CN103704508B - 沟眶象的半人工饲料和人工饲养方法 - Google Patents

Abstract

本发明提供的一种沟眶象的半人工饲料和人工饲养方法，属于林业害虫的生物防治技术领域，其中，人工饲养方法包括，（1）将成虫雌雄搭配成对，分别放入容器中进行交配产卵，先饲喂臭椿枝叶，之后在容器中放入苹果片，苹果片用于喂养成虫和为成虫产卵提供场所；（2）孵化幼虫；（3）取半人工饲料混合制备成饲料培养基，饲料培养基设置孔道，将步骤（2）获得的幼虫接入到孔道内，在黑暗条件下饲养，直至幼虫化蛹；上述半人工饲料的组分包括臭椿根粉、大豆粉、玉米粉、蔗糖、琼脂、韦氏盐、尼泊金酯、山梨酸钾、大豆油、水，本发明不仅可以持续获得大量发育整齐、生理状况一致的昆虫，而且能解决季节性寄主饲养饲料短缺的问题。

Description

沟眶象的半人工饲料和人工饲养方法

本发明是在十二五科技支撑计划课题（2012BAD19B07）、国家林业公益性行业科研专项（201204501）资助下进行的。

技术领域

本发明属于林业害虫的生物防治技术领域，特别涉及一种沟眶象的半人工饲料和人工饲养方法。

背景技术

沟眶象Eucryptorrhynchus chinensis(Olivier)俗称椿大象，属鞘翅目象甲科隐喙象亚科沟眶象属。沟眶象是危害臭椿Ailanthus altissima(Mill.)Swingle及其变种千头椿A.altissima var.Qiantouchun的主要害虫，分布于陕西、北京、河南、河北、山东、山西、辽宁、黑龙江、上海、江苏、四川、宁夏等省区。2003年沟眶象被国家林业局列入“危险性林业有害生物”名单，现在被宁夏和新疆列为补充林业检疫性有害生物。

随着林分、树种结构的调整，臭椿已成为宁夏等地主要的造林树种。宁夏第二代农田林网、绿化带臭椿所占比例为20～30%，部分地段高达50%。一些重点绿化工程所占比例更高。目前宁夏全区有臭椿5000万株，合41万亩。近年来，由于沟眶象的危害造成大面积臭椿树树势衰弱甚至死亡，严重影响当地的城镇绿化和农田防护林建设。

沟眶象在我国1年发生1代，以幼虫和成虫在土里越冬。幼虫期为主要危害阶段，成虫在臭椿树干基部土壤表面产卵，卵孵化后幼虫钻蛀并取食根部。初期危害症状不明显，待显露明显症状时，已失去有利防治时机。严重危害时，幼虫取食切断根部输导组织导致植株死亡。沟眶象幼虫活动场所较隐蔽、生活周期长，致使其生物学特性研究较少。人工饲养沟眶象，既可以方便观察沟眶象的生活习性，也可以为生物测定或者毒力测定等研究提供所需实验材料，还可以为繁殖天敌昆虫提供载体。

目前，已有学者利用野外采集的臭椿枝叶和木屑分别饲养沟眶象成虫和幼虫，但这种饲养方法存在诸多问题。首先，臭椿生长、成熟具有季节性，不能满足研究中长期提供稳定虫源的需求，而且人为更换新鲜枝叶和木屑耗时耗力；其次，成虫将卵产在臭椿枝干里，人为挑拣时容易损伤卵，造成卵孵化率下降；再次，受湿度等条件的影响，木屑容易发霉变质和营养流失，造成幼虫生长营养不良，化蛹率和羽化率降低。

因此，当下需要迫切解决的一个技术问题就是：如何能够创新的提出有效的方法，以实现沟眶象不受季节性限制的人工饲养，同时提高成活率，为沟眶象的生物学、生理、生态以及毒理等研究长期提供研究材料，为沟眶象建立实验室种群和防治研究提供基础。

发明内容

针对现有技术不足，本发明的目的是提供一种沟眶象的半人工饲料和人工饲养方法，使其不仅可以持续获得大量发育整齐、生理状况一致的昆虫，而且能解决季节性寄主饲养饲料短缺的问题。

为实现上述目的，本发明提供的一种沟眶象的半人工饲料，所述半人工饲料中各组分的重量份数为:臭椿根粉12～18份、大豆粉2.5～6.0份、玉米粉2.5～7.0份、蔗糖2.5～5.0份、琼脂2.0～2.5份、韦氏盐0.3～0.5份、抗坏血酸0.1-0.3份、尼泊金酯0.1～0.25份、山梨酸钾0.1～0.25份、大豆油0.1～0.3份、复合维生素0.15～0.25份和水60～80份。

优选的，在所述复合维生素混合液中，每10mL混合液含有氯化胆碱1.250g、叶酸0.002g、肌醇1.259g、烟酸0.100g、泛酸钙0.150g、维生素B60.030g、核黄素0.020g和硫胺素0.020g。

优选的，所述臭椿根粉为臭椿根韧皮部粉或臭椿根的韧皮部粉与木质部粉的混合。

一种沟眶象的人工饲养方法，包括以下步骤，

（1）将成虫雌雄搭配成对，分别放入容器中进行交配产卵，避免了多对相互干扰；先饲喂臭椿枝叶，之后在容器中放入苹果片，所述苹果片用于喂养成虫和为成虫产卵提供场所，并提高了沟眶象的产卵量，优选饲喂臭椿枝叶8-12天，饲喂臭椿枝叶10天为最佳；

（2）孵化幼虫；

（3）取上述半人工饲料混合制备成饲料培养基，所述饲料培养基设置孔道，将步骤（2）获得的幼虫接入到所述孔道内，在黑暗条件下饲养，直至幼虫化蛹。

优选的，饲养空间的洁净度为千级，控温在18～28℃，控湿在65～85%，控温在25～28℃为最佳，控湿在70%～80%为最佳。

优选的，所述步骤（1）中所述苹果片每天更换，有利于获得龄期整齐的幼虫，并且能够收集更多的卵量。

优选的，所述步骤（3）中饲料培养基每周更换一次。

一种沟眶象的人工饲养方法，具体包括以下步骤，

（1）处女成虫和卵的获得

野外采集沟眶象蛹，置于温度为25～28℃，湿度65～85%的条件下羽化成虫。

将羽化后的成虫按每雌雄配对一组，分别放入容器中进行交配产卵，避免了多对相互干扰；先饲喂臭椿枝叶10天，之后在容器中放入苹果片，用于喂养成虫和为成虫产卵提供场所；优选的容器为直径为12cm的塑料盒，优选的苹果片厚度为1cm。

由于沟眶象幼虫具有自残习性、成虫的活动会导致卵受伤并且苹果水分大易腐败，因此每天更换苹果，这样保证了产卵的量，又可以使得卵的孵化时间基本一致，有利于得到龄期比较整齐的幼虫。

（2）卵的孵化管理

用镊子小心剥开产有卵的苹果片，将卵小心挑出，常规消毒后，用75%酒精消毒10s，再利用无菌水冲洗2次，放入铺有滤纸的培养皿，在卵上加盖一层滤纸，置于温度为18～28℃，湿度为65～85%的人工气候箱内。

每天在滤纸上喷1次无菌水进行润湿，观察卵的孵化情况。

人工气候箱内温度以25～28为佳。

（3）半人工饲料的制备

所述的半人工饲料的组分为：臭椿根粉13g、大豆粉5g、玉米粉3g、蔗糖3g、琼脂2.2g、韦氏盐0.4g、抗坏血酸0.2g、尼泊金酯0.2g、山梨酸钾0.1g、大豆油0.2ml、复合维生素0.2ml、水80ml。

优选的，原料中的臭椿根粉选取野外健康或者受害的臭椿根段，经烘干粉碎后过80目筛制得。

每次半人工饲料投入前先搅拌、混匀，分装培养皿中备用，压实并自然晾干，制得饲料培养基。

（4）室内幼虫人工饲养

选取培养皿，用无菌细玻璃棒在饲料中间钻一个孔道，挑取沟眶象幼虫，小心放到孔道口，等幼虫钻入后，然后将沟眶象幼虫饲养容器置于人工培养箱内黑暗条件饲养。

优选的，饲料每周更换一次。

优选的，饲养二周后，转入到直径较大的培养皿中饲养。

优选的，在化蛹时，将蛹转移到滤纸铺好的小培养皿内，蛹上再加盖一层滤纸，每天往滤纸上喷1次无菌水保湿，使其成功羽化。

昆虫饲养和饲料制备过程中所用到的试验器具均用75%的酒精进行消毒。

本发明与现有技术相比，具有以下优点：

（1）本发明工艺简单，采用原料来源广泛且价格低廉，营养全面，效益显著；

（2）不受季节性限制，持续获得大量发育整齐，生理一致的沟眶象幼虫；

（3）采用半人工饲料在室内完成沟眶象的生活史，在不伤害卵和幼虫的情况下，得到大量完好的卵、准确的各龄期幼虫和蛹；

（4）本发明的人工饲养方法具有发育历期短、存活率高等特点，大量繁殖的沟眶象可为沟眶象的生物学、生理生态等研究长期提供研究材料，是沟眶象防治研究的重要基础；

（5）沟眶象的大量人工饲养还可作为寄生性天敌昆虫人工繁殖，亦可为生物防治和农药毒理筛选等方面研究。

具体实施方式

以下实施例用于说明本发明，但不用来限制本发明的范围。

实施例1

表1：沟眶象幼虫半人工饲料不同配方各物质的重量比例

将表1所示的4种配方，按以下步骤制备成饲料培养基，

（1）将臭椿根粉、大豆粉、玉米粉和蔗糖充分混匀制成混合粉状物，同时将蔗糖、韦氏盐、抗坏血酸、尼泊金酯、山梨酸钾、大豆油、复合维生素溶于水，搅拌、混匀制成混合液；

（2）在容器中加入水，加热煮沸，加入琼脂，待琼脂完全融化后，加入混合液，搅拌使其溶解；

（3）慢慢加入混合粉状物，并充分搅拌，混合均匀；

（4）停止加热，趁热分装入培养皿，且压实并自然晾干表面水分，冷却后5℃保存备用，制得饲料培养基。

实施例2

选定沟眶象蛹40头，在温度25～28℃、湿度70～80%条件下，羽化成虫37头。将沟眶象成虫按雌雄比1:1配对，装入直径12cm的塑料盒中，先饲喂臭椿枝叶10天，后放入切好的厚度为1cm的苹果片，每盒一对成虫，3～7天后产卵，产卵380粒，卵期10天。常规消毒后置于25℃条件下，孵化得到幼虫345头。

按照配方1配置半人工饲料，分装到塑料培养皿内，将初孵幼虫接入（每个容器接入1头），放入恒温培养箱，置于黑暗饲养。视饲养情况每隔一定时间更换饲料，2周后幼虫成活200头，103天后化蛹144头。将蛹转移至滤纸铺好的小培养皿内，并加盖一层滤纸、保湿，11天后羽化122头。

实施例3

选定沟眶象蛹60头，在温度25～28℃、湿度65～85%条件下，羽化成虫45头。将沟眶象成虫按雌雄比1:1的比例，装入直径12cm的塑料盒中，先饲喂臭椿枝叶10天，后放入切好的厚度为1cm的苹果片，每盒一对成虫，3～7天后产卵，产卵460粒，卵期11天，常规消毒（先用75%酒精消毒10s，再利用无菌水冲洗2次）后置于28℃条件下，孵化得到幼虫403头。

按照配方2配置半人工饲料，分装到塑料培养皿内，将初孵幼虫接入（每个容器接入1头），放入恒温培养箱，置于黑暗饲养。视饲养情况每隔一定时间更换饲料，2周后幼虫成活248头，后转入直径5cm的塑料培养皿。98天后化蛹198头。将蛹转移至滤纸铺好的小培养皿内，并加盖一层滤纸、保湿，11天后羽化168头。

实施例4

选定沟眶象蛹45头，在温度25～28℃、湿度70～80%条件下，羽化成虫36头。将沟眶象成虫按雌雄比1:1配对，装入直径12cm的塑料盒中，先饲喂臭椿枝叶10天，后放入切好的厚度为1cm的苹果片，每盒一对成虫，3～7天后产卵，产卵350粒，卵期10天。常规消毒后置于25℃条件下，孵化得到幼虫315头。

按照配方3配置半人工饲料，分装到塑料培养皿内，将初孵幼虫接入（每个容器接入1头），放入恒温培养箱，置于黑暗饲养。视饲养情况每隔一定时间更换饲料，2周后幼虫成活214头，90天后化蛹177头。将蛹转移至滤纸铺好的小培养皿内，并加盖一层滤纸、保湿，11天后羽化150头。

实施例5

选定沟眶象蛹30头，在温度25～28℃、湿度70～80%条件下，羽化成虫25头。将沟眶象成虫按雌雄比1:1配对，装入直径12cm的塑料盒中，先饲喂臭椿枝叶10天，后放入切好的厚度为1cm的苹果片，每盒一对成虫，3～7天后产卵，产卵390粒，卵期10天。常规消毒后置于28℃条件下，孵化得到幼虫352头。

按照配方4配置半人工饲料，分装到塑料培养皿内，将初孵幼虫接入（每个容器接入1头），放入恒温培养箱，置于黑暗饲养。视饲养情况每隔一定时间更换饲料，2周后幼虫成活256头，85天后化蛹228头。将蛹转移至滤纸铺好的小培养皿内，并加盖一层滤纸、保湿，11天后羽化192头。

实施例6

表2不同饲料下饲养沟眶象幼虫饲养的效果

如表2所示，采用本发明方法人工饲养的沟眶象，卵存活率90%以上，幼虫存活率60%以上；其中，由于添加了抗坏血酸和复合维生素的半人工饲料饲养下的老熟幼虫平均体重、化蛹率和羽化率分别为0.5804g、89.39%和86.32%，而寄主（臭椿枝叶）饲养下老熟幼虫平均体重、化蛹率和羽化率分别为0.4623g、72.45%、73.67%。因此，半人工饲料饲养较寄主饲养的指标（平均体重、化蛹率和羽化率）明显提高，且半人工饲料的原料来源不受季节的限制，随时可以制备，从而使室内大量饲养沟眶象幼虫得到充分保障。

表3不同处理下沟眶象的平均发育历期

如表3所示，本发明中，将成虫雌雄配对放入饲养盒中，用苹果切片喂养，且每个盒子只放一对成虫。苹果片饲养可以使得成虫将卵产在果肉内，较臭椿枝条便于挑取，并且提高了产卵量。

使用半人工饲料饲养沟眶象，幼虫历期和蛹期分别为85.83天和11.21天，而寄主饲养沟眶象，幼虫历期和蛹期分别为113.72天和15.74天，因此，使用半人工饲料饲养沟眶象较用寄主饲养幼虫孵化期和化蛹期明显缩短。

实施例7

表4不同饲料配方饲养沟眶象幼虫的效果

实施例2-5的实验结果表明，如表4所示，使用上述4种配方，可有效保证在此饲养方法及环境下幼虫成活率50%以上；老熟幼虫平均体重超过0.4623g；幼虫历期低于103天，化蛹率不低于72%；完成一个世代的时间比野外最多缩短近55天（通常野外沟眶象幼虫完成一个世代大约需要140天左右），相对成本降低；由于这些原材料不受地域及季节的限制，随时可以制备，不会出现季节性的短缺而影响到沟眶象幼虫的人工饲养，从而使室内连续大量饲养沟眶象幼虫得到充分保障。

虽然，上文中已经用一般性说明、具体实施方式及试验，对本发明作了详尽的描述，但在本发明基础上，可以对之作一些修改或改进，这对本领域技术人员而言是显而易见的。因此，在不偏离本发明精神的基础上所做的这些修改或改进，均属于本发明要求保护的范围。

Claims (6)

1.一种沟眶象的人工饲养方法，其特征在于，包括以下步骤， 

(1)将成虫雌雄搭配成对，分别放入容器中进行交配产卵，避免了多对相互干扰，先饲喂臭椿枝叶，之后在容器中放入苹果片，所述苹果片用于喂养成虫和为成虫产卵提供场所，并提高了沟眶象的产卵量； 

(2)孵化幼虫； 

(3)取半人工饲料混合制备成饲料培养基，所述半人工饲料中各组分的重量份数为:臭椿根粉12～18份、大豆粉2.5～6.0份、玉米粉2.5～7.0份、蔗糖2.5～5.0份、琼脂2.0～2.5份、韦氏盐0.3～0.5份、抗坏血酸0.1-0.3份、尼泊金酯0.1～0.25份、山梨酸钾0.1～0.25份、大豆油0.1～0.3份、复合维生素0.15～0.25份和水60～80份；所述饲料培养基设置孔道，将步骤(2)获得的幼虫接入到所述孔道内，在黑暗条件下饲养，直至幼虫化蛹。 

2.根据权利要求1所述的人工饲养方法，其特征在于，在所述复合维生素中，每10mL混合液含有氯化胆碱1.250g、叶酸0.002g、肌醇1.259g、烟酸0.100g、泛酸钙0.150g、维生素B6 0.030g、核黄素0.020g和硫胺素0.020g。 

3.根据权利要求1或2所述的人工饲养方法，其特征在于，所述臭椿根粉为臭椿根韧皮部粉或臭椿根的韧皮部粉与木质部粉的混合。 

4.根据权利要求1所述的人工饲养方法，其特征在于，饲养空间的洁净度为千级，控温在18～28℃，控湿在65～85％。 

5.根据权利要求4所述的人工饲养方法，其特征在于，所述步骤(1)中所述苹果片每天更换，有利于获得龄期整齐的幼虫，并且能够收集更多的卵量。 

6.根据权利要求5所述的人工饲养方法，其特征在于，所述步骤(3)中饲料培养基每周更换一次。