CN104031120B - 一种治疗癌症的肽变体及其应用 - Google Patents

一种治疗癌症的肽变体及其应用 Download PDF

Info

Publication number
CN104031120B
CN104031120B CN201410245332.6A CN201410245332A CN104031120B CN 104031120 B CN104031120 B CN 104031120B CN 201410245332 A CN201410245332 A CN 201410245332A CN 104031120 B CN104031120 B CN 104031120B
Authority
CN
China
Prior art keywords
peptide
seq
cell
application
treating cancer
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Expired - Fee Related
Application number
CN201410245332.6A
Other languages
English (en)
Other versions
CN104031120A (zh
Inventor
王凤羽
王林青
王海丽
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Wang Fengyu
Original Assignee
Individual
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Priority to CN201610002817.1A priority Critical patent/CN105622722B/zh
Priority to CN201610002825.6A priority patent/CN105504016B/zh
Priority to CN201610002912.1A priority patent/CN105601714B/zh
Priority to CN201610002923.XA priority patent/CN105601715B/zh
Priority to CN201610002834.5A priority patent/CN105481948B/zh
Priority to CN201610002822.2A priority patent/CN105601710B/zh
Priority to CN201610002926.3A priority patent/CN105597078B/zh
Application filed by Individual filed Critical Individual
Priority to CN201410245332.6A priority patent/CN104031120B/zh
Priority to CN201610002930.XA priority patent/CN105585615B/zh
Priority to CN201610002828.XA priority patent/CN105601713B/zh
Priority to CN201610002869.9A priority patent/CN105481949B/zh
Priority to CN201610002827.5A priority patent/CN105601712B/zh
Priority to CN201610002932.9A priority patent/CN105504017B/zh
Priority to CN201610002824.1A priority patent/CN105601711B/zh
Publication of CN104031120A publication Critical patent/CN104031120A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN104031120B publication Critical patent/CN104031120B/zh
Expired - Fee Related legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K7/00—Peptides having 5 to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K7/04—Linear peptides containing only normal peptide links
    • C07K7/08—Linear peptides containing only normal peptide links having 12 to 20 amino acids
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/04—Peptides having up to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • A61K38/10—Peptides having 12 to 20 amino acids
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides

Abstract

本发明提供了一系列抗癌的肽的变体SEQ ID No：2‑15及其制药用途。这些肽变体是在序列SEQ ID No：1的基础上经过一系列点突变以及两端分别进行特异性的修饰而获得，这些肽变体相对于野生型具有更强的杀伤肿瘤细胞的效果，有着广阔的制药前景。

Description

一种治疗癌症的肽变体及其应用
技术领域
本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明涉及治疗癌症的肽变体。
背景技术
微管是细胞骨架的三个丝状网络之一的组成成分，是复杂的、不稳定的聚合物，微管的基本单元是α-和β-微管蛋白二聚体。例如，它们负责多种细胞运动、轴突运输、或运动性，特别是，它们提供用于形成有丝分裂纺锤体的基本材料。微管不断地重新形成不同长度的中空管。因此，通过破坏癌细胞的微管动力学，本发明的肽能起到阻止癌细胞增殖的抗有丝分裂剂的作用(减慢或阻止癌细胞的有丝分裂)。
本发明的活性肽还显现出特异性地改变癌细胞的质膜，并且显现出在宿主生物体的健康细胞中不引起这些相同的改变。所述活性肽具有聚阳离子的性质，因此它们会作用在富含负电荷的癌细胞的质膜上。
在现有技术中，为了提高蛋白或肽的活性，针对蛋白或肽的活性位点进行特异性的突变和取代，从而寻找活性更高的变体是常规的做法。
发明详述
序列SEQ ID No：1所示的肽是现有技术中已知的可以被被用于治疗癌症。但是其活性并不是非常令人满意。为了进一步提高该肽的生物活性，申请人通过大量的实验，针对SEQ ID No：1所示的肽中特定的位点进行了点突变以及两端分别进行特异性的修饰，从而获得了比SEQ ID No：1所示的肽本身具有更高抑癌活性的变体。
具体地，被用作治疗癌症的活性成分的肽的序列如下所示(表I)：
申请人对SEQ ID No：2至SEQ ID No：15这些肽的研究有证实，这些肽相对于SEQ ID No：1的肽对癌细胞具有更高的细胞毒活性，同时对待治疗的宿主的细胞具有非常弱的毒性或者无毒性。本发明的活性肽特异性地改变癌细胞的微管。
表I中所引用的肽被用作治疗癌症的药物，具体地，可有效地治疗白血病、肝癌、胶质母细胞瘤等。
根据本发明的另一个特点，通过化学合成产生序列SEQ ID No：1至SEQ IDNo：15的肽。
发明的另一个目的涉及包含上文所定义的肽之一的药物组合物。
有利地，所述组合物是水性悬浮液或溶液形式，或者是干燥状态的未包衣或包衣片剂形式，例如丸剂、凝胶胶囊、胶囊或者粉末。
如果所述药物组合物处于干燥状态，则它可以与一种或多种惰性稀释剂例如淀粉、纤维素、蔗糖、乳糖或二氧化硅等混合。它在干燥状态下还可以包含其他物质，例如一种或多种润滑剂如硬脂酸镁或滑石粉、着色剂、包衣(糖包衣片剂)或清漆。
如果本发明的药物组合物是液体形式，则它可以包括含有惰性稀释剂例如水、乙醇、甘油、植物油或液体石蜡的可药用的溶液、悬浮液、乳剂、糖浆剂和酏剂。所述药物组合物还可以包含除稀释剂以外的其他液体物质，例如润湿剂、甜味剂、增稠剂、调味剂或稳定剂产品。
所述组合物任选与可药用的无毒惰性赋形剂或介质组合，其特征在于，可以以皮肤、透皮或经皮；口服；胃肠外；鼻或支气管应用的形式局部施用所述组合物。
用于胃肠外施用的药物组合物可以是水性或非水性溶液、悬浮液或乳剂。这些制剂由作为溶剂或介质的水、丙二醇、植物油特别是橄榄油和芝麻油、可注射的有机酯例如油酸乙酯、或其他合适的有机溶剂制成。所述药物组合物还可以含有佐剂，特别是润湿剂、等渗剂、乳化剂、分散剂和稳定剂。
对于局部施用来说，有利地，以软膏、乳膏、凝胶或斑贴的形式施用所述药物。
另外，所述药物组合物可被单独使用或在给定的治疗中与其他药物联合使用，或者与放射疗法或手术联合。
具体实施方式
A)肽的合成
肽SEQ ID No：1至SEQ ID No：17的合成与纯化
通过使用N-9-氟代苯基甲氧基羰基和Novasyn TGS树脂手动分离固相合成来制备所述肽。侧链保护的基团包括丝氨酸的叔丁基和赖氨酸的叔丁氧基羰基。为了制备具有乙酰化的N末端残基的肽，在连接了最后的氨基酸残基后，将乙酸酐加入到树脂-肽复合物中，并保持搅拌1小时以促进乙酰化。
通过用浓度为10mL.g-1的三氟乙酸/1，2-乙二硫醇/苯甲醚/苯酚/水(体积比82.5∶2.5∶5∶5∶5)在室温下处理2小时来剪切所述树脂-肽复合物。随后进行过滤以去除树脂。然后加入4℃的乙醚，使粗肽沉淀，随后在室温下以1000g离心15分钟后收集粗肽。随后将粗肽溶解在水中，并使用Shiseido C-18半制备柱(250mm x10.0mm；5μm)在用含有0.1％(v/v)TFA的40％(v/v)乙腈以2mL/min的速率恒溶剂洗脱下通过RP-HPLC进行层析分离。用UV-DAD检测器(紫外线二极管阵列检测器)(Shimadzu，型号SPD-M10A)在215nm下调节洗脱，并且每个洗脱的馏分都被手动收集在2mL的玻璃小瓶中。通过HPLC和ESI-MS分析来测定合成的肽(乙酰化和非乙酰化两种肽)的序列。在肽被合成、纯化并检验后，确认得到了表I所示的肽序列。
B)肽SEQ ID No：1-17对健康细胞的活性
使两种非致瘤的成纤维细胞FIBRO1和FIBRO2与肽SEQ ID No：1-17接触，以观察健康细胞的微管网络是否也被该肽破坏。在使用肽浓度为15μM的情况下，代表了多种正常细胞的人成纤维细胞对肽SEQ ID No：1-15根本没有响应(聚合的微管蛋白密度没有改变)。而SEQ ID No：16-17处理的成纤维细胞对微管蛋白密度的影响较大，其厚度变薄了大约15％。这说明，肽SEQ ID No：1-15对健康细胞无活性。当肽SEQ ID No：1-15被用作哺乳动物、尤其是人的治疗剂时，事实上非常有可能发生很少的副作用。
C)细胞增殖和细胞存活率的测定
分析以下细胞系(表II)，以确定并定量肽SEQ ID No：1-17的活性。
表II
组织类型 细胞系
急性早幼粒细胞白血病细胞系 NB4
肝癌 HepG2
胶质母细胞瘤 U87M6
以每孔0.2mL的体积将约10000个细胞接种到96孔微板中，24小时后，用肽SEQ ID No：1-17进行处理。在存在肽SEQ ID No：1-17的条件下将细胞在CO2培养箱中在37℃下孵育48小时。在孵育后，将MTT试剂或(3-(4，5-二甲基-2-基)-2，5-二苯基溴化四唑(0.5mg/ml，在0.1ml的体积中)加入到每个孔中并在37℃下孵育2小时。然后，MTT所含有的四唑环被活细胞的琥珀酸脱氢酶还原。然后，去除上清，并加入0.1ml裂解缓冲液(含有10％tritonX100和10％1N HCl的异丙醇)以溶解所形成的蓝紫色甲臜沉淀。几分钟后，在室温下用酶标仪在562nm的检测波长下测定吸光度。使用不含肽的孔来证实对照细胞的存活率。通过处理后细胞的吸光度与对照细胞的吸光度的比率来评估每一种细胞的IC50(肽SEQ ID No：1-17在这些细胞系上引起50％细胞毒性时的浓度)值，μM。
表III
如表III所示，肽SEQ ID No：2-15显著提高了以上三种肿瘤细胞的增殖。比肽SEQ ID No：1对癌细胞有毒性的剂量得到显著的降低，而SEQ ID No：16和17反而提高了IC50值，说明本申请的肽SEQ ID No：2-15相对于现有技术有着对肿瘤细胞更好的抑制效果，可进一步用于肿瘤的相关治疗。
癌细胞对肽的耐药性
将SEQ ID No：1-15分别对癌细胞进行耐药性实验，实验方法为本领域常规的方法，结果显示该肽具有不诱导快速耐药过程。

Claims (2)

1.一种用于治疗癌症的肽，其特征在于：为XA2，其氨基酸序列为SEQ ID No：2。
2.权利要求1所述的肽用于制备药物的用途，所述药物用于治疗白血病、肝癌或胶质母细胞瘤。
CN201410245332.6A 2014-05-29 2014-05-29 一种治疗癌症的肽变体及其应用 Expired - Fee Related CN104031120B (zh)

Priority Applications (14)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201610002912.1A CN105601714B (zh) 2014-05-29 2014-05-29 一种治疗癌症的肽变体及其应用
CN201610002923.XA CN105601715B (zh) 2014-05-29 2014-05-29 一种治疗癌症的肽变体及其应用
CN201610002834.5A CN105481948B (zh) 2014-05-29 2014-05-29 一种治疗癌症的肽变体及其应用
CN201610002822.2A CN105601710B (zh) 2014-05-29 2014-05-29 一种治疗癌症的肽变体及其应用
CN201610002926.3A CN105597078B (zh) 2014-05-29 2014-05-29 一种治疗癌症的肽变体及其应用
CN201610002828.XA CN105601713B (zh) 2014-05-29 2014-05-29 一种治疗癌症的肽变体及其应用
CN201410245332.6A CN104031120B (zh) 2014-05-29 2014-05-29 一种治疗癌症的肽变体及其应用
CN201610002930.XA CN105585615B (zh) 2014-05-29 2014-05-29 一种治疗癌症的肽变体及其应用
CN201610002817.1A CN105622722B (zh) 2014-05-29 2014-05-29 一种治疗癌症的肽变体xa3及其应用
CN201610002869.9A CN105481949B (zh) 2014-05-29 2014-05-29 一种治疗癌症的肽变体及其应用
CN201610002827.5A CN105601712B (zh) 2014-05-29 2014-05-29 一种治疗癌症的肽变体及其应用
CN201610002825.6A CN105504016B (zh) 2014-05-29 2014-05-29 一种治疗癌症的肽变体及其应用
CN201610002824.1A CN105601711B (zh) 2014-05-29 2014-05-29 一种治疗癌症的肽变体xa5及其应用
CN201610002932.9A CN105504017B (zh) 2014-05-29 2014-05-29 一种治疗癌症的肽变体及其应用

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201410245332.6A CN104031120B (zh) 2014-05-29 2014-05-29 一种治疗癌症的肽变体及其应用

Related Child Applications (13)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201610002932.9A Division CN105504017B (zh) 2014-05-29 2014-05-29 一种治疗癌症的肽变体及其应用
CN201610002930.XA Division CN105585615B (zh) 2014-05-29 2014-05-29 一种治疗癌症的肽变体及其应用
CN201610002827.5A Division CN105601712B (zh) 2014-05-29 2014-05-29 一种治疗癌症的肽变体及其应用
CN201610002824.1A Division CN105601711B (zh) 2014-05-29 2014-05-29 一种治疗癌症的肽变体xa5及其应用
CN201610002912.1A Division CN105601714B (zh) 2014-05-29 2014-05-29 一种治疗癌症的肽变体及其应用
CN201610002825.6A Division CN105504016B (zh) 2014-05-29 2014-05-29 一种治疗癌症的肽变体及其应用
CN201610002834.5A Division CN105481948B (zh) 2014-05-29 2014-05-29 一种治疗癌症的肽变体及其应用
CN201610002817.1A Division CN105622722B (zh) 2014-05-29 2014-05-29 一种治疗癌症的肽变体xa3及其应用
CN201610002869.9A Division CN105481949B (zh) 2014-05-29 2014-05-29 一种治疗癌症的肽变体及其应用
CN201610002828.XA Division CN105601713B (zh) 2014-05-29 2014-05-29 一种治疗癌症的肽变体及其应用
CN201610002923.XA Division CN105601715B (zh) 2014-05-29 2014-05-29 一种治疗癌症的肽变体及其应用
CN201610002822.2A Division CN105601710B (zh) 2014-05-29 2014-05-29 一种治疗癌症的肽变体及其应用
CN201610002926.3A Division CN105597078B (zh) 2014-05-29 2014-05-29 一种治疗癌症的肽变体及其应用

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN104031120A CN104031120A (zh) 2014-09-10
CN104031120B true CN104031120B (zh) 2016-08-24

Family

ID=51462136

Family Applications (14)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201610002822.2A Expired - Fee Related CN105601710B (zh) 2014-05-29 2014-05-29 一种治疗癌症的肽变体及其应用
CN201610002834.5A Active CN105481948B (zh) 2014-05-29 2014-05-29 一种治疗癌症的肽变体及其应用
CN201610002817.1A Active CN105622722B (zh) 2014-05-29 2014-05-29 一种治疗癌症的肽变体xa3及其应用
CN201410245332.6A Expired - Fee Related CN104031120B (zh) 2014-05-29 2014-05-29 一种治疗癌症的肽变体及其应用
CN201610002930.XA Expired - Fee Related CN105585615B (zh) 2014-05-29 2014-05-29 一种治疗癌症的肽变体及其应用
CN201610002869.9A Active CN105481949B (zh) 2014-05-29 2014-05-29 一种治疗癌症的肽变体及其应用
CN201610002926.3A Active CN105597078B (zh) 2014-05-29 2014-05-29 一种治疗癌症的肽变体及其应用
CN201610002912.1A Active CN105601714B (zh) 2014-05-29 2014-05-29 一种治疗癌症的肽变体及其应用
CN201610002824.1A Expired - Fee Related CN105601711B (zh) 2014-05-29 2014-05-29 一种治疗癌症的肽变体xa5及其应用
CN201610002923.XA Expired - Fee Related CN105601715B (zh) 2014-05-29 2014-05-29 一种治疗癌症的肽变体及其应用
CN201610002827.5A Active CN105601712B (zh) 2014-05-29 2014-05-29 一种治疗癌症的肽变体及其应用
CN201610002828.XA Expired - Fee Related CN105601713B (zh) 2014-05-29 2014-05-29 一种治疗癌症的肽变体及其应用
CN201610002932.9A Expired - Fee Related CN105504017B (zh) 2014-05-29 2014-05-29 一种治疗癌症的肽变体及其应用
CN201610002825.6A Active CN105504016B (zh) 2014-05-29 2014-05-29 一种治疗癌症的肽变体及其应用

Family Applications Before (3)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201610002822.2A Expired - Fee Related CN105601710B (zh) 2014-05-29 2014-05-29 一种治疗癌症的肽变体及其应用
CN201610002834.5A Active CN105481948B (zh) 2014-05-29 2014-05-29 一种治疗癌症的肽变体及其应用
CN201610002817.1A Active CN105622722B (zh) 2014-05-29 2014-05-29 一种治疗癌症的肽变体xa3及其应用

Family Applications After (10)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201610002930.XA Expired - Fee Related CN105585615B (zh) 2014-05-29 2014-05-29 一种治疗癌症的肽变体及其应用
CN201610002869.9A Active CN105481949B (zh) 2014-05-29 2014-05-29 一种治疗癌症的肽变体及其应用
CN201610002926.3A Active CN105597078B (zh) 2014-05-29 2014-05-29 一种治疗癌症的肽变体及其应用
CN201610002912.1A Active CN105601714B (zh) 2014-05-29 2014-05-29 一种治疗癌症的肽变体及其应用
CN201610002824.1A Expired - Fee Related CN105601711B (zh) 2014-05-29 2014-05-29 一种治疗癌症的肽变体xa5及其应用
CN201610002923.XA Expired - Fee Related CN105601715B (zh) 2014-05-29 2014-05-29 一种治疗癌症的肽变体及其应用
CN201610002827.5A Active CN105601712B (zh) 2014-05-29 2014-05-29 一种治疗癌症的肽变体及其应用
CN201610002828.XA Expired - Fee Related CN105601713B (zh) 2014-05-29 2014-05-29 一种治疗癌症的肽变体及其应用
CN201610002932.9A Expired - Fee Related CN105504017B (zh) 2014-05-29 2014-05-29 一种治疗癌症的肽变体及其应用
CN201610002825.6A Active CN105504016B (zh) 2014-05-29 2014-05-29 一种治疗癌症的肽变体及其应用

Country Status (1)

Country Link
CN (14) CN105601710B (zh)

Families Citing this family (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN108276477A (zh) * 2018-03-29 2018-07-13 张建华 一种治疗癌症的合成多肽及其应用

Family Cites Families (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2146262C1 (ru) * 1993-06-30 2000-03-10 Фармация Энд Апджон С.П.А. Пептиды, способ их получения, фармацевтическая композиция и способ ее получения
US7030211B1 (en) * 1998-07-08 2006-04-18 Gemvax As Antigenic peptides derived from telomerase
FR2960542B1 (fr) * 2010-05-27 2012-08-17 Esther Suzy Arlette Fellous Peptide en tant que medicament, en particulier pour le traitement du cancer
CN103288926B (zh) * 2013-05-30 2014-07-09 王朝霞 一种微管蛋白聚合剂多肽及其应用
CN103265621B (zh) * 2013-05-30 2014-06-25 北京新领先医药科技发展有限公司 一种微管蛋白解聚剂多肽及其应用

Also Published As

Publication number Publication date
CN105504016A (zh) 2016-04-20
CN105601711A (zh) 2016-05-25
CN105601714A (zh) 2016-05-25
CN105481949B (zh) 2019-11-12
CN105601712A (zh) 2016-05-25
CN105601710A (zh) 2016-05-25
CN105585615B (zh) 2019-11-15
CN105601711B (zh) 2019-11-05
CN105585615A (zh) 2016-05-18
CN105622722A (zh) 2016-06-01
CN105601713A (zh) 2016-05-25
CN105481948A (zh) 2016-04-13
CN105504017B (zh) 2019-05-03
CN105504017A (zh) 2016-04-20
CN105601715B (zh) 2019-10-01
CN105601715A (zh) 2016-05-25
CN105601713B (zh) 2019-10-22
CN105481949A (zh) 2016-04-13
CN105601710B (zh) 2019-10-15
CN105601714B (zh) 2019-09-13
CN105597078B (zh) 2019-01-25
CN105597078A (zh) 2016-05-25
CN105504016B (zh) 2019-01-01
CN105622722B (zh) 2019-12-24
CN104031120A (zh) 2014-09-10
CN105601712B (zh) 2019-10-11
CN105481948B (zh) 2019-12-27

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN103204907B (zh) 孔鳐软骨多肽类血管生成抑制因子及其制备方法和用途
CN105524142B (zh) 一种十六肽qtddnhsnvlwagfsr及其应用
CN104031120B (zh) 一种治疗癌症的肽变体及其应用
US8076284B2 (en) Analogues of antimicrobial and anticancer peptide synthesized and produced from Gaegurin 5
TWI517855B (zh) 用於治療肺癌之牛樟芝萃取物及其製備方法
US10668112B2 (en) Formulation for targeting cancer in humans and canines
CN110117324A (zh) 一种抗肿瘤活性多肽及其用途
Febriyanti et al. The Effectiveness of Mirabilis jalapa Leaf Methanol Extract's Concentration on the Growth of Streptococcus pyogenes.
US10668113B2 (en) Formulation for targeting cancer in humans and canines using venom
CN108778302A (zh) 制备昭和草提取物的方法，由此制备的提取物以及所述提取物的用途
CN104987377A (zh) 天然抗感染抗肿瘤双功能多肽ecct及其基因与应用
CN106589095A (zh) 一种抗癌活性肽变体及其应用
CN106589096A (zh) 一种抗癌活性肽变体及其应用
Ruiz et al. Antibacterial activity of the enniatins A, A1, B, B1 produced by fusarium tricinctum in liquid culture, and cytotoxicity effects on Caco-2 cells
WO2012130999A1 (fr) Peptides isolés et purifiés à partir de testicules de roussettes
US20150209398A1 (en) Melaleuca quinquenervia extracts and uses of the same
CN105037495A (zh) 一种具有抗乳腺癌活性的寡肽

Legal Events

Date Code Title Description
C06 Publication
PB01 Publication
C10 Entry into substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
C41 Transfer of patent application or patent right or utility model
CB03 Change of inventor or designer information

Inventor after: Wang Fengyu

Inventor after: Wang Linqing

Inventor after: Wang Haili

Inventor before: Zhu Lingwei

COR Change of bibliographic data
TA01 Transfer of patent application right

Effective date of registration: 20160714

Address after: 450002 Hongqi Road 26, Jinshui District, Henan, Zhengzhou

Applicant after: Wang Fengyu

Address before: 100073 Beijing city of Fengtai District in the Pacific east building 18 room 307

Applicant before: Zhu Lingwei

C14 Grant of patent or utility model
GR01 Patent grant
CF01 Termination of patent right due to non-payment of annual fee

Granted publication date: 20160824

Termination date: 20170529

CF01 Termination of patent right due to non-payment of annual fee