CN103202898A - 中药组合物及其制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及一种天然药物组合物、其制备方法及其在制备癌症化疗中减毒增效药物中的用途,该天然药物组合物由山楂荜茇水煎浓缩提取物、山楂总黄酮、荜茇乙醇提取物与胡椒碱按2-7∶1-5∶3-4∶3-9的比例组成,该组合物对由癌症化疗相关性腹泻有极好的疗效并能同时对癌症化疗起增效作用。
Description
技术领域
本发明涉及一种天然药物组合物,更具体地涉及一种由山楂荜茇水煎浓缩提取物、山楂总黄酮、荜茇乙醇提取物与胡椒碱组成的天然药物组合物,该天然药物组合物的制备方法以及该天然药物组合物在用于制备减少癌症化疗相关性腹泻并对癌症治疗起增效作用的药物中的用途。
背景技术
恶性肿瘤是当前危害人类生存,健康的主要疾病之一,其治疗手段包括手术、化疗、放疗、中医药治疗,而化疗治疗肿瘤的效果尤为突出。化疗药单用或联合用均会引起患者腹泻等毒副反应,肿瘤化疗后腹泻又叫化疗相关性腹泻。近年来随着化疗药物如5-氟尿嘧啶、紫杉烷类、羟基喜树碱、伊立替康、希罗达等的面世及推广应用,化疗相关性腹泻的发生率逐年提高,而且若不进行积极治疗,易导致患者脱水、营养不良、血清电解质紊乱、酸碱平衡失调等,不仅对机体的康复带来极大的不利,也给周期性化疗带来一定的困难,因此对化疗相关性腹泻的有效治疗已成为肿瘤患者整体治疗的重要组成部分。
化疗相关性腹泻就其临床表现来看,当属中医学“泄泻”范畴,中医药对于泄泻的研究,令人瞩目,但是目前尚无对抗癌症化疗具有减轻腹泻及增效作用的中成药。因此,研发一种高效低毒、价格低廉,易于推广的可用于减轻癌症化疗相关性腹泻并起化疗增效作用的天然中药成为临床亟待解决的问题。
山楂能消食积,化滞瘀,主治饮食积滞,泄泻痢疾。荜茇为胡椒科植物Piper longumI.的未成熟的果实,用于呕吐、泄泻等症。近年来,山楂和荜茇抗癌作用得到证实,本发明人经过大量的各配方比例的研究和实验,最后获得了本发明的最佳药物比例组合物,并证明了其对癌症化疗相关性腹泻有极好的疗效并能同时起到抑制肿瘤的效果,由此完成了本发明。
发明内容
本发明提供的一种天然药物组合物,由山楂荜茇水煎浓缩提取物、山楂总黄酮、荜茇乙醇提取物与胡椒碱以重量计按2-7∶1-5∶3-4∶3-9的比例组成。
上述天然药物组合物,其中山楂荜茇水煎浓缩提取物、山楂总黄酮、荜茇乙醇提取物与胡椒碱的用量比例是7∶5∶4∶9。
其中,山楂荜茇水煎浓缩提取物、山楂总黄酮、荜茇乙醇提取物可通过本领域技术人员公知的常规方法进行提纯获得,采用常规方法获得的这些成分组成的本发明的天然药物均能获得相同的疗效。
优选地,上述天然药物组合物中山楂荜茇水煎浓缩提取物的制备方法是:
按照配伍比例为1∶1或1-6∶1其他比例取山楂、荜茇,10倍量蒸馏水,浸泡1h,于加石棉网的电炉上加热煎煮1h,绢布过滤,保存滤液,药渣再加6倍蒸馏水,同法浸泡、煎煮、过滤,将两次滤液混合,加热浓缩至小体积,超滤膜过滤,采用真空干燥箱70℃减压干燥36h得棕黄色粉末,即得。
上述天然药物组合物中山楂总黄酮的制备方法是:
取山楂果肉,以60%乙醇回流提取2次,每次1.5h,合并提取液,回收乙醇,得浸膏,浸膏分别加入适量蒸馏水,搅匀,加入CaCl21g,静置过夜,离心,收集上清液,用氨水调pH至7~8,加入大孔吸附树脂柱中,调节流速5mL/min,用蒸馏水洗去杂质,以乙醇为流动相解吸附,回收乙醇,即得。
上述天然药物组合物中荜茇乙醇提取物制备方法是:
取荜茇,干燥,粉碎,过筛,乙醇浸泡12h,过滤取澄清液,残渣继续浸泡12h,将两次滤液合并,3000rpm离心15分钟,分离上清液,水浴蒸干浓缩,再减压干燥成干浸膏,粉碎,过筛,即得。
上述天然药物组合物中胡椒碱制备方法是:
将荜茇颗粒粉碎,用乙醇浸泡12h,过滤,残渣乙醇浸泡12h,将两次滤液合并,减压浓缩至粘稠状,浓缩液放冷处静置1-2天,析出固体,过滤得粗品,将干燥的粗品溶于乙醚中,10%KOH溶液洗涤三次,收集乙醚层,蒸去乙醚,将所得粉末溶于乙醇中,活性炭脱色重结晶,即得单斜棱柱结晶的胡椒碱。
本发明还提供了该天然药物组合物的优选的制备方法,包括:
(1)山楂荜茇水煎浓缩提取物的制备
按照配伍比例为1∶1或1-6∶1其他比例取山楂、荜茇,10倍量蒸馏水,浸泡1h,于加石棉网的电炉上加热煎煮1h,绢布过滤,保存滤液,药渣再加6倍蒸馏水,同法浸泡、煎煮、过滤,将两次滤液混合,加热浓缩至小体积,超滤膜过滤,采用真空干燥箱70℃减压干燥36h得棕黄色粉末,即得。
(2)山楂总黄酮的制备
取山楂果肉,以60%乙醇回流提取2次,每次1.5h,合并提取液,回收乙醇,得浸膏,浸膏分别加入适量蒸馏水,搅匀,加入CaCl21g,静置过夜,离心,收集上清液,用氨水调pH至7~8,加入大孔吸附树脂柱中,调节流速5mL/min,用蒸馏水洗去杂质,以乙醇为流动相解吸附,回收乙醇,即得。
(3)荜茇乙醇提取物制备
取荜茇,干燥,粉碎,过筛,乙醇浸泡12h,过滤取澄清液,残渣继续浸泡12h,将两次滤液合并,3000rpm离心15分钟,分离上清液,水浴蒸干浓缩,再减压干燥成干浸膏,粉碎,过筛,即得。
(4)胡椒碱制备
将荜茇颗粒粉碎,用乙醇浸泡12h,过滤,残渣乙醇浸泡12h,将两次滤液合并,减压浓缩至粘稠状,浓缩液放冷处静置1-2天,析出固体,过滤得粗品,将干燥的粗品溶于乙醚中,10%KOH溶液洗涤三次,收集乙醚层,蒸去乙醚,将所得粉末溶于乙醇中,活性炭脱色重结晶,即得单斜棱柱结晶的胡椒碱。
(5)按比例取山楂荜茇水煎浓缩提取物、山楂总黄酮、荜茇乙醇提取物与胡椒碱,均匀混合,即得。
上述天然药物组合物的制备方法,还包括:将步骤(5)制得的产品进一步通过常规的制药手段制成含有天然药物组合物100mg或200mg规格的胶囊,或将按湿法制粒工艺制成含天然药物组合物100mg或200mg规格的片剂。
本发明天然药物组合物在抗化疗相关性腹泻及抑制肿瘤方面的有益效果如下:
1、本发明天然药物组合物,在伊立替康导致小鼠腹泻模型的研究表明:对于伊立替康所致小鼠的腹泻反应有明显的对抗作用。
2、证明了本天然药物组合物能增强化疗药物对肿瘤的抑制作用,采用了小鼠肿瘤模型,观察该天然药物组合物与环磷酰胺联合对小鼠体内肿瘤的抑制作用。研究表明:该天然药物组合物能明显增加环磷酰胺对于肿瘤的抑制作用。
3、本发明人独创地将山楂荜茇水煎浓缩提取物、山楂总黄酮、荜茇乙醇提取物与胡椒碱进行组合,并通过大量实验确定这些组分之间的用量配比,使该组合物发挥协同作用,经过反复实验研究,本发明的天然药物组合物各组分之间的比例在2-7∶1-5∶3-4∶3-9时产生了协同作用,增效明显,减轻癌症化疗相关性腹泻,在各组分的用量比例是7∶5∶4∶9时尤其明显,这是本发明人付出大量创造性劳动而获得的,本领域普通技术人员仅仅通过公开的内容无法简单获得这种配比范围以及最佳用量比例。
4、该天然药物组合物山楂荜茇水煎浓缩提取物、山楂总黄酮、荜茇乙醇提取物与胡椒碱各组分均可通过常规手段获得,其中组分如胡椒碱还可通过商业购得,这样的组合物本身具有获得方便、成本较低的效果。这也是发明人通过大量创造性劳动方获得的兼具极佳疗效和较高工业实用性的产品。
具体实施方式
下面通过实施例和试验例进一步阐述本发明天然药物组合物的制备,以及其在抗腹泻和抗肿瘤中应用的有益效果。
实施方案
第一步:各种提取物的制备
(1)山楂荜茇水煎浓缩提取物的制备
按照配伍比例为1∶1或1-6∶1其他比例取山楂、荜茇,10倍量蒸馏水,浸泡1h,于加石棉网的电炉上加热煎煮1h,绢布过滤,保存滤液,药渣再加6倍蒸馏水,同法浸泡、煎煮、过滤,将两次滤液混合,加热浓缩至小体积,超滤膜过滤,采用真空干燥箱70℃减压干燥36h得棕黄色粉末,即得。
(2)山楂总黄酮的制备
取山楂果肉,以60%乙醇回流提取2次,每次1.5h,合并提取液,回收乙醇,得浸膏,浸膏分别加入适量蒸馏水,搅匀,加入CaCl21g,静置过夜,离心,收集上清液,用氨水调pH至7~8,加入大孔吸附树脂柱中,调节流速5mL/min,用蒸馏水洗去杂质,以乙醇为流动相解吸附,回收乙醇,即得。
(3)荜茇乙醇提取物制备
取荜茇,干燥,粉碎,过筛,乙醇浸泡12h,过滤取澄清液,残渣继续浸泡12h,将两次滤液合并,3000rpm离心15分钟,分离上清液,水浴蒸干浓缩,再减压干燥成干浸膏,粉碎,过筛,即得。
(4)胡椒碱制备
将荜茇颗粒粉碎,用乙醇浸泡12h,过滤,残渣乙醇浸泡12h,将两次滤液合并,减压浓缩至粘稠状,浓缩液放冷处静置1-2天,析出固体,过滤得粗品,将干燥的粗品溶于乙醚中,10%KOH溶液洗涤三次,收集乙醚层,蒸去乙醚,将所得粉末溶于乙醇中,活性炭脱色重结晶,即得单斜棱柱结晶的胡椒碱。
第二步:制剂的制备
(1)本发明天然药物组合物胶囊制剂的制备
分别称取上述步骤制备的山楂荜茇水煎浓缩提取物28mg、山楂总黄酮20mg、荜茇乙醇提取物16mg与胡椒碱36mg,同时称取淀粉395mg、硬脂酸镁5mg,均匀混合,填充成胶囊。
(2)本发明天然药物组合物片剂的制备
分别称取上述步骤制备山楂荜茇水煎浓缩提取物28mg、山楂总黄酮20mg、荜茇乙醇提取物16mg与胡椒碱36mg,淀粉295mg、乳糖100mg,均匀混合,湿法制粒、干燥,整粒,与5mg硬脂酸镁混合,压成片剂。
药效及药理学资料:
在下述试验例子中组合物为:山楂荜茇水煎浓缩提取物、山楂总黄酮、荜茇乙醇提取物与胡椒碱的用量比例为7∶5∶4∶9。发明人对上述各成分用量比例在2-7∶1-5∶3-4∶3-9之间时的多种配比组合获得的组合物进行了与上相同的实验,均发现在这种用量范围内的天然药物组合物能获得很好的协同作用,对癌症化疗相关性腹泻能起到很好的效果并对癌症的治疗有增效作用。以下是优选的实施方式获得的药效学资料:
试验例1:天然药物组合物治疗化疗相关性腹泻作用的药效学研究
1、试验材料
(1)山楂,荜茇,购于药材市场。
(2)小鼠,雄性,实验前自由进食饮水。
2、试验方法:
将小鼠随机分为5组,每组5只,A组为模型组,B组为山楂荜茇水煎浓缩提取物10g.kg-1(相当于含生药量),C组为山楂总黄酮10g.kg-1(相当于含生药量),D组荜茇乙醇提取物与胡椒碱按4∶9比例混合10g.kg-1(相当于含生药量),E组为本发明的天然药物组合物10g.kg-1(相当于含生药量),伊立替康腹腔注射给药(75mg/kg),每天1次,连续4天,复制化疗相关性腹泻模型。B、C、D、E组连续用相应提取物灌胃8天,将小鼠置于代谢笼,笼底铺白色滤纸以观察大便情况,并且观察小鼠肛周情况及鼠尾粪便污染情况,结合棉签刺激肛门排便,每日观察记录2次。腹泻程度标准评分如下:0分:大便正常或没有;1分:轻度腹泻,大便可见轻微湿软;2分:中度腹泻,大便较湿且不成型。并且有轻度肛周着色;3分,重度腹泻,水样便并伴有重度肛周着色。
3、实验结果
与模型组比较,山楂荜茇水煎浓缩提取物组化疗相关性腹泻的程度低于模型组,而本发明的天然药物组合物组腹泻发生率明显减轻。结果见表1.
表1本发明组合物对小鼠化疗相关性腹泻发生率及评分影响
注:a相当于含生药量
试验例2:本发明天然药物组合物抗肿瘤作用的药效学研究
1、实验材料
(1)昆明种小鼠,体重20±2g,实验前自由进食饮水,24h自然光照射。
(2)环磷酰胺,江苏恒瑞医药制药股份有限公司产品。
2、试验方法:
对小鼠S180肉瘤生长的抑制试验
采用传代5-7天,生长良好的乳白色腹水,以适量无菌生理盐水稀释成瘤细胞悬液,细胞数为107/mL,每组5只,每鼠右腋窝皮下接种0.2mL(含瘤细胞2×106个)。接种次日随机分组,实验组将本发明的天然药物组合物分为(200,100mg/mL)两个剂量组,每鼠灌胃0.5ml,同时给予环磷酰胺10g·kg-1·d-1;阴性对照组给予0.5mL蒸馏水;阳性药物组给予环磷酰胺10g·kg-1·d-1,连续给药10天。常规饲养,饮水,食物不限。停药次日,小鼠全部脱颈椎处死,剥取皮下实体瘤瘤块,称重,按下列公式计算肿瘤抑制率(%):
肿瘤抑制率=〔对照组平均瘤重(C)-实验组平均瘤重(T)〕/对照组平均瘤重(C)
3、试验结果
本发明天然药物组合物低、高剂量组均可增强环磷酰胺剂与对S180的抑制程度作用,尤其以高剂量组作用最强。(如表2)
表2本发明天然药物组合物对S180小鼠的肿瘤抑制作用
Claims (5)
1.一种减少癌症化疗相关性腹泻并对治疗癌症起增效作用的天然药物组合物,其特征在于该组合物由山楂荜茇水煎浓缩提取物、山楂总黄酮、荜茇乙醇提取物与胡椒碱以重量计按2-7∶1-5∶3-4∶3-9的比例组成,
其中山楂荜茇水煎浓缩提取物的制备方法是:
按照配伍比例为1-6∶1取山楂、荜茇,10倍量蒸馏水,浸泡1h,于加石棉网的电炉上加热煎煮1h,绢布过滤,保存滤液,药渣再加6倍蒸馏水,同法浸泡、煎煮、过滤,将两次滤液混合,加热浓缩至小体积,超滤膜过滤,采用真空干燥箱70℃减压干燥36h得棕黄色粉末,即得;
其中山楂总黄酮的制备方法是:
取山楂果肉,以60%乙醇回流提取2次,每次1.5h,合并提取液,回收乙醇,得浸膏,浸膏分别加入适量蒸馏水,搅匀,加入CaCl21g,静置过夜,离心,收集上清液,用氨水调pH至7~8,加入大孔吸附树脂柱中,调节流速5mL/min,用蒸馏水洗去杂质,以乙醇为流动相解吸附,回收乙醇,即得;
其中荜茇乙醇提取物的制备方法是:
取荜茇,干燥,粉碎,过筛,乙醇浸泡12h,过滤取澄清液,残渣继续浸泡12h,将两次滤液合并,3000rpm离心15分钟,分离上清液,水浴蒸干浓缩,再减压干燥成干浸膏,粉碎,过筛,即得;
其中胡椒碱的制备方法是:
将荜茇颗粒粉碎,用乙醇浸泡12h,过滤,残渣乙醇浸泡12h,将两次滤液合并,减压浓缩至粘稠状,浓缩液放冷处静置1-2天,析出固体,过滤得粗品,将干燥的粗品溶于乙醚中,10%KOH溶液洗涤三次,收集乙醚层,蒸去乙醚,将所得粉末溶于乙醇中,活性炭脱色重结晶,即得单斜棱柱结晶的胡椒碱。
2.如权利要求1所述的天然药物组合物,其特征在于其中山楂荜茇水煎浓缩提取物、山楂总黄酮、荜茇乙醇提取物与胡椒碱的用量比例是7∶5∶4∶9。
3.如权利要求1或2的天然药物组合物的制备方法,其特征在于该方法包括:
(1)山楂荜茇水煎浓缩提取物的制备
按照配伍比例为1-6∶1取山楂、荜茇,10倍量蒸馏水,浸泡1h,于加石棉网的电炉上加热煎煮1h,绢布过滤,保存滤液,药渣再加6倍蒸馏水,同法浸泡、煎煮、过滤,将两次滤液混合,加热浓缩至小体积,超滤膜过滤,采用真空干燥箱70℃减压干燥36h得棕黄色粉末,即得;
(2)山楂总黄酮的制备
取山楂果肉,以60%乙醇回流提取2次,每次1.5h,合并提取液,回收乙醇,得浸膏,浸膏分别加入适量蒸馏水,搅匀,加入CaCl21g,静置过夜,离心,收集上清液,用氨水调pH至7~8,加入大孔吸附树脂柱中,调节流速5mL/min,用蒸馏水洗去杂质,以乙醇为流动相解吸附,回收乙醇,即得;
(3)荜茇乙醇提取物的制备
取荜茇,干燥,粉碎,过筛,乙醇浸泡12h,过滤取澄清液,残渣继续浸泡12h,将两次滤液合并,3000rpm离心15分钟,分离上清液,水浴蒸干浓缩,再减压干燥成干浸膏,粉碎,过筛,即得;
(4)胡椒碱的制备
将荜茇颗粒粉碎,用乙醇浸泡12h,过滤,残渣乙醇浸泡12h,将两次滤液合并,减压浓缩至粘稠状,浓缩液放冷处静置1-2天,析出固体,过滤得粗品,将干燥的粗品溶于乙醚中,10%KOH溶液洗涤三次,收集乙醚层,蒸去乙醚,将所得粉末溶于乙醇中,活性炭脱色重结晶,即得单斜棱柱结晶的胡椒碱;
(5)按比例选取山楂荜茇水煎浓缩提取物、山楂总黄酮、荜茇乙醇提取物与胡椒碱均匀混合,即得。
4.如权利要求3所述的天然药物组合物的制备方法,其特征在于还包括:将步骤(5)制得的产品进一步通过常规的制药手段制成含有天然药物组合物100mg或200mg规格的胶囊,或将按湿法制粒工艺制成含天然药物组合物100mg或200mg规格的片剂。
5.如权利要求1-2任一项所述的天然药物组合物在制备减少癌症化疗相关性腹泻反应并对治疗癌症起增效作用的药物中的用途。
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