CN103674954B - 一种用于检测日本血吸虫感染性水体的装置及检测方法 - Google Patents

Abstract

一种用于检测日本血吸虫感染性水体的装置及方法，属于血吸虫病防治研究领域。本装置由扩展剂滴加装置、粘取尾蚴装置及扩展剂共同构成。扩展剂滴加装置由活塞拉杆、扩展剂盛放缸、扩展剂出液嘴、固定支架、刻度细线、伸缩拉杆A、定滑轮A及收线摇柄A等组成；粘取尾蚴装置由载膜器具、细线、伸缩拉杆B、定滑轮B、收线摇柄B、双面胶及PE吸附膜组成。在待检测水面用扩展剂滴加装置在待测水面中心的十字方向滴加扩展剂，在扩展剂的作用下水面漂浮的尾蚴被推至检测水面中心，利用粘取尾蚴装置上的PE吸附膜粘取水面中心的尾蚴，显色剂显色后直接在解剖镜下计数。本装置及方法对水面上的血吸虫尾蚴具有富集作用，从而大大提高了血吸虫感染性水体的检测速度及检出率。

Description

一种用于检测日本血吸虫感染性水体的装置及检测方法

技术领域

一种用于检测日本血吸虫感染性水体的装置及检测方法，属于血吸虫病防治研究领域。

背景技术

血吸虫病是一种经水传播的传染性疾病，目前在我国长江中下游地区流行。对水体中血吸虫尾蚴的检测是疫情监测系统的最重要组成部分，现有的检测方法主要采用C-6膜法及哨鼠法，但这两种方法均因水面尾蚴密度较低使其检测敏感性受到限制，同时因为C-6膜质地较软且该方法需要C-6膜的量大，给现场操作和检查带来了很大不便；哨鼠法每年耗费大量的实验动物，从放哨鼠到检测需要至少一个月的时间而且需要大量的人力支出。本装置利用扩展剂在水面扩散过程中形成的推力作用，对水面尾蚴进行富集，结合薄膜粘取尾蚴的特性从而提高对疫水检测的敏感性。本装置及方法操作简便，覆盖范围广，能快速的检出水体中极少量的血吸虫尾蚴，敏感性高，为目前低流行状态下的疫水检测提供了一种新的快速检测方法。

发明内容

本发明的目的是为了解决现有技术上在血吸虫病低流行区，水面血吸虫尾蚴密度低，难以检测的问题，而提供的一种可以快速高效检测日本血吸虫感染性水体的装置及方法。

本发明的技术方案：一种用于检测日本血吸虫感染性水体的装置，本装置由扩展剂滴加装置（图1）、粘取尾蚴装置（图2）及扩展剂共同构成。扩展剂滴加装置：由上端带有螺栓的活塞拉杆1，内侧带有螺纹的下挡板2，两端外侧带有密封螺纹的扩展剂盛放缸3，固定在扩展剂盛放缸上支撑橡胶垫的中挡板4，在扩展剂盛放缸一侧的扩展剂出液嘴5，外侧及下端内侧带有螺纹、支撑橡胶垫及固定支架的上挡板6，允许细线通过且阻碍扩展剂流出的橡胶垫7，下端内侧及上端外侧带螺纹、固定扩展剂盛放缸的固定支架8，固定在伸缩拉杆A前端的定滑轮A9，一端带有螺母的刻度细线10，前端带有螺母的支撑固定架的2-5m长伸缩拉杆A11，固定在伸缩拉杆A尾端的定滑轮及收线摇柄A12组成；

扩展剂置于扩展剂盛放缸内；

粘取尾蚴装置：由四角有孔、底面平整的塑料制载膜器具13，固定及平衡载膜器具的固定线14，固定在伸缩拉杆B前端的定滑轮B15，提升载膜器具的提升线16，前端带环的2-4m长伸缩拉杆B17，固定在伸缩拉杆B尾端的定滑轮及收线摇柄B18，双面胶19和10cm×10cmPE吸附膜20组成。

所述用于检测日本血吸虫感染性水体的装置，扩展剂为试剂煤油、或异佛尔酮等扩展剂。

用所述检测日本血吸虫感染性水体的装置的检测方法，在选定的待检测水面中心的十字方向4个距中心1m处，应用扩展剂滴加装置滴加扩展剂，将水面漂浮的血吸虫尾蚴推至待检测水面中心，然后用粘取尾蚴装置上载有的PE吸附膜粘取待检测水面中心的血吸虫尾蚴，显色剂显色后直接在解剖镜下鉴定并计数。

本发明的有益效果：由于本装置及检测方法对水面上的日本血吸虫尾蚴具有富集作用，从而大大提高了血吸虫感染性水体的检测速度及检出率，而且操作简便。本装置及检测方法采用质地较硬吸附能力强的PE吸附膜使操作更为简便，同时本检测方法避免了哨鼠法所耗费的大量实验动物，本装置及检测方法对各种水体均适合应用，避免了哨鼠法及C-6膜法只能在大型水体的边缘检测所带来的的偏倚。

附图说明

图1为扩展剂滴加装置的结构示意图，1、活塞拉杆，2、下挡板，3、扩展剂盛放缸，4、中挡板，5、扩展剂出液嘴，6、上挡板，7、橡胶垫，8、固定支架，9、定滑轮A，10、刻度细线，11、伸缩拉杆A，12、收线摇柄A。

图2为粘取尾蚴装置结构示意图，13、载膜器具，14、固定线，15、定滑轮B，16、提升线，17、伸缩拉杆B，18、收线摇柄B，19、双面胶，20、PE吸附膜。

图3试剂煤油的量效关系曲线

图4异佛尔酮的量效关系曲线

图5扩展剂滴加示意图。

具体实施方式

实施例1：扩展剂滴加装置的连接及扩展剂的装入

首先将上端带有螺栓的活塞拉杆1推入两端外侧带有密封螺纹的扩展剂盛放缸3内，再将内侧带有螺纹的下挡板2与两端外侧带有密封螺纹的扩展剂盛放缸3下端连接好。其次将外侧及下端内侧带有螺纹、支撑橡胶垫及固定支架的上挡板6的下端与下端内侧及上端外侧带螺纹固定扩展剂盛放缸的固定支架8连接为一体，再将外侧及下端内侧带有螺纹、支撑橡胶垫及固定支架的上挡板6的上端与前端带有螺母的支撑固定架的2-5m长伸缩拉杆A11连接起来并旋紧。然后将一端带有螺母的刻度细线10的一端系在固定在伸缩拉杆尾端的定滑轮及收线摇柄A12上，刻度细线带螺母的一端绕过固定在伸缩拉杆前端的定滑轮A9，并依次穿过下端内侧及上端外侧带螺纹固定扩展剂盛放缸的固定支架8、外侧及下端内侧带有螺纹支撑橡胶垫及固定支架的上挡板6、允许细线通过且阻碍扩展剂流出的橡胶垫7，然后将上端带有螺栓的活塞拉杆1推至固定在扩展剂盛放缸上支撑橡胶垫的中挡板4处，再将穿过橡胶垫的带有螺母的刻度细线10的螺母与上端带有螺栓的活塞拉杆1旋在一起。将上端带有螺栓的活塞拉杆1拉至扩展剂盛放缸的下挡板2处，将扩展剂通过固定在扩展剂盛放缸上支撑橡胶垫的中挡板4中间的孔加入到扩展剂盛放缸3中。最后将允许细线通过且阻碍扩展剂流出的橡胶垫7覆盖在固定在扩展剂盛放缸上支撑橡胶垫的中挡板4上面，再将外侧及下端内侧带有螺纹支撑橡胶垫及固定支架的上挡板6压在允许细线通过且阻碍扩展剂流出的橡胶垫7上面并与扩展剂盛放缸3旋在一起。

实施例2：粘取尾蚴装置的连接

将粘取尾蚴的10cm×10cmPE吸附膜20通过双面胶19粘合在四角有孔底面平整的塑料制载膜器具13的底部。将四根固定及平衡载膜器具的固定线14一端系在四角有孔底面平整的塑料制载膜器具13的四个孔上，另一端系在提升载膜器具的提升线16上，然后将提升载膜器具的提升线16通过前端带环的2-4m长伸缩拉杆B17的环，绕过固定在伸缩拉杆B上的定滑轮B15，再系在固定在伸缩拉杆B尾端的定滑轮及收线摇柄B18上。

实施例3扩展剂的滴加及尾蚴的粘取

将扩展剂滴加装置通过2-5m长伸缩拉杆A11伸到水面上，分别在选定的待检测水面中心的十字方向4个距中心1m处根据一端带有螺母的刻度细线10上的刻度控制扩展剂的滴加量，通过固定在伸缩拉杆A尾端的定滑轮及收线摇柄A12来收取细线使带有螺栓的活塞拉杆1上提将扩展剂从两端外侧带有密封螺纹的扩展剂盛放缸3内经由扩展剂出液嘴5排出。当扩展剂完全散开后将准备好的粘取尾蚴装置应用前端带环的2-4m长伸缩拉杆B17伸到待检测水面中心，用固定在伸缩拉杆B尾端的定滑轮及收线摇柄B18将四角有孔底面平整的塑料制载膜器具13放到水面，利用10cm×10cmPE吸附膜20粘取尾蚴，约15秒后摇动固定在伸缩拉杆B尾端的定滑轮及收线摇柄B18通过提升载膜器具的线16将四角有孔底面平整的塑料制载膜器具13提起并收回。将粘有尾蚴的10cm×10cmPE吸附膜20从四角有孔底面平整的塑料制载膜器具13上卸下来，在显色剂下显色后直接解剖镜下鉴定并计数。

实施例4建立扩展剂量效关系

以煤油、异佛尔酮等为扩展剂，用量2.5μL、5μL、10μL、20μL、40μL滴在水面上，记录扩散半径，并计算扩散面积。根据不同扩展剂的量及扩散半径拟合一条曲线，从而估算出不同面积的水域所需要的扩展剂的量来指导现场应用。结果发现异佛尔酮的扩散效果明显优于试剂煤油，从图3及图4中可以发现相同体积的情况下异佛尔酮的扩散面积约为试剂煤油扩散面积的50倍，且扩散速度基本相同。（如图3、4）

实施例5扩展剂的滴加方式及用量选择

由于现场操作过程中所选择的待检测水域距离岸边有一定距离，所以扩展剂滴加装置的伸缩杆设计为长2-5m，另外扩展剂滴加后呈圆形向四周扩散，扩散面积只占待检区的1/4，所以根据待检测水域面积、扩展剂的类型及量效关系曲线计算得到（图5所示），在A、B、C、D四个角上分别滴加2.5-40μL扩展剂，待扩展剂完全散开尾蚴将被推至待检测水面中心区。

实施例6扩展剂的现场模拟及效果评价

在外江的江滩上寻找一河滩，在距离河滩5m的地方建3个2m²的水池，并引河水灌入。在每个水池中各加入600条尾蚴，待尾蚴分布均匀后，将3个水池分别标做PE吸附膜对照组、PE吸附膜+煤油组、PE吸附膜+异佛尔酮组。各组应用分别相应的扩展剂及3张准备好的PE吸附膜粘取尾蚴，染色后在解剖镜下鉴定并计数。每组实验重复3次，以每张膜面积为100cm²计，3张膜总面积约为水体表面积的1.5%，通过比较PE吸附膜对照组、PE吸附膜+煤油组、PE吸附膜+异佛尔酮组尾蚴收取率，对比检测效果。

结果发现PE吸附膜结合扩展剂收取尾蚴的数量明显高于单纯应用PE吸附膜组，尾蚴检出率约提高了60倍（见表1）。

表1

Claims (3)

1.一种用于检测日本血吸虫感染性水体的装置，本装置由扩展剂滴加装置、粘取尾蚴装置及扩展剂共同构成；

扩展剂滴加装置：由上端带有螺栓的活塞拉杆（1），内侧带有螺纹的下挡板（2），两端外侧带有密封螺纹的扩展剂盛放缸（3），固定在扩展剂盛放缸上支撑橡胶垫的中挡板（4），在扩展剂盛放缸一侧的扩展剂出液嘴（5），外侧及下端内侧带有螺纹、支撑橡胶垫及固定支架的上挡板（6），允许细线通过且阻碍扩展剂流出的橡胶垫（7），下端内侧及上端外侧带螺纹、固定扩展剂盛放缸的固定支架（8），固定在伸缩拉杆A前端的定滑轮A（9），一端带有螺母的刻度细线（10），前端带有螺母的支撑固定架的2-5m长伸缩拉杆A（11），固定在伸缩拉杆A尾端的定滑轮及收线摇柄A（12）组成；

扩展剂置于扩展剂盛放缸内；

粘取尾蚴装置：由四角有孔、底面平整的塑料制载膜器具（13），固定及平衡载膜器具的固定线（14），固定在伸缩拉杆B前端的定滑轮B（15），提升载膜器具的提升线（16），前端带环的2-4m长伸缩拉杆B（17），固定在伸缩拉杆B尾端的定滑轮及收线摇柄B（18），双面胶（19）和10cm×10cmPE吸附膜（20）组成。

2.根据权利要求1所述用于检测日本血吸虫感染性水体的装置，其特征在于扩展剂为试剂煤油或异佛尔酮。

3.用权利要求1所述检测日本血吸虫感染性水体的装置的检测方法，其特征在于在待检测水面中心的十字方向4个距中心1m处，应用扩展剂滴加装置滴加扩展剂，将水面漂浮的血吸虫尾蚴推至待检测水面中心，然后用粘取尾蚴装置上载有的PE吸附膜粘取待检测水面中心的血吸虫尾蚴，显色剂显色后直接在解剖镜下鉴定并计数。