CN103262827A - 室内饲养假茶眼小绿叶蝉的方法 - Google Patents

Abstract

本发明通过生长素、水培等方法为假眼小绿叶蝉提供了理想的食源和栖息产所。实现了假眼小绿叶蝉室内周年饲养。同时，在此基础上发明了未交配成虫和相同日龄科学试虫的饲养方法。摆脱了假眼小绿叶蝉种群数量的季节性波动，为开展假眼小绿叶蝉相关研究提供了稳定的虫源保障。

Description

室内饲养假茶眼小绿叶蝉的方法

技术领域

本发明涉及一系列假眼小绿叶蝉(Empoasca vitis G?the)室内常年续代饲养的方法，属于试验用途昆虫饲养领域。 

背景技术

假眼小绿叶蝉(Empoasca vitis G?the)属半翅目,头喙亚目叶蝉总科,叶蝉属昆虫。自上世纪六十年代开始，已逐渐成为我国茶园主要害虫之一，为害方式主要以刺吸式口器刺吸茶树新梢和嫩叶的汁液。这一为害方式严重影响茶叶的产量与品质，据统计，一般可造成减产15%左右，严重的甚至达50%。长期以来，由于茶农缺乏植物保护知识，盲目使用大量化学农药防治茶树害虫，导致茶叶农药残留超标，进而导致假眼小绿叶蝉的抗药性大大增强，对茶叶的为害程度大大加深。我国作为茶叶产量大国之一，针对假眼小绿叶蝉的防治就不可避免的成为当前的研究热点之一。

要深入进行假眼小绿叶蝉的相关研究，解决虫源问题是关键之处。从相关文献报道上看，假眼小绿叶蝉个体小，体长在2至3mm，身体十分脆弱，如果单靠人力从茶园捕捉，不仅费时费力，而且捕捉到的虫子难免会有损伤，影响试验质量。因此，对假眼小绿叶蝉相关研究的虫源多来自于用扫网法从室外茶园中直接捕得。室内饲养假眼小绿叶蝉的优势体现在以下两方面：一方面，茶园中的假眼小绿叶蝉的爆发成季节性，再加上茶农对茶树喷施农药、修剪等操作，导致从茶园获得的假眼小绿叶蝉数量、性比、生理状态都不稳定，难免会影响试验的可重复性和试验数据的可靠性；另一方面，因为假眼小绿叶蝉个体小，在茶园的调查仅能看出种群动态变化，难以反映单个虫体的生活习性和行为表现。综合这两方面的因素，假眼小绿叶蝉的饲养采用室内饲养来进行近距离观察显得更具科学性。

室内饲养假眼小绿叶蝉可以解决多个领域研究的难题。以缨小蜂为例，缨小蜂是一种卵寄生蜂，它将卵产于假眼小绿叶蝉的卵中，前者在后者内孵化、生长直至羽化，导致后者最后只剩一空壳。然而作为假眼小绿叶蝉的一种重要天敌，对缨小蜂的研究却只停留在调查茶园缨小蜂分类、寄生率等水平上，关于它生活规和行为习惯了解甚少。如果能够以假眼小绿叶蝉卵作为缨小蜂的寄主进行室内饲养缨小蜂，相信对缨小蜂的研究将会取得很大进展。

室内饲养昆虫，其优点在于：1.可以获得稳定的虫源，包括数量、体型、虫龄和生理水平等多个方面；2.可以根据试验要求人为控制饲养条件，例如光周期、温度、湿度以及食物等条件；3.用途广：室内饲养的昆虫可以用于药剂试验、行为学研究、天敌研究、室内种群生命表构建、分子生物学研究、体内代谢产物研究等大多数领域。

从文献报导上看，尚无完整的假眼小绿叶蝉饲养方法。基于假眼小绿叶蝉对茶园茶树的严重危害性以及国内这类叶蝉的研究热度，故发明一套室内试验用途饲养假眼小绿叶蝉的方法是具有一定的价值和意义的。 

发明内容

本发明针对多种试验用途提供了一系列假眼小绿叶蝉室内饲养方法，这些方法操作简便、成本低廉，并且可以满足大部分关于假眼小绿叶蝉的研究需求。

本发明内容的包括：

一种室内饲养茶假眼小绿叶蝉的方法，其特征在于该方法包括：1）通过植物生长调节剂刺激以及修剪盆栽茶树使其全年不断抽茶芽作为假眼小绿叶蝉的食物来源，饲养条件为：温度24-27℃、相对湿度60%-80%、自然光照周期；2）通过捕捉若虫或释放待产卵雌成虫来调节种群数量；所述待产卵的雌成虫的培育方式为：抓取末龄假眼小绿叶蝉若虫，饲养获得未交配假眼小绿叶蝉成虫，拿出已性成熟的雌雄成虫两两配对进行交配，交配完成后得到待产卵的雌成虫。

所述植物生长调节剂刺激盆栽茶树的具体操作为通过喷洒植物生长调节剂至茶枝；所述的盆栽茶树为两年以上树龄；所述植物生长调节剂的配制比例为：每升5%乙醇水溶液中含有800mg赤霉素和100mg吲哚乙酸。

所述待产卵的雌成虫的培育方式为：抓取末龄假眼小绿叶蝉若虫，单头饲养获得未交配假眼小绿叶蝉成虫，拿出已性成熟的雌雄成虫两两配对进行交配，交配完成后得到待产卵的雌成虫；所述单头饲养的方法是以茶芽作为若虫的食物，将若虫养殖在无底的玻璃管中，待若虫羽化后每一至两天更换玻璃管和茶芽；所述的无底玻璃管一头用纱布包着，另一头用湿润的棉花塞紧，玻璃管内茶芽的柄端接触棉花以吸收水分保持活力。纱布为100目。

一种获得未交配假眼小绿叶蝉成虫的方法，其特征在于以如上所述的方法所饲养的假眼小绿叶蝉的为虫源，抓取末龄假眼小绿叶蝉若虫，用无底玻璃管单头饲养获得未交配假眼小绿叶蝉成虫；所述单头饲养的方法是以茶芽作为若虫的食物，将若虫养殖在无底的玻璃管中，待若虫羽化后每一至两天更换玻璃管和茶芽；所述的无底玻璃管一头用100目纱布包着，另一头用湿润的棉花塞紧，玻璃管内茶芽的柄端接触棉花以吸收水分保持活力。纱布为100目。

一种获得同日龄假眼小绿叶蝉若虫的方法，其特征在于将上所述的方法所获得待产卵的雌成虫接入水培茶枝，让其在水培茶枝上产卵，每日更换新茶枝，同一日的茶枝集中水培以保证茶枝内的假眼小绿叶蝉卵可以正常孵化，即得同日龄假眼小绿叶蝉若虫；其中所述孵化的环境条件为温度24—27℃、相对湿度60%—80%、自然光照周期。

所述水培茶枝的栽培方法为：水培茶枝采自如权利要求1所述的盆栽茶树，当盆栽茶树单个茶枝上茶芽数达到10个4cm以上茶芽，将茶枝剪下，茶枝长度扣除茶芽长度为10cm；茶枝末端剪成契形，剪完后伤口用0.5%高锰酸钾浸泡消毒；之后将这些茶枝插入浸泡到用装有自配营养液中，茶枝末端即茎干端，无叶的那一端露出5cm；往营养液中鼓气保证营养液中的氧气含量；营养液的配制方法为：硫酸铵0.1克、四水合硝酸钙0.1克、磷酸二氢钾0.005克、硫酸钾0.04克、七水合硫酸镁0.025克、硼酸0.001克、硫酸锰0.01克、七水合硫酸锌0.001克、五水合硫酸铜0.00025克、二水合钼酸钠0.0005克、十六合硫酸铝0.025克、乙二胺四乙酸铁钠0.005克，用水溶解后以盐酸水溶液和氢氧化钠水溶液调pH值为6.0，定容至1L配制成营养液。

根据以上，本发明的具体部分操作如下：

1.      室内假眼小绿叶蝉种群的周年饲养方法

在温室内26-30℃温度下，盆栽大量茶树（树龄两年以上），并且分批次的，以自调植物生长调节剂（800mg赤霉素和100mg吲哚乙酸溶于1升5%乙醇水溶液）半个月喷一次，喷撒盆栽茶树的茶枝以及适时修剪这两种方法相结合使茶树不断抽茶芽，保证全年茶梢的供给。当单盆茶的茶芽数达到50个，多数茶芽长到4cm左右时，放入养虫室内并接入饲养假眼小绿叶蝉。饲养一段时间后将受取食危害较大的茶树取出，代替以重新长满健康茶芽的茶树。受害茶树进行除虫、修剪并喷撒自配的植物生长调节剂，在26-30℃温度下隔离虫源放置，待其恢复健康并长出茶芽后再次用于假眼小绿叶蝉饲养。饲养条件为：温度24—27℃、相对湿度60%-80%，自然光照周期。

2.    获得科学试虫A，未交配成虫

从室内盆栽的茶树上挑取末龄假眼小绿叶蝉若虫，单头饲养于无底玻璃管（直径1 cm，长5cm）内待其羽化，玻璃管内放入新鲜茶芽作为若虫的食物。玻璃管一头用纱布包住，另一头以湿润棉花塞紧，玻璃管内茶芽柄端接触棉花以吸收水分保持活力。羽化后每一至两天更换玻璃管和茶芽。饲养条件为：温度24-27℃、相对湿度60%-80%、自然光照周期。

3. 获得科学试虫B,同日龄若虫

1）水培茶梢的获得：水培的茶枝采自室内盆栽茶树，同样进行生长素和修剪使其常年抽茶芽，当单个茶枝上茶芽数达到10个茶芽长到4cm左右时，将茶枝剪下，茶枝长度控制在10cm范围（扣除茶芽长度后）。茶枝末端剪成契形，伤口用0.5%高锰酸钾浸泡消毒。之后将这些茶枝依次插入一塑料泡沫（固定茶枝），茶枝末端露出约5cm,浸泡到用装有自配营养液中的方形深色塑料盆（长40cm，宽20cm，高10cm）中，营养液中通入一根小橡胶管，橡胶管另一端接气泵，保证营养液中的氧气含量，调节气泵的输氧量至每10秒钟3到5个气泡。营养液的配置方法为：以一升纯水溶解硫酸铵0.1克、四水合硝酸钙0.1克、磷酸二氢钾0.005克、硫酸钾0.04克、七水合硫酸镁0.025克、硼酸0.001克、硫酸锰0.01克、七水合硫酸锌0.001克、五水合硫酸铜0.00025克、二水合钼酸钠0.0005克、十六合硫酸铝0.025克、乙二胺四乙酸铁钠0.005克，最后调pH值为6.0配制成营养液。

2）从以上未交配的假眼小绿叶蝉成虫中拿出已性成熟的雌雄成虫两两配对进行交配，交配对数根据需虫量进行增减。交配完成后将雌虫接入水培茶枝，让其在水培茶枝上产卵。每日更换新茶枝，同一日的茶枝集中水培以保证茶枝内的假眼小绿叶蝉卵可以正常孵化，孵化出来的一龄若虫可根据需要用于试验或继续在水培茶枝上饲养到需要的虫态。此法养出的假眼小绿叶蝉虫龄基本相同。饲养条件为：温度24-27℃、相对湿度60%-80%、自然光照周期。

4. 室内假眼小绿叶蝉种群维持方法

捕捉盆栽茶树上假眼小绿叶蝉末龄若虫单头饲养于玻璃管（同方法2），当虫量趋于减少时，将玻璃管内饲养并已经性成熟的假眼小绿叶蝉雌雄成虫两两配对进行交配，交配完毕后的将雌虫释放到盆栽茶树上产卵。释放的雌虫数根据室内盆栽茶树上的实际虫量决定。 

具体实施方式

为了使本发明所述的内容更加便于理解，下面结合具体实施方式对本发明所述的技术方案做进一步的说明，但是本发明不仅限于此。

实施例1

2012年3月开始分批次的对盆栽茶树进行修剪后喷施植物生长调节剂（800mg赤霉素和100mg吲哚乙酸溶于5%乙醇水溶液）。10—15天后开始抽茶芽。约25天后，茶芽长到4cm左右，一盆茶树约有30个茶芽，此时将十盆茶树移入养虫室。4月4号，从茶园采集假眼小绿叶蝉末龄若虫接在这十盆茶树上。养虫室内环境条件为温度24-27℃、相对湿度60%—80%、自然光照周期，放入盆栽茶树30盆。接入末龄若虫后一到三天内，若虫陆续羽化。4月20从这十盆茶树上可以观察到一龄若虫，之后虫量开始增多。到6月初，养虫室内虫量约在500头。每日将茶树上的末龄若虫挑出单头饲养于无底玻璃管，无底玻璃管一头用100目纱网包着，另一头用湿润的棉花塞紧，玻璃管内茶芽的柄端接触棉花以吸收水分保持活力，当管内茶芽受害严重时，进行更换。末龄若虫一般1至2天内羽化，记录每头的羽化日期并继续以无底玻璃管饲养到达性成熟后备用。为维持茶树上假眼小绿叶蝉的数量和各虫态的均匀，每三天放入五只玻璃管饲养并刚完成交配的雌成虫，让其在茶树上产卵。根据茶树的受危害程度，适时的进行更换，为保证虫量稳定每次只更换一盆，更换间隔至少在两天以上。更换的茶树放于以独立单间，抓去茶树上的假眼小绿叶蝉放回养虫室茶树上继续饲养，剪去此茶树的所有嫩枝条（去除产于嫩枝条内的假眼小绿叶蝉卵）。之后放于另一单间，施肥、喷施自配生长调节剂，在26-30℃温度下隔离虫源放置，使其恢复健康并重新抽出茶芽，一般受害茶树重新长出茶芽需要1到2个月。剪下的嫩枝条插于水中保持活力，水培十天待嫩枝条内的卵孵化，孵出的一龄若虫放于养虫室盆栽茶树上饲养。替换放入养虫室的健康茶树不必人为放入假眼小绿叶蝉，只需与其他茶树接触，假眼小绿叶蝉（若虫与成虫）自己会爬（或飞）到新茶树上取食或产卵。至2013年3月，应用此方法养虫室内的假眼小绿叶蝉虫源未断。根据本方法饲养的假眼小绿叶蝉，从一龄若虫到初羽化成虫所需时间为8-10天。羽化成虫平均体长为雄成虫2.29mm，雌成虫2.59mm，与茶园捕捉到的成虫无明显区别。

实施例2

从养虫室内茶树上抓取末龄若虫50头，饲养于无底玻璃管，无底玻璃管一头用100目纱网包着，另一头用湿润的棉花塞紧，玻璃管内茶芽的柄端接触棉花以吸收水分保持活力，当管内茶芽受害严重时，进行更换。羽化后取雌雄两两配对进行交配试验。结果显示，室内饲养假眼小绿叶蝉成虫在羽化后4到5日后可以观察到交配行为，即认为此时达到性成熟，交配时间段集中在晚上17点到24点，交配时长在30分钟到180分钟不等。交配结束后将雌虫放于水培茶枝上，约6天后可以看到茶枝上出现一龄若虫。将交配后的成虫继续用玻璃管单头饲养，在适时更换新鲜茶芽的情况下，多数可存活两个月以上。

实施例3

当单个茶枝上茶芽数达到10个茶芽长到4cm左右时，将茶枝剪下，茶枝长度控制在10cm范围（扣除茶芽长度后）。茶枝末端剪成契形，伤口用0.5%高锰酸钾浸泡消毒。之后将这些茶枝依次插入一塑料泡沫（固定茶枝），每盆十个茶枝，茶枝末端露出约5cm,浸泡到用装有自配营养液中的方形深色塑料盆（长40cm，宽20cm，高10cm）中，营养液中通入一根小橡胶管，接气泵保证营养液中的氧气含量。环境条件为：温度24—27℃、相对湿度60%—80%、自然光照周期。在水培茶枝上接入正要产卵的假眼小绿叶蝉雌成虫10头。每日更换新茶枝，同一日的茶枝集中一起插于水中保持活力。水培4天后剪取茶枝上的一芽四叶嫩梢数个，在体视镜下进行解剖，可以发现假眼小绿叶蝉的卵。水培8到11天后，同批次卵大部分在同一天内孵化，孵化出来的一龄若虫可根据需要用于试验或继续在水培茶枝上饲养到需要的虫态；部分若虫继续培养，可以完成羽化变为成虫；挑取初羽化成虫单独饲养5天后，雌雄配对装于玻璃管中，可以看到交配行为；在茶枝上成虫未挑除干净的情况下，茶枝水培2到3个月后仍可观察到茶枝上有一龄若虫出现，说明在水培茶枝上生活的假眼小绿叶蝉可以繁殖后代。水培茶枝可以存活3到6个月，水培2个月后，部分茶枝有根长出。由于对营养液持续供氧和深色塑料盆的遮光功能，瓶中营养液可长时间保持清澈，无绿藻、菌类等物质的产生。

Claims (6)

1. 一种室内饲养茶假眼小绿叶蝉的方法，其特征在于该方法包括：1）通过植物生长调节剂刺激以及修剪盆栽茶树使其全年不断抽茶芽作为假眼小绿叶蝉的食物来源，饲养条件为：温度24-27℃、相对湿度60%-80%、自然光照周期；2）通过捕捉若虫或释放待产卵雌成虫来调节种群数量；所述待产卵的雌成虫的培育方式为：抓取末龄假眼小绿叶蝉若虫，饲养获得未交配假眼小绿叶蝉成虫，拿出已性成熟的雌雄成虫两两配对进行交配，交配完成后得到待产卵的雌成虫。

2.如权利要求1所述的室内饲养茶假眼小绿叶蝉的方法，其特征在于所述植物生长调节剂刺激盆栽茶树的具体操作为通过喷洒植物生长调节剂至茶枝；所述的盆栽茶树为两年以上树龄；所述植物生长调节剂的配制比例为：每升5%乙醇水溶液中含有800mg赤霉素和100mg吲哚乙酸。

3.如权利要求1所述的室内饲养茶假眼小绿叶蝉的方法，其特征在于所述待产卵的雌成虫的培育方式为：抓取末龄假眼小绿叶蝉若虫，单头饲养获得未交配假眼小绿叶蝉成虫，拿出已性成熟的雌雄成虫两两配对进行交配，交配完成后得到待产卵的雌成虫；所述单头饲养的方法是以茶芽作为若虫的食物，将若虫养殖在无底的玻璃管中，待若虫羽化后每一至两天更换玻璃管和茶芽；所述的无底玻璃管一头用纱布包着，另一头用湿润的棉花塞紧，玻璃管内茶芽的柄端接触棉花以吸收水分保持活力。

4.一种获得未交配假眼小绿叶蝉成虫的方法，其特征在于以如权利要求1所述的方法所饲养的假眼小绿叶蝉的为虫源，抓取末龄假眼小绿叶蝉若虫，用无底玻璃管单头饲养获得未交配假眼小绿叶蝉成虫；所述单头饲养的方法是以茶芽作为若虫的食物，将若虫养殖在无底的玻璃管中，待若虫羽化后每一至两天更换玻璃管和茶芽；所述的无底玻璃管一头用纱布包着，另一头用湿润的棉花塞紧，玻璃管内茶芽的柄端接触棉花以吸收水分保持活力。

5.一种获得同日龄假眼小绿叶蝉若虫的方法，其特征在于将如权利要求1所述的方法所获得待产卵的雌成虫接入水培茶枝，让其在水培茶枝上产卵，每日更换新茶枝，同一日的茶枝集中水培以保证茶枝内的假眼小绿叶蝉卵可以正常孵化，即得同日龄假眼小绿叶蝉若虫；其中所述孵化的环境条件为温度24—27℃、相对湿度60%—80%、自然光照周期。

6.如权利要求5所述一种获得同日龄假眼小绿叶蝉若虫的方法，其特征在于所述水培茶枝的栽培方法为：水培茶枝采自如权利要求1所述的盆栽茶树，当盆栽茶树单个茶枝上茶芽数达到10个4cm以上茶芽，将茶枝剪下，茶枝长度扣除茶芽长度为10cm；茶枝末端剪成契形，剪完后伤口用0.5%高锰酸钾浸泡消毒；之后将这些茶枝插入浸泡到用装有自配营养液中，茶枝末端露出5cm；往营养液中鼓气保证营养液中的氧气含量；营养液的配制方法为：硫酸铵0.1克、四水合硝酸钙0.1克、磷酸二氢钾0.005克、硫酸钾0.04克、七水合硫酸镁0.025克、硼酸0.001克、硫酸锰0.01克、七水合硫酸锌0.001克、五水合硫酸铜0.00025克、二水合钼酸钠0.0005克、十六合硫酸铝0.025克、乙二胺四乙酸铁钠0.005克，用水溶解后以盐酸水溶液和氢氧化钠水溶液调pH值为6.0，定容至1L配制成营养液。