CN103826613A - 疏水性制剂 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及物质在通常不会溶解所述物质的疏水性溶剂中的制剂，和获得这些制剂的方法。特别是，本发明涉及亲水性物种在诸如油等疏水性溶剂中的制剂。还描述了这些制剂作为疫苗的应用和在药物组合物中的应用。

Description

疏水性制剂
本发明涉及物质在通常不会溶解所述物质的疏水性溶剂中的制剂，和获得这些制剂的方法。特别是，本发明涉及亲水性物种在诸如油等疏水性溶剂中的制剂。
本发明特别适用于在正常情况下不溶于油或其他疏水性溶剂的亲水性大分子。
对于多种应用，例如在药物科学、食品技术或化妆品行业中的应用，操作蛋白质或类似的大分子时会带来问题，这是因为它们的亲水性和高度的极性限制了它们与脂相的相互作用程度或并入脂相的程度。许多天然系统采取脂质屏障(例如，皮肤、细胞膜)来防止亲水性分子与内部区室接触；将蛋白质分散在脂质载剂中的能力将开启将这些大分子引入生物系统的新途径，由此可以使含有蛋白质的脂质介质与屏障的疏水性成分整合，而不是被其排斥。
将蛋白质并入油中可带来益处的另一方面是酶在有机相中的应用。与化学方法相比，酶合成正变得越来越重要，这是因为其低得多的能量需求、更大的底物和产物特异性、高产率和使不可能以化学方式催化的许多反应得到了催化。最近关于酶可以在有机环境中保持活性的发现开启了很多新的可能性。因此，涉及亲脂性底物和产物的反应可以得到有效催化，并且酶稳定性通常比在水性环境中高得多，使其可用于极端得多的条件中，例如高温。一个非常重要的方面是，涉及到诸如脂肪酶和肽酶等水解酶的反应在低水环境中能够优先逆向进行，因此能够合成多种工业上重要的化合物。另一应用是涉及到复杂反应链的情况，其中多个催化单元需要保持相互接近。这可以是光引发的氧化还原反应的情况。另一可能性是利用酶作用于有机金属底物以引起矿化从而以受控方式在油相中产生纳米颗粒。制备预先形成的纳米颗粒在油相中的稳定分散体还可能有利于某些表面催化的反应的进行。
亲水性物质在油相中而非在水性介质中的分散还对在温度介导的变性、水解、光敏感性等方面提高其稳定性有益。可以选择在与水溶液相比更宽的温度范围内保持流体的油或者具有更高粘度的油，从而形成抗物理损伤的更大保护。在混合相体系中，蛋白质在油中的包封可限制其与水溶性化合物之间的对彼此有害的相互作用，例如氧化。
本发明的组合物或制剂的另一优点在于它们基本上无水，因此对水解稳定。它们还对冷冻-解冻稳定，并在高温下具有更高的稳定性，这很可能是因为蛋白质的解折叠和变性必须要求水的存在。这意味着可以预期所述组合物或制剂与亲水性物质的水性制剂相比具有长得多的保存期。另外，因为这些制剂是无水的，它们与制药实践中的胶囊相容性更好，在制药实践中，明胶和羟丙基甲基纤维素(HPMC)胶囊壳可吸收水分并因此软化。
此类物质在不相容相中的溶解可通将其包裹在两亲物外鞘中来实现，所述两亲物与所要溶解的物质以及连续相均相容。这种方法在专利申请WO96/014871中已有所描述，其中，将片层形成性两亲物(例如磷脂)分散在水相中，从而形成小的单片层囊泡(SUV脂质体)，然后将其与大分子混合，之后通过冻干除去水，随后加入疏水性(油)相。已经提出，在添加油的过程中，脂质体膜相互融合并形成完全包围大分子的连续扩展的单片层或多片层膜(两亲物外鞘)。
不过，该方法具有较大的局限性，这是因为实现完全溶解(利用可见光散射的缺失来确定完全溶解)所需的两亲物与溶质的比例(重量/重量)较高。在诸如油酸等油中，两亲物/溶质比通常≥7，而甘油三脂需要为溶质的15至20倍的两亲物来实现令人满意的溶解，在矿物油的情况下，高浓度的大分子的有效溶解通常不能实现。由于两亲物本身在甘油三脂和其它油相中的溶解性有限，这给可容纳于油相中的溶质的最大总量带来了较大限制——通常小于5mg/ml。此外，当将这些油相分散在水相中形成乳液时，其中增溶的分子在正常情况下容易释放到水相中，从而损失了30%至70%的大分子。
现在已经发现，可以以比WO96/014871公开的方式更有效的方式将大分子封装在两亲物外鞘中。这通过以下方式来实现：首先将两亲物溶解在有机相(例如环己烷)中，然后将溶解在水相中的大分子的溶液分散在上述环己烷中以形成油包水乳液。通过这种方式，大分子被单层的两亲物包围，而非WO96/014871所述的多层包围。不过，令人惊讶地发现，为了实施这一方法，使用单一两亲物(例如大豆磷脂酰胆碱)并不够，并且该方法仅在采用特定比例的两亲物的特定组合时才有效。因此，本领域技术人员单纯基于WO96/014871的教导不能获得本发明。
因此，利用本发明公开的两亲物的组合(其可以具有片层形成性或不具有片层形成性)，可以以矿物油、甘油三酯或角鲨烯构建油制品，这些油制品容易溶解高浓度的大分子，并且即使在将油相分散到水性介质中后还能够保留这些大分子。即使其不是本发明的必要条件，但将大分子并入最终油相中的机制可能例如是包含到反胶团(reverse micelle)中的结果。
在第一方面，本发明提供一种单相疏水性制剂，所述制剂包含油相中的亲水性物种和两亲性组分，所述两亲性组分至少包含多库酯钠、磷脂和非离子型两亲物，其中，所述亲水性物种部分被所述两亲性组分包围，并且所述两亲性组分的亲水性头部基团朝向所述亲水性物种，并且其中，在上述两亲性组分和亲水性物种之间没有化学相互作用，例如共价相互作用；所述制剂的特征在于，所述非离子型两亲物具有：包含10至20个碳的亲脂性链，和包含2至10个亚乙基氧基或1至3个羟基的头部基团。所述亲水性物种的分子精细地均匀且稳定地分散在整个疏水性介质中。
此处所用的“非离子型两亲物”的定义是具有本文定义的亲脂性链和头部基团的两亲物。所述非离子型两亲物的亲脂性链包含10至20个碳，优选12至18个碳，更优选14至16个碳。该亲脂性链可包含10、11、12、13、14、15、16、17、18、19或20个碳。所述头部基团包含2至10个亚乙基氧基或1至3个羟基。优选所述头部基团包含4至8个亚乙基氧基。该头部基团可包含2、3、4、5、6、7、8、9或10个亚乙基氧基。作为另一选择，头部基团可包含1、2或3个羟基。非离子型两亲物的实例包括聚氧乙烯2十六烷基醚(Brij52)、聚氧乙烯2油烯基醚、聚氧乙烯10十六烷基醚、聚氧乙烯4十六烷基醚、聚氧乙烯4肉豆蔻基醚、聚氧乙烯3硬脂基醚、聚氧乙烯4月桂基醚、乙醇酸乙氧基化物月桂基醚和月桂基山梨聚糖或其混合物。
合适的油相包括：烃，例如非极性油，如植物油，包括花生油、红花油、大豆油、棉籽油、玉米油、橄榄油、杏仁油、芝麻油、椰子油、蓖麻油、大风子油、桃仁油；肉豆蔻酸异丙酯矿物油，包括轻质石蜡、角鲨烷和角鲨烯；具有不饱和脂肪酸的长链脂肪酸，例如优选的油酸和亚油酸；醇，特别是中链醇(例如辛醇)以及支化长链醇(例如叶绿醇)，类萜(例如橙花醇和香叶醇)，其他醇(例如叔丁醇、松油醇)；甘油单酯，例如甘油单油酸酯(GMO)；其他酯，例如乙酸乙酯、乙酸戊酯和乙酸冰片酯；中链或长链甘油单酯、甘油二酯或甘油三酯及其混合物；以上任何物质的卤化类似物，包括卤化油，例如长链碳氟化合物和碘化甘油三酯(例如lipidiol)。适合的甘油三酯包括由分馏的植物脂肪酸或其混合物衍生出的那些甘油三酯。例如，可以使用例如辛酸、癸酸和亚油酸甘油三酯的混合物，例如Miglyol818TM，或丙二醇、二辛酸酯和二癸酸酯的混合物，例如Miglyol840TM。
可以使用具有磷脂酰胆碱头部基团的磷脂，这种磷脂的实例包括磷脂酰胆碱(PC)本身、溶血磷脂酰胆碱(溶血PC)、大豆PC、鞘磷脂、任何这些物质的衍生物，例如十六烷基磷酸胆碱或含有磷酰胆碱的两亲性聚合物以及卤化两亲物(例如氟化磷脂)。在本申请中，术语磷脂酰胆碱(PC)和卵磷脂可互换使用。适合的天然卵磷脂可源自任何常规来源，例如蛋类，特别是大豆。
为了使两亲性组分以其头部基团指向亲水性物种的方式定向，需要在引入油相之前但在除去水之后使亲水性物种被两亲物包围的制备方法。这可以通过创造两相油包水乳液来实现，其中，非水可混溶的‘油相’是容易通过例如蒸发或冻干而除去的疏水相。作为除去油相的方法，冻干是有利的，这是因为可同时除去乳液微滴中的水相。
极其优选的是，本发明的制剂是光学透明的，这可以通过在可见光波长处测量浊度来监测，而在一些情况下，通过检查一段时间内的沉淀情况来监测。通常可以测量620mm的光密度。0.2以下的值、优选0.15以下的值被认为是透明的。
在本发明的所有结构中，两亲物分子的亲水性头部向内朝向结构的中心，而疏水性尾部则向外朝向分散有疏水性物种的溶剂。
因此，在本发明的第二方面，提供了一种制造含有亲水性物种的疏水性制剂的方法，所述方法包括以下步骤：
(i)将溶于疏水性溶剂中的多库酯钠、磷脂和非离子型两亲物的溶液与溶于水相的亲水性物种的溶液混合以形成乳液；
(ii)除去所述水相和疏水性溶剂；
(iii)向在(ii)中获得的干燥的残余物中添加油相。
本文所用的术语“疏水性溶剂”是指容易通过例如蒸发或冻干而除去的疏水相。可以使用任何具有适合的熔点的挥发性疏水性溶剂。该溶剂必须是水不混溶的，并且应当容易冻干，因此其优选具有-10℃至+15℃的冰点。适合的溶剂的实例包括环己烷、环庚烷和环辛烷，多种比例的这些化合物的混合物，和与所添加的小比例的叔丁醇的混合物，这些溶剂足以将两亲物的溶解度提高到所需水平。疏水性溶剂的选择取决于所要溶解的物种的类型和两亲物。本领域技术人员利用见于以下实施例中的指导可容易地确定这种选择。
在该程序中单独使用磷脂不会产生在各种不同的油中的透明分散液。如果使用非离子型两亲物和多库酯钠的组合，在系统中完全不存在游离水的情况下，其结果在细颗粒的悬浮液或非常均匀但极其浑浊的分散液之间变化，这取决于两亲性物质的比例。不过，包含磷脂作为较少组分与多库酯钠和非离子型两亲物组合却得到了透明的分散液。在油相是矿物油并且非离子型两亲物是POE2十六烷基醚(Brij52)的情况下，在组分重量比多库酯钠:磷脂:非离子型两亲物为2:1:2至3:2:3时获得了最佳结果。这些比例仅是指示性比例，特别应当指出，确切的比例取决于所采用的油和两亲物的性质。如本说明书后面给出的实施例中所描述的那样，容易进行实验来确定任何给定情况下不同组分的最佳比例。
适合的水相包括水、氧化氘和二甲基亚砜(DMSO)。可以将少量的额外的亲水性试剂与亲水相混合，例如乙二醇、甘油、丙二醇、碳酸丙烯酯、PEG或者单糖或寡糖。
两亲物以溶剂中的总溶质至多为100mg/ml的水平溶解于疏水性溶剂中。大分子，优选免疫原或免疫调节剂，通常以10mg/ml至20mg/ml的浓度溶于水或其他适合的水相(例如DMSO)中。然后将水相加入到疏水性溶剂中，优选以1:4(体积/体积)的比例，从而在涡旋混合后得到均匀的分散液。
乳液颗粒的平均粒径取决于疏水相和水相的确切性质。不过，其可以为2μm左右。
水相在疏水性溶剂中的分散可通过混合来实现，例如通过短时间(如约10至60秒、通常约15秒)的剧烈涡旋混合来实现，或通过数小时的温和混合(例如使用定轨摇床)来实现。
第二方面的方法的产物是新颖的，这是因为其使得可以制备包含溶于诸如矿物油、角鲨烷、角鲨烯和甘油三酯等油中的通常不溶于疏水性溶剂的亲水性物种的组合物，其中，在将所述组合物分散在水相中后，所述亲水性物种会以较高的程度保留在所述疏水性溶剂中。也可以采用在室温下通常为固体的其他油(例如三硬脂精、三月桂精、石蜡)，只要在高于所涉及的油的熔点的温度下进行将油添加至亲水相中的步骤即可。
上述组合物可用于制备两相组合物。因此，在第三方面，本发明提供一种包含亲水相和疏水相的两相组合物，其中，所述疏水相包含上述组合物或制剂。可通过使上述组合物或疏水性制剂与诸如水溶液等亲水相接触来形成所述两相组合物。适合的亲水相包含水、氧化氘和二甲基亚砜(DMSO)。可以将少量的额外的亲水性试剂与亲水相混合，例如乙二醇、甘油、丙二醇、碳酸丙烯酯、PEG或者单糖或寡糖。
在第三方面的优选实施方式中，两相组合物是水包油乳液。含有本发明的疏水性制剂或组合物的乳液也可以用于制备微胶囊。如果乳液用含有明胶的水相形成，则可以用已知方法通过凝聚使明胶从溶液中析出，并且会在含有亲水物的疏水相的微滴外围形成膜。在除去亲水相后，微胶囊将保留。该技术是本领域中已知的，但在与本发明的制剂结合时特别有用。因此，本发明的第四方面提供了制备水包油乳液的方法，所述方法包括以下步骤：使本发明的单相疏水性制剂与亲水相接触以形成水包油乳液。
在优选实施方式中，亲水相包含明胶或白蛋白。
该水包油双乳液将亲水性溶质保留在了疏水性油相中，且随不同时间向外部水性区域中渗漏的程度最小。该体系中使用的油优选是矿物油、角鲨烷、角鲨烯或甘油三酯。也可以采用在室温下通常为固体的其他油(例如三硬脂精、三月桂精、石蜡)，只要在高于所涉及的油的熔点的温度下进行将油添加至亲水相中的步骤即可。
如果外部亲水相是白蛋白(例如浓度为50mg/ml的白蛋白)或至多20%w/w水平的明胶，则会进一步增强保留作用。因此亲水相优选包含明胶或白蛋白。保留程度越高，则所述制品越适合作为疫苗递送载体。
本发明的产品有极多的用途，并具有多种应用。在第五方面，本发明提供一种制品，所述制品包含本发明的制剂或组合物，以及可选的一种或多种药物可接受赋形剂、稀释剂或载剂。所述制品可用于医药应用。
在本发明的一个优选实施方式中，所述组合物或制剂中的亲水性物种是免疫原。所述制品优选为疫苗。在另一方面，本发明提供了本发明的制品作为疫苗的应用。
在本发明中，术语“亲水性物种”涉及通常可溶于水性溶剂但不溶于疏水性溶剂的任何物种。用于本发明中的亲水性物种的范围很广，但亲水性大分子代表了可使用的物种的实例。
多种大分子适合用于本发明。通常，这种大分子化合物具有亲水性或至少具有亲水性区域，这是因为将疏水性大分子溶于油性溶液一般很少有困难。适合的大分子的实例包括蛋白质和糖蛋白质、寡核酸和多核酸(例如DNA和RNA)、多糖以及任何这些物质的超分子组装体(在一些情况下包括整个细胞或细胞器)。可用本发明的方法成功溶解的具体蛋白的实例包括胰岛素、降钙素、血红蛋白、细胞色素C、辣根过氧化物酶、抑肽酶、蘑菇酪氨酸酶、红细胞生成素、生长素、生长激素、生长激素释放因子、加兰肽、尿激酶、因子IX、组织型纤溶酶原激活剂、超氧化物歧化酶、过氧化氢酶、过氧化物酶、铁蛋白、干扰素、因子VIII及其片段(所有上述蛋白均可来自任何适合的来源)。可以使用的其他大分子为FITC标记的葡聚糖和Torulla酵母的RNA提取物。特别地，大分子可以为胶原，例如I型胶原或II型胶原。含有II型胶原的制品是用于口服下调类风湿性关节炎中的免疫反应的很有前景的候选物。大分子也可以是免疫原，尤其用于疫苗组合物。通常在1ml的油中引入最低浓度为2.5mg的大分子，因此初始亲水性溶剂中的大分子浓度为至少10mg/ml。
本文所用的术语“免疫原”涉及能够引发免疫结果的物种。该结果可以是典型的免疫应答，例如产生抗体或触发特定T细胞群的分化或扩增，并且可以是系统性的或局部的，例如限于黏膜应答。作为另一选择，免疫结果还可以是例如免疫耐受，其中使初始免疫系统对特定抗原的激发无应答。作为再一选择，所述结果可以是脱敏作用，其中预先存在的发生针对特定抗原的自身免疫或过敏反应(IgE)的趋势降低。
免疫原可选自但不限于白喉类毒素、破伤风类毒素、肉毒杆菌类毒素、蛇毒抗原、病毒抗原(例如甲、乙、丙、丁或戊型肝炎病毒的抗原，百日咳亚基，甲型流感和/或乙型流感病毒(全灭活病毒或蛋白亚基)，H1N1猪流感病毒，H5N1禽流感病毒，脊髓灰质炎病毒，轮状病毒，腮腺炎病毒，麻疹病毒，水痘病毒，脑膜炎病毒，风疹病毒，呼吸道合胞病毒，HIV，EV71，登革热病毒抗原，黄热病病毒抗原，人乳头状瘤病毒抗原，疱疹病毒HSV1或HSV2抗原，埃博拉病毒，猪繁殖与呼吸综合征病毒，猪环状病毒2型，西尼罗河病毒，日本脑炎病毒，手足口病抗原)、整个细菌或其提取物(例如BCG，其他分枝杆菌抗原，肠道疾病病原体及其抗原，包括例如霍乱抗原、沙门菌属物种、埃希氏菌属物种、幽门螺杆菌抗原、铜绿假单胞菌、衣原体物种、奈瑟球菌属物种、耶尔森菌属物种)、真菌或真菌抗原、甲型或乙型流感嗜血杆菌(带有或不带有载体蛋白)、原生动物抗原(例如疟疾、利什曼原虫、弓形虫、锥虫)、吸虫抗原(例如血吸虫)、绦虫抗原(例如，来自囊尾蚴、棘球蚴)、线虫抗原(例如弓蛔虫、钩虫和丝虫)、螺旋属抗原(例如疏螺旋体属物种)、癌细胞特异的表面膜表位和靶向细胞受体的抗炎调节因子、类固醇的聚合物缀合物。用于下调免疫应答的免疫原包括HLA抗原、花粉、尘螨抗原、蜂螯或食物过敏原，例如麸质或花生、谷氨酸脱氢酶、用于治疗糖尿病的胰岛素或含有胰岛素亚组分的缀合物。另外，免疫原可以是胶原，例如I型胶原或II型胶原。含有II型胶原的制品是用于口服下调类风湿性关节炎中的免疫反应的很有前景的候选物。免疫原可以是肽、蛋白质、脂质、糖、核酸、类固醇和/或一种或多种这些试剂的组合形成的缀合物。当抗原是肽、多糖或其他抗原时，还可以使其与至少一条中链或长链烃尾缀合。
本发明的一个优点在于不同的抗原(例如蛋白和多糖)可以共存于同一载体中，从而通过一种组分作为另一种组分的载剂来引发增强的免疫应答，而无需任何共价连接。
在需要上调免疫应答的情况下，免疫原可以与一种或多种其他分子(免疫刺激剂或佐剂)结合，一起作为免疫原共同嵌入同一油相中。所述佐剂可包括：霍乱毒素B片段及其类似物和衍生物，大肠杆菌不耐热毒素及其类似物和衍生物，BCG，含有CpG的寡核苷酸序列，破伤风类毒素，白喉类毒素，细菌脂质A(完好的或去毒)，单磷酰基脂质A。
在另一实施方式中，免疫原与一种或多种细胞因子共溶解以增强应答。适合的细胞因子的实例包括IL-4、IL-10、IL-12和γ干扰素。也可以加入其他免疫刺激剂，例如单磷酰基脂质A、分枝杆菌提取物、胞壁酰二肽及类似物、促吞噬肽和霍乱亚单位B和大肠杆菌的不耐热毒素。
还可以方便地将小分子(例如维生素)与大分子(特别是多糖，例如环糊精)一起共溶解。小分子(如维生素B12)还可以与大分子化学偶联，从而可以包含在组合物中。
与例如WO95/13795等现有技术的方法相比，本发明的方法可以以低得多的两亲物:蛋白质比例进行包封。这可以使更多的大分子并入诸如甘油三酯和矿物油等油中。另外，在分散到水性介质中后，大分子在油中的保留更高。
除了大分子之外，本发明的方法可用于溶解更小的有机分子。有机小分子的实例包括葡萄糖、羧基荧光素和多种药剂，例如抗癌剂，但所述方法当然可同样适用于其他有机小分子，例如维生素或药学活性剂或生物学活性剂。另外，利用该方法还可以溶解诸如氯化钙和磷酸钠等化合物。实际上，本发明对于药学或生物学活性剂特别有利，这是因为使用非水性溶液能够使分子进入体内的路径多样化，从而例如增加生物利用度。
可包含在本发明的疏水性组合物中的另一类型的物种是无机材料，例如无机小分子或胶体物质，例如胶体金属。本发明的方法能够使胶体金属(例如胶体金、钯、铂或铑)的一些性质即使在在正常情况下会使颗粒聚集的疏水性溶剂中也能够得以保留。这对于在有机溶剂中进行的反应的催化可以特别有用。
其他大颗粒材料也可以利用此方法来封装，例如病毒和细菌(无论是活的、弱化的还是灭活的)。
在其他方面，本发明提供：
一种化妆品制品，所述制品包含本发明的制剂或组合物以及可选的一种或多种赋形剂、稀释剂或载剂。
一种治疗受试对象的方法，所述方法包括施用本发明的制剂或组合物。
包含胶原或其片段的本发明的制剂或组合物，用于治疗类风湿性关节炎。所述胶原优选为II型胶原。
可以使用本发明的组合物的一种方式是将在正常情况下不溶于亲脂性溶剂的物质口服递送给包括人在内的哺乳动物。这可以用于递送饮食补充剂，例如维生素，或用于递送生物活性物质，特别是蛋白质或糖蛋白，包括胰岛素、生长激素和免疫原。
在另一种应用中，可以通过例如上述方法将诸如维生素等营养物包封到胶囊或微胶囊中，随后，其不仅可以用作人类食物补充剂，还可以用于农业和水产业，后者的一个实例是用于养殖幼虾的食料生产。
另外，所述组合物可用于制备胃肠外施用的药物或其他制品以及供局部或眼部使用的制品。对于此应用，通常优选使用上述的油溶液和水相的乳液。
许多治疗或预防处理经设计用来实现持续释放或延迟释放，或者涉及双组分体系，所述双组分体系包括例如即释组分以及用于延迟释放或持续释放的组分。由于其高稳定性，本发明的制剂对于设计用来进行持续释放或延迟释放的大分子制品特别有用。
本发明组合物的更长的保存期在药物领域中特别有利。
这种油包亲水物制剂可在制药或类似的行业中用于掩盖气味。这在药物工业中是一个特别的问题，许多药物因为具有令人不愉快的气味而不受患者、特别是儿童的欢迎。
另一应用是在化妆品业中，其中，将亲水性化合物的疏水性制剂并入化妆品制品中同样非常容易。可以以这种方式使用的大分子包括那些具有一定的润湿作用或酶促作用的大分子。本发明还可以用于将诸如胶原等蛋白质并入皮肤病用乳膏和洗剂中。
本发明的制品可以与其他试剂联合存在，从而使其可以施用至人和动物以实现治疗目的或其他目的。所得的组合物可包括糊剂、乳膏、凝胶剂、半固体或两相固体分散体。所述制品可局部施用、口服施用、眼部施用、鼻部施用或作为栓剂施用，或可作为注射剂施用(例如肌肉内注射、皮下注射或皮内注射)。在进行口服施用的情况下，所述组合物可以为液体、锭剂、凝胶形式或与干燥粉末混合，任何这些形式都以自由形式摄取或以封装在例如明胶、淀粉或HPMC硬胶囊壳中或软胶囊(例如软明胶胶囊)中的形式摄取。可选的是，这些胶囊可以具有肠溶包衣以使它们经过胃而不与胃内容物相互作用，而是随后在小肠或大肠中溶解。适合的包衣是本领域已知的。作为另一选择，对于适合的施用途径，例如鼻腔施用、肺部施用、颊部施用和舌下施用，组合物可以为气溶胶形式。气溶胶可以由含有本申请的疏水性制剂的油微滴或水包油微滴形成。
本发明的组合物可适合于通过任何适当的途径来施用，例如通过口服(包括颊部和舌下)途径、直肠途径、鼻腔途径、局部(包括颊部、舌下或透皮)途径、阴道途径或胃肠外(包括皮下、肌肉内、静脉内或皮内)途径。所述制品可通过制药领域中已知的任何方法来制备，例如通过将活性成分与载剂或赋形剂相结合。
适合于口服施用的药物制品可以作为离散的单元存在，例如胶囊或片剂；粉末或颗粒；水性或非水性液体中的溶液或悬浮液；可食用泡沫或搅拌物(whip)；乳液。
适合于局部施用的药物制品可以配制成软膏、乳膏、悬浮液、洗剂、散剂、溶液、糊剂、凝胶剂、喷雾剂、气溶胶或油。
对于向眼部或其它外部组织(例如口和皮肤)的施用，所述制品优选作为局部软膏或乳膏施用。当配制成软膏时，可以将活性成分与石蜡基质或水可混溶的软膏基质一起使用。作为另一选择，可以用水包油乳膏基质或油包水基质来将活性成分配制成乳膏。
适合于对眼部局部施用的药物制品包括滴眼液，其中，活性成分溶于或悬浮于适合的载剂(特别是水性溶剂)中。
适合于在口中局部施用的药物制品包括锭剂、软锭剂和口腔洗剂。
适合于对直肠施用的药物制品可以作为栓剂或灌肠剂存在。
载剂为固体的适合于鼻腔施用的药物制品包括粒径为例如20μm至500μm的粗粉末，其以嗅入的方式施用，即，从举到鼻下近处的粉末容器中通过鼻道快速吸入。载剂为液体的作为喷鼻剂或滴鼻剂施用的适合制品包括包含活性成分的微乳化液的水溶液或油溶液。
适合于吸入施用的药物制品包括细粉灰或烟雾，其可用各种类型的计量给药式加压气溶胶、喷雾器或吹入器来产生。
适合于阴道施用的药物制品可以作为阴道环、棉塞、乳膏、凝胶、糊剂、泡沫或喷雾制品存在。
适合于胃肠外施用的药物制品包括：水性和非水性的无菌注射液，其可含有抗氧化剂、缓冲剂、抑菌剂和使该制品与计划的接受者的血液等渗的溶质；水性和非水性的无菌悬浮液，其可包含悬浮剂和增稠剂。这些制品可以存在于单位剂量或多剂量容器中，例如密闭的安培瓶和小瓶，并且可以储存在冷冻干燥(冻干)条件下，只需在即将使用时添加无菌液体载剂(例如注射用水)。即用注射溶液和悬浮液可以用无菌粉末、颗粒和片剂来制备。
应当理解的是，除了以上特别提及的成分之外，所述制品还可以包含在所涉及的制品类型的相关领域中常规使用的其他试剂，例如，适合于口服施用的制品可包含调味剂。
最后，本发明在化学和生物合成领域(例如无水酶促合成)中具有多种应用。
下面将参考下述非限制性实施例和以下附图来进一步描述本发明：
图1显示了在用包含胶原的本发明的制剂治疗后小鼠关节炎的发病率。
图2显示了施用包含胶原的本发明的制剂对关节炎小鼠软骨侵蚀的效果。
实施例1
利用多库酯钠、Brij52和大豆PC的组合在矿物油中形成含有抑肽酶的反胶团
1.在8ml带螺旋盖的玻璃小瓶中称重300mg多库酯钠，并加入2.7ml环己烷。将盖子拧紧后，加温振荡小瓶直至内容物溶解，从而得到浓度约100mg/ml的溶液。
2.在8ml带螺旋盖的玻璃小瓶中称重300mg Brij52(聚氧乙烯2十六烷基醚)，并加入2.7ml环己烷。将盖子拧紧后，加温振荡小瓶直至内容物溶解，从而得到浓度约100mg/ml的溶液。
3.在8ml带螺旋盖的玻璃小瓶中称重300mg大豆磷脂酰胆碱，并加入2.7ml环己烷。将盖子拧紧后，加温振荡小瓶直至内容物溶解，从而得到浓度约100mg/ml的溶液。
4.将10个2ml带螺旋盖的玻璃小瓶标记为1至10，在各管中分配下表所示体积的来自步骤1、2和3的溶液。
管编号 多库酯钠溶液 Brij52溶液 大豆磷脂酰胆碱
μl μl μl
1 0 400 -
2 100 300 -
3 200 200 -
4 300 100 -
5 400 0 -
6 0 400 100
7 100 300 100
8 200 200 100
9 300 100 100
10 400 0 100
5在各样品中加入100μl的20mg/ml的抑肽酶溶液，短暂涡旋混合，然后在甘油浴中快速冷冻，随后暴露于1mbar以下的真空中过夜，以除去环己烷和水。
6第二天向各小瓶中加入450μl矿物油，随后将小瓶封盖并置于辊式混合器上，直至获得单一均相。
7将200μl的各分散液转移至微孔板中的单独的孔中，通过在微孔板读取仪上测量620nm处的光密度来评价散射。
从下表可见，当采用两种以上两亲物的组合来形成疏水相时，观察到了最有效的溶解(根据OD减少所指示的散射缺失来判断)。
不含PC的样品 吸光度读数 含PC的样品 吸光度读数
1 0.514 6 1.041
2 0.34 7 1.22
3 0.2 8 0.089
4 0.231 9 0.076
5 0.928 10 0.49
实施例2
在组合使用多库酯钠、Brij52和大豆PC时，抑肽酶从矿物油中的反胶团中的渗漏情况
1.在2ml小瓶中加入400μl的PBS和20μl实施例1的抑肽酶油制品。将样品剧烈混合至分散，然后在离心机中以3000rpm离心10分钟。
2.将各样品的50μl水相转移至微孔板中的单独的孔中，向其中加入150μlBradford蛋白试剂。通过在微孔板读取仪上测量570nm处的光密度来确定蛋白浓度，并与标准曲线比较。通过与仅含有抑肽酶的对照比较来推断渗漏情况。
由下表可知，当采用两种以上两亲物的组合来形成疏水相时，渗漏最少。
不含PC的样品 %渗漏 含PC的样品 %渗漏
1 12.42 6 1.86
2 0.38 7 0.90
3 0.27 8 0.39
4 0.27 9 0.25
5 0.81 10 0.42
实施例3
利用多库酯钠、Brij52和大豆PC的组合在矿物油中形成含有大分子聚合物染料聚R-478的反胶团
1在8ml带螺旋盖的玻璃小瓶中称重300mg多库酯钠，并加入2.7ml环己烷。将盖子拧紧后，加温振荡小瓶直至内容物溶解，从而得到浓度约100mg/ml的溶液。
2在8ml带螺旋盖的玻璃小瓶中称重300mg Brij52(聚氧乙烯2十六烷基醚)，并加入2.7ml环己烷。将盖子拧紧后，加温振荡小瓶直至内容物溶解，从而得到浓度约100mg/ml的溶液。
3在8ml带螺旋盖的玻璃小瓶中称重300mg大豆磷脂酰胆碱，并加入2.7ml环己烷。将盖子拧紧后，加温振荡小瓶直至内容物溶解，从而得到浓度约100mg/ml的溶液。
4将10个2ml带螺旋盖的玻璃小瓶标记为1至10，在各管中分配下表所示体积的来自步骤1、2和3的溶液。
管编号 多库酯钠溶液 Brij52溶液 大豆磷脂酰胆碱
μl μl μl
1 0 400 -
2 100 300 -
3 200 200 -
4 300 100 -
5 400 0 -
6 0 400 100
7 100 300 100
8 200 200 100
9 300 100 100
10 400 0 100
5在各样品中加入100μl的20mg/ml的聚R-478溶液，短暂涡旋混合，然后在甘油浴中快速冷冻，随后暴露于1mbar以下的真空中过夜，以除去环己烷和水。
6第二天向各小瓶中加入450μl矿物油，随后将小瓶封盖并置于辊式混合器上，直至获得单一均相。
7将200μl的各分散液转移至微孔板中的单独的孔中，通过在微孔板读取仪上测量620nm和492nm之间的光密度差来评价散射。
从下表可见，当采用两种以上两亲物的组合来形成疏水相时，观察到了最有效的溶解(根据OD减少所指示的散射缺失来判断)。
不含PC的样品 吸光度读数 含PC的样品 吸光度读数
1 0.87 6 0.129
2 0.27 7 0.043
3 0.208 8 0.078
4 0.485 9 0.147
5 0.561 10 0.416
实施例4
在组合使用多库酯钠、Brij52和大豆PC时，大分子染料聚R-478从矿物油中的反胶团中的渗漏情况
1在2ml小瓶中加入400μl的PBS和20μl实施例1的聚R-478油制品。将样品剧烈混合至分散，然后在离心机中以3000rpm离心10分钟。
2将各样品的200μl的水相转移至微孔板中的单独的孔中，通过在微孔板读取仪上测量492nm处的光密度来确定染料浓度，并与标准曲线比较。通过与仅含有聚R-478的对照比较来推断渗漏情况。
由下表可知，当采用两种以上两亲物的组合来形成疏水相时，渗漏最少。
不含PC的样品 %渗漏 含PC的样品 %渗漏
1 100 6 15
2 32 7 4
3 25 8 8
4 59 9 17
5 68 10 50
实施例5
与仅使用大豆磷脂酰胆碱的情况相比，在组合使用多库酯钠、Brij52和大豆磷脂酰胆碱时溶菌酶从矿物油中的反胶团中的渗漏情况
如下构造利用大豆磷脂酰胆碱作为两亲物的疏水性制剂，然后添加油相：
1.将大豆磷脂酰胆碱(SPC)加入20ml小瓶内的蒸馏水中(1g SPC+9ml水)，然后将混合物涡旋混合直至完全分散。
2.随后将分散液挤压通过0.2um Anatop滤器两次。
3.在一个8ml小瓶中称量20mg溶菌酶并将其溶于4ml来自以上步骤2的脂质体分散液中。
4.将6份400μl等分部分的来自步骤3的溶菌酶溶液转移至新的2ml带螺旋盖的玻璃小瓶中，然后在甘油中快速冷冻，并在–30℃下保持1小时。
5.然后将小瓶冻干过夜。
如下构造利用多库酯钠、Brij52和大豆磷脂酰胆碱作为两亲物的疏水性制剂，然后添加油相：
1.将大豆磷脂酰胆碱(SPC)以100mg/ml的浓度溶于8ml小瓶中的环己烷中(600mgSPC+5.4ml环己烷)。
2.将多库酯钠以100mg/ml的浓度溶于8ml小瓶中的环己烷中(600mg多库酯钠+5.4ml环己烷)。
3.将Brij52以100mg/ml的浓度溶于8ml小瓶中的环己烷中(600mg Brij52+5.4ml环己烷)。
4.将溶菌酶以20mg/ml溶于8ml小瓶中的蒸馏水中。
5.在20ml小瓶中分别加入2ml、3ml和3ml的以上各溶液并混匀，从而以比例(2:3:3)混合SPC、多库酯钠和Brij52溶液。
6.在6个2ml带螺旋盖的玻璃小瓶中加入400μl的SPC:Brij52:多库酯钠/环己烷溶液。
7.向在上一步中得到的各小瓶中加入100μl溶菌酶溶液并同时进行涡旋混合(约10秒)。立即在–20℃的甘油浴中冷冻分散液，随后在–30℃下温育约1小时。
8.随后将样品冻干过夜。
按如下方式从以上获得的干燥残余物制备油相：
9.当样品干燥时，向各小瓶中加入360μl的以下所列的不同的油。随后将小瓶封盖并置于辊式混合器上，直至获得单一均匀的油相。
样品 所加的油
1 矿物油
2 角鲨烯
3 甘油单油酸酯
4 MiglyolTM840
5 MiglyolTM818
6 中链甘油单酯
以下述方式对分散在水相中后蛋白从疏水相中的渗漏进行定量：
1.将荧胺以0.2mg/ml溶于丙酮(2mg荧胺+10ml丙酮)。
2.在12个8ml带标记的小瓶中加入1.5ml的PBS缓冲液和75μl的各疏水相。随后剧烈震荡样品，并以1000g离心沉降50分钟。
3.然后将1ml来自各样品的水相转移至新的小瓶中，与50μl的荧胺/丙酮溶液一起涡旋混合10秒。
4.将200μl的每份样品转移到白色微孔板上，在Molecular Devices Spectramax荧光平板读取仪上以Ex=390nm;Em=465mn;截取值=455nm测量荧光。
5.利用多种浓度的游离溶菌酶制备标准曲线，并计算出占所引入的原始量的百分比作为蛋白从各油相中的渗漏值。
Figure BDA0000452944660000171
从该表中可见，对于多种不同的油，与仅使用磷脂酰胆碱时不同，当采用两亲物的组合时蛋白质从油中的渗漏大大减少。
实施例6
利用多种不同的两亲物与多库酯钠和大豆磷脂酰胆碱的组合在矿物油中形成反胶团
1在8ml带螺旋盖的玻璃小瓶中称重300mg多库酯钠，并加入2.7ml环己烷。将盖子拧紧后，加温振荡小瓶直至内容物溶解，从而得到浓度约100mg/ml的溶液。
3在8ml带螺旋盖的玻璃小瓶中称重300mg的下表所示的每种两亲物，并加入2.7ml环己烷。将盖子拧紧后，加温振荡小瓶直至内容物溶解，从而得到浓度约100mg/ml的溶液。
4在8ml带螺旋盖的玻璃小瓶中称重300mg大豆磷脂酰胆碱，并加入2.7ml环己烷。将盖子拧紧后，加温振荡小瓶直至内容物溶解，从而得到浓度约100mg/ml的溶液。
5将10个2ml带螺旋盖的玻璃小瓶标记为1至10，在各管中分配下表所示体积的来自步骤1、2和3的溶液。
管编号 多库酯钠溶液 两亲物溶液 大豆磷脂酰胆碱
μl μl μl
1 0 400 -
2 100 300 -
3 200 200 -
4 300 100 -
5 400 0 -
6 0 400 100
7 100 300 100
8 200 200 100
9 300 100 100
10 400 0 100
5在各样品中加入100μl的20mg/ml的溶菌酶溶液，短暂涡旋混合，然后在甘油浴中快速冷冻，随后暴露于1mbar以下的真空中过夜，以除去环己烷和水。
6第二天向各小瓶中加入450μl矿物油，随后将小瓶封盖并置于辊式混合器上，直至获得单一均相。
7将200μl的各分散液转移至微孔板中的单独的孔中，通过在微孔板读取仪上测量620nm和492nm之间的光密度差来评价散射。
从下表可见，当采用两种以上两亲物的组合来形成疏水相时，观察到了最有效的溶解(根据OD减少所指示的散射缺失来判断)。
聚氧乙烯10十六烷基醚
样品编号 不含PC 样品编号 含PC
1 2.179 6 2.148
2 1.377 7 1.09
3 0.142 8 0.156
4 0.08 9 0.091
5 0.359 10 0.101
聚氧乙烯2硬脂基醚
样品编号 不含PC 样品编号 含PC
1 1.693 6 1.716
2 0.124 7 0.105
3 0.096 8 0.099
4 0.085 9 0.094
5 0.462 10 0.101
聚氧乙烯4十六烷基醚
样品编号 不含PC 样品编号 含PC
1 0.604 6 0.693
2 0.096 7 0.085
3 0.088 8 0.096
4 0.087 9 0.084
5 0.482 10 0.403
聚氧乙烯4肉豆蔻基醚
样品编号 不含PC 样品编号 含PC
1 0.76 6 0.546
2 0.099 7 0.091
3 0.104 8 0.102
4 0.082 9 0.086
5 0.378 10 0.106
聚氧乙烯3硬脂基醚
样品编号 不含PC 样品编号 含PC
1 2.011 6 2.476
2 1.665 7 1.474
3 0.093 8 0.474
4 0.081 9 0.087
5 0.466 10 0.097
聚氧乙烯4月桂基醚
样品编号 不含PC 样品编号 含PC
1 0.401 6 0.172
2 0.106 7 0.093
3 0.089 8 0.097
4 0.098 9 0.079
5 0.185 10 0.107
乙醇酸乙氧基化物月桂基醚
样品编号 不含PC 样品编号 含PC
1 0.295 6 0.297
2 0.584 7 0.107
3 0.091 8 0.101
4 0.103 9 0.082
5 0.202 10 0.115
聚氧乙烯2油烯基醚
样品编号 不含PC 样品编号 含PC
1 0.292 6 0.64
2 0.112 7 0.092
3 0.097 8 0.1
4 0.096 9 0.08
5 0.247 10 0.105
月桂基山梨聚糖
样品编号 不含PC 样品编号 含PC
1 0.396 6 0.106
2 0.104 7 0.091
3 0.092 8 0.098
4 0.095 9 0.08
5 0.169 10 0.105
实施例7
组合使用多库酯钠、Brij52和大豆磷脂酰胆碱将不同蛋白浓度的溶菌酶并入在矿物油中的反胶团中，并与单独使用大豆磷脂酰胆碱时相比较
1.按照实施例5所述的方式构造利用大豆磷脂酰胆碱作为两亲物的疏水性制剂，不同之处在于，调整溶菌酶的量从而使矿物油中的蛋白终浓度为下表所示的50mg/ml至0。脂质浓度为100mg/ml。
2.按照实施例5所述的方式构造利用多库酯钠、Brij52和大豆磷脂酰胆碱作为两亲物的疏水性制剂，不同之处在于，调整溶菌酶的量从而使矿物油中的蛋白终浓度为下表所示的50mg/ml至0。脂质浓度为100mg/ml。
3.在添加矿物油后，将所有样品在辊式混合机上混合2小时，然后将100μl的每种样品转移至透明微孔板的单独的孔中，测量620nm处的光密度。结果如下表所示。
可见，对于两亲物混合物而言，一直到浓度高达25mg/ml都实现了蛋白在油中的透明溶液(由小于0.2的OD读数来指示)；而在仅含有大豆PC的制剂中，只有在蛋白浓度为3.125mg/ml以下时才能实现溶解。因此，在可以并入油中的蛋白的量方面，本发明所述的方法远远优于现有技术(例如WO96/014871)所述的方法。
实施例8
组合使用多库酯钠、Brij52和大豆磷脂酰胆碱时将溶菌酶并入在矿物油中的含有不同水平的两亲物的反胶团中，并与单独使用大豆磷脂酰胆碱时相比较
1.按照实施例5所述的方式构造利用大豆磷脂酰胆碱作为两亲物的疏水性制剂，不同之处在于，调整大豆卵磷脂的量从而使脂质在油中的终浓度为100mg/ml、87.5mg/ml、75mg/ml、62.5mg/ml、50mg/ml、37.5mg/ml、25mg/ml、12.5mg/ml、6.25mg/ml、2.5mg/ml和0mg/ml。在使脂质残余物完全干燥后，添加足够的矿物油以实现400μl的最终体积(设两亲物的密度为1g/ml)。油中的溶菌酶终浓度为1mg/ml。
2.按照实施例5所述的方式构造利用多库酯钠、Brij52和大豆磷脂酰胆碱作为两亲物的疏水性制剂，不同之处在于，调整大豆卵磷脂的量从而使脂质在油中的终浓度为100mg/ml、87.5mg/ml、75mg/ml、62.5mg/ml、50mg/ml、37.5mg/ml、25mg/ml、12.5mg/ml、6.25mg/ml、2.5mg/ml和0mg/ml。在使脂质残余物完全干燥后，添加足够的矿物油以实现400μl的最终体积(设两亲物的密度为1g/ml)。油中的溶菌酶终浓度为1mg/ml。
3.在添加矿物油后，将所有样品在辊式混合机上混合2小时，然后将100μl的每种样品转移至透明微孔板的单独的孔中，测量620nm处的光密度。结果如下表所示。
可见，对于两亲物混合物而言，一直到浓度低至6.25mg/ml(两亲物:蛋白比为6.25:1(重量/重量))都实现了蛋白在油中的透明溶液(由小于0.2的OD读数来指示)；而在仅含有大豆PC的制剂中，只有在两亲物浓度为100mg/ml以上(两亲物:蛋白比为100:1(重量/重量))时才能实现溶解。因此，在两亲物需求的经济方面，本发明所述的方法远远优于现有技术(例如WO96/014871)所述的方法。
实施例9
含有II型胶原的疫苗制品的制造
1.在1个8ml带螺旋盖的玻璃小瓶中加入0.5ml冰醋酸和4.5ml二甲基亚砜(DMSO)，并振荡充分混合。将1ml该混合物添加到5mg的II型胶原中，然后在室温下温和混合过夜以使其溶解。
2.在3个8ml带螺旋盖的玻璃小瓶中称量多库酯钠、大豆磷脂酰胆碱和Brij52各200mg，加温的同时将其溶于1.8ml环己烷中。在一个8ml小瓶中分配1.5ml的多库酯溶液、1.5ml的Brij52溶液和1ml的磷脂溶液，并充分混合。
3.将1ml的两亲物在环己烷中的溶液转移至新的8ml玻璃小瓶中，添加0.2ml来自步骤1的胶原溶液，快速涡旋混合30秒，然后在甘油/水-30℃冷却浴中在振荡下快速冷冻。将小瓶在冰上放置5分钟，然后转移至-30℃冰箱中放置20分钟。
4.以Genevac真空泵在+4℃下使小瓶的内容物暴露于1mbar的真空，并过夜冻干。干燥后，向小瓶内容物中加入900μl的矿物油，温和振荡直至所有内容物都溶解。油中的胶原浓度为1mg/ml。
5.在200ml玻璃锥形瓶中称重20g明胶，并在振荡的同时加入80g蒸馏水。然后将混合物在磁力搅拌器上在50℃下加热，直至所有蛋白溶解。
6.将3ml明胶溶液转移至37℃水浴中的6个预温热的8ml玻璃小瓶中。
7向各小瓶中加入120μl来自步骤4的油(含有120ug胶原)，并通过缓慢涡旋混合10秒来进行温和混合。使小瓶在室温下静置直至内容物固化。在以氮气吹扫后将小瓶封盖，将其储藏在+4℃备用。10ug剂量的胶原包含在约0.25ml的明胶溶液中。
实施例10
使用含有胶原的疫苗制剂进行口服施用来下调小鼠模型的类风湿性关节炎的严重程度的实施例
1.对10～12周龄的雄性DBA-1小鼠称重，并将其分为以下所示的3组(n=8/组)。对所有组都口服治疗(通过强饲法)4次(在第-10天、第-7天、第-5天和第-3天)，而后在尾基部注射在完全弗氏佐剂中的100μg胶原，从而诱导胶原诱发性关节炎(CIA)。
2.在第0天在所有动物中都诱导关节炎，随后在第21天进行加强，在加强后的第5天、第7天、第9天、第12天、第14天、第16天、第19天和第21天对发病率和严重程度进行评估和评分。3个治疗组(每组8只动物)如下使用：
(i).CIA+仅用油进行强饲
(ii).CIA+用含有牛II型胶原(10μg/剂)的油进行强饲
(iii).CIA+用牛II型胶原(20μg/剂)进行强饲
在实验期间，在进行CIA诱导后对关节炎发病率(每组中在任何数量的关节中患有任何严重程度的关节炎的动物的%)和关节炎严重程度(每只个体小鼠中的疾病严重程度)进行临床评分。使用下述的标准关节炎评分系统。对于每只动物，评价每只爪的肿胀和变形、进行评分并计算总和。
0分:无关节炎
1分:仅1～2个趾受影响
2分:3个以上趾，且/或爪肿胀(掌骨/后跗骨)
3分:腕节/跗骨肿胀
4分:变形并且腕节/跗骨关节强直
3.在研究终止时(第21天)，使小鼠安乐死，收集前后腿并在10%的中性缓冲的福尔马林中固定，在5%福尔马林中的10%甲酸中进行脱钙，并进行石蜡包埋。将右膝关节的矢状切面以甲苯胺蓝和固绿染色。利用标准组织病理学评级系统(见附录1)由单盲观察者(CBL)对切面进行评分。
如在图1和2中所见，与单独使用20μg胶原时观察到的相比，对于在油中的10μg剂量的胶原，观察到了患有关节炎的动物数量的更大减少。另外，对形态学变化的效果。

Claims (24)

1.一种单相疏水性制剂，所述制剂包含油相中的亲水性物种和两亲性组分，所述两亲性组分包含多库酯钠、磷脂和非离子型两亲物，其中，所述亲水性物种部分被所述两亲性组分包围，并且所述两亲性组分的亲水性头部基团朝向所述亲水性物种，并且其中，在所述两亲性组分和所述亲水性物种之间没有化学相互作用；所述制剂的特征在于，所述非离子型两亲物具有：包含10至20个碳的亲脂性链，和包含2至10个亚乙基氧基或1至3个羟基的头部基团。
2.如权利要求1所述的制剂，其中，所述亲水性物种选自：肽、蛋白、脂质、糖、核酸、类固醇，和/或一种或多种这些试剂的组合形成的缀合物，和/或带有至少一条中链或长链烃尾部的缀合物。
3.一种制造含有亲水性物种的疏水性制剂的方法，所述方法包括以下步骤：
(i)将溶于疏水性溶剂的多库酯钠、磷脂和非离子型两亲物的溶液与溶于水相的亲水性物种的溶液混合，以形成乳液；
(ii)除去所述水相和疏水性溶剂；
(iii)向在(ii)中获得的干燥的残余物中添加油相。
4.如权利要求3所述的方法，其中，所述疏水性溶剂选自环己烷、环庚烷、环辛烷或其混合物以及可选的叔丁醇。
5.如权利要求3或4所述的方法，其中，步骤(ii)通过冻干来进行。
6.如权利要求3至5中任一项所述的方法，其中，所述亲水性物种选自：肽、蛋白、脂质、糖、核酸、类固醇，和/或一种或多种这些试剂的组合形成的缀合物，和/或带有至少一条中链或长链烃尾部的缀合物。
7.如权利要求3至6中任一项所述的方法，其中，所述亲水性物种是胶原或其片段、衍生物和类似物，所述亲水性物种溶于乙酸和二甲基亚砜的混合物中。
8.一种两相组合物，所述组合物包含：水相；和权利要求1或2所述的单相疏水性制剂或者能够用权利要求3至7中任一项所述的方法获得的单相疏水性制剂。
9.如权利要求8所述的两相组合物，其中，所述两相组合物是水包油乳液。
10.如权利要求8或9所述的两相组合物，其中，所述水相包含明胶或白蛋白。
11.如权利要求10所述的两相组合物，其中，所述两相组合物是微胶囊。
12.一种形成两相组合物的方法，所述方法包括：使权利要求1或2所述的制剂或者能够用权利要求3至7中任一项所述的方法获得的制剂与水溶液接触。
13.如权利要求12所述的方法，其中，所述水相包含明胶或白蛋白。
14.用于医药应用的权利要求1或2所述的制剂、或权利要求8至11中任一项所述的组合物、或能够用权利要求3至7中任一项所述的方法获得的制剂、或能够用权利要求12或13所述的方法获得的组合物。
15.一种组合物，所述组合物包含：权利要求1或2所述的制剂、或权利要求8至11中任一项所述的组合物、或能够用权利要求3至7中任一项所述的方法获得的制剂、或能够用权利要求12或13所述的方法获得的组合物，以及可选的一种或多种药物赋形剂、稀释剂或载剂。
16.一种疫苗，所述疫苗包含权利要求14所述的制剂或权利要求15所述的组合物。
17.如权利要求16所述的疫苗，所述疫苗适合于口服施用。
18.如权利要求17所述的疫苗，所述疫苗包括胶囊。
19.如权利要求18所述的疫苗，其中，所述胶囊具有肠溶包衣。
20.如权利要求16至19中任一项所述的疫苗，其中，所述组合物包含疟疾抗原或流感抗原或肠道疾病病原体抗原。
21.如权利要求15所述的药物组合物，所述组合物适于口服施用、肌肉内施用或皮下施用。
22.一种具有肠溶包衣的胶囊，所述胶囊包含权利要求15所述的药物组合物。
23.如权利要求15所述的组合物，所述组合物包含胶原，用于治疗类风湿性关节炎。
24.一种化妆品制品，所述制品包含：权利要求1或2所述的制剂、或权利要求8至11中任一项所述的组合物、或能够用权利要求3至7中任一项所述的方法获得的制剂、或能够用权利要求12或13所述的方法获得的组合物，以及可选的一种或多种赋形剂、稀释剂或载剂。
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