明的操作的详情或构建的详情和成分的安排。本发明可以不同的其它实施方案执行,并且可以非本文明确公开的备选方法实施或进行。此外,要了解,本文所用措辞和术语用于描述的目的,不应视为限制性的。“包括”和“包含”及其变化的使用意在包括其后所列项目及其等同项目以及其它项目及其等同项目。此外,枚举可用于描述各种不同的实施方案。除非另有明确说明,否则枚举的使用不应解释为将本发明限于组分的任何特定的顺序或数。枚举的使用不应解释为本发明的范围不包括可与所枚举的步骤或组分组合或并入其中的任何其它的步骤或组分。
附图简述
图1是说明通过给予本发明实施方案的包括塔拉的组合物而DNA损伤剂量依赖性减少的示图。
图2是说明用于DNA保护的最大塔拉有效浓度的示图。
图3是说明通过给予本发明实施方案的包括塔拉的组合物抑制已知与炎症有关的酶的示图。
图4是说明本发明实施方案的包括塔拉的组合物针对多种主要自由基的抗氧化能力的示图。
本发明的实施方案的描述
本发明的实施方案基于云实属的提取物显示可提高DNA保护功能、抗炎作用和抗氧化作用的出乎意料的发现。所研究的具体组合物包括来自云实属植物(具体地为刺云实)的提取物,刺云实亦称为“塔拉”或备选称为Molina、Kuntze或Spiny Holdback。具体而言,如图1所示,当给予人成淋巴细胞时,塔拉提取物的组合物对DNA损伤保护提供剂量依赖性的积极作用。同样地,如图3所示,不同剂量的塔拉提取物的组合物对抑制炎性酶(inhibiting inflammatory enzyme)显示剂量依赖性的积极作用。另如图4所示,塔拉提取物组合物说明针对多种氧化自由基有非常高的活性。以本文的发现为基础,本发明的实施方案涉及包括云实属植物(例如刺云实、“塔拉”)提取物的组合物,该提取物的量足以在受试者和任选在有需要的受试者中提供抗炎作用、抗氧化功能和/或有助于DNA保护的至少一种。
如上所述,组合物可包括来自刺云实植物的提取物,然而,预期云实属的其它植物也可在受试者中提供抗炎作用、抗氧化功能和/或有助于DNA保护的至少一种,这样的植物例如Caesalpinia cacalaco、Caesalpinia californica、Caesalpinia gilliesii、番蝴蝶(Caesalpinia mexicana)、Caesalpinia platyloba和金凤花(Caesalpinia pulcherrima)。
一般而言,包括塔拉提取物的组合物可具有任选介于6.0与约8.0之间、另任选介于约6.5与约7.5之间的pH和另任选约7.0的pH或通常实质上是中性的。本文所用的塔拉提取物可市购获自各种资源,包括但不限于中国云南的云南易门明欣塔拉生物科技开发有限公司(Yunnan Yimen Mingxin Tara Biotechnology Development Co., Ltd)。另外,可采用任何常规提取技术获得任何合适的塔拉提取物。
按组合物的重量计,组合物中的塔拉提取物可以任选约0.001%-约50%的量存在,另任选按组合物的重量计以约0.1%-约30%的量存在,另任选按组合物的重量计以约1%-约10%存在。根据应用,可使用其它量的塔拉提取物。
塔拉提取物和/或来自合适云实属植物的其它提取物可单用或彼此联用或与其它成分、提取物和/或赋形剂联用。其它合适的提取物可包括选自以下的提取物或成分:蔷薇果、越桔、黑莓、接骨木、酸果蔓、迷迭香、丁子香、小白菊、荨麻根、洋蓟、橄榄提取物、绿茶提取物(表没食子儿茶素没食子酸酯)、葡萄籽提取物、白藜芦醇、非洲豆蔻(Aframomum melegueta)、齿叶乳香(boswellia serrata)提取物、boswellia forte、依普黄酮、生育三烯酚类、月见草油、INM-176、琉璃苣油、磷虾油、叶黄素的至少一种类型(例如变胞藻黄素)、生咖啡提取物(绿原酸)和阿魏酸。此外,可通过各种方法包括但不限于Rana等人的美国专利7,897,184 (其通过引用以其整体结合到本文中)中公开的那些提取方法,从植物材料中获得提取物。
包括所述提取物的组合物还可包括一种或多种药学上可接受的赋形剂,例如硅化微晶纤维素、二氧化硅、硬脂酸、羟丙基甲基纤维素(HPMC)、乳糖、葡萄糖、蔗糖、玉米淀粉、马铃薯淀粉、醋酸纤维素、乙基纤维素等。组合物还可包括稀释剂和其它添加剂,例如一种或多种药学上可接受的粘合剂、填充剂、载体、增稠剂、味觉改良剂、着色剂、防腐剂、蛋白质、甜味剂、抗微生物剂、螯合剂、惰性气体、稳定剂、调节剂、乳化剂或其混合物,这取决于所采用的组合物的形式。
组合物可呈具有不同递送系统的各种形式。例如,组合物可被加工并纳入片剂、胶囊剂、凝胶片(gel tab)、锭剂、条、颗粒剂、散剂、浓缩物、溶液剂、洗剂、乳膏剂、混悬剂和/或其组合中。组合物可口服、通过摄入或在口腔中经舌下给予受试者,或可通过呼吸道(例如通过喷雾剂、细雾剂(mist)或气雾剂)给予。
组合物可单独配制或与其它食物或营养补充品等组合配制。举例来说,组合物可包括片剂形式中组合物的一部分和以胶囊剂形式给予的组合物的另一部分。
此外,组合物可按各种不同的时间增量以不同的剂量给予,这取决于所述病况或组合物的所需作用。例如,组合物可以多个连续剂量给予,通常间隔约6-约12小时,或间隔长达约1、2或3周。可给予每日剂量一天1、2或3次持续一段时间以获得某些症状(例如炎症)的系统缓解。可调整剂量以保持这些系统的缓解。组合物的给予可持续数周或数月的时间,或任选长期作为营养补充方案的部分。
组合物一般可按任何合适的方案给予以便达到所需结果,例如炎症减轻、活性氧物类和/或自由基减少,和/或受试者DNA的突变或损伤减少。此外,组合物的给药频率可取决于若干因素,包括减轻或消除炎症所需要的水平、抗氧化功能和/或DNA保护。
一般而言,可将组合物给予患有急性或慢性炎症的受试者。可通过炎症的各种常规试验或诊断程序,鉴定受试者患有炎症。例如,组合物可用来减轻与疾病和/或异常情况有关的炎性反应。任选组合物可用来减轻与以下疾病有关的症状和/或治疗以下疾病:关节炎、心血管疾病、骨质疏松症、阿尔茨海默病和外伤性损伤的炎性反应或与炎症有关的其它异常情况或疾病,例如疼痛和僵硬。另任选可以治疗有效量将组合物给予患有以下至少一种的受试者:关节炎、心血管疾病、骨质疏松症、炎性反应和/或与炎症相关的病况或疾病,例如疼痛和/或僵硬。
实施例1
为了分析组合物特别是塔拉提取物对DNA保护的作用,进行了测定。为了测试DNA保护,进行了单细胞凝胶电泳测定,亦称为彗星测定法(comet assay),以检测用塔拉提取物预处理的真核细胞、特别是人成淋巴细胞的DNA损伤。彗星测定法描述于Singh等(1988),Experimental Cell Research,175(1):184-191,其通过引用结合到本文中。在该测定中,按照Singh等人提供的用于彗星测定法的标准方法制备人成淋巴细胞,并用不同量的塔拉提取物、具体而言为6.25μg、12.5μg、25μg、50μg、100μg和200μg的塔拉提取物预处理1小时。细胞经洗涤,用100μM的过氧化氢处理20分钟。用过氧化氢处理的细胞显示不同水平的DNA损伤,这取决于用塔拉提取物的预处理。
如图1中可见,塔拉提取物显示浓度依赖性DNA保护功能。例如,在较低水平的浓度下,塔拉提取物不会保护细胞至明显的程度,因此,过氧化氢略微损伤DNA。然而,用较高剂量的塔拉提取物处理的细胞受到保护,使得这些细胞的DNA通常保持未受损,如图1右侧所示。一般,将任选大于约90μg-约100μg、另任选大于200μg的水平的剂量的塔拉提取物给予细胞,显示非常好的DNA保护。
基于这个发现,认为本文所述组合物可用来在给予组合物的受试者中提供DNA损伤保护,或一般可保护DNA免于异常突变或受损,使得不能在受试者中适当复制。
图2说明上述和图1所示彗星测定法中塔拉提取物的有效浓度EC50值。其中可见塔拉提取物的EC50值为95.06μg/mL,此浓度在彗星测定法下提供DNA保护。认为在约80μg/mL-约120μg/mL的任意范围内、另任选大于120μg/mL、甚至还任选大于200μg/mL的给予塔拉提取物的浓度,在彗星测定法下可提供DNA保护。
实施例2
为了分析组合物、特别是塔拉提取物对炎症的作用,进行了下列测定。一般,测量负责诱导炎症的某些酶的抑制以测定塔拉提取物的有效性。具体地讲,在该测定中测量MMP1和MMP9酶抑制。在不同浓度的稀释的塔拉提取物存在下(如图3曲线图各点标示的一样),将常规纯化的重组MMP蛋白(市购可获自北美的EMD Biosciences)与荧光肽底物IX (市购可获自R&D Systems,Minneapolis,Minnesota)混合。用荧光读板仪,具体为SpectraMax M5读板仪监测荧光肽底物随时间推移的转化,该读板仪可市购获自Molecular Devices,LLC,Sunnyvale,California,United States。收集数据,计算各孔的Vmax和百分比控制(即MMP抑制百分比),并与酶以及底物最大反应对照进行比较。
根据图3所示结果,塔拉提取物有效地抑制例如所测量的炎症相关酶MMP1和MMP9,特别随塔拉提取物的浓度增加时。因此,认为含塔拉提取物的组合物可能有效地减轻和/或抑制受试者的炎性反应。
实施例3
为了分析组合物、特别是塔拉提取物的抗氧化作用,研究了其中和多种主要自由基的能力。具体地讲,在常规的过氧化氢、羟基、过氧亚硝酸盐、超氧化物和单线态氧(single oxygen)测定中,测试了不同浓度的塔拉提取物。测定包括过氧化氢自由基、羟基自由基、超氧化物自由基阴离子、单线态氧和过氧亚硝酸盐阴离子的各个测试。测定在Brunswick Laboratories,Southborough,Massachusetts进行。采用曲线下面积动力学分析,例如公开于Dubost,Ou和Beelman,2007;Huang,Ou,Hampsch-Woodill,Flanagan和Prior,2002;Ou等,2002;Ou,Hampsch-Woodill和Prior,2001;Zhang等,2009 (其通过引用结合到本文中)的曲线下面积动力学分析,针对各参数量化抗氧化能力。各测定包括使用试剂以产生特定的RNOS物类(一种还用作测量的分析探针的氧化用靶分子)和待评价的样品抗氧剂。使各测定标准化至Trolox,并以微摩尔Trolox当量/克样品(μmol TE/克)的单位报告。Huang, D., Ou, B., Hampsch-Woodill, M., Flanagan, J. A.和Prior, R. L. (2002), High-throughput assay of oxygen radical absorbance capacity (ORAC) using a multichannel liquid handling system coupled with a microplate fluorescence reader in 96-well format (使用偶联96孔格式的微板荧光读数器的多通道液体处理系统对氧自由基吸收能力(ORAC)进行高通量测定). J Agric Food Chem,50,4437-4444,其通过引用结合到本文中。
如图4所示,包括塔拉提取物的组合物显示针对活性氧物类过氧化氢、羟基、过氧亚硝酸盐、超氧化物和单线态氧的高抗氧化能力。如所示,当在类似测定组中分析时,塔拉提取物的抗氧化能力是酸果蔓的15倍多,是接骨木的3倍多。因此,认为当给予受试者时,包括塔拉提取物的组合物将同样地显示显著的抗氧化作用。
上述描述是本发明的实施方案的描述。可进行各种改动和变化而不偏离随附权利要求书中限定的本发明的精神和更宽方面,其将按照专利法的包括等同原则在内的原则来解释。提供本公开内容用于说明目的,且本公开内容不应解释为本发明全部实施方案的穷尽性说明或将权利要求书的范围限于联合这些实施方案说明和描述的有关具体要素。例如而不限于,所述发明的任何个别要素可被提供大致类似的功能或另提供适当操作的替代要素替换。这包括,例如目前已知的替代要素,例如本领域技术人员目前已知的替代要素,和未来可开发的替代要素,例如本领域技术人员在开发时可认定为替代的那些要素。此外,所公开的实施方案包括一致描述的和可能协同提供一系列益处的多个特征。除已发布的权利要求书中另有明确说明外,否则本发明不仅限于包括所有这些特征或提供所有所述益处的那些实施方案。任何以单数提及权利要求要素时,例如使用冠词“一个”、“一种”、“特定一个”或“所述”不得解释为将要素限于单数。任何以“X、Y和Z的至少一个”提及权利要求要素时,意在包括X、Y或Z各自的任一个和X、Y和Z的任何组合,例如X、Y、Z;X、Y;X、Z和Y、Z。
权利要求书(按照条约第19条的修改)
1.一种用于给予受试者的组合物,所述组合物包含有效减轻受试者的炎症的量的来自刺云实(Caesalpiniaspinosa)物种植物的提取物。
2.权利要求1的组合物,其中所述提取物以按组合物的重量计约0.001%-约50%的量存在。
3.权利要求2的组合物,其中所述提取物以按组合物的重量计约1%-约10%的量存在。
4.权利要求3的组合物,所述组合物包含赋形剂和至少一种其它提取物,其中所述组合物为作为营养补充方案的部分在周期性基础上给予受试者的营养补充剂的形式。
5.一种用于给予受试者的组合物,所述组合物包含在受试者中有效提供抗氧化作用的量的刺云实物种植物的提取物。
6.权利要求5的组合物,其中所述提取物以按组合物的重量计约0.001%-约50%的量存在。
7.权利要求6的组合物,其中所述提取物以按组合物的重量计约1%-约10%的量存在。
8.权利要求7的组合物,所述组合物包含赋形剂和至少一种其它提取物,其中所述组合物为作为营养补充方案的部分在周期性基础上给予受试者的营养补充剂的形式。
9.一种用于给予受试者的组合物,所述组合物包含有效抑制和减轻受试者的DNA损伤的至少一种的量的刺云实物种植物的提取物。
10.权利要求9的组合物,其中所述提取物以按组合物的重量计约0.001%-约50%的量存在。
11.权利要求10的组合物,其中所述提取物以按组合物的重量计约1%-约10%的量存在。
12.权利要求9的组合物,所述组合物包含赋形剂和至少一种其它提取物,其中所述组合物为作为营养补充方案的部分在周期性基础上给予受试者的营养补充剂的形式。
13.一种用于减轻有需要的受试者的炎症的方法,所述方法包括:
鉴定患有炎症的受试者;
以有效减轻受试者的炎症的量将包括刺云实物种植物的提取物的组合物给予受试者。
14.一种减少受试者中的氧自由基的方法,所述方法包括:
以有效减少存在于受试者中的活性氧物类的量给予包括刺云实物种植物的提取物的组合物。
15.一种用于保护受试者的DNA的方法,所述方法包括:
以对受试者有效而减少或削弱DNA损伤或DNA突变的至少一种的量给予包括刺云实物种植物的提取物的组合物。
Claims (18)
1. 一种用于给予受试者的组合物,所述组合物包含有效减轻受试者的炎症的量的来自云实属(Caesalpinia)植物的提取物。
2. 权利要求1的组合物,其中所述提取物获自刺云实(Caesalpinia spinosa)。
3. 权利要求2的组合物,其中所述提取物以按组合物的重量计约0.001%-约50%的量存在。
4. 权利要求3的组合物,其中所述提取物以按组合物的重量计约1%-约10%的量存在。
5. 权利要求4的组合物,所述组合物包含赋形剂和至少一种其它提取物,其中所述组合物为作为营养补充方案的部分在周期性基础上给予受试者的营养补充剂的形式。
6. 一种用于给予受试者的组合物,所述组合物包含在受试者中有效提供抗氧化作用的量的云实属植物的提取物。
7. 权利要求4的组合物,其中所述提取物获自刺云实。
8. 权利要求5的组合物,其中所述提取物以按组合物的重量计约0.001%-约50%的量存在。
9. 权利要求8的组合物,其中所述提取物以按组合物的重量计约1%-约10%的量存在。
10. 权利要求9的组合物,所述组合物包含赋形剂和至少一种其它提取物,其中所述组合物为作为营养补充方案的部分在周期性基础上给予受试者的营养补充剂的形式。
11. 一种用于给予受试者的组合物,所述组合物包含有效抑制和减轻受试者的DNA损伤的至少一种的量的云实属植物的提取物。
12. 权利要求7的组合物,其中所述提取物获自刺云实。
13. 权利要求8的组合物,其中所述提取物以按组合物的重量计约0.001%-约50%的量存在。
14. 权利要求8的组合物,其中所述提取物以按组合物的重量计约1%-约10%的量存在。
15. 权利要求9的组合物,所述组合物包含赋形剂和至少一种其它提取物,其中所述组合物为作为营养补充方案的部分在周期性基础上给予受试者的营养补充剂的形式。
16. 一种用于减轻有需要的受试者的炎症的方法,所述方法包括:
鉴定患有炎症的受试者;
以有效减轻受试者的炎症的量将包括云实属植物的提取物的组合物给予受试者。
17. 一种减少受试者中的氧自由基的方法,所述方法包括:
以有效减少存在于受试者中的活性氧物类的量给予包括云实属植物的提取物的组合物。
18. 一种用于保护受试者的DNA的方法,所述方法包括:
以对受试者有效而减少或削弱DNA损伤和DNA突变的至少一种的量给予包括云实属植物的提取物的组合物。
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