CN103503838A - 一种荔枝蒂蛀虫的饲养方法 - Google Patents

Abstract

本发明涉及昆虫饲养技术领域，具体公开了一种荔枝蒂蛀虫的饲养方法。所述方法包括成蛾饲养和幼虫饲养。所述方法综合考虑了限制蒂蛀虫虫体成活率的多种因素，如温度、湿度、饲料、光周期和产卵介质等以及他们之间的互作对蒂蛀虫虫体成活率的影响，研究出针对荔枝蒂蛀虫培养周期特点的饲养方法。该法能够提高饲养蒂蛀虫的成活率，降低饲料的用量，节本增效，饲养效率高。

Description

一种荔枝蒂蛀虫的饲养方法

技术领域

本发明涉及昆虫饲养技术领域，具体地涉及一种荔枝蒂蛀虫的饲养方法。

背景技术

荔枝蒂蛀虫是我国荔枝龙眼生产的头号害虫，以幼虫钻蛀果实造成为害，是荔枝果品安全的主要风险产生点之一。荔枝蒂蛀虫研究自1941年首篇文献报道至今，已有七十多年历史，不可谓不长久，但进展却相当缓慢，甚至连该虫最基本的生活史都没弄清楚。这已严重影响该虫防控策略和措施的研究与制定。荔枝蒂蛀虫研究进展之所以缓慢，归根到底，是其人工饲养技术存在问题，试验种群不能大量而持续繁衍，试验材料的供应得不到保障。

目前蒂蛀虫研究所用试验虫源大多直接取材于田间，基本处于靠天吃饭的状态，田间什么时候发生，研究工作就什么时候开展。而田间荔枝蒂蛀虫的发生受季节限制明显，一年只在荔枝或龙眼果期有一个发生高峰，持续时间仅1～2个月，也只有这段时间才有足够的虫源供研究所用。其他时间，虫口密度均很低，即使不实施防治，蒂蛀虫也难觅踪影，其虫源数量远不足以支撑研究工作的开展。

现有技术中也有一些关于荔枝蒂蛀虫的人工饲养方法，如将荔枝果核切成小方块作为饲料，在方块中饲养幼虫（洪巧珍 等，植物保护学会会刊，Vol．44，pp89-99，2002）。该法虽可将蒂蛀虫幼虫饲养至蛹，但存在以下不足。一、耗时耗饲料。荔枝果核质地较硬，将之切成小方块作为饲料，在操作上具有一定难度，要耗费一段时间，而且一个方块只能饲养一头幼虫，接虫源时，需先在方块上切细缝，再接虫源，操作步骤较繁琐，对操作者熟练程度也要求较高，很难大范围推广使用。二、饲养效果不甚理想。在饲养过程中，饲料方块很容易霉变腐烂，影响饲养效果，笔者曾多次使用该法饲养蒂蛀虫，其由卵至蛹的成活率只有40%左右，很难实现大规模连续饲养。

随后，有学者改进了饲养方法，直接以荔枝果核作为饲料饲养蒂蛀虫（曾赞安，“有机荔枝园节肢动物类群及蒂蛀虫生态控制研究”，华南农业大学博士学位论文，2007；王少山，“荔枝蒂蛀虫化学生态调控物质的基础研究”，华南农业大学博士论文，2008；曾赞安 等，昆虫天敌，Vol．29．NO．4，pp160-165，2007；王少山 等，生态学报，Vol．28．NO．2，pp836-841，2008）。该法在操作流程上有所简化，不需将荔枝果核切成方块，大大节省了操作时间。但对饲料的需求量很大，一个果核一般只能饲养1头幼虫，整个饲养流程操作下来，果核的用量非常大。此外，该法的饲养效果也不甚理想，蒂蛀虫由卵至蛹的成活率只有30%左右，饲养种群容易出现断代，很难满足研究虫源的使用需求。

由此可见，现行的蒂蛀虫人工饲养技术普遍存在饲料用量大和饲养效果不理想的问题。

发明内容

本发明要解决的技术问题是为了克服现有技术中荔枝蒂蛀虫饲养方法饲料用量大和饲养效果不理想的问题，提供一种新的荔枝蒂蛀虫的饲养方法。本发明所述方法使虫体成活率得到显著提升，饲料用量也大大下降，节本增效，实现了蒂蛀虫的大量饲养。

本发明的目的通过以下技术方案予以实现：

一种荔枝蒂蛀虫的饲养方法，包括如下步骤：

S1.成蛾饲养：将荔枝蒂蛀虫雌蛾和雄蛾放入用黑色湿水棉布罩盖的养虫笼中，黑色湿水棉布每日更换一次，同时使用荔枝或龙眼果实作为产卵介质诱导成虫产卵，成虫产卵后收集卵，供幼虫饲养；

S2.幼虫饲养：将黑叶荔枝果核对半切成两块，在每块切面上接3～4粒S1获得的卵，即每果核接6～8粒卵，再将两半拼合后放于垫有一层干滤纸的培养皿中，在温度为29℃，相对湿度为90～95%，光周期L:D=14h:10h的条件下培养，卵孵化后得幼虫，幼虫老熟后化蛹，得到的蛹可用于科研，或继续羽化成成蛾，供成蛾饲养。

    优选地，S1所述黑色湿水棉布的湿水程度以双手拧布而无水下滴为宜。

优选地，S1所述使用荔枝或龙眼果实作为产卵介质诱导成虫产卵的优选操作为：荔枝或龙眼果实用卫生纸包裹后放于养虫笼中，成蛾遂将卵产于该卫生纸上，每日更换卫生纸；所用的卫生纸在使用前要用微波炉微波杀菌2分钟。

优选地，S1所述成虫产卵后收集卵的优选操作为：待成虫产卵后，将更换下来的卫生纸剪成方片，每方片含1～3粒卵，用作卵卡。获得的卵卡接种在步骤S2所述的对半切成两块的黑叶荔枝果核切面上，来进行幼虫饲养。将卫生纸剪成方片时使用的工具如剪刀等在使用前要用75%酒精表面消毒；将卵卡接种在步骤S2所述的对半切成两块的黑叶荔枝果核切面上时使用的工具如镊子等在使用前要用75%酒精表面消毒。

优选地，S1所述荔枝或龙眼均用75%的酒精表面消毒；S2所述黑叶荔枝果核在使用前，经75%酒精浸泡3～5分钟；S2所述滤纸在使用前用微波炉微波杀菌2分钟；S2所述培养皿在使用前用75%酒精表面消毒。另外，在成蛾饲养和幼虫饲养过程中，操作者的双手需经75%酒精表面消毒。

S1得到的卵和S2得到的蛹在未使用之前，可进行低温保藏，保藏条件为：卵在10～14℃下保藏10～20天，蛹在14～18℃保藏12～22天，以推迟其孵化或羽化时间。

昆虫人工饲养效果好坏所涉及的因素很多，包括温度、湿度、饲料、光周期、补充营养和产卵介质等等。一方面，有关影响蒂蛀虫饲养效果因素的研究较缺乏，没有相应的优化组合方案；另一方面，在操作设置上存在漏洞，如用具消毒不彻底、虫体保藏不得当和操作流程不科学等，严重影响饲养效果。因此，我们在前人所研制饲养技术的基础上，从成蛾饲养、幼虫饲养、用具消毒和虫体低温保藏等各方面对饲养技术进行改进和优化。虫体成活率得到提升，饲料用量也大大下降，节本增效，实现了蒂蛀虫的大量饲养。

与现有技术相比，本发明具有以下有益效果：

（1）本发明提供蒂蛀虫的饲养方法，可显著减少饲料用量。以荔枝果核作为饲料，以往的饲养方法一般只能做到一个果核饲养一头幼虫，本发明所提供的方法可以一个果核饲养8头幼虫，大大提高饲料的使用效率，减少饲料用量，降低成本。

（2）本发明提供蒂蛀虫的饲养方法，可大大提升饲养效果，将蒂蛀虫虫体成活率由原来的30~40%提高至80%以上，且操作简便快捷，可实现蒂蛀虫的大量饲养。

本发明综合考虑了限制蒂蛀虫虫体成活率的多种因素，针对性地研究出针对荔枝蒂蛀虫培养周期特点的饲养方法。所述方法通过综合研究温度、湿度、饲料、光周期和产卵介质等对蒂蛀虫虫体成活率的影响，最后得到一种培养周期短，成活率高，且能获得大量虫体的饲养方法。

具体实施方式

下面结合具体实施例进一步详细说明本发明。除非特别说明，本发明采用的试剂、设备为本技术领域常规试剂和设备。

实施例1 荔枝蒂蛀虫幼虫的饲养

S1.幼虫饲养的饲料种类的确定

以人工气候箱饲养，饲料选用荔枝或龙眼果核，荔枝品种为：妃子笑、白蜡、白糖罂、桂味、黑叶、怀枝、糯米糍等7个品种；龙眼品种为：石硖、大乌圆和储良等3个品种。将以上10个品种的果实剥皮，去肉，取其果核，用清水洗净，再用75%酒精浸泡3～5分钟，晾干，备用。在果核顶部切一细缝，将1粒卵接入切口内，然后将果核放入垫有湿滤纸的培养皿，单层铺开，再将培养皿放入白瓷盘。每品种接200粒卵，重复3次。饲养温度为25℃，光周期为L：D=12h：12h。幼虫老熟后，即爬出果核，在培养皿盖或白瓷盘盘沿下吐丝结茧化蛹。待幼虫开始结茧化蛹后，每日记录蒂蛀虫蛹数量，至无幼虫出果核化蛹为止，计算其由卵至蛹的成活率。结果见表1。表1结果表明，以黑叶荔枝果核饲养蒂蛀虫的饲养效果最好，其由卵至蛹的成活率最高，为35.7%。因此选用黑叶荔枝的果核为饲料，对蒂蛀虫幼虫进行饲养。

表1 以不同品种果核饲养蒂蛀虫的成活率

注：同列数据后的不同字母表示数据经邓肯式多重比较差异显著（P=0.05）。

S2.幼虫饲养湿度的确定

以人工气候箱饲养，设置7个湿度处理。其中，6个为湿度梯度：70%RH、75%RH、80%RH、85%RH、90%RH和95%RH，1个是在幼虫饲养的培养皿中垫湿滤纸，培养皿外的湿度为75%RH。饲养温度为25℃，光周期为L：D=12h：12h，饲料选用黑叶荔枝果核。用清水将果核洗净，再用75%酒精浸泡3～5分钟，晾干，备用。在果核顶部切一细缝，将1粒卵接入切口内，然后将果核放入培养皿内，单层铺开，再将培养皿放入白瓷盘。每湿度处理接200粒卵，重复3次。其中，70%RH～95%RH等6个处理的培养皿垫的是干滤纸。待幼虫开始结茧化蛹后，每日记录蒂蛀虫蛹数量，至无幼虫出果核化蛹为止，计算其由卵至蛹的成活率。结果见表2。表2结果表明，当饲养湿度为90%RH和95%RH时，蒂蛀虫的饲养效果最好，其由卵至蛹的成活率最高，分别为44.4%和41.0%。因此选用90～95%RH为饲养湿度，对蒂蛀虫幼虫进行饲养。

表2 蒂蛀虫在不同饲养湿度下的成活率

注：同列数据后的不同字母表示数据经邓肯式多重比较差异显著（P=0.05）。

    S3. 幼虫饲养温度的确定

以人工气候箱饲养，设置7个温度梯度：17、20、23、26、29、32和35℃。饲养湿度为90%RH，光周期为L：D=12h：12h，饲料选用黑叶荔枝果核。用清水将果核洗净，再用75%酒精浸泡3～5分钟，晾干，备用。在果核顶部切一细缝，将1粒卵接入切口内，然后将果核放入垫有干滤纸的培养皿内，单层铺开，再将培养皿放入白瓷盘。每温度接200粒卵，重复3次。待幼虫开始结茧化蛹后，每日记录蒂蛀虫蛹数量，至无幼虫出果核化蛹为止，计算其由卵至蛹的成活率。结果见表3。结果表明，当饲养温度为29℃时，蒂蛀虫的饲养效果最好，其由卵至蛹的成活率最高，为68.5%。因此选用29℃对蒂蛀虫幼虫进行饲养。

表3 蒂蛀虫在不同饲养温度下的成活率

注：同列数据后的不同字母表示数据经邓肯式多重比较差异显著（P=0.05）。

    S4. 幼虫饲养光周期的确定

以人工气候箱饲养，饲养温度为29℃，湿度为90%RH，饲料选用黑叶荔枝果核，设置5个光周期，分别为L：D=0：24h、10h：14h、12h：12h、14h：10h和24h：0。用清水将果核洗净，再用75%酒精浸泡3～5分钟，晾干，备用。在果核顶部切一细缝，将1粒卵接入切口内，然后将果核放入垫有干滤纸的培养皿内，单层铺开，再将培养皿放入白瓷盘。每光周期接200粒卵，重复3次。待幼虫开始结茧化蛹后，每日记录蒂蛀虫蛹数量和化蛹日期，至无幼虫出果核化蛹为止，计算其由卵至蛹的成活率及历期。结果见表4。表4结果表明，各饲养光周期对蒂蛀虫成活率无明显影响，其数值之间差异不显著。然而，L:D=14h:10h时，蒂蛀虫由卵至蛹的历期相对较短，仅9～13天。因此选用L:D=14h:10h为光周期，对蒂蛀虫幼虫进行饲养。

表4 在不同饲养光周期下蒂蛀虫由卵至蛹的成活率及历期

注：同列数据后的相同字母表示数据经邓肯式多重比较差异不显著（P=0.05）。

    S5. 幼虫饲养的单个果核接卵量的确定

以人工气候箱饲养，饲养温度为29℃，湿度为90%RH，饲料选用黑叶荔枝果核，光周期为L:D=14h:10h。用清水将果核洗净，再用75%酒精浸泡3～5分钟，晾干，备用。按接卵方式和数量设置7个处理：处理1、在果核顶部切一细缝，将1粒卵接入切口内；处理2、在果核顶部切一细缝，将2粒卵接入切口内；处理3、在果核顶部切一细缝，将3粒卵接入切口内；处理4、将果核对半切成两块，在每块切面接2粒卵，整个果核接4粒卵；处理5、将果核对半切成两块，在每块切面接3粒卵，整个果核接6粒卵；处理6、将果核对半切成两块，在每块切面接4粒卵，整个果核接8粒卵；处理7、将果核对半切成两块，在每块切面接5粒卵，整个果核接10粒卵。将接有虫卵的两半果核拼合，放于垫有一层干滤纸的培养皿内。处理1接200个果核，处理2接100个果核，处理3接70个果核，处理4接50个果核，处理5接35个果核，处理6接25个果核，处理7接20个果核。重复3次。待幼虫开始结茧化蛹后，每日记录蒂蛀虫蛹数量，至无幼虫出果核化蛹为止，计算其由卵至蛹的成活率。结果见表5。表5结果表明，单个果核接卵量为10粒时，蒂蛀虫由卵至蛹的成活率有所下降，接卵量1～8粒时，其成活率之间差异不显著。

表5 在不同接卵量处理下蒂蛀虫由卵至蛹的成活率及历期

注：同列数据后的相同字母表示数据经邓肯式多重比较差异不显著（P=0.05）。

接下来，我们对单个果核接卵量进行确定。要选择一个合适的接卵量需符合以下2个条件：1、成活率不受影响。根据试验结果，每果核接1～8粒卵，符合该条件。2、接卵量越大越好。根据结果，每果核接8粒卵，正好不影响成活率，符合该条件。因此，将幼虫饲养的单个果核接卵量定为8粒。

此外，在操作层面上，上述的接卵方式有2种：一种是在果核顶部切细缝，另一种是将果核一分为二。以方式一操作，难度较大。蒂蛀虫卵很小，约0.3mm×0.4mm，接卵所用的卵卡也较小，只有0.3cm×0.4cm，将如此小的卵卡接入细缝，往往需要借助解剖镜，该方式对动作的熟练程度和技术性要求较高，而且随着接卵量的增加，该方式的操作难度也大大提高。以方式二操作，直接将果核一份为二，再在切面上接卵卡，整个过程可直接用肉眼查看，操作起来也比在细缝中接卵卡容易得多。因此，我们选择方式二为幼虫饲养的接卵方式，即将果核对半切成两块，再在每半的切面上接卵。

实施例2 荔枝蒂蛀虫成蛾的饲养

S1. 成蛾饲养光周期的确定

以养虫笼饲养成蛾，室温26℃，湿度为80%RH，养虫笼规格为30cm×30cm×30cm。养虫笼正上方50cm处装有2根40瓦的日光灯，以亮灯或关灯控制光周期。笼中放入雌、雄蛾各50头，共100头。养虫笼内放置10%蜂蜜水的棉块用于补充营养，放置6粒以白色卫生纸包裹的荔枝或龙眼果实用作产卵介质诱导成蛾产卵，成蛾遂将卵产于该卫生纸上。设置3个光周期处理：L:D=24h:0、12h:12h和0:24h，重复3次。成蛾产卵后，每日更换卫生纸，并记录卫生纸上的卵量，共调查3天，计算单雌产卵量。结果见表6。表6结果表明，无光照情况下，成蛾产卵最多。因此，选择黑暗的环境对成蛾进行饲养。当成蛾饲养房间的光线不易遮蔽时，用黑布罩盖养虫笼，也可获得与此相当的饲养效果。

表6 饲养光周期对成蛾产卵的影响

注：同列数据后的相同字母表示数据经邓肯式多重比较差异不显著（P=0.05）。

S2. 成蛾饲养湿度的确定

以养虫笼饲养成蛾，室温26℃，养虫笼规格为30cm×30cm×30cm。笼中放入雌、雄蛾各50头，共100头。光周期L:D=0:24h，养虫笼内放置10%蜂蜜水的棉块用于补充营养，放置6粒以白色卫生纸包裹的荔枝或龙眼果实用作产卵介质诱导成蛾产卵，成蛾遂将卵产于该卫生纸上。设置3个湿度处理70%RH、80%RH以及用湿水棉布罩盖养虫笼，湿水程度以双手拧布而无水下滴为宜。重复3次。成蛾产卵后，每日更换卫生纸，并记录卫生纸上的卵量，共调查3天，计算单雌产卵量。结果见表7。表7结果表明，当以湿水棉布罩盖养虫笼时，成蛾产卵最多。因此，选用湿水棉布罩盖养虫笼，饲养成蛾。

表7 饲养湿度对蒂蛀虫成蛾产卵的影响

注：同列数据后的相同字母表示数据经邓肯式多重比较差异不显著（P=0.05）。

S3. 包裹荔枝或龙眼果实卫生纸干湿与否的确定

以卫生纸包裹荔枝或龙眼果实用作产卵介质诱导成蛾产卵是当前蒂蛀虫成蛾饲养的主要步骤之一。但在卫生纸的使用上存在2种截然相反的观点：1、卫生纸需用水喷湿润（曾赞安 等，昆虫天敌，Vol．29．NO．4，pp160-165，2007；洪巧珍 等，植物保护学会会刊，Vol．44，pp89-99，2002）；2、无需弄湿卫生纸（王少山 等，生态学报，Vol．28．NO．2，pp836-841，2008）。为了确定卫生纸干湿与否对饲养效果的影响，进行以下试验。

以养虫笼饲养成蛾，室温26℃，养虫笼规格为30cm×30cm×30cm。笼中放入雌、雄蛾各50头，共100头。光周期L:D=0:24h，以10%蜂蜜水为补充营养，以湿水棉布罩盖养虫笼，湿水程度以双手拧布而无水下滴为宜。在养虫笼中放置6粒以白色卫生纸包裹的荔枝或龙眼果实用作产卵介质诱导成蛾产卵，成蛾遂将卵产于该卫生纸上。其中，3粒的卫生纸用清水喷湿，3粒的卫生纸保持干爽，随机排列。重复3次。成蛾产卵后，每日更换卫生纸，并记录卫生纸上的卵量，共调查3天，计算单雌产卵量。结果见表8。表8结果表明，包裹荔枝或龙眼果实卫生纸的干湿与否对成蛾产卵量的影响不大，两者差异不显著。根据轻简原则，本发明选择以干卫生纸包裹荔枝或龙眼果实作为产卵介质，用于蒂蛀虫成蛾饲养，以减少操作步骤和缩短操作时间。

表8 包裹卫生纸对蒂蛀虫成蛾产卵的影响

注：同列数据后的相同字母表示数据经邓肯式多重比较差异不显著（P=0.05）。

实施例3 卵和蛹低温保藏温度的确定

用人工气候箱保存，湿度95%RH，设置10℃、12℃和14℃三个温度保存卵，定期记录卵孵化情况。设置14℃、16℃和18℃三个温度保存蛹，定期记录成蛾羽化情况。结果见表9。表9结果表明，10～14℃时，蒂蛀虫卵需10～20天才开始孵化；14～18℃时，成蛾需12～22天才开始羽化。

表9 不同温度下蒂蛀虫的卵孵化和蛹成蛾羽化情况

注：“–”表示无卵孵化或无成蛾羽化；“√”表示有卵孵化或有成蛾羽化。

实施例4 用具消毒

在饲养幼虫的过程中，用作饲料的荔枝果核常会发霉变质，为了延缓其霉变速度，需要设置消毒环节。现行的方法是饲料果核经75%酒精浸泡2～3分钟。但我们发现，仅仅对饲料消毒还远远不足，其霉变情况还是很严重。因此，我们在成蛾饲养和幼虫饲养过程中分别设置以下3个处理，以确定消毒方式。处理1：仅黑叶荔枝果核经75%酒精浸泡3～5分钟；处理2：在进行处理1的同时，外加对幼虫饲养所需工具进行消毒，即培养皿、剪刀、刀片和镊子用75%酒精进行表面消毒，滤纸用微波炉微波杀菌2分钟，以及操作者双手经75%酒精表面消毒；处理3：在进行处理2的同时，外加对成蛾饲养所需工具进行消毒，即荔枝或龙眼果实用75%的酒精表面消毒，卫生纸用微波炉微波杀菌2分钟。成蛾饲养方法参照实施例7：饲养光周期为L:D=0:24h，饲养温度为26℃，并以湿水棉布罩盖养虫笼保湿。幼虫饲养方法参照实施例5：将上述饲养成蛾所产的全部卵接入饲料，饲料为黑叶果核，饲养光周期为L:D=14h:10h，饲养湿度为90%RH，饲养温度为29℃，每饲料果核接卵8粒。在连续进行成蛾饲养和幼虫饲养后，统计成蛾产卵数量、蒂蛀虫蛹数量以及饲料果核霉变数量，计算单雌产卵量、由卵至蛹的成活率以及饲料果核的发霉率，重复3次。

结果见表10。表10结果表明，3种处理不影响成蛾产卵量，但却影响蒂蛀虫由卵至蛹的成活率以及饲料果核的发霉率。处理3的成活率最高、发霉率最低，分别为88.2%和38.7%。说明，消毒越彻底，越能延缓饲料果核的霉变速度，蒂蛀虫由卵至蛹的成活率也越高。所以，我们选用处理3的消毒方式来进行消毒。

表10 在不同消毒方式处理下蒂蛀虫幼虫饲料的霉变情况

注：同列数据后的相同字母表示数据经邓肯式多重比较差异不显著（P=0.05）。

实施例5 蒂蛀虫的大量饲养方法

S1. 成蛾饲养：按以下方法饲养成蛾。用养虫笼饲养，养虫笼规格为30cm×30cm×30cm。笼中放入雌、雄蛾各50头，共100头。养虫笼内放置10%蜂蜜水的棉块用于补充营养，放置6粒以白色卫生纸包裹的荔枝或龙眼果实用作产卵介质诱导成蛾产卵，成蛾遂将卵产于该卫生纸上。然后用一张尺寸为150cm×150cm的黑色湿水棉布罩盖养虫笼，以保持笼内环境的黑暗和湿润，黑色湿水棉布的湿水程度以双手拧布而无水下滴为宜，棉布每日更换一次。成蛾产卵后，每日更换产卵介质上的卫生纸，将更换下来的卫生纸剪成0.3cm×0.3cm的方片，每方片含1～3粒卵，用作卵卡，供幼虫饲养之用。

S2. 幼虫饲养：按以下方法饲养幼虫。在人工气候箱中饲养，温度为29℃，相对湿度为90~95%RH，光周期为L:D=14h:10h，饲料选用黑叶荔枝果核。饲养时，将果核对半切成两块，在每块切面上接卵卡（4粒卵），每果核接8粒卵，再将两半拼合，放于垫有一层干滤纸的培养皿内。将培养皿放于白瓷盘上，幼虫老熟后，即在培养皿盖或白瓷盘盘沿下化蛹。

用具消毒为：成蛾饲养时，荔枝龙眼果实在使用前均用75%的酒精进行表面消毒；卫生纸在使用前用微波炉微波杀菌2分钟。幼虫饲养时，黑叶荔枝果核在使用前，经75%酒精浸泡3~5分钟；培养皿、刀片和镊子在使用前，用75%酒精进行表面消毒；滤纸在使用前用微波炉微波杀菌2分钟。在成蛾和幼虫饲养过程中，操作者双手需经75%酒精表面消毒。

经过以上操作，饲养了一代，我们共获蒂蛀虫卵1363粒，蛹1146头，其由卵至蛹的成活率达84.1%，实现了蒂蛀虫的大量饲养。

实施例6 荔枝蒂蛀虫幼虫饲养条件的验证

为了验证饲料种类、饲养温度和湿度等幼虫饲养条件，进行以下试验。

用具消毒方法按照实施例5。饲养幼虫方法为如下。在人工气候箱中饲养，以荔枝核为饲料。饲养时将果核对半切成两块，在每块切面上接4粒卵，每果核共接8粒卵，再将两半拼合，放于垫有滤纸的培养皿内。将培养皿放于白瓷盘上，幼虫老熟后，即在培养皿盖或白瓷盘盘沿下化蛹。

按饲料种类、饲养湿度和温度等条件的不同，设置5个处理。处理1：饲料为黑叶荔枝果核，饲养湿度为90%RH（培养皿内垫的是干滤纸），饲养温度为26℃；处理2：饲料为黑叶荔枝果核，培养皿内垫的是湿滤纸（培养皿外的湿度为75%RH），饲养温度为29℃；处理3：饲料为怀枝荔枝果核，饲养湿度为90%RH（培养皿内垫的是干滤纸），饲养温度为29℃；处理4：饲料为糯米糍荔枝果核，饲养湿度为90%RH（培养皿内垫的是干滤纸），饲养温度为29℃；处理5：饲料为黑叶荔枝果核，饲养湿度为90%RH（培养皿内垫的是干滤纸），饲养温度为29℃。每处理接30个果核，重复3次。处理5的饲养条件是经优化和改良的，也是本发明方法的饲养条件。待幼虫开始结茧化蛹后，每日记录蒂蛀虫蛹数量，至无幼虫出果核化蛹为止，计算其由卵至蛹的成活率。

结果见表11。表11结果表明，以处理5的条件饲养蒂蛀虫幼虫时，其饲养效果最好，其由卵至蛹的成活率最高，为86.3%。但当其中的饲料、湿度和温度等任一饲养条件改变时，蒂蛀虫由卵至蛹的成活率会明显下降。

表11  不同饲养条件下的蒂蛀虫幼虫饲养效果

注：同列数据后的相同字母表示数据经邓肯式多重比较差异不显著（P=0.05）。

实施例7

为了比较不同成蛾饲养方法的产卵效果，我们用以下3种方法进行荔枝蒂蛀虫成蛾饲养。其中，方法1和方法2为前人研发的方法，方法3为本发明的方法。具体操作步骤如下。

方法1：用养虫笼饲养，养虫笼规格为30cm×30cm×30cm。养虫笼中放入雌、雄蛾各50头，共100头，以10%蜂蜜水作为补充营养，放置6粒以白色卫生纸包裹的荔枝或龙眼果实用作产卵介质诱导成蛾产卵。饲养温度为26℃，光周期L:D=12h:12h，湿度为80%RH。成蛾产卵后，每天更换荔枝果或龙眼果实，并重新包裹。记录卫生纸上的卵量，直至成蛾不再产卵为止，计算单雌产卵量。

方法2：用养虫笼饲养，养虫笼规格为30cm×30cm×30cm。养虫笼中放入雌、雄蛾各50头，共100头，以5%蜂蜜水作为补充营养，放置6粒以白色卫生纸包裹的荔枝或龙眼果实用作产卵介质诱导成蛾产卵，卫生纸用清水喷湿。饲养温度为26℃，光周期L:D=12h:12h，湿度为70%RH。成蛾产卵后，每2天更换卫生纸，以水喷施。并及时更换荔枝或龙眼果实，以保证试验材料的新鲜。记录卫生纸上的卵量，直至成蛾不再产卵为止，计算单雌产卵量。

方法3：用养虫笼饲养，养虫笼规格为30cm×30cm×30cm。养虫笼中放入雌、雄蛾各50头，共100头，以10%蜂蜜水作为补充营养，放置6粒以白色卫生纸包裹的荔枝或龙眼果实用作产卵介质诱导成蛾产卵。饲养温度为26℃，用一张尺寸为150cm×150cm的黑色湿水棉布罩盖养虫笼，以保持笼内环境的黑暗和湿润。成蛾产卵后，每天更换卫生纸。记录卫生纸上的卵量，直至成蛾不再产卵为止，计算单雌产卵量。

结果见表12。表12结果表明，以本发明的方法即方法3饲养蒂蛀虫成蛾，其产卵效果最好，单雌产卵量达22.3粒，明显高于其他2种饲养方法。

表12  蒂蛀虫成蛾不同饲养方法的产卵效果

注：同列数据后的相同字母表示数据经邓肯式多重比较差异不显著（P=0.05）。

实施例 8

为了比较不同幼虫饲养方法的饲养效果，我们用以下4种方法饲养蒂蛀虫幼虫。其中，方法1、方法2和方法3为前人研发的方法，方法4为本发明的方法。具体操作步骤如下。

方法1：以人工气候箱饲养。取新鲜荔枝核洗净，用75%酒精灭菌处理2~3min后备用，再在果核上切一小口，接入1粒卵蒂蛀虫卵。然后将果核置于直径15cm的培养皿中，再置于高湿度的养虫盒内。饲养温度为26℃，养虫盒外的湿度为80%RH，光周期为L:D=12h:12h。约9d后，放入1cm×2cm对折的小纸片供荔枝蒂蛀虫化蛹，每日记录蛹数量，至无幼虫出果核化蛹为止，计算其由卵至蛹的成活率。以该方法对蒂蛀虫幼虫饲养了5次，每次接卵400粒。

方法2：以人工气候箱饲养。将荔枝核内的种仁切成长、宽、高约0.5～0.6 cm的块状，其上以刀片切一细缝，再将一粒卵夹于其中。置于直径为15cm的培养皿中，再放置于长、宽和高分别为21cm、14cm和7cm的高湿度养虫盒内。饲养温度为25℃，养虫盒外的湿度为70%RH，光周期为L:D=12h:12h。约10日后，放置扇形纸片供其化蛹，每日记录蛹数量，至无幼虫出果核化蛹为止，计算其由卵至蛹的成活率。以该方法对蒂蛀虫幼虫饲养了5次，每次接卵400粒。

方法3：以人工气候箱饲养，以荔枝嫩叶为幼虫饲料。将采自果园之嫩叶以清水洗净阴干后，把20～30片叶子堆成一叠，将含5粒卵之卵片夹于中间，并置于长、宽和高分别为21cm、14cm和7cm的高湿度养虫盒内。饲养温度为25℃，养虫盒外的湿度为70%RH，光周期为L:D=12h:12h。约10日后，放置扇形纸片供其化蛹，每日记录蛹数量，至无幼虫出果核化蛹为止，计算其由卵至蛹的成活率。以该方法对蒂蛀虫幼虫饲养了5次，每次接卵400粒。

方法4：用具消毒和幼虫饲养方法均按照实施例5。待幼虫开始结茧化蛹后，每日记录蒂蛀虫蛹数量，至无幼虫出果核化蛹为止，计算其由卵至蛹的成活率。以该方法对蒂蛀虫幼虫饲养了5次，每次接卵400粒。

结果见表13。表13结果表明，以本发明的方法即方法4饲养蒂蛀虫幼虫，其饲养效果最好，蒂蛀虫由卵至蛹的成活率最高，达80.4%，明显较其他3种饲养方法的成活率高。

表13  蒂蛀虫幼虫不同饲养方法的饲养效果

注：同列数据后的相同字母表示数据经邓肯式多重比较差异不显著（P=0.05）。

Claims (7)

1.一种荔枝蒂蛀虫的饲养方法，其特征在于，包括如下步骤：

S1.成蛾饲养：将荔枝蒂蛀虫雌蛾和雄蛾放入用黑色湿水棉布罩盖的养虫笼中，黑色湿水棉布每日更换一次，同时使用荔枝或龙眼果实作为产卵介质诱导成虫产卵，成虫产卵后收集卵，供幼虫饲养；

S2.幼虫饲养：将黑叶荔枝果核对半切成两块，在每块切面上接3～4粒S1获得的卵，即每果核接6～8粒卵，再将两半拼合后放于垫有一层干滤纸的培养皿中，在温度为29℃，相对湿度为90～95%，光周期L:D=14h:10h的条件下培养，卵孵化后得幼虫，幼虫老熟后化蛹，得到的蛹用于科研，或继续羽化成成蛾，供成蛾饲养。

2.根据权利要求1所述饲养方法，其特征在于，S1所述荔枝或龙眼果实用卫生纸包裹后放于养虫笼中，成蛾遂将卵产于该卫生纸上，每日更换卫生纸；所述成虫产卵后收集卵的方法为：待成虫产卵后，将更换下来的卫生纸剪成方片，每方片含1～3粒卵，用作卵卡，供幼虫饲养之用。

3.根据权利要求1所述饲养方法，其特征在于，S1所述荔枝或龙眼果实均用75%的酒精表面消毒；S2所述黑叶荔枝果核在使用前经75%酒精浸泡3～5分钟；S2所述滤纸在使用前用微波炉微波杀菌2分钟；S2所述培养皿在使用前用75%酒精表面消毒。

4.根据权利要求2所述饲养方法，其特征在于，所述卫生纸在使用前用微波炉微波杀菌2分钟。

5.根据权利要求1所述饲养方法，其特征在于，所述成蛾饲养和幼虫饲养过程中，操作者的双手需经75%酒精表面消毒，操作所需之剪刀、刀片和镊子等工具在使用前，用75%酒精表面消毒。

6.根据权利要求1所述饲养方法，其特征在于，S1得到的卵和S2得到的蛹在未使用之前，进行低温保藏，保藏条件为：卵在10～14℃下保藏10～20天，蛹在14～18℃保藏12～22天，以推迟其孵化或羽化时间。

7.根据权利要求1所述饲养方法，其特征在于，S1所述黑色湿水棉布的湿水程度以双手拧布而无水下滴为宜。