CN103750038A - 抗育肥猪运输应激的饲料预混剂及抗育肥猪运输应激的方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了止痢草油在制备抗育肥猪运输应激的饲料预混剂中的应用，本发明还公开了一种抗育肥猪运输应激的饲料预混剂及一种抗育肥猪运输应激的方法，所述抗育肥猪运输应激的饲料预混剂中含有止痢草油，所述方法是从育肥猪宰前一个月起，向猪饲料或饲粮中加入0.1-1‰的抗育肥猪运输应激的饲料预混剂。本发明可以改善宰前育肥猪的生产性能，提高宰前育肥猪平均日增重和降低料肉比，具有缓解宰前运输而造成的育肥猪应激反应、肉质下降和运输失重增加的作用，与传统抗应激添加剂相比，其作为一种抗育肥猪运输应激预混剂在缓解育肥猪宰前应激具有明显的优势。
Description
技术领域
本发明属于家畜饲养领域，具体涉及一种抗育肥猪运输应激的饲料预混剂及一种抗育肥猪运输应激的方法。
背景技术
宰前猪肉供应产销地不同的原因，生猪绝大部分需要通过公路由养殖场运至屠宰厂，生猪运输已经成为猪肉生产过程中一个组成部分。育肥猪在运输过程中受到多种应激原的刺激，而出现全身性的非特异性反应。造成育肥猪免疫力降低，易感性增强，死亡率增加，畜产品品质降低，给肉猪养殖业带来严重的经济损失。因此，寻求缓解育肥猪运输应激，降低运输期间育肥猪损失的饲料预混剂成为国内外提高肉猪养殖业经济效益的重要途径。
为了缓解运输应激对育肥猪的影响，通常在运输前采用合成抗氧化剂或神经抑制类药物，这些药物起安定镇静、降低应激敏感性和清除自由基的作用，进而起到一定缓解运输应激的作用。但由于药物清除和残留时间，以及在体内代谢的影响，神经类药物的使用与合成抗氧化剂的添加在各国的使用受到严格的限制。
止痢草是一种唇形科牛至属植物，广泛分布于地中海地区。止痢草油是从止痢草中提取得到的一种植物精油，具有强烈芳香气味，主要由香芹酚、百里香酚等组成。止痢草油所含有的活性成分主要是酚羟类化合物，被证明具有显著的抗菌、消炎的作用，但将其作为育肥猪抗运输应激的饲料预混剂应用于饲料中尚无相关报道。
发明内容
本发明的目的在于解决抗育肥猪运输应激中所存在的问题，提供一种改善育肥猪宰前生产性能，缓解宰前运输应激造成的育肥猪过度应激反应、肉质下降和运输失重，并显著提高经济效益的一种抗育肥猪运输应激的饲料预混剂及抗育肥猪运输应激的方法。
本发明是这样实现的：
一种抗育肥猪运输应激的饲料预混剂，它含有止痢草油。
优选地，所述抗育肥猪运输应激的饲料预混剂含有占重量2-8%的止痢草油，余量为载体。
进一步优选地，所述载体由下述重量百分比的成分组成：40%-60%的玉米芯粉，10%-20%的碳酸氢钙、5-10%的蒙脱石、20%-30%的次麦粉、2%-5%的粘合剂。采用该载体的作用是：能够有效吸附止痢草油，从而提高预混剂的稳定性。当然，所述载体还可以是饲料领域常规的辅料如淀粉、蔗糖、β-环糊精等，其中，由于β-环糊精能与精油在搅拌或超声的条件下制备成包合物，从而不但可以增加止痢草油的生物相容性，还能起到缓释的作用。
下面继续提供一种抗育肥猪运输应激的方法，该方法是：从育肥猪宰前一个月起，向猪饲料或饲粮中加入上述抗育肥猪运输应激的饲料预混剂，所述抗育肥猪运输应激的饲料预混剂的添加量为猪饲料或饲粮重量的0.1-1‰。
优选地，所述抗育肥猪运输应激的饲料预混剂的添加量为猪饲料或饲粮重量的0.5‰。
试验证明，本发明的抗育肥猪运输应激的饲料预混剂在体外具有良好的抗氧化能力，在动物试验中，本发明的饲料预混剂与传统的抗氧化剂维生素E、黄酮类植物提取物以及合成抗氧化剂相比较，本发明能够明显提高平均日增重，提高饲料利用率，节约饲料成本；在运输应激期间可以显著缓解由于运输所带来的过度应激、肉质下降和失重增加的现象，对于育肥猪宰前运输应激的缓解起到重要作用，给育肥猪养殖业带来重大经济效益。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明进行详细说明。
实施例1
一种抗育肥猪运输应激的饲料预混剂，它含有占预混剂重量5%的止痢草油，余量为载体。所述载体由下述重量百分比的成分组成：50%的玉米芯粉，15%的碳酸氢钙、8%的蒙脱石、25%的次麦粉、2%的粘合剂。
所述粘合剂为糖浆，制备时，先将玉米芯粉、碳酸氢钙、蒙脱石、次麦粉混合均匀，然后将止痢草油加入到糖浆中搅拌混匀，最后将糖浆与玉米芯粉、碳酸氢钙、蒙脱石、次麦粉混合搅拌，即得。
抗育肥猪运输应激的方法是：从育肥猪宰前一个月起，向猪饲料或饲粮中加入上述抗育肥猪运输应激的饲料预混剂，所述抗育肥猪运输应激的饲料预混剂的添加量为猪饲料或饲粮重量的0.5‰。
实施例2 止痢草油的体外抗氧化能力评价试验
为了验证本发明的效果，对本发明所选用的止痢草油进行了体外抗氧化能力评价试验：
1 试验材料
1.1 实验动物
SPF级雄性Wistar大鼠，体重250±10g，购于湖北省疾病控制中心。
1.2 试剂
止痢草油，购自广州美瑞康公司；维生素E、维生素C购自杭州晨秀生物科技公司；L-硫辛酸、槲皮素均为食品级，购自湖北远成共创科技有限公司；1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)，为分析级购自sigma公司；2-硫代巴比妥酸、三氯乙酸，其它试剂购自国药集团化学试剂有限公司，均为国产分析纯；试验中所用水均为双蒸水。
1.3 仪器
752型紫外可见光分光光度剂，上海舜宇恒平科学仪器有限公司；多功能酶标仪；5804R台式离心机，eppendorf公司。
2 方法
2.1 DPPH自由基清除能力测定
DPPH自由基清除活性检测采用Om P.Sharma的方法(Sharma,2009)，DPPH分光测定法的测定原理是依据[DPPH·]在515nm处有一强吸收峰，其甲醇溶液呈深紫色。当有自由基清除剂存在时，由于与其单电子配对而使其吸收逐渐消失，其褪色程度与其接受的电子数量成定量关系，因而可用分光法进行定量分析。抗氧化活性以清除DPPH自由基能力大小表示。各取3ml100μM/L的DPPH溶液(以甲醇为溶剂)，加入1ml不同摩尔浓度的抗氧化剂,以甲醇代替抗氧化剂为对照。摇匀后在室温下反应30min，515nm处测吸光度。并求清除率，I%=（A对照-A样品）/A对照×100%，根据线性方程，计算EC50。绘制抗氧化剂清除[DPPH·]自由基的曲线。
2.2 对肝脂质过氧化的抑制（TBARS法）
肝脂质过氧化的抑制采用Sun等的方法（Sun et al.,2005），溶剂略有改动，过氧化脂质的二级分解产物丙二醛在酸性条件下能与硫代巴比妥酸反应生成红色产物，在532nm处有最大吸收。大鼠乙醚麻醉后迅速分离肝组织，用4℃生理盐水洗净，冰浴下匀浆，制成10%的肝匀浆液。取匀浆液各1ml加入不同摩尔浓度的抗氧化剂1ml，对照组以45%乙醇代替。混匀后于37℃水浴1.5h，取出后加10%三氯乙酸2.0ml，终止反应5min。加入0.67%硫代巴比妥酸1.0ml,混匀后沸水浴中反应15min，取出后流水冷却，以4000r·min-1离心10min，取上清液在532nm处比色，以空白管调零，测定吸光度A值，并求算抑制率，I%=（A对照-A样品）/A对照×100%，根据线性方程，计算IC50。绘制抗氧化剂抑制肝脂质自氧化的曲线。
2.3 数据处理与分析
所有试验均重复3次。数据处理采用Excel 2003进行统计分析，结果表示为平均数±标准差形式，进行回归分析和作图。IC50值采用曲线拟合原理，运用IC50计算软件进行换算。
3 试验结果
表1 不同饲料级样品对DPPH·清除率和半抑制率比较
| 抗氧化剂 | 维生素E | 维生素C | 槲皮素 | 止痢草油 | 硫辛酸 |
| EC50(mg/ml) | 0.034 | 0.014 | 0.0071 | 0.069 | — |
注：EC50通过线性拟合法换算得出
3.1 饲料级抗氧化剂对自由基DPPH的清除作用
DPPH法通过半最大效应浓度（concentration for 50% of maximal effect，EC50）来评价不同抗氧化剂清除自由基的能力的结果，由表1可以看出，槲皮素、VE、VC和止痢草油几种抗氧化剂均具有清除自由基的能力，且与其浓度成一定的量效关系，其中槲皮素对自由基的清除能力最强，几种抗氧化剂EC50值相比较：维生素C为77.8μM（0.014mg/ml），维生素E为77.8μM（0.034mg/ml），槲皮素为23.4μM（0.0071mg/ml），止痢草油0.0687mg/ml，硫辛酸对DPPH自由基基本没有清除作用。其清除率能力为：槲皮素＞维生素C＞维生素E＞止痢草油＞硫辛酸。
表2 不同饲料级抗氧化剂对大鼠肝匀浆脂质自氧化抑制率
| 抗氧化剂 | 维生素E | 维生素C | 止痢草油 | 槲皮素 | 硫辛酸 |
| IC50mg/ml | 0.224 | 1.58 | 0.087 | 0.0154 | 0.224 |
注：IC50通过线性拟合法换算得出
3.2 对大鼠肝质脂过氧化的抑制作用
TBARS法通过半抑制浓度（half maximal inhibitory concentration of a substance,IC50）来评价不同抗氧化剂清除自由基的能力的结果实验表明,由表2可以看出，不同抗氧化剂在体外能明显抑制大鼠肝脏质脂过氧化，脂质自氧化的程度随加入看过氧化剂的浓度的上升而下降，且抗氧化剂与脂质自氧化抑制率的动力学反应成曲线状态，其在前期作用较为明显，成一定的线性关系，但至作用后期，则反应较为平缓。几种抗氧化剂IC50值相比较，槲皮素的脂质自氧化抑制率最高，浓度仅为50.9μM（0.0154mg/ml）时，就可抑制体系中50%脂质自氧化，而维生素C为8.99mM（1.58mg/ml），维生素E为0.52mM（0.224mg/ml），硫辛酸25.8mM（5.32mg/ml），止痢草油0.087mg/ml时才能达到相同的效果。脂质自氧化抑制能力：槲皮素＞止痢草油＞维生素E＞维生素C＞硫辛酸。
4 小结
从上述实验结果可以看出，适合抗运输应激的的备选天然抗氧化剂有：槲皮素、止痢草油和维生素E，但从止痢草油所具有的良好的适口性和芬芳香气来看，止痢草油是理想的选择，因此，从这一角度出发，继续进行抗运输应激预混剂同传统抗应激添加剂进行动物比较。
实施例3 日粮添加止痢草油和维生素E对肥育猪生长性能、肉品质及抗运输应激的效果比较试验
1 材料与方法
1.1 试验设计
选择日龄相同或相近（<3d）、体重相同或相近（<5kg）公母各半体重78kg左右的育肥猪共计300头，把猪分成3组，每组100头，分别饲养在6个栏里面（16头/栏）进行饲喂和管理（饲喂日粮见表3）。
表3.试验猪分组与日粮处理
| 试验分组 | 日粮处理 |
| 对照组（100头） | 饲喂基础日粮 |
| 处理1组（100头） | 饲喂基础日粮+200mg/kg维生素E |
| 处理2组（100头） | 饲喂基础日粮+500mg/kg抗运输应激预混剂 |
注：各组猪分栏饲养，每组分别饲养在6个栏里面，16头猪/栏，共计18个栏。其中，处理1和处理2日粮在基础日粮中分别添加VE、预混剂配制成成品料。
1.2 动物饲养管理
根据试验设计，把猪分组合栏后，适应期先用基础日粮饲喂7d，正式试验期分别饲喂基础日粮或添加200mg/kg维生素E、500mg/kg抗育肥猪运输应激饲料预混剂的日粮30d，自由采食和饮水。各栏舍每日结料一次，并统计其平均日采食量；在试验开始和结束时分别测定每头猪的初始体重和末重，并统计得出平均日增重。饲喂结束后，每组挑选出60头体重接近，共计180头猪，根据模拟运输应激条件，进行高密度长时间（5h）或低密度短时间运输（1h）运送至屠宰场进行屠宰。采集血液和相关组织。
1.3 模拟运输应激及屠宰
运输猪的卡车为每车装三层运输，每层有10个小栏，共30小栏，每个小栏规格为1900mmx1250mm，面积约2.375m2，屠宰猪活重约为100kg。试验中低密度和高密度分别装载4头和6头猪/小栏，密度分别为168kg/m2、252kg/m2。其中，非应激处理猪低密度（4头/栏）装载先运输至屠宰场（约1h的运输时间），安置在栏舍内，只供饮水，休息过夜；应激处理组以高密度（6头/栏）模拟长途运输5h后至屠宰场立即屠宰（模拟运输应激方案见表4）。试验猪全部运输至武汉中粮肉食品加工厂进行屠宰，采用电麻击晕屠宰方式。
1.4 肉质指标的测定
测定屠宰后猪左半胴体背最长肌45min及4℃储存1d、2d和3d时pH、导电率（EC）、肉色（MCV）、24h内的滴水损失（Drip loss）和肌内脂肪（IMF）含量。pH测定采取倒数第1-2胸椎段背最长肌中心部位，利用pH计进行测定；导电率测定利用德国产LF-STAR导电测定仪对倒数第1-2胸椎段背最长肌中心部位进行测定；肉色用德国产OPTO-STAR肉色测定仪对胸腰椎结合处背最长肌横断面进行测定；滴水损失测定采用EZ-滴水损失测定法；取胴体第10-12胸椎部背最长肌新鲜肉样，用氯仿-乙醇萃取法测定肌内脂肪含量。
1.5 血清生化指标的检测
血清的制备方法：每头猪采约20mL血液及时分装于3个10mL离心管中，在室温中静置1小时，待血清析出后，在高速离心机中4℃，3000r/min离心15min，离心后取上清液分装于5个1.5ml的离心管中，编号后于-80℃冰箱中保存备用。主要检测了血清中皮质醇、肌酸激酶（CK）。其中，皮质醇使用R&D公司的ELISA试剂盒进行测定；CK使用南京建成生物工程研究所的相应的试剂盒测定。
1.6 数据统计方法
所有试验数据经过Excel统计分析，然后采用SAS（8.0）单因素（或双因素）GLM程序分析比较了两种运输应激方式和三种不同日粮对各处理组猪生长性能、肉品质指标、血液生化指标的差异显著性(显著水平以P<0.05为差异显著，以P<0.01为差异极显著)。数据以平均值±标准差的方式表示。
表4.模拟运输应激猪分组与处理
注：非应激和应激处理猪分两车次，小栏装载的方式运输至屠宰场，各处理组每小栏选择两头猪（公母各一头）进行屠宰试。
2 结果与分析
2.1 日粮添加抗运输应激预混剂和VE对猪生长性能的影响
由表5可以看出，各组的平均日采食量没有显著差异(P>0.05)；与对照组相比，抗运输应激预混剂组试验猪结束体重和总增重均有提高的趋势(P=0.0575)，平均日增重显著高于对照组(P=0.0546)。抗运输应激预混剂组和VE组的料肉比分别比对照组降低8.6%和5.4%，其中抗运输应激预混剂组和对照组相比差异显著(P<0.05)。
表5 日粮添加止痢草油和VE对肥育猪生长性能的影响
| 项目 | 对照组 | VE组 | 预混剂组 | P值 |
| 重复数（栏） | 6 | 6 | 6 | |
| 样本数（头） | 94 | 93 | 93 | |
| 试验期(d) | 28 | 28 | 28 | |
| 初始体重(kg) | 77.74±0.38 | 77.62±0.85 | 78.01±0.49 | 0.5351 |
| 结束体重(kg) | 101.97±1.80b | 102.63±2.09ab | 104.79±1.91a | 0.0575 |
| 试验期增重(kg) | 24.23±1.87b | 25.01±1.30ab | 26.78±2.25a | 0.0803 |
| 平均日增重(kg) | 0.88±0.07b | 0.91±0.04ab | 0.97±0.07a | 0.0546 |
| 平均日采食量(kg) | 2.44±0.18 | 2.39±0.10 | 2.47±0.09 | 0.5459 |
| 料肉比(FCR,%) | 2.78±0.19a | 2.63±0.08ab | 2.54±0.09b | 0.0213 |
注：数据采用SAS（8.0）单因素GLM程序分析，比较了三种不同日粮对各处理组猪生长性能指标的差异显著性。显著水平以P<0.05为差异显著，以P<0.01为差异极显著。标注不同字母表示差异显著。
2.2 运输应激对猪肌肉品质的影响
由表6-1、6-2、6-3可见，长时间（运输5h）、高密度（6头/小栏）模拟运输应激处理（下称应激组）与非应激组相比，猪背最长肌的pH45min极显著降低（P<0.01），而当4℃储藏1d、2d后，二组pH值差异不显著，但第3d应激组的pH显著低于非应激组（P<0.05）。对肌肉各时间点测定的肉色差异均不显著（P>0.05）；宰后45min、24h和48h测定导电率的差异不显著（P>0.05），但是第72h应激组的导电率值显著高于非应激组（P<0.05）。值得注意的是，与非应激组相比，应激组肌肉滴水损失显著提高（P<0.05）。
2.3 日粮中添加抗运输应激预混剂和VE对猪肌肉品质的影响
由表6-1、6-2、6-3可见，不同日粮处理组猪肌内脂肪含量差异不显著（P>0.05）。与对照组相比，日粮中添加抗运输应激预混剂、VE组的pH45min和pH24差异不显著（P>0.05），但是第2d、3d的pH显著低于对照组（P<0.05）。各处理日粮测定的45min肉色差异不显著（P>0.05），但24h和48h的肉色值差异显著（P<0.05）。不同日粮处理对肌肉导电率的影响差异不显著（P>0.05）；基础日粮、VE和抗运输应激预混剂组肌肉滴水损失差异不显著（P>0.05），但有依次降低的趋势（P=0.06）。
表6-1 日粮添加预混剂和VE对非应激处理猪肉品质的影响
表6-2 日粮添加预混剂和VE对运输应激处理猪肉品质的影响
表6-3 两种运输应激方式和三种不同日粮对各处理组猪肉品质的差异性分析
注：数据采用SAS（8.0）双因素GLM程序分析，比较了两种运输应激方式和三种不同日粮对各处理组猪肉品质差异显著性。显著水平以P<0.05为差异显著，以P<0.01为差异极显著。
表7-1 日粮添加抗运输应激预混剂和VE对非应激处理的猪血清生化指标的影响
表7-2 日粮添加抗运输应激预混剂和VE对应激处理的猪血清生化指标的影响
表7-3 两种运输应激方式和三种不同日粮对各处理组猪血清生化指标的差异性分析
注：数据采用SAS（8.0）双因素GLM程序分析，比较了两种运输应激方式和三种不同日粮对各处理组猪血清生化指标的差异显著性。显著水平以P<0.05为差异显著，以P<0.01为差异极显著。
2.4 日粮添加抗运输应激预混剂和VE对猪血清生化指标的影响
由表7-1、7-2、7-3可以看出，应激组皮质醇含量与非应激组相比没有显著差异（P>0.05），而不同日粮处理间有依次下降的趋势，特别是添加预混剂组较对照组在应激和非应激情况下均有使皮质醇分泌减少的趋势（P=0.06）。而肌酸激酶的含量，在运输应激和不同日粮处理条件下各组间差异均不显著（P>0.05）。
本研究结果表明，在育肥期最后1个月的日粮中添加抗运输应激预混剂可以显著提高平均日增重，改善饲料报酬。长途运输会造成猪应激的发生，导致肌肉pH下降、滴水损失升高，但对肉色、导电率和肌内脂肪含量几乎没有影响。抗运输应激预混剂和VE对运输应激均有一定的缓解作用，在一定程度上抑制了肌肉pH的降低和滴水损失的增加，其中止痢草油对肉质的改善作用优于维生素E。抗运输应激预混剂的添加相比较传统抗氧化剂维生素E具有更优的缓解运输应激的作用。与对照组相比，育肥猪屠宰前短期饲喂抗育肥猪运输应激饲料预混剂，可以显著提高经济效益。从上述实验我们可以看出抗运输应激预混剂较传统的抗氧化剂具有更好的抗运输应激的效果，我们以此为出发点，进一步比较不同类型添加剂的抗运输应激效果。
实施例4 日粮添加不同抗氧化剂对缓解育肥猪运输应激和改善肉质的筛选试验
1 材料与方法
1.1 试验动物与分组
选择日龄、体重、遗传背景接近的育肥猪共计336头。把猪群分成4组，每组5个栏，每栏平均17头猪，共计84头，公母比一致，进行饲喂和管理，饲喂处理日粮28d（饲喂日粮见表8）。
表8 试验猪分组与日粮处理
| 试验分组 | 日粮处理 |
| 负对照组（84头） | 饲喂基础日粮 |
| 正对照组（84头） | 饲喂基础日粮+200mg/kgVE |
| 处理1组（84头） | 饲喂基础日粮+25mg/kg槲皮素 |
| 处理2组（84头） | 饲喂基础日粮+500mg/kg抗运输应激预混剂 |
注：槲皮素为食品级，有效成分98%。
1.2 猪屠宰前的饲养管理
根据试验设计，把猪分组完成后，日粮饲喂见表8，自由饮水，记录每天猪舍温度，育肥猪日采食量。饲喂结束后，每组挑选出36头，共计144头，根据模拟运输应激条件，进行高密度（6头/栏）长时间（5h）运送至屠宰场进行屠宰（模拟运输应激方案见表9），采集血液和相关组织。
表9 猪分组与处理
1.3 运输密度
通常运送猪的卡车为每车装三层运输，每个小栏规格为1900mmx1250mm，面积约2.375m2，每层有10个小栏，共30小栏，屠宰猪活重约为100kg。若以每小栏装载4、5、6头猪计算，则密度分别为168kg/m2、210kg/m2、252kg/m2。因此，运输应激模型构建参考（柴进，2010）：应激处理采用高密度（6头/栏，每栏挑选2头进行屠宰实验）与长时间（5小时）组合运输，运输抵达屠宰场后立即电麻击晕屠宰，每组需处理共36头，分6个小栏装载，其中每栏选取出2头（12头）屠宰采样。
1.4 肉质指标的测定
测定屠宰后猪左半胴体背最长肌45min及4℃储存24h时pH、导电率（EC）、肉色（MCV）值、24h、48h和72h内的滴水损失（Drip loss）含量。pH测定采取倒数第1～第2胸椎段背最长肌中心部位，利用pH计进行测定；导电率测定利用德国产LF-STAR导电测定仪对倒数第1～第2胸椎段背最长肌中心部位进行测定；肉色用德国产OPTO-STAR肉色测定仪对胸腰椎结合处背最长肌横断面进行测定；滴水损失测定采用EZ-滴水损失测定法。
1.5 胴体性状的测定
测定育肥猪运输前体重，测定屠宰后猪空体重、胴体重、胴体直长、胴体斜长、背膘厚（腰荐膘厚、F膘厚）、屠宰率。屠宰率：指胴体重(放血、脱毛后除去头、蹄、尾和内脏，保留板油和肾脏的重量)占宰前空腹重的比率（空腹24小时），或占空体重(空体重=宰前体重—胃肠道和膀胱内容物重量)的比率(采用空体重无需停食)；胴体重：肉猪经放血、退毛、开膛除去板油和肾脏以外的全部内脏，去头(沿耳根后缘及下颌第一条自然横褶切离寰、枕关节)。去蹄(前肢断离腕掌关节，后肢在跗关节内侧断离第一间褶关节)和尾(紧贴肛门切断尾根)。开片成左右对称的胴体(背线切面要整齐)，左右两片胴体之和(包括板油和肾)即胴体重；膘厚：第6和第7胸椎接合处用游标卡尺测定皮下脂肪层厚度。或采用三点膘厚平均即肩部最厚处、胸腰椎结合处、腰荐结合处三点膘厚平均。(采用时须加说明)；胴体直长：从耻骨联合前缘中点至第一颈椎前缘中点的长度；胴体斜长：胴体在倒挂状态下从耻骨联合前缘中点至第一肋骨与胸骨结合处的长度。
1.6 血清生化指标的检测
血清的制备方法：每头猪采约20mL血液及时分装于3个10mL离心管中，在室温中静置1小时，待血清析出后，在高速离心机中4℃，3000r/min离心15min，离心后取上清液分装于5个1.5ml的离心管中，编号后于-80℃冰箱中保存备用。主要检测了血清中皮质醇、去甲肾上腺素、葡萄糖、肌酸激酶（CK）。其中，皮质醇和去甲肾上腺素使用R&D公司的ELISA试剂盒进行测定；葡萄糖采用葡萄糖氧化酶法测定；CK使用南京建成生物工程研究所试剂盒测定；
1.7 数据统计方法
所有试验数据经过Excel统计分析，然后采用SAS（8.0）单因素）GLM程序分析比较了四种不同日粮对各处理组猪生长性能、肉品质指标、胴体性状指标的差异显著性(显著水平以P<0.05为差异显著，以P<0.01为差异极显著)。数据以平均值±标准差的方式表示。
2 结果与分析
2.1 日粮添加不同天然抗氧化剂对育肥猪猪生长性能的影响
表10 日粮添加不同抗氧化剂对肥育猪生长性能的影响
| 项目 | 负对照组 | 正对照组 | 处理一组 | 处理二组 | P值 |
| 重复数 | 5 | 5 | 5 | 5 | |
| 样本数 | 81 | 81 | 71 | 79 | |
| 时间(d) | 26 | 26 | 26 | 26 | |
| 入试体重/kg | 74.02±1.32 | 72.36±2.21 | 73.81±2.61 | 74.71±3.52 | 0.5359 |
| 结束体重/kg | 99.12±0.90b | 99.10±2.23b | 102.43±2.06ab | 103.83±4.97a | 0.0482 |
| 试验期总增重/kg | 25.10±0.87b | 26.74±2.04ab | 28.62±2.91a | 29.12±3.06a | 0.034 |
| 平均日增重/kg | 0.97±0.03b | 1.03±0.07ab | 1.10±0.11a | 1.12±0.12a | 0.0334 |
| 日均采食量/kg | 2.73±0.07 | 2.77±0.17 | 2.91±0.10 | 2.84±0.19 | 0.3602 |
| 料肉比 | 2.83±0.10a | 2.71±0.16a | 2.65±0.16ab | 2.55±0.29b | 0.026 |
注:结果表示为平均值±标准差，数据采用SAS(8.0)单因素GLM程序分析,比较了四种不同日粮对各处理组猪生长性能指标的差异显著性.显著水平以P<0.05为差异显著,以P<0.01为差异极显著。标注不同字母表示差异显著。
由表10可以看出，各组试验猪间入试体重差异不显著（P>0.05）；在试验期结束后，正对照组与负对照组相比，结束体重、试验期平均总增重和平均日增重均无差异（P>0.05）；处理二组和负对照组相比，显著提高结束体重、试验期平均总增重和平均日增重（P<0.05），处理一组与负对照组相比结束体重没有差异，但显著提高育肥猪试验期平均总增重和平均日增重（P<0.05）；在整个试验期内，各个时期各组试验猪间平均日采食量均无差异（P>0.05）；正对照组和负对照组相比，料肉比也无差异（P>0.05），但处理二组与负对照组和正对照组相比显著降低育肥猪料肉比（P<0.05），处理一组和其余几组相比料肉比均无差异。
2.2 日粮中添加不同天然抗氧化剂对育肥猪运输应激胴体性状的影响
表11 日粮添加不同抗氧化剂对运输应激猪胴体性状的影响
| 项目 | 负对照组 | 正对照组 | 处理一组 | 处理二组 | P值 |
| 重复数 | 12 | 12 | 12 | 12 | |
| 运输初重（kg/cage） | 623.33±18.44 | 622.00±15.76 | 617.83±22.22 | 609.33±32.99 | 0.7266 |
| 运输末重（kg/cage） | 608.17±19.29 | 605.50±12.49 | 601.33±18.78 | 597.00±32.15 | 0.8252 |
| 运输失重（kg/cage） | 15.17±6.68 | 16.50±6.53 | 16.50±4.09 | 12.33±5.57 | 0.5712 |
| 宰前体重/kg） | 101.36±3.07 | 100.92±1.98 | 100.12±3.11 | 99.50±5.11 | 0.5878 |
| 胴体重/kg） | 68.42±2.62b | 67.83±5.06b | 70.82±4.79ab | 73.39±5.63a | 0.0362 |
| 屠宰率(%) | 67.00±2.75b | 67.94±4.72b | 70.67±4.67ab | 72.58±6.35a | 0.0345 |
注:结果表示为平均值±标准差（n=12），数据采用SAS(8.0)单因素GLM程序分析,比较了四种不同日粮对各处理组猪胴体性状指标的差异显著性.显著水平以P<0.05为差异显著,以P<0.01为差异极显著。标注不同字母表示差异显著。
由表11可见，在运输应激状态下，各日粮处理对育肥猪运输失重均无差异性（P>0.05），但与负对照组相比，处理二组可以降低育肥猪平均每栏18.7%由运输过程中所带来的失重。各日粮处理宰前体重没有差异，但日粮中处理二的添加同负照组、正对照相比，可以提高育肥猪胴体重和屠宰率，且差异显著（P<0.05），而处理一同其余各组在育肥猪胴体重和屠宰率的影响没有差异。
2.3 日粮中添加不同抗氧化剂对育肥猪运输应激肉品质的影响
表12 日粮添加不同抗氧化剂对运输应激猪肉质的影响
| 项目 | 负对照组 | 正对照组 | 处理一组 | 处理二组 | P值 |
| 重复数 | 12 | 12 | 12 | 12 | |
| pH45min | 6.12±0.34b | 6.33±0.23a | 6.42±0.17a | 6.46±0.16a | 0.0074 |
| pH24h | 5.67±0.09 | 5.81±0.13 | 5.85±0.18 | 5.73±0.18 | 0.027 |
| 导电率45min | 4.65±0.16 | 4.64±0.15 | 4.63±0.18 | 4.66±0.21 | 0.9815 |
| 导电率24h | 4.51±0.20 | 4.50±0.20 | 4.67±0.20 | 4.59±0.20 | 0.1863 |
| 色值45min | 74.37±5.30 | 76.93±2.48 | 76.22±2.41 | 76.22±3.04 | 0.304 |
| 色值24h | 45.33±3.28B | 51.95±5.52A | 50.18±5.35A | 52.91±4.92A | 0.002 |
| 滴水损失24h（%） | 0.37±0.38A | 0.17±0.30AB | 0.04±0.07B | 0.03±0.05B | 0.021 |
| 滴水损失48h（%） | 1.25±0.38A | 0.88±0.39AB | 0.44±0.56B | 0.80±0.38AB | 0.004 |
| 滴水损失72h（%） | 1.55±0.31a | 1.43±0.55a | 0.89±0.50b | 1.15±0.55ab | 0.0161 |
注:结果表示为平均值±标准差（n=12），数据采用SAS(8.0)单因素GLM程序分析,比较了四种不同日粮对各处理组猪肉质指标的差异显著性.显著水平以P<0.05为差异显著,以P<0.01为差异极显著。标注不同字母表示差异显著。
由表12可见，在运输应激作用下，不同日粮处理对肉质pH24h、导电率45min、导电率24h和色值45min的影响均无差异性（P>0.05）；正对照和处理一、处理二和负对照相比较均能显著提高pH45min和色值24h（P<0.05）。同负对照组相比，正对照组于滴水损失的影响在不同时间点均无差异，而处理一能够显著降低24h和48h育肥猪滴水损失（P<0.01），显著降育肥猪肉72h滴水损失水平（P<0.05）；日粮中添加处理二同负对照组相比可以极显著降低24h的滴水损失（P<0.01）。
2.4 日粮添加不同抗氧化剂对猪血清生化指标的影响
表13 日粮添加不同抗氧化剂对运输应激猪血液生化指标的影响
注:结果表示为平均值±标准差（n=6），数据采用SAS(8.0)单因素GLM程序分析,比较了四种不同日粮对各处理组猪血液生化指标的差异显著性.显著水平以P<0.05为差异显著,以P<0.01为差异极显著。标注不同字母表示差异显著。
由表13可以看出，在运输应激状态下，日粮中添加天然抗氧化剂都显著降低血清中皮质醇和去甲肾上腺素水平（P<0.05），不同抗氧化剂之间差异不显著；和负对照组相比，处理二组具有降低血清中肌酸激酶的趋势，但是差异不显著（P=0.1）；运输应激状态下，处理一同其它日粮处理相比，可以极显著的提高血清中葡萄糖的水平（P<0.01）。
3 小结
本研究结果表明，在育肥期最后1个月中日粮中添加抗育肥猪运输应激饲料预混剂可以显著提高平均日增重，改善饲料报酬。长途运输会造成猪应激的发生，导致肌肉pH下降、肉色降低、滴水损失升高，但对导电率几乎没有影响。不同天然抗氧化剂对运输应激均具有一定的缓解作用，在一定程度上抑制了肌肉pH和色值的降低和滴水损失的增加，而饲喂抗育肥猪运输应激饲料预混剂对肉质的改善作用优于其余不同处理。在育肥期最后1个月的日粮中添加抗育肥猪运输应激饲料预混剂可以显著提高育肥猪胴体重和屠宰率，改善育肥猪屠宰性能与对照组相比，育肥猪屠宰前短期饲喂抗育肥猪运输应激饲料预混剂，可以显著提高经济效益。
由以上三个试验结果可以看出，抗育肥猪运输应激饲料预混剂在体外具有良好的抗氧化能力，可用于缓解运输应激，在动物试验中，抗育肥猪运输应激饲料预混剂与传统的抗氧化剂维生素E、黄酮类植物提取物以相比较，抗育肥猪运输应激饲料预混剂能够明显提高平均日增重，提高饲料利用率，节约饲料成本；在运输应激期间可以显著缓解由于运输所带来的过度应激、肉质下降和失重增加的现象，对于育肥猪宰前运输应激的缓解起到重要作用。给育肥猪养殖业带来重大经济效益。
实施例5
一种抗育肥猪运输应激的饲料预混剂，它含有占预混剂重量2%的止痢草油，余量为载体。所述载体为β-环糊精。制备方法是：先将β-环糊精用水在70℃溶解并制成饱和溶液，然后向溶液缓慢加入止痢草油并同时搅拌，继续搅拌30分钟，然后冷却使β-环糊精析出，将析出的沉淀低温干燥，即得止痢草油β-环糊精包合物。
抗育肥猪运输应激的方法是：从育肥猪宰前一个月起，向猪饲料或饲粮中加入上述抗育肥猪运输应激的饲料预混剂，所述抗育肥猪运输应激的饲料预混剂的添加量为猪饲料或饲粮重量的1‰。
实施例6
一种抗育肥猪运输应激的饲料预混剂，它含有占预混剂重量8%的止痢草油，余量为载体。所述载体由下述重量百分比的成分组成：40%的玉米芯粉，20%的碳酸氢钙、10%的蒙脱石、25%的次麦粉、5%的粘合剂。
所述粘合剂为淀粉浆，制备时，先将玉米芯粉、碳酸氢钙、蒙脱石、次麦粉混合均匀，然后将止痢草油加入到淀粉浆中搅拌混匀，最后将淀粉浆与玉米芯粉、碳酸氢钙、蒙脱石、次麦粉混合搅拌，即得。
抗育肥猪运输应激的方法是：从育肥猪宰前一个月起，向猪饲料或饲粮中加入上述抗育肥猪运输应激的饲料预混剂，所述抗育肥猪运输应激的饲料预混剂的添加量为猪饲料或饲粮重量的0.1‰。
Claims (6)
1.止痢草油在制备抗育肥猪运输应激的饲料预混剂中的应用。
2.一种抗育肥猪运输应激的饲料预混剂，其特征在于：它含有止痢草油。
3.根据权利要求2所述的抗育肥猪运输应激的饲料预混剂，其特征在于：它含有占预混剂重量2-8%的止痢草油，余量为载体。
4.根据权利要求3所述的抗育肥猪运输应激的饲料预混剂，其特征在于：所述载体由下述重量百分比的成分组成：40%-60%的玉米芯粉，10%-20%的碳酸氢钙、5-10%的蒙脱石、20%-30%的次麦粉、2%-5%的粘合剂。
5.一种抗育肥猪运输应激的方法，其特征在于：从育肥猪宰前一个月起，向猪饲料或饲粮中加入抗育肥猪运输应激的饲料预混剂，所述抗育肥猪运输应激的饲料预混剂的添加量为猪饲料或饲粮重量的0.1-1‰，所述抗育肥猪运输应激的饲料预混剂含有占预混剂重量2-8%的止痢草油，余量为载体。
6.根据权利要求5所述的抗育肥猪运输应激的方法，其特征在于：所述抗育肥猪运输应激的饲料预混剂的添加量为猪饲料或饲粮重量的0.5‰。
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