CN103048466A - 用于对组织细胞蛋白进行快速定量的试纸条检测方法 - Google Patents

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糜军
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Abstract

本发明提供一种用于对组织细胞蛋白进行快速定量的试纸条检测方法，所述试纸条包括样品垫、金标垫、检测区和吸附垫，所述检测区上设有数个检测圆点。该试纸条在使用时，可在检测区内固定一种与被检测蛋白相结合的单抗或多抗，然后再使被检测蛋白质(已与金标或银标抗体形成复合物)与检测区内的抗体进行结合使检测圆点显色，通过读取显色的检测圆点的数量就可快速判读组织细胞中检测蛋白含量的高低，进而得出确切的诊断结果。

Description

用于对组织细胞蛋白进行快速定量的试纸条检测方法
技术领域
本发明涉及一种试纸条，特别是涉及一种可对组织细胞蛋白进行快速定量的试纸条检测技术。
背景技术
以往的肿瘤治疗，特别是化疗，因为药物作用范围广泛，在杀死肿瘤细胞的同时，也杀死了大量的正常细胞，导致了难以忍受的毒副作用。随着医学研究的快速进展，科学家们逐渐开发出了针对性强、毒副作用小的肿瘤靶向治疗药物。目前，这种靶向治疗由于治疗作用好、毒副作用小越来越成为肿瘤治疗的发展趋势。然而，如何能够在临床中快速、准确的判断患者肿瘤的分子类型，进而确定该患者是否适用于某种靶向治疗方案仍是目前医学界急需解决的一个难题。
以乳腺癌为例，大约20％-30％的乳腺癌患者为人类表皮生长因子受体-2(HER2)阳性乳腺癌。HER2阳性的患者同其他乳腺癌病人相比，肿瘤恶性程度更高，进展更快，更容易复发和向远处转移，且此类病人通常对内分泌治疗不敏感，预后较差。故几家国际制药公司研发出针对HER2阳性乳腺癌的靶向治疗药物，如赫赛汀，收到了比较好的治疗效果。然而，这类靶向药只对HER2阳性的乳腺癌患者有效，对于70％-80％HER2阴性的患者却没有任何治疗效果，如果在治疗前不及时诊断明确，不仅耽误了治疗，还会给患者背负沉重的经济负担(治疗费用)。因此，如何在最短的时间里对乳腺癌患者肿瘤组织中HER2表达水平(阴性或阳性)作出准确判断对于其靶向治疗意义重大。
目前市场上有一种对瘦肉精等进行快速检测的方法-金标法。金标法是在酶联免疫吸附法的基础上发展起来的一种固相标记免疫测定新技术。其检测原理是，以微孔滤膜为载体，包被已知抗原，加入待检标本后，经滤膜的毛细管作用，标本中的抗原与胶体金结合的抗原结合，再通过与膜上包被的抗原结合显色而达到检测目的。金标法的试剂为试纸条形式，即为金标试纸条。
但是，金标法不仅灵敏度太低，不同批次间的实验误差太大，而且，只能通过显色来判断被检测蛋白的有和无，不能判读被检蛋白的绝对定量或相对定量。因此，现有的金标法根本无法对组织细胞中的蛋白进行检测。所以，开发出一种对肿瘤组织中靶点蛋白表达水平进行快速、准确检测的技术，不仅在胶体免疫检测技术中属于一种突破性进展，具有重要意义，而且也具有广泛的市场应用前景。
发明内容
鉴于以上所述现有技术的缺点，本发明的目的在于提供一种可对组织细胞蛋白进行快速定量的试纸条检测方法。
为实现上述目的及其他相关目的，本发明提供一种用于对组织细胞蛋白进行快速定量的试纸条检测方法，其包括如下步骤：
1)设置一试纸条，所述试纸条上设有样品垫、金标垫、检测区和吸附垫，所述检测区上设有数个检测圆点；
2)利用胶体金或胶体银与检测蛋白的单抗或多抗偶联，并将偶联后形成的胶体金或胶体银抗体复合物滴加于金标垫上，烘干后阴凉保存；
3)将另外一种抗被检测蛋白的单抗或多抗固定在检测区上；
4)待检测区显色后，观测检测圆点的个数判断该被检测蛋白的表达是阳性还是阴性。
优选地，所述数个检测圆点呈阵列状分布。
优选地，所述试纸条还包括一底板，所述底板上设有聚脂膜，聚酯膜上设有硝酸纤维膜，所述样品垫、金标垫位于所述聚脂膜上，所述检测区、吸附垫位于所述硝酸纤维膜。
如上所述，本发明的用于对组织细胞蛋白进行快速定量检测的试纸条具有以下有益效果：该试纸条在使用时，可在检测区内固定一种与被检测蛋白相结合的单抗或多抗，然后再使被检测蛋白质(已与金标或银标抗体形成复合物)与检测区内的抗体进行结合使检测圆点显色，通过读取显色的检测圆点的数量就可快速判读组织细胞中检测蛋白含量的高低，再结合其它的方法进而得出确切的诊断结果。
附图说明
图1为本发明试纸条的主视图。
图2为本发明试纸条的俯视图。
元件标号说明
1                        底板
2                        聚脂膜
3                        样品垫
4                        金标垫
5                        硝酸纤维膜
6                        检测区
61                       检测圆点
7                        吸附垫
具体实施方式
以下由特定的具体实施例说明本发明的实施方式，熟悉此技术的人士可由本说明书所揭露的内容轻易地了解本发明的其他优点及功效。
请参阅图1、2。须知，本说明书所附图式所绘示的结构、比例、大小等，均仅用以配合说明书所揭示的内容，以供熟悉此技术的人士了解与阅读，并非用以限定本发明可实施的限定条件，故不具技术上的实质意义，任何结构的修饰、比例关系的改变或大小的调整，在不影响本发明所能产生的功效及所能达成的目的下，均应仍落在本发明所揭示的技术内容得能涵盖的范围内。同时，本说明书中所引用的如“上”、“下”、“左”、“右”、“中间”及“一”等的用语，亦仅为便于叙述的明了，而非用以限定本发明可实施的范围，其相对关系的改变或调整，在无实质变更技术内容下，当亦视为本发明可实施的范畴。
如图1、2所示，本发明提供一种用于对组织细胞蛋白进行快速定量的试纸条检测方法，该试纸条包括底板1，底板1上设有聚脂膜2，聚酯膜2上设有硝酸纤维膜5、样品垫3、金标垫4，硝酸纤维膜5上设有检测区6、吸附垫7，在吸附垫7虹吸作用下，样品垫3上的液体可从左向右的移动。检测区6上设有多个按阵列形状分布的检测圆点61。
下面以乳腺癌为例，对本试纸条使用方法做进一步的描述：
首先肿瘤组织细胞裂解液滴加在试纸条的样品垫1上，利用胶体金或胶体银与相应的管家蛋actin、及细胞裂解液中被检测蛋白Her2的单抗或多抗分别偶联，并将偶联后形成的胶体金或胶体银抗体复合物滴加于金标垫4上，在37°C环境下烘干后阴凉保存。将另外一种抗相应管家蛋白actin或被检测蛋白Her2的单抗或多抗以陈列方式固定在检测区6上；5分钟检测区显色后，通过放大镜观测检测区上管家蛋白显色圆点与被检测蛋白显色圆点的个数，计算相应比值，进而判断该肿瘤细胞是采用阳性还是阴性，进而确定是否采用以Her2为靶点的靶向治疗药物(如赫赛汀)进行治疗。
该试纸条在使用时，可在检测区内固定一种与被检测蛋白相抗的单抗或多抗，然后再使被检测蛋白质(已与金标或银标抗体形成复合物)与检测区内的抗体进行结合使检测圆点显色，通过读取显色的检测圆点的数量就可快速判读组织细胞中检测蛋白含量的高低，进而得出确切的诊断结果。综上所述，本发明有效克服了现有技术中的种种缺点而具高度产业利用价值。
上述实施例仅例示性说明本发明的原理及其功效，而非用于限制本发明。任何熟悉此技术的人士皆可在不违背本发明的精神及范畴下，对上述实施例进行修饰或改变。因此，举凡所属技术领域中具有通常知识者在未脱离本发明所揭示的精神与技术思想下所完成的一切等效修饰或改变，仍应由本发明的权利要求所涵盖。

Claims (3)

1.一种用于对组织细胞蛋白进行快速定量的试纸条检测方法，其特征在于，其包括如下步骤：
1)设置一试纸条，所述试纸条上设有样品垫、金标垫、检测区和吸附垫，所述检测区上设有数个检测圆点；
2)利用胶体金或胶体银与检测蛋白的单抗或多抗偶联，并将偶联后形成的胶体金或胶体银抗体复合物滴加于金标垫上，烘干后阴凉保存；
3)将另外一种抗被检测蛋白的单抗或多抗固定在检测区上；
4)待检测区显色后，观测检测圆点的个数判断该被检测蛋白的表达是阳性还是阴性。
2.根据权利要求1所述的用于对组织细胞蛋白进行快速定量的试纸条检测方法，其特征在于：所述数个检测圆点呈阵列状分布。
3.根据权利要求1所述的用于对组织细胞蛋白进行快速定量的试纸条检测方法，其特征在于：所述试纸条还包括一底板，所述底板上设有聚脂膜，聚酯膜上设有硝酸纤维膜，所述样品垫、金标垫位于所述聚脂膜上，所述检测区、吸附垫位于所述硝酸纤维膜。
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