CN103305484B

CN103305484B - 植物耐逆性相关蛋白w69及其编码基因和应用

Info

Publication number: CN103305484B
Application number: CN201210065605.XA
Authority: CN
Inventors: 徐兆师; 马有志; 翟朝增; 杨乐; 李连城; 陈明
Original assignee: Institute of Crop Sciences of Chinese Academy of Agricultural Sciences
Current assignee: Institute of Crop Sciences of Chinese Academy of Agricultural Sciences
Priority date: 2012-03-13
Filing date: 2012-03-13
Publication date: 2015-05-27
Anticipated expiration: 2032-03-13
Also published as: CN103305484A

Abstract

本发明公开了一种植物耐逆性相关蛋白W69及其编码基因和应用。本发明提供的蛋白质，是如下(a)或(b)：(a)由序列表中序列1所示的氨基酸序列组成的蛋白质；(b)将序列1的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且具有相同功能的由序列1衍生的蛋白质。本发明的实验证明，本发明发现的基因W69在高盐、低温、ABA、和干旱的诱导下表达。W69能够显著提高拟南芥对NaCl的抗性，促进根系的发育。本发明提供的蛋白和基因为人为控制抗逆和耐逆相关基因的表达提供了基础，将在培育抗逆性和耐逆性增强的植物中发挥重要的作用。

Description

植物耐逆性相关蛋白W69及其编码基因和应用

技术领域

本发明涉及生物技术领域，尤其涉及一种植物耐逆性相关蛋白W69及其编码基因和应用。

背景技术

干旱、高盐及低温等逆境胁迫是影响小麦生长、发育的障碍因子。因此，了解小麦对逆境条件的应答与信号传导机制，提高小麦品种的抗逆性，成为小麦遗传研究及小麦品种改良的重要任务之一。

在逆境胁迫下植物体内会产生一系列应答反应，伴随着许多生理生化及发育上的变化。明确植物对逆境的反应机制，将为抗逆基因工程研究和应用提供科学论据。目前，植物抗逆性研究已逐渐深入到细胞、分子水平，并与遗传学和遗传工程研究相结合，探索用生物技术来改进植物生长特性，其目的是提高植物对逆境的适应能力。

在干旱、高盐和低温等环境胁迫的逆境条件下，植物体内产生的大量活性氧(reactive oxygen species，ROS)，ROS以其极强的氧化性使细胞膜脂过氧化，损伤膜系统和氧化细胞，使脂类和蛋白质代谢异常，最终对作物的生长发育造成严重伤害。在长期进化过程中，植物形成了一套酶促和非酶促的ROS清除机制来阻止膜脂过氧化，在最大程度上减少环境所造成的伤害并得以生存。谷胱甘肽过氧化物酶(glutathioneperoxidases，GPX)是酶促清除机制中清除ROS的关键酶类。

到目前为止，在拟南芥、玉米、水稻、小麦、燕麦、油菜、胡萝卜、绿豆、菠菜、中国大白菜等植物中克隆到了GPXs基因，研究表明，植物体内GPXs参与了生长发育和胁迫响应，GPXs在mRNA和蛋白水平上受到高盐、低温、机械损伤、重金属、ABA和过氧化压力的诱导表达。同源性分析表明，植物体内的GPXs和动物体内的磷脂氢谷胱甘肽过氧化物酶(phospholipid hydroperoxide GPxs，PHGPX)高度同源，所有的GPXs都具有高度保守的结构域。有趣的是，植物GPXs基因所编码的的氨基酸序列中，硒代半胱氨酸(selenoCys)被半胱氨酸(Cys)所代替，而这个selenoCys被认为是动物PHGPX的催化位点，这就大大降低了GPXs在植物体内的催化能力。动物体内PHGPX的功能主要是通过催化过氧化氢和脂质过氧化物还原来保护细胞膜免受氧化损伤。植物GPX家族在结构、功能和组织分布上与动物有很大的不同，最近的研究表明，植物GPXs基因家族同样可以还原H₂O₂，有机氢过氧化物、磷脂氢过氧化物，且对后者表现出较高的催化活性，可以预测GPXs同样可以防止膜质过氧化。研究发现，GPXs在抵御逆境胁迫的信号通路中起着至关重要的作用。在拟南芥中已经发现8种GPXs的同工酶，蛋白分子量在20kD左右，分布在4条染色体上，定位在细胞质、叶绿体、线粒体等细胞器中，在非生物胁迫中不同GPXs基因受不同信号转导途径所调节，但是具体的分子机制还不清楚。研究表明，高盐、重金属、低温、干旱、机械损伤等非生物胁迫均能诱导GPXs的表达，GPXs可能参与到响应外界环境胁迫的细胞信号传导、细胞衰老等纵横交错的网络中，提高植物对外界逆境的适应能力。

由于植物的逆境耐性是由多基因调控的复杂网络，植物如何感受、利用和清除非生物胁迫过程产生的ROS具有重要的理论意义和实用价值。依靠导入逆境胁迫中关键的基因，促进多个相关基因的表达，激活整个信号网络，从而增强植物的抗逆性，已经成为植物抗逆基因工程的研究热点。

发明内容

本发明的一个目的是提供一种植物耐逆性相关蛋白W69及其编码基因。

本发明提供的一种蛋白，为谷胱甘肽过氧化物酶，来源于小麦属小麦(Triticumaestivum L.)，是如下(a)或(b)：

(a)由序列表中序列1所示的氨基酸序列组成的蛋白质；

(b)将序列1的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且与植物耐逆性相关的由序列1衍生的蛋白质。

上述蛋白中，一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加为不超过10个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加。

上述序列表中序列1的氨基酸残基序列由187个氨基酸残基组成。

编码上述蛋白的基因也是本发明保护的范围。

上述基因为如下1)-5)中任一一种的DNA分子：

1)序列表中序列2所示的DNA分子；

2)序列表中序列2自5’端第88至651位核苷酸所示的DNA分子；

3)序列表中序列2自5’端第88至648位核苷酸所示的DNA分子；

4)在严格条件下与1)或2)或3)限定的DNA序列杂交且编码与植物耐逆性相关蛋白的DNA分子；

5)与1)或2)或3)限定的DNA序列具有90％以上同源性，且编码与植物耐逆性相关蛋白的DNA分子。

上述严格条件为在6×SSC，0.5％ SDS的溶液中，在65℃下杂交，然后用2×SSC，0.1％ SDS和1×SSC，0.1％ SDS各洗膜一次。

上述序列2由889个核苷酸组成，开放阅读框架为自5′端第88至651位碱基。

含有上述基因的重组表达载体、表达盒、转基因细胞系或重组菌也是本发明保护的范围。

上述重组表达载体为将上述基因插入pBI121中得到的重组载体，具体为将序列表的序列2自5’端第88至651位核苷酸所示的DNA片段插入pBI121的SmaI和SpeI酶切识别位点之间得到的重组质粒。

扩增上述基因的全长或其任意片段的引物对也是本发明保护的范围，上述引物对由序列表中序列3所示的DNA分子和序列表中序列4所示的DNA分子组成。

上述的蛋白或上述基因或上述的重组表达载体在调控植物耐逆性和/或抗氧化能力中的应用也是本发明保护的范围。

上述应用中，上述耐逆具体为耐盐或耐干旱；上述调控具体为提高。

上述的蛋白作为谷胱甘肽过氧化物酶中的应用也是本发明保护的范围。

本发明的另一个目的是提供一种培育转基因植物的方法。

本发明提供的方法，是将上述基因导入目的植物中，得到转基因植物；所述转基因植物具有如下1)或2)的特征：

1)所述转基因植物耐逆性高于所述目的植物；

2)所述转基因植物抗氧化能力高于所述目的植物。

上述基因通过上述重组表达载体导入所述目的植物中。

上述方法中，所述耐逆为耐盐或耐干旱；

上述方法中，上述目的植物为双子叶植物或单子叶植物，在本发明的实施例中，所述双子叶植物具体为拟南芥。

所述耐盐具体体现为在盐胁迫下，所述转基因植物的根长大于所述目的植物；

所述抗氧化具体体现为在H₂O₂胁迫下，所述转基因植物的根系比所述目的植物发达和/或所述转基因植物的生长不受明显抑制；

所述耐干旱具体体现在ABA胁迫下，所述转基因植物的萌发率高于所述目的植物。

本发明的实验证明，本发明发现的基因W69在高盐、低温、ABA、H₂O₂和干旱的诱导下表达，通过转基因技术，得到转W69植物，证明W69能够显著提高拟南芥对NaCl、ABA和H₂O₂的抗性，促进根系的发育。本发明提供的蛋白和基因为人为控制抗逆和耐逆相关基因的表达提供了基础，将在培育抗逆性和耐逆性增强的植物中发挥重要的作用。

附图说明

图1为W69基因在各种胁迫下的表达模式

图2为NaCl处理下野生型和转基因拟南芥生长情况

图3为外源ABA处理下野生型和转基因拟南芥生长情况

图4为外源H₂O₂处理下野生型和转基因拟南芥生长情况

图5为SDS-PAGE电泳检测PET-W169目的条带

图6为W69蛋白的GPX酶活性测定

具体实施方式

下述实施例中所使用的实验方法如无特殊说明，均为常规方法。

下述实施例中所用的材料、试剂等，如无特殊说明，均可从商业途径得到。

下述实施例中的％，如无特殊说明，均为质量百分含量。

实施例1、W69的克隆

一、W69的克隆

将水培生长10天左右的普通小麦(Triticum aestivum L.)品种小白麦(Triticumaestivum cv.Xiaobaimai，公众可从中国农业科学院作物科学研究所获得，公众也可从国家种质资源库获得(编号为ZM242)；提及小白麦的文献为：孙海桃等，小麦TaDREB6转录因子互作蛋白的筛选，中国农业科学，2011，44(22)：4740-4747.；提及小白麦的文献为：Isolation and molecular characterization of the Triticum aestivumL.ethylene-responsive factor 1(TaERF1)that increases multiple stresstolerance，Plant Mol Biol(2007)65：719-732，Zhao Shi Xu，Lan Qin Xia，MingChen，Xian Guo Cheng，Rui Yue Zhang，Lian Cheng Li，Yun Xing Zhao，Yan Lu，Zhi YongNi，Li Liu，Zhi Gang Qiu，You Zhi Ma)三叶期幼苗NaCl处理2小时，用液氮速冻，-80℃保存备用。

采用Trizol法(TianGen)提取小麦叶片总RNA，第一链cDNA合成用反转录酶XL(AMV)。采用SMART法合成ds cDNA，PCR产物进行1.0％琼脂糖凝胶电泳检测。

通过5’RACE和3’RACE的方法获得序列表中的序列2。

该序列表中序列2所示的基因命名为W69基因，其开放阅读框架为自序列表的序列2的5′端第88位-651位核苷酸，将该基因编码的蛋白命名为W69蛋白，由187个氨基酸残基组成，该蛋白的氨基酸序列为序列表中的序列1。

上述序列2也可以通过人工合成。

二、实时荧光定量PCR分析胁迫处理后W69的表达特性

苗龄为10天的小白麦幼苗，进行以下处理：

(1)干旱处理：将水培的小白麦幼苗取出吸干根上的水分，置于干燥的滤纸上，干旱培养30分钟、1小时、2小时、4小时、8小时、12小时、24小时后取出材料，用液氮速冻，-80℃保存备用。

(2)盐渍处理：将小麦幼苗置于2％的由NaCl和Na₂SO₄组成的钠盐溶液中(NaCl与Na₂SO₄的质量百分比为3∶2)中，光照培养30分钟、1小时、2小时、4小时、8小时、12小时、24小时后分别取出材料，用液氮速冻，-80℃保存备用。

(3)脱落酸处理：将小麦幼苗置于200μM的脱落酸(ABA)溶液中，光照培养30分钟、1小时、2小时、4小时、8小时、12小时、24小时后分别取出并用液氮速冻，-80℃保存备用。

(4)H₂O₂处理：将小麦幼苗置于100mM的H₂O₂溶液中，光照培养30分钟、1小时、2小时、4小时、8小时、12小时、24小时后分别取出并用液氮速冻，-80℃保存备用。

(5)低温处理：将小麦幼苗置于42℃下，光照培养30分钟、1小时、2小时、4小时、8小时、12小时、24小时后分别取出并用液氮速冻，-80℃保存备用。

(6)对照的处理：直接取未经任何处理的小麦幼苗-80℃冻存作为对照(0小时)。

将上述各处理的小苗幼苗采用Quikprep Micro mRNA Purification Kit(Pharmacia)进行mRNA的分离，再采用R103-Quant_Reverse_Transcriptase(TIANGEN)将纯化的mRNA反转录为cDNA。

根据W69序列，在其可变区设计特异引物W69RTF和W69RTR(产物大小为573bp)。以actin为内参基因，引物为actin-2F和actin-2R。

W69RTF：5’-CGAATTCACCGTTAAGGATTG-3’；

W69RTR：5’-CTGGCAGAGATTGGTCTAGATATC-3’。

actin-2F：5’-CTCCCTCACAACAACCGC-3’；

actin-2R：5’-TACCAGGAACTTCCATACCAAC-3’。

以上述各处理的cDNA为模板，用W69RTF和W69RTR进行实时荧光定量PCR。

结果如图1所示，A为盐渍处理的结果，B为ABA处理的结果，C为干旱处理的结果，D为低温处理的结果，E为H₂O₂处理的结果，可以看出，植物受到盐渍、ABA和干旱处理的早期反应阶段，W69 mRNA便开始大量转录；低温处理下，W69 mRNA表达量在1h出现回落后又有所升高。W69 mRNA表达量对外源的H₂O₂处理并无显著变化。

实施例2、W69对植物耐逆性的影响

一、重组表达载体的构建

1、W69基因的克隆

根据TaTPRPK1基因的序列设计引物对(W69-121F和W69-121R)，引物末端分别引入SmaI和SpeI酶切识别位点，

W69-121F：5’-TCCCCCGGGATGGGGGCGTCCGAATCT-3’(序列3)；

W69-121R：5’-GGACTAGTTCTACTTCTGCGAGTCGGAAGATTC-3(序列4)。

提取小白麦叶片总RNA，反转录得到cDNA为模板，用上述引物进行扩增，得到的PCR产物进行1.2％琼脂糖凝胶电泳，其大小为0.5Kb。将该PCR产物送去测序，该PCR产物具有序列表中序列2自5’端第88-651位核苷酸，即为W69基因。

采用Agarose Gel DNA Purification Kit Ver.2.0(TaKaRa公司，Code No.：DV807A)回收纯化0.5Kb大小的PCR产物。

2、重组表达载体的构建

①用限制性内切酶SmaI和SpeI(Promega，R6121，R6591)酶切步骤1回收纯化的PCR产物，回收酶切产物；

②用限制性内切酶SmaI和SpeI酶切植物真核表达载体pBI121(购自Clontech公司)，回收载体骨架；

③将步骤①的酶切产物和步骤②的载体骨架连接；

④将步骤③的连接产物电击转化TOP10菌株(Tiangen，CB104-03)，37℃过夜培养，挑取阳性克隆提取质粒进行测序。

测序结果表明，该质粒为将序列表中的序列2自5’端第88-651位核苷酸所示的DNA片段插入pBI121载体的SmaI和SpeI酶切位点间得到的载体，将该质粒命名为pBI121-W69。

二、转基因植物的获得

1、用上述重组质粒pBI121-W69转化农杆菌C58(购自北京拜尔迪生物技术公司)，得到重组农杆菌。

提取重组农杆菌的质粒送去测序，结果该质粒为pBI121-W69，证明该重组菌为阳性重组农杆菌，将其命名为C58/pBI121-W69。

2、将重组农杆菌C58/pBI121-W69接种于YEP液体培养基中，28℃、3000rpm培养约30小时；

3、将步骤2的菌液转至YEP液体培养基(含50μg/ml利福平)中，28℃、300rpm培养约14小时(菌液OD600达到1.5-3.0)；

4、收集菌体，4℃、4000g离心10min，用10％蔗糖(含0.02％silwet)稀释至OD600约为1.0；

5、将拟南芥哥伦比亚生态型Col-0(美国拟南芥信息资源网，以下简称为野生型拟南芥，购自SALK公司)整株与花盆一起倒扣在盛有步骤4的菌液的容器中，使花浸泡50s左右，浸泡完毕后，取出花盆，侧放于托盘中，盖上黑色塑料布，24hr后揭开塑料布，直立放置花盆，进行正常的光照培养，混收T₀代转W69拟南芥种子。将T₀代转W69拟南芥种子播种到含有50mg/ml卡那霉素的MS培养基上后得到4株T₁代转W69拟南芥幼苗。

采用同样的方法将空载体pBI121转入野生型拟南芥，得到T₁代转空载体拟南芥。

分别将T₁代转W69拟南芥和T₁代转空载体拟南芥播种、自交，直到得到T₃代转W69拟南芥和T₃代转空载体拟南芥。

提取T₃代转W69拟南芥植株的DNA，以载体pBI121序列为基础设计引物(121F：5’-GACGCACAATCCCACTAT CC和121R：5’-AATCATCGCAAGACCGGC)进行PCR检测，得至条带为550bp的阳性T₃代转W69拟南芥植株。

提取T₃代转空载体拟南芥的基因组DNA，用W69-121F和W69-121R为引物进行PCR扩增，没有得到550bp的目的片段，说明T₃代转空载体拟南芥构建成功。

三、转基因植物的耐逆性鉴定

分别将T₃代转W69拟南芥(W69)种子、T₃代转空载体拟南芥种子和野生型拟南芥种子(WT)种在普通MS培养基上，生长7天后，进行如下耐逆性鉴定，每个株系10个，实验重复三次，结果取平均值：

1、盐处理(耐盐实验)：将处于相同生长期的生长7天的幼苗转移到含有NaCl的MS培养基(NaCl浓度分别为0mM、50mM、100mM、150mM、200mM)上继续培养7天。

观察生长情况，测量在含有NaCl的MS培养基生长7天的拟南芥幼苗根长，结果如图2所示，2a为150mM NaCl处理下WT与转基因拟南芥的生长情况；2b为不同NaCl浓度处理下WT与转基因拟南芥根长；从图2a看出，在0mMNaCl的MS培养基(正常生长)下，T₃代转W69拟南芥(W69)和野生型拟南芥的根长差不多，而在150mMNaCl的MS培养基下，T₃代转W69拟南芥(W69)的根长较野生型株系长2倍左右。

具体长度见图2b，

T₃代转W69拟南芥(W69)在含有0mM、50mM、100mM、150mM、200mM NaCl的MS培养基中的根长分别为5.30、5.03、4.27、2.26、1.47cm；

野生型拟南芥在含有0mM、50mM、100mM、150mM、200mM NaCl的MS培养基中的根长分别为5.03、4.21、2.73、1.16、0.77cm；

T₃代转空载体拟南芥和野生型拟南芥的结果无显著差异。

说明T₃代转W69拟南芥(W69)耐盐。

2、ABA处理(耐干旱实验)：将上述各株系的种子播种到0.8μM ABA的MS培养基上培养14天，以不添加ABA为对照，观察生长情况并计算萌发率。

结果如图3所示，a为0.8μM ABA处理下WT与转基因拟南芥的生长情况；b为0.8μM ABA处理下WT与转基因拟南芥萌发率统计，从3a中看出，左图为不添加ABA下T₃代转W69拟南芥(W69)和野生型拟南芥的生长无显著差异，而右图为0.8μM ABA处理后，野生型植物的生长明显受到抑制，并开始黄化。

具体数据见图3b所示，ABA浓度在0.8μM时，野生型种子萌发率仅为10％，而T₃代转W69拟南芥(W69)萌发率为43％，说明T₃代转W69拟南芥(W69)耐干旱。

T₃代转空载体拟南芥和野生型拟南芥的结果无显著差异。

3、H₂O₂处理(抗氧化能力实验)：将处于相同生长期的生长7天的幼苗转移到含有1mM H₂O₂的MS培养基上继续培养7天，观察生长情况。

结果如图4所示，可以看出，经浓度为1mM H₂O₂的处理，T₃代转W69拟南芥(W69)比野生型(WT)植株生长旺盛，并且形成了更加发达的根系统，生长不受抑制，而野生型拟南芥叶片开始变黄，根系也不发达，说明转基因植株的抗氧化能力高于野生型植株。

T₃代转空载体拟南芥和野生型拟南芥的结果无显著差异。

实施例3、W69的酶活性测定

1、W69蛋白的制备

根据W69序列，设计特异引物W69-PETF和W69-PETR，引物末端分别引入BamHI和XhoI酶切识别位点。

W69-PETF 5’-TACGGATCCATGGGGGCGTCCGAATCT-3’

W69-PETR 5’-TAGCTCGAGCTTCTGCGAGTCGGAAGATTCC-3’

以序列表中序列2为模板，用W69-PETF和W69-PETR为引物进行PCR扩增，得到0.5kb的PCR产物W69。

用BamHI和XhoI酶切PCR产物，与经过同样酶切的原核表达载体pET-28a(+)(Novagen，69864-3)连接，得到连接产物，转入E.coli BL21(DE3)菌系，得到转化子。

提取转化子的质粒，送去测序，该质粒为将序列表中序列2自5’端第88-648位核苷酸所示的DNA片段插入PET-28a载体的BamHI和XhoI酶切位点间得到的载体，将该质粒命名为PET-28a-W69，将含有该质粒的重组菌命名为BL21(DE3)/PET-28a-W69。

将上述BL21(DE3)/PET-28a-W69在40ml LB(含50mg/ml kanamycin)培养基中37℃培养至D₆₀₀＝0.5，加入108mM IPTG，分别转移到22℃诱导4小时，3000g离心10分钟收集菌体，于100mM Tris/HCl(pH 8)溶液中重悬，超声破碎细胞壁，4℃，15000g离心15分钟收集上清液(W69)。

采用同样的方法将空载体PET-28a转入BL21(DE3)，得到BL21(DE3)/PET-28a，诱导后4小时，得到空载体上清液(PET-28a)。

将上清液(W69)和空载体上清液(PET-28a)分别进行纯化，方法参考His标签蛋白纯化试剂盒(Cowin，CW0009)，分别得到纯化W69(带组氨酸标签的可溶性蛋白W69)和对照蛋白(PET-28a)(表达的组氨酸标签蛋白)。

将上述纯化前上清液和纯化后蛋白进行SDS-PAGE电泳检测。

结果如图5所示，上清液(W69)和纯化W69均获得了21KD目的蛋白。

2、W69蛋白的酶活鉴定

在还原剂谷胱甘肽存在下，以H₂O₂为底物，在412nm光波长下测定酶活性，方法参考Flohe和Gunzler(1984)。各取0.1ml上清注于酶管和非酶管中，并将非酶管加热使酶失活，分别加入1mM还原型谷胱甘肽(Sigma，G4251)0.2ml和经37℃预热的1.5mMH₂O₂ 1.5ml，立即于37℃下反应3min，再在2支试管中加入1.67％的偏磷酸沉淀液1.6ml(1.67％ HPO₃，0.05％ EDTA-2Na，28％ NaCl)。3000rpm离心10min，保留上清液，另取2支试管分别加入上清液(W69，蛋白浓度为6.61mg/ml)或空载体上清液(PET-28a，蛋白浓度为6.34mg/ml)0.5ml，再取1支试管加双蒸水0.4ml和1.67％的偏磷酸沉淀液1.6ml作为空白管，并在这3支试管中各加入0.32M的Na₂HPO₄1ml和5，5’-二硫双(2-硝基苯甲酸)(DTNB，Sigma，D8130)0.5ml，反应5min，在412nm处比色读取OD值。谷胱甘肽过氧化物酶活力可用单位时间内催化GSH氧化的减少量表示，酶活性单位(U)，1U＝μmol min^-1(mg protein)^-1。

谷胱甘肽过氧化物酶活力(U)＝[(非酶管OD₄₁₂-酶管OD₄₁₂)×A×6.25]/[5(min)×1ml样液中蛋白质(mg)]。

结果如图6所示，可以看出，

空载体上清液(PET-28a)的酶活为0，上清液(W69)(PET-W69，4h)的酶活为0.04μmol min^-1(mg protein)^-1；说明W69为谷胱甘肽过氧化物酶(GPX)。

说明W69蛋白在植物体内具有GPX活性，参与NaCl、H₂O₂等引起的过氧化胁迫。

Claims

1.蛋白W69在提高植物耐逆性和/或抗氧化能力中的应用；所述耐逆为耐盐或耐干旱；

所述蛋白W69的氨基酸序列为序列表中序列2。

2.蛋白W69编码基因在提高植物耐逆性和/或抗氧化能力中的应用；所述耐逆为耐盐或耐干旱；

所述蛋白W69编码基因的核苷酸序列为序列表中序列1。

3.含有蛋白W69编码基因的重组表达载体在提高植物耐逆性和/或抗氧化能力中的应用；所述耐逆为耐盐或耐干旱；

所述重组表达载体为将所述蛋白W69编码基因插入pBI121中得到的重组载体；

所述蛋白W69的氨基酸序列为序列表中序列2。

4.一种培育转基因植物的方法，是将蛋白W69编码基因导入目的植物中，得到转基因植物；所述转基因植物具有如下1)或2)的特征：

1)所述转基因植物耐逆性高于所述目的植物；

2)所述转基因植物抗氧化能力高于所述目的植物；

所述耐逆为耐盐或耐干旱；

所述蛋白W69的氨基酸序列为序列表中序列2。

5.如权利要求4所述的方法，其特征在于：

所述目的植物为双子叶植物或单子叶植物，所述双子叶植物为拟南芥。