CN103610079A - 一种dha磷脂的使用方法 - Google Patents
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Abstract
本发明提供DHA磷脂的新的用途，即其在制备用于辅助睡眠的制品中的应用。本发明所述的DHA磷脂，其一种制备方法如下：首先用提取液浸提原料，静置分层后，收集下层溶液，用无水硫酸钠除水后蒸干得到总脂，加入冷丙酮洗涤后等到粗产品，粗产品经纯化后得到DHA磷脂。本发明所述DHA磷脂纯天然提取物，安全性高，稳定性好，更易被人体吸收，具有很高营养价值和保健功能。对于小鼠的使用效果表明，可以有效的促进小鼠的睡眠时间；因此，具有开发成辅助睡眠的制品的应用潜力。
Description
技术领域
本发明属于天然高分子领域，具体涉及一种含DHA的磷脂在制备用于延长睡眠时间的保健食品、功能性食品或药物中的应用。
背景技术
现代社会竞争激烈，人们思想压力大，致使许多人长期失眠或睡眠质量不高。长期失眠会使人患上许多相关疾病。到目前为止，治疗失眠改善睡眠的药物其效果褒贬不一，许多人使用安眠药来缓解失眠或睡眠质量问题，长时间服用安眠药会产生药物依赖性并且可能导致其他疾病发生。安眠药物产生的毒副作用也严重危害人体健康。因此，有必要获得副作用更小的，具有延长睡眠时间的物质。
发明内容
本发明的目的是提供一种DHA磷脂的新的用途，即其在制备用于辅助睡眠的制品中的应用，从而弥补现有技术上的不足。
本发明首先提供DHA磷脂的新的用途，即其在制备用于辅助睡眠的制品中的应用。
本发明所述的DHA磷脂，其一种制备方法如下：首先用提取液浸提原料，静置分层后，收集下层溶液，用无水硫酸钠除水后蒸干得到总脂，加入冷丙酮洗涤后等到粗产品，粗产品经纯化后得到DHA磷脂。
其中提取液为氯仿、甲醇和0.88% KCl溶液的混合液，其中氯仿、甲醇和KCl溶液的体积比为 60：30：22.5;
所述的纯化为硅胶柱层析法纯化；
所述的原料为鱿鱼卵粉或南极磷虾粉。
所述的辅助睡眠的制品，为食品、保健品或药品。
本发明所述DHA磷脂纯天然提取物，安全性高，稳定性好，更易被人体吸收，具有很高营养价值和保健功能。对于小鼠的使用效果表明，可以有效的促进小鼠的睡眠时间；因此，具有开发成辅助睡眠的制品的应用潜力。
具体实施方式
DHA磷脂是一种富含二十二碳六烯酸（DHA）的磷脂，主要存在于海洋生物体内，尤其以海洋动物的卵中含量较为丰富。申请人在长期的研究中发现，DHA磷脂能够有效的延长小鼠睡眠时间的问题，从而促成了本发明。
在本发明中，为了提供使用效果，优选DHA含量不小于15%的DHA磷脂。
实施例1 鱿鱼卵DHA磷脂的制备
称取10g的鱿鱼卵粉,先加入体积比60∶30∶22.5 加入氯仿,甲醇和KCl溶液（质量体积百分比浓度为0.88%）共1125mL，振荡摇匀后静置12h分层。收集下层氯仿层，用无水硫酸钠过滤，收集滤液蒸干得到总脂。用冷丙酮洗涤3-4次获得磷脂。再经硅胶柱层析法纯化，具体方法是称取45g柱层析硅胶，先后分别用150mL甲醇和150mL氯仿充分搅拌静置30min，风干后，在105℃下活化1-2h，冷却至室温。将100mL氯仿加入到活化后的硅胶搅拌均匀至没有气泡，然后倒入层析柱中静置30min待胶柱稳定后进行实验。纯化时使用甲醇洗脱，将收集到的溶液旋蒸至干，得到所需DHA磷脂。
所得DHA磷脂样品利用高效液相色谱仪测得其中磷脂酰胆碱（PC）的含量为92.1%，利用气相色谱仪对其脂肪酸进行分析, 测得其中DHA 含量为40%。
实施例2 南极磷虾DHA磷脂的制备
称取10g南极磷虾粉，采用8倍体积的95%乙醇800mL进行萃取，在30℃下搅拌6h，混合物用真空布氏漏斗过滤，滤液在45℃下旋转蒸发蒸去溶剂，真空干燥至恒重得到总脂。用冷丙酮洗涤数次获得磷脂。磷脂经硅胶柱层析法纯化后，得到所需的DHA磷脂。
所得DHA磷脂样品利用高效液相色谱仪测得其中磷脂酰胆碱（PC）的含量为85.3%，利用气相色谱仪对其脂肪酸进行分析, 测得其中DHA 含量为15%。
实施例3 鱿鱼卵DHA磷脂对小鼠睡眠时间的影响
1 材料与方法
1.1 实验分组
DHA磷脂的制备方案与实施例1相同，选用昆明种小鼠，体重为18~22 g，分为10组，分别为DHA-甘油三酯组、不含DHA的磷脂组、DHA磷脂组和对照组，每组8只。根据DHA磷脂及卵磷脂的人体推荐用量，DHA-甘油三酯组剂量设为100mg/kg BW（标准体重）和不含DHA的磷脂组剂量设为200mg/kg BW（标准体重），DHA磷脂组剂量设为150mg/kg BW，对照组给予以等体积的蒸馏水。分别给予相应剂量组动物灌胃，灌胃体积为0.2 mL/10g BW，每天灌胃一次，连续灌胃30 d。
1.2实验方法
在末次灌胃结束后15分钟，各组动物经腹腔注射戊巴比妥钠50mg/kg BW(剂量由预实验所得)，注射量为0.2mL/20g BW。观察受试物能否延长戊巴比妥钠睡眠时间，以动物的翻正反射消失超过60s 判为进入睡眠，翻正反射恢复即为动物觉醒，统计动物睡眠时间，结果用方差分析进行统计分析。如试验小鼠的睡眠时间比阴性对照组延长有统计学意义，即判定该项试验结果为阳性。
2 实验结果
表1：鱿鱼卵DHA磷脂对延长小鼠戊巴比妥钠睡眠时间实验的实验结果
| 组别 | 例数 | 延长戊巴比妥钠睡眠时间（min）  |
| 对照组 | 8 | 56.7±5.48 |
| 不含DHA的磷脂组 | 8 | 50.7±6.29 |
| DHA-甘油三酯组 | 8 | 52.4±10.15 |
| DHA磷脂组 | 8 | 103.0±12.55* |
注：*与对照组相比P＜0.05。
实验结果见表1，DHA磷脂组与对照组、卵磷脂组和DHA鱼油组相比较，均有统计学意义，且DHA磷脂延长戊巴比妥钠睡眠时间的作用与其剂量有关，剂量越大作用越显著。卵磷脂和DHA鱼油均无镇静催眠作用。结果表明，只有富含DHA的磷脂对延长戊巴比妥钠睡眠时间有效。
实施例4 南极磷虾DHA磷脂对小鼠睡眠时间的影响
1 材料与方法
1.1 实验分组
DHA磷脂的制备方案与实施例2相同。选用昆明种小鼠，体重为18~22 g，分为10组，分别为DHA磷脂高、中、低剂量组和对照组，每组8只。DHA磷脂组高、中、低剂量设为300、150、75mg/kg BW，对照组给予以等体积的蒸馏水。分别给予相应剂量组动物灌胃，灌胃体积为0.2 mL/10g BW，每天灌胃一次，连续灌胃30 d。
1.2实验方法
实验方法与实验例3所述试验方法相同。
2 实验结果
表2：南极磷虾DHA磷脂对延长小鼠戊巴比妥钠睡眠时间实验的实验结果
| 组别 | 例数 | 延长戊巴比妥钠睡眠时间（min）  |
| 对照组 | 8 | 53.2±5.18 |
| DHA磷脂高 | 8 | 70.3±6.62** |
| DHA磷脂中 | 8 | 66.5±2.54* |
| DHA磷脂低 | 8 | 61.1±4.34 |
*与对照组相比P＜0.05, **与对照组相比P＜0.01
实验结果见表2，DHA磷脂与对照组相比较，DHA磷脂能延长小鼠戊巴比妥钠睡眠时间，其显著性与剂量有关，剂量越大作用越显著。同时表明，DHA含量为15%的南极磷虾DHA磷脂延长睡眠时间的作用效果与DHA含量为40%的鱿鱼卵DHA磷脂的作用效果存在很大差距，富含DHA的鱿鱼卵DHA磷脂对延长睡眠时间的作用具有统计学意义，只有富含DHA的DHA磷脂对延长戊巴比妥钠睡眠时间有显著效果。
而对其它海洋生物来源的DHA磷脂的研究结果表明其也具有南极磷虾DHA磷脂的功效。
上述结果表明，富含DHA的DHA磷脂可以有效的延长小鼠的睡眠时间，具有具有开发成辅助睡眠的制品的应用潜力。
Claims (8)
1.一种DHA磷脂的应用，其特征在于，是将DHA磷脂用于制备辅助睡眠的制品。
2.如权利要求1所述的应用，其特征在于所述的DHA磷脂中DHA含量不小于15%。
3.如权利要求1所述的应用，其特征在于所述的DHA磷脂，其制备方法如下：首先用提取液浸提原料，静置分层后，收集下层溶液，用无水硫酸钠除水后蒸干得到总脂，加入冷丙酮洗涤后等到粗产品，粗产品经纯化后得到DHA磷脂。
4.如权利要求3所述的应用，其特征在于所述的提取液为氯仿、甲醇和0.88% KCl溶液的混合液，其中氯仿、甲醇和KCl溶液的体积比为 60：30：22.5。
5.如权利要求3所述的应用，其特征在于所述的纯化为硅胶柱层析法纯化。
6.如权利要求3所述的应用，其特征在于所述的原料为鱿鱼卵粉或南极磷虾粉。
7.如权利要求1所述的应用，其特征在于所述的辅助睡眠的制品，为食品、保健品或药品。
8.一种用于辅助睡眠的制品，其特征在于，所述的制品包含有DHA含量不小于15%的DHA磷脂。
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Legal Events
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|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
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| C10 | Entry into substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| C12 | Rejection of a patent application after its publication | ||
| RJ01 | Rejection of invention patent application after publication |
Application publication date: 20140305 |