CN103735675B - 一种具有保肝功能的药物组合物及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种具有保肝功能的药物组合物及其制备方法，属于中药领域。它是由下列重量份的原料药制成：沙棘28～38份，葛根32～52份，栀子22～32份，肉豆蔻19～25份，本发明优选剂型是软胶囊。本发明根据中医药理论与肝脏的生理功能特点，采用辨证的理论，经科学配伍组方而成，经功能性药理实验表明本发明提供的保健品具有较好的保护肝脏，促进肝细胞修复，提高肝功能和再生的作用，且药物安全可靠。

Description

一种具有保肝功能的药物组合物及其制备方法

技术领域

本发明属于医药、食品、保健品领域，具体涉及具有保肝作用的药物组合物。

背景技术

由于生活压力较大，生活与工作环境的恶化，致使因接触化学性毒物（如酒精与其他有毒物质）所引起的肝损伤的人数也在不断增加，其中酗酒和酒精中毒者逐渐增多，从事化学药物合成和化工生产行业的工作人员中化学性肝损伤的人数也日益增多。由化学性肝损伤所引发的急慢性肝炎患者也在增加，严重影响了人们的身心健康。目前市场上有各种保肝护肝的药物与保健品，然而现有的保肝护肝药与保健品在保护人们肝脏的同时，其本身也存在损肝的物质，所以，长期服用疗效不佳。

2010版药典收载的沙棘是颓子科植物沙棘Hippophae rhamnoides L.的干燥成熟果实。性酸、涩、温，归脾、胃、肺、心经。健脾消食，止咳祛痰，活血散瘀。

2010版药典收载的葛根是豆科植物野葛Pueraria lobata（Willd.）Ohwi的干燥根。性甘、辛、凉。归脾、胃、肺经。解肌退热，生津止渴，透疹，升阳止泻，通经活络，解酒毒。

2010版药典收载的栀子是茜草科植物栀子Gardenia jasminoides Ellis的干燥成熟果实。性苦，寒，归心、肺、三焦经。泻火除烦，清热利湿，凉血解毒；外用消肿止痛。

2010版药典收载的肉豆蔻是肉豆蔻科植物肉豆蔻Myristica fragrans Houtt.的干燥种仁。性辛、温，归脾、胃、大肠经。温中行气，涩肠止泻。

肝脏是人体最大并且最重要的解毒器官，它对来自外界环境和机体自身代谢产生的毒素都具有强大的防御和解毒的功能。在日常生活中，化学性的有害物质会通过胃肠道、血液循环进入肝脏，然后进行转化，所以，肝脏容易受到这些物质的损害，进而造成化学性肝损伤。

病毒性肝炎、脂肪肝、肝纤维化、药物性肝损害、酒精肝及肝硬化肝癌等肝病是当今威胁人类健康的主要疾病，我国的肝病发生率较高。保肝包括保护肝细胞，促使肝细胞再生，加速肝功能恢复，防止肝纤维化的产生等，是预防肝病的重要方法。近年来，有不少文献报道中药对急慢性肝脏损伤疾病有确切疗效，其中很多具有减轻组织、肝细胞损伤和促使受损肝细胞修复和再生恢复肝脏功能的作用。

有机凝胶是指某些小分子有机化合物在浓度很低的情况下，通过静电力、疏水力、氢键以及π-π相互作用等分子间非共价键，自发的组装、聚集，使有机溶剂凝胶化后形成的具有三维网状结构的药物载体。

原位凝胶，也称在位凝胶，它是一类以溶液状态给药后，能在特定环境（如温度、pH或离子强度等）下发生相的转变，由液态转化为非化学交联半固体凝胶的制剂。原位凝胶作为一种新型缓控释给药载体，能够以液体状态自由加载各种不同性质的药物，也可以作为微球、脂质体及纳米粒等药物传递系统的载体。它以液体状态给药后，在用药部位即发生相转变，由液态转化形成非化学交联的半固体状态。可有效延长药物在用药部位滞留时间，达到缓释长效的目的。凝胶剂也具有良好的组织相容性，在给药部位的滞留时间较长，同时也可起到贮存药物，防止药物受环境影响等作用。原位凝胶剂作为一种新型药物剂型，广泛的用于缓释控释及脉冲释放等新型给药系统，原位凝胶可应用于皮肤眼部鼻腔口腔阴道直肠等多种途径给药。现今，原位凝胶给药系统已成为药剂学与生物技术领域的一个研究热点，但目前却未发现原位凝胶技术应用于软胶囊制剂中。

检索相关文献，结果有关以沙棘、葛根、栀子、肉豆蔻有效成分组方进行保肝与原位凝胶技术研究情况及专利如下。

中国专利（CN200610170462.3）一种具有解酒保肝作用的药物组合物，报道了一种具解酒保肝作用的药物组合物，组合物由桅子、木瓜、葛花、枳椇子、葡萄子组成，酒前服用，可有效防醉。

中国专利（CN200910061280.6）一种解酒保肝剂及制备方法，报道了一种解酒保肝剂及制备方法，它由枳椇子、葛根、五味子提取物制成。该配方清热利湿、化癖解毒、肝胃并治、行敛相兼，具有抑制酒精吸收和促进酒精排泄，对抗酒精所致肝脏氧化损伤的作用，能增强人体对酒精的耐受能力并减低酒精对肝脏的损伤。

中国专利（CN200910304933.9）一种保肝护肝的中药组合物及其制备方法和质量控制方法，报道了一种保肝护肝的中药组合物及其制备方法和质量控制方法，该中药组合物包括:葛根、枳惧果、绿茶叶、茵陈、积雪草、菊花、陈皮和干姜，具有显著的保肝作用。

中国专利（CN201110412910.7）一种具有保肝作用的保健品及其制备方法，报道了该具有保肝作用的保健品由下列重量份数的原料药制成:铁皮石解1-5份，西洋参3-8份，葛根12-20份。经药理实验表明本发明提供的保健品具有很好的保护肝脏，能有效提高肝功能，促进肝细胞修复和再生的作用，且不良反应低，服用安全。

中国专利（CN201210215685.2）一种快速降低转氨酶与保肝的药物，本发明公开了一种快速降低转氨酶与保肝的药物，它是以木瓜、甘枸杞、鱼腥草、蒲公英、桅子、麦芽、桃仁、大枣、山药、茯苓、山碴、沙棘、陈皮、紫苏、薏苡仁、甘草为原料，按中药药剂学的制剂工艺制备成任何一种服用剂型。

中国专利（CN200810041212.9）一种壳聚糖原位凝胶药剂的制备方法，报道了其步骤为：第一步，将壳聚糖溶解于水溶液和/或含共溶剂的水溶液；第二步，将药物加入到壳聚糖的溶液，并充分搅拌；第三步，CO₂气氛下，在搅拌条件下，将强碱弱酸盐缓慢加入到壳聚糖溶液中，继续搅拌；第四步，在CO₂保护下，将混均的壳聚糖溶胶分装于具塞无菌瓶中并密封或填充于喷雾装置中即得到壳聚糖原位凝胶载药制剂。本发明不仅避免了制剂生产过程中有机溶剂的使用，而且简化了制剂生产的流程、扩大了制剂的应用途径。

中国专利（CN200910093291.2）穿琉宁原位凝胶制剂及其制备方法，报道了以水为溶媒，由穿琉宁及本领域公认的原位凝胶基质及其它药剂学必要的药用辅料制备而成的穿琉宁原位凝胶。

中国专利（CN200910160992.3）奥洛他定原位凝胶的制备与应用，报道了奥洛他定pH敏感型凝胶是采用调节卡波姆980和轻丙基甲基纤维素(HPMC)的用量实现的。该制剂可通过眼部或鼻腔用药大大延长了药物在给药部位的滞留时间，提高了生物利用度，改善了疗效，有着理想的应用前景。

中国专利（CN201110188614.3）一种用于退热的直肠用原位凝胶剂及其制备方法，报道了其制备方法，以质量分数计，包括以下组分:退热药物1-20%、原位凝胶基质5-30%、增粘剂0.1-10%、润滑剂0.1-10%、防腐剂0.1-10%、透皮吸收调节剂0.1-10%，余量为水。本发明提供的用于退热的直肠用原位凝胶剂不仅没有用药死角，同时还通过添加生物粘附物质加强吸附能力延长药物作用，减少固体制剂引起的便意引起药物的排泄;具有良好的包容性，既可以是具体的药用成分也可以是中药提取物的有效成分。

综上所述可知，专利报道的组方成分复杂，提取工艺较为繁琐，生产的软胶囊有效成分含量不均匀，不适宜大规模工业化生产。原位凝胶技术广泛应用于鼻腔给药、直肠给药等外用剂型中，并且有在病患处分布均匀、广泛、持久的特点，取得了显著地疗效。但是现有专利报道并未提及原位凝胶技术应用于软胶囊中。

发明内容

本发明提供一种具有保肝功能的药物组合物及其制备方法，以解决现有的组方中成分复杂、生产工艺繁琐以及生产的软胶囊有效成分含量不均匀的问题。

葛根为传统医学中最具代表性的解酒药物，为君药；沙棘含多种有机酸，可增强养肝护肝，助葛根醒酒保肝，为臣药；肉豆蔻主温中行气，涩肠止泻，开胃消食，为佐药，助君臣药缓解酒后痞满食少诸症；栀子清利湿热，调和诸药，为使药。四药相合，具有解酒保肝、补中润燥、清热生津、理气健脾作用，特别可于酒后服用。

本发明的药物各组分用量也是经过发明人进行大量的摸索后总结得出的，各组分用量在下述重量范围内具有较好的疗效：

沙棘28～38份，葛根32～52份，栀子22～32份，肉豆蔻19～25份。

优选地：

沙棘33份，葛根42份，栀子27份，肉豆蔻22份。

本发明的组合物提取物可通过如下制备方法得到软胶囊：

①取沙棘，粉碎、过40-60目筛，以CO₂超临界萃取有效组分，萃取温度35-40℃，萃取压力25-40MPa，萃取时间3-4h，萃取流速18-22kg/h，得到油状活性成分；

②将葛根、栀子、肉豆蔻混合，粉碎，过20-60目筛，加入8-12倍体积的浓度为50%-80%的乙醇，进行提取，提取2～3次，每次4-6个小时，提取液进行浓缩、干燥至干粉；

③将得到的上述活性成分提取物合并后，溶于13～18重量份的橄榄油中，混合均匀后，置于20℃-25℃的环境中，加入N-月桂酰-l-丙氨酸甲酯，使入N-月桂酰-l-丙氨酸甲酯的浓度为43.l-45.0mg/mL，混合均匀，再以4-8℃/min的速度将温度提升到35℃-40℃，使含活性成分提取物的混合物发生相转变，形成交联半固体状态。

优选地，本发明的组合物提取物可通过如下制备方法得到：

①取沙棘，粉碎、过60目筛，以CO₂超临界萃取有效组分，萃取温度38℃，萃取压力33MPa，萃取时间3.5h，萃取流速20kg/h，得到油状活性成分；

②将葛根、栀子、肉豆蔻混合，粉碎，过40目筛，加入10倍体积的浓度为65%的乙醇，进行提取，提取3次，每次5个小时，提取液进行浓缩、干燥至干粉；

③将得到的上述活性成分提取物合并后，溶于15重量份的橄榄油中，混合均匀后，置于22℃的环境中，加入N-月桂酰-l-丙氨酸甲酯，使入N-月桂酰-l-丙氨酸甲酯的浓度为44.0mg/mL，混合均匀，再以6℃/min的速度将温度提升到37℃，使含活性成分提取物的混合物发生相转变，形成交联半固体状态。

本发明优选的剂型是软胶囊。

本发明是由沙棘、葛根、栀子、肉豆蔻组成，四种药材均具有保肝的作用。沙棘中含有的草酸、苹果酸等有机酸均具有缓解抗生素与其他药物毒性的作用，可保护肝脏。其所含的磷脂类化合物是一种生物活性较高的成分，可以促进细胞代谢，改善肝功能，并且具有促进肝细胞恢复蛋白质合成的能力。葛根为药食同源的植物，具有解肌退热，生津止渴，透疹，升阳止泻，通经活络，解酒毒的作用。传统中医药理论认为，调理脾胃运化功能是酒精性肝病长期临床治疗实践中常用的基本治疗原则。葛根具调理脾胃的功能，使得脾升胃降，各司其职从而达到防治肝病的作用。现代药理研究表明，葛根可通过抗脂质过氧化，清除氧自由基来改善肝脏微循环等，从而达到预防和治疗化学性肝损伤。栀子具有抗炎、抗氧化、抗自由基损伤、抗病毒保护神经细胞、促进胆汁分泌等药理作用，其化学成分主要包括环烯醚萜苷类、有机酸酯类、二萜类以及其他化合物。栀子及其主要有效成分具有保肝利胆的作用，对四氯化碳、黄曲霉素B1、异硫氰酸-1-萘酯等诱导的肝损伤具有良好的保护作用。肉豆蔻木脂素通过激活促细胞分裂剂来激活蛋白激酶信号通路，尤其是c-Jun和JNK及其底物，发挥肝保护作用。其具有温中行气，涩肠止泻，开胃消食的功效。

本发明根据中医药理论与肝脏的生理功能特点，采用辨证的理论，经科学配伍组方而成，经功能性药理实验表明本发明提供的保健品具有较好的保护肝脏，促进肝细胞修复，提高肝功能和再生的作用，且药物安全可靠。

本发明具有如下优点:

（1）本发明采用CO₂超临界萃取技术从沙棘中提取出有效成分，该方法操作简单，和传统的提取方法相比，没有有害溶剂的残留，二氧化碳在生理上是安全的，价钱低，易获得；得到的提取物不需要浓缩和回收溶媒；低温提取保证了有效成分不被破坏；该工艺可以保证连续化生产，容易实现工业化生产；该提取方法提取效率高，更加有效的解决提取工艺繁琐，成本高，不宜于工业化生产的问题。

（2）本发明在制备工艺中使用了原位凝胶技术，可以使沙棘、葛根、栀子、肉豆蔻的有效提取物均匀的分布于橄榄油中，不形成沉淀，使胶囊成分的均匀度与美观度大幅提升。解决了乙醇提取物沉淀快，使胶囊内的乙醇提取物含量不均匀的问题。同时，它也起到贮存药物的作用，防止药物受到环境变化的影响。普通口服给药潜在降解、不稳定或生物利用度低的缺点；此外，伴随药物出现的恶心或呕吐会引起局部刺激，高度离子化的药物和分子量大的药物吸收不好。原位凝胶生物黏附性好，可以促进药物的吸收，避免首过效应，从而提高药物的生物利用度，降低局部刺激性，提高服用者的顺应性。该技术未见相关保健品专利报道，其有助于有效物质均匀分布的能力十分可观，这也为该发明的创新点。

由于中药成分复杂，药味偏多，其提取物难溶解于植物油中，软胶囊内容物若单纯的依靠粉末与油混悬，会出现内容物混悬不均，易分层等缺点，造成装量不准确，所以，目前软胶囊多采用混悬液的形式将其包裹于囊壳中从而制成软胶囊，常用的助悬剂有蜂蜡、单硬脂酸甘油、单硬脂酸铝、乙基纤维素，其中蜂蜡效果较好，但是这种软胶囊的稳定性并不是很好。还有采用动物油制备软胶囊，使动物油迅速凝固，达到稳定的效果，但是动物油中主要的成分中饱和脂肪酸的含量很高，容易导致胆固醇升高，形成高血脂或者动脉粥样硬化，同时对肝脏的代谢造成负担。

本专利应用的就是温度敏感型的原位凝胶，在20℃-25℃的时候，CO₂超临界萃取物（沙棘油）可溶于橄榄油中，但是乙醇提取物（葛根、栀子及肉豆蔻提取物）无法溶解在橄榄油中。并且在快速搅拌的前提下，醇提物也无法均匀的分散在橄榄油中，而是迅速沉淀，导致其在制备软胶囊的过程中，醇提物的含量不均匀，无法研制出合格的软胶囊。该专利应用了原位凝胶技术，将醇提物均匀溶于含有N-月桂酰-l-丙氨酸甲酯的橄榄油中，将温度迅速提高至35℃-40℃，使其发生相转变，由液态转化形成凝胶，这样醇提物几乎不会发生沉降，在这种条件下制备的软胶囊，保证了其醇提物成分含量的均一性。

（3）橄榄油是优质的脂肪，维持人体健康的必需物质。在国际上被认为食用油中的绿色食品，美、英等国早已把它载入药典。我国中医则认为，油橄榄性味甘、酸、涩、平，对人体具有清肺、利咽、解毒、生津的作用。橄榄油是自然分离的果油，不经过化学处理，与我们习惯使用的菜籽油、花生油的加工工序有着很大的区别。橄榄油富含胡萝卜素、脂溶性多种维生素及多种微量元素等天然营养物质，油中所含的不饱和脂肪酸高达82%-87%，其具有独特芳香和美味，在饮食上也具有独特的烹饪特点，并且被人体消化吸收率达93.4%，对人体具有多种保健功效，特别是对减少心血管疾病和健美肌肤、促进幼儿骨骼及神经系统发育有特殊功效。橄榄油中含有角鲨烯物质，是一种天然抗氧化剂，橄榄油过氧化值很低，一般条件下贮放几年后也无异味。另外，橄榄油在医药、日用化学、纺织、食品、电子等工业具有广泛用途。

(4)本发明采用软胶囊剂型，其避免了空气和水分对药物的影响，具有含量准确、密封稳定、生物利用度高、易被患者接受等特点。

本发明的工艺简便、合理，易于操作与质量控制，提取物的有效成分含量高，成本较低，具有明显的保肝作用，并且服用方便，毒副作用小，是较为理想的保肝的保健品。

具体实施方式

以下各实施例所用的橄榄油符合国家标准GB23347-2009。

实施例1本发明软胶囊的制备

各组分用量在下述重量范围内具有较好的疗效：

沙棘28份，葛根32份，栀子22份，肉豆蔻19份。

本发明的组合物提取物可通过如下制备方法得到：

①取沙棘，粉碎、过40目筛，以CO₂超临界萃取有效组分，萃取温度35℃，萃取压力25MPa，萃取时间3h，萃取流速18kg/h，得到油状活性成分；

②将葛根、栀子、肉豆蔻混合，粉碎，过20目筛，加入8倍体积的浓度为50%的乙醇，进行提取，提取2次，每次4个小时，提取液进行浓缩、干燥至干粉；

③将得到的上述活性成分提取物合并后，溶于13重量份的橄榄油中，混合均匀后，置于20℃的环境中，加入N-月桂酰-l-丙氨酸甲酯，使入N-月桂酰-l-丙氨酸甲酯的浓度为43.lmg/mL，混合均匀，再以4℃/min的速度将温度提升到35℃，使含活性成分提取物的混合物发生相转变，形成交联半固体状态后，加入常规辅料，按常规方法，制成软胶囊。

实施例2：本发明软胶囊的制备

各组分用量在下述重量范围内具有较好的疗效：

沙棘33份，葛根42份，栀子27份，肉豆蔻22份。

本发明的组合物提取物可通过如下制备方法得到：

①取沙棘，粉碎、过60目筛，以CO₂超临界萃取有效组分，萃取温度38℃，萃取压力33MPa，萃取时间3.5h，萃取流速20kg/h，得到油状活性成分；

②将葛根、栀子、肉豆蔻混合，粉碎，过40目筛，加入10倍体积的浓度为65%的乙醇，进行提取，提取3次，每次5个小时，提取液进行浓缩、干燥至干粉；

③将得到的上述活性成分提取物合并后，溶于15重量份的橄榄油中，混合均匀后，置于22℃的环境中，加入N-月桂酰-l-丙氨酸甲酯，使入N-月桂酰-l-丙氨酸甲酯的浓度为44.0mg/mL，混合均匀，再以6℃/min的速度将温度提升到37℃，使含活性成分提取物的混合物发生相转变，形成交联半固体状态，加入常规辅料，按常规方法，制成软胶囊。

实施例3：本发明软胶囊的制备

各组分用量在下述重量范围内具有较好的疗效：

沙棘38份，葛根52份，栀子32份，肉豆蔻25份。

本发明的组合物提取物可通过如下制备方法得到：

①取沙棘，粉碎、过60目筛，以CO₂超临界萃取有效组分，萃取温度40℃，萃取压力40MPa，萃取时间4h，萃取流速22kg/h，得到油状活性成分；

②将葛根、栀子、肉豆蔻混合，粉碎，过60目筛，加入12倍体积的浓度为80%的乙醇，进行提取，提取3次，每次6个小时，提取液进行浓缩、干燥至干粉；

③将得到的上述活性成分提取物合并后，溶于18重量份的橄榄油中，混合均匀后，置于25℃的环境中，加入N-月桂酰-l-丙氨酸甲酯，使入N-月桂酰-l-丙氨酸甲酯的浓度为45.0mg/mL，混合均匀，再以8℃/min的速度将温度提升到40℃，使含活性成分提取物的混合物发生相转变，形成交联半固体状态后，加入常规辅料，按常规方法，制成软胶囊。

实验例1：功能性药理实验

实验动物:健康小鼠200只，雌雄各半，20-25g，随机分为4组(二组为治疗组，一组对照组、一组空白组)，每组各50只小鼠。

实验方法:二个治疗组与对照组小鼠分别给予0.15g/kg的本发明药物软胶囊剂，加水稀释至含药量0.1g/ml，灌胃，空白组使用相同量的生理盐水进行灌胃，每日进行灌胃1次，连续灌胃7天。最后一次给药1h后，对照组、治疗组1、治疗组2给予浓度为0.10%CCl4豆油溶液1g，空白组给予豆油溶液1g，然后禁食24h，取血、分离血清，测定血清ALT与AST值；取肝组织，处理后测定SOD活性与MDA含量，具体实验结果如表1所示。

表1本发明改善CCl₄所致的肝损伤作用表

组别	ALT	AST	SOD	MDA
					空白组	43.58±6.93	45.27±7.96	130.96±23.64	9.45±0.98
对照组	160.78±22.98	174.39±36.41	90.36±18.68	15.57±0.75
					治疗组1	83.58±10.67**	89.76±11.89**	113.87±17.54**	11.23±0.83**
治疗组2	81.79±9.76**	95.46±13.68*	116.83±18.09**	12.23±0.43**

注：与对照组比较*表示P＜0.05，**表示P＜0.01

由试验结果表明，本发明提供的具有保肝作用的药物组合物对CCl4所致小鼠ALT、AST和MDA升高具有明显的降低作用，而且结果也表明本发明提供的药物组合物对CCl4引起SOD活性降低也有明显的升高作用，说明本发明提供的药物组合物具有很好的改善CCl4所致的肝损伤作用。

实验例2：本发明软胶囊的稳定性考察

原位凝胶组：本发明制备得到。

助悬剂（蜂蜡）组：

沙棘28～38份，葛根32～52份，栀子22～32份，肉豆蔻19～25份。

①取一定重量份的沙棘，去除杂质及残茎，粉碎、过40-60目筛，萃取温度35-40℃，萃取压力25-40MPa，萃取时间3-4h，萃取流速18-22kg/h，以CO₂超临界萃取有效组分，得到油状活性成分。

②将葛根、栀子、肉豆蔻按重量配比混合，粉碎，过20-60目筛，加入8-12倍体积的浓度为50%-80%的乙醇，进行提取，每次4-6个小时，提取3次。提取液进行浓缩，干燥至干粉。

③将得到的活性成分提取物合并后，溶于13-18重量份的橄榄油中，混合均匀后，按重量份比加入6%～8%的蜂蜡，制成软胶囊。

动物油（猪油）组：

沙棘28～38份，葛根32～52份，栀子22～32份，肉豆蔻19～25份。

①取一定重量份的沙棘，去除杂质及残茎，粉碎、过40-60目筛，萃取温度35-40℃，萃取压力25-40MPa，萃取时间3-4h，萃取流速18-22kg/h，以CO₂超临界萃取有效组分，得到油状活性成分。

②将葛根、栀子、肉豆蔻按重量配比混合，粉碎，过20-60目筛，加入8-12倍体积的浓度为50%-80%的乙醇，进行提取，每次4-6个小时，提取3次。提取液进行浓缩，干燥至干粉。

③将得到的活性成分提取物合并后，溶于13-18重量份的动物油中，混合均匀后，凝固，制成软胶囊。

在25℃室温下，取出软胶囊内容物，静置，采用测定沉降比（F）来观察混悬的效果。

表2稳定性结果表

由上表可知，原位凝胶软胶囊的稳定性最好，其次是动物油软胶囊，稳定性最不好的为助悬剂（蜂蜡）组，从实验结果可以看出原位凝胶软胶囊在稳定性这方面的优势。

实验例3：功能性药理实验

实验动物:健康小鼠200只，雌雄各半，20-25g，随机分为4组(一组为本发明原位凝胶组、一组为动物油组、一组为空白组、一组为对照组)，每组各50只小鼠。

原位凝胶组为按本发明配方和方法所制备的软胶囊，动物油组为实验例2中动物油（猪油）组所制备的软胶囊。

实验方法:原位凝胶组、动物油（猪油）组与对照组小鼠分别给予0.15g/kg的提取物(加水稀释至含药量0.1g/ml)灌胃，空白组使用相同量的生理盐水进行灌胃，每日进行灌胃1次，连续灌胃7天。最后一次给药1h后，对照组、原位凝胶组、动物油（猪油）组给予浓度为0.10%CCl4豆油溶液1g，空白组给予豆油溶液1g，然后禁食24h，取血、分离血清，测定血清ALT与AST值；取肝组织，处理后测定SOD活性与MDA含量，具体实验结果如表3所示。

表3实验结果表

组别	ALT	AST	SOD	MDA
					空白组	44.69±5.98	46.38±8.01	129.54±22.99	10.05±0.78
对照组	158.78±21.58	175.38±34.59	92.47±19.02	16.64±0.69
					原位凝胶组	84.95±9.85**	90.54±10.79**	115.56±16.38**	11.59±0.79**
动物油组	93.26±8.99**	100.39±12.73*	100.27±19.59**	14.56±0.55**

注：与对照组比较*表示P＜0.05，**表示P＜0.01

由表3可知，原位凝胶组与动物油（猪油）组均有抑制CCl₄所致小鼠ALT、AST和MDA升高具有明显的降低作用，而且结果也表明原位凝胶组与动物油（猪油）组对CCl₄引起SOD活性降低也有明显的升高作用。但是原位凝胶组使ALT、AST和MDA的降低作用与使SOD活性升高的作用较动物油（猪油）组明显。

Claims (2)

1.一种具有保肝功能的药物组合物的制备方法,其特征在于包括下列步骤:

①取以重量份计的沙棘28～38份，粉碎、过40-60目筛，以CO₂超临界萃取有效组分，萃取温度35-40℃，萃取压力25-40MPa，萃取时间3-4h，萃取流速18-22kg/h，得到油状活性成分；

②将以重量份计的葛根32～52份、栀子22～32份、肉豆蔻19～25份混合，粉碎，过20-60目筛，加入8-12倍体积的浓度为50％-80％的乙醇，进行提取，提取2～3次，每次4-6个小时，提取液进行浓缩、干燥至干粉；

③将得到的上述活性成分提取物合并后，溶于13～18重量份的橄榄油中，混合均匀后，置于20℃-25℃的环境中，加入N-月桂酰-l-丙氨酸甲酯，使加入的N-月桂酰-l-丙氨酸甲酯的浓度为43.l-45.0mg/mL，混合均匀，再以4-8℃/min的速度将温度提升到35℃-40℃，使含活性成分提取物的混合物发生相转变，形成交联半固体状态。

2.根据权利要求1所述的具有保肝功能的药物组合物的制备方法:其特征在于包括下列步骤:

①取以重量份计的沙棘33份，粉碎、过60目筛，以CO₂超临界萃取有效组分，萃取温度38℃，萃取压力33MPa，萃取时间3.5h，萃取流速20kg/h，得到油状活性成分；

②将以重量份计的葛根42份、栀子27份、肉豆蔻22份混合，粉碎，过40目筛，加入10倍体积的浓度为65％的乙醇，进行提取，提取3次，每次5个小时，提取液进行浓缩、干燥至干粉；

③将得到的上述活性成分提取物合并后，溶于15重量份的橄榄油中，混合均匀后，置于22℃的环境中，加入N-月桂酰-l-丙氨酸甲酯，使加入的N-月桂酰-l-丙氨酸甲酯的浓度为44.0mg/mL，混合均匀，再以6℃/min的速度将温度提升到37℃，使含活性成分提取物的混合物发生相转变，形成交联半固体状态。