CN103623455B - 一种生物护创膜的制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种生物护创膜的制备方法，其制备方法包括：①选取胎盘，取下胎膜；②冲洗，并将绒毛膜除去，得到羊膜；③用生理盐水冲洗并浸泡；④刮膜，除去残留绒毛膜及其附属物；⑤冲洗；⑥将羊膜放入浸泡液中处理，再将其固定在专用膜片静置；⑦用生理盐水冲洗羊膜后用保护液冲洗；⑧将羊膜置于干净的保护液中，于紫外灯下照射；⑨将羊膜放至包装袋中，注入保护液，封口，得生物护创膜。该护创膜具有韧性、弹性及透气性好等特点；并且与创面不排斥，给敷性强，该护创膜及其制备方法成本低，不但给患者减轻经济负担，且减轻了患者的痛苦，三度以内烧伤可以不用换药切痂，是目前国内最先进的一种生物技术。

Description

一种生物护创膜的制备方法

技术领域

本发明涉及医药领域中的一种医用材料，具体涉及一种生物护创膜的制备方法。

背景技术

由火焰、高温固体、化学物质、强辐射热和电等引起的皮肤损伤称之为烧伤。烧伤的程度由温度的高低、作用时间的长短而不同。烧伤皮肤达全身表面积的三分之一以上时则可有生命危险。

在临床上，烧伤的严重程度取决于受伤组织的范围和深度，烧伤深度可分为I度、II度和III度。I度烧伤损伤最轻，烧伤皮肤发红、疼痛、明显触痛、有渗出或水肿，轻压受伤部位时局部变白，但没有水疱；II度烧伤损伤较深，皮肤有水疱，水疱底部呈红色或白色，充满了清澈、黏稠的液体，触痛敏感，压迫时变白；III度烧伤损伤最深，烧伤表面可以发白、变软或者呈黑色、炭化皮革状。由于被烧皮肤变得苍白，在白皮肤人中常被误认为正常皮肤，但压迫时不再变色。破坏的红细胞可使烧伤局部皮肤呈鲜红色，偶尔有水疱，烧伤区的毛发很容易拔出，感觉减退。III度烧伤区域一般没有痛觉。因为皮肤的神经末梢被破坏。烧伤后常常要经过几天，才能区分深II度与III度烧伤。

而皮肤指身体表面包在肌肉外面的组织，是人体最大的器官，主要承担着保护身体、排汗、感觉冷热和压力的功能。人和高等动物的皮肤由表皮、真皮、皮下组织三层组成。而表皮和真皮又分别由很多层构成，表皮是基底层、棘层、颗粒层、透明层、角质层；真皮是乳头层和网状层，要非常精确地判定烧伤的深度总是不太容易，特别是在二度烧伤的案例中，因为二度烧伤的深度可能会随着时间推移而改变。鉴于此，即使在最初进行治疗的情况下，二度烧伤也有可能会演变成三度烧伤。

护创膜是一种能代替纱布敷料的生物膜，保护创面不被感染的一种敷膜。用于大面积烧伤病人身上效果甚佳。护创膜不仅能代替纱布，而且优于人工皮，一次敷用，不用更换。目前，烧伤病人临床上主要是靠大量的抗生素静滴控制创面感染，其次就是烧伤创面涂一些烧伤药膏，有市售的，也有医院自制的。比较先进一点的就是应用一些化学合成膜。总之，这些方法都会给患者带来很大的痛苦。每次换药，患者都要使用麻醉剂(杜冷丁)才能止痛。不但治疗费用昂贵，而且更主要的是给患者带来极大的痛苦。另外对大面积烧伤病人，需要植皮，自身的好皮很少，因此就得用人工皮，人工皮做起来比较复杂。

发明内容

本发明的目的是提供一种生物护创膜的制备方法，它与临床上用的化学合成膜相比，具有韧性好，弹性好，透气性好等特点；并且与创面不排斥，给敷性强，该生物护创膜的制备方法成本低，不但给患者减轻经济负担，而且减轻了患者的痛苦，三度以内烧伤可以不用换药切痂，即可以代替人工皮，是目前国内最先进的一种生物技术。

本发明的目的是通过以下技术方案来实现：

一种生物护创膜的制备方法，所述生物护创膜是用动物胎膜制成，保护创面不被感染的一种外敷膜，所述动物胎膜为人或羊的胎膜；该生物护创膜的制备方法包括以下步骤：

①选取胎盘，取下胎膜，所述胎膜完整无变形；

②将步骤①中所述的胎膜进行冲洗，除去血污及杂质，再将胎膜中的绒毛膜分离出去，得到羊膜；

③将步骤②中所述的羊膜用生理盐水冲洗干净后，再在生理盐水中进行浸泡；

④将步骤③中所述的浸泡过的羊膜进行刮膜，除去残留绒毛膜及其附属物；

⑤将步骤④中所述的处理好的羊膜放入生理盐水中冲洗，同时检查确保绒毛膜已清除完全，如还有残留绒毛膜，需要再次处理；

⑥将步骤⑤中所述的羊膜放入浸泡液中处理7～15分钟，并将所述羊膜进行柔洗，再将其固定在专用膜片静置5～10分钟；

⑦用无菌生理盐水将步骤⑥中所述的羊膜冲洗，再用保护液冲洗；

⑧将步骤⑦中所述的用保护液冲洗过的羊膜置于干净无污染的保护液中，并将其放置于紫外灯下照射；

⑨将步骤⑧中所述的羊膜从保护液中取出，再将其放至包装袋中，在所述包装袋中注入100mL所述保护液，将包装袋封口，得生物护创膜；

⑩保存步骤⑨中所述的制备好的生物护创膜。

进一步地，在步骤①中要选取健康分娩出人或羊的胎盘，取其胎膜。

进一步地，步骤③中所述的羊膜在生理盐水中浸泡时间为15～30分钟。

进一步地，步骤⑤中所述的生理盐水为无菌生理盐水。

进一步地，步骤⑥中所述的浸泡液为具有抑菌、杀菌作用的洗必泰。

进一步地，步骤⑥中所述的在浸泡液中处理的时间为10分钟。

进一步地，步骤⑧中所述的紫外照射时间为5～10分钟。

进一步地，所制备的生物护创膜在4℃的温度下进行保存。

本发明的有益效果：

1、生物护创膜有弹性好、随意性的优点；无毒、无副作用、无过敏反应，且具有一定弹性和韧性，易于展开和覆盖。

2、在创面上通透性好，无排斥反应。

3、护创膜不仅能代替纱布，而且优于人工皮，一次敷用，不用更换。它能与创面紧密相贴，起到了保护创面、防止感染、预防感染加深、减少创面渗出的作用。它不产生结痂，患者可免除切痂痛苦，便于患者使用。

4、因为大面积烧伤，创面暴露，不仅创面容易感染、加深、同时还有大量液体渗出，如果用纱布敷料覆盖，在更换敷料清创时，会给病人带来极大的痛苦，护创膜却能完全可以弥补这些缺点。

5、保存方便，勿需特殊条件，保养液同时又可用于创面消毒。保养液成分除有杀、抑菌外，同时又可收缩扩张血管，达到减少创面渗出，降低软组织水肿，及止痛的作用。

6、原材料来源方便，可保存两年有效。护创膜原料易得、成本低、因而能减少患者医疗费用。

7、制备工艺不复杂，所需设备简单易用，小批量生产占用的厂地、厂房少。

8、保存方便，有效期长：护创膜本身具有生理活性，放入保护液中，可长期保存备用，已留样观察二十个月，无任何变化。

9、可用于烧伤创面上，还可用于治疗：手术刀口的敷贴，治疗褥疮和外科擦皮伤、美容业等，创面干净，无须多次换药，不留疤。

10、创面干净、不污染易脏衣物，免除泛用中草药等换药敷料的异味弊端。医生用大量劳动，换药累积的费用亦可观。无多次换药之苦，患者经济消耗低，医务人员劳动量少。

11、生物护创膜覆盖创面，创面周围健康皮肤无一例炎性浸润。为此，减少应用抗生素防止创面细菌感染。临床观察与其他方法对照，创面条件相同，可提前愈合3～4天。愈合后的创面光滑，无毛刺无刺痒感。

具体实施方式

本发明实施例所述的一种生物护创膜的制备方法，生物护创膜是治疗烧、烫伤的局部外用膜。临床上用此护创膜观察的病例已有几百例。从观察结果看，对浅度烧伤、轻II度、重II度、都有良好的效果。对四肢烧伤用护创膜效果更佳，用膜后可减轻患者痛苦，减少创面渗出，可保护创面不被感染加深。对I度、轻II度、重II度烧伤可不留斑痕。对深III度创面早期使用可防止感染，便于手术。同时可用护创膜保护液清洗创面，不但可以杀死残留菌，而且可以代替临床上使用的消毒液。由于膜与创面粘贴甚牢，可开成完整的痂，愈合自动脱落、无痛苦，易于患者接受。

该保护液是由纯度14％的过氧乙酸、95％的乙醇以及灭菌生理盐水配制而成；这三者的体积比为14％的过氧乙酸1％、95％的乙醇14％以及灭菌生理盐水85％，将三者按配比混合均匀，保存待用。该保护膜不仅能保存护创膜，还可保存其它生物膜，如人或羊胎盘、羊膜或绒毛膜等；生物膜放入该保护液中，可长期保存备用，已留样观察二十个月，无任何变化。该保护液是无任何毒、副作用的化学试剂，具有抗炎、杀／抑微生物的作用，又可收缩扩张血管，达到减少创面渗出，降低软组织水肿，及止痛的作用，且使创面保持无菌环境。

下面以具体实验案例为例来说明具体实施方式，应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本发明，并不用于限定本发明。

实验材料：实验组：保存在保护液中的生物护创膜；阳性对照组：京万红烫伤药(天津达仁堂制药二厂生产，批号850489)。实验对象：所用小白鼠为昆明种小白鼠，雌、雄各半，沈阳制药一厂动物房提供；大白鼠：雌、雄各半，沈阳东陵区小动物养殖场提供。

实施例1：对烫伤的治疗作用及病理检查结果

取体重20～24g小白鼠36只，随机分3组，12只／组；用10％硫化钠背部脱毛，以80℃水造成面积为1.4×1.4cm的II度烫伤面。第一组小白鼠使用生物护创膜，作为实验组；第二组小白鼠使用京万红烫伤药，将其作为阳性对照组，第三组小白鼠什么都用，作为空白对照组。

其结果表明：1、实验组和阳性对照组第二天开始长出痂皮，4-7天后所有小白鼠皮肤上的痂脱落，新生肉芽红润，并逐渐长出毛发，至11天时毛发均已长满，且所有小白鼠饮食及活动情况正常；2、阳性对照组(即第一组)比实验组(即第二组)好转慢；3、空白对照组(即第三组)在烫伤初期有嘶叫、跳跃、颤抖等现象，随后局部结痂，小白鼠长毛时间比实验组延迟1～2天；4、实验结束后，试验组小白鼠体重平均增长2g／只，阳性对照组平均增长1.8g／只，空白对照组平均增长1.4g／只。

此外，将上述实验小白鼠造型及涂药部分的皮肤组织进行病理检查，1、空白对照组皮肤出现程度不同的溃疡、坏死，并深达真皮层，皮下组织水肿和淋巴细胞显著，皮肤表面有结痂；2、阳性对照组虽然病变也侵及真层，皮下组织也有水肿和淋巴细胞浸润，但皮肤表面坏死形成溃疡程度较空白对照组轻；3、实验组大多数皮肤基本未破坏，有些小白鼠只是表面留有一些皮肤渗出液形成的痂皮，还有一些小白鼠只是表皮坏死形成痂皮，而真皮部分虽有水肿和浸润，但明显比其它两组轻，如下表所示：

注：-：无±：轻+：中++：重

由此可见，烫伤造型成功，且阳性对照组和实验组均有不同程度的疗效，且实验组(即生物护创膜组)疗效优于阳性对照组。

实施例2：对大白鼠烫伤部位血管通透性的影响

取体重180～200g大白鼠20只，用乌拉担1g／kg腹腔注射麻醉，固定背部，用10％硫化钠腹部脱毛生理盐水洗净待干，舌下静脉注射1％伊文思兰0.2mL／只，立即用80℃水在腹部标形成对称的三个1.4×1.4cm烫伤面，一个为空白对照组(不涂药)，一个为实验组(即使用生物护创膜处)，一个为阳性对照组(即使用京万红烫伤药)，分别于涂烫伤药或贴护创膜1hr后和2hr后观察烫伤面的兰染程度，测量并计算兰染面积，结果见下表所示：

*号与对照组的比较P<0.01

由此可见，生物护创膜能明显的降低烫伤部位的血管通透性。

实施例3：抗炎作用

取体重200～220g大白鼠30只，随机分2组，15只／组，测量两后足踝关节和足掌周经。自足掌腱膜向踝关节皮下注射20％新鲜鸡蛋0.1mL／足，右后足作为实验组，其中一组大白鼠的右后足立即贴生物护创膜，另一组大白鼠的右后足立即涂京万红烫伤药，并每隔0.5hr重复贴膜或涂药一次，上述两组所有大白鼠的左后足作空白对照组。在注射蛋清后0.5hr、1hr、2hr重测两后足关节和足掌周经，计算炎症肿胀程度，结果见下表所示：

*与对照组足比较P<0.05

由表可知，生物护创膜在致炎后0.5hr和1hr对蛋清引起的炎症肿胀有显著抑制作用，且其作用明显优于市售京万红烫伤药。

实施例4：生物护创膜对大白鼠烫伤部位局部循环的影响

取体重210～290g大白鼠30只用乌拉担1g／kg腹腔注射麻醉，背部固定，10％硫化钠腹部脱毛，生理盐水洗净待干。用80℃水在腹部标形成对称的三个直径为1.4cm烫伤面处，其中，一处贴生物护创膜作为实验组，另一处涂京万红烫伤药作为阳性对照组，还有一处作为空白对照组。半小时后在烫伤部位皮下注射0.05伊文思兰0.05mL／处，贴生物护创膜处不动，阳性对照组处继续涂京万红烫伤药，一个小时后观察并比较三个烫伤面的兰染程度，测量计算兰染面积，结果见下表所示：

组别	动物数(只)	局部兰染相对面积(X±SD)
			空白对照组	30	187.8±28.8
阳性对照组	30	149.4±19.2*
			实验组	30	116.8±21.3*

*号与对照处比较P<0.01

由此可以看出生物护创膜显著改善烫伤部位的局部血液循环，促进染色剂吸收，减轻兰染程度，使兰染面积较对照组明显减少。

实施例5：生物护创膜皮肤过敏实验

取体重20～22g健康小白鼠20只，剪去背部毛发面积2×2cm，局部涂保护液适量，每天1次，连续3天；然后贴生物护创膜，于第一次涂保护液后第14天，护创膜自行脱落；再重复上述操作，观察局部的情况。结果未见涂保护液贴护创膜处有任何发红、皮疹、水肿、起泡等现象，动物也无任何全身反应。说明生物护创膜无局部刺激性过敏反应。

实施例6：生物护创膜抑菌实验

体外抑菌实验采用三个方法：即营养琼脂平皿实验(平板法)、营养琼脂平皿实验增菌划线法以及肉汤培养实验法，采用六种标准致病菌株。结果表明：生物护创膜对大肠杆菌、绿脓杆菌、金黄色葡萄球菌、白色葡萄球菌、四叠球菌和八叠球菌等均有抑制作用。

具体实施时，浅II度以及深II度偏浅的新鲜创面创伤1～8小时后，用生物护创膜覆盖后，基本贴一次创面即可愈合。而对于面积大的新鲜创面，在创伤后1～2小时内使用，覆盖后渗出液可能部分沿边缘外溢，2小时左右停止；个别护创膜附带积液太多，即保护液附带太多时，可在护创膜的相关部位撮个小洞放出渗出液，也是基本贴一次创面即可愈合。

本发明不局限于上述最佳实施方式，任何人在本发明的启示下所作的有关本发明的任何修饰或变更，凡是具有与本申请相同或相近似的技术方案，均落在本发明的保护范围之内。

Claims (3)

1.一种生物护创膜的制备方法，所述生物护创膜是用动物胎膜制成，保护创面不被感染的一种外敷膜，其特征在于：所述动物胎膜为选取健康分娩出人或羊的胎盘，取其胎膜；该生物护创膜的制备方法包括以下步骤：

①选取胎盘，取下胎膜，所述胎膜完整无变形；

②将步骤①中所述的胎膜进行冲洗，除去血污及杂质，再将胎膜中的绒毛膜分离出去，得到羊膜；

③将步骤②中所述的羊膜用生理盐水冲洗干净后，再在生理盐水中进行浸泡；所述的羊膜在生理盐水中浸泡时间为15～30分钟；

④将步骤③中所述的浸泡过的羊膜进行刮膜，除去残留绒毛膜及其附属物；

⑤将步骤④中所述的处理好的羊膜放入生理盐水中冲洗，同时检查确保绒毛膜已清除完全；

⑥将步骤⑤中所述的羊膜放入浸泡液中处理7～15分钟，并将所述羊膜进行柔洗，再将其固定在专用膜片静置5～10分钟；所述的浸泡液为具有抑菌、杀菌作用的洗必泰，在浸泡液中处理的时间为10分钟；

⑦用无菌生理盐水将步骤⑥中所述的羊膜冲洗，再用保护液冲洗；

⑧将步骤⑦中所述的用保护液冲洗过的羊膜置于干净无污染的保护液中，并将其放置于紫外灯下照射；所述的紫外照射时间为5～10分钟；

⑨将步骤⑧中所述的羊膜从保护液中取出，再将其放至包装袋中，将包装袋封口，得所述生物护创膜；

⑩保存步骤⑨中所述的制备好的生物护创膜。

2.根据权利要求1所述的生物护创膜的制备方法，其特征在于：步骤⑤中所述的生理盐水为无菌生理盐水。

3.根据权利要求1所述的生物护创膜的制备方法，其特征在于：所制备的生物护创膜在4℃的温度下进行保存。