CN103127068A - Eryngiolide A在促胰岛素分泌药物中的应用 - Google Patents

Abstract

本发明属于制药领域，公开了EryngiolideA在制备促胰岛素分泌药物中的应用。本发明涉及的EryngiolideA在制备促胰岛素分泌药物中的用途属于首次公开，由于骨架类型属于全新的骨架类型，而且其促胰岛素分泌活性强得意想不到，不存在由其他化合物给出任何启示的可能，具备突出的实质性特点，同时用于2型糖尿病的防治显然具有显著的进步。

Description

Eryngiolide A在促胰岛素分泌药物中的应用

技术领域

本发明属于制药领域，涉及Eryngiolide A在制备促胰岛素分泌药物中的应用。

 

背景技术

2型糖尿病是一种严重影响人体健康和生活质量的疾病，目前不但累及西方国家6%的成人，而且其发病趋于年轻化，并正以6%的年增长率高速增长。其危害性及在儿童群体中不断上升的发病率已引起了各国学者的广泛关注，并成为医学研究领域中的一个重要研究方向。

本发明涉及的化合物Eryngiolide A是一个2012年发表（Wang, S. J. et al., 2012. Eryngiolide A, a Cytotoxic Macrocyclic Diterpenoid with an Unusual Cyclododecane Core Skeleton Produced by the Edible Mushroom Pleurotus eryngii. Organic Letters 14 (14), 3672–3675.）的新骨架化合物，该化合物拥有全新的骨架类型，目前的用途仅仅涉及癌细胞的细胞毒活性（Wang, S. J. et al., 2012. Eryngiolide A, a Cytotoxic Macrocyclic Diterpenoid with an Unusual Cyclododecane Core Skeleton Produced by the Edible Mushroom Pleurotus eryngii. Organic Letters 14 (14), 3672–3675.），对于本发明涉及的Eryngiolide A在制备促胰岛素分泌药物中的用途属于首次公开，由于骨架类型属于全新的骨架类型，而且其促胰岛素分泌活性强得意想不到，不存在由其他化合物给出任何启示的可能，具备突出的实质性特点，同时用于2型糖尿病的防治显然具有显著的进步。

发明内容

本发明的目的是通过下列技术措施实验的：Eryngiolide A在制备促胰岛素分泌药物中的应用。

本发明的有益效果：

发现Eryngiolide A不影响胰岛细胞株RINm5F的细胞活力，表示Eryngiolide A对细胞没有毒性作用。Eryngiolide A在10^-10，10^-11，10^-12M范围内对胰岛细胞株的胰岛素分泌能力有促进作用，并且此作用有浓度和时间依赖趋势。

所述化合物Eryngiolide A结构如式（Ⅰ）所示：

式（Ⅰ）

本发明涉及的Eryngiolide A在制备促胰岛素分泌药物中的用途属于首次公开，由于骨架类型属于全新的骨架类型，而且其促胰岛素分泌活性强得意想不到，不存在由其他化合物给出任何启示的可能，具备突出的实质性特点，同时用于2型糖尿病的防治显然具有显著的进步。

 

具体实施方式：

 本发明所涉及化合物Eryngiolide A的制备方法参见文献（Wang, S. J. et al., 2012. Eryngiolide A, a Cytotoxic Macrocyclic Diterpenoid with an Unusual Cyclododecane Core Skeleton Produced by the Edible Mushroom Pleurotus eryngii. Organic Letters 14 (14), 3672–3675.）。

以下通过实施例对本发明作进一步详细的说明，但本发明的保护范围不受具体实施例的任何限制，而是由权利要求加以限定。

实施例1：本发明所涉及化合物Eryngiolide A片剂的制备：

取20克化合物Eryngiolide A，加入制备片剂的常规辅料180克，混匀，常规压片机制成1000片。

实施例2：本发明所涉及化合物Eryngiolide A胶囊剂的制备：

取20克化合物Eryngiolide A，加入制备胶囊剂的常规辅料如淀粉180克，混匀，装胶囊制成1000片。

下面通过药效学实验来进一步说明其药物活性。

实验例1

1、Eryngiolide A对胰岛细胞株RINm5F的安全范围的确定

将RINm5F细胞按每孔2×10⁴个细胞的浓度接种于96孔板中，于37℃5%CO₂培养箱中培养当细胞达到80%的密度时，使用Eryngiolide A（终浓度0,10^-8，10^-9，10^-10，10^-11，10^-12M）（1M=1mol/L，下同）对细胞刺激3小时后采用MTT法检测细胞活力。首先在加入MTT液。使MTT终浓度达到0.5mg/ml，并在37℃孵育2小时。吸去上清，加入DMSO溶解晶体，在570nm处测吸光度值。结果为：未用Eryngiolide A MTT值=0.2467±0.01317；Eryngiolide A 10^-8mol/L MTT值=0.2463±0.0814；Eryngiolide A 10^-9mol/L MTT值=0.2466±0.01061；Eryngiolide A 10^-10mol/L MTT值=0.2473±0.06；Eryngiolide A 10^-11mol/L MTT值=0.2491±0.07414；Eryngiolide A 10^-12mol/L MTT值=0.2433±0.07423。各组间没有显著性差异，P>0.05说明Eryngiolide A不影响细胞活力。结果显示Eryngiolide A在各个浓度不影响细胞的活力。

、Eryngiolide A对胰岛细胞分泌功能的影响

RINm5F细胞接种到6孔板中，在细胞达到3×10⁵个/孔时，吸去上清并用PBS洗三遍，使用KRB缓冲液（128.8mM NaCl，4.8mM KCl，1.2mM KH₂PO₄，1.2mM MgSO₄，1.0mM CaCl₂，5.0mM HEPES，0.1%胎牛血清，2.8mM 葡萄糖），在缓冲液中加入Eryngiolide A 10^-12M刺激2小时。实验结束后取上清，离心去除上清中细胞后使用胰岛素ELISA检验试剂盒（Mercodia AB Sweden）检测上清中胰岛素。结果显示Eryngiolide A刺激胰岛素的分泌有时间和浓度依赖趋势，分别见表1、2。

表1  10 ^-12 M 的Eryngiolide A刺激不同时间对胰岛素分泌的影响

分组	刺激时间	胰岛素分泌量
			空白对照组		19.54±1.51
Eryngiolide A 10-12M	30min	27.74±1.80*
			Eryngiolide A 10-12M	1h	33.61±2.01*
Eryngiolide A 10-12M	2h	37.51±2.21*

与对照组比较，*P<0.05。

 

表2 不同浓度的Eryngiolide A刺激2小时对胰岛素分泌的影响

分组	刺激时间	胰岛素分泌量
			空白对照组		19.54±1.51
Eryngiolide A 10-12M	2h	37.51±2.31*
			Eryngiolide A 10-11M	2h	41.12±2.47*
Eryngiolide A 10-10M	2h	51.05±3.52*

与对照组比较，*P<0.05。

 

结论：Eryngiolide A能够显著刺激胰岛素分泌，可以用来制备治疗糖尿病药物。

Claims (1)

1.Eryngiolide A在促胰岛素分泌药物中的应用，所述化合物Eryngiolide A结构如式（Ⅰ）所示：

式（Ⅰ）。