CN103808699A - 装载量子点和酶的脂质体及其制备方法和应用 - Google Patents

装载量子点和酶的脂质体及其制备方法和应用 Download PDF

Info

Publication number
CN103808699A
CN103808699A CN201210460456.7A CN201210460456A CN103808699A CN 103808699 A CN103808699 A CN 103808699A CN 201210460456 A CN201210460456 A CN 201210460456A CN 103808699 A CN103808699 A CN 103808699A
Authority
CN
China
Prior art keywords
quantum dot
enzyme
liposome
preparation
loading
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Granted
Application number
CN201210460456.7A
Other languages
English (en)
Other versions
CN103808699B (zh
Inventor
唐芳琼
任湘菱
陈真真
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Technical Institute of Physics and Chemistry of CAS
Original Assignee
Technical Institute of Physics and Chemistry of CAS
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Technical Institute of Physics and Chemistry of CAS filed Critical Technical Institute of Physics and Chemistry of CAS
Priority to CN201210460456.7A priority Critical patent/CN103808699B/zh
Publication of CN103808699A publication Critical patent/CN103808699A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN103808699B publication Critical patent/CN103808699B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Images

Landscapes

  • Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
  • Investigating Or Analysing Materials By The Use Of Chemical Reactions (AREA)
  • Investigating, Analyzing Materials By Fluorescence Or Luminescence (AREA)

Abstract

本发明涉及装载量子点和酶的脂质体及其制备方法和应用。本发明通过逆相蒸发法制备脂质体，在制备的过程中引入量子点和酶。将该装载量子点和酶的脂质体用于酶反应底物的检测，由于装载在脂质体中的酶与待检测酶反应底物发生反应，使得量子点的荧光强度产生变化，采用荧光分光光度计检测装载量子点和酶的脂质体和酶反应底物的混合溶液，通过分析量子点荧光强度的变化的量来实现对待检测酶反应底物浓度的高选择性的定量检测。本发明的装载量子点和酶的脂质体制备过程简单、成本低、易于规模生产。使用时操作简单、检测快速、周期短，检测灵敏度高、线性范围宽。可用于各种与疾病诊断相关的生理指标的检测。

Description

装载量子点和酶的脂质体及其制备方法和应用
技术领域
本发明属于生物检测领域，特别是涉及装载量子点和酶的脂质体及其制备方法和应用。
背景技术
近年来量子点作为一种新型的荧光标记物质，其制备与应用研究得到了飞速的发展。数量众多的研究报道集中于量子点荧光标记和用于构建生物传感器。与之前研究常用的有机荧光染料相比，量子点有以下优点：（1）荧光发射比较稳定，其发光寿命可达ms级，且不易被光漂白；（2）荧光发射强度高，谱峰窄，峰形对称；（3）发射波长随粒径的增大而有规律地红移，改变粒径就可获得多色发光；（4）其激发光谱在吸收阈值以上几乎是连续的，有利于多波长激发。因而基于量子点构建的生物传感器具有更加优异的性能。
在基于量子点构建的各类生物传感器中，检测酶反应底物的生物传感器是一大类。由于很多酶反应底物是人体生理反应的重要指标，例如血糖的高低是糖尿病病情的直观表现，乙酰胆碱的多少是老年痴呆症的重要标志等。因此研究准确、灵敏、快捷地检测这些生理指标的新方法，有助于许多常见和重大疾病的早期诊断与监测，易于促进多种疾病早期诊断的普及化和家庭化，从而提高疾病的治愈率。酶反应具有很强的专一性，酶蛋白分子往往较抗体、抗原或基因蛋白等更易于获得且生物活性相对稳定，价格便宜。所以构建酶法检测生理指标的体系更为方便和价廉，易于推广应用。
虽然目前基于量子点荧光检测酶反应体系的研究报道日益增多，量子点已被应用于葡萄糖（X.Y.Li,Y.L.Zhou,Z.Z.Zheng,X.L.Yue,Z.F.Dai,S.Q.Liu,Z.Y.Tang,Langmuir,2009,25,6580-6586）、半乳糖（R.Freeman,L.Bahshi,T.Finder,R.Gill,I.Willner,Chem.Commun.,2009,764-766）、核酸（W.R.Algar,U.J.Krull,Anal.Chem.,2009,81,4113-4120）、乳酸脱氢酶（X.L.Ren,L.Q.Yang,F.Q.Tang,C.M.Yan,J.Ren,Biosensors and Bioelectronics,2010,26,271-274）等生理指标的检测，本案发明人也申请了“量子点荧光检测酶活性的方法”的专利（CN200910241266.4），但该方法仍然存在检测灵敏度不高，线性范围较窄，量子点发光长期稳定性较差等不足，严重制约了该方法向实际应用的推广，因而亟待研究新的解决办法。
脂质体（Liposome）是由磷脂和亲脂型稳定剂（如胆固醇等）为膜材包合而成的囊泡，其薄膜是磷脂与亲脂型稳定剂混合分子相互间隔定向排列的双分子层，结构类似生物膜，又称人工生物膜。它被作为药物、基因、抗原、免疫佐剂的载体制剂等得到广泛研究。特别是对于生物活性酶，通过脂质体的包覆，更能延长生物酶的寿命，有效地保持其活性，因此非常适宜装载酶。近年来也有一些关于脂质体装载量子点的研究，表明装载在脂质体中的量子点保持了荧光性能，更有利于在生物体内应用（J.Y.Wang,J.F.Zhao,P.N.Wang,W.L.Yang,J.Y.Chen,J.Fluoresc.,2011,21,1635-1642）。但将量子点和酶共同装载在脂质体中，用于酶反应底物检测的研究还未见报道。
发明内容
本发明的目的在于提供一种装载量子点和酶的脂质体，该装载量子点和酶的脂质体可以检测酶反应底物的浓度。
本发明的另一目的在于提供一种装载量子点和酶的脂质体的制备方法，将量子点与酶共同装载在脂质体中，以得到所述的装载量子点和酶的脂质体。
本发明的再一目的是提供装载量子点和酶的脂质体的应用，利用该装载量子点和酶的脂质体检测酶反应底物的浓度。
本发明的装载量子点和酶的脂质体是在脂质体（如背景技术中所述，脂质体（Liposome）是由磷脂和亲脂型稳定剂（如胆固醇等）为膜材包合而成的囊泡）中共同装载有量子点和酶。
所述的脂质体中共同装载有量子点和酶，其装载的所述的酶的活力单位与量子点的质量比为3.2×109:1~1.0×1.012:1个活力单位/公斤。
所述的量子点是水溶性的CdTe量子点、CdTe/CdS量子点、CdTe/CdS/ZnS量子点、CdSe/ZnS量子点、ZnTe量子点或ZnSe量子点。
所述的酶为葡萄糖氧化酶、乳酸氧化酶、尿酸氧化酶、乙酰胆碱酯酶或胆碱氧化酶等。
所述的共同装载有量子点和酶的脂质体的粒径为30~350nm。
本发明的装载量子点和酶的脂质体的制备方法：将磷脂和亲脂型稳定剂溶于有机溶剂中，完全溶解后加入含有量子点和酶的缓冲溶液，超声分散成稳定的乳液后减压蒸干有机溶剂，再加入缓冲溶液进行超声分散，制得共同装载有量子点和酶的脂质体。
所述的制备方法中的磷脂和亲脂型稳定剂的质量比为1:1~6:1；所述的量子点与磷脂和亲脂型稳定剂的总质量的质量比为3.2×10-7:1~4.1×10-6:1；所述的酶的活力单位与磷脂和亲脂型稳定剂的总质量的比为1.3×104:1~3.4×105:1个活力单位/公斤。
所述的制备方法中的所述的有机溶剂与含有量子点和酶的缓冲溶液的体积比为2.2:1~8.3:1。
所述的磷脂是卵磷脂。
所述的亲脂型稳定剂是胆固醇、磷脂酸或维生素E等。
所述的有机溶剂为氯仿、乙醚或两者的混合液。
所述的缓冲溶液为磷酸盐缓冲液，其浓度为0.01摩尔/升，pH值为6.8。
所述的量子点为现有技术产品，如可参照CN200810101429.4公开的方法进行制备。所述的量子点的荧光发射波长位于400～700纳米，量子产率大于20%。
所述的量子点是水溶性的CdTe量子点、CdTe/CdS量子点、CdTe/CdS/ZnS量子点、CdSe/ZnS量子点、ZnTe量子点或ZnSe量子点。
所述的酶为葡萄糖氧化酶、乳酸氧化酶、尿酸氧化酶、乙酰胆碱酯酶或胆碱氧化酶等。
本发明的装载量子点和酶的脂质体可用于酶反应底物的检测，由于装载在脂质体中的酶与待检测酶反应底物发生反应，使得量子点的荧光强度产生变化，采用荧光分光光度计检测装载量子点和酶的脂质体和酶反应底物的混合溶液，通过分析量子点荧光强度的变化的量来实现对待检测酶反应底物浓度的高选择性的定量检测。
所述的酶反应底物为葡萄糖、乳酸、尿酸、乙酰胆碱或胆碱等。
本发明的装载量子点和酶的脂质体可用于葡萄糖、乳酸、尿酸、乙酰胆碱或胆碱等生理指标的检测，有助于糖尿病、痛风、老年性痴呆症和心脑血管疾病等相关疾病的早期检测和诊断。
本发明的装载量子点和酶的脂质体的制备方法简单易行，由于脂质体的制备采用了常用的逆相蒸发法，并且这种方法制备的脂质体已有成熟的产品。所以本发明的制备方法十分易于推广应用。
本发明的优势在于，创新性地将量子点和酶一同装载在脂质体中，由于脂质体特殊的结构和良好的生物相容性，有利于生物酶活性的保持。同时量子点装载在脂质体中，减少了量子点与其他活性物质的接触，提高了量子点的发光长期稳定性。利用装载量子点和酶的脂质体检测酶反应底物，得到了更好的检测灵敏度和更宽的线性范围。例如图3所示，装载量子点和葡萄糖氧化酶的脂质体检测葡萄糖时，线性范围为0.01~500mM（0.01~10mM和10mM~500mM），性能优于文献报道的采用量子点和葡萄糖氧化酶水溶液检测葡萄糖的数据（文献见L.Q.Yang,X.L.Ren,X.W.Meng,H.B.Li,F.Q.Tang,Biosensors and Bioelectronics,2011,26,3488-3493，线性范围为1.67~6.67mM）。可以看出脂质体的引入优化了量子点荧光检测酶反应的体系。
本发明的装载量子点和酶的脂质体的制备过程简单、成本低、易于规模生产。使用时操作简单、检测快速、周期短，可用于各种与疾病诊断相关的生理指标的检测。
附图说明
图1.本发明实施例1制备的装载量子点和酶的脂质体的电镜照片。
图2.本发明实施例1的装载量子点和酶的脂质体检测葡萄糖的荧光光谱图。
图3.本发明实施例1的荧光检测的线性拟合图。
具体实施方式
实施例1
1、水溶性的碲化镉量子点的制备（参照CN200810101429.4制备）
（1）在去离子水中依次加入硝酸镉、巯基乙酸，使硝酸镉与巯基乙酸的摩尔比为1：50，络合反应完成后，加入与硝酸镉等摩尔的碲氢化钠，得到水溶性量子点的前驱体溶液，最终镉离子的浓度为10-5M；
（2）将步骤（1）得到的前驱体溶液加到超声雾化器中，经过超声雾化后，前驱体溶液以亚微米小液滴的形式存在，得到水溶性量子点的前驱体溶液的雾滴；
（3）通入氮气，氮气流量为5L/min，将步骤(2)得到的前驱体溶液的雾滴带入到温度稳定的反应装置中，前驱体溶液的雾滴经过加热（温度为450℃）反应，反应产物由水吸收得到水溶性的碲化镉量子点，荧光发射波长为569nm，量子产率为50%。
2、将卵磷脂600mg和胆固醇300mg溶于65ml氯仿中，完全溶解后加入含8.2×10－4mg的水溶性的碲化镉量子点和45个活性单位葡萄糖氧化酶的浓度为0.01摩尔/升，pH值为6.8的磷酸盐缓冲溶液15ml，超声分散成稳定的乳液后减压蒸干氯仿，成均匀膜。加入浓度为0.01摩尔/升，pH值为6.8的60ml磷酸盐缓冲溶液进行超声分散，制得共同装载有水溶性的碲化镉量子点和葡萄糖氧化酶的脂质体，共同装载有水溶性的碲化镉量子点和葡萄糖氧化酶的脂质体的粒径约50nm，电镜照片见图1。
3、将待检测的葡萄糖溶液加入到步骤2制得的共同装载有水溶性的碲化镉量子点和葡萄糖氧化酶的脂质体磷酸盐缓冲溶液中，采用荧光分光光度计检测混合溶液体系，得到体系的荧光光谱，通过分析荧光光谱的荧光强度的变化测得葡萄糖浓度的数据。得到的共同装载有水溶性的碲化镉量子点和葡萄糖氧化酶的脂质体检测葡萄糖的荧光光谱图见图2，荧光检测的线性拟合图见图3。
实施例2
1、水溶性的碲化镉量子点的制备同实施例1。
2、将卵磷脂106mg和胆固醇20mg溶于10ml氯仿中，完全溶解后加入含2.3×10-4mg的水溶性的碲化镉量子点和12个活性单位乳酸氧化酶的磷酸盐缓冲溶液3ml，超声分散成稳定的乳液后减压蒸干氯仿，成均匀膜。加入12ml磷酸盐缓冲溶液进行超声分散，制得共同装载有水溶性的碲化镉量子点和乳酸氧化酶的脂质体，共同装载有水溶性的碲化镉量子点和乳酸氧化酶的脂质体的粒径约70nm。
3、将待检测的乳酸溶液加入到步骤2制得的共同装载有水溶性的碲化镉量子点和乳酸氧化酶的脂质体磷酸盐缓冲溶液中，采用荧光分光光度计检测混合溶液体系，得到体系的荧光光谱，通过分析荧光光谱的荧光强度的变化测得乳酸浓度的数据。
实施例3
1、水溶性的碲化镉量子点的制备（参照CN200810101429.4制备）
（1）在去离子水中依次加入硝酸镉、巯基乙酸，使硝酸镉与巯基乙酸的摩尔比为1：3，络合反应完成后，加入与硝酸镉等摩尔的碲氢化钠，得到水溶性量子点的前驱体溶液，最终镉离子的浓度为5×10-2M；
（2）将步骤（1）得到的前驱体溶液加到超声雾化器中，经过超声雾化后，前驱体溶液以亚微米小液滴的形式存在，得到水溶性量子点的前驱体溶液的雾滴；
（3）通入氮气，氮气流量为3L/min，将步骤(2)得到的前驱体溶液的雾滴带入到温度稳定的反应装置中，前驱体溶液的雾滴经过加热（温度为220℃）反应，反应产物由水吸收得到水溶性的碲化镉量子点，荧光发射波长为545nm，量子产率为30%。
2、将卵磷脂1248mg和磷脂酸520mg溶于100ml氯仿中，完全溶解后加入含5.7×10-4mg的水溶性的碲化镉量子点和600个活性单位尿酸氧化酶的浓度为0.01摩尔/升，pH值为6.8的磷酸盐缓冲溶液18ml，超声分散成稳定的乳液后减压蒸干氯仿，成均匀膜。加入浓度为0.01摩尔/升，pH值为6.8的85ml磷酸盐缓冲溶液进行超声分散，制得共同装载有水溶性的碲化镉量子点和尿酸氧化酶的脂质体，共同装载有水溶性的碲化镉量子点和尿酸氧化酶的脂质体的粒径约30nm。
3、将待检测的尿酸溶液加入到步骤2制得的共同装载有水溶性的碲化镉量子点和尿酸氧化酶的脂质体磷酸盐缓冲溶液中，采用荧光分光光度计检测混合溶液体系，得到体系的荧光光谱，通过分析荧光光谱的荧光强度的变化测得尿酸浓度的数据。
实施例4
1、水溶性的碲化锌量子点的制备（参照CN200810101429.4制备）
（1）在去离子水中依次加入乙酸锌、巯基乙酸，使乙酸锌与巯基乙酸的摩尔比为1：20，络合反应完成后，加入与乙酸锌等摩尔的碲氢化钠，得到水溶性量子点的前驱体溶液，最终锌离子的浓度为3×10-2M；
（2）将步骤（1）得到的前驱体溶液加到超声雾化器中，经过超声雾化后，前驱体溶液以亚微米小液滴的形式存在，得到水溶性量子点的前驱体溶液的雾滴；
（3）通入氮气，氮气流量为1L/min，将步骤(2)得到的驱体溶液的雾滴带入到温度稳定的反应装置中，前驱体溶液的雾滴经过加热（温度为110℃）反应，反应产物由水吸收得到水溶性的碲化锌量子点，荧光发射波长为465nm，量子产率为25%。
2、将卵磷脂768mg和胆固醇240mg溶于30ml氯仿与25ml乙醚混合溶液中，完全溶解后加入含2.5×10－3mg的水溶性的碲化锌量子点和58个活性单位葡萄糖氧化酶的浓度为0.01摩尔/升，pH值为6.8的磷酸盐缓冲溶液25ml，超声分散成稳定的乳液后减压蒸干氯仿和乙醚，成均匀膜。加入浓度为0.01摩尔/升，pH值为6.8的30ml磷酸盐缓冲溶液进行超声分散，制得共同装载有水溶性的碲化锌量子点和葡萄糖氧化酶的脂质体，共同装载有水溶性的碲化锌量子点和葡萄糖氧化酶的脂质体的粒径约200nm。
3、将待检测的葡萄糖溶液加入到步骤2制得的共同装载有水溶性的碲化锌量子点和葡萄糖氧化酶的脂质体磷酸盐缓冲溶液中，采用荧光分光光度计检测混合溶液体系，得到体系的荧光光谱，通过分析荧光光谱的荧光强度的变化测得葡萄糖浓度的数据。
实施例5
1、水溶性的碲化锌量子点的制备同实施例4。
2、将卵磷脂50mg和维生素E50mg溶于20ml乙醚中，完全溶解后加入含4.1×10-4mg的水溶性的碲化锌量子点和1.3个活性单位胆碱氧化酶的磷酸盐缓冲溶液8ml，超声分散成稳定的乳液后减压蒸干乙醚，成均匀膜。加入20ml磷酸盐缓冲溶液进行超声分散，制得共同装载有水溶性的碲化锌量子点和胆碱氧化酶的脂质体，共同装载有水溶性的碲化锌量子点和胆碱氧化酶的脂质体的粒径约170nm。
3、将待检测的胆碱溶液加入到步骤2制得的共同装载有水溶性的碲化锌量子点和胆碱氧化酶的脂质体磷酸盐缓冲溶液中，采用荧光分光光度计检测混合溶液体系，得到体系的荧光光谱，通过分析荧光光谱的荧光强度的变化测得胆碱浓度的数据。
实施例6
1、水溶性的硒化锌量子点的制备（参照CN200810101429.4制备）
（1）在去离子水中依次加入氯化镉、巯基丙酸，使氯化镉与巯基丙酸的摩尔比为1：5，络合反应完成后，加入与氯化镉等摩尔的硒氢化钠，得到水溶性量子点的前驱体溶液，最终镉离子的浓度为7×10-3M；
（2）将步骤（1）得到的前驱体溶液加到超声雾化器中，经过超声雾化后，前驱体溶液以亚微米小液滴的形式存在，得到水溶性量子点的前驱体溶液的雾滴；
（3）通入氮气，氮气流量为4L/min，将步骤(2)得到的前驱体溶液的雾滴带入到温度稳定的反应装置中，前驱体溶液的雾滴经过加热（温度为250℃）反应，反应产物直接由水吸收得到水溶性的硒化锌量子点，荧光发射波长为652nm，量子产率为35%。
2、将卵磷脂960mg和胆固醇160mg溶于100ml氯仿与50ml乙醚混合溶液中，完全溶解后加入含5.0×10-4mg的水溶性的硒化锌量子点和90个活性单位乙酰胆碱酯酶的浓度为0.01摩尔/升，pH值为6.8的磷酸盐缓冲溶液24ml，超声分散成稳定的乳液后减压蒸干氯仿和乙醚，成均匀膜。加入浓度为0.01摩尔/升，pH值为6.8的100ml磷酸盐缓冲溶液进行超声分散，制得共同装载有水溶性的硒化锌量子点和乙酰胆碱酯酶的脂质体，共同装载有水溶性的硒化锌量子点和乙酰胆碱酯酶的脂质体的粒径约120nm。
3、将待检测的乙酰胆碱溶液加入到步骤2制得的共同装载有水溶性的硒化锌量子点和乙酰胆碱酯酶的脂质体磷酸盐缓冲溶液中，采用荧光分光光度计检测混合溶液体系，得到体系的荧光光谱，通过分析荧光光谱的荧光强度的变化测得乙酰胆碱浓度的数据。
实施例7
1、水溶性的碲化镉量子点的制备同实施例3。
2、将卵磷脂3280mg和维生素E820mg溶于183ml氯仿中，完全溶解后加入含3.0×10-3mg的水溶性的碲化镉量子点和275个活性单位乳酸氧化酶的浓度为0.01摩尔/升，pH值为6.8的磷酸盐缓冲溶液22ml，超声分散成稳定的乳液后减压蒸干氯仿，成均匀膜。加入浓度为0.01摩尔/升，pH值为6.8的120ml磷酸盐缓冲溶液进行超声分散，制得共同装载有水溶性的碲化镉量子点和乳酸氧化酶的脂质体，共同装载有水溶性的碲化镉量子点和乳酸氧化酶的脂质体的粒径约350nm。
3、将待检测的乳酸溶液加入到步骤2制得的共同装载有水溶性的碲化镉量子点和乳酸氧化酶的脂质体磷酸盐缓冲溶液中，采用荧光分光光度计检测混合溶液体系，得到体系的荧光光谱，通过分析荧光光谱的荧光强度的变化测得乳酸浓度的数据。

Claims (10)

1.一种装载量子点和酶的脂质体，其特征是：在脂质体中共同装载有量子点和酶。
2.根据权利要求1所述的装载量子点和酶的脂质体，其特征是：所述的脂质体中共同装载有量子点和酶，其装载的所述的酶的活力单位与量子点的质量比为3.2×109:1~1.0×1.012:1个活力单位/公斤。
3.根据权利要求1或2所述的装载量子点和酶的脂质体，其特征是：所述的量子点是水溶性的CdTe量子点、CdTe/CdS量子点、CdTe/CdS/ZnS量子点、CdSe/ZnS量子点、ZnTe量子点或ZnSe量子点；
所述的酶为葡萄糖氧化酶、乳酸氧化酶、尿酸氧化酶、乙酰胆碱酯酶或胆碱氧化酶。
4.根据权利要求1或2所述的装载量子点和酶的脂质体，其特征是：所述的共同装载有量子点和酶的脂质体的粒径为30~350nm。
5.一种根据权利要求1~4任意一项所述的装载量子点和酶的脂质体的制备方法，其特征是：将磷脂和亲脂型稳定剂溶于有机溶剂中，完全溶解后加入含有量子点和酶的缓冲溶液，超声分散成稳定的乳液后减压蒸干有机溶剂，再加入缓冲溶液进行超声分散，制得共同装载有量子点和酶的脂质体。
6.根据权利要求5所述的制备方法，其特征是：所述的制备方法中的磷脂和亲脂型稳定剂的质量比为1:1~6:1；所述的量子点与磷脂和亲脂型稳定剂的总质量的质量比为3.2×10-7:1~4.1×10-6:1；所述的酶的活力单位与磷脂和亲脂型稳定剂的总质量的比为1.3×104:1~3.4×105:1个活力单位/公斤。
7.根据权利要求5所述的制备方法，其特征是：所述的制备方法中的所述的有机溶剂与含有量子点和酶的缓冲溶液的体积比为2.2:1~8.3:1；
所述的有机溶剂为氯仿、乙醚或两者的混合液；所述的缓冲溶液为磷酸盐缓冲液，其浓度为0.01摩尔/升，pH值为6.8。
8.根据权利要求5所述的制备方法，其特征是：所述的磷脂是卵磷脂；所述的亲脂型稳定剂是胆固醇、磷脂酸或维生素E。
9.一种根据权利要求1~4任意一项所述的装载量子点和酶的脂质体的应用，其特征是：所述的装载量子点和酶的脂质体用于酶反应底物的检测，采用荧光分光光度计检测装载量子点和酶的脂质体和酶反应底物的混合溶液，通过分析量子点荧光强度的变化实现对待检测酶反应底物的浓度的定量检测。
10.根据权利要求9所述的应用，其特征是：所述的酶反应底物为葡萄糖、乳酸、尿酸、乙酰胆碱或胆碱。
CN201210460456.7A 2012-11-15 2012-11-15 装载量子点和酶的脂质体及其制备方法和应用 Active CN103808699B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201210460456.7A CN103808699B (zh) 2012-11-15 2012-11-15 装载量子点和酶的脂质体及其制备方法和应用

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201210460456.7A CN103808699B (zh) 2012-11-15 2012-11-15 装载量子点和酶的脂质体及其制备方法和应用

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN103808699A true CN103808699A (zh) 2014-05-21
CN103808699B CN103808699B (zh) 2016-03-09

Family

ID=50705788

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201210460456.7A Active CN103808699B (zh) 2012-11-15 2012-11-15 装载量子点和酶的脂质体及其制备方法和应用

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN103808699B (zh)

Cited By (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN105300903A (zh) * 2015-10-28 2016-02-03 中国医学科学院输血研究所 一种血红蛋白类载氧药物中总磷脂含量的测定方法
CN106872422A (zh) * 2016-12-30 2017-06-20 锦州医科大学 量子点检测体液中尿酸的方法
CN107583059A (zh) * 2017-10-31 2018-01-16 宁夏医科大学 一种可包载量子点的阳离子脂质体流感疫苗及其制备方法
CN110068675A (zh) * 2019-05-13 2019-07-30 福州大学 一种基于光热及免疫功能化脂质体构建的便携式热成像免疫分析方法
CN111504995A (zh) * 2020-05-13 2020-08-07 暨南大学 一种基于比色原理检测磷脂酶a2的方法及其应用

Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20060083781A1 (en) * 2004-10-14 2006-04-20 Shastri V P Functionalized solid lipid nanoparticles and methods of making and using same
EP1838430A2 (en) * 2004-11-09 2007-10-03 Nanolab Systems OY Methods and devices for facile fabrication of nanoparticles and their applications
US20110104052A1 (en) * 2007-12-03 2011-05-05 The Johns Hopkins University Methods of synthesis and use of chemospheres
CN102876328A (zh) * 2012-10-24 2013-01-16 中国药科大学 近红外体内荧光纳米粒探针及其制备方法

Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20060083781A1 (en) * 2004-10-14 2006-04-20 Shastri V P Functionalized solid lipid nanoparticles and methods of making and using same
EP1838430A2 (en) * 2004-11-09 2007-10-03 Nanolab Systems OY Methods and devices for facile fabrication of nanoparticles and their applications
US20110104052A1 (en) * 2007-12-03 2011-05-05 The Johns Hopkins University Methods of synthesis and use of chemospheres
CN102876328A (zh) * 2012-10-24 2013-01-16 中国药科大学 近红外体内荧光纳米粒探针及其制备方法

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
JUN-YONG WANG: "Liposome Encapsulation of Thiol-Capped CdTe Quantum Dots for Enhancing the Intracellular Delivery", 《JOURNAL OF FLUORESCENT》 *

Cited By (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN105300903A (zh) * 2015-10-28 2016-02-03 中国医学科学院输血研究所 一种血红蛋白类载氧药物中总磷脂含量的测定方法
CN105300903B (zh) * 2015-10-28 2018-02-23 中国医学科学院输血研究所 一种血红蛋白类载氧药物中总磷脂含量的测定方法
CN106872422A (zh) * 2016-12-30 2017-06-20 锦州医科大学 量子点检测体液中尿酸的方法
CN107583059A (zh) * 2017-10-31 2018-01-16 宁夏医科大学 一种可包载量子点的阳离子脂质体流感疫苗及其制备方法
CN110068675A (zh) * 2019-05-13 2019-07-30 福州大学 一种基于光热及免疫功能化脂质体构建的便携式热成像免疫分析方法
CN111504995A (zh) * 2020-05-13 2020-08-07 暨南大学 一种基于比色原理检测磷脂酶a2的方法及其应用
CN111504995B (zh) * 2020-05-13 2021-10-12 暨南大学 一种基于比色原理检测磷脂酶a2的方法及其应用

Also Published As

Publication number Publication date
CN103808699B (zh) 2016-03-09

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Li et al. Design of red emissive carbon dots: robust performance for analytical applications in pesticide monitoring
Shen et al. Synthesis-modification integration: one-step fabrication of boronic acid functionalized carbon dots for fluorescent blood sugar sensing
Xu et al. Analysis of intracellular glucose at single cells using electrochemiluminescence imaging
Li et al. Equipment-free and visual detection of multiple biomarkers via an aggregation induced emission luminogen-based paper biosensor
Sun et al. In vivo dynamic monitoring of small molecules with implantable polymer-dot transducer
Lin et al. Signal-on photoelectrochemical immunoassay for aflatoxin B1 based on enzymatic product-etching MnO2 nanosheets for dissociation of carbon dots
Hai et al. Alkaline phosphatase-triggered simultaneous hydrogelation and chemiluminescence
Li et al. Facile and sensitive fluorescence sensing of alkaline phosphatase activity with photoluminescent carbon dots based on inner filter effect
Huo et al. Recent advances of ratiometric electrochemiluminescence biosensors
Zhang et al. Highly sensitive and selective detection of dopamine using one-pot synthesized highly photoluminescent silicon nanoparticles
Jung et al. Quantum dot–dye conjugates for biosensing, imaging, and therapy
Mao et al. One-step synthesis of Rox-DNA functionalized CdZnTeS quantum dots for the visual detection of hydrogen peroxide and blood glucose
Zhao et al. Ultrasensitive DNA detection using highly fluorescent bioconjugated nanoparticles
Jin et al. Biomolecule-stabilized Au nanoclusters as a fluorescence probe for sensitive detection of glucose
Li et al. Ratiometric luminescent detection of bacterial spores with terbium chelated semiconducting polymer dots
CN103808699B (zh) 装载量子点和酶的脂质体及其制备方法和应用
Yang et al. Direct fluorescent detection of blood potassium by ion-selective formation of intermolecular G-quadruplex and ligand binding
Wang et al. Fluorescein provides a resonance gate for FRET from conjugated polymers to DNA intercalated dyes
Faulds et al. Evaluation of surface-enhanced resonance Raman scattering for quantitative DNA analysis
Huang et al. Stimulus response of TPE-TS@ Eu/GMP ICPs: toward colorimetric sensing of an anthrax biomarker with double ratiometric fluorescence and its coffee ring test kit for point-of-use application
Wang et al. Strong acid-assisted preparation of green-emissive carbon dots for fluorometric imaging of pH variation in living cells
Zhang et al. Sensitive single-color fluorescence “off–on” switch system for dsDNA detection based on quantum dots-ruthenium assembling dyads
Wilhelm et al. Spectrally matched upconverting luminescent nanoparticles for monitoring enzymatic reactions
Yuan et al. Enhanced DNA sensing and chiroptical performance by restriction of double-bond rotation of AIE cis-tetraphenylethylene macrocycle diammoniums
Soleymani Advanced materials for optical sensing and biosensing of neurotransmitters

Legal Events

Date Code Title Description
C06 Publication
PB01 Publication
C10 Entry into substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
C14 Grant of patent or utility model
GR01 Patent grant