CN103415205A - 杀真菌组合物和使用方法 - Google Patents

Abstract

提供了用于保护植物免于真菌、细菌和病毒疾病的组合物和方法，所述组合物包含至少一种产生系统获得性抗性的化合物和至少一种抗真菌化合物。本发明的组合物可以直接施用于待保护的植物的种子、幼苗、枝、根、和/或叶，从而保护它们免于真菌、细菌和病毒疾病。

Description

杀真菌组合物和使用方法

背景

1.    领域

本发明的组合物和方法广泛涉及用于保护植物免于真菌病、猝倒病、空中枯萎病(aerial blights)、腐烂、叶斑、和其他状况的方法和组合物。更具体地，该组合物包含至少一种产生系统获得性抗性的化合物，如至少一种皂苷，和至少一种抗真菌化合物。这些组合物可以直接施用于待保护的植物的种子、幼苗、枝、根、和/或叶。这些组合物还可以直接施用于感染疾病的植物的种子、幼苗、枝、根、和/或叶，从而治疗疾病。除真菌疾病以外，该组合物可用于保护和治疗植物免于细菌和病毒疾病包括，但不限于，火疫病、Goss和Stewart枯萎病、软腐烂、总体细菌斑点和枯萎、黄瓜花叶病毒、大麦黄矮病毒和番茄斑萎病毒。

2.    相关领域的描述

存在许多由病原微生物(如细菌、病毒或真菌)引起的植物病，所述微生物可能在种子至完全成熟植物的各个发育阶段感染植物。通常，保护植物免于这类疾病依赖于施用对病原微生物有毒的试剂(例如，杀昆虫剂、杀线虫剂、杀真菌剂、杀菌剂等)。根据感染或攻击的部位，经由各种途径施用毒性试剂，如杀虫剂，所述途径包括种子处理、土壤浸湿、和叶面喷洒。然而，常规的杀虫剂通过与病原体直接接触起作用，或者它们被植物吸收且当植物组织被消耗时行使它们的功能(全身性杀虫剂)。

幼苗猝倒病、褐根腐、或腐霉菌根腐病是主要的幼苗疾病，引起减少的站立、推迟成熟和产量减少。腐霉菌，例如，在由于高降雨量引起的土壤氧水平较低的情况下是最常见的。在加拿大西部，例如，在磷和有机物质较低的潮湿土壤中发生该疾病。腐霉菌的孢子在土壤和作物残留物中存活多年。当干旱期随后为充沛下雨时，发生最严重的爆发，具有最重的损伤。当在潮湿条件下发生发芽时经常发生猝倒病。萌发的幼苗通常恢复，但可能经历根发育受损和延迟成熟。在整个田间，特别是在淹水地区在有些部分出现疾病症状。受感染的植物变得褪绿，且下部叶变黄，然后褐色。在地下，可能发现较小植物上的死根尖和较大植物的根上的褐色病变，尤其是在年轻根尖处。

冷湿条件可以导致幼苗枯萎病。它们是由许多不同的病原体引起的，包括青霉菌属(Penicillium spp.)、腐霉属(Pythium spp.)、镰刀菌属(Fusarium spp.)、丝核菌属(Rhizoctonia spp.)、疫霉属(Phytophthora spp.)、根串珠霉属(Thielaviopsis spp.)、层孔菌属(Phellinus spp.)、和其他。更有利于冷湿条件的田(没有耕种)更易患由这类病原体引起的幼苗枯萎病。此外，保持更长潮湿的低洼田地处于更大的风险中。幼苗枯萎病发生在萌发之前和之后 - 在任何情况下，植物被变弱或过早死亡。杀真菌剂处理种子确保，甚至在较差条件下，允许种子发芽和萌发，而没有当种子不受保护时可以发生的严重问题。

用作种子处理的杀虫剂在种子上干燥，其中杀虫剂直接干扰攻击种子、幼苗、或根的土传病原体或害虫。杀虫剂也可以施用于根(例如，作为浸渍)，或叶(例如，作为喷雾)。这种保护通常是暂时的，且当处理降解或稀释时下降。已知杀虫剂对于非目标物种也是有毒的，这降低了生物多样性，且甚至损害有益物种，如授粉或捕食性昆虫。

随着时间推移，目标害虫和病原体可以产生对杀虫剂组合物的抗性，因此需要渐增量的杀虫剂，以达到预期效果，但产生对有益物种甚至更加有害的风险。由于此问题，已经做出了尝试，以便用某种组合物替代杀虫剂施用，所述组合物刺激植物自身的防御基因以引起植物产生抑制疾病的蛋白。这些产物在植物内产生通常被称为系统获得性抗性(SAR)反应的反应。参见，例如， Gurr SJ, 等人 “Engineering plants with increased disease resistance: how are we going to express it?” Trends Biotechnol. 2005;23(6):283-290和Sheen J, 等人 “Sugars as signaling molecules” Curr Opin Plant Biol. 1999;2(5):410-418。

植物对各种各样的环境刺激响应，且响应包括提供免于害虫(例如，昆虫)和病原体(例如，真菌、细菌和病毒)的保护的那些。植物对害虫或病原体攻击的响应由一连串事件所引起，所述事件将刺激的初始识别与植物细胞中的变化联系起来，最终导致保护。因此，响应于伤口和害虫/病原体攻击，存在诱导的局部和全身事件，其具有在局部部位处发生的信号传导通路，在整个植物交流该局部事件的全身信号，和响应于全身信号在遥远细胞发生的信号传导通路。从植物获得的几种化合物(例如，水杨酸、茉莉酸等)已经参与SAR的发展中，但是这类化合物通常是昂贵的，可能损伤植物，且提供的保护是有限的。一种这样的植物是昆诺藜(Chenopodium quinoa)。作为杀虫剂活性成分，将从昆诺藜植物提取的皂苷在种植前施用于粮食作物如豆类和谷物的种子，且施用于移植前的番茄幼苗。这种处理的目的是防止种子和番茄植物发生由真菌以及由某些细菌和病毒引起的疾病。参见，例如，U.S. 6,743,752; U.S. 2003/0162731; 和U.S. 2005/0261129。

因此，仍然需要用于刺激植物的自身免疫系统以抗击植物病原体的经济的方法，优选采用天然获得的组合物，以减轻潜在的环境问题。

仍然还需要使用环保生物组分和较低毒性的化学杀真菌剂且以不使用更具毒性的传统化学杀真菌剂即提供改进的植物活力和产量的方式使用它们的有效组合物和方法。

因此，技术问题是通过提供用于有效治疗和/或预防植物疾病的成本有效的、环保的组合物而克服这些现有技术的困难。权利要求的特征性实施方案提供了该技术问题的解决方案。

概述

在一个实施方案中，本发明提供了组合物，其包含至少一种杀真菌剂和至少一种产生系统获得性抗性的化合物。在一个方面，将所述至少一种杀真菌剂与至少一种产生系统获得性抗性的化合物混合。在一个方面，所述至少一种杀真菌剂与至少一种产生系统获得性抗性的化合物在物理上分开。在一个方面，所述至少一种杀真菌剂包括至少一种二甲苯基丙氨酸(xylylalanine)。在一个方面，所述至少一种二甲苯基丙氨酸选自苯霜灵(benalaxyl)、呋霜灵(furalaxyl)、精甲霜灵(mefenoxam)、甲霜灵(metalaxyl)、L-甲霜灵(L-metalaxyl)、以及它们的组合。在一个方面，所述至少一种产生系统获得性抗性的化合物是至少一种皂苷。在一个方面，所述至少一种皂苷从昆诺藜获得。在一个方面，所述至少一种皂苷包含齐墩果酸。在一个方面，所述至少一种皂苷包含常春藤苷配基。在一个方面，所述至少一种皂苷包含美洲商陆酸(phytolaccagenic acid)。在一个方面，所述至少一种皂苷包含皂皮酸。在一个方面，所述至少一种皂苷选自齐墩果酸、常春藤苷配基、美洲商陆酸、皂皮酸、以及它们的组合。在一个方面，所述至少一种皂苷包含约等摩尔量的齐墩果酸、常春藤苷配基、美洲商陆酸的三萜双糖链糖苷。在一个方面，所述至少一种皂苷包含约等摩尔量的齐墩果酸、常春藤苷配基、美洲商陆酸、和皂皮酸。在一个方面，组合物进一步包含至少一种杀昆虫剂和/或至少一种产芽孢细菌，和/或至少一种杀线虫剂。在一个方面，所述至少一种杀真菌剂，至少一种产生系统获得性抗性的化合物，任选的至少一种杀昆虫剂，任选的至少一种产芽孢细菌，和任选的至少一种杀线虫剂分开施用于种子、植物或植物部分；在另一个方面，它们以其任何组合相组合，且一起施用于种子、植物或植物部分。

在一个实施方案中，本发明提供了保护种子或植物免于疾病的方法，和用于处理感染疾病的种子或植物的方法，该方法包括以下步骤：施用至少一种杀真菌剂和至少一种产生针对所述种子或植物的系统获得性抗性的化合物。在一个方面，分开施用所述至少一种杀真菌剂和至少一种产生针对所述种子或植物的系统获得性抗性的化合物。在一个方面，将所述至少一种杀真菌剂和至少一种产生针对所述种子或植物的系统获得性抗性的化合物混合且一起施用。在一个方面，所述至少一种杀真菌剂是二甲苯基丙氨酸。在一个方面，所述二甲苯基丙氨酸选自苯霜灵、呋霜灵、精甲霜灵，甲霜灵、L-甲霜灵、以及它们的组合。在一个方面，所述至少一种产生系统获得性抗性的化合物是至少一种皂苷。在一个方面，所述至少一种皂苷从昆诺藜获得。在一个方面，所述至少一种皂苷包含齐墩果酸。在一个方面，所述至少一种皂苷包含常春藤苷配基。在一个方面，所述至少一种皂苷包含美洲商陆酸。在一个方面，所述至少一种皂苷包含皂皮酸。在一个方面，所述至少一种皂苷选自齐墩果酸、常春藤苷配基、美洲商陆酸、皂皮酸、以及它们的组合。在一个方面，所述至少一种皂苷包含约等摩尔量的齐墩果酸、常春藤苷配基、美洲商陆酸的三萜双糖链糖苷。在一个方面，所述至少一种皂苷包含约等摩尔量的齐墩果酸、常春藤苷配基、美洲商陆酸和皂皮酸的三萜双糖链糖苷。在一个方面，组合物进一步包含至少一种杀昆虫剂和/或至少一种产芽孢细菌，和/或至少一种杀线虫剂。在一个方面，所述至少一种杀真菌剂，至少一种产生系统获得性抗性的化合物，任选的至少一种杀昆虫剂，任选的至少一种产芽孢细菌，和任选的至少一种杀线虫剂分开施用于种子、植物或植物部分；在另一个方面，它们以其任何组合相组合，且一起施用于种子、植物或植物部分。

在一个实施方案中，本发明提供了具有外表面和在至少一部分表面上的组合物的种子，所述组合物包含至少一种杀真菌剂和至少一种产生系统获得性抗性的化合物。在一个方面，将所述至少一种杀真菌剂和至少一种产生针对所述种子或植物的系统获得性抗性的化合物分开施用于种子。在一个方面，将所述至少一种杀真菌剂和至少一种产生针对所述种子或植物的系统获得性抗性的化合物混合且一起施用于种子。在一个方面，所述至少一种杀菌剂是二甲苯基丙氨酸。在一个方面，所述二甲苯基丙氨酸选自苯霜灵、呋霜灵、精甲霜灵、甲霜灵、L-甲霜灵、以及它们的组合。在一个方面，所述至少一种产生系统获得性抗性的化合物是至少一种皂苷。在一个方面，所述至少一种皂苷从昆诺藜获得。在一个方面，所述至少一种皂苷包含齐墩果酸的三萜双糖链糖苷。在一个方面，所述至少一种皂苷包含常春藤苷配基的三萜双糖链糖苷。在一个方面，所述至少一种皂苷包含美洲商陆酸的三萜双糖链糖苷。在一个方面，所述至少一种皂苷包含皂皮酸。在一个方面，所述至少一种皂苷选自齐墩果酸、常春藤苷配基、美洲商陆酸、皂皮酸、以及它们的组合。在一个方面，所述至少一种皂苷包含约等摩尔量的齐墩果酸、常春藤苷配基和美洲商陆酸的三萜双糖链糖苷。在一个方面，所述至少一种皂苷包含约等摩尔量的齐墩果酸、常春藤苷配基、美洲商陆酸和皂皮酸的三萜双糖链糖苷。在一个方面，外表面和组合物进一步包含杀昆虫剂和/或至少一种产芽孢细菌，和/或至少一种杀线虫剂。在一个方面，所述至少一种杀真菌剂，至少一种产生系统获得性抗性的化合物，任选的至少一种杀昆虫剂，任选的至少一种产芽孢细菌，和任选的至少一种杀线虫剂分开施用于种子、植物或植物部分；在另一个方面，它们以其任何组合相组合，且一起施用于种子、植物或植物部分。

在一个实施方案中，本发明提供了降低或防止真菌中的杀真菌剂抗性传播的方法，该方法包括以下步骤：将至少一种杀真菌剂和至少一种产生系统获得性抗性的化合物施用于种子或植物。在一个方面，将所述至少一种杀真菌剂和至少一种产生针对所述种子或植物的系统获得性抗性的化合物分开施用于种子或植物。在一个方面，将所述至少一种杀真菌剂和至少一种产生针对所述种子或植物的系统获得性抗性的化合物混合且一起施用于种子或植物。在一个方面，所述二甲苯基丙氨酸选自苯霜灵、呋霜灵、精甲霜灵、甲霜灵、L-甲霜灵、以及它们的组合。在一个方面，所述至少一种产生系统获得性抗性的化合物是至少一种皂苷。在一个方面，所述至少一种皂苷从昆诺藜获得。在一个方面，所述至少一种皂苷包含齐墩果酸。在一个方面，所述至少一种皂苷包含常春藤苷配基。在一个方面，所述至少一种皂苷包含美洲商陆酸。在一个方面，所述至少一种皂苷包含皂皮酸。在一个方面，所述至少一种皂苷选自齐墩果酸、常春藤苷配基、美洲商陆酸、皂皮酸、以及它们的组合。在一个方面，所述至少一种皂苷包含约等摩尔量的齐墩果酸、常春藤苷配基、美洲商陆酸的三萜双糖链糖苷。在一个方面，所述至少一种皂苷包含约等摩尔量的齐墩果酸、常春藤苷配基、美洲商陆酸和皂皮酸的三萜双糖链糖苷。在一个方面，外表面和组合物进一步包含杀昆虫剂和/或至少一种产芽孢细菌，和/或至少一种杀线虫剂。在一个方面，所述至少一种杀真菌剂，至少一种产生系统获得性抗性的化合物，任选的至少一种杀昆虫剂，任选的至少一种产芽孢细菌，和任选的至少一种杀线虫剂分开施用于种子、植物或植物部分；在另一个方面，它们以其任何组合相组合，且一起施用于种子、植物或植物部分。

在下列详述和权利要求书中提供根据该组合物的其它组合物和方法。其它目的、特征和优点将在下列描述中记载且部分是从该描述中显而易见的或可通过该组合物和方法的实践获知。可以借助随附权利要求中特别指出的手段和组合实现和获得这些目的、特征和优点。

附图概述

为了进一步理解本发明的组合物和方法的性质、目的和优点，应该参考连同下列附图阅读的下列详细说明，其中类似的参考数字表明相同的要素。

图1A和1B提供了表1的数据的图示。

图2提供了表2的数据的图示。

图3提供了表3的数据的图示。

图4A和4B提供了表4的数据的图示，其中图4A显示来自品种A的数据，且图4B显示来自品种B的数据。

图5A和5B提供了表5的数据的图示，其中图5A显示来自品种A的数据，且图5B显示来自品种B的数据。

详述

在进一步描述本发明的组合物和方法之前，应当理解的是，所述组合物和方法不限于下面描述的组合物和方法的特定实施方案，因为可以进行特定实施方案的变化，且仍落入随附权利要求的范围内。也可以理解的是，所用的术语目的在于描述特定实施方案，而不是意在限制。相反，将通过随附的权利要求确定本发明的组合物和方法的范围。

在本说明书和随附权利要求中，单数形式 “一(a)”、“一(an)”和“该(the)”包括复数对象，除非上下文另有清楚指出。除非另有定义，本文所用的所有技术和科学术语和这些组合物和方法所属领域普通技术人员通常理解的具有相同含义。

本发明的组合物和方法通过广泛提供用于治疗和/或预防植物免于疾病的有效的组合物和方法而解决或克服了现有技术的问题。

如本文所使用的，“植物”意在是指植物的任何部分(例如，根、叶、枝)，以及树、灌木、花、和草。“种子”意在包括种子、块茎、块茎片、鳞茎等，或植物由其生长的其部分。

本文提供了用于控制植物和种子中的微生物(例如，细菌、病毒或真菌)损伤或感染的改进的组合物和方法。以本发明的一些组合，与从单独的组合物成分的总和(例如，观察到协同作用)所期望的相比，对微生物损伤或感染控制的程度出乎意料地明显更高。因此，与从单独的组合物成分的总和所期望的相比，对植物中所述微生物损伤或感染控制所需的组合物的量明显更低。该发现极大地改进了成本效益比，同时降低了微生物发展抗性的机会。此外，当处理种子时，可以施用任何组合物的空间是有限的，因为种子相对较小。因此，降低实现微生物损伤或感染所需的组合物的量(体积) — 不妥协效力 — 代表了显著进步。

用于控制植物中的损伤或感染而提供的组合物包含(a)至少一种杀真菌剂，和(b)至少一种产生系统获得性抗性的化合物，(a)/(b)重量比为约0.01至约50，约1至约40，约5至约30，约5至约25，且优选约8至约16。可以将各独立组分或组合物施用于种子、植物、植物叶面、植物果实或植物生长的土壤或要用于栽培植物的土壤。个别组分(a)和(b)可以作为分开组分在不同时间分开施用，它们可以作为分开组分在相同时间分开施用，或者它们可以在施用前混合或配制在一起且如此一起(即，同时)施用。

适合用于本发明组合物的杀真菌剂成分(a)包括单独或组合的aldimorph、1-氨基丙基磷酸、1-氨基丙基磷酸钾、andoprim、敌菌灵、氧环唑、嘧菌酯、苯双灵、麦锈灵、苯菌灵、benzamacril、benzamacryl-isobutyl、双丙氨磷、乐杀螨、联苯、比多农、灭瘟素、啶酰菌胺、糠菌唑、乙嘧酚磺酸酯、丁硫啶、多硫化钙、卡巴西霉素、敌菌丹、克菌丹、多菌灵、萎锈灵、香芹酮、灭螨猛、chlobenthiazone、chlorfenazole、地茂散、氯化苦、百菌清、乙菌利、clozylacon、硫杂灵、霜脲氰、环唑醇、嘧菌环胺、酯菌胺、咪菌威、双氯酚、苄氯三唑醇、diclofluanid、哒菌清、氯硝胺、乙霉威、苯醚甲环唑、甲菌定、烯酰吗啉、甲氧菌平、烯唑醇、烯唑醇-M、敌螨普、二苯胺、双硫氧吡啶、灭菌磷、二噻农、吗菌灵、多果定、敌菌酮、克瘟散、氟环唑、乙环唑、乙嘧酚、土菌灵、噁唑酮菌、咪菌腈、氯苯嘧啶醇、腈苯唑、甲呋酰胺、种衣酯、拌种咯、苯锈啶、丁苯吗啉、三苯醋锡、毒菌锡、福美铁、嘧菌腙、氟啶胺、咯菌腈、flumetover、氟吡菌酰胺、氟氯菌核利、氟喹唑、呋嘧醇、氟硅唑、磺菌胺、氟酰胺、粉唑醇、灭菌丹、乙膦铝、乙膦钠、四氯苯酞、麦穗宁、呋霜灵、福拉比、furcarbonil、呋菌唑、呋醚唑、拌种胺、双胍辛胺、六氯苯、己唑醇、恶霉灵、抑霉唑、亚胺唑、双胍辛胺、双胍三辛烷基苯磺酸盐、双胍辛醋酸盐、碘代丙炔基丁基甲胺酸酯(iodocarb)、种菌唑、异稻瘟净(IBP)、种菌唑、异菌脲、irumamycin、稻瘟灵、isovaledione、春雷霉素、醚菌酯、铜制剂，如：氢氧化铜、环烷酸铜、王铜、硫酸铜、氧化铜、喹啉铜和波尔多(Bordeaux)混合剂、代森锰铜、代森锰锌、代森锰、精甲霜灵、meferimzone、灭派林、担菌宁、甲霜灵、L-甲霜灵、叶菌唑、磺菌威、呋菌胺、代森联、metomeclam、噻菌胺、米多霉素、腈菌唑、甲菌利、二甲基二硫代氨基甲酸镍、酞菌酯(nitrothal-isopropyl)、氟苯嘧啶醇、呋酰胺、恶霜灵、oxamocarb、奥索利酸、oxycarboxim、oxyfenthiin、多效唑、净种灵、戊菌唑、戊菌隆、戊苯吡菌胺、氯瘟磷、匹马力星、粉病灵、多抗霉素、多氧霉素、噻菌灵、咪鲜胺、腐霉利、霜霉威、propanosine-sodium、并环唑、丙森锌、prothiocinazole、唑菌胺酯、吡菌磷、啶斑肟、嘧霉胺、咯喹酮、吡氧呋、quinconazole、五氯硝基苯(PCNB)、硫磺和硫磺制剂、戊唑醇、叶枯酞、四氯硝基苯、tetcyclasis、氟醚唑、噻菌灵、噻菌腈、噻呋酰胺、甲基托布津、秋兰姆、tioxymid、甲基立枯磷、对甲抑菌灵、三唑酮、三唑醇、丁三唑、咪唑嗪、水杨菌胺、三环唑、十三吗啉、肟菌酯、氟菌唑、嗪氨灵、灭菌唑、烯效唑、井冈霉素、乙烯菌核利、氯康唑、二甲苯基丙氨酸、zarilamide、代森锌、福美锌以及Dagger G、OK-8705、OK-8801、α-(1,1-二甲基乙基)-β-(2-苯氧基乙基)-1H-1,2,4-三唑-1-乙醇、α-(2,4-二氯苯基)-β-氟-β-丙基-1H--1,2,4-三唑-1-乙醇、α-(2,4-二氯苯基)-β-甲氧基-α-甲基-1H-1,2,4-三唑-1-乙醇、α-(5-甲基-1,3-二氧杂环己烷-5-基)-β-[[4-(三氟甲基)-苯基]-亚甲基]-1H-1,2,4-三唑-1-乙醇、(5RS,6RS)-6-羟基-2,2,7,7-四甲基-5-(1H-1,2,4-三唑-1-基)-3-辛酮、(E)-α-(甲氧基亚氨基)-N-甲基-2-苯氧基-苯基乙酰胺、{2-甲基-1-[[[1-(4-甲基苯基)-乙基]-氨基]-羰基]-丙基}氨基甲酸1-异丙酯、1-(2,4-二氯苯基)-2-(1H-1,2,4-三唑-1-基)-乙酮-O-(苯基甲基)-肟、1-(2-甲基-1-萘基)-1H-吡咯-2,5-二酮、1-(3,5-二氯苯基)-3-(2-丙烯基)-2,5-吡咯烷二酮、1-[(二碘甲基)-磺酰基]-4-甲基-苯、1-[[2-(2,4-二氯苯基)-1,3-二氧戊环-2-基]-甲基]-1H-咪唑、1-[[2-(4-氯苯基)-3-苯基环氧乙烷基]-甲基]-1H-1,2,4-三唑、1-[1-[2-[(2,4-二氯苯基)-甲氧基]-苯基]-乙烯基]-1H-咪唑、1-甲基-5-壬基-2-(苯基甲基)-3-吡咯烷酮(pyrrolidinole)、2',6'-二溴-2-甲基-4'-三氟甲氧基-4'-三氟-甲基-1,3-噻唑-5-甲酰苯胺、2,2-二氯-N-[1-(4-氯苯基)-乙基]-1-乙基-3-甲基-环丙烷羧酰胺、2,6-二氯-5-(甲基硫代)-4-嘧啶基-硫氰酸酯、2,6-二氯-N-(4-三氟甲基苄基)-苯甲酰胺、2,6-二氯-N-[[4-(三氟甲基)-苯基]-甲基]-苯甲酰胺、2-(2,3,3-三碘-2-丙烯基)-2H-四唑、2-[(1-甲基乙基)-磺酰基]-5-(三氯甲基)-1,3,4-噻二唑、2-[[6-脱氧-4-O-(4-O-甲基-β-D-吡喃葡萄糖基)-α-D-吡喃葡萄糖基]-氨基]-4-甲氧基-1H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-5-腈、2-氨基丁烷、2-溴-2-(溴甲基)-戊二腈、2-氯-N-(2,3-二氢-1,1,3-三甲基-1H-茚-4-基)-3-吡啶羧酰胺、2-氯-N-(2,6-二甲基苯基)-N-(异硫氰酸根合甲基)-乙酰胺、2-苯基酚(OPP)、3,4-二氯-1-[4-(二氟甲氧基)-苯基]-1H-吡咯-2,5-二酮、3,5-二氯-N-[氰基[(1-甲基-2-丙炔基)-氧基]-甲基]-苯甲酰胺、3-(1,1-二甲基丙基-1-氧代-1H-茚-2-腈、3-[2-(4-氯苯基)-5-乙氧基-3-异噁唑烷基]-吡啶、4-氯-2-氰基-N,N-二甲基-5-(4-甲基苯基)-1H-咪唑-1-磺胺、4-甲基-四唑并[1,5-a]喹唑啉-5(4H)-酮、8-(1,1-二甲基乙基)-N-乙基-N-丙基-1,4-二氧杂螺[4,5]癸烷-2-甲胺、8-羟基喹啉硫酸盐、9H-呫吨-2-[(苯基氨基)-羰基]-9-羧酸酰肼、双-(1-甲基乙基)-3-甲基-4-[(3-甲基苯甲酰基)-氧基]-2,5-噻吩二羧酸酯、顺式-1-(4-氯苯基)-2-(1H-1,2,4-三唑-1-基)-环庚醇、顺式-4-[3-[4-(1,1-二甲基丙基)-苯基-2-甲基丙基]-2,6-二甲基-吗啉盐酸盐、[(4-氯苯基)-偶氮]-氰基乙酸乙酯、碳酸氢钾、甲烷四硫醇-钠盐、1-(2,3-二氢-2,2-二甲基-1H-茚-1-基)-1H-咪唑-5-羧酸甲酯、N-(2,6-二甲基苯基)-N-(5-异噁唑基羰基)-DL-丙氨酸甲酯、N-(氯乙酰基)-N-(2,6-二甲基苯基)-DL-丙氨酸甲酯、N-(2,3-二氯-4-羟基苯基)-1-甲基-环己烷酰胺、N-(2,6-二甲基苯基)-2-甲氧基-N-(四氢-2-氧代-3-呋喃基)-乙酰胺、N-(2,6-二甲基苯基)-2-甲氧基-N-(四氢-2-氧代-3-噻吩基)-乙酰胺、N-(2-氯-4-硝基苯基)-4-甲基-3-硝基-苯磺胺、N-(4-环己基苯基)-1,4,5,6-四氢-2-嘧啶胺、N-(4-己基苯基)-1,4,5,6-四氢-2-嘧啶胺、N-(5-氯-2-甲基苯基)-2-甲氧基-N-(2-氧代-3-噁唑烷基)-乙酰胺、N-(6-甲氧基)-3-吡啶基)-环丙烷酰胺、N-[2,2,2-三氯-1-[(氯乙酰基)-氨基]-乙基]-苯甲酰胺、N-[3-氯-4,5-双(2-丙炔氧基)-苯基]-N'-甲氧基-甲脒、N-甲酰基-N-羟基-DL-丙氨酸-钠盐、O,O-二乙基 [2-(二丙基氨基)-2-氧乙基]-乙基硫代磷酰胺酯(phosphoramidothioate)、O-甲基S-苯基苯基丙基硫代磷酰胺酯(phosphoramidothioate)、1,2,3-苯并噻二唑-7-硫代甲酸S-甲酯和螺[2H]-1-苯并吡喃-2,1'(3'H)-异苯并呋喃]-3'-酮。

优选地，杀真菌剂组分(a)包含至少一种二甲苯基丙氨酸。优选地，所述二甲苯基丙氨酸选自苯霜灵、呋霜灵、精甲霜灵、甲霜灵和L-甲霜灵。更优选地，所述二甲苯基丙氨酸是甲霜灵和/或L-甲霜灵。

产生系统获得性抗性且适用于本公开的组合物的化合物(b)包括水杨酸、硅、磷酸盐/酯、2 - 硫脲嘧啶、聚丙烯酸、核酸、fosethyl-AI、茉莉酸、苯并噻二唑、聚半乳糖醛酸酶抑制蛋白、2,6 - 二氯异烟酸和其甲酯、苯并(1,2,3)噻二唑-7 - 硫代甲酸S-甲酯，和皂苷。

优选地，所述至少一种产生系统获得性抗性的化合物(b)是至少一种皂苷。所述至少一种皂苷可以包含齐墩果酸(b1)、常春藤苷配基(b2)、美洲商陆酸(b3)、和/或皂皮酸(b4)，(b1) :(b2) :(b3) :(b4)重量比的量为约1 : 0.01 : 0.01 : 0.01 : 0.00 至约1 : 100 : 100 : 100，约1 : 0.1 : 0.1 : 0.1 : 0.0至约1 : 50 : 50 : 50，和约1 : 1 : 1 : 0至约1 : 1 : 1 : 1；化合物(b1)、(b2)、(b3)、和(b4)的比例彼此独立地变化。优选地，所述至少一种皂苷可以是约等摩尔量的齐墩果酸、常春藤苷配基、和美洲商陆酸。所述至少一种皂苷也可以是约等摩尔量的齐墩果酸、常春藤苷配基、美洲商陆酸、和皂皮酸。

尽管任何皂苷可以适合用于组合物中，但是所述皂苷应当优选从与最终皂苷组合物意在保护的植物不同的植物获得。皂苷的合适来源包括昆诺藜(Chenopodium quinoa)、藜科(Chenopodiaceae)、皂树(皂皮树科(Quillajaceae)，例如，皂树(Quillaja saponica))、报春花(Primrose)(报春花属(Primula spp.))、美远志(Senega)(美远志(Polygala senega))、丝石竹属(Gypsophila spp.)、七叶树(七叶树属??(Aesculus spp.))、人参(人参属(Panax spp.)和Eleutherocosus spp.)、甘草(甘草属(Glycyrrhiza spp.))、常春藤(常春藤属(Hedera spp.))、茶籽(茶(Camellia sinensis))、苜蓿(紫苜蓿(Medicago sativa))、大豆(大豆(Glycine max))、丝兰(丝兰属(Yucca spp.))、和薯蓣科(Dioscoreaceae) 。特别优选地，皂苷是相对于丝兰中发现的甾体类型的在昆诺藜和皂树中发现的三萜种类。

昆诺藜被归类为藜科的成员，所述藜科是大而多变的家族，其包括培育的菠菜和甜菜。昆诺藜是极端耐寒且耐干旱的植物，其可以在严酷生态条件 — 高海拔、相对贫瘠的土壤、降雨量少、和寒冷温度 — 生长，而其他主要谷物如玉米、小麦则不能耐受。

昆诺藜来源于南美安第斯地区，在该地区昆诺藜是在西班牙征服时代前的主要谷物。在西班牙占领后，昆诺藜的传统用途下降。该谷物的培育和使用并不普遍，直到最近复兴，这是由于西方因为该作物作为对于人食用的高赖氨酸、高蛋白谷物而产生兴趣。昆诺藜甚至更广泛的人食用的主要障碍一直是，且继续是谷物中存在的皂苷的苦味。

在化学上，皂苷包括一系列相关化合物。它们是在各种植物物种包括昆诺藜(Chenopodium quinoa)中广泛分布的一类甾醇苷，它们具有去污剂特性，且它们帮助植物抵抗微生物病原体如真菌、病毒和细菌。昆诺藜种子的提取物中的主要皂苷成分主要包括约等摩尔量的齐墩果酸、常春藤苷配基、和美洲商陆酸的三萜双糖链糖苷。昆诺藜种子在南美作为膳食补充剂具有很长的使用历史，且在美国作为谷物产品“Quinoa.”进行销售。基于毒性研究和这些皂苷存在于许多食品中，这种活性成分预计不会伤害人类，其他非目标生物，或环境。通常存在两种类型的皂苷—三萜皂苷和甾体皂苷。传统上，已经通过在自来水中洗涤谷物而去除皂苷，尽管最近已经开放了新方法(参见，例如，WO 99/53933)。

昆诺藜的皂苷是霜样米黄色粉末，其具有精细研磨的蛋白材料特征性的肉气味。皂苷可以通过各种方法提取，包括通过将昆诺藜植物的含有皂苷的部分置于醇水(如，甲醇，乙醇)溶液中，以形成含有皂苷的溶液和提取的固体残留物。然后从该溶液中去除醇，随后通过蒸发水，以获得含有皂苷的组合物(含有约等摩尔量的齐墩果酸、常春藤苷配基、和美洲商陆酸的三萜双糖链糖苷)。本领域技术人员将理解，皂苷也可以通过与本发明的组合物和方法一起使用的其他方法从昆诺藜提取(参见，例如，美国专利号6,482,770，其完整地通过引用并入本文)，且可以进行修饰(例如，通过水解)。

在一个方面，提供了意在用作种子处理的组合物。在另一个方面，提供了意在用作种植前根部浸渍的组合物。在另一个方面，提供了意在用作叶处理的组合物。在另一个方面，提供了意在移植前使用的组合物。在另一个方面，提供了意在移植后使用的组合物。在一些方面，该组合物是粉末、液体、涂覆层、气溶胶、或固体。

在一些方面，提供了组合物和种子，所述组合物包含：(a) 至少一种杀真菌剂；(b) 至少一种产生系统获得性抗性的化合物。

在处理植物中，公开的组合物的总浓度可以在相对宽的范围内变化。通常，它们是以重量计约0.01至约99.9，约0.1％至约99％，约0.5至约90％，约10％至约75％，和优选约15％至约70％的至少一种杀真菌剂(a)和至少一种产生系统获得性抗性的化合物(b)的组合，剩余重量包含下面描述的额外组分。

在处理种子中，至少一种杀真菌剂和至少一种产生系统获得性抗性的化合物的量可以在相对宽的范围内变化。通常，它们是约0.001至约50克，约0.01至约30克，约0.1至约15.6克，约1.6至约15.6克，优选约1.6至约10.6克的至少一种杀真菌剂(a)和至少一种产生系统获得抗性的化合物(b)的组合/每100 Kg种子。

本发明的组合物可以进一步包含额外组分如杀线虫剂、杀昆虫剂、细菌、粘合剂、稳定剂、乳化剂、溶剂、或载体，根据期望的特性，以重量计其可以占组合物的约1％至约99.9％，约5％至约75％，约5％至约50％，和约10％至约25％。

合适的杀真菌剂包括抗生素杀线虫剂，如阿维菌素；氨基甲酸酯杀线虫剂，如苯菌灵、克百威、丁硫克百威和cleothocard；肟氨基甲酸酯杀线虫剂，如棉铃威、涕灭威、涕灭砜威、杀线威；有机磷杀线虫剂，如diamidafos、苯线磷、丁硫环磷、磷胺、硫线磷、毒死蜱、diclofenthion、乐果、灭线磷、丰索磷、fostiazate、速杀硫磷、isamidofos、氯唑磷、灭多威、甲拌磷、phosphocarb、特丁硫磷、硫双威、虫线磷、三唑磷、imicyafos和四甲磷。其他合适的杀线虫剂包括乙酰虫腈、benclothiaz、氯化苦、棉隆、DBCP、DCIP、1,2-二氯丙烷、1,3-二氯丙烯、氟吡菌酰胺、糠醛、碘甲烷、威百亩、甲基溴、异硫氰酸甲酯和二甲苯酚。合适的生物杀线虫剂包括疣孢漆斑菌(Myrothecium verrucaria)、Burholderia cepacia、Bacillus chitonosporus、坚强芽孢杆菌(Bacillus firmus)、Pasteuria usage和淡紫拟青霉(Paecilomyces lilacinus)或植物或动物来源的杀线虫剂，如harpin蛋白、氨基酸序列或病毒、类病毒粒子。优选的杀线虫剂是：硫双灭多威、阿维菌素、harp??in蛋白、坚强芽孢杆菌、和Pasteuria usage。通常，它们是约0.001至约1000克，约0.01至约500克，约0.1至约300克，约1.6至约100克，优选约1.6至约10克的至少一种杀线虫剂(a)和至少一种产生系统获得性抗性的化合物(b)的组合/每100 Kg种子。

合适的杀虫剂包括非杀线虫剂型新烟碱类杀虫剂如1-(6-氯-3-吡啶基甲基)-N-硝基咪唑烷-2-亚胺(吡虫啉)、3-(6-氯-3-吡啶基甲基)-1,3-噻唑烷-2-亚基氰胺(噻虫啉(thiacloprid))、1-(2-氯-1,3-噻唑-5-基甲基)-3-甲基-2-硝基胍(可尼丁(clothianidin))、烯啶虫胺(nitempyran)、N ¹-[(6-氯-3-吡啶基)甲基]-N²-氰基-N¹-甲基乙脒(吡虫清)、3-(2-氯-1,3-噻唑-5-基甲基)-5-甲基-1,3,5- 二嗪烷(oxadiazinan)-4-亚基(ylidene)(硝基)胺(噻虫嗪(thiamethoxam))和1-甲基-2-硝基-3-(四氢-3-呋喃基甲基)胍(呋虫胺(dinotefuran))。优选的杀虫剂是：可尼丁、吡虫啉和噻虫嗪。通常，它们是约0.001至约1000克，约0.01至约500克，约0.1至约300克，约1.6至约100克，优选约1.6至约100克的至少一种杀线虫剂(a)和至少一种产生系统获得性抗性的化合物(b)的组合/每100 Kg种子。

合适的细菌是能够提供防止植物病原真菌或细菌和/或土传寄生虫如线虫或其他蠕虫的有害作用的能力的细菌。可通过对这些土传动物有害和/或对微生物种群有害的壳多糖分解活性、蛋白质分解活性、溶胶原活性或其它活性防治植物寄生线虫类和寄生微生物。表现出这些杀线虫、杀真菌和杀菌性质的细菌可以包括但不限于，Bacillus argri、Bacillus aizawai、白色乳杆菌(Bacillus albolactis)、解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)、蜡状芽孢杆菌(Bacillus cereus)、凝结芽孢杆菌(Bacillus coagulans)、Bacillus endoparasiticus、Bacillus endorhythmos、坚强芽孢杆菌(Bacillus firmus)、Bacillus kurstaki、Bacillus lacticola、Bacillus lactimorbus、乳杆菌(Bacillus lactis)、侧孢芽孢杆菌(Bacillus laterosporus)、Bacillus lentimorbus、地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis)、巨大芽孢杆菌(Bacillus megaterium)、Bacillus medusa、Bacillus metiens、纳豆芽孢杆菌(Bacillus natto)、Bacillus nigrificans、甲虫杆菌(Bacillus popillae)、短小芽孢杆菌(Bacillus pumilus)、Bacillus siamensis、Bacillus sphearicus、Bacillus spp.、枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)、苏云金芽孢杆菌(Bacillus thurngiensis)、Bacillus unifagellatus，以及此处完整地通过引用并入本文的Bergey’s Manual of Systematic Bacteriology，第一版 (1986)中的杆菌属分类中列举的那些。在一个实施方案中，该产芽孢细菌或根殖细菌用于保护种子。合适的细菌的实例包括在此处完整地通过引用并入的美国专利号6,406,690中都公开的坚强芽孢杆菌CNCM I-1582孢子、蜡状芽孢杆菌菌株CNCM I-1562孢子。其他产芽孢细菌包括解淀粉芽孢杆菌IN937a、名为GB03的枯草芽孢杆菌菌株或名为GB34的短小芽孢杆菌(B. pumulis)菌株。此外，该产芽孢细菌可以是上文列举的任何种的混合物、以及已知表现出农业有益性质的其它产孢子的根殖细菌。优选的细菌是：枯草芽孢杆菌、解淀粉芽孢杆菌、坚强芽孢杆菌和短小芽孢杆菌。通常，它们是约0.001至约100克，约0.01至约50克，约0.1至约30克，约1.6至约10克，优选约1.6至约10克的至少一种杀线虫剂(a)和至少一种产生系统获得性抗性的化合物(b)的组合/每100 kg种子。

可以将粘合剂添加到本发明的组合物中，所述粘合剂包括由对将要包衣的种子无植物毒性作用的天然或合成的粘合剂聚合物构成的那些。可以使用各种着色剂，包括但不限于有机发色团，其被分类为亚硝基、硝基、氮杂(包括单氮杂、双氮杂和多氮杂)、二苯甲烷、三芳基甲烷、呫吨、甲烷、吖啶、噻唑、噻嗪、吲达胺、靛酚、吖嗪、噁嗪、蒽醌和酞菁、 无机颜料、氧化铁、氧化钛和普鲁士蓝、及有机染料,例如茜素染料、氮杂染料和金属酞菁染料。可添加的其它添加剂包括微量营养物，如铁、锰、硼、铜、钴、钼和锌的盐。可以施用聚合物或其它防尘剂以使处理剂保留在种子表面上，包括，但不限于纤维素基、淀粉基、硅树脂基、聚丙烯、聚氯乙烯、聚碳酸酯、聚苯乙烯、聚丁二烯、基于乙烯基和苯乙烯丁二烯。

其它常规种子处理添加剂包括，但不限于，包衣剂、润湿剂、缓冲剂和多糖。可以将至少一种农业可接受载体添加到种子处理制剂中，如水、固体或干粉。干粉可以获得自各种材料，如树皮、碳酸钙、石膏、蛭石、滑石、腐殖质、活性木炭和各种磷化合物。

可任选加入稳定剂和缓冲剂，包括碱金属和碱土金属盐和有机酸类，如柠檬酸和抗坏血酸，无机酸类，如盐酸或硫酸。还可以加入杀生物剂且可以包括甲醛或甲醛释放剂，以及苯甲酸衍生物，如对羟基苯甲酸。其它添加剂包括能保护种子免受选择性除草剂的有害作用的功能剂，如活性炭、营养素(肥料)和能改善发芽和该组合物的质量的其它试剂，或其组合。

种子组合物的组分可以转化成常规制剂，如气溶胶分配剂、胶囊悬浮剂、冷雾浓缩物、粉剂(dustable powder)、可乳化的浓缩物、水包油乳剂、油包水乳剂、囊化颗粒、细粒、用于种子处理的可流动的浓缩物、气体(在压力下)、产气产品、颗粒、热雾浓缩物、大颗粒、微粒、用活性化合物浸渍的天然和合成材料、油分散性粉末、油混溶性可流动的浓缩物、油混溶的液体、糊剂、植物小棒、粉末、用于干种子处理的粉末、用杀虫剂涂覆的种子、可溶性浓缩物、可溶性粉末、用于植物处理的溶液、用于种子处理的溶液、悬浮液、悬浮液浓缩物(可流动的浓缩物)、在聚合物材料中的超细封装、超低容量(ulv)液体、超低容量(ulv)悬浮液、悬乳剂浓缩物、水分散性颗粒或片剂、用于浆液处理的水可分散性粉末、水溶性颗粒或片剂、用于种子处理的水溶性粉末和可湿性粉末。这些制剂以已知方式产生，例如通过将活性化合物与填充剂混合(即，与液体溶剂和/或固体载体混合)，任选使用表面活性剂(例如，乳化剂、分散剂、发泡剂、离子型或非离子型润湿剂或其混合物)。合适的乳化剂和/或发泡剂是，例如非离子和阴离子乳化剂，如聚氧乙烯脂肪酸酯、聚氧乙烯脂肪醇醚，例如烷基芳基聚乙二醇醚，烷基磺酸盐/酯、硫酸烷酯、芳基磺酸盐/酯以及蛋白水解产物；合适的分散剂是，例如木质素亚硫酸盐废液和甲基纤维素。表面活性剂含量以重量计可以占组合物的约0.1％至约40％、约5％至约40％、约10％至约40％、约20％至约40％、约30％至约40％、约0.1％至约30％、约0.1％至约20％、约0.1％至约10％、和约0.1％至约5％。

这些组合物不仅包括即可借助合适的装置如喷洒或喷雾装置施用于待处理的植物或者种子的组合物，并且包括在它们施用于植物或种子前必须稀释的浓缩的商业组合物。

合适的填充剂(extenders)是，例如，水，极性和非极性的有机化学液体，例如来自如下类别：芳族化合物和非芳香烃(例如石蜡，烷基苯，烷基萘，氯苯)，醇和多元醇(其，可以任选地被取代，醚化和/或酯化)，酮(例如丙酮，环己酮)，酯(包括脂和油)和(聚)醚，未取代的和取代的胺，酰胺，内酰胺(例如N-烷基吡咯烷酮)和内酯，砜和亚砜(例如二甲基亚砜)。

在使用水作为填充剂的情况下，有机溶剂可以，例如，也用作助溶剂。合适的液体溶剂主要包括：芳族化合物，如二甲苯，甲苯或者烷基萘，氯化芳族化合物或者氯化脂肪族烃，例如氯苯，氯乙烯或者二氯甲烷，脂肪族烃，例如环己烷或者石蜡，例如矿物油级分，矿物油和植物油，醇，例如丁醇或者乙二醇，以及它们的醚和酯，酮，例如丙酮，甲基乙基酮，甲基异丁基酮或者环己酮，强极性溶剂，例如二甲基甲酰胺和二甲基亚砜，和水。

术语“载体”是指天然或合成的，有机或无机材料，其与活性物质组合以使它们更容易施用，特别是施用于植物部分。因此，这种载体通常是惰性的，且应当是农业上可接受的。载体可以是固体或液体。合适的载体的实例包括粘土、天然或合成硅酸盐、二氧化硅、树脂、蜡、固体肥料、水、醇类、特别是丁醇、有机溶剂、矿物油和植物油和它们的衍生物。也可以使用这样的载体的混合物。合适用于本发明的组合物中的固体载体包括，例如，铵盐和研磨的天然的矿物质，例如，高岭土，粘土，滑石，白垩，石英，硅镁土(坡缕石)，蒙脱土或者硅藻土，和研磨的合成的矿物质，例如，高度分散硅粉，矾土和硅酸盐；对于颗粒合适的固体载体是：例如压碎和分级的天然岩石，例如方解石，大理石，浮石，海泡石和白云石，和无机和有机粗粉的合成颗粒，和有机材料的颗粒，例如锯屑，椰子壳，玉米棒子和烟草茎。

添加剂，例如羧甲基纤维素和天然的和合成的以粉末，颗粒或晶格形式的聚合物，例如阿拉伯树胶，聚乙烯醇，和聚醋酸乙烯酯，或天然的磷脂，例如脑磷脂和卵磷脂和合成的磷脂，也可以用于组合物制剂中。

还提供了用组合物处理种子、植物和/或植物部分的方法。在一个实施方案中，该方法包括：(a)提供包含有效量的至少一种产生系统获得性抗性的化合物的组合物；(b)将该产生系统获得性抗性的化合物与至少一种杀真菌剂组合以产生组合物；和(c)将该组合物施用于种子、植物和/或植物部分；和(d)任选地重复步骤(c)。

在一个实施方案中，该方法包括：(a)提供包含至少一种杀真菌剂的组合物；(b)提供包含有效量的至少一种产生系统获得性抗性的化合物的组合物；(c)将(a)的组合物施用于种子、植物和/或植物部分；和将(b)的组合物施用于种子、植物和/或植物部分。在一个方面，同时施用(a)和(b)的组合物。在一个方面，分开施用(a)和(b)的组合物。在一个方面，彼此独立地至少一次重复步骤(c)和(d)。

可以通过将本发明的组合物直接施用于种子、植物和/或植物部分而用该组合物处理种子、植物和/或植物部分。在另一个实施方案中，可以，例如通过处理种子、植物和/或植物部分正在暴露或将要暴露的环境或产地，而间接地处理种子、植物和/或植物部分。常规处理方法可用于处理种子、植物和/或植物部分、环境或产地，包括浸渍、撒粉、喷雾、薰蒸、成雾、散射、刷上、注射，和，在繁殖材料特别是种子的情况下，此外通过用一种或多种涂层涂覆。

可以以任何所需方式进行施用步骤，如以种子包衣、土壤浸液、根浸渍形式施用和/或直接在犁沟中施用和/或以叶面喷剂形式施用，和萌发前和/或萌发后施用。当包含至少一种杀真菌剂的组合物(a)和包含有效量的至少一种产生系统获得性抗性的化合物的组合物(b)是分开的组合物时，可以以任何顺序或任何施用组合进行施用步骤，如交替(a)和(b)的施用，(a)的多次施用和(b)的一次施用等。不被理论所束缚，相信至少一种杀真菌剂与至少一种皂苷协同作用，从而导致观察到的优异效果。

在另一个实施方案中，所述施用如下进行：1)在种植种子之前； 2)在移植幼苗时施用于根；3) 在移植幼苗前施用于叶；或4) 在移植幼苗后施用于叶。在另一个实施方案中，所述施用可以在温室内、温室外、或便携喷涂室内的外部进行。

在一个进一步实施方案中，提供了保护种子、植物或植物部分免于真菌的方法，包括提供至少一种包含至少一种产生系统获得性抗性的化合物如皂苷和至少一种杀真菌剂的组合物；和将该组合物施用于种子、植物、或植物部分。

在一个方面，提供制造用至少一种产生系统获得性抗性的化合物和杀真菌剂处理的种子的方法，包括：(a) 将所述至少一种产生系统获得性抗性的化合物和所述至少一种杀真菌剂施用于所述种子；和(b) 混合所述种子以实现基本均匀地处理。在进一步的方面，所述至少一种产生系统获得性抗性的化合物和所述至少一种杀真菌剂在它们被施用于种子之前混合在一起。在进一步的方面，所述至少一种产生系统获得性抗性的化合物和所述至少一种杀真菌剂分开施用于种子。在进一步的方面，所述至少一种产生系统获得性抗性的化合物和所述至少一种杀真菌剂的施用次数彼此独立地变化。

如果本发明的组合物是粉末形式，那么所述至少一种产生系统获得性抗性的化合物和所述至少一种杀真菌剂可以直接分开施用于种子，或混合在一起，然后施用于种子。如果组分是液体形式，它们可以在种植时或分开或混合在一起喷雾或雾化到种子上或垄沟中。

使用常规混合、喷施方法或其组合，使种子基本均匀地被一层或多层本发明的组合物包衣。通常使用精确、安全并有效地将种子处理组合物施用于种子的专门设计和制造的设备进行施用。这种设备使用各种类型的包衣技术，如旋转包衣机、转鼓包衣机、流化床技术、喷泉床、旋转雾或其组合。在一个实施方案中，通过旋转“雾化”盘或喷嘴进行施用，其在种子经过该喷流型时将种子处理剂均匀分布到种子上。随后可以将种子混合或翻滚额外的时间以实现另外的处理剂分布和干燥。在用组合物包衣之前，种子可以预涂或未预涂以提高发芽和萌发的均匀性。在可替代的实施方案中，可以将干粉组合物计量添加到移动的种子上。

可以通过连续或分批包衣法将种子包衣。在连续包衣法中，连续流设备同时计量加入种子流和种子处理组合物。滑动门、锥孔板、种子轮(seed wheel)或配重装置(带或分流器)调节种子流。一旦确定通过处理设备的种子流速，依据种子流速校准种子处理剂的流速以在种子流经种子处理设备时将所需剂量输送至种子。另外，计算机系统可监测包衣机的种子输入，由此保持种子的适量的恒流。在分批包衣法中，分批处理设备称出规定量的种子并将该种子放入封闭处理室或碗中，在此随后施用相应的种子处理剂。随后将种子与种子处理剂混合以实现各种子上的基本均匀地包衣。随后将该批倒出处理室以便准备处理下一批。借助计算机控制系统，使该分批法自动化以使其能够连续重复分批处理过程。在任一包衣法中，可任选通过无需员工干预就能启动和停止各种设备块(pieces)的可编程逻辑控制器操作种子包衣机。该系统的部件可通过若干来源，如Gustafson Equipment of Shakopee, MN购得。

在一个实施方案中，本发明的组合物被配制作为土壤处理剂。土壤处理剂可以是另外的，或作为种子处理剂的替代。可以通过常规的方法如喷雾将期望组合物施用于土壤而处理土壤。或者，通过利用各种技术，包括但不限于，滴灌、喷洒器、土壤灌注或土壤浸液，该期望组合物可以在种子萌发前引入土壤中或直接施用于与根接触的土壤。可以在种子种植前、种植时或种植后将期望组合物施用于土壤。

可以由本文所述的方法和组合物处理的真菌包括但不限于下述类别的成员：卵菌(Oomycetes)、腐霉属(Pythium spp.)、疫霉属(Phytophthora spp.)、镰刀菌属(Fusarium spp.)、丝核菌属(Rhizoctonia spp.)、青霉菌属(Penicillium spp.)、曲霉属(Aspergillus spp.)、链格孢属(Alternaria spp.)、枝孢属(Cladosporium spp.)、长蠕孢属(Helminthosporium spp.)、和双极霉属(Bipolaris spp.)。

基于用本发明的组合物处理的种子和/或植物和没有这样处理的种子和/或植物之间的损伤比较，公开的方法和组合物使由真菌引起的损伤降低约10％、约20％、约30％、约40％、约50％、约60％、约70％、约80％、约90％、或约100％。

所有种子、植物和植物部分都可以根据本文所述的组合物和方法进行处理，其中包括，但不限于甜菜(包括但不限于，花园甜菜和甜菜)、鸟足三叶草、谷物(包括但不限于，小麦、大麦、黑麦、燕麦、小米、蜀黍、玉米、荞麦、大米、和黑小麦)、玉米(包括，但不限于，田间玉米、甜玉米、和爆米花)、棉花、黄瓜、干豆、亚麻、牧草(包括但不限于，生长用于干草、放牧、或青贮的草、玉米饲料、玉米青贮、高粱干草、和高粱青贮)、果类植物??(包括但不限于，苹果、梨柑橘类水果、和葡萄)、豆类植物(包括但不限于，紫花苜蓿、三叶草、胡枝子、豆类、大豆、大豆干草、花生、花生干草、豌豆、豌豆藤蔓干草、豇豆、豇豆干草、三叶草、野豌豆、和绒毛豆)、生菜、油菜(包括但不限于，卡诺拉)、豌豆、马铃薯、水稻、红豆草、种子和豆荚类蔬菜(包括但不限于，黑眼豌豆、鹰嘴豆、豇豆、莳萝、食用大豆、蚕豆、红豌豆、豌豆、青豆、四季豆、云豆、利马豆、羽扇豆、海军豆、秋葵荚、豌豆、斑豆、架豆、四季豆、豆角、黄荚种菜豆和小扁豆)、高粱、向日葵、唐莴苣、烟草、番茄、块茎和草坪草。在该背景中，植物应理解为本文意指的全部植物和植物群体，例如所需和非所需的野生植物或农作物(包括天然存在的农作物)。农作物可为通过常规育种方法和优化方法，或通过生物技术及重组方法或者通过这些方法的组合得到的植物，包括转基因植物以及受或不受植物育种者权利法(plant breeders’ rights)保护的植物品种。植物部分应理解为意指地上及地下的所有植物部分和植物器官，例如枝、叶、花和根，可能提及的实例为：叶、针叶、枝(stalk)、茎(stem)、花、子实体、果实和种子，但也为根、块茎和根状茎。所述植物部分还包括农作物材料、营养体材料以及有性生殖材料，例如插条、块茎、根茎、幼枝(slips)和种子。

在一个实施方案中，处理野生植物种类或植物品种或通过传统生物学育种方法例如杂交或原生质体融合得到的植物种类或植物品种和这些植物种类或品种的部分。在另一个实施方案中，处理通过重组方法(如果合适的话，与传统方法(遗传修饰的生物体组合)得到的转基因植物和植物品种及其部分。术语“部分”、“植物的部分”或“植物部分”如上所述。

可以处理的植物包括商业上可获得的或使用中的那些品种。植物品种被理解为意指通过常规育种、通过诱变或通过重组DNA技术育种的具有新性状的植物。它们可以采用品种、生物型或基因型的形式。可以处理的转基因植物或植物品种(通过基因工程改造得到的植物或植物品种)，包括借助重组修饰已经接受了将特别有利的有用性状赋予这些植物的遗传物质的所有植物。这些性状的实例为：植物生长更良好、对高温或低温的耐受性增强、对干旱或水或土壤含盐量的耐受性增强、开花性能增强、收获简易、成熟加速、产量提高、农作物产物的质量和/或营养价值提高、农作物产物的储藏稳定性和/或加工性改善。这样性状的特别强调的其他实例为植物对动物和微生物害虫防御性的改善，所述害虫例如为昆虫、螨、植物病原性真菌、细菌和/或病毒，以及植物对特定除草活性化合物的抗性提高。

可提及的转基因植物的实例为例如以下的重要农作物：谷类(包括但不限于小麦、水稻、大麦、黑麦、燕麦、小米、蜀黍、玉米、荞麦、和黑小麦)、玉米、大豆、马铃薯、棉花、烟草、芸苔以及果类植物(带有果实为苹果、梨、柑橘类水果和葡萄)，特别强调的是：玉米、大豆、马铃薯、棉花、烟草和芸苔 (例如，卡诺拉)。不希望因此被限制，可以受益于本文公开的组合物和方法的转基因作物的其他实例包括紫花苜蓿、大麦、鸟足三叶草、卡诺拉、苜蓿、黄瓜、干豆、秋黑麦、田间玉米、亚麻、豆类、生菜、LibertyLink玉米杂交种、燕麦、豌豆、红豆草、种子和豆荚蔬菜、向日葵、唐莴苣、野豌豆、和小麦。特别强调的转基因性状为：由于在植物中形成毒素，特别是由于苏云金杆菌(Bacillus thuringiensis)的遗传物质(例如通过基因CryIA(a)、CryIA(b)、CryIA(c)、CryIIA、CryIIIA、CryIIIB2、Cry9c、Cry2Ab、Cry3Bb和CryIF及其组合)在植物(在本文中被称为“Bt 植物”)中产生的毒素所导致的植物对昆虫、蜘蛛、线虫、蛞蝓、蜗牛的防御性提高。还特别强调的性状是通过系统获得性抗性(SAR)、系统素、植保素、诱导子和抗性基因以及相应的表达蛋白和毒素增强了植物对真菌、细菌和病毒的防御性。此外特别强调的的性状是植物对特定除草活性化合物的抗性增强，所述除草活性化合物例如为：咪唑啉酮类、磺酰脲类、草甘膦类(glyphosate)或草胺膦类(phosphinotricin)(例如“PAT”基因)。赋予所需性状的特定基因还与转基因植物中的另一种特定基因组合存在。.

“Bt植物”的实例包括玉米品种，棉花品种、大豆品种和马铃薯品种，其以以下商标名销售：YIELD GARD(例如玉米，棉花，大豆)，KNOCKOUT (例如玉米)，STARLINK (例如玉米)，BOLLGARD (棉花)，NUCOTN (棉花)和NEWLEAF (马铃薯)。可以提到的抗除草剂植物的实例是玉米品种，棉花品种和大豆品种，其以以下商标名销售：ROUNDUP READY(草甘膦抗性，例如玉米，棉花，大豆)，LIBERTY LINK(草胺膦抗性，例如油菜)，IMI(咪唑啉酮抗性)和STS(磺脲抗性，例如玉米)。还可以提到的抗除草剂植物(常规地针对除草剂抗性培育)是以商标名CLEARFIELD销售的品种(例如玉米)。当然，上述内容也适用于未来将开发或销售且具有这些遗传性状或未来待开发的性状的植物品种。

下列实施例用来说明本发明的某些方面而不必意在限制本发明。

实施例1

实施例1显示了通过将至少一种皂苷与至少一种杀真菌剂的组合施用于玉米而获得的优势。如表1中所示，将腐霉菌感染的玉米种子暴露于各种处理方案，且然后使其在田间生长。不同于本文公开的其他实验，用于实施例1的实验的土壤没有用腐霉菌接种。未感染且未处理的和腐霉菌感染且未处理的种子充当对照。三唑醇，15% w/v，是用于谷物种子处理的系统性广谱杀真菌剂，但没有针对腐霉属的活性。甲霜灵，28.35% w/v，提供了系统性保护种子、根和正在萌发植物免于腐霉菌、系统性霜霉病和疫霉菌。对于玉米，甲霜灵的工业标准剂量为2克活性成分/每100千克种子(2 GA/100Kg)。皂苷，49.65% v/v 的昆诺藜皂苷的提取物，含有约等摩尔量的齐墩果酸、常春藤苷配基、和美洲商陆酸的三萜双糖链糖苷。出乎意料且如表1中显示的，皂苷与甲霜灵的工业标准剂量的一半的组合产生了与用单独的工业标准剂量或工业标准剂量两倍的甲霜灵可见的那些相当的结果(参见表1)。在表1中，“活力”代表植物健康的主观量度，且基于均匀性，一致的植物质量，和一致的植物间隔，更低的评分比更高的评分更有利。  

GA：克活性成分；kg：千克； DAA：将组合物施用于种子后的天数。

表1的数据图示显示于图 1A和1B中。如表1和图1A和1B所示，对于所有处理条件，计数和密度随着时间增加。然而，对于未处理/未感染和甲霜灵(2 GA/100kg)类别，相对密度随着时间下降。对于未处理的/未感染的类别，相对密度保持相同，因为它提供了参考点(即，相对于未处理/未感染的类别计算相对密度)。有趣的是，施用1 GA/100Kg甲霜灵(对于玉米，甲霜灵的工业标准剂量的一半)连同0.6 GA/100Kg皂苷产生与用单独的2 GA/100Kg甲霜灵或用单独的7.5 GA/100Kg甲霜灵实现的那些相当的计数、密度和相对密度。如图1B所示，用1 GA/100Kg甲霜灵和0.6 GA/100Kg皂苷处理的植物的活力与用单独的2 GA/100Kg甲霜灵或用单独的7.5 GA/100Kg甲霜灵处理的植物的活力相当。

实施例2

实施例2显示了通过将至少一种皂苷与至少一种杀真菌剂的组合施用于棉花而获得的优势。如表2中所示，将腐霉菌感染的棉花种子暴露于各种处理方案。将种子种植在田间，或在已经用腐霉菌接种的土壤中(用腐霉菌接种(Inoc.)的土壤)，或在没有用腐霉菌接种的土壤中(对照(Ctrl.))，然后使之生长。三唑醇、甲霜灵和皂苷的浓度和组成与实施例1中给出的是相同的。对于棉花，甲霜灵的行业标准剂量为15.5克活性成分/每100千克种子(15.5 GA/100Kg)。出乎意料且如表2中显示的，皂苷与甲霜灵的工业标准剂量的一半的组合产生了与用单独的工业标准剂量或工业标准剂量两倍的甲霜灵可见的那些相当的结果(参见表1)。表2的数据图示显示于图 2中。相对于15.5 GA/100Kg甲霜灵类别计算表2和图2的数据的相对密度。如表2和图2所示，用腐霉菌接种土壤与棉花幼苗计数和密度的总体下降相关(比较Ctrl.与Inoc.)。当用腐霉菌接种物攻击时，用3.75 GA/100Kg甲霜灵和0.6 GA/100Kg皂苷预处理的种子的表现与用单独的15.5 GA/100Kg甲霜灵(对于棉花的工业标准剂量)预处理的种子几乎一样好，且用7.5 GA/100Kg甲霜灵和0.6 GA/100Kg皂苷预处理的种子的表现与用单独的15.5 GA/100Kg甲霜灵预处理的种子或用单独的31 GA/100Kg 甲霜灵(对于棉花，工业标准剂量的两倍)预处理的种子一样好或更好。

实施例3

实施例3显示了通过将至少一种皂苷与至少一种杀真菌剂的组合施用于黄瓜而获得的令人惊讶的优势。如表3中所示，将腐霉菌感染的黄瓜种子暴露于各种处理方案。将种子种植在田间，或在已经用腐霉菌接种的土壤中(用腐霉菌接种(Inoc.)的土壤)，或在没有用腐霉菌接种的土壤中(对照(Ctrl.))，然后使之生长。三唑醇、甲霜灵和皂苷的浓度和组成与实施例1中给出的是相同的。对于黄瓜，甲霜灵的行业标准剂量为15.5克活性成分/每100千克种子(15.5 GA/100Kg)。出乎意料且如表3中显示的，皂苷与Allegiance的工业标准剂量的一半的组合产生了与用单独的工业标准剂量或工业标准剂量两倍的甲霜灵可见的那些相当的结果(参见表1)。表3的数据图示显示于图 3中。相对于31 GA/100Kg甲霜灵类别计算表3和图3的数据的相对密度。如表3和图3所示，用腐霉菌接种土壤与黄瓜幼苗计数、密度和相对密度的总体下降相关(比较Ctrl.与Inoc.)。当用腐霉菌接种物攻击时，用3.75 GA/100Kg甲霜灵和0.6 GA/100Kg皂苷预处理的黄瓜种子的表现没有与用单独的15.5 GA/100Kg甲霜灵(对于黄瓜的工业标准剂量)预处理的种子一样好，但是用7.5 GA/100Kg甲霜灵和0.6 GA/100Kg皂苷预处理的种子的表现与用单独的15.5 GA/100Kg甲霜灵预处理的种子或用单独的31 GA/100Kg 甲霜灵(对于黄瓜，工业标准剂量的两倍)预处理的种子一样好或更好。

实施例4

实施例4显示了通过将至少一种皂苷与至少一种杀真菌剂的组合施用于不同的玉米杂交种而获得的令人惊讶的优势。如表4中所示，将腐霉菌感染的两种不同杂交种(杂交种A和杂交种B)的玉米种子暴露于各种处理方案，且然后使其在温室中生长，以确定在温室环境中是否可以重复在田间观察到的影响。三唑醇、甲霜灵和皂苷的浓度和组成与实施例1中给出的是相同的。  

GA：克活性成分；Kg：千克。

表4的数据图示显示于图 4A和4B中。如表4和图4A和4B所示，用1 GA/100Kg甲霜灵和0.6 GA/100Kg预处理两种玉米种子的品种产生的计数与用2 GA/100Kg甲霜灵(对于玉米的工业标准剂量)或7.5 GA/100Kg甲霜灵预处理种子获得的计数类似。

实施例5

实施例5显示了当提供至少一种杀真菌剂连同至少一种皂苷时真菌对杀真菌剂抗性的抑制。将终极腐霉菌(Pythium ultimum)感染的两种不同品种的玉米幼苗(品种A和品种B)暴露于各种比例的甲霜灵、皂苷、或甲霜灵+皂苷，且然后使其在温室中生长，以确定在温室环境中是否可以重复在田间观察到的影响。先前显示这种特定的终极腐霉菌菌株对含有甲霜灵和/或L-甲霜灵的种子处理具有中等程度的抗性。如表5中所示，在明显低于15 GA / 100 Kg的商业标准比例的甲霜灵水平，将皂苷添加至甲霜灵增加了站立植物计数。来自品种A(基于未处理种子的站立计数的最弱的种子来源)的数据显示，在1和5 GA / 100Kg将皂苷添加至甲霜灵导致在第14和19天的站立计数与商业标准比例的甲霜灵实现的计数相等或更好(参见图5A)。来自品种B的站立计数显示了与1 GA /100 Kg比例的甲霜灵类似的趋势(参见图5B)。品种B的固有遗传学的额外强度和用品种A一样在有或没有皂苷的情况下无法分开甲霜灵比例。

本说明书中引用的所有参考文献通过引用并入本文中，如同每篇参考文献具体且单独地通过引用并入。

将被理解的是，上述的每个、或两个或更多个要素也可以一起在不同于上述类型的其他方法类型中找到有用的应用。在没有进一步分析的情况下，上述内容将如此充分地揭示本发明的组合物和方法的要旨，通过应用当前的知识，其他人可以在不忽略一定特征的情况下容易地使之适应各种应用，从现有技术的观点来看，所述特征相当地构成随附权利要求中所述的这些组合物和方法的一般或特定方面的本质特征。前述实施方案仅以实例的方式给出；本发明的组合物和方法的范围仅通过下列权利要求限制。

Claims (31)

1.组合物，其包含至少一种杀真菌剂和至少一种产生针对种子和/或植物中的病原体的系统获得性抗性的化合物。

2.权利要求1的组合物，其中所述至少一种杀真菌剂是二甲苯基丙氨酸。

3.权利要求2的组合物，其中所述二甲苯基丙氨酸选自苯霜灵、呋霜灵、精甲霜灵、甲霜灵、L-甲霜灵、以及它们的组合。

4.权利要求1的组合物，其中所述至少一种产生系统获得性抗性的化合物是至少一种皂苷。

5.权利要求4的组合物，其中所述至少一种皂苷是从昆诺藜获得的。

6.权利要求4的组合物，其中所述至少一种皂苷是约等摩尔量的齐墩果酸、常春藤苷配基、和美洲商陆酸的三萜双糖链糖苷。

7.权利要求6的组合物，其中所述杀真菌剂是甲霜灵。

8.权利要求1的组合物，进一步包含杀昆虫剂。

9.权利要求1的组合物，进一步包含至少一种细菌。

10.权利要求1的组合物，进一步包含杀线虫剂。

11.保护种子或植物免于疾病的方法，所述方法包括施用包含至少一种杀真菌剂和至少一种产生针对所述种子或植物的系统获得性抗性的化合物的组合物。

12.权利要求11的方法，其中所述至少一种杀真菌剂是二甲苯基丙氨酸。

13.权利要求12的方法，其中所述二甲苯基丙氨酸选自苯霜灵、呋霜灵、精甲霜灵、甲霜灵、L-甲霜灵、以及它们的组合。

14.权利要求11的方法，其中所述至少一种产生系统获得性抗性的化合物是至少一种皂苷。

15.权利要求14的方法，其中所述至少一种皂苷是从昆诺藜获得的。

16.权利要求14的方法，其中所述至少一种皂苷是约等摩尔量的齐墩果酸、常春藤苷配基、和美洲商陆酸的三萜双糖链糖苷。

17.权利要求16的方法，其中所述杀真菌剂是甲霜灵。

18.权利要求12的方法，其中所述组合物进一步包含至少一种杀昆虫剂。

19.权利要求12的方法，其中所述组合物进一步包含至少一种细菌。

20.权利要求12的方法，其中所述组合物进一步包含至少一种杀线虫剂。

21.种子，其具有外表面和包含至少一种杀真菌剂和至少一种产生系统获得性抗性的化合物的组合物。

22.权利要求21的种子，其中所述至少一种杀真菌剂是二甲苯基丙氨酸。

23.权利要求22的种子，其中所述二甲苯基丙氨酸选自苯霜灵、呋霜灵、精甲霜灵、甲霜灵、L-甲霜灵、以及它们的组合。

24.权利要求21的种子，其中所述至少一种产生系统获得性抗性的化合物是至少一种皂苷。

25.权利要求24的种子，其中所述至少一种皂苷是从昆诺藜获得的。

26.权利要求26的种子，其中所述至少一种皂苷是约等摩尔量的齐墩果酸、常春藤苷配基、和美洲商陆酸的三萜双糖链糖苷。

27.权利要求26的种子，其中所述杀真菌剂是甲霜灵。

28.权利要求22的种子，其中所述外表面和组合物进一步包含杀昆虫剂。

29.权利要求22的种子，其中所述外表面和组合物进一步包含至少一种细菌。

30.权利要求22的种子，其中所述外表面和组合物进一步包含杀线虫剂。

31.降低或防止真菌中的杀真菌剂抗性传播的方法，所述方法包括将包含至少一种杀真菌剂和至少一种产生系统获得性抗性的化合物的组合物施用于种子或植物的步骤。

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