CN103889241B - 用于促进健康的骨生长和/或用于预防和/或治疗骨疾病的组合物 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了用于促进健康的骨生长和/或用于预防和/或治疗骨疾病的组合物，其包含至少一种长链多不饱和脂肪酸、至少一种益生菌、和寡聚糖的混合物，所述的混合物含有至少一种N‑乙酰化寡聚糖、至少一种唾液酸基化寡聚糖和至少一种中性寡聚糖。所述的骨疾病特别是骨软化症、佝偻病、骨质减少或骨质疏松症。优选的组合物是营养组合物。

Description

用于促进健康的骨生长和/或用于预防和/或治疗骨疾病的组合物
发明领域
本发明涉及用于预防和/或治疗骨疾病的组合物，例如促进健康的骨生长、以及预防或治疗骨质减少、骨软化症或佝偻病或骨质疏松症。该组合物用于哺乳动物，优选用于人。
发明背景
骨质减少是特征为缺乏有机骨基质而导致骨组织的量低于正常的病症。
骨软化症是骨矿物质密度(BMD)和骨矿物质含量(BMC)低于正常的病症。
两种病症常见于早产和/或低出生体重的婴儿和/或遭受不良的子宫内营养的婴儿，并且导致在这些人群中骨折风险的增加(Arch Dis Child Fetal Neonatal Ed200286:F82-F85)。患有由营养不良和/或疾病导致的生长迟缓的婴儿、儿童和青少年也经常受到这些状况的影响。
儿童中的骨软化症通常与佝偻病相关联，而骨质减少经常限于疾病的更原始的成人的形式。骨软化症经常被许多医生视为骨质疏松症的先兆。
骨质疏松症("疏松的骨骼"，来源于希腊语)是导致骨折风险增加的骨疾病。该疾病特征在于骨生成不足、过度的骨丢失、或两者的组合。在骨质疏松症中，骨矿物质密度(BMD)降低，骨微结构衰退和骨中蛋白质的量和种类改变。
骨质疏松症被世界卫生组织(WHO)定义为由DXA(双能X射线吸收光度法)测定的骨矿物质密度(BMD)低于平均骨量峰值(年轻的、健康的成人的平均值)以下2.5个标准差或更多。与之相比，骨质减少被定义为骨矿物 质密度处于所述的平均骨量峰值以下的1.0和2.5个标准差之间。BMD试验为个体提供称为T-评分的测量，该数值来源于将个体的骨密度与最佳骨密度之间的比较。
骨软化症是广义的骨病症，其中存在骨的不充分矿化。骨软化症或佝偻病可能表现为弥漫性身体疼痛、肌肉无力和骨脆性的体征。该疾病的最常见的原因是维生素D缺乏，其通常从膳食和日晒获得。
然而，仍然需要用于预防和/或治疗骨疾病(例如骨质减少、骨软化症、佝偻病和骨质疏松症)的营养组合物，特别是在早产或低出生体重(LBW)或遭受子宫内生长迟缓(IUGR)的、或者遭受通常由营养不良(通常经历不良的子宫内营养)引起的生长发育障碍或经历疾病如克罗恩病和/或乳糜泻和/或癌的、或者使用导致吸收障碍、厌食症和/或代谢性骨病的药物(例如化疗药和/或皮质类固醇)进行治疗的婴儿和幼儿中。
需要通过适合于脆弱个体(如婴儿或儿童)的非基于药物的对骨疾病的改善，例如骨质减少、骨软化症、佝偻病或骨质疏松症。
需要能降低骨疾病的频率、发生、严重性和/或持续时间的长期作用。而且需要在“以后的生命中”、特别是干预之后的若干年中变为可测量的作用。
需要在年幼的哺乳动物(特别是婴儿和儿童、也指年幼的宠物)中的营养干预，所述的哺乳动物是早产的或具有LBW或经历IUGR的、或者遭受由营养不良引起的生长发育障碍或经历如克罗恩病和/或乳糜泻和/或癌的疾病的、或者使用导致吸收障碍、厌食症和/或代谢性骨病的药物(例如化疗药和/或皮质类固醇)进行治疗的。
需要导致人和动物中、特别是年幼哺乳动物中的骨健康的维持或改善的这些干预。
发明概述
发明人已经令人惊讶地发现给予特定的寡聚糖混合物以及至少1种长链多不饱和脂肪酸(LC-PUFA)和至少1种益生菌在促进健康的骨生长和预 防和/或治疗骨疾病(特别是骨软化症、佝偻病、骨质减少和骨质疏松症)中特别有效。
因此，本发明提供包含至少1种LC-PUFA、至少1种益生菌和寡聚糖混合物的组合物，所述的混合物含有至少一种N-乙酰化寡聚糖、至少一种唾液酸基化寡聚糖和至少一种中性寡聚糖，其用于骨疾病(优选骨软化症、佝偻病、骨质减少或骨质疏松症)的预防和/或治疗。
根据本发明的组合物优选是营养组合物。
LC-PUFA优选在花生四烯酸(ARA)和二十二碳六烯酸(DHA)中进行选择，更优选LC-PUFA是ARA和DHA的混合物。
益生菌优选在益生菌菌株中进行选择，更优选益生菌是乳杆菌或双歧杆菌。在优选的实施方案中，益生菌是鼠李糖乳杆菌(Lactobacillus rhamnosus)，该术语涵盖鼠李糖乳杆菌ATCC53103和鼠李糖乳杆菌CGMCC1.3724(也称为NCC4007和LPR)、罗伊乳杆菌和乳双歧杆菌。
中性寡聚糖优选在寡聚果糖(FOS)和半乳寡聚糖(GOS)中进行选择，优选GOS。
在一个实施方案中，寡聚糖混合物可以来源于动物乳，例如奶牛、山羊、绵羊或水牛乳中的1种或多种。例如，其通过奶牛的乳分馏并且进一步酶处理而获得。
在第二实施方案中，寡聚糖混合物可以使用酶、化学-酶和/或化学的方法进行制备。
在第三实施方案中，寡聚糖混合物可以使用酵母和/或细菌发酵技术进行制备。例如，经基因修饰或未经基因修饰的表达合适的酶(例如糖苷酶和/或糖基转移酶)的酵母和/或细菌细胞可能用于此目的。
本发明包含本发明组合物的3种不同类型的应用。在第一种情形中，个体和特别是儿童是健康的，因在其家族中无骨疾病史而没有任何骨疾病的风险。在第二种情形中，个体和特别是儿童是健康的，但因在其家族中有骨疾病史、或者因其是早产的或具有LBW或经历IUGR、或者遭受生长发育障碍期或经历如克罗恩病和/或乳糜泻和/或癌的疾病、或者使用导致 吸收障碍、厌食症和/或代谢性骨病的药物(例如化疗药和/或皮质类固醇)进行治疗而处于骨疾病的风险中。在第三种情形中，个体和特别是儿童患有骨疾病，并且因此是患病的。本发明的优选的应用是第二种情形，用于早产/LBW/IUGR婴儿并且也用于遭受由疾病或营养不良或药物使用而引起的生长延迟的婴儿/儿童。
发明详述
如本文所用的，以下术语具有以下的含义。
术语“儿童”是指处于出生和青春期阶段之间的人。成人是比儿童更年长的人。
术语“婴儿”是指年龄在12个月以下的儿童。
术语“早产儿”是指在低于37周胎龄出生的婴儿。
术语“低出生体重婴儿”是指具有低于2,500g的出生体重的婴儿。
术语“幼儿”是指年龄在1和3岁之间的儿童。
术语“婴儿配方食品”是指针对在生命最初4至6个月期间的婴儿的特定营养应用并且自身满足该类人群营养需求的食品(1991年5月14日，the European Commission Directive91/321/EEC的第1.2条，关于婴儿配方食品和后续配方食品)。
术语“早产儿配方食品”是指针对早产儿的婴儿配方食品。
术语“人乳强化剂”是指用于增加喂给早产儿或低出生体重婴儿的母乳中的热量、蛋白质、矿物质和维生素的添加剂。
术语“后续配方食品”是指针对年龄超过4个月的婴儿的特定营养应用并且含有在这类人群的进行性的多样化膳食中的主要液体元素的食品。
术语“初始婴儿配方食品”是指针对在生命最初4个月期间的婴儿的特定营养应用的食品。
术语“婴儿食品”是指针对在生命最初几年期间的婴儿的特定营养应用的食品。
术语“婴儿谷物组合物”是指针对在生命最初几年期间的婴儿的特定营养应用的食品。
术语“成长乳”是指适合于幼儿的特定营养需要的基于乳的饮料。
术语“断奶期”是指在婴儿的膳食中母乳或婴儿配方食品部分地或完全地被其他食物取代的时期。
术语“骨疾病”是指影响骨的医学病症，特别是与骨有机基质的减少(例如骨质减少或骨质疏松症)和/或与骨矿物化减少(例如骨软化症和佝偻病)相关的医学病症。
术语“预防和/或治疗骨疾病”是指预防骨疾病以及降低骨疾病的频率和/或发生率和/或严重性和/或持续时间。发生率与任意骨疾病的数量相关。频率与相同骨疾病的数量相关。预防包含在以后的生命中所述骨疾病的频率和或严重性的降低。术语“在以后的生命中”包含在干预终止后的作用。“在以后的生命中”的作用能够优选是在干预终止后2-4周、2-12个月或年(例如2、5、10年)。骨折能够是例如上述的骨疾病的后果。
术语“促进健康的骨生长”是指支持骨生长，由此其以最平衡的方式完成。
术语“营养组合物”是指喂养个体的组合物。该营养组合物通常经口、经胃内或静脉内摄入，并且其通常包括脂质或脂肪源和蛋白质源。
术语“合成的混合物”是指通过化学和/或生物学方法获得的混合物，其能够与哺乳动物乳中天然存在的混合物在化学上相同。
术语“低过敏原组合物”是指不太可能引起变态反应的组合物。
术语“益生菌”是指对宿主的健康或幸福有益的微生物细胞制剂或微生物细胞的组分或微生物细胞代谢物(Salminen S,Ouwehand A.Benno Y.等人“益生菌:其应当如何被定义”Trends Food Sci.Technol.1999:10107-10)。
术语“寡聚糖”是指聚合度(DP)范围在2-20(包含端点)、但不包括乳糖的碳水化合物。
术语“中性寡聚糖”是指不带电荷并且没有N-乙酰基残基的寡聚糖。
术语“唾液酸基化寡聚糖”是指具有唾液酸(例如N-乙酰基神经氨酸和/或N-乙醇酰基神经氨酸)残基的寡聚糖。
术语“N-乙酰化的”寡聚糖是指具有至少一种载有N-乙酰残基的己糖的寡聚糖。
NCC是指雀巢培养物保藏中心(NestléCulture Collection)。
除非另有说明，所有百分比是按重量计。
在一个方面，本发明提供用于促进健康的骨生长以及预防和/或治疗骨疾病(优选骨软化症、佝偻病、骨质减少或骨质疏松症)的组合物，其包含
●至少一种LC-PUFA，
●至少一种益生菌，和
●寡聚糖混合物，所述的混合物含有至少一种选自
GalNAcα1,3Galβ1,4Glc(=3’GalNAc-lac=N-乙酰-半乳糖胺基-乳糖)、Galβ1,6GalNAcα1,3Galβ1,4Glc(=6’Gal-3GalNAc-lac=半乳糖基-N-乙酰-半乳糖胺基-乳糖)、Galβ1,4GlcNAcβ1,3Galβ1,4Glc(乳-N-新四糖或LNnT)和Galβ1,3GlcNAcβ1,3Galβ1,4Glc(乳-N-四糖或LNT)的N-乙酰化寡聚糖，至少一种选自NeuAcα2,3Galβ1,4Glc(=3’-唾液酸基乳糖)和NeuAcα2,6Galβ1,4Glc(=6’-唾液酸基乳糖)的唾液酸基化寡聚糖，以及至少一种选自Galβ1,6Gal(=β1,6-二半乳糖苷)；Galβ1,6Galβ1,4Glc(=6’Gal-lac)；Galβ1,6Galβ1,6Glc；Galβ1,3Galβ1,3Glc；Galβ1,3Galβ1,4Glc(=3’Gal-lac)；Galβ1,6Galβ1,6Galβ1,4Glc(=6’,6-diGal-lac)；Galβ1,6Galβ1,3Galβ1,4Glc(=6’,3-diGal-lac)；Galβ1,3Galβ1,6Galβ1,4Glc(=3’,6-diGal-lac)；Galβ1,3Galβ1,3Galβ1,4Glc(=3’,3-diGal-lac)；Galβ1,4Galβ1,4Glc(=4’Gal-lac)和Galβ1,4Galβ1,4Galβ1,4Glc(=4’,4-diGal-lac);和Fucα1,2Galβ1,4Glc(=2’岩藻糖基乳糖或FL)的中性寡聚糖。
在第二方面，本发明涉及用于促进健康的骨生长以及预防和/或治疗骨疾病(优选骨软化症、佝偻病、骨质减少或骨质疏松症)的组合物，所述的 组合物包含至少一种长链多不饱和脂肪酸、至少一种益生菌、和寡聚糖混合物，所述的寡聚糖混合物包含：
●相对于寡聚糖混合物的总重量，0.25-20重量%、优选0.3-10重量%、更优选0.3-5重量%和甚至更优选大约0.5重量%的至少一种N-乙酰化寡聚糖，
●相对于寡聚糖混合物的总重量，0.5-30重量%、优选0.75-15重量%、更优选0.75-10重量%和甚至更优选大约1重量%的至少一种唾液酸基化寡聚糖，和
●相对于寡聚糖混合物的总重量，50-99.3重量%、优选20-80重量%、更优选10-50重量%和甚至更优选大约50重量%的至少一种中性寡聚糖。
根据优选的实施方案，寡聚糖混合物是按组合物的总重计0.5-70%、更优选1-20%、甚至更优选2-5%的量存在。
寡聚糖化合物以其结构进行定义，其中GalNAc是N-乙酰半乳糖胺，GlcNAc是N-乙酰葡萄糖胺，Gal是半乳糖，NeuAc是N-乙酰神经氨酸，Glc是葡萄糖和Fuc是岩藻糖。
本发明组合物的寡聚糖混合物优选地是所述组合物中的寡聚糖的唯一来源。
在第一实施方案中，中性寡聚糖优选地在FOS和GOS中进行选择，优选GOS，例如上文所引用的那些。
在第二实施方案中，独立于或不来源于第一实施方案，中性寡聚糖优选是2’-岩藻糖基乳糖(FL)。在这种情况中，在其制备期间FL优选包含在寡聚糖混合物中的中性寡聚糖的组中。
中性寡聚糖可以通过购买和混合各个组分而被制成混合物。例如合成的半乳寡聚糖(例如Galβ1,6Gal、Galβ1,6Galβ1,4Glc、Galβ1,6Galβ1,6Glc、Galβ1,3Galβ1,3Glc、Galβ1,3Galβ1,4Glc、Galβ1,6Galβ1,6Galβ1,4Glc、Galβ1,6Galβ1,3Galβ1,4Glc、Galβ1,3Galβ1,6Galβ1,4Glc、Galβ1,3Galβ1,3Galβ1,4Glc、Galβ1,4Galβ1,4Glc和
Galβ1,4Galβ1,4Galβ1,4Glc)及其混合物可以以商标从Friesland Campina,荷兰和购买得到。寡聚糖的其他供应商是Dextra Laboratories、Sigma-Aldrich Chemie GmbH和Kyowa Hakko Kogyo Co.,Ltd。或者，特定的糖基转移酶和/或糖苷酶(例如半乳糖基转移酶和/或岩藻糖基转移酶和/或半乳糖苷酶和/或岩藻糖苷酶)可以用于生产半乳寡聚糖和/或岩藻糖基化的寡聚糖。
岩藻糖基乳糖是岩藻糖基化的寡聚糖(即具有岩藻糖残基的寡聚糖)。该岩藻糖基化的寡聚糖可以通过色谱或过滤技术从天然来源(例如动物乳)分离出来。或者，其可以通过生物技术手段使用特定的岩藻糖基转移酶和/或岩藻糖苷酶或者通过使用基于酶的发酵技术(重组的或天然的酶)或微生物发酵技术来生产。在后一种情形中，微生物可以表达其天然酶和底物或者可以被设计为产生相应的底物和酶。可以使用单一的微生物培养物和/或混合的培养物。岩藻糖基化的寡聚糖形成能够被起始于任意聚合度(DP)(从DP=1向前)的受体底物启动。或者，岩藻糖基化的寡聚糖可以通过化学合成从乳糖和游离的岩藻糖进行生产。岩藻糖基化的寡聚糖也可以从例如日本的Kyowa,Hakko,Kogyo获得。
根据本发明，唾液酸基化寡聚糖能够选自3’-唾液酸基乳糖和6’-唾液酸基乳糖。优选地，唾液酸基化寡聚糖包含3’-唾液酸基乳糖和6’-唾液酸基乳糖。在该实施方案中，3'-唾液酸基乳糖和6'-唾液酸基乳糖之间的比例优选位于5:1和1:2之间的范围。
唾液酸基乳糖的3’-和6’-形式可以通过向组合物中加入天然来源(例如动物乳)来获得，或者可以通过色谱或过滤技术从这些天然来源分离出来。或者，其可以通过生物技术手段使用特定的唾液酸基转移酶或唾液酸酶、神经氨酸酶、通过基于酶的发酵技术(重组的或天然的酶)、通过化学合成或通过微生物发酵技术来生产。在后一种情形中，微生物可以表达其天然酶和底物或者可以被设计为产生相应的底物和酶。可以使用单一的微生物培养物和/或混合的培养物。唾液酸基-寡聚糖形成能够被起始于任意聚合度(DP)(从DP=1向前)的受体底物启动。或者，唾液酸基乳糖可以通过化 学合成从乳糖和游离的N’-乙酰神经氨酸(唾液酸)进行生产。唾液酸基乳糖也可以从例如日本的Kyowa,Hakko,Kogyo购买获得。
N-乙酰化的寡聚糖可以通过向组合物加入天然来源(例如动物乳)来获得。或者，其可以通过氨基葡糖苷酶和/或氨基半乳糖苷酶对N-乙酰-葡萄糖和/或N-乙酰半乳糖的作用来进行制备。同样地，N-乙酰-半乳糖基转移酶和/或N-乙酰-糖基转移酶可以用于该目的。N-乙酰化的寡聚糖也可以通过使用相应的酶(重组或天然的)的发酵技术和/或微生物发酵的应用来生产。在后一种情形中，微生物可以表达其天然的酶和底物或者可以可以被设计为产生相应的底物和酶。可以使用单一的微生物培养物和/或混合的培养物。N-乙酰化寡聚糖形成能够被起始于任意聚合度(DP)(从DP=1向前)的受体底物启动。如Wrodnigg,T.M.;Stutz,A.E.(1999)Angew.Chem.Int.Ed.38:827-828中所述，另一种选择是将游离的或者结合到寡聚糖(例如乳果糖)上的酮己糖(例如果糖)进行化学转化为N-乙酰己糖胺或者含寡聚糖的N-乙酰己糖胺。
例如，如US专利号5,288,637和WO96/10086中所述，LNnT和LNT可以通过使用糖基水解酶和/或糖基转移酶将糖单元从供体部分向受体部分进行酶转移来合成。或者，如Wrodnigg,T.M.;Stutz,A.E.(1999)Angew.Chem.Int.Ed.38:827-828中所述，LNnT可以通过将游离的或者结合到寡聚糖(例如乳果糖)上的酮己糖(例如果糖)进行化学转化为N-乙酰己糖胺或者含寡聚糖的N-乙酰己糖胺来进行制备。以这种方法产生的N-乙酰-乳糖胺然后可以被转移到作为受体部分的乳糖。
优选地，N-乙酰化寡聚糖选自乳-N-新四糖(或LNnT)和乳-N-四糖(或LNT)。优选地，LNnT和/或LNT包含于在其制备期间的寡聚糖混合物中的唾液酸基化的寡聚糖的组之中。
存在于本发明组合物中的益生菌菌株可以选自符合益生菌定义并且在其所添加的组合物中具有可接受的贮存期限的任意菌株。例如，如果将组合物加入婴儿配方食品中，所述的婴儿配方食品需要在长达12个月保持稳定和有效。
益生菌菌株优选是乳杆菌或双歧杆菌。优选的乳杆菌物种的实例是鼠李糖乳杆菌、副干酪乳杆菌和罗伊乳杆菌。特别优选的菌株是鼠李糖乳杆菌ATCC53103、鼠李糖乳杆菌CGMCC1.3724和副干酪乳杆菌CNCMI-2116。甚至更优选地，益生菌是鼠李糖乳杆菌，该术语包含鼠李糖乳杆菌ATCC53103和鼠李糖乳杆菌CGMCC1.3724。
鼠李糖乳杆菌ATCC53103可以从芬兰的Valio Oy公司以商标LGG获得。
优选的双歧杆菌物种的实例包括乳双歧杆菌、长双歧杆菌、短双歧杆菌和婴儿双歧杆菌。特别优选的菌株是尤其由丹麦的Christian Hansen公司以商标Bb12销售的乳双歧杆菌CNCM I-3446、由日本的Morinaga Milk Industry有限公司以商标BB536销售的长双歧杆菌ATCC BAA-999、由Danisco公司以商标Bb-03销售的短双歧杆菌的菌株、由Morinaga公司以商标M-16V销售的短双歧杆菌的菌株、由Procter&Gamble Co.以商标Bifantis销售的婴儿双歧杆菌的菌株和由Institut Rosell(Lallemand)以商标R0070销售的短双歧杆菌的菌株。
根据本发明的实施方案，益生菌选自益生菌细菌菌株，优选益生菌是乳杆菌或双歧杆菌，更优选益生菌是鼠李糖乳杆菌、罗伊乳杆菌和乳双歧杆菌。
如果益生菌发挥上述的作用，益生菌能够以宽范围的百分比存在于组合物中。然而，优选地，对于每克组合物，益生菌以相当于从10e2至10e12cfu(=菌落形成单位)、更优选在10e6和10e9cfu之间的益生菌菌株的量存在于组合物中。这种表述包括细菌是活的、灭活的或者死的或者甚至以片段(例如DNA、细胞壁材料、细胞内材料或细菌代谢产物)存在的可能性。换句话说，组合物包含的细菌的量是以假设全部细菌是活的时细菌量的菌落形成能力来表达，而不论其实际上是否是活的、灭活的或死的、片段的或者任意或全部这些状态的混合物。
组合物含有至少一种LC-PUFA，其通常是n-3或n6LC-PUFA。n-3LC-PUFA能够是C20或C22n-3脂肪酸。组合物中存在的C20或C22n-3LC-PUFA的量优选是全部脂肪酸的至少0.1重量%。优选地，n-3LC-PUFA是二十二碳六烯酸(DHA,C22:6,n-3)。n-6LC-PUFA能够是C20或C22n-6脂肪酸。组合物中存在的C20或C22n-6LC-PUFA的量优选是全部脂肪酸的至少0.1重量%。优选地，n-6LC-PUFA是花生四烯酸(ARA,C20:4,n-6)。LC-PUFA的来源可以是例如蛋脂质、真菌油、低EPA鱼油或藻油。本发明的组合物的LC-PUFA可以以小量的含有高含量形成的花生四烯酸和二十二碳六烯酸的油(例如鱼油或微生物油)来提供。
根据本发明的组合物优选地是营养组合物、更优选地是合成营养组合物。在这种情况中，其能够是通常在住院期间使用的和/或在出院之后使用的早产儿配方食品、人乳强化剂、初始婴儿配方食品、后续配方食品、婴儿食物配方食品、婴儿谷物配方食品、成长乳、用于临床营养的医疗食品、或补充剂。补充剂能够针对早产儿或儿童或成人。所述的组合物优选是针对早产喂养的产品，例如早产儿配方食品、人乳强化剂或早产儿补充剂。根据实施方案，组合物优选是早产儿配方食品、人乳强化剂或补充剂。根据本发明的组合物也能够是针对儿童或成人的产品，例如酸乳、医疗食品、以及宠物食品。
根据特别优选的实施方案，根据本发明的组合物用于早产或具有LBW或经历IUGR的婴儿和幼儿，优选地用于经历IUGR、或者遭受通常由于营养不良而引起的生长发育障碍或者经历如克罗恩病和/或乳糜泻和/或癌的疾病或使用导致吸收障碍、厌食症和/或代谢性骨病的药物(例如化疗药和/或皮质类固醇)进行治疗的婴儿。
根据本发明的组合物能够在断奶期之前和/或期间和/或之后使用。
优选地，根据本发明的组合物用于促进健康的骨生长和/或预防和降低骨疾病的频率和/或发生和/或严重性和/或持续时间。
特别地，根据本发明的组合物用于预防和降低骨折的频率和/或发生和/或严重性和/或持续时间。
优选地，本发明的组合物用于促进健康的骨生长。更优选地，本发明的组合物用于预防BMD减少和/或用于提高骨矿物质含量(BMC)。
本发明也包括本发明组合物作为合成营养剂用于促进健康的骨生长和/或用于预防和/或治疗骨疾病，特别是骨软化症、佝偻病、骨质减少或骨质疏松症的用途。
本发明也包括本发明组合物作为合成营养剂用于预防BMD减少和/或提高BMC的用途。
这些用途包含组合物是补充剂的情形，优选地以单位剂量的形式提供。
上述的所有用途特别地针对婴儿和幼儿。本发明的组合物和用途特别适合于处于骨疾病风险、具有骨疾病家族史、或者已经经历至少1次、优选若干次骨折发生的婴儿和幼儿。本发明的组合物和用途特别适合于早产的或具有LBW或经历IUGR或遭受由于营养不良或经历如克罗恩病和/或乳糜泻和/或癌的疾病而引起的生长发育障碍、或使用导致吸收障碍、厌食症和/或代谢性骨病的药物(例如化疗药和/或皮质类固醇)进行治疗的婴儿和幼儿。本发明的组合物也能够应用于处于骨疾病风险或已经经历至少1次、优选若干次骨折发生、或早产的或具有LBW或经历IUGR或遭受由于营养不良或经历如克罗恩病和/或乳糜泻和/或癌的疾病而引起的生长发育障碍、或使用导致吸收障碍、厌食症和/或代谢性骨病的药物(例如化疗药和/或皮质类固醇)进行治疗的、或者遭受由疾病或营养不良或在婴儿和/或儿童期间(包括青春期)的药物使用而导致的生长延迟的青少年或成人。
本发明的组合物特别优选用于早产的或具有低出生体重或经历子宫内生长发育障碍、或具有子宫内营养不良或遭受生长延迟的婴儿和儿童。
不希望受限于理论，发明人相信上述组合物中的寡聚糖混合物的组合在促进健康的骨生长和/或在预防和/或治疗骨疾病中的功效可能是由益生菌菌株和LC-PUFA通过使用特定的寡聚糖混合物的刺激作用引起的免疫调节剂效应的协同组合的结果。
寡聚糖、LC-PUFA和益生菌菌株可以在同一组合物中进行施用或者可以先后进行施用。
如果针对早产和LBW婴儿组，组合物优选是营养组合物，例如以液体形式食用的。其可以是完全营养的配方食品，例如(早产)婴儿配方食品、补充剂、人乳强化剂、后续配方食品或成长乳。或者对于幼儿组，组合物可以是例如汁液饮料或者其他冷藏的或贮存稳定的饮料或汤、或婴儿食品、或婴儿谷物组合物。或者，对于幼小的哺乳动物组，组合物可以是宠物食品。
根据本发明的组合物也能够含有蛋白质源。认为蛋白质的类型对于本发明不重要，只要满足必需氨基酸含量的最低需求和保证令人满意的生长即可。因此，可以使用基于乳清蛋白、酪蛋白及其混合物的蛋白质源以及基于大豆的蛋白质源。考虑乳清蛋白时，蛋白质源可以基于酸乳清蛋白或甜乳清蛋白或其混合物，并且可以包括任意需要的比例的α-乳白蛋白和β-乳球蛋白。为了增强对变应原、特别是食物变应原的口服耐受，蛋白质能够至少部分地被水解。在这种情况中，组合物是低过敏原组合物。
根据本发明的组合物也能够含有除寡聚糖混合物之外的碳水化合物源。这在本发明的组合物是婴儿配方食品的情形中是特别优选的。在这种情形中，可以使用在婴儿配方食品中常见的任意碳水化合物源，例如乳糖、蔗糖、麦芽糊精、淀粉及其混合物，但优选的碳水化合物源是乳糖。在任何情况中，寡聚糖混合物优选是本发明组合物中的益生元的单一来源。
根据本发明的组合物也能够含有除LC-PUFA之外的脂质源。如果本发明的营养组合物是婴儿配方食品，这是特别相关的。在这种情形中，脂质源可以是适合用于婴儿配方食品的任意的脂质或脂肪。优选的脂肪源包括棕榈油酸、高油酸葵花籽油和高油酸红花油。也可以加入必需脂肪酸亚油酸和α-亚麻酸。在组合物中，脂肪源(包括LC-PUFA，例如ARA和/或DHA)优选具有约1:2至约10:1、优选约3:1至约8:1的n-6与n-3脂肪酸的比例。
本发明的组合物也能够含有被认为在每日饮食中必需的并且以营养上显著量的全部维生素和矿物质。已经证实了对某些维生素和矿物质的最低需求。任选地存在于本发明的组合物中的矿物质、维生素和其他营养素的 实例包括维生素A、维生素B1、维生素B2、维生素B6、维生素B12、维生素E、维生素K、维生素C、维生素D、叶酸、肌醇、烟酸、生物素、泛酸、胆碱、钙、磷、碘、铁、镁、铜、锌、锰、氯、钾、钠、硒、铬、钼、牛磺酸和L-肉碱。矿物质通常以盐形式添加。特定的矿物质和其他的维生素的存在和量根据目标人群而有所不同。
如果需要，本发明的组合物可以含有乳化剂和稳定剂，例如大豆、卵磷脂、单和二甘油酯的柠檬酸酯等。
本发明的组合物也可以含有可以具有有益作用的其他的物质，例如乳铁蛋白,核苷酸、核苷、神经节苷脂、聚胺等。
本发明组合物的制备将以举例的方式进行描述。
配方食品可以以任意合适的方式进行制备。例如，其可以通过将蛋白质源、碳水化合物源(不同于寡聚糖混合物)和包括LC-PUFA的脂肪源以合适的比例混合在一起来进行制备。如果使用，此刻也可以包括乳化剂。维生素和矿物质可以此刻加入，但通常其在后面加入从而避免热降解。在混合前可以将任意的亲脂性维生素、乳化剂等溶解于脂肪源中。然后可以将水(优选已经经过反渗透的水)混入其中从而形成液体混合物。水的温度范围通常在约50℃和约80℃之间，从而帮助成分的分散。可商购获得的液化剂可以用于形成液体混合物。如果最终产品具有液体形态，在该阶段将加入寡聚糖混合物。如果最终产品是粉末，如果需要也可以在此阶段加入寡聚糖。液体混合物然后进行匀化，例如以2个阶段。
液体混合物然后可以进行热处理从而降低细菌载量，例如通过快速加热液体混合物至约80℃-约150℃之间的温度范围持续约5秒至约5分钟。这可以通过蒸汽喷射、高压锅或热交换器(例如板式热交换器)的方法进行。
然后，例如通过快速冷却可以将液体混合物冷却至约60℃和约85℃之间。液体混合物然后可以再进行匀化，例如以2个阶段，在第一阶段在约10MPa和约30MPa之间和在第二阶段在约2MPa和约10MPa之间。然后可以将匀化的混合物进一步冷却从而加入任意的热敏感的组分，例如维生素和矿物质。此刻方便地调节匀化的混合物的pH和固体含量。
将匀化的混合物转移至合适的干燥设备(例如喷雾干燥器或冷冻干燥器)并且转化为粉末。粉末应当具有按重量计低于约5%的含水量。在该阶段可以通过与益生菌菌株一起干法混合或者通过与益生菌菌株一起以结晶的糖浆形式进行混合并且喷雾干燥(或冷冻干燥)，从而加入寡聚糖混合物。
如果优选液体的组合物，匀化的混合物可以进行灭菌、然后在无菌条件下填充到合适的容器中，或者可以先填充到容器中、然后进行灭菌。
在另一个实施方案中，本发明的组合物可以是足以在个体中达到所需效果的量的补充剂。该施用形式通常更适合于早产或LBW或IUGR婴儿、较大的儿童和成人。
在补充剂中所包含的寡聚糖混合物、LC-PUFA和益生菌菌株的量将根据补充剂的施用方式进行选择。
补充剂可以是例如粉末、片剂、胶囊、锭剂或液体的形式。补充剂可以进一步含有保护性水胶体(例如树胶、蛋白质、改性淀粉)、粘合剂、成膜剂、包囊剂/材料、壁/壳材料、基质化合物、包衣、乳化剂、表面活性剂、增溶剂(油、脂肪、蜡、卵磷脂等)、吸附剂、载体、填充剂、辅助化合物、分散剂、润湿剂、加工助剂(溶剂)、助流剂、掩味剂、增重剂、凝胶剂和胶凝剂。补充剂也可以含有常规的药物添加剂和辅料、赋形剂和稀释剂，其非限制性地包括水、任意来源的明胶、植物胶、木素磺酸盐、滑石粉、糖、淀粉、阿拉伯胶、植物油、聚亚烷基二醇、调味剂、防腐剂、稳定剂、乳化剂、缓冲剂、润滑剂、着色剂、润湿剂、填充剂等。
补充剂能够被加入到可被使用者(其是人或动物)接受的产品中，例如分别是可摄食的载体或支持物。这些载体或支持物的实例是药物或食物或宠物食品组合物。这些组合物的非限制性实例是乳、酸乳、凝乳、乳酪、发酵乳、基于乳的发酵产品、发酵的基于谷物的产品、基于乳的粉末、人乳、早产儿配方食品、婴儿配方食品、口服补充剂和管喂食品(tube-feeding)。
进一步地，补充剂可以含有适合于肠内或胃肠外施用的有机或无机的载体材料以及根据政府机构(例如USRDA)推荐的维生素、矿物质、微量元素和其他微量营养素。
当考虑了结合附图详细描述的说明性实验时，本发明的优点、性质和各种其他特征将展现得更全面。在附图中：
图1是关于骨矿物质浓度(BMC，以g)的描述实验结果的柱状图。
图2是关于骨矿物质密度(BMD，以g/cm2)的描述实验结果的柱状图。
图3是关于鼻-肛门长度(或者naL，以cm)的描述实验结果的柱状图。
图4是关于股骨长度(或者fL，以mm)的描述实验结果的柱状图。
实施例
在经历IUGR的大鼠上进行补充寡聚糖混合物的效果的实验，所述的寡聚糖混合物是富含半乳寡聚糖(脱矿物质、脱乳糖的乳清蛋白渗透物或DDWP)的牛乳寡聚糖(CMOS)、LC-PUFA(花生四烯酸-ARA-和二十二碳六烯酸-DHA-)和鼠李糖乳杆菌的混合物。通过从妊娠第11天至分娩的母亲食物限制50%来诱发IUGR。
1、方法学
从法国的Charles River公司购买按时交配的雌性和未交配的雌性的斯普拉格-道利大鼠。按体重隔离交配的雌性并且分配到无限制的或受限制的饮食方案。所有动物接受膳食(Kliba3437)。受限制的雌性从怀孕第11天至分娩接受未交配的雌性的50%摄入量，随后允许所有雌性随意进食。
出生时，幼崽在最初24小时内进行称重并且被分配到三组之一(每组12个雄性和12个雌性)：
对照：来自不受限喂养的母体的幼崽，其接受对照管饲法和对照断奶饮食；
IUGR对照(IUGRc)：来自受限制的母体的幼崽，其接受对照管饲法和对照断奶饮食；
IUGR混合物(IUGRtx)：来自受限制的母体的幼崽，其接受治疗管饲法和治疗断奶饮食。
为了使母体影响最小化，研究中的幼崽随机地选自每一个母亲并且每组被分配给4只哺育母畜，因此，来自同一窝的同胞被随机地分配到2个 IUGR组中。对照幼崽由在怀孕期间随意喂养的母畜喂养，IUGR组中的幼崽由在怀孕期间受限制的母畜喂养。
每窝被调整至8只幼崽(4只雄性和4只雌性)，其中来自每窝的6只(3只雄性和3只雌性)被纳入实验组中。幼崽保持与其分配的母畜在一起并且被允许随意哺乳直至21天的年龄。
2、处理和饮食
以下功能性成分用于实验管饲法和饮食组合物：
a）以98.8%干物质的DDWP成分，其组成详见表1。
表1.DDWP混合物的组成
DDWP通常根据WO2007/101675或WO2007/090894的公开内容获得，并且通常含有大约30重量%的GalNAcα1,3Galβ1,4Glc和
Galβ1,6GalNAcα1,3Galβ1,4Glc；50重量%的Galβ1,6Galβ1,4Glc和
Galβ1,3Galβ1,4Glc；20重量%的NeuAcα2,3Galβ1,4Glc和
NeuAcα2,6Galβ1,4Glc的混合物。
b）含有2.14x1011cfu/g的含脱脂奶粉的NCC4007(鼠李糖乳杆菌)的冷冻干燥的培养物粉末。
c）含有43.6%花生四烯酸(ARA)的油和含有43.6%的二十二碳六烯酸(DHA)的油(Martek Biosciences公司).
2.1管饲法
从第7至21天，幼崽接受对照或处理的管饲法。处理管饲法的目标是每天提供0.08%体重(BW)的DDWP、0.03%BW的DHA和ARA以及1x109CFU的NCC4007。在安慰剂管饲法中，DDWP被麦芽糊精(Glucidex12,Roquette)替代，DHA和ARA分别被α-亚麻酸(C18:3n-3)和亚油酸(C18:2n-6)替代，冷冻干燥的NCC4007被脱脂奶粉替代。DDWP混合物中所存在的其他碳水化合物(见表1)也在安慰剂管饲法中提供。
2.2饮食
在第21天，幼崽单独圈养并且断奶而改吃对照(对照和IUGRc)或实验(IUGRtx)饮食直至第58天(=出生后天数)。断奶饮食(表2和3)是粉末形式并且在4℃贮存于真空密封的铝包装中直至使用。
表2.断奶饮食的组成(g/100g饮食)
表3脂肪混合物(g/100g脂肪)
14.53kcal/g,18.32%蛋白质24.46kcal/g,18.78%蛋白质3Smith商业公司 4Synopharm,德国,5Roquette,法国.6Howeg,瑞士.7Fluka,8Merck,德国. 9Nestlé,瑞士,10Socochim,瑞士.11Sofinol,瑞士.12Nutriswiss,瑞士.13Martek,USA.14Sabo,瑞士.
在实验中，比例如下：管饲法：DDWP:ARA:DHA1:1:1，饮食：DDWP:ARA:DHA11:1:1
使两种饮食(改进的AIN93G)的营养含量适应大鼠生长所需。对照饮食补充乳糖、葡萄糖、半乳糖从而匹配DDWP产品中的这些碳水化合物的水平。
平衡两种饮食的脂肪酸谱从而提供相似的n-6/n-3的比例和相似的饱和、单不饱和和多不饱和的脂肪酸的比例。
从脂肪酸谱来讲，两种饮食的脂肪酸组成几乎相同，除了C18:2n-6(亚油酸)对于对照是16.8%重量FA而对于处理是14.6，C18:3n-3(α-亚麻酸)对于对照是4.1%重量FA而对于处理是2.5，C20:4n-9(ARA)对于对照是0.0而对于处理是2.1%重量FA，和C22:6n-3(DHA)对于对照是0.0而对于处理是1.9%重量FA。对于对照和处理，总n-6是18.0%重量FA。对于对照总n-3是4.1%重量FA而对于处理是4.4%重量FA，这是非常相似的，并且对于对照n-6/n-3比例是4.4%重量FA而对于处理是4.1，这是相似的。
在此期间，动物接受含有(IUGR-处理)或不含有(对照和IUGR-对照)NCC4007(1x109CFU)的明胶小丸。每天早上补充小丸，并且其组成详见表4。
表4明胶小丸的组成
在第58天处死动物。
3、骨参数
在处死之前，测量鼻-肛门长度。
在处死之后，收集股骨。为了留下完整的骨膜，将骨仔细除去肉。在测量其长度后，在-80℃将股骨带水贮存于浸透磷酸盐缓冲液盐水的纱布中。在测量前使每一根股骨达到室温。
使用双能量X射线吸收测定法(DXA)测定完整股骨的骨矿物质含量(BMC)和骨矿物质密度(BMD)。将股骨置于模拟软组织的参照离体骨板(从PIXImus购买)上并且用DXA(PIXImus2;GE-Lunar,Madison,WI)进行扫描。总BMD和BMC的变异系数是0.5%。
图1是在第58天(=出生后天数)关于骨矿物质含量(BMC，以g)的描述实验结果的柱状图。
图2是在第58天(=出生后天数)关于骨矿物质密度(BMD，以g/cm2)的描述实验结果的柱状图。柱表示组的中位值±SE中位值。雄性和雌性描 绘在一起。“a”和“b”字母具有以下含义：不同的字母表示显著性差异(p<0.005)。
图3是在第58天(=出生后天数)关于鼻-肛门长度(或者naL，以cm)的描述实验结果的柱状图。
图4是在第58天(=出生后天数)关于股骨长度(或者fL，以mm)的描述实验结果的柱状图。柱表示组的中位值±SE中位值。雄性和雌性描绘在一起。“a”和“b”字母具有以下含义：不同的字母表示显著性差异(p<0.005)。
根据这些结果，其表明，与对照相比IUGRc的鼻-肛门长度(naL)减小，而在对照和IUGRtx之间没有差异(图3,IUGRc相对于对照,P<0.01和IUGRtx相对于IUGRc,P=0.059)。与对照和IUGRtx相比IUGRc的股骨长度(fL)减小；在对照和IUGRtx之间没有差异(图4,IUGRc相对于对照IUGRtx,P=0.027)。相似地，与对照和IUGRtx相比IUGRc的BMC减小(图1,P≤0.003)；在IUGRtx和对照之间没有差异。相对于对照和IUGRc，IUGRtx的BMD增加(图2,P≤0.003)。

Claims (37)

1.用于促进健康的骨生长和/或用于预防和/或治疗骨疾病的组合物，其包含至少一种长链多不饱和脂肪酸(LC-PUFA)、至少一种益生菌、和寡聚糖的混合物，所述的混合物含有至少一种N-乙酰化寡聚糖、至少一种唾液酸基化寡聚糖和至少一种中性寡聚糖。
2.根据权利要求1的组合物，其中所述骨疾病是骨软化症、佝偻病、骨质减少或骨质疏松症。
3.根据权利要求1的组合物，其中中性寡聚糖选自寡聚果糖(FOS)和/或半乳寡聚糖(GOS)。
4.根据权利要求3的组合物，其中中性寡聚糖是半乳寡聚糖(GOS)。
5.根据权利要求1-3中任意一项的组合物，其中所述的寡聚糖混合物含有至少一种选自GalNAcα1,3Galβ1,4Glc(＝3’GalNAc-lac＝N-乙酰-半乳糖胺基-乳糖)、Galβ1,6GalNAcα1,3Galβ1,4Glc(＝6’Gal-3GalNAc-lac＝半乳糖基-N-乙酰-半乳糖胺基-乳糖)、Galβ1,4GlcNAcβ1,3Galβ1,4Glc(乳-N-新四糖或LNnT)和Galβ1,3GlcNAcβ1,3Galβ1,4Glc(乳-N-四糖或LNT)的N-乙酰化寡聚糖，至少一种选自NeuAcα2,3Galβ1,4Glc(＝3’-唾液酸基乳糖)和NeuAcα2,6Galβ1,4Glc(＝6’-唾液酸基乳糖)的唾液酸基化寡聚糖，以及至少一种选自Galβ1,6Gal(＝β1,6-二半乳糖苷)；Galβ1,6Galβ1,4Glc(＝6’Gal-lac)；Galβ1,6Galβ1,6Glc；Galβ1,3Galβ1,3Glc；Galβ1,3Galβ1,4Glc(＝3’Gal-lac)；Galβ1,6Galβ1,6Galβ1,4Glc(＝6’,6-diGal-lac)；Galβ1,6Galβ1,3Galβ1,4Glc(＝6’,3-diGal-lac)；Galβ1,3Galβ1,6Galβ1,4Glc(＝3’,6-diGal-lac)；Galβ1,3Galβ1,3Galβ1,4Glc(＝3’,3-diGal-lac)；Galβ1,4Galβ1,4Glc(＝4’Gal-lac)和Galβ1,4Galβ1,4Galβ1,4Glc(＝4’,4-diGal-lac)和Fucα1,2Galβ1,4Glc(＝2’岩藻糖基乳糖)的中性寡聚糖。
6.根据权利要求1-3中任意一项的组合物，其中寡聚糖混合物包含：
●相对于寡聚糖混合物的总重量，0.25-20重量％的至少一种N-乙酰化寡聚糖，
●相对于寡聚糖混合物的总重量，0.5-30重量％的至少一种唾液酸基化寡聚糖，和
●相对于寡聚糖混合物的总重量，50-99.3重量％的至少一种中性寡聚糖。
7.根据权利要求6的组合物，其中所述至少一种N-乙酰化寡聚糖的量相对于寡聚糖混合物的总重量为0.3-10重量％。
8.根据权利要求6的组合物，其中所述至少一种N-乙酰化寡聚糖的量相对于寡聚糖混合物的总重量为0.3-5重量％。
9.根据权利要求6的组合物，其中所述至少一种N-乙酰化寡聚糖的量相对于寡聚糖混合物的总重量为0.5重量％。
10.根据权利要求6的组合物，其中所述至少一种唾液酸基化寡聚糖的量相对于寡聚糖混合物的总重量为0.75-15重量％。
11.根据权利要求6的组合物，其中所述至少一种唾液酸基化寡聚糖的量相对于寡聚糖混合物的总重量为0.75-10重量％。
12.根据权利要求6的组合物，其中所述至少一种唾液酸基化寡聚糖的量相对于寡聚糖混合物的总重量为1重量％。
13.根据权利要求6的组合物，其中所述至少一种中性寡聚糖的量相对于寡聚糖混合物的总重量为20-80重量％。
14.根据权利要求6的组合物，其中所述至少一种中性寡聚糖的量相对于寡聚糖混合物的总重量为10-50重量％。
15.根据权利要求6的组合物，其中所述至少一种中性寡聚糖的量相对于寡聚糖混合物的总重量为50重量％。
16.根据权利要求1-3中任意一项的组合物，其中寡聚糖混合物存在的量是按组合物的总重计0.5-70％。
17.根据权利要求16的组合物，其中寡聚糖混合物存在的量是按组合物的总重计1-20％。
18.根据权利要求16的组合物，其中寡聚糖混合物存在的量是按组合物的总重计2-5％。
19.根据权利要求1-3中任意一项的组合物，其中LC-PUFA选自花生四烯酸(ARA)和二十二碳六烯酸(DHA)。
20.根据权利要求1-3中任意一项的组合物，其中LC-PUFA是ARA和DHA的混合物。
21.根据权利要求1-3中任意一项的组合物，其中益生菌选自益生菌细菌菌株。
22.根据权利要求1-3中任意一项的组合物，其中益生菌是乳杆菌或双歧杆菌。
23.根据权利要求22的组合物，其中益生菌选自鼠李糖乳杆菌、罗伊乳杆菌和乳双歧杆菌。
24.根据权利要求1-3中任意一项的组合物，其中N-乙酰化寡聚糖选自乳-N-新四糖(或LNnT)和乳-N-四糖(或LNT)。
25.根据权利要求1-3中任意一项的组合物，其中唾液酸基化寡聚糖选自3’-唾液酸基乳糖和6’-唾液酸基乳糖。
26.根据权利要求25的组合物，其中唾液酸基化寡聚糖包含3'-唾液酸基乳糖和6'-唾液酸基乳糖二者。
27.根据权利要求26的组合物，其中3'-唾液酸基乳糖和6'-唾液酸基乳糖之间的比例为5:1和1:2之间的范围。
28.根据权利要求1-3中任意一项的组合物，其中中性寡聚糖是2’-岩藻糖基乳糖(或FL)。
29.根据权利要求1-3中任意一项的组合物，其中所述的组合物是早产儿配方食品、人乳强化剂、初始婴儿配方食品、后续配方食品、婴儿食物配方食品、婴儿谷物配方食品、成长乳、用于临床营养的医疗食品或补充剂。
30.根据权利要求29的组合物，其中所述的组合物是早产儿配方食品、人乳强化剂或补充剂。
31.根据权利要求1-3中任意一项的组合物，其用于早产的或具有低出生体重或经历子宫内生长发育障碍的、或者遭受由于营养不良或经历疾病而引起的生长发育障碍的、或者使用导致吸收障碍、厌食症和/或代谢性骨病的药物进行治疗的婴儿和儿童。
32.根据权利要求31的组合物，其中所述的疾病是厌食症、克罗恩病和/或乳糜泻和/或癌。
33.根据权利要求31的组合物，其中所述的导致吸收障碍、厌食症和/或代谢性骨病的药物是化疗药和/或皮质类固醇。
34.根据权利要求1-3中任意一项的组合物，其用于预防骨矿物质密度(BMD)的降低和/或用于提高骨矿物质含量(BMC)。
35.组合物作为合成营养剂在制备用于促进健康的骨生长和/或用于预防和/或治疗骨疾病的药物中的用途，所述的组合物包含至少一种长链多不饱和脂肪酸(LC-PUFA)、至少一种益生菌、和寡聚糖的混合物，所述的混合物含有至少一种N-乙酰化寡聚糖、至少一种唾液酸基化寡聚糖和至少一种中性寡聚糖。
36.根据权利要求35的用途，其中所述骨疾病是骨软化症、佝偻病、骨质减少或骨质疏松症。
37.组合物作为合成营养剂在制备用于预防骨矿物质密度(BMD)的降低和/或用于提高骨矿物质含量(BMC)的药物中的用途，所述的组合物包含至少一种长链多不饱和脂肪酸(LC-PUFA)、至少一种益生菌、和寡聚糖的混合物，所述的混合物含有至少一种N-乙酰化寡聚糖、至少一种唾液酸基化寡聚糖和至少一种中性寡聚糖。
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