CN103361371A

CN103361371A - 一种番茄硫代腺苷甲硫氨酸合酶基因SlSAMS1的克隆及其应用

Info

Publication number: CN103361371A
Application number: CN2013103206232A
Authority: CN
Inventors: 史庆华; 巩彪; 王秀峰; 魏珉; 杨凤娟
Original assignee: Shandong Agricultural University
Current assignee: Shandong Agricultural University
Priority date: 2013-07-29
Filing date: 2013-07-29
Publication date: 2013-10-23

Abstract

本发明涉及一种番茄硫代腺苷甲硫氨酸合酶基因SlSAMS1的克隆及其应用，属于蔬菜分子生物学和生物技术领域；本发明将该基因的cDNA序列置于CaMV35S启动子之下，构建植物表达载体，转化番茄，使该基因在番茄中过量表达。试验证明，与野生型番茄植株相比，转基因耐碱能力显著提高，在碱胁迫下整株生长势增强，叶片失绿症降低，光合、叶绿素荧光参数趋于正常，元素代谢趋于平衡，氧化胁迫程度降低，利用转基因番茄作为砧木能提高碱胁迫下番茄产量。因此，利用该基因在抗碱方面的特性，通过基因工程手段改善番茄性状，对盐碱地地区番茄的可持续具有重要意义。

Description

一种番茄硫代腺苷甲硫氨酸合酶基因SlSAMS1的克隆及其应用

（一）技术领域

本发明涉及一种番茄硫代腺苷甲硫氨酸合酶基因SlSAMS1的克隆，重组及在提高转基因番茄抵抗盐碱胁迫能力方面的应用，属于蔬菜分子生物学和生物技术领域。

（二）技术背景

土壤盐碱化是影响农业生产和生态环境的严重问题，在干旱、半干旱地区，由于降雨量少而蒸发强烈，致使土壤盐分不断积累，严重的地区植物基本无法生长，盐碱胁迫是植物分布受限和农业减产的重要原因。在全世界15亿ha耕地中，约有3.4亿ha盐土和5.6亿ha碱土。我国为世界盐碱地大国之一，盐碱地面积约为0.9亿ha，主要分布在东北、西北和华北地区以及沿海滩涂。随着灌溉农业的发展，盐碱土面积还将不断扩大。

近年来随着农业结构的调整，我国蔬菜栽培面积不断扩大，蔬菜产业已经成为很多省市农民增收致富的主导产业，但是很多地方，尤其是“三北”地区由于土壤盐碱化问题较为突出，蔬菜产业的发展受到制约。土壤盐碱化包括盐化和碱化两个方面，盐土中主要含有较多的Na⁺、Cl^-、SO₄ ^2-等离子，而碱土中除了以上离子外，还含有较多的HCO₃ ^-和CO₃ ^2-。在我国北方内陆的很多地区碱性土壤分布往往较中性盐土更为广泛。针对转基因蔬菜抵抗中性盐胁迫的工作，国内外科研工作者已做了大量工作，而关于转基因蔬菜的耐碱性研究尚未见报道。

高浓度的碱胁迫不仅能引起植物体内的离子失衡和渗透胁迫，而且还会对植物造成高pH伤害，导致植物发育不良，生长缓慢，降低作物经济产量。严重的盐碱胁迫或渗透胁迫会引起植物体内的次生胁迫—氧化胁迫的发生，甚至导致植物死亡。因此，提高作物的耐盐碱性愈来愈受到人们的关注。番茄是我国蔬菜生产中栽培面积最大的蔬菜之一，属中度盐敏感植物,在高盐碱土壤上生育状况较差。选育耐盐碱性强的番茄品种一直是番茄育种的重要目标。但是传统的育种手段具有一定的局限性，通过常规杂交育种方法筛选耐盐后代费时，耗地，且受环境因素影响较大。转基因育种与传统育种相比可以有效地打破物种界限,克服有利基因与有害基因的连锁,达到定向改良植物的目的。因此利用转基因技术创造耐盐碱番茄新种质是盐碱地地区番茄可持续生产的重要措施。

S-腺苷甲硫氨酸合成酶(S-adenosylmethionine synthetase，SAMS,EC2.5.1.6)是植物代谢中的一个关键酶，它催化甲硫氨酸与ATP合成S-腺苷甲硫氨酸（SAM）。SAM在植物体内参与多种代谢途径，SAM是体内最重要的甲基供体之一，具有转甲基作用，许多生物合成都需要SAM提供甲基(Tabor等，1984)。多胺类物质参与多种植物生长发育过程，且植物体内多胺的积累有利于植物抵抗包括盐碱胁迫在内的各种非生物胁迫和生物胁迫，生物胺(精胺和亚精胺)的合成需要SAM脱梭产物作为氨丙基供体(Hbey等，1990；Arfi等，1994)。SAM去甲基后生成S-腺苷同型半胱氨酸，经过转硫途径生成同型半胱氨酸，随后生成半胱氨酸、谷胱苷肽等有利于机体清除活性氧伤害的物质。

植物中SAMS的表达会受到一些环境因子的诱导，比如盐胁迫(Espartero，1994；VanBreusegem，1994)、渗透胁迫等。研究表明，烟草中SAMS1基因受高温诱导表达增强，但不受甲基紫晶诱导的氧化胁迫及盐胁迫影响，而SAMS2基因的表达同时受高温、甲基紫晶及高盐3种胁迫的诱导(余涛，2004)。盐胁迫可以诱导番茄SAMS酶活性，免疫化学分析表明，SAMS在各种类型细胞和植物器官中都有表达。番茄含有4个SAMS基因，其中盐胁迫、甘露醇处理、ABA处理条件下SAMS1和SAMS3会在根部发生累积现象，处理8小时后就会出现这种现象并且会维持3天。预示着他们与番茄的抗逆性有关(EsPartero，1994)。Sule等(2004)利用蛋白质组学的方法比较了热耐受型大麦和热敏感型大麦在高温胁迫下蛋白的表达模式的差异，结果表明SAMS蛋白差异显著。这些研究表明植物的SAMS基因能积极响应逆境胁迫。然而，目前报道多集中于非生物胁迫诱导SAMS基因的表达情况，但关于番茄过量表达SAMS1基因的耐盐碱特性及在盐碱胁迫下的增产效果尚无报道。

经检索，国内外文献和专利中尚没有关于SlSAMS1增强碱耐受性的相关报道。

（三）发明内容

本发明的目的旨在提供一种可提高番茄耐碱能力的相关基因SlSAMS1，同时提供一种该基因在提高番茄耐碱胁迫方面的应用，并应用于生产其他可提高碱抵抗能力的转基因植物。

本发明中，我们用常规方法在番茄中克隆得到一个SAMS1基因，将其命名为SlSAMS1。并利用该基因构建了真核表达载体后转入野生型番茄自交系，使之高效表达。研究发现，转基因番茄植株耐碱能力较非转基因番茄植株显著提高，表现为碱胁迫下整株生长势增强，叶片失绿症降低，光合、叶绿素荧光参数趋于正常，元素代谢趋于平衡，氧化胁迫程度降低，且通过嫁接试验证明了该转基因番茄用于砧木能显著提高接穗（野生型因番茄）在碱胁迫下的产量，延缓番茄叶片衰老，增加水分利用效率，降低落花、落果、落叶率等。因此，利用该基因在增加番茄碱耐受性方面的特性，通过基因工程手段改善作物的逆境抵抗能力，提高碱胁迫下的经济产量具有重要的现实意义。这一策略的应用不仅能为植物抗碱性状的改良提供新的基因源，而且对于培育其它非生物胁迫耐受力强的种质材料提供了理论基础。

本发明中提供的核苷酸序列来自番茄。

本发明利用同源克隆获得了番茄的碱抵抗相关基因SlSAMS1，其基因序列如SEQ.ID.NO.1所示，蛋白质氨基酸序列如SEQ.ID.NO.2所示。具体方法如下：

本发明从番茄幼叶中提取总RNA，反转录得到cDNA。根据国际番茄基因组数据库中已公布的序列，设计特异引物：

SAMS5’GCTCTAGACAAGGGGTAAAAAGATTG

SAMS3’CGAGCTCACAAAGAACAAAAACATAG

进行常规聚合酶链式反应（Polymerase chain reaction，PCR）。将PCR产物与克隆载体（PMD18-T）连接后转化大肠杆菌DH5α感受态细胞，然后筛选重组子，与国际番茄基因组数据库比对，得到该基因cDNA全长，命名为SlSAMS1。

该基因的cDNA全长为1659bp，其中开放阅读框部分为1182bp。可编码393个氨基酸。

该基因序列如下：

序列表

（1）SEQ.ID.NO.1的信息

（a）序列特征

长度：1659bp

类型：核酸

链型：双链

拓扑结构：线性

（b）分析类型：cDNA

（c）假设：否

（d）反义：否

（e）最初来源：番茄

（f）序列描述：SEQ.ID.NO.1

cgcaagcatt tggcgaacca aaaatacaaa gaggttattt ctctcaaggg 50

gtaaaaagat tgcccctttt cgacatttat aatcctcttt ttctctttgt 100

tcgccgttgg gttcttcact ttcctgtttc ttgagaatgg aaactttctt 150

attcacctcc gagtctgtga acgagggtca cccagacaag ctctgtgatc 200

agatctctga tgcagttctt gatgcctgcc ttgagcaaga tcccgagagc 250

aaagttgcat gtgaaacttg caccaagacc aacttggtca tggtctttgg 300

tgagatcaca accaaggcta ttgtagacta tgagaagatt gtgcgtgaca 350

catgccgtaa tattggattt gtttctgatg atgttggtct tgatgctgac 400

aactgcaagg tccttgttta cattgagcag caaagtcctg atattgctca 450

aggtgtccac ggccatctga ccaaacgccc cgaggagatt ggtgctggtg 500

accagggcca catgtttggc tatgcaacag atgagacccc tgaattaatg 550

cctctcagtc acgtgcttgc aactaaactt ggtgcccgtc ttacagaagt 600

ccgcaagaat ggcacctgcg cctggttgag gcctgatggc aagacccaag 650

ttactgttga gtatagcaat gacaatggtg ccatggttcc aattagggta 700

cacactgttc ttatctccac ccaacacgat gagaccgtta ccaatgatga 750

gattgcccgc gaccttaagg agcatgtcat caaaccagtc atcccagaga 800

agtaccttga tgagaatact attttccacc ttaacccatc tggccgattc 850

gttattggtg gacctcatgg tgatgctggt ctcactggtc gtaaaatcat 900

catcgacact tatggtggtt ggggtgctca tggtggtggt gctttctcgg 950

gcaaagaccc aaccaaggtc gacaggagtg gtgcatacat tgtaaggcag 1000

gctgcaaaga gtatcgtagc tagtggactt gctcgtagat gcatcgtgca 1050

ggtatcttat gccatcggtg tgcctgagcc attgtctgta ttcgttgaca 1100

cctatggcac tggaaagatc cctgacaggg aaattttgaa gatcgttaag 1150

gagaactttg acttcagacc tggaatgatg tccattaact tggatttgaa 1200

gaggggtggc aatagaagat tcttgaaaac tgctgcctat ggtcactttg 1250

gacgtgatga ccccgatttc acatgggaag ttgtcaagcc cctcaagtgg 1300

gaaaagcccc aagactaata agtgcttgcc tatgtttttg ttctttgttg 1350

tttgcttgtg gctttagaat ctcccccgtg tttgcttgtt tgtctttgta 1400

ttttctcttt tgacccttta ttttgttatt gtcctgtttc cattgtgttg 1450

gatggatatc ttaggccttg gaatattaag gaaagaaaaa gaaatattat 1500

tatatacttg aaaattagtg catttgtgga atgattttct ttattgaaaa 1550

aaagatgcta aatgatgagt gcaaatgtgc actaggaaaa caagcagctg 1600

tgacgttttc tgtgttatca ttcgttggct gacaatgaaa ttactgtgtt 1650

gtaaggacc 1659

其中灰色方框内的ATG和TAA分别为起始密码子和终止密码子。

（3）SEQ.ID.NO.2的信息

（a）序列特征

长度：393个氨基酸

类型：氨基酸

链型：单链

拓扑结构：线性

（b）分子类型：蛋白质

（c）序列描述：SEQ.ID.NO.2

MET Glu Thr Phe Leu Phe Thr Ser Glu Ser Val Asn Glu Gly His Pro

5 10 15

Asp Lys Leu Cys Asp Gln Ile Ser Asp Ala Val Leu Asp Ala Cys Leu

20 25 30

Glu Gln Asp Pro Glu Ser Lys Val Ala Cys Glu Thr Cys Thr Lys Thr

35 40 45

Asn Leu Val MET Val Phe Gly Glu Ile Thr Thr Lys Ala Ile Val Asp

50 55 60

Tyr Glu Lys Ile Val Arg Asp Thr Cys Arg Asn Ile Gly Phe Val Ser

65 70 75 80

Asp Asp Val Gly Leu Asp Ala Asp Asn Cys Lys Val Leu Val Tyr Ile

85 90 95

Glu Gln Gln Ser Pro Asp Ile Ala Gln Gly Val His Gly His Leu Thr

100 105 110

Lys Arg Pro Glu Glu Ile Gly Ala Gly Asp Gln Gly His MET Phe Gly

115 120 125

Tyr Ala Thr Asp Glu Thr Pro Glu Leu MET Pro Leu Ser His Val Leu

130 135 140

Ala Thr Lys Leu Gly Ala Arg Leu Thr Glu Val Arg Lys Asn Gly Thr

145 150 155 160

Cys Ala Trp Leu Arg Pro Asp Gly Lys Thr Gln Val Thr Val Glu Tyr

165 170 175

Ser Asn Asp Asn Gly Ala MET Val Pro Ile Arg Val His Thr Val Leu

180 185 190

Ile Ser Thr Gln His Asp Glu Thr Val Thr Asn Asp Glu Ile Ala Arg

195 200 205

Asp Leu Lys Glu His Val Ile Lys Pro Val Ile Pro Glu Lys Tyr Leu

210 215 220

Asp Glu Asn Thr Ile Phe His Leu Asn Pro Ser Gly Arg Phe Val Ile

225 230 235 240

Gly Gly Pro His Gly Asp Ala Gly Leu Thr Gly Arg Lys Ile Ile Ile

245 250 255

Asp Thr Tyr Gly Gly Trp Gly Ala His Gly Gly Gly Ala Phe Ser Gly

260 265 270

Lys Asp Pro Thr Lys Val Asp Arg Ser Gly Ala Tyr Ile Val Arg Gln

275 280 285

Ala Ala Lys Ser Ile Val Ala Ser Gly Leu Ala Arg Arg Cys Ile Val

290 295 300

Gln Val Ser Tyr Ala Ile Gly Val Pro Glu Pro Leu Ser Val Phe Val

305 310 315 320

Asp Thr Tyr Gly Thr Gly Lys Ile Pro Asp Arg Glu Ile Leu Lys Ile

325 330 335

Val Lys Glu Asn Phe Asp Phe Arg Pro Gly MET MET Ser Ile Asn Leu

340 345 350

Asp Leu Lys Arg Gly Gly Asn Arg Arg Phe Leu Lys Thr Ala Ala Tyr

355 360 365

Gly His Phe Gly Arg Asp Asp Pro Asp Phe Thr Trp Glu Val Val Lys

370 375 380

Pro Leu Lys Trp Glu Lys Pro Gln Asp

385 390

本发明还提供了编码S-腺苷甲硫氨酸合酶的基因SlSAMS在番茄中应用的方法，可提高转基因番茄的耐碱性。步骤为：

（a）将番茄SlSAMS1基因的cDNA序列置于CaMV35S启动子下，构建植物表达载体。

（b）采用本领域熟知的农杆菌介导法将构建好的植物表达载体导入植物细胞，得到转基因植株。

本发明从番茄中分离出一种编码S-腺苷甲硫氨酸的基因SlSAMS1，将该基因cDNA序列构建在由组成型CaMV35S强启动子控制的真核表达载体PROKII上，构建了SlSAMS1的正义表达载体，采用农杆菌介导法转化番茄，对获得的转基因番茄进行功能分析表明，转基因番茄中SlSAMS1的过量表达能提高其抗碱能力，提高高浓度碱（150mM NaHCO₃）胁迫下番茄幼苗的存活率（图3）。增加番茄幼苗的生物量和光合能力，维持K-Na代谢平衡（图4）。促进了低浓度碱（5mMNaHCO₃）胁迫下不定芽和不定根的发育，高浓度碱胁迫（100mM NaHCO₃）下有机酸的积累，通过评估100mM NaHCO₃胁迫下番茄愈伤组织的电解质渗透率和MDA含量，证明了其抗碱性主要是通过多胺类物质的积累发挥的作用（图5）。并且，本发明发现使用转入SlSAMS1基因的番茄植株作为砧木，能显著提高碱胁迫下番茄接穗的耐碱性和产量（图6）。具有较大的经济价值和社会价值。

本发明还涉及将上述植物表达载体导入植物细胞中，获得可提高碱抵抗能力的转基因植物。导入的方法是本领域人员熟知的农杆菌介导转化法。

本发明所选用的标记基因为卡那霉素转移酶基因，可进一步包括其他选择标记基因和报告基因。

在本发明中SlSAMS1基因及含有该基因的植物表达载体也可用于生产其他转基因植物，包括转基因植物器官、组织、细胞及其种子和后代。

（四）附图说明

图1.SlSAMS1基因正义表达载体构建简图。

图2.转基因番茄鉴定结果和蛋白质水平表达量分析。

图3.碱胁迫下转基因番茄的耐碱性鉴定。

Control为正常营养液培养;Stress为含150mM NaHCO₃营养液培养。照片为胁迫后12天拍摄，由图可以看出转基因番茄植株（SAMS1-3，1-7，1-11）较非转基因番茄植株（WT）显著提高耐碱性，表现在叶片萎蔫及黄化程度降低。

图4.碱胁迫下转基因番茄的生物量，光合能力和Na，K含量。

Control为正常营养液培养;Sress为含150mM NaHCO₃营养液培养，由图可以看出转基因番茄植株（SAMS1-3，1-7，1-11）较非转基因番茄植株（WT）在碱胁迫下积累了更多的生物量，提高光合能力，维持K-Na平衡。

图5.碱胁迫下转基因植株的芽和根系发育状况，有机酸含量，电解质渗透率和MDA含量，及添加多胺合成抑制剂（MGBG）和乙烯合成抑制剂（AOA）后的效果。

本图说明SlSAMS基因是通过多胺生物合成途径提高转基因番茄植株的耐碱性。

图6.碱胁迫下转基因番茄作为砧木对接穗产量的影响。

（五）具体实施方案

基于番茄离体培养再生能力强、遗传转化效率高等优点，在下述实施例中以本实验室保存的野生型番茄自交系为例对本发明进行了详细的说明。下述实施例中的方法，如无特别说明，均为常规方法。

1.RNA的提取：利用TRIZOL试剂盒提取番茄总RNA。

2.cDNA第一链合成（采用TaKaRa公司cDNA第一链合成试剂盒法），在0.25ml离心管中加入下列试剂：

42℃水浴30min，85℃水浴5min，冰上冷却5min，轻离心后，保存备用。

3.cDNA全长序列的获得

3.1用特异引物进行PCR反应获得SlSAMS1基因，引物序列如下：

SAMS5’GCTCTAGACAAGGGGTAAAAAGATTG（SEQ ID NO.3）

SAMS3’CGAGCTCACAAAGAACAAAAACATAG（SEQ ID NO.4）

体系如下；

反应程序为：

反应完毕后，电泳检测结果并回收正确片段。得到SlSAMS1基因，其核苷酸序列如SEQ.ID.NO.1所示；其氨基酸序列如SEQ.ID,NO.2所示。将所得片段连入pMD18-T（TaKaRapMD18-T Vector），然后转化大肠杆菌DH5α感受态细胞，在含有氨苄青霉素（100mg/L）的LB固体培养基上培养过夜，挑取白色菌落至LB液体培养基中培养3h，进行菌液PCR鉴定。将正确的菌样在含有氨苄青霉素（100mg/L）的LB液体培养基中培养过夜。碱法小量提取质粒DNA，酶切鉴定后进行序列测定，得到过渡载体pMD18-SlSAM1。

4.表达载体的构建

碱法小量提取pMD18-SlSAM1质粒DNA，用XbaI和SacI酶切，与用相同的限制性内切酶酶切的PROKII表达载体连接。连接产物转化大肠杆菌DH5α感受态细胞，然后在含卡那霉素（50mg/L）的LB固体培养基上培养，对生长的菌落进行PCR鉴定和质粒DNA酶切鉴定。将构建好的表达载体转化农杆菌LBA4404感受态细胞，本发明采用的是CaCl₂化学法转化农杆菌。

5.转基因植物的获得

（1）播种将番茄种子用70％酒精处理1分钟，然后用浓度为3.3％的次氯酸钠处理15分钟。处理完毕后用无菌水冲洗种子5次，用无菌吸水纸吸干水分。然后将种子播种于1/2MS培养基（植物组织培养中常用配方）上（每瓶40-50粒）。把种子放在暗处培养至种子长根，待种子长出根后把种子转移到光下培养，直到子叶完全展开。

（2）预培养：在超净工作台上取子叶完全展开的番茄植株，将其子叶剪下，去除两端，留中间大约0.5厘米长的叶片。叶片按其生长方式摆放于预培养基上（MS培养基+2.0mg L^-1玉米素+0.5mg L^-1吲哚乙酸）置于暗处，倒置培养2天。在预培养的同时将农杆菌置于28℃进行活化培养。

（3）侵染将携带重组质粒的农杆菌摇两天至金黄色，在超净工作台上将农杆菌菌液转入灭菌的2ml离心管中，12000rpm离心1分钟，弃去上清。加入MS液体培养基，侵染经预培养的番茄子叶。在无菌纸上将菌液吸干，然后转移到共培养基上（与预培养基配方一致）暗培养两天。

（4）分化培养将经过共培养的番茄子叶转移到分化培养基（预培养基+200mg L^-1头孢霉素+50mg L^-1卡那霉素）上诱导抗性愈伤组织的产生，每天光照16h，温度控制在25-28℃，每15d-18d继代1次。当愈伤组织上有抗性芽生长后，将其移入灭菌的新鲜分化培养基上继续培养。当芽长到2-3cm时，将去除愈伤组织的芽移到生根培养基上，7d左右会有根生成，待根系发达，叶片顶盖后将小苗移到灭菌土中，获得转基因植株。

6.过量表达SlSAMS1基因提高番茄碱抵抗能力分析

6.1采用营养液培养方法，研究转基因番茄T2代幼苗与非转基因番茄幼苗的耐碱性差异，试验设置正常营养液和高浓度碱营养液（150mM NaHCO₃），处理至第6d和12d时观察表型差异并测定相关指标。随后继续培养，统计碱胁迫下番茄幼苗27d内的存活率。处理各期间非转基因番茄较转基因番茄死亡率显著上升，处理至27d，非转基因植株全部死亡，而转基因植株存活率约为40%-70%。

6.2采用MS固体培养基进行转基因番茄碱胁迫下不定芽和不定根的再生能力试验，通过分别添加多胺和乙烯生物合成抑制剂分析过量表达SlSAMS1基因后转基因苗的抗碱机理，评估指标包括有机酸含量，电解质渗透率和MDA含量。结果表明，SlSAMS1基因能够通过多胺途径提高转基因番茄的耐碱性。

6.3以野生型番茄作为接穗，再以转基因番茄和野生型番茄分别作为砧木进嫁接，在10mM NaHCO₃胁迫下对野生型番茄产量及生长进行评估。每株番茄留果4穗，于完全成熟时记录产量。结果表明，转基因植株作为砧木能显著提高碱胁迫下番茄的产量。

6.4实验结果表明，过量表达SlSAMS1的转基因番茄具有较高的碱抵抗能力，提高高浓度碱（150mM NaHCO₃）胁迫下番茄幼苗的存活率（图3）。提高番茄幼苗的生物量和光合能力，维持K-Na代谢平衡（图4）增强低浓度碱（5mM NaHCO₃）胁迫下不定芽和不定根的发育，高浓度碱胁迫（100mM NaHCO₃）下有机酸的积累，通过评估100mM NaHCO₃胁迫下番茄愈伤组织的电解质渗透率和MDA含量，证明了其抗碱性主要是通过多胺类物质的积累发挥的作用（图5）。并且，本发明涉及了采用转SlSAMS1基因的番茄作为砧木，能显著提高碱胁迫下番茄的产量，其中SAMS1-3，SAMS1-7，SAM1-11分别较对照增产48.42%，29.61%和38.81%。（图6）。

序列表

Claims

1.一种番茄硫代腺苷甲硫氨酸合酶基因SlSAMS1，其特征在于其核苷酸序列如SEQ.ID.NO.1所示；该核苷酸编码的氨基酸序列如SEQ.ID.NO.2所示。

2.如权利要求1所述的SlSAMS1基因在番茄中的应用，可以增加番茄的耐碱性。

3.过量表达如权利要求1所述SlSAMS1基因的番茄可用于抗碱砧木，能提高碱胁迫下番茄接穗的耐碱性及产量。