CN103211129B - 一种海洋硅藻作为缢蛏育苗饵料的应用 - Google Patents

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Abstract

本发明提供一种海洋硅藻作为缢蛏饵料的应用，即选择威氏海链藻（Thalassiosira weissflogii）分别采用特定的培养液配方进行三级扩大培养，并在缢蛏(Sinonovacula constricta Lamarck)稚贝生长到平均体长大于0.45mm后进行投喂。根据本发明提供的培养液配方，该海洋硅藻繁殖速度极快，而且根据本发明提供的投喂方式，投喂该微藻后可以明显提高缢蛏稚贝的生长速度。

Description

一种海洋硅藻作为缢蛏育苗饵料的应用
技术领域
本发明属于水产养殖饵料培养和投喂技术领域，具体涉及一种海洋硅藻作为缢蛏饵料的应用，即将威氏海链藻（Thalassiosira weissflogii）作为饵料，在缢蛏(Sinonovacula constricta Lamarck)生长的特定阶段进行投喂，以提高缢蛏苗种生长速度。
背景技术
缢蛏(Sinonovacula constricta Lamarck)，隶属于软体动物门(Mollusca)、瓣鳃纲(Lamellibranchia)、真瓣鳃目(Eulamellibranchia)、竹蛏科(Solenidae)，缢蛏属(Sinonovacula)，是我国传统的四大养殖贝类之一，在我国海水养殖业中占有重要的地位。但由于沿海大量的围垦填海及工业污染，缢蛏天然苗种资源遭受到严重破坏，缢蛏生产越来越多地依赖于人工培育的苗种。而人工育苗中，最为重要的是饵料微藻品种的选择和培养，只有选择营养效果优良且容易进行大规模培养的品种作为缢蛏饵料，才可能在实际生产中获得最佳的缢蛏苗种产量和质量。
缢蛏稚贝的育苗季节在每年的秋季，在其适宜盐度（10-15）、适宜温度（20~25℃）条件下生长非常迅速，一般5天重量可以增加4-10倍，迅速生长意味着需要更多的饵料供给，目前贝类苗种生产中常规选择的饵料效果比较好的微藻有角毛藻、金藻、扁藻等微藻品种，但在现有滩涂贝类苗种场的技术条件下，在缢蛏育苗季节温度和适宜盐度条件下，这些常规微藻繁殖速度均不够理想，无法满足生产的需要，这就需要选择一种在该生产季节，在一定培养条件下生物量繁殖速度极快的饵料微藻品种。
发明内容
本发明的目的是提供一种海洋硅藻作为缢蛏饵料的应用，即威氏海链藻在缢蛏育苗生产中的应用，从而弥补现有技术的不足。
本发明一方面提供威氏海链藻作为缢蛏稚贝的饵料的应用；
本发明用威氏海链藻投喂缢蛏稚贝，是在缢蛏稚贝生长到长度大于0.45mm时才进行投喂的；
本发明的威氏海链藻，是进行三级培养制备；其中在一级培养阶段采用培养液配方如下：
每升海水中加有90 mg KNO3、40 mg KH2PO4、15 mg Na2SiO3、0.25 mg MnSO4•H2O、2.50 mg FeSO4•7H2O、20 mg EDTA-Na2、2 mg α-萘乙酸、6 μg VB1和0.05 μg VB12；
在二级培养阶段，采用培养液配方为每升海水中加有90 mg KNO3、40 mg KH2PO4、15 mg Na2SiO3、2.50 mg FeSO4•7H2O、10mg EDTA-Na2、1 mg α-萘乙酸、6 μg VB1和0.05 μg VB12；
在三级培养阶段，采用培养液配方为每升海水中加有20 mg 尿素、20 mg KH2PO4、10 mg Na2SiO3及0.05 mL的鱼饲料浸泡液；
其中鱼饲料由如下质量百分比物质组成：52％鱼粉、17％虾粉、9％玉米粉、8％面粉、8％豆粕、6％啤酒酵母菌粉。
所述的鱼饲料浸泡液，其一种制备方法，是将5kg颗粒状鱼饲料加入到50L海水中，搅拌均匀后遮光密封，20-25℃下浸泡24h后，通过200目尼龙筛绢过滤后制备的。
本发明通过在缢蛏稚贝特定的生长阶段投喂威氏海链藻 ，可使缢蛏稚贝的生长速度变快，跟其他微藻饵料效果比较，其生长速度要远远超过投喂其他常规的饵料微藻。而且，本发明的培养液条件下可以快速繁殖威氏海链藻，特别在三级水泥池中投入鱼饲料浸泡液后，自然光照培养2-3d后即可达到投喂所需的密度，而投喂后保留1/4的藻液加满培养液，经过一天培养又可达到投喂所需的密度，能够满足大规模生产的需求。
具体实施方式
对于本发明培养基所用的各种组分，均为微藻培养中常用的药品，本发明在于使用药品之间的互配作用。而且，威氏海链藻培养中，除了培养基的选择外，其它的培养方法均可采用已公开的威氏海链藻的培养方法。对于缢蛏稚贝的培养，也选用公开的方法。
以下结合实施案例对本发明进行详细的描述。
一、威氏海链藻的扩大培养
将威氏海链藻藻种接种到2500mL的玻璃锥形瓶中， 锥形瓶中装有进行一级培养所用的培养液，培养液配方为每升海水中加有90 mg KNO3、40 mg KH2PO4、15 mg Na2SiO3、0.25 mg MnSO4•H2O、2.50 mg FeSO4•7H2O、20 mg EDTA-Na2、2 mg α-萘乙酸、6μg VB1和0.05 μg VB12， 海水盐度为13，但海水的盐度可以上下浮动，只要在威氏海链藻承受的范围内即可。培养的时候每天摇瓶3-6次，(20±2)℃下自然光培养1周密度达到200 cell•μL-1左右后接入50L的白色塑料桶中连续充空气进行二级培养 （接种密度4-5cell•μL-1）, 二级培养的培养液配方为每升海水中加有90 mgKNO3、40 mg KH2PO4、15 mgNa2SiO3、2.50 mg FeSO4•7H2O、10 mg EDTA-Na2、1 mg α-萘乙酸、6 μg VB1和0.05 μg VB12，在自然光、 温度(20~25℃)下再培养5d左右，密度达到80~120 cell•μL-1后接入15-30m2水泥池（接种密度2-3 cell•μL-1），沙滤海水的水位1m， ，连续充空气培养，三级培养液配方为每升海水中加有20 mg 尿素、20 mgKH2PO4、10 mg Na2SiO3及0.05 mL/L的鱼饲料浸泡液，在自然光、温度(20~25℃)下培养2-3d后密度达到15-25 cell•μL-1后进行投喂。其中鱼饲料由如下质量百分比物质组成：52％鱼粉、17％虾粉、9％玉米粉、8％面粉、8％豆粕、6％啤酒酵母菌粉；鱼粉和虾粉都可以选用饲料领域中常用的品种。制备鱼饲料浸泡液是将5kg颗粒状鱼饲料加入到50L海水中，搅拌均匀后遮光密封，20-25℃下浸泡24h后，通过200目尼龙筛绢过滤后制备的。
一、威氏海链藻的扩大培养
缢蛏浮游幼虫附着后在连续充空气的8.5×3.5×1.0 m (长×宽×深)的水泥池中培养。培养时，盐度13的自然海水经沙滤后入池，加入经200℃高温烘干并经200目（直径75m）尼龙筛绢过滤后的海泥,使池底的海泥达1~2 mm厚，每口池投放平均大小大于0.45mm的缢蛏稚贝1kg左右，每天分两次投喂经过三级培养的15-25 cell•μL-1威氏海链藻，第一天每次投喂量2m3左右，后随着稚贝的生长逐步增加投喂量，以每次投喂前水体中藻类基本被缢蛏稚贝滤食清为参考，温度(20~25℃)下培养5天，稚贝重量可达到6kg以上。
为了确定该海洋硅藻需要缢蛏稚贝生长到哪个阶段才可以投喂，在28cm×15cm×10cm (长×宽×高)的白色塑料盆中，加入盐度为13的沙滤海水和与水泥池中同样的海泥后，撒入0.3-1.0mm大小不等的缢蛏稚贝，投喂威氏海链藻，24h后显微镜下观察，发现小于0.45mm的缢蛏稚贝肠胃内没有颜色，说明不能摄食威氏海链藻，只有大于0.45mm的缢蛏稚贝肠胃才饱满，所以本发明是在缢蛏稚贝生长到长度大于0.45mm时才投喂威氏海链藻；在20~25℃自然温度、盐度10-15的自然海水中，一般缢蛏浮浪幼虫下附后4-5d可达到此规格。
为了比较该海洋硅藻跟其他饵料微藻对缢蛏稚贝的饵料效果，选择了现在该行业公认且大量使用的角毛藻、金藻、扁藻，与威氏海链藻一起对缢蛏稚贝进行单种投喂实验：在28 cm×15cm×10cm (长×宽×高)的白色塑料盆中加入盐度为13的沙滤海水和与水泥池中同样的海泥, 均匀洒入1g湿重、长度一定的稚贝。每一实验盆中足量投喂单一种微藻(金藻和角毛藻控制细胞密度100~120cell•μL-1，扁藻和威氏海链藻细胞密度控制在15~20cell•μL-1)，每4~5d换新鲜水和海泥并随机取样计算成活率， 取20粒苗测量大小(长×宽)，在18~25℃自然温度下培养12d为一个实验周期. 每一样品平行实验3次, 结果取均值（表1）。可见，在此规格下，用威氏海链藻投喂的缢蛏稚贝生长速度远远高于其他3种微藻投喂的缢蛏稚贝。
表1 分别投喂4种微藻前后（12d）缢蛏稚贝的大小(长度，mm)
Figure BDA0000318496271
为了比较本发明提供培养液跟其他文献中提供的常规硅藻培养液对威氏海链藻的培养效果差异，在水温21℃海水的20m3的水泥池中，分别加入本发明提供的培养液、NMB3培养液（Effect of unialgal diets on the composition of fatty acids and sterols in juvenile ark shell Tegillarca granosa Linnaeus, Journal of Agricultural and Food Chemistry,60: 3973–3980）和F/2培养液（Guillard，1975），每一培养液平行加入三只大小一样的培养池，接种密度均为3 cell•μL-1，每天下午16点用血球计数板对培养密度进行计数，结果如表2所示。
表2 分别添加不同种培养液后威氏海链藻的繁殖速度比较（cell•μL-1）
Figure BDA0000318496272
表2结果表明，加有本发明提供的培养液培养池中，威氏海链藻在第二天就可以达到18.4 cell•μL-1，最高密度可以达到26 cell•μL-1，无论繁殖速度还是最终密度均远高于其他两种配方。

Claims (2)

1.一种威氏海链藻投喂缢蛏稚贝的方法，其特征在于，所述的威氏海链藻是在缢蛏稚贝生长到长度大于0.45mm时才进行投喂；
所述的威氏海链藻是通过三级培养制备；其中在一级培养阶段采用培养液配方如下：
每升海水中加有90mg KNO3、40mg KH2PO4、15mg Na2SiO3、0.25mg MnSO4·H2O、2.50mg FeSO4·7H2O、20mg EDTA-Na2、2mgα-萘乙酸、6μgVB1和0.05μg VB12；
在二级培养阶段，采用培养液配方为每升海水中加有90mg KNO3、40mgKH2PO4、15mg Na2SiO3、2.50mg FeSO4·7H2O、10mg EDTA-Na2、1mgα-萘乙酸、6μg VB1和0.05μg VB12；
在三级培养阶段，采用培养液配方为每升海水中加有20mg尿素、20mgKH2PO4、10mg Na2SiO3及0.05mL的鱼饲料浸泡液；
所述的鱼饲料由如下质量百分比物质组成：52％鱼粉、17％虾粉、9％玉米粉、8％面粉、8％豆粕、6％啤酒酵母菌。
2.如权利要求1所述的方法，其特征在于所述的鱼饲料浸泡液，是将颗粒状鱼饲料加入到海水中，搅拌均匀后遮光密封，20-25℃下浸泡后，通过200目尼龙筛绢过滤后制备的。
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