CN103404868A - 白木香果皮提取物在制备抗衰老的保健食品或护肤品中的应用 - Google Patents

Abstract

本发明公开了白木香果皮提取物在制备抗衰的老保健食品及护肤品中的应用。本发明的白木香果皮提取物是通过以下方法制备的：以白木香果皮为原料，用水、乙醇水溶液、、乙酸乙酯或丙酮对白木香果皮进行提取，提取液经干燥后制得白木香果皮提取物。该白木香果皮提取物对DPPH自由基具有显著的清除作用。因此，白木香果皮提取物可用于制备抗衰老的保健食品或护肤品。

Description

白木香果皮提取物在制备抗衰老的保健食品或护肤品中的应用

技术领域：

本发明属于中药、天然保健食品、护肤品领域，具体涉及白木香果皮提取物在抗衰老的保健品和护肤品中的应用。

背景技术：

自由基和人类多种疾病有着密切的关系，如果体内自由基过多，则可引起蛋白质、核酸（DNA）变性，导致细胞和组织器官损伤，诱发各种疾病，加速机体衰老。同时，自由基过量产生也是导致皮肤自然衰老和光致老化的主要原因，减少自由基的产生和清除老化代谢产物已成为目前延缓人体和皮肤衰老的有效方法。由于在保健食品和护肤品中使用的合成抗氧化剂通常具有毒副作用，因此，寻找天然、高效、低毒的抗氧化剂成为了一种必然趋势。植物是天然抗氧化剂的重要来源，其所含的天然抗氧化剂不但有抑制体内脂质过氧化和清除自由基的作用，同时可促进体内抗氧化酶与内源性抗氧化剂的合成，具有比合成抗氧化剂更多的优越性，因此，以纯天然植物成分为主的保健食品、护肤品越来越受到广大消费者的青睐。

白木香Aquilaria sinensis(Lour.)Gilg是瑞香科(Thymelaeaceae)沉香属Aquilaria常绿乔木，以其含树脂的木材作沉香入药。沉香是我国传统珍贵中药，具有行气止痛，温中止呕，纳气平喘之功效，主治胸腹胀闷疼痛，胃寒呕吐呃逆，肾虚气逆喘急。目前对白木香的利用主要集中在以其茎、干生产沉香，但由于天然结香和人工结香都比较困难且结香周期过长，导致白木香资源的利用率很低。因此，为拓展白木香资源的新用途，提高该植物资源利用率和经济效益，人们开始关注白木香叶、果实的开发利用，并已有相关文献的报道，如：“白木香果实及其提取物在制备抗肿瘤药物中的新用途”[梅文莉等，中国，ZL200810186904.2]；“白木香果皮挥发性成分及抗肿瘤活性研究”[徐维娜等，中药材，2010，33(11):1736-1740]；“白木香果皮化学成分及其生物活性研究”[张兴等，中草药，2013，44（10）：1248-1252]。

本专利所涉及的白木香果皮提取物的提取方法公开于专利“白木香果皮提取物及其制备方法和应用”[李浩华等，中国，ZL201010526431.3]，并发现白木香果皮提取物具有广谱抗菌活性，而白木香果皮提取物在清除DPPH自由基活性方面的研究均未见报道。

发明内容：

本发明的第一个目的是提供白木香果皮提取物在制备抗衰老的保健食品及护肤品中的应用。

本发明的白木香果皮提取物是通过以下方法制备的：以白木香果皮为原料，用水、乙醇水溶液、乙酸乙酯或丙酮对白木香果皮进行提取，提取液经干燥后制得白木香果皮提取物。

优选，以白木香果皮为原料，将其粉碎，加入水、乙醇水溶液、乙酸乙酯、丙酮作溶剂经回流提取或超声提取，得提取液，提取液经减压浓缩干燥或冷冻干燥，而制得白木香果皮提取物。

所述的回流提取优选是在60～100℃下回流进行提取。进一步优选，所述的回流提取是采用水、乙醇水溶液、乙酸乙酯或丙酮进行回流提取获得提取液，提取液经减压浓缩干燥而获得白木香果皮提取物。

所述的超声提取优选是在超声波频率为40KHz下超声提取，进一步优选，所述的超声提取是用70%乙醇水溶液进行超声提取，提取液经减压浓缩干燥获得白木香果皮提取物。

所述的抗衰老保健食品或护肤品为对DPPH自由基具有清除作用的保健食品或护肤品。

本发明通过实验发现，本发明的白木香果皮各提取物在200μg/mL浓度下，与DPPH溶液在30℃下反应30min后对DPPH自由基的清除率均为95%以上，而阳性对照药物维生素C对DPPH自由基的清除率为99.7%。由此可见，在同等条件下，白木香果皮各提取物对DPPH自由基的清除能力均与维生素C相当。选择400μg/mL、200μg/mL、100μg/mL、50μg/mL、25μg/mL、12.5μg/mL、6.25μg/mL7个反应浓度下测定白木香果皮各提取物对DPPH自由基的清除率，采用SigmaPolot10.0软件计算白木香果皮各提取物清除DPPH自由基的IC₅₀值为19.9～38.7μg/mL之间。选择10min、20min、30min、40min、50min、60min不同反应时间，测定100μg/mL浓度下白木香果皮各提取物对DPPH自由基的清除率，结果表明，白木香果皮提取物对自由基清除能力随反应时间的延长而增强，在反应30min后，白木香果皮各提取物对DPPH自由基的清除作用均趋于稳定状态。因此，本发明的白木香果皮提取物具有显著清除DPPH自由基活性，可应用于制备抗衰老的保健食品或护肤品。

本发明的第二个目的是提供上述白木香果皮提取物在制备DPPH自由基清除剂中的应用。

本发明的第三个目的是提供一种抗衰老的保健食品及护肤品，其特征在于，该抗衰老的保健食品或护肤品包含有效量的白木香果皮提取物作为活性成分。

因此，本发明的白木香果皮提取物具有显著清除DPPH自由基能力，表明白木香果皮提取物在制备抗衰老的保健食品及护肤品中具有广阔的应用开发前景。

具体实施方式：

以下通过具体实施例来对本发明进一步说明，但并非限制本发明。

白木香果皮提取物的制备：

白木香果皮水提取物样品的制备：称取白木香果皮5g，加入100mL纯净水，100℃回流提取2次，每次2h，过滤，合并2次提取液，旋转蒸发仪浓缩至干，得白木香果皮水提物浸膏。

白木香果皮乙醇提取物样品的制备：称取白木香果皮5g，加入100mL体积分数为70%乙醇在频率为40KHZ超声提取2次，每次30min，过滤，合并2次提取液，旋转蒸发仪浓缩至干，得白木香果皮乙醇提取物浸膏。

白木香果皮乙酸乙酯提取物样品的制备：称取白木香果皮5g，加入100mL乙酸乙酯，80℃回流提取2次，每次2h，过滤，合并2次提取液，旋转蒸发仪浓缩至干，得白木香果皮乙酸乙酯提取物浸膏。

白木香果皮丙酮提取物样品的制备：称取白木香果皮5g，加入100mL丙酮，60℃回流提取2次，每次2h，过滤，合并2次提取液，旋转蒸发仪浓缩至干，得白木香果皮丙酮提取物浸膏。

实施例1：白木香果皮提取物清除DPPH自由基活性的测定：

白木香果皮提取物溶液的配制：白木香果皮各提取物（浸膏）用DMSO溶解并配制成50mg/mL浓度。

DPPH溶液的配制：称取1mgDPPH，加入12.5mL无水乙醇，配制成0.2mmoL/L浓度。

维生素C溶液的配制：称取1mg维生素C，加入2mL无水乙醇，配制成500μg/mL浓度。

将白木香果皮各提取物溶液和维生素C用无水乙醇稀释至400μg/mL。吸取上述白木香果皮各提取物溶液的乙醇稀释液100μL于96孔板中，加入浓度为0.2mmoL/L的DPPH溶液100μL作样品组，以无水乙醇溶液作参比溶液，以无水乙醇代替DPPH溶液作样品背景组，以无水乙醇代替上述白木香果皮提取物溶液的乙醇稀释液作阴性对照组，以维生素C稀释液代替上述白木香果皮提取物溶液的乙醇稀释液作阳性对照组，置30℃培养箱中反应30min，用酶标仪测定每孔517nm处的吸光值（OD），实验重复3次，按以下公式计算提取物对DPPH自由基的抑制率：

清除率（%）={1-（OD_{样品组/阳性组}-OD_背景组）/OD_阴性组}×100%。结果见表1所示：

表1：白木香果皮提取物对DPPH自由基的清除活性（n=3）

实施例2：不同浓度的白木香果皮提取物清除DPPH自由基活性的测定

将白木香果皮各提取物溶液用无水乙醇稀释至400μg/mL、200μg/mL、100μg/mL、50μg/mL、25μg/mL、12.5μg/mL、6.25μg/mL，按上述步骤的测定方法测吸光值，并采用SigmaPolot10.0软件计算白木香果皮提取物清除DPPH自由基的IC₅₀值。结果见表2。

表2：不同浓度的白木香果皮提取物对DPPH自由基清除活性（n=3）

实施例3：白木香果皮提取物不同反应时间清除自由基活性的测定

将白木香果皮各提取物溶液用无水乙醇溶液稀释至200μg/mL，按上述步骤测定吸光值，之后每隔10min测定1次，共测定7次，测定白木香果皮各提取物在不同反应时间对DPPH自由基的清除率，结果见表3。

表3：不同反应时间的白木香果皮提取物对DPPH自由基清除活性（n=3）

由以上实验结果可以看出，本发明的白木香果皮各提取物在200μg/mL浓度下，对DPPH自由基的清除率均为95%以上，而阳性对照药物维生素C对DPPH自由基的清除率为99.7%，由此可见，在同等条件下，该白木香果皮提取物对DDPH自由基的清除能力与维生素C相当。选择400μg/mL、200μg/mL、100μg/mL、50μg/mL、25μg/mL、12.5μg/mL、6.25μg/mL7个浓度下测定白木香果皮提取物对DPPH自由基的清除率，采用SigmaPolot10.0软件计算白木香果皮各提取物清除DPPH自由基的IC₅₀值为19.9～38.7μg/mL之间。选择0min、10min、20min、30min、40min、50min、60min反应时间，测定白木香果皮各提取物在100μg/mL浓度下对DPPH自由基的清除率，确定该白木香果皮各提取物在反应30min时对自由基的清除率为85%以上，在反应30min后，白木香果皮各提取物对DPPH自由基的清除作用均趋于稳定状态。因此，本发明的白木香果皮提取物具有显著清除DPPH自由基活性，能用于制备DPPH自由基清除剂，因此，可用于制备抗衰老的保健食品或护肤品。

Claims (7)

1.白木香果皮提取物在制备DPPH自由基清除剂中的应用，所述的白木香果皮提取物是通过以下方法制备的：以白木香果皮为原料，用水、乙醇水溶液、乙酸乙酯或丙酮对白木香果皮进行提取，提取液经干燥后制得白木香果皮提取物。

2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述的白木香果皮提取物是将白木香果皮粉碎，加入水、乙醇水溶液、乙酸乙酯或丙酮作为溶剂，经回流提取或超声提取，得提取液，提取液经减压浓缩干燥或冷冻干燥，而制得白木香果皮提取物。

3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述的回流提取是在60～100℃下进行回流提取；所述的超声提取是在超声波频率为40KHz，溶剂为70%乙醇水溶液下进行超声提取。

4.根据权利要求1或2或3所述的应用，其特征在于，所述的DPPH自由基清除剂是对DPPH自由基具有清除作用的抗衰老护肤品。

5.一种抗衰老护肤品，其特征在于，该抗衰老护肤品包含有效量的白木香果皮提取物作为活性成分，所述的白木香果皮提取物是通过以下方法制备的：以白木香果皮为原料，用水、乙醇水溶液、乙酸乙酯或丙酮对白木香果皮进行提取，提取液经干燥后制得白木香果皮提取物。

6.根据权利要求5所述的抗衰老护肤品，其特征在于，所述的白木香果皮提取物是将白木香果皮粉碎，加入水、乙醇水溶液、乙酸乙酯或丙酮作为溶剂，经回流提取或超声提取，得提取液，提取液经减压浓缩干燥或冷冻干燥，而制得白木香果皮提取物。

7.根据权利要求6所述的抗衰老护肤品，其特征在于，所述的回流提取是在60～100℃下进行回流提取；所述的超声提取是在超声波频率为40KHz，溶剂为70%乙醇水溶液下进行超声提取。