CN103808915A - 中华鲟等渗盐度点的实验及计算方法 - Google Patents
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Abstract
中华鲟等渗盐度点的实验及计算方法，该方法步骤如下：先将中华鲟血液，制备血清，备用；然后测定6-15份同龄但不同个体的中华鲟血清的渗透压值，并利用统计软件SASV8计算血清渗透压均值，制成表格，再将淡水中血清渗透压转化为等渗点盐度条件下的血清渗透压，即血清渗透压均值即为环境渗透压，最后根据公式计算出中华鲟的等渗点。本方法简单易行，克服了设立多梯度盐度组、实验系统难实现，难操作，样本数少等实验问题，为揭示各龄中华鲟的等渗盐度点提供了较好的方法。
Description
技术领域
本发明属水产科学领域，特别涉及到中华鲟的等渗盐度点的研究。
背景技术
全世界现存27种鲟鱼中有16种属于广盐性鱼类，即在淡水和咸水中均能生存，包括中华鲟。中华鲟属于国家一级保护动物，濒危等级为极危，为保护这一物种国家投入了大量的人财物力。等渗点盐度，是指鱼体生长的一定盐度的环境水体渗透压等于鱼自身渗透压。在等渗环境下，鱼类不用在渗透压调节方面消耗能量，同时等渗盐度对血液电解质组成有显著影响。因此，找到中华鲟等渗点格外重要。另外，渗透压和年龄相关性显著，随年龄变化渗透压显著变化。故找到中华鲟各年龄段的等渗点盐度或者等渗点盐度关于年龄的变化方程对物种保护意义重大。
现有关于等渗点求法的实验的描述，具体是将实验对象养殖在4-5个不同的梯度盐度下，由于实验对象对新的盐度环境的应激，需要使实验对象适应新环境，消除应激，从而得到准确的实验数据。在等到实验对象适应新的环境后，进入长期养殖阶段，该阶段一般持续10-20天，期间保证实验对象行为和摄食均正常。然后抽取血液，制备血清。待血清稳定后，测定各盐度下制备的实验对象血清和环境渗透压，用盐度或者环境渗透压（X轴）建立血清渗透压（Y轴）的函数关系式，再令Y=X，即得出等渗渗透压，相应的盐度即为等渗盐度 （Sampaio，2002）。考虑到实验样本数需求（5-30），以及过程操作（各个梯度盐度环境的设置、空间的麻醉、采血）。该方法一般需要建立以下条件：1. 各个梯度盐度环境的设置，需要有足够多的海水或者海水素进行稀释；或者价格昂贵的维生系统保证盐度环境的质量；2. 需要额外建立较大的实验场所和空间，特别对于像中华鲟这样的大型鱼类，体长达到2 m以上后，难有理想的实验系统满足其生长环境；因此，用该方法很难完实现中华鲟各年龄段的盐度实验。而特别对于成年中华鲟而言，目前迁地保护下养殖在淡水水体，如经同样的方法来计算等渗点，不仅面临以上困难，还面临着样本数量不足的问题。如果仅以淡水一个盐度作为实验组，那么就可以节约使用3-4组实验对象。
发明内容
本发明的目的在于提供一种中华鲟等渗盐度点的实验及计算方法，该方法不仅适用于小型中华鲟，也适用于于成年中华鲟，且该方法简单易行，克服了设立多梯度盐度组、实验系统难实现，难操作，样本数少等实验问题，为揭示各龄中华鲟的等渗盐度点提供了较好的方法。
为实现上述目的，本发明的技术方案为：
中华鲟等渗盐度点的实验及计算方法，其特征在于：该方法步骤如下：
1. 将中华鲟血液，制备血清，备用；
2. 测定6-15份同龄但不同个体的中华鲟血清的渗透压值，并利用统计软件SASV8计算血清渗透压均值，制成表格。
3. 将淡水中血清渗透压转化为等渗点盐度条件下的血清渗透压，即血清渗透压均值即为环境渗透压“Yw”。
4. 将各年龄段中华鲟血清均渗透压均值带入下列公式式：Yw=8.45293+26.6572x ，其中“Yw”表示环境渗透压，“x”表示盐度，以血清渗透压为Yw赋值，即可计算出中华鲟的等渗点x。
本发明的积极效果为：
1. 本发明证明了在中华鲟在淡水渗透压等于等渗环境的渗透压，为求中华鲟等渗盐度点提供了捷径。
2. 本发明克服了设立多梯度盐度组、较大的实验场地和空间等实验等问题，同时无需购买特别的维生系统和实验设备，极大地节约了资金和人力支出。只需在淡水中进行适应养殖，而目前中华鲟子一代后代均在淡水中养殖，为实验提供了极大的便利。
3. 缓解了实验样本少的问题。
具体实施方式
下面结合实施例，对本发明作进一步说明。
实施例一
12龄中华鲟等渗点的实验及计算方法
1、 12龄中华鲟血清的制备
将11份12龄中华鲟血液各1ml，静置2小时后，3000转离心10分钟，得上清液即制得血清。
2、血清渗透压的测定
血清渗透压经由冰点渗透压仪测定，取20μL血清于Advanced 210微量样品渗透压管，探针测得冰点值，然后转化渗透压值。渗透压值见表1。
表1 淡水环境中12龄中华鲟血清渗透压
| 年龄（年） | 血清渗透压 (mOsm/kg) |
| 12 | 264.00 |
| 12 | 264.00 |
| 12 | 257.00 |
| 12 | 225.00 |
| 12 | 242.00 |
| 12 | 255.00 |
| 12 | 229.00 |
| 12 | 207.00 |
| 12 | 211.00 |
| 12 | 209.00 |
| 12 | 216.00 |
| Mean ± SD | 234.45 ± 22.68 |
3、根据表1的统计数据得知，统计软件SASV8根据11个血清渗透压数据计算出的12龄中华鲟血清渗透压均值血清渗透压均值：Mean ± SD＝234.45 ± 22.68 mOsm/kg。
4、血清渗透压转换。
将淡水环境下的血清渗透压作为等渗盐度环境下的血清渗透压。淡水环境下血清渗透压的均值同时作为等渗环境下血清渗透压的均值，即Mean值即为环境渗透压“Yw”。
5、求得等渗点。
根据公式Yw=8.45293+26.6572x，将“Yw”值234.45，带入公式，即求出x为8.48 psu，即为等渗点。
实施例二
13龄中华鲟等渗点的实验及计算方法
1、13龄中华鲟血清的制备
将13份13龄中华鲟血液各1ml，静置2小时后，3000转离心10分钟，得上清液即制得血清。
2、血清渗透压的测定。
血清渗透压经由冰点渗透压仪（Fiske Micro-Osmometer 210）测定，取20μL血清于Advanced 210微量样品渗透压管，探针测得冰点值，然后转化渗透压值。渗透压值见表2。
表2淡水环境中13龄中华鲟血清渗透压
3、根据表2的统计数据得知，统计软件SASV8根据13个血清渗透压数据计算出的13龄中华鲟血清渗透压均值血清渗透压均值：Mean ± SD＝247.08 ± 13.02 mOsm/kg。
4、血清渗透压转换。
将淡水环境下的血清渗透压作为等渗盐度环境下的血清渗透压。淡水环境下血清渗透压的均值同时作为等渗环境下血清渗透压的均值，即Mean值即为环境渗透压“Yw”。
5、求得等渗点。
根据公式Yw=8.45293+26.6572x，将“Yw”值247.08，带入公式，即求出x为8.95 psu，即为等渗点。
实施例三
15龄中华鲟等渗点计算
1、15龄中华鲟血清的制备
将6份15龄中华鲟血液各1ml，静置2小时后，3000转离心10分钟，得上清液即制得血清。
2、血清渗透压的测定。
血清渗透压经由冰点渗透压仪（Fiske Micro-Osmometer 210）测定，取20μL血清于Advanced 210微量样品渗透压管，探针测得冰点值，然后转化渗透压值。渗透压值见表3。
表3淡水环境中15龄中华鲟血清渗透压
3、根据表3的统计数据得知，统计软件SASV8根据6个血清渗透压数据计算出的15龄中华鲟血清渗透压均值血清渗透压均值：Mean ± SD＝254.75 ± 22.57 mOsm/kg。
4、血清渗透压转换。
将淡水环境下的血清渗透压作为等渗盐度环境下的血清渗透压。淡水环境下血清渗透压的均值同时作为等渗环境下血清渗透压的均值，即Mean值即为环境渗透压“Yw”。
5、求得等渗点。
根据公式Yw=8.45293+26.6572x，将“Yw”值254.75，带入公式，即求出x为9.23 psu，即为等渗点。
实例四
9月龄中华鲟等渗点计算
1、9月龄龄中华鲟血清的制备
将15份9月龄中华鲟血液各1ml，静置2小时后，3000转离心10分钟，得上清液即制得血清。
2、血清渗透压的测定。
血清渗透压经由冰点渗透压仪（Fiske Micro-Osmometer 210）测定，取20μL血清于Advanced 210微量样品渗透压管，探针测得冰点值，然后转化渗透压值。渗透压值见表3。
表4 淡水环境中9月龄中华鲟血清渗透压
3、根据表4的统计数据得知，统计软件SASV8根据15个血清渗透压数据计算出的9月龄中华鲟血清渗透压均值血清渗透压均值：Mean ± SD＝265.67±10.73 mOsm/kg。
4、血清渗透压转换。
将淡水环境下的血清渗透压作为等渗盐度环境下的血清渗透压。淡水环境下血清渗透压的均值同时作为等渗环境下血清渗透压的均值，即Mean值即为环境渗透压“Yw”。
5、求得等渗点。
根据公式Yw=8.45293+26.6572x，将“Yw”值265.67，带入公式，即求出x为9.65 psu，即为等渗点。
实例五
5月龄中华鲟等渗点计算
1、5月龄中华鲟血清的制备
将10份5月龄中华鲟血液各1ml，静置2小时后，3000转离心10分钟，得上清液即制得血清。
2、血清渗透压的测定。
血清渗透压经由冰点渗透压仪（Fiske Micro-Osmometer 210）测定，取20μL血清于Advanced 210微量样品渗透压管，探针测得冰点值，然后转化渗透压值。渗透压值见表3。
表5淡水环境中5月龄中华鲟血清渗透压
| 年龄 | 血清渗透压 (mOsm/kg) |
| 0.5 | 272 |
| 0.5 | 280 |
| 0.5 | 306 |
| 0.5 | 253 |
| 0.5 | 250 |
| 0.5 | 269 |
| 0.5 | 279 |
| 0.5 | 272 |
| 0.5 | 271 |
| 0.5 | 271 |
| Mean ± SD | 272.3 ± 15.36 |
3、根据表5的统计数据得知，统计软件SASV8根据10个血清渗透压数据计算出的5月龄中华鲟血清渗透压均值血清渗透压均值：Mean ± SD＝272.3 ± 15.36 mOsm/kg。
4、血清渗透压转换。
将淡水环境下的血清渗透压作为等渗盐度环境下的血清渗透压。淡水环境下血清渗透压的均值同时作为等渗环境下血清渗透压的均值，即Mean值即为环境渗透压“Yw”。
5、求得等渗点。
根据公式Yw=8.45293+26.6572x，将“Yw”值272.3，带入公式，即求出x为9.90 psu，即为等渗点。
本发明证明了在中华鲟在淡水渗透压等于等渗环境的渗透压，为求中华鲟等渗盐度点提供了捷径。克服了设立多梯度盐度组、较大的实验场地和空间等实验等问题，同时无需购买特别的维生系统和实验设备，极大地节约了资金和人力支出。只需在淡水中进行适应养殖，而目前中华鲟的子一代后代均在淡水中养殖，为实验提供了极大的便利。同时，缓解了实验样本少的问题。
Claims (1)
1.中华鲟等渗盐度点的实验及计算方法，其特征在于：该方法步骤如下：
（1）将中华鲟血液，制备血清，备用；
（2）测定6-15份同龄但不同个体的中华鲟血清的渗透压值，并利用统计软件SASV8计算血清渗透压均值，制成表格；
（3）将淡水中血清渗透压转化为等渗点盐度条件下的血清渗透压，即血清渗透压均值即为环境渗透压“Yw”；
（4）将各年龄段中华鲟血清均渗透压均值带入下列公式式：Yw=8.45293+26.6572x ，其中“Yw”表示环境渗透压，“x”表示盐度，以血清渗透压为Yw赋值，即可计算出中华鲟的等渗点x。
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|---|---|
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| CN110794024A (zh) * | 2019-11-30 | 2020-02-14 | 中国海洋大学 | 一种贝类血液生理指标的标准化测定方法 |
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2014
- 2014-03-07 CN CN201410081824.6A patent/CN103808915A/zh active Pending
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