CN103027999A - 中药瑞香及其提取物在制药中的新用途 - Google Patents
中药瑞香及其提取物在制药中的新用途 Download PDFInfo
- Publication number
- CN103027999A CN103027999A CN2011103844982A CN201110384498A CN103027999A CN 103027999 A CN103027999 A CN 103027999A CN 2011103844982 A CN2011103844982 A CN 2011103844982A CN 201110384498 A CN201110384498 A CN 201110384498A CN 103027999 A CN103027999 A CN 103027999A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- extract
- winter daphne
- chinese medicine
- daphne
- hepatitis
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
Landscapes
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Medicines Containing Plant Substances (AREA)
Abstract
本发明公开了中药瑞香及其提取物在制备丙型肝炎病毒NS3/4A蛋白酶抑制剂和治疗丙型肝炎药物中的应用，瑞香及瑞香提取物对丙型肝炎病毒NS3/4A蛋白酶具有较强的抑制作用，乙酸乙酯和正丁醇提取物浸膏浓度在100mg/ml时，对丙型肝炎蛋白酶的抑制率分别为70.5%和65.4%，可用于制备丙型肝炎病毒NS3/4A蛋白酶抑制剂和治疗丙型肝炎的药物。
Description
技术领域
本发明涉及中药技术领域，特别是涉及中药瑞香及其提取物在制药中的新用途。
背景技术
人体感染丙型肝炎病毒所致的丙型肝炎，已成为全球最棘手的健康问题,目前全世界已有1.7亿人感染。若无药物的治疗,长期感染丙型肝炎病毒将发展成为慢性肝炎、肝坏死、肝癌等疾病。当前最有效的治疗方法是聚乙二醇干扰素联合利津巴韦，该方法对于广大发展中国家普遍存在的I型丙型肝炎治疗有效率低于50%,长期使用干扰素存在许多副作用，如：白细胞、血小板、嗜中性白血球的减少和抑郁症等；长期使用利津巴韦，也将产生溶血性贫血等副作用，使得患者不能持续治疗，因此发展独特、有效、更安全的丙型肝炎治疗药物尤为紧迫。
丙型肝炎病毒蛋白酶NS3/4A 在病毒圆熟过程中起着重要的作用，已被证实是发现丙型肝炎药物的有效靶点之一。目前三种丙型肝炎NS3/4A蛋白酶抑制剂，BILN 2061,VX-950和SCH 503034，已被临床证实疗效显著，但多为肽类抑制剂，合成困难，并有一定的毒副作用。
中药瑞香（Daphne papyracea Wall. ex Steud. var. crassiuscula Rehd.）系瑞香科瑞香属常绿灌木，又名麝囊，蓬莱花，雪花、夺香花，野梦花、山梦花，雪地开花、红总管、雪冻花。主要分布于四川、贵州、云南等地海拔1000-3100米的山坡灌丛或草坡中，具有治咽喉肿痛，齿痛，风湿痛等功效。
发明内容
本发明所要解决的技术问题是克服现有治疗丙型肝炎的药物合成困难、副作用多的缺陷，提供中药瑞香及其提取物在制备丙型肝炎病毒NS3/4A蛋白酶抑制剂和治疗丙型肝炎药物中的应用。
为了解决上述技术问题，本发明采用如下的技术方案：
本发明提供中药瑞香及其提取物在制备丙型肝炎病毒NS4/4A蛋白酶抑制剂和治疗丙型肝炎药物中的应用。
上述的应用中，所述提取物为中药瑞香的有机溶剂提取物。
上面所说的有机溶剂提取物是指采用甲醇、乙醇、丙酮、正丁醇、乙酸乙酯、氯仿或二氯甲烷中一种或两种以上溶剂混合提取中药瑞香所得的提取物。优选使用乙酸乙酯和正丁醇提取。
乙酸乙酯和正丁醇提取物的提取方法：取瑞香植物全株，粉碎，用乙醇加热回流提取3次，合并提取液，浓缩成浸膏，用水分散，先用乙酸乙酯萃取，然后用正丁醇萃取，分别浓缩，得乙酸乙酯浸膏和正丁醇浸膏，即得。
上述提取方法中所用乙醇的浓度为80～95%。
前述应用中所述的中药瑞香是瑞香科瑞香属植物Daphne papyracea Wall. ex Steud. var. crassiuscula Rehd.的全株。
申请人对瑞香提取物的体外抗丙型肝炎活性进行了测试，具体如下；
测试原理：荧光法
检测仪器：TECAN GENios
受试药物：实施例1中的乙酸乙酯提取物和正丁醇提取物，分别、浓缩干燥成干浸膏。
试剂盒:SensoLyte 520 HCV蛋白酶试剂盒 (批号：AK71145-1011，美国圣何塞 AnaSpec。)
蛋白酶：HCV NS3/4A蛋白酶 (批号：046-079，美国圣何塞 AnaSpec)
测试溶液的配制(按试剂盒说明手册操作)：
缓冲溶液：将2X实验缓冲液（Component D）、1M DDT（Component F）和去离子水按1：0.06：1进行混合，冰浴备用。
HCV NS3/4A蛋白酶底物溶解：加0.12 ml的DMSO (Component C)到HCV NS3/4A蛋白酶底物[Ac-Asp-Glu-Dap(QXLTM520)-Glu-Glu-Abu-COO-Ala-Ser-Cys
(5-FAMsp)-NH2]（Component A）, 作为储备液-20℃冻存。每次实验前取储备液，用缓冲溶液按1：100比例稀释，现配现用。
HCV NS3/4A蛋白酶溶液：用缓冲溶液将蛋白酶溶液稀释20或60倍。
测定方法(按试剂盒说明手册操作)：在384孔黑色平板 (美国BD Falcon公司)中，先分别加入底物空白溶液（Substrate Control，SC）、溶剂空白溶液（Vehicle Control，VC）、阳性对照（Positive Control, PC）、 抑制剂对照(Inhibitor Control, IC)、测试化合物对照(Test Compound Control, TCC), 再加入HCV NS3/4A蛋白酶和底物。每个浓度均为3个复孔，震荡混匀后，室温下暖孵30分钟,经TECAN GENios在激发波长485nm和发射波长535nm下测试荧光强度。实验结果见表1。
抑制率计算公式：
抑制率% = 100×（FAverage VC-Average SC- FAverage sample-Average SC）/ FAverage VC-Average SC
式中的F 为对照组和样品组荧光值，抑制率及IC50的计算通过微软Windows Excel软件完成。
表1 瑞香提取物对HCV NS3/4A蛋白酶的抑制作用 (n=3)
| 组别 | （100mg/mL） | （10mg/mL） | （1mg /mL） | IC50 (mg /ml) |
| 瑞香乙酸乙酯提取物 | 70.5±0.02% | |||
| 瑞香正丁醇提取物 | 65.4±0.45% | |||
| Embelin（PC） | 100.2±0.1% | 63.7±3.2% | 14.0±4.4% | 6.0 |
* 数据为：平均值±相对标准偏差 （三次独立实验值）
目前离体实验认为，单体化合物的IC50在10mg/ml以下就具有较强的抗HCV NS3/4A蛋白酶作用。对瑞香乙酸乙酯和正丁醇两种提取物的HCV NS3/4A蛋白酶测试结果显示：在100mg/ml浓度时，两种提取物对HCV NS3/4A蛋白酶抑制率分别达70.5%和65.4%，对HCV NS3/4A蛋白酶有较好的抑制作用，可用于研制预防和治疗丙型肝炎药物。
与现有技术相比，本发明发现中药瑞香及其提取物对丙型肝炎病毒NS3/4A蛋白酶具有较强的抑制作用，乙酸乙酯和正丁醇提取物浸膏浓度在100mg/ml时，对丙型肝炎病毒NS3/4A蛋白酶的抑制率分别为70.5%和65.4%，可用于制备丙型肝炎病毒NS3/4A蛋白酶抑制剂和治疗丙型肝炎的药物。
具体实施方式
实施例1：瑞香药材于2005年3月采自贵州贵阳，由贵阳中医学院陈德媛教授（生药学专家）鉴定为瑞香（Daphne papyracea Wall. ex Steud. var. crassiuscula Rehd.），植物标本存放在贵阳中医学院药学系中药化学实验室（标本号GY200503D），采用如下方法提取：
取瑞香植物全株5.5kg，粉碎，用80～95%乙醇（料液重量比为1:6）加热回流提取3次，合并提取液，减压浓缩成30℃相对密度为1.05～1.35的浸膏，用水分散（料液重量比为1:2），先用等体积倍的乙酸乙酯萃取，然后用等体积倍的正丁醇萃取，分别萃取三次，分别合并后减压浓缩并干燥成干浸膏，得乙酸乙酯浸膏132g和正丁醇浸膏208g，这两种浸膏即为对丙型肝炎病毒有抑制作用的瑞香提取物。
实施例2：取乙酸乙酯浸膏，干燥，粉碎，加入辅料，制成中药制剂。例如片剂、颗粒剂等。
实施例3：取正丁醇浸膏，干燥，粉碎，加入药用辅料，制成中药制剂。
实施例4：取瑞香全株，粉碎，装入胶囊，制成胶囊剂。
Claims (7)
1.中药瑞香及其提取物在制备丙型肝炎病毒NS3/4A蛋白酶抑制剂和治疗丙型肝炎药物中的应用。
2.按照权利要求1所述的应用，其特征在于：所述提取物为中药瑞香的有机溶剂提取物。
3.按照权利要求2所述的应用，其特征在于：所述提取物为中药瑞香的甲醇、乙醇、丙酮、正丁醇、乙酸乙酯、氯仿或二氯甲烷中一种或两种以上溶剂混合的提取物。
4.按照权利要求3所述的应用，其特征在于：所述提取物为中药瑞香的乙酸乙酯和正丁醇提取物。
5.按照权利要求4所述的应用，其特征在于：所述乙酸乙酯和正丁醇提取物的提取方法为：取中药瑞香植物全株，粉碎，用乙醇加热回流提取3次，合并提取液，浓缩成浸膏，用水分散，先用乙酸乙酯萃取，然后用正丁醇萃取，分别浓缩，得乙酸乙酯浸膏和正丁醇浸膏，即得。
6.按照权利要求5所述的应用，其特征在于：所述乙醇的浓度为80～95%。
7.按照权利要求1至6任一项所述的应用，其特征在于：所述中药瑞香是瑞香科瑞香属植物Daphne papyracea Wall. ex Steud. var. crassiuscula Rehd.的全株。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201110384498.2A CN103027999B (zh) | 2011-11-28 | 2011-11-28 | 中药瑞香及其提取物在制药中的新用途 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201110384498.2A CN103027999B (zh) | 2011-11-28 | 2011-11-28 | 中药瑞香及其提取物在制药中的新用途 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN103027999A true CN103027999A (zh) | 2013-04-10 |
| CN103027999B CN103027999B (zh) | 2014-09-17 |
Family
ID=48015728
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN201110384498.2A Expired - Fee Related CN103027999B (zh) | 2011-11-28 | 2011-11-28 | 中药瑞香及其提取物在制药中的新用途 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN103027999B (zh) |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN107875143A (zh) * | 2017-11-02 | 2018-04-06 | 贵阳中医学院 | 1‑4′‑羟基苯基‑5‑苯基‑2(e)‑烯‑1‑戊酮在制药中的应用 |
| CN110772555A (zh) * | 2019-12-02 | 2020-02-11 | 贵州中医药大学 | 黄褐毛忍冬不同溶剂提取物在制药中的应用及其制备方法 |
| CN110974834A (zh) * | 2019-12-02 | 2020-04-10 | 贵州中医药大学 | 黄褐毛忍冬酸水解产物在制药中的应用及其制备方法 |
Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN1416867A (zh) * | 2002-11-22 | 2003-05-14 | 丁心河 | 天然植物治疗艾滋病、乙肝、丙肝和癌症的特效药 |
-
2011
- 2011-11-28 CN CN201110384498.2A patent/CN103027999B/zh not_active Expired - Fee Related
Patent Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN1416867A (zh) * | 2002-11-22 | 2003-05-14 | 丁心河 | 天然植物治疗艾滋病、乙肝、丙肝和癌症的特效药 |
Non-Patent Citations (2)
| Title |
|---|
| 李媛等: "丙型病毒性肝炎治疗研究进展", 《现代中医药》 * |
| 陈宝玲: "慢性丙型肝炎中医药研究进展", 《河北中医》 * |
Cited By (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN107875143A (zh) * | 2017-11-02 | 2018-04-06 | 贵阳中医学院 | 1‑4′‑羟基苯基‑5‑苯基‑2(e)‑烯‑1‑戊酮在制药中的应用 |
| CN107875143B (zh) * | 2017-11-02 | 2019-09-17 | 贵阳中医学院 | 1-4′-羟基苯基-5-苯基-2(e)-烯-1-戊酮在制药中的应用 |
| CN110772555A (zh) * | 2019-12-02 | 2020-02-11 | 贵州中医药大学 | 黄褐毛忍冬不同溶剂提取物在制药中的应用及其制备方法 |
| CN110974834A (zh) * | 2019-12-02 | 2020-04-10 | 贵州中医药大学 | 黄褐毛忍冬酸水解产物在制药中的应用及其制备方法 |
| CN110772555B (zh) * | 2019-12-02 | 2021-10-12 | 贵州中医药大学 | 黄褐毛忍冬不同溶剂提取物在制药中的应用及其制备方法 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN103027999B (zh) | 2014-09-17 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Zhou et al. | Determination of oleanolic acid, ursolic acid and amygdalin in the flower of Eriobotrya japonica Lindl. by HPLC | |
| Hooper et al. | Isolation and identification of Desmodium root exudates from drought tolerant species used as intercrops against Striga hermonthica | |
| CN105963312B (zh) | 从东北婆婆纳中分离的纯化提取物、其制备方法以及包含该提取物的组合物 | |
| Ke et al. | Molluscicidal activity and physiological toxicity of Macleaya cordata alkaloids components on snail Oncomelania hupensis | |
| KR101373120B1 (ko) | 엉겅퀴 추출물을 함유하는 간성상세포 활성 억제용 조성물 | |
| Hu et al. | Association between chemical and genetic variation of Vitex rotundifolia populations from different locations in China: its implication for quality control of medicinal plants | |
| Saleem et al. | Hepatoprotective effect of aqueous methanolic extract of Rumex dentatus in paracetamol-induced hepatotoxicity in mice | |
| CN103027999B (zh) | 中药瑞香及其提取物在制药中的新用途 | |
| Du et al. | Elicitation of Lonicera japonica Thunb suspension cell for enhancement of secondary metabolites and antioxidant activity | |
| Wang et al. | Inhibitory effects of sulfated lentinan with different degree of sulfation against tobacco mosaic virus (TMV) in tobacco seedlings | |
| Zhu et al. | Morphological, physiological, and secondary metabolic responses of Taraxacum officinale to salt stress | |
| CN101112409A (zh) | 蒲公英中酚酸类有效部位的制备及其抑制流感病毒的用途 | |
| Said et al. | Phytoconstituents and bioctivity evaluation of Bombax ceiba L. flowers | |
| Desoukey et al. | Hepatoprotection and antioxidant activity of Gazania longiscapa and G. rigens with the isolation and quantitative analysis of bioactive metabolites | |
| CN103446278B (zh) | 一种海棠提取物及其制备、应用 | |
| Rajoria et al. | Evaluation of antiproliferative and hepatoprotective effects of wheat grass (Triticum aestivum) | |
| CN103739652B (zh) | 一种23,29-降齐墩果烷酸化合物及其制备方法和在制备糖苷酶抑制剂药物中的用途 | |
| Franco et al. | Effects of leaf extracts of Myrcia guianensis (Aubl.) DC.: on growth and gene expression during root development of Sorghum bicolor (L.) Moench | |
| CN102106587B (zh) | 一种天然植物提取物的制备方法及用途 | |
| CN103027909B (zh) | 香豆素类化合物的应用及其从瑞香中提取的方法 | |
| Han et al. | Correlation between the genetic diversity and variation of total phenolic acids contents in Fructus Xanthii from different populations in China | |
| Zhang et al. | Targeted identification of antioxidant compounds from Sparassis latifolia extracts and their antioxidant activities | |
| Jiménez et al. | Phytochemical and biological characterization of aqueous and ethanolic extracts of Parthenium hysterophorus | |
| CN110772555B (zh) | 黄褐毛忍冬不同溶剂提取物在制药中的应用及其制备方法 | |
| Vijayakumari et al. | Qualitative phytochemical screening, GC-MS analysis and antibacterial activity of palmyra fruit pulp (Borassus flabellifer L.) |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| C06 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| C10 | Entry into substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| C14 | Grant of patent or utility model | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| CF01 | Termination of patent right due to non-payment of annual fee | ||
| CF01 | Termination of patent right due to non-payment of annual fee |
Granted publication date: 20140917 Termination date: 20181128 |