CN103893744A - 一种治疗糖尿病的药物制剂及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种治疗糖尿病的药物制剂及其制备方法，公开了一种含有GLP-1类似物的药用组合物，包括GLP-1类似物，缓冲剂，稳定剂，等渗调节剂和防腐剂。本发明的优点在于通过添加一些能被人体接受的成分，增强了GLP-1类似物的理化与生物学活性的稳定，从而制备出一种适合于临床多次注射使用的制剂。这种制剂可以有效的防止有效成分GLP-1类似物由于降解、氧化、沉淀等多种因素而导致失效或结晶，从而方便运输、长期保存和临床使用。

Description

一种治疗糖尿病的药物制剂及其制备方法

技术领域

本发明涉及多肽药物制剂领域，更具体地说本发明涉及一种包含利拉鲁肽的药物制剂。 

背景技术

利拉鲁肽（liraglutide）化学名Arg³⁴，Lys²⁶（N^ε-（γ-Glu（N^α-十六烷酰基）））GLP-1(7-37)，是脂肪酸修饰的GLP-1多肽类似物，修饰后的药物经皮下给药后血浆半衰期延长为13小时。GLP-1多肽链序列与人GLP-1（7-37）序列类似，将人GLP-1天然序列第34位赖氨酸取代成精氨酸，其氨基酸序列与类胰高血糖素glucagon-like peptide-1 （GLP-1）有约97%的同源性（Goke等，J.Biol.Chem.,268:19650-55,1993）。16碳脂肪酸通过一个谷氨酸和多肽第26位赖氨酸连接，其结构如下所示： 

利拉鲁肽作为GLP-1类似物，因与GLP-1高度同源而具有以下药理学作用：（1）血糖浓度依赖性促胰岛素分泌作用；（2）抑制餐后胰高血糖素分泌；（3）降低食欲，减缓胃排空。此外，利拉鲁肽可促进B细胞增殖、分化，调节B细胞凋亡基因相关表达，抑制其凋亡，增加体内胰岛B细胞数量。研究表明，利拉鲁肽亦能恢复人胰岛B细胞对血糖的敏感性。 

通常治疗Ⅱ型糖尿病的一线药物是口服降血糖药，但由于目前口服降血糖药的不良反应，尤其是低血糖反应，使之并不适用于所有Ⅱ型糖尿病患者。研究表明，利拉鲁肽具有良好的糖尿病治疗前景。在全球40多个国家的5 000多名糖尿病患者中进行的LEAD（Liraglutide Effect and Action in Diabetes）研究证明，利拉鲁肽具有保护胰岛B细胞功能的作用，改善B细胞胰岛素分泌的数量和质量，因此有可能从根本上改变糖尿病的发展进程。LEAD研究包括6个Ⅲ期临床试验，对利拉鲁肽单药治疗和与其他口服降糖药合用的疗效进行了广泛的评价。研究证实，利拉鲁肽与其他降糖药相比，不仅能有效保护胰岛B细胞功能，延缓Ⅱ型糖尿病的进展，而且能够迅速、高效、持久地降低糖化血红蛋白（HbA1c），极少发生低血糖，同时还有降低体重、降低收缩压的作用。 

临床试验发现利拉鲁肽对心血管系统具有一定保护作用。研究发现利拉鲁肽可以使收缩压下降2.7～6.7mmHg，此现象出现在患者体重下降之前，因此不能把收缩压的下降完全归因于患者体重的变化。研究发现接受利拉鲁肽治疗的患者脉率略有增加，此现象的临床意义还有待进一步研究。Courreges等报道了利拉鲁肽治疗还伴随着总胆固醇、低密度脂蛋白、游离脂肪酸、甘油三酯、纤溶酶原激活物抑制因子-1及B型利钠肽浓度的下降。研究还发现利拉鲁肽治疗组患者超敏C反应蛋白水 平呈现尽管不显著但为剂量依赖性的下降。 

利拉鲁肽作为GLP-1类似物，其对血糖的降低作用呈葡萄糖浓度依赖性，仅在血糖浓度较高时促进胰岛素分泌并抑制胰高血糖作用，因此利拉鲁肽单独应用几乎不会引起低血糖。临床试验表明利拉鲁肽单药治疗的低血糖发生率明显低于格列美脲，与二甲双胍相当。利拉鲁肽联合治疗导致的低血糖事件与其他降糖药相当或更少。Nauck等报道利拉鲁肽联合二甲双胍治疗组患者低血糖发生率与安慰剂加二甲双胍组患者相当，均小于3％，而格列美脲联合二甲双胍治疗组患者低血糖发生率为17％，差异有统计学意义（P＜0.001）。 

利拉鲁肽治疗中最常见的不良反应为胃肠道反应，主要表现为恶心、呕吐、腹泻，通常见于用药第1周，呈剂量依赖性。在LEAD-2和LEAD-3临床试验中，利拉鲁肽治疗组出现恶心的患者＜10％。通过缓慢增加剂量可减少胃肠道反应的发生，患者常在用药1～3周内耐受此不良反应，很少有患者因为胃肠道反应终止治疗。 

作为新一代降血糖药，利拉鲁肽无论单独应用还是与其他口服降糖药联用，均能迅速、高效地降低血糖和HbA1c水平。其降糖作用依赖于葡萄糖浓度，即仅在血糖水平升高时刺激胰岛素释放达到治疗效果，因此发生低血糖的概率非常低。最引人瞩目的是其延缓糖尿病进展的潜力。大量临床试验表明，利拉鲁肽能够改善B细胞功能，减少其凋亡，增加B细胞的新生，从而延缓糖尿病的进展。利拉鲁肽对心血管系统的保护作用使其可以减少糖尿病心血管并发症的发生。另外，利拉鲁肽有明显的降低体重的作用，适用于需要减轻体重及有严重低血糖风险的患者。利拉鲁肽独特的药理学作用使其在糖尿病治疗中具有广阔的前景。 

利拉鲁肽的生产工艺早有报道，如参见中国专利97198413.1和99808706.8等。需要指出的是，GLP-1蛋白是一类较易降解的蛋白，有多种水解酶易促使其降解（M.Egel-Mitani，et al；Yield improvement of heterologous peptides expressed in yps1-disrupted Saccharomyces cerevisiae strains;Enzyme and Microbial Technology，2000,26:671-677）。利拉鲁肽虽然经过脂肪酸链修饰更为稳定，但是作为一种多肽类药物，其稳定性无法与常规化学药物相比，其理化、生物学性质在长期贮存时会因受到多种环境因素的影响而发生变化。例如对温度，氧和紫外线高度敏感。由于这些因素的作用，可能发生多种物理或化学变化，例如吸附，聚合，沉淀和氧化，这给其制剂处方的选择带来极大困难，在药物保质期内保证有90%以上的纯度是行业内公认的标准，比通常的蛋白药物制剂纯度需在95%以上的标准要低很多。因此如果贮存期间利拉鲁肽的稳定性不能保证的话，会导致给药剂量的变化从而影响疗效。 

制剂溶液中可见异物形成的通常由下列原因引起：物理振荡和溶液中蛋白质分子的相互作用以及在贮存小瓶中液-气界面上蛋白质分子的相互作用。人们认为蛋白质分子吸附在气-液界面上，其疏水基团向空气中伸展而亲水基团浸在水相中。一旦在表面这样排布，蛋白质分子便容易聚集、形成颗粒和沉淀。人们还认为在诸如由于运输或其它过程中发生的振动而导致界面的伸缩过程制剂中，吸附于气-液和固-液界面的蛋白质发生进一步的构象变化。这种振荡能引起蛋白质缠结、聚集、形成颗粒并最终与其它吸附的蛋白质沉淀。另外，蛋白质在冻干过程中由于预冻速率、升温速率等冻干曲线工艺的影响导致可见异物产生。 

CN200480034152.8号中国专利申请提及一种利拉鲁肽的改进制剂。在以往的实验中发现利拉鲁肽易从药剂溶液中结晶析出，例如包含 甘露醇的制剂由于其结晶导致生产设备或者注射器的针管导致堵塞，从而影响设备的生产控制或者患者的治疗。经过大量的探索实验，在排除甘露醇、甘油、蔗糖、PEG400、精氨酸、木糖醇、二甲砜、山梨糖醇、肌醇、葡萄糖、甘氨酸、麦芽糖和乳糖等常用的等渗调节剂后，发明人最终选择丙二醇作为利拉鲁肽的等渗调节剂，并且发现含有丙二醇的制剂对利拉鲁肽的物理和化学稳定性没有影响（但未提供数据证明），制剂不易产生沉积物。 

但是，由于利拉鲁肽药物是用于治疗糖尿病，需要终身给药并且每天注射。利拉鲁肽的上市处方为：3ml溶液含有18mg利拉鲁肽，1.42mg二水磷酸氢二钠，14mg丙二醇，5.5mg苯酚，溶解于注射用水，pH为8.15。虽然丙二醇是相对安全的一种要用辅料，但是根据临床总结，丙二醇对人体皮肤还是有一些可能的副作用，主要有以下几种： 

(1)刺激性：有些人使用时会有主观上的灼热感、刺痛感及痒感。 

(2)去脂性：丙二醇具有脂溶性溶剂的特性，长期使用高浓度丙二醇，对表皮皮脂结构会有影响。 

(3)刺激性皮肤炎：丙二醇对皮肤及黏膜都具有刺激性，浓度越高、越密封的状况下使用，刺激性越大，会引起皮肤发红、起红疹、脱皮刺痒及粗糙的情形。虽然对多数人来说刺激性不大，但长期使用所可能产生的累积效应，却很值得注意。对于受伤性皮肤或敏感性肤质而言，即使是低浓度的丙二醇，也很容易产生刺激反应。 

(4)过敏性皮肤炎：约有1～5％的人接触到丙二醇，会产生局部皮肤过敏性湿疹反应。通常首次接触时不会发生问题，但再度接触到时，就会产生皮肤的过敏反应。 

(5)全身性接触性皮肤炎：少数对于丙二醇产生皮肤过敏反应的人， 若服用或施加含丙二醇成分的食品或药品，会引起全身性皮肤过敏反应。 

总体而言，丙二醇的用途相当广泛且安全性还算高，但对于皮肤仍有潜在可能的刺激性及致敏性。以其常见的用途来看，如果有其它更安全的替代成分时，能尽量减少丙二醇的使用或降低其使用浓度，对皮肤而言会更安全。 

因此，研究出一种能替代丙二醇作为利拉鲁肽制剂的药用辅料，使其不易降解，防止从制剂溶液中结晶析出，并适合于实际临床使用的药物制剂是极其有意义的。本发明涉及的就是此方面内容。 

发明内容

本发明者通过大量的处方筛选和稳定性试验，意外的获得了一种包含利拉鲁肽的稳定的药用组合物。 

利拉鲁肽为皮下注射给药。为使利拉鲁肽制剂能稳定保存，使其不易降解和从制剂溶液中结晶析出，发明人发现需要在制剂溶液中添加适宜量的表面活性剂。但是，出于对临床应用安全性的考虑，使能混入用于注射入人体的非肠道组合物的表面活性剂的类型与特性受到限制。因此，本领域需要能提供改进的蛋白蛋稳定稳定性的药物组合物，该组合物中只包含那些被认为是安全的并包括在制定规章的权威批准的商用非肠道药中的成分。 

本发明通过大量的摸索实验意外发现，利用氯化钠作为等渗调节剂替代丙二醇并配合低浓度的poloxamer188表面活性剂与聚山梨酯表面活性剂(优选吐温-20或吐温-80)单独或者联合应用可提高利拉鲁肽制剂的长期稳定性，在4℃条件下存放3个月，利拉鲁肽纯度依然保持在95% 以上，比进口品上市处方更为稳定；而且制剂溶液保持澄清，未见有可见异物或者结晶导致注射剂针管堵塞等现象；而且，低浓度的氯化钠的临床应用安全性要比丙二醇高的多，副作用更少。 

本发明所制备的药用组合物，含有0.1mg/ml-25mg/ml的利拉鲁肽，pH7.0‐9.0的缓冲剂，0.001％至0.05％（m/v）的稳定剂，0.5%-2%（m/v）的氯化钠和0.1mg/ml‐10mg/ml的防腐剂。本发明的优点在于通过添加一些能被人体接受的成分，增强了利拉鲁肽的理化与生物学活性的稳定，从而制备出一种适合于临床多次注射使用的制剂。这种制剂可以有效的防止有效成分利拉鲁肽由于降解、氧化、沉淀等多种因素而导致纯度降低或结晶析出，从而利于方便运输、长期保存和临床使用。 

上述的药物组合物中，利拉鲁肽的浓度优选为约1mg/ml-15mg/ml，更优选为3mg/ml-10mg/ml，最优选为6mg/ml。 

上述的药物组合物中，适用于本发明的缓冲剂为能够维持制剂在水溶液状态下pH值为7.0-9.0的任何一种缓冲液，可任选自磷酸缓冲液、磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲液、TRIS、甘氨酰基-甘氨酸、N-二（羟乙基）甘氨酸、磷酸二氢钠缓冲液、磷酸氢二钠缓冲液、醋酸钠缓冲液、碳酸钠缓冲液、磷酸钠缓冲液、赖氨酸缓冲液、精氨酸缓冲液或其混合物。缓冲剂的pH值范围优选为7.5-8.5，更优选为8.0-8.5；缓冲剂的浓度为5-100mmol/L，优选10-30mmol/L。优选磷酸氢二钠缓冲液,浓度为5-100mmol/L，pH范围在7.5-8.5之间；更优选磷酸氢二钠缓冲液浓度为10-30mmol/L,pH范围为8.0-8.5。 

本发明的药物组合中使用氯化钠作为等渗调节剂，重量体积比浓度为0.5%-2%（m/v），更优选为0.8%-1.5%（m/v）。根据CN200480034152.8号专利申请公开的技术内容，常用的等渗调节剂如葡萄糖，甘露醇，果 糖，乳糖，麦芽糖，蔗糖，海藻糖，甘油，甘氨酸，组氨酸或精氨酸等均不能配合利拉鲁肽使用，易使利拉鲁肽从制剂中结晶析出。发明人经过大量的摸索实验，意外发现，若使用氯化钠替代丙二醇配合表面活性剂联合使用，可以兼起等渗调节剂和稳定剂的作用，促使利拉鲁肽制剂能够稳定保存，不易结晶析出。 

多肽药物注射剂组合物中，合适的稳定剂对于多肽药物的稳定是极其重要的（Wang W,Martin‐Moe S,Pan Cetal,Sabilization of a polypeptide in non‐aqueous solvents.Int J Pharm.2007Sep15），为了达到本发明的目的，发明者研究了大量不同制剂辅料对利拉鲁肽稳定性的影响。本发明选择了一些适合于人体应用的辅料进行了筛选。 

本发明的药用组合物中用于提高利拉鲁肽稳定性的稳定剂包括但不限于：氨基酸及衍生物：甘氨酸、丙氨酸、丝氨酸、天冬氨酸、谷氨酸、苏氨酸、色氨酸、赖氨酸、羟赖氨酸、组氨酸、精氨酸、胱氨酸、半胱氨酸、甲硫氨酸、苯丙氨酸、亮氨酸、异亮氨酸等以及它们的衍生物；非离子表面活性剂：脱水山梨醇脂肪酸酯，甘油脂肪酸酯（如脱水山梨糖醇辛酸单酯，脱水山梨糖醇月桂酸单酯和脱水山梨糖醇棕榈酸单酯），聚甘油脂肪酸酯（例如甘油辛酸单酯，甘油肉豆蔻酸单脂霜和甘油硬脂肪酸单酯），聚氧乙烯脱水山梨醇脂肪酸酯，聚氧乙烯山梨醇脂肪酸酯，聚氧乙烯甘油脂肪酸酯，聚氧乙烯乙二醇脂肪酸酯，聚氧乙烯烷基醚，聚氧乙烯聚氧丙烯烷基醚，聚氧乙烯苯醚，聚氧乙基化硬蓖麻油，聚氧乙基化蜂蜡衍生物，聚氧乙烯化羊毛脂衍生物或者聚氧乙烯脂肪酸酰胺，阳离子表面活性剂是烷基硫酸盐（如有—个C₁₀—C₁₈烷基的烷基硫酸盐）；聚乙二醇，聚乙烯醇，羟丙基－β－环糊精，羧甲基纤维素，聚乙烯吡咯烷酮,聚山梨酯20或聚山梨酯80，泊洛沙姆系列（泊洛 沙姆124、泊洛沙姆181、泊洛沙姆182、泊洛沙姆188、泊洛沙姆237、泊洛沙姆331、泊洛沙姆338或泊洛沙姆407），优选聚山梨酯20、聚山梨酯80或泊洛沙姆188。 

发明人通过大量的对比摸索实验，意外发现浓度为0.001％至0.05％（m/v）的聚山梨酯20、聚山梨酯80、泊洛沙姆188或其混合物作为稳定剂配合等渗调节剂氯化钠可有效促进利拉鲁肽制剂的长期稳定性，防止利拉鲁肽结晶析出。聚山梨酯和泊洛沙姆188可以单独使用，也可以联合使用。单独应用时，聚山梨酯20、聚山梨酯80或泊洛沙姆188浓度可优选为约为0.005％至约0.03％，最优选为0.02％。联合应用时，含有约0.001％至约0.05％（m/v）的聚山梨酯80和0.001％至约0.05％（m/v）的泊洛沙姆188，更优选约0.005％至约0.03％（m/v）的聚山梨酯80和0.005％至约0.03％（m/v）的泊洛沙姆188，更优选为0.01%（m/v）的聚山梨酯80和0.01%（m/v）的泊洛沙姆188。该稳定剂和氯化钠的联合作用对防止利拉鲁肽的结晶形成特别有用。 

本发明的药物组合中包含了药学上可接受的防腐剂。合适的药学上可接受的防腐剂可以选自苯酚、邻甲酚、间甲酚、对甲酚、对羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸丙酯、2－苯氧基乙醇、对羟基苯甲酸丁酯、2－苯基乙醇、苯甲醇、氯丁醇、氯甲酚、对羟基苯甲酸乙酯或其混合物，浓度约为0.1mg/ml到10mg/ml，优选浓度约为1mg/ml到8mg/ml，最优选浓度约为2mg/ml到6mg/ml。发明的药用组合物优选的防腐剂是苯酚或间甲酚，二者可以单独使用，也可以联合使用。 

优选的，上述药物组合物中含有0.1mg/ml-25mg/ml的利拉鲁肽，pH范围为7.0‐9.0、浓度为5-100mmol/L的磷酸氢二钠缓冲剂，0.001％至 0.05％（m/v）的聚山梨酯80或泊洛沙姆188，0.5%-2%（m/v）的氯化钠和0.1mg/ml‐10mg/ml的苯酚或间甲酚。 

优选的，上述药物组合物中含有0.1mg/ml-25mg/ml的利拉鲁肽，pH范围为7.0‐9.0、浓度为5-100mmol/L的磷酸氢二钠缓冲剂，0.001％至0.05％（m/v）的聚山梨酯80和0.001％至约0.05％（m/v）的泊洛沙姆188，0.5%-2%（m/v）的氯化钠和0.1mg/ml‐10mg/ml的苯酚或间甲酚。 

优选的，上述药物组合物中含有1mg/ml-15mg/ml的利拉鲁肽，pH范围为7.5‐8.5、浓度为10-30mmol/L的磷酸氢二钠缓冲剂，0.005％至0.03％（m/v）的聚山梨酯80或泊洛沙姆188，0.8%-1.5%（m/v）的氯化钠和1mg/ml‐8mg/ml的苯酚或间甲酚。 

优选的，上述药物组合物中含有1mg/ml-15mg/ml的利拉鲁肽，pH范围为7.5‐8.5、浓度为10-30mmol/L的磷酸氢二钠缓冲剂，0.005％至0.03%（m/v）的聚山梨酯80和0.005％至0.03％（m/v）的泊洛沙姆188，0.8%-1.5%（m/v）的氯化钠和1mg/ml‐8mg/ml的苯酚或间甲酚。 

优选的，上述药物组合物中含有3mg/ml-10mg/ml的利拉鲁肽，pH范围为8.0‐8.5、浓度为10-30mmol/L的磷酸氢二钠缓冲剂，0.02％（m/v）的聚山梨酯80或泊洛沙姆188，0.8%-1.5%（m/v）的氯化钠和2mg/ml‐6mg/ml的苯酚或间甲酚。 

优选的，上述药物组合物中含有3mg/ml-10mg/ml的利拉鲁肽，pH范围为8.0‐8.5、浓度为10-30mmol/L的磷酸氢二钠缓冲剂，0.01%（m/v）的聚山梨酯80和0.01％的泊洛沙姆188，0.8%-1.5%（m/v）的氯化钠和2mg/ml‐6mg/ml的苯酚或间甲酚。 

根据需要，可将上述的药物制剂制备为冻干粉针，加入药学上可接受的稀释剂可将冻干制剂还原成冻干前的制剂溶液状态，例如加入注射 用水溶解。可以用本领域常用技术进行冻干，例如冻干循环包括冷冻、初次干燥和二次干燥。由于冻干前的液体制剂基本上为等张和/或等渗的，因此冻干后加入适量的注射用水能够还原形成等张或等渗溶液。 

上述的药物制剂可用于治疗II型糖尿病患者，用于改善患者的血糖控制，可单独使用或与二甲双胍、磺脲类药物等联合应用。临床使用时为皮下注射，一种优选的给药方案为每天给药一次，第一周0.6mg/天，以后为1.2mg/天；如果1.2mg剂量未能明显控制血糖，剂量增加至1.8mg。 

本发明还涉及一种利拉鲁肽药物组合物的制备方法，所述方法包括如下步骤： 

（1）将防腐剂、氯化钠和缓冲剂溶解于注射用水中制得溶液； 

（2）将利拉鲁肽原料溶解于上述溶液中，将pH调节至所需的pH； 

（3）在上述溶液中加入稳定剂，得到含有0.1mg/ml-25mg/ml的利拉鲁肽、pH7.0‐9.0的缓冲剂、0.001％至0.05％（m/v）的稳定剂、0.5%-2%（m/v）的氯化钠和0.1mg/ml‐10mg/ml的防腐剂的利拉鲁肽药物组合物。 

所述方法中的防腐剂、缓冲剂和稳定剂的定义如前所述，优选的利拉鲁肽药物组合物亦如前所述。 

在配制时，步骤（3）所得溶液可用0.22μm滤器过滤，即可用于制剂灌封。 

为了进-步阐明本发明，提供了下列例子，这些例子仅仅是为了进一步说明本发明，并不意味着作为一种限制。 

具体实施方式

实施例一  考察利拉鲁肽原粉在不同pH值条件下的溶解情况 

将适量的利拉鲁肽原粉分别溶解在注射用水和不同的pH的磷酸氢二钠缓冲液中，其溶解情况见表1： 

表1  原粉在不同的pH的溶液中的溶解情况 

	利拉鲁肽的浓度	溶解情况
			注射用水	6mg/ml	不溶解
10mM磷酸氢二钠缓冲液（pH7.00）	6mg/ml	不溶解
			10mM磷酸氢二钠缓冲液（pH7.50）	6mg/ml	无色澄清
10mM磷酸氢二钠缓冲液（pH8.00）	6mg/ml	无色澄清
			10mM磷酸氢二钠缓冲液（pH8.15）	6mg/ml	无色澄清
10mM磷酸氢二钠缓冲液（pH8.50）	6mg/ml	无色澄清
			10mM磷酸氢二钠缓冲液（pH9.00）	6mg/ml	无色澄清

从上述试验可知：利拉鲁肽原粉在酸性及中性条件下不溶解，在偏碱性的条件下才溶解。 

实施例二  考察含有不同渗透压调节剂溶液的渗透压 

将不同的渗透压调节剂溶于10mM的磷酸氢二钠缓冲液中，边搅拌边加入利拉鲁肽原粉（6mg／ml），然后用氢氧化钠将pH值调节到pH8.15。最后，将上述溶液分别用0.22μm滤器过滤。每种溶液等渗剂的浓度和渗透压的测试结果见表2： 

表2  等渗剂的浓度和渗透压的测试结果 

等渗剂	摩尔渗透压浓度
		阴性对照（无等渗剂）	0.041
甲硫氨酸（15mg／ml）	0.141
		甘氨酸（15mg／ml）	0.301
L-精氨酸（25mg／ml）	0.322
		氯化钠（8.6mg／ml）	0.307
进口制剂	0.281

等渗溶液具有约0.285～0.310osmol／L的摩尔渗透压浓度。 

实施例三  考察含有不同稳定剂的制剂溶液的稳定性 

将防腐剂、等渗剂和缓冲剂溶解于注射用水中，边缓慢搅拌边将利拉鲁肽原粉溶解与上述溶液中，然后用氢氧化钠和／或盐酸将pH调节至所需的pH，分别加入一定量的稳定剂。最后将上述制剂溶液用0.22μm滤器过滤。加入稳定剂的种类和用量见表3，制剂的组成如下： 

表3  稳定剂的种类和用量 

制剂编号	稳定剂的种类	稳定剂的用量
			1	聚山梨酯80	0.02％
2	泊洛沙姆188	0.02％
			3	聚山梨酯80＋泊洛沙姆188	0.01％＋0.01％
4	羟丙基－β－环糊精	2％
			5	聚维酮K30	3%
6	PEG300	3%
			7	仿进口品上市处方（丙二醇）	14mg/ml

将上述制剂分别放入37℃、25℃和4℃进行稳定性考察,用HPLC法检测样品的纯度（面积归一法）。具体结果如下： 

表4  37℃条件下稳定性考察结果 

表5  25℃条件下稳定性考察结果 

表6  4℃条件下稳定性考察结果 

从以上结果可以看出，低浓度的聚山梨酯80或泊洛沙姆188配合氯化钠能有效增加利拉鲁肽制剂的稳定性，甚至在加速条件下能控制制剂纯度保持在95%以上，其增加稳定性效果要比羟丙基-β-环糊精、聚维酮K30或PEG300等强，甚至比进口品上市处方的稳定性更好。稳定性考察期间编号1-3组制剂溶液澄清，未见有可见异物或者结晶现象。 

实施例四  考察不同浓度泊洛沙姆188作为稳定剂的制剂溶液稳定性 

将防腐剂、等渗剂和缓冲剂溶解于注射用水中，边缓慢搅拌边将利拉鲁肽原粉溶解与上述溶液中，然后用氢氧化钠和／或盐酸将pH调节至所需的pH，分别加入一定量的泊洛沙姆188。最后将上述制剂溶液用0.22μm滤器过滤。加入泊洛沙姆188量见表7，制剂的组成如下： 

表7  不同处方泊洛沙姆188的浓度 

制剂编号	泊洛沙姆188的用量
		1	0
2	0.005％
		3	0.01％
4	0.02％
		5	0.03%
6	仿进口品上市处方

[0075] 将上述制剂分别放入37℃、25℃和4℃进行稳定性考察,用HPLC法检测样品的纯度（面积归一法）。稳定性考察期间各编号组制剂溶液澄清，未见有可见异物或者结晶现象。具体结果如下： 

表8  37℃条件下稳定性考察结果 

表9  25℃条件下稳定性考察结果 

表10  4℃条件下稳定性考察结果 

从以上结果可以看出，添加有0.005%-0.03%泊洛沙姆188和等渗调节剂氯化钠的利拉鲁肽制剂稳定性大为提高，比进口品上市处方的稳定性更好。在4℃条件下存放3个月，利拉鲁肽纯度依然保持在95%以上，而且制剂溶液保持澄清，未见有可见异物或者结晶导致注射剂针管堵塞等现象。 

Claims (10)

1.一种药用组合物，含有0.1mg/ml-25mg/ml的利拉鲁肽，pH7.0-9.0的缓冲剂，0.001％至0.05％（m/v）的稳定剂，0.5%-2%（m/v）的氯化钠和0.1mg/ml-10mg/ml的防腐剂；其中，所述的稳定剂选自聚山梨酯20、聚山梨酯80、泊洛沙姆188或其混合物。

2.根据权利要求1所述的药物组合物，其特征在于：所述组合物中缓冲剂为能够维持制剂在水溶液状态下pH值为7.0-9.0的任何一种缓冲液，可任选自磷酸缓冲液、磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲液、TRIS、甘氨酰基-甘氨酸、N-二（羟乙基）甘氨酸、磷酸二氢钠缓冲液、磷酸氢二钠缓冲液、醋酸钠缓冲液、碳酸钠缓冲液、磷酸钠缓冲液、赖氨酸缓冲液、精氨酸缓冲液或其混合物。

3.根据权利要求1所述的药物组合物，其特征在于：所述组合物中稳定剂选自聚山梨酯20、聚山梨酯80或泊洛沙姆188，浓度为0.005％至0.03％（m/v）。

4.根据权利要求1所述的药物组合物，其特征在于：所述组合物中稳定剂为聚山梨酯80或泊洛沙姆188的混合物，含有0.001％至0.05％（m/v）的聚山梨酯80和0.001％至0.05％（m/v）的泊洛沙姆188。

5.根据权利要求1所述的药物组合物，其特征在于：所述组合物中防腐剂选自苯酚、邻甲酚、间甲酚、对甲酚、对羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸丙酯、2－苯氧基乙醇、对羟基苯甲酸丁酯、2－苯基乙醇、苯甲醇、氯丁醇、氯甲酚、对羟基苯甲酸乙酯或其混合物，浓度为0.1mg/ml到10mg/ml。

6.一种药物组合物，含有0.1mg/ml-25mg/ml的利拉鲁肽，pH范围为7.0-9.0、浓度为5-100mmol/L的磷酸氢二钠缓冲剂，0.001％至0.05％（m/v）的聚山梨酯80或泊洛沙姆188，0.5%-2%（m/v）的氯化钠和0.1mg/ml-10mg/ml的苯酚或间甲酚。

7.一种药物组合物，含有0.1mg/ml-25mg/ml的利拉鲁肽，pH范围为7.0-9.0、浓度为5-100mmol/L的磷酸氢二钠缓冲剂，0.001％至0.05％（m/v）的聚山梨酯80和0.001％至约0.05％（m/v）的泊洛沙姆188，0.5%-2%（m/v）的氯化钠和0.1mg/ml-10mg/ml的苯酚或间甲酚。

8.一种药物组合物，含有1mg/ml-15mg/ml的利拉鲁肽，pH范围为7.5-8.5、浓度为10-30mmol/L的磷酸氢二钠缓冲剂，0.005％至0.03％（m/v）的聚山梨酯80或泊洛沙姆188，0.8%-1.5%（m/v）的氯化钠和1mg/ml-8mg/ml的苯酚或间甲酚。

9.一种药物组合物，含有1mg/ml-15mg/ml的利拉鲁肽，pH范围为7.5-8.5、浓度为10-30mmol/L的磷酸氢二钠缓冲剂，0.005％至0.03%（m/v）的聚山梨酯80和0.005％至0.03％（m/v）的泊洛沙姆188，0.8%-1.5%（m/v）的氯化钠和1mg/ml-8mg/ml的苯酚或间甲酚。

10.一种利拉鲁肽药物组合物的制备方法，所述方法包括如下步骤：

（1）将防腐剂、氯化钠和缓冲剂溶解于注射用水中制得溶液；

（2）将利拉鲁肽原料溶解于上述溶液中，将pH调节至所需的pH；

（3）在上述溶液中加入稳定剂，得到如权利要求1所述的药物组合物。