CN103698323A - 一种胶体金免疫层析试纸检测系统 - Google Patents
一种胶体金免疫层析试纸检测系统 Download PDFInfo
- Publication number
- CN103698323A CN103698323A CN201310381330.5A CN201310381330A CN103698323A CN 103698323 A CN103698323 A CN 103698323A CN 201310381330 A CN201310381330 A CN 201310381330A CN 103698323 A CN103698323 A CN 103698323A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- pct
- detection system
- test paper
- colloidal gold
- immunochromatographic test
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
Images
Landscapes
- Investigating Or Analysing Materials By Optical Means (AREA)
- Investigating Or Analysing Materials By The Use Of Chemical Reactions (AREA)
Abstract
本发明涉及一种胶体金免疫层析试纸检测系统,由激光发射光源、光学系统、计算机控制系统、可充电电池、微型打印机、液晶显示屏以及配套的层析试纸条组成。本发明提供一种胶体金免疫层析试纸检测系统,可以定性、定量的检测试纸条信息,并记录分析数据结果,可打印输出。
Description
技术领域
本发明属生物技术领域,特别是涉及专用的免疫层析分析系统。
背景技术
PCT是一种蛋白质,当严重细菌、真菌、寄生虫感染以及脓毒症和多脏器功能衰竭时它在血浆中的水平升高。自身免疫、过敏和病毒感染时PCT不会升高。局部有限的细菌感染、轻微的感染和慢性炎症不会导致其升高。细菌内毒素在诱导过程中担任了至关重要的作用。
PCT反映了全身炎症反应的活跃程度。影响PCT水平的因素包括被感染器官的大小和类型、细菌的种类、炎症的程度和免疫反应的状况。另外,PCT只是在少数患者的大型外科术后1~4d可以测到。
PCT水平的升高出现在严重休克、全身性炎症反应综合征(SIRS)和多器官功能紊乱综合征(MODS),即使没有细菌感染或细菌性病灶。但是,在这些病例中PCT水平通常低于那些有细菌性病灶的患者。从肠道释放细胞因子或细菌移位可能引起诱导。
目前,检测PCT的实验室方法有很多,不仅可以定性,亦可以定量。常用的方法有如下几种:1.放射免疫学分析法:利用人工合成的多克隆抗体特异地识别和连接合成氨基酸降钙素原。该方法能检测正常人的血清PCT,可靠敏感度为4pm/mL,检测的是游离PCT、结合型PCT和降钙素基因相关肽前体的混合物,而不能区分上述三种物质。该法检测耗时长(19~22h),而且有放射性元素的污染使用受到限制。2.双抗夹心免疫化学发光法(ILMA):运用双单克隆抗体,其中一个抗体为降钙素抗体,另一个为抗钙素抗体,分别结合到PCT分子的降钙素和抗钙素部位,可排除交叉反应。其中一个抗体是光标记的,另一个未标记的抗体固定在试管的内壁,反应过程中两个抗体与PCT分子结合而形成三明治复合体,发光部位于反应管的表面。该法操作简便,特异性强,敏感性高,测定的低限值为0.1ng/mL,2h可以出结果。3.胶体金比色法(B.R.A.H.M.S PCT-Q-半定量快速实验):采用胶体金技术,包括胶体金标记的抗抗钙素的单克隆抗体和用作包被的抗降钙素多克隆抗体,当标本(血清或血浆)加入标本孔,金标单克隆抗体与标本中的PCT结合,形成金标记的抗原抗体复合物。该复合物在反应膜上移动,与固定在膜上的抗降钙素抗体结合形成更大的复合物。当PCT浓度超过0.5ng/mL,该复合物显示红色,红色的深浅与PCT的浓度成正比,与标准比色板比较即可得出PCT的浓度范围。结果分为四级:正常<0.5ng/mL;轻度升高>0.5ng/mL;明显升高>2ng/mL;显著升高>10ng/mL。该法具有快速简便,易观察的特点。4.透射免疫浊度法:样品中的PCT与试剂中的PCT单克隆抗体发生抗原-抗体反应,使反应液浊度增加,并在一定范围内反应液浊度与所加人抗原的量呈线性关系,可使用生化分析仪或其它光学检测仪器在600nm波长处测定反应液吸光度值,反应液吸光度值与所测PCT浓度成正比。该测定方法简便、快速,可自动化,适合于批量检测。2005年国内已有研制开发的PCT免疫比浊试剂盒供应,为PCT的广泛应用提供了方便条件,但免疫透射比浊的方法学及临床应用尚需做进一步的验证。
免疫层析方法是20世纪90年代兴起的一种将免疫技术和色谱层析技术相结合的固相膜免疫分析方法,由这一技术开发出来的胶体金免疫层析试纸现已广泛应用于医学检验、食品安全监测、出入境检验检疫等领域。但现有的胶体金免疫层析诊断试剂多用于定性测定,不能满足临床对某些指标量化的要求。
因此,本研究开发的胶体金免疫层析试纸检测系统,研制出PCT免疫层析快速定量检测系统。该检测系统以特定波长的激光器为光源,通过测量试剂检测带和质控带对特定波长光线的吸收光密度来实现对试剂的定量测定。其内部集成了光学系统、计算机控制系统、可充电电池、微型打印机和液晶显示屏等部件,是一种便携式的快速检测仪器。具有在15min内完成对PCT的快速定量测定;该检测系统具有简便、快速、便携等特点,可有效用于评价严重炎症性疾病临床进程及预后、动态监测细菌性感染伴随系统性炎症反应,弥补了临床现有方法的不足,适合于各级医院及基层、社区医疗机构使用,具有很高的临床应用价值。
发明内容
本发明通过提供一种胶体金免疫层析试纸检测系统。
本发明提供的胶体金免疫层析试纸检测系统,该系统包括激光发射光源、光学系统、计算机控制系统、可充电电池、微型打印机、液晶显示屏以及配套的层析试纸条。另外,作为可选配置,所述的免疫层析分析仪还包括实时存储器和打印部件。此外,免疫层析分析仪还包括一套软件系统,使检测结果在较宽的检测范围内保持线性。同时可有效排除检测试剂本身造成的误差,使结果更为准确、可靠。
本发明的工作流程为:
1、降钙素原(PCT)定量免疫层析试纸条的制作
将PCT单克隆抗体标记于制备好的胶体金颗粒表面,并固定于胶金垫上,相应的另一抗体及羊抗鼠IgG分别喷涂在硝酸纤维膜(NC膜)上形成检测线(T)和质控线(C)。根据免疫层析的基本原理,将吸水纸、分析膜、胶金垫、样品垫依次贴在带有PVC底板上,切割并装卡。
2、定量检测系统的建立
吸取待测样品垂直滴加至加样孔中,15min后通过免疫层析分析仪判读结果。实验和理论均证明,胶体金颗粒对绿光具有较强的吸收特性。免疫层析分析仪通过测量免疫层析试剂检测区胶体金颗粒的漫反射光,分别计算出其上检测线吸收光密度值和质控线吸收光密度值,通过标准工作曲线,计算出被检样品中目标被检物的浓度。
附图说明
以下结合附图进一步说明本发明的结构特征及目的
图1为PCT定量检测系统示意图。光电扫描处理系统由光机模组和光电电路两部分组成,发光二极管通过匀光玻璃照射到PCT免疫层析定量检测试剂的色带区上,两条色带反射的光经聚光片、透镜聚焦到传感器件上,从而实现数据采集和光电信号的转换。主板电路负责将光电扫描处理系统收集的光电信号进行数字处理及计算,最后将处理的一些结果通过液晶屏显示出来,即可实现对PCT的定量测定。
图2为本发明PCT定量检测免疫层析试纸条的剖面结构示意图。
具体实施方式
胶体金-PCT抗体复合物的制备
采用经典的Frens法制备粒径均一且高度分散的胶体金。将制备好的胶体金用0.1mol/L K2C03调节pH至9.0,加入PCT单克隆抗体,涡旋反应10min,加入10%BSA封闭,10min后将制备的金标抗体复合物离心、重悬,浓缩至原体积的1/25,4℃保存。
PCT免疫层析试纸条的研制
1、样品垫的制备:选用玻璃纤维素膜作为样品垫材料,将其放入样品垫处理液
(0.01m01/L PBS(PH=7.4),含有1%BSA,0.5%Triton X-100)中浸泡,37℃烘干备用。
2、胶金垫的制备:选用玻璃纤维素膜作为胶金垫材料,将上述制备的胶体金-PCT抗体复合物重新分散于0.05mol/L Tris-HCl缓冲液(PH=8.0,含5%蔗糖,1%BSA)中,并喷于胶金垫上,37℃烘干。
3、分析膜的制备:用划膜仪在硝酸纤维素膜(NC膜)的不同位置分别喷点PCT单抗(T线)及羊抗鼠IgG抗体(C线),37℃烘干。
4、组装:将吸水纸、分析膜、胶金垫、样品垫依次贴在PVC底板上,并切成4mm宽的试纸条,装卡。
检测系统的研制
光电扫描处理系统由光机模组和光电电路两部分组成,发光二极管通过匀光玻璃照射到PCT免疫层析定量检测试剂的色带区上,两条色带反射的光经聚光片、透镜聚焦到传感器件上,从而实现数据采集和光电信号的转换。主板电路负责将光电扫描处理系统收集的光电信号进行数字处理及计算,最后将处理的一些结果通过液晶屏显示出来,即可实现对PCT的定量测定。
Claims (2)
1.一种胶体金免疫层析试纸检测系统,其特征在于:该系统由激光发射光源、光学系统、计算机控制系统、可充电电池、微型打印机、液晶显示屏以及配套的层析试纸条组成。
2.根据权利要求1所述的胶体金免疫层析试纸检测系统,其特征在于,所述的检测系统还包括实时存储器和打印装置。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN201310381330.5A CN103698323A (zh) | 2013-08-24 | 2013-08-24 | 一种胶体金免疫层析试纸检测系统 |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN201310381330.5A CN103698323A (zh) | 2013-08-24 | 2013-08-24 | 一种胶体金免疫层析试纸检测系统 |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
CN103698323A true CN103698323A (zh) | 2014-04-02 |
Family
ID=50359926
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
CN201310381330.5A Pending CN103698323A (zh) | 2013-08-24 | 2013-08-24 | 一种胶体金免疫层析试纸检测系统 |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
CN (1) | CN103698323A (zh) |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN110411989A (zh) * | 2019-08-28 | 2019-11-05 | 热景(廊坊)生物技术有限公司 | 一种上转发光免疫分析仪的快速检测装置其光路整形方法 |
Citations (9)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN1455242A (zh) * | 2003-06-04 | 2003-11-12 | 苏向东 | 胶体金免疫层析定量检测装置及定量检测方法 |
CN101441164A (zh) * | 2007-09-15 | 2009-05-27 | 周中人 | 嵌入式免疫试纸图像识别及定量分析仪 |
CN101825640A (zh) * | 2010-03-25 | 2010-09-08 | 沈鹤柏 | 一种胶体金免疫层析定性定量两用检测hcg试纸 |
CN101887063A (zh) * | 2010-07-26 | 2010-11-17 | 沈鹤柏 | 一种人c-反应蛋白胶体金免疫层析法定量检测试纸 |
CN101915832A (zh) * | 2010-07-29 | 2010-12-15 | 陈晓汀 | 胶体金和双流向酶联免疫快速检测一体机 |
CN102279263A (zh) * | 2011-05-06 | 2011-12-14 | 杭州顿力医疗器械股份有限公司 | 一种ccd型胶体金免疫层析诊断试纸定量分析系统 |
CN102778455A (zh) * | 2012-07-26 | 2012-11-14 | 杭州华光光电有限公司 | 一种胶体金免疫层析试纸用的检测系统 |
CN202720230U (zh) * | 2012-06-27 | 2013-02-06 | 天津市普瑞仪器有限公司 | 一种便携式高分辨率金标检测仪 |
CN202720235U (zh) * | 2012-04-19 | 2013-02-06 | 沈鹤柏 | 一种视黄醇结合蛋白定量检测装置 |
-
2013
- 2013-08-24 CN CN201310381330.5A patent/CN103698323A/zh active Pending
Patent Citations (9)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN1455242A (zh) * | 2003-06-04 | 2003-11-12 | 苏向东 | 胶体金免疫层析定量检测装置及定量检测方法 |
CN101441164A (zh) * | 2007-09-15 | 2009-05-27 | 周中人 | 嵌入式免疫试纸图像识别及定量分析仪 |
CN101825640A (zh) * | 2010-03-25 | 2010-09-08 | 沈鹤柏 | 一种胶体金免疫层析定性定量两用检测hcg试纸 |
CN101887063A (zh) * | 2010-07-26 | 2010-11-17 | 沈鹤柏 | 一种人c-反应蛋白胶体金免疫层析法定量检测试纸 |
CN101915832A (zh) * | 2010-07-29 | 2010-12-15 | 陈晓汀 | 胶体金和双流向酶联免疫快速检测一体机 |
CN102279263A (zh) * | 2011-05-06 | 2011-12-14 | 杭州顿力医疗器械股份有限公司 | 一种ccd型胶体金免疫层析诊断试纸定量分析系统 |
CN202720235U (zh) * | 2012-04-19 | 2013-02-06 | 沈鹤柏 | 一种视黄醇结合蛋白定量检测装置 |
CN202720230U (zh) * | 2012-06-27 | 2013-02-06 | 天津市普瑞仪器有限公司 | 一种便携式高分辨率金标检测仪 |
CN102778455A (zh) * | 2012-07-26 | 2012-11-14 | 杭州华光光电有限公司 | 一种胶体金免疫层析试纸用的检测系统 |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN110411989A (zh) * | 2019-08-28 | 2019-11-05 | 热景(廊坊)生物技术有限公司 | 一种上转发光免疫分析仪的快速检测装置其光路整形方法 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
CN106872420B (zh) | 一种时间分辨荧光定量检测尿微量白蛋白的试剂盒及方法 | |
CN202814988U (zh) | 一种全量程超敏c反应蛋白胶体金检测试纸条 | |
US4240751A (en) | Method and apparatus for specific binding substances | |
US20190219569A1 (en) | Fluorescence immunochromatographic detection card and a preparation method therefor and use thereof | |
CN101825640A (zh) | 一种胶体金免疫层析定性定量两用检测hcg试纸 | |
WO2018120854A1 (zh) | 检测ck-mb的时间分辨荧光免疫层析试纸条、试剂盒及其制备方法 | |
CN207248894U (zh) | 胱抑素c时间分辨检测卡及试剂盒 | |
CN105675879A (zh) | 血清淀粉样蛋白a的荧光免疫层析检测方法及试剂盒 | |
CN102341706A (zh) | 前带现象检测方法、分析方法、前带现象检测装置和分析装置 | |
CN101887063A (zh) | 一种人c-反应蛋白胶体金免疫层析法定量检测试纸 | |
CN101762690A (zh) | 一种定量检测血液中c反应蛋白的磁性免疫层析试纸条及制备方法 | |
CN105510577A (zh) | 一种快速多点定标定量检测血液多种分析物的方法 | |
CN102269763A (zh) | 一种膀胱癌定量检测试纸 | |
CN202720235U (zh) | 一种视黄醇结合蛋白定量检测装置 | |
CN101566631A (zh) | 一种联合检测hiv-1+2抗体和p24抗原的磁性免疫层析试纸条及其制备方法 | |
CN101762697A (zh) | 一种定量检测血液中肿瘤相关抗原15-3的磁性免疫层析试纸条及制备方法 | |
CN101762699A (zh) | 一种定量检测血液中肿瘤相关抗原125的磁性免疫层析试纸条及制备方法 | |
EP4160210A1 (en) | Sandwich-type assays using decreasing signal portions of dose response curve to measure analytes, including analytes at high concentration | |
Liu et al. | Procalcitonin measurement using antibody-conjugated fluorescent microspheres distinguishes atypical bacterial meningitis from viral encephalitis in children | |
CN103954753A (zh) | 一种免疫层析试纸条的定量检测方法 | |
CN212068784U (zh) | 一种检测人超敏c反应蛋白用微流控纸芯片 | |
Golden et al. | A “do-it-yourself” array biosensor | |
CN207301081U (zh) | 一种胰蛋白酶原时间分辨荧光纳米免疫层析定量检测试纸条 | |
CN103698323A (zh) | 一种胶体金免疫层析试纸检测系统 | |
CN106546729A (zh) | 一种去除干式免疫荧光定量法检测中血清基质效应的新工艺方法 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
C06 | Publication | ||
PB01 | Publication | ||
C10 | Entry into substantive examination | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
C02 | Deemed withdrawal of patent application after publication (patent law 2001) | ||
WD01 | Invention patent application deemed withdrawn after publication |
Application publication date: 20140402 |