CN103571750B

CN103571750B - 一种以无菌操作箱的方式改良接种工艺

Info

Publication number: CN103571750B
Application number: CN201310292058.3A
Authority: CN
Inventors: 章方国
Original assignee: WENZHOU SUNSHINE MACHINERY TECHNOLOGY Co Ltd
Current assignee: WENZHOU SUNSHINE MACHINERY TECHNOLOGY Co Ltd
Priority date: 2013-07-10
Filing date: 2013-07-10
Publication date: 2015-06-17
Anticipated expiration: 2033-07-10
Also published as: CN103571750A

Abstract

本发明涉及一种以无菌操作箱的方式改良接种工艺。主要解决了现有的接种工艺灭菌程度以及自动化程度都不高的问题。包括以下步骤：对无菌操作箱以及整个接种发酵装置进行空气排空且以蒸汽灭菌；把装有菌种的管体放入无菌操作箱内并灭菌；打开接种罐上的接种头并倒入菌种；菌种通过管道输送到发酵箱内。整个装置以及装有菌种的管体均进行了彻底的灭菌，不会残留任何杂菌，提高了发酵的有效性，工艺操作简单，不繁琐；对菌种的添加采用自动化输送，科学高效。

Description

一种以无菌操作箱的方式改良接种工艺

技术领域

本发明涉及一种工业发酵领域，具体涉及一种以无菌操作箱的方式改良接种工艺。

背景技术

发酵有时也写作酦酵，其定义由使用场合的不同而不同。通常所说的发酵，多是指生物体对于有机物的某种分解过程。

发酵时需要在发酵箱内接入菌种（一般为人工接入），且不能混入杂菌，这样就对灭菌效果有很高的要求。

通常在工业上的接种为人工点火式接种，在发酵箱上打开一个小口，在开口周围涂上酒精并点燃，一段时间后再倒入从实验室中取来的带有菌种的药剂。这种方式的接种虽然在一定程度上消灭了杂菌，但是还残留了少量杂菌，同时点火式接种难度较高，而且对于工作人员还有一定的危险性。

另外一种常用的接种方式是在发酵箱体侧面打开一个小口，再放一个无菌操作箱，工作人员通过无菌操作箱已经消毒，倒入药剂。这种方式虽然能保证灭菌的程度，但是操作很繁琐，没有实现自动化，导致效率较低。

发明内容

为了克服背景技术的不足，本发明提供一种以无菌操作箱的方式改良接种工艺，主要解决了现有的接种工艺灭菌程度以及自动化程度都不高的问题。

本发明所采用的技术方案是：一种以无菌操作箱的方式改良接种工艺，包括以下步骤：

（1）灭菌，先进行管道灭菌，操作阀门使管道的两端分别与蒸汽源及外界相通，此时管道与发酵罐之间不通，管道内充入温度为130—145℃、压力0.2—0.3MPa的蒸汽，排空管道内的原有空气，持续10—15分钟；然后，进行接种罐以及经过管道系统的发酵罐灭菌，操作阀门使管道与外界关闭且管道与发酵罐相通，蒸汽对接种罐以及发酵罐内进行灭菌持续10—15分钟；最后，进行无菌操作箱灭菌，关闭无菌操作箱的门，打开操作箱内的紫外线灯，对无菌操作箱内进行灭菌，持续10—15分钟；

（2）从实验室中取出装有菌种的管体，打开四分之一无菌操作箱的侧开门，同时打开箱体内的正压无菌风口，把管体放在箱体内一侧，打开紫外线灯，关上玻璃门，持续10—15分钟；

（3）关闭紫外线灯，打开无菌操作箱的玻璃门，再打开接种罐上的接种盖，将接种盖挂于旁边的支架上，远离操作箱底，然后把菌种倒入接种罐内，盖上接种盖，关闭玻璃门；

（4）打开接种罐上的增压装置，增压到0.3—0.35MPa，接种罐内的压力大于发酵罐内的压力，菌种就通过管道被输送到了发酵罐内。

步骤（1）中的无菌蒸汽为135℃，0.25MPa；上述的灭菌持续时间为15分钟，步骤（4）中增压到0.3MPa。

步骤（2）中的菌种3%—5%的液体菌种。

所述的菌种为5%的液体菌种。

本发明的有益效果是：由于采取上述技术方案，整个装置以及装有菌种的管体均进行了彻底的灭菌，不会残留任何杂菌，提高了发酵的有效性，工艺操作简单，不繁琐；对菌种的添加采用自动化输送，科学高效，增加了接种的成功率。

附图说明

图1为本发明涉及装置的结构示意图。

图中1、接种罐；2、无菌操作箱；3、发酵罐；4、管道；5、阀门；6、增压装置。

具体实施方式

下面结合附图对本发明实施例作进一步说明：

一种以无菌操作箱的方式改良接种工艺，包括以下步骤：

（1）灭菌，先进行管道灭菌，操作阀门使管道的两端分别与蒸汽源及外界相通，此时管道与发酵罐3之间不通，管道4内充入温度为130—145℃、压力0.2—0.3MPa的蒸汽，排空管道4内的原有空气，持续10—15分钟；然后，进行接种罐1以及经过管道系统的发酵罐3灭菌，操作阀门使管道与外界关闭且管道与发酵罐3相通，蒸汽对接种罐1以及发酵罐3内进行灭菌持续10—15分钟；最后，进行无菌操作箱灭菌，关闭无菌操作箱的门，打开操作箱内的紫外线灯，对无菌操作箱内进行灭菌，持续10—15分钟；

整个接种发酵装置包括内设有接种罐1的无菌操作箱2以及发酵罐3，无菌操作箱2与外部的发酵罐3通过管道4连接，且管道4上设有控制开关以及控制换向的阀门5，无菌操作箱2采用侧开玻璃门密闭结构；无菌操作箱体2上部设有紫外线灯，箱体内设有正压无菌风口。

（2）从实验室中取出装有菌种的管体，打开四分之一无菌操作箱的侧开门，同时打开箱体内的正压无菌风口，把管体放在箱体内一侧，打开紫外线灯，关上玻璃门，持续10—15分钟；在打开箱体的同时，打开正压吹风口，这样可以保证杂物不会随着门的打开而进入。

（3）关闭紫外线灯，打开无菌操作箱的玻璃门，再打开接种罐1上的接种盖，将接种盖挂于旁边的支架上，远离操作箱底，然后把菌种倒入接种罐1内，盖上接种盖，关闭玻璃门；接种盖为上下两层把手式的锁控，这样设计可以避免接种盖感染杂菌从而影响接种。

（4）打开接种罐1上的增压装置，增压到0.3—0.35MPa，接种罐1内的压力大于发酵罐3内的压力，菌种就通过管道被输送到了发酵罐内。

优选方案为：步骤（1）中的无菌蒸汽为135℃，0.25MPa；上述的灭菌持续时间为15分钟，步骤（4）中增压到0.3MPa。

步骤（2）中的菌种3%—5%的液体菌种。经实验验证，优选方案为：所述的菌种为5%的液体菌种。

各位技术人员须知：虽然本发明已按照上述具体实施方式做了描述，但是本发明的发明思想并不仅限于此发明，任何运用本发明思想的改装，都将纳入本专利专利权保护范围内。

Claims

1.一种以无菌操作箱的方式改良接种工艺，其特征在于：包括以下步骤：

（1）灭菌，先进行管道灭菌，由于整个接种发酵装置包括内设有接种罐的无菌操作箱以及发酵罐，无菌操作箱与外部的发酵罐通过管道连接，该管道为三通管道，第一通道与无菌操作箱以及蒸汽源连通，第二通道与发酵罐连通，第三通道与外界连通，而且三通管道上设有控制换向的阀门；

操作阀门使管道的两端分别与蒸汽源及外界相通，此时管道与发酵罐之间不通，管道内充入温度为130—145℃、压力0.2—0.3MPa的蒸汽，排空管道内的原有空气，持续10—15分钟；然后，进行接种罐以及经过管道系统的发酵罐灭菌，操作阀门使管道与外界关闭且管道与发酵罐相通，蒸汽对接种罐以及发酵罐内进行灭菌持续10—15分钟；最后，进行无菌操作箱灭菌，关闭无菌操作箱的门，打开操作箱内的紫外线灯，对无菌操作箱内进行灭菌，持续10—15分钟；

（3）关闭紫外线灯，打开无菌操作箱的玻璃门，再打开接种罐上的接种盖，接种盖为上下两层把手式的锁控，将接种盖挂于旁边的支架上，远离操作箱底，然后把菌种倒入接种罐内，盖上接种盖，关闭玻璃门；

2.根据权利要求1所述的一种以无菌操作箱的方式改良接种工艺，其特征在于：步骤（1）中的无菌蒸汽为135℃，0.25MPa；上述的灭菌持续时间为15分钟，步骤（4）中增压到0.3MPa。

3.根据权利要求1所述的一种以无菌操作箱的方式改良接种工艺，其特征在于：步骤（2）中的菌种为3%—5%的液体菌种。

4.根据权利要求3所述的一种以无菌操作箱的方式改良接种工艺，其特征在于：所述的菌种为5%的液体菌种。