CN103006782B - 大果榕提取物及其在制备治疗骨质疏松药物中的应用 - Google Patents
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Abstract
本发明属植物应用领域,涉及一种大果榕提取物及其在制备治疗骨质疏松药物中的应用。所述大果榕提取物是以大果榕为原料获得的醇粗提物,醇粗提物加水稀释用有机溶剂萃取,将萃取液或萃取后剩余的水溶液浓缩至浸膏状,真空干燥得到的粉末即为大果榕提取物。在药效试验基础上,发现大果榕提取物在治疗骨质疏松上具有良好的药效,可以用来制备治疗骨质疏松药物,为骨质疏松的治疗提供有效途径,其制备方法简单,成本低。
Description
技术领域
本发明属植物应用领域,涉及一种植物活性提取物及其应用,具体是一种大果榕提取物及其在制备治疗骨质疏松药物中的应用。
背景技术
骨质疏松(osteoporosis, OP)是以骨量减少、骨微观结构退化、脆性增加和易发生骨折为特征的一种全身性疾病,多发于绝经后妇女、老人和多种慢性疾病患者。骨质疏松致残率较高,极大影响着人们的生活质量,给家庭和社会带来沉重的经济负担。随着人口结构老龄化,骨质疏松的问题越来越突出。
现代医学认为骨质疏松的基本病理机制是在骨代谢过程中骨吸收和骨形成的偶联出现了失衡,导致人体内的钙磷代谢不平衡,骨密度逐渐减少而引发的临床症状。目前临床上对于骨质疏松的治疗尚无理想的方法。
中国传统医学中虽无骨质疏松的症名,但究其临床表现、发病机制应归属于“骨痹”、“骨痿”的范畴。中医理论认为,骨质疏松的病因病机主要是肾亏、脾虚和痰瘀阻脉。治则则为补肾壮骨、健脾益气和活血通络。
大果榕(Ficus auriculata)为桑科榕属的植物,是榕属的一种高大乔木或者小乔木,生活在低山沟谷潮湿雨林中,分布较广,高3-10米,树冠呈圆伞形,色浓绿碧亮。经检索,目前大果榕的用途仅为园林用途,在治疗骨质疏松药物中的应用尚无报道。
发明内容
本发明的目的是提供一种制备方法简单的大果榕提取物及其在制备治疗骨质疏松药物中的应用。
本发明所述的大果榕提取物是将大果榕原料烘干并粉碎成粉末,然后用醇回流提取,过滤提取液,减压回收尽溶剂,获得浸膏状醇粗提物,醇粗提物加水稀释,再用有机溶剂萃取,将萃取液或萃取后剩余的水溶液浓缩至浸膏状,真空干燥得到的粉末即为大果榕提取物。所述大果榕原料是指大果榕的根、茎或叶。
所述有机溶剂是石油醚、氯仿或乙酸乙酯。
本发明还包括上述大果榕提取物在制备治疗骨质疏松药物中的应用。发明人在药效试验基础上,发现大果榕提取物在治疗骨质疏松上具有良好的药效,可以用来制备治疗骨质疏松药物。
所述治疗骨质疏松药物是将大果榕提取物与常规辅料配合,采用现有工艺制得的临床上允许的内用制剂。
所述常规辅料是溶剂、崩解剂、矫味剂、防腐剂、着色剂、粘合剂、润滑剂、润湿剂、增稠剂、增溶剂或基质。
所述内用制剂是散剂、颗粒剂、片剂、胶囊剂、丸剂、口服液、分散片、喷雾剂、静脉注射剂、肌肉注射剂、吸入剂或凝胶剂。
本发明还包括上述大果榕提取物与祛风湿药、利水渗湿药、活血化瘀药、补虚药中的一种或一种以上的药物组成复方药剂。
所述祛风湿药为木瓜、秦艽、五加皮、桑寄生、狗脊等。
所述利水渗湿药为茯苓、泽泻等。
所述活血化瘀药为川芎、延胡索、牛膝、骨碎补等。
所述补虚药是补阳药、补阴药、补气药、补血药等。所述补阳药包括淫羊藿、杜仲、续断、鹿角胶、菟丝子、补骨脂、仙茅、肉苁蓉、紫河车、巴戟天、鹿茸、胡桃肉、葫芦巴等;所述补阴药包括麦门冬、黄精、枸杞子、女贞子、旱莲草、龟板、鳖甲、石斛、玉竹、天门冬等;所述补气药包括黄芪、山药、甘草、白术、党参、人参、大枣等;所述补血药包括熟地黄、当归、何首乌、白芍、阿胶等。
本发明所提供的大果榕提取物在治疗骨质疏松上具有良好的药效,可以用来开发治疗骨质疏松药物,避免化学合成药副作用大的缺点,为骨质疏松的治疗提供有效途径,其制备方法简单,成本低。
具体实施方式
下面结合实施例,对本发明的具体实施方式作进一步详细描述。以下实施例用于说明本发明,但不用来限制本发明的范围。下列实施例中未注明具体条件的实验方法,通常按照常规条件,或按照制造厂商所建议的条件。
实施例一
将大果榕根烘干并粉碎成粉末,粉末用95%甲醇回流提取3次,合并提取液,过滤,减压回收尽甲醇获得浸膏状甲醇粗提物,甲醇粗提物加水稀释,然后依次用石油醚、氯仿、乙酸乙酯萃取,分别将萃取液减压浓缩至浸膏状,真空干燥得到的粉末分别为大果榕根石油醚部位提取物、氯仿部位提取物、乙酸乙酯部位提取物。萃取后剩余的水溶液减压浓缩至浸膏状,真空干燥得到的粉末为大果榕根水相部位提取物。
实施例二、
将大果榕茎烘干并粉碎成粉末,粉末用75%乙醇回流提取6次,合并提取液,过滤,减压回收尽乙醇获得浸膏状乙醇粗提物,乙醇粗提物加水稀释,然后依次用石油醚、氯仿、乙酸乙酯萃取,分别将萃取液减压浓缩至浸膏状,真空干燥得到的粉末分别为大果榕茎石油醚部位提取物、氯仿部位提取物、乙酸乙酯部位提取物。萃取后剩余的水溶液减压浓缩至浸膏状,真空干燥得到的粉末为大果榕茎水相部位提取物。
实施例三、
将大果榕叶烘干并粉碎成粉末,粉末用95%乙醇回流提取4次,合并提取液,过滤,减压回收尽乙醇获得浸膏状乙醇粗提物,乙醇粗提物加水稀释,然后依次用石油醚、氯仿、乙酸乙酯萃取,分别将萃取液浓缩至浸膏状,真空干燥得到的粉末分别为大果榕叶石油醚部位提取物、氯仿部位提取物、乙酸乙酯部位提取物。萃取后剩余的水溶液减压浓缩至浸膏状,真空干燥得到的粉末为大果榕叶水相部位提取物。
一、大果榕根、茎、叶各部位醇粗提物和各极性萃取部位体外促成骨细胞增殖的实验:
将实施例获得的提取物(醇粗提物、石油醚部位提取物、氯仿部位提取物、乙酸乙酯部位提取物、水相部位提取物)分别用PBS(磷酸盐缓冲液)配制成10mg/mL储备液,临用前稀释成1000μg/mL,100μg/mL,10μg/mL。
实验步骤:取原代培养的鼠成骨细胞(OB)以2×104个/mL接种于96孔板,每孔体积90μL,在CO2培养箱中培养24h。待细胞贴壁后,加入提取物的PBS溶液10μL,使提取物的终浓度为100μg/mL,10μg/mL,1μg/mL, 培养48h后, 每孔加入MTT溶液(5 mg/mL)10μL,继续在培养箱中孵育4h,倾去上清液后,每孔加入DMSO100μL,振荡后用酶标仪于570nm处测定各孔吸光度值。同时设定空白组(以同体积的PBS代替提取物),根据下面公式计算细胞存活率(Cell viability)=(提取物组OD值/空白组OD值)×100%。
1、大果榕根提取物对成骨细胞增殖的影响
实验结果见表1。
表1大果榕根各极性部位对成骨细胞增殖的影响
注:1、与对照组比较*P<0.05, ** P<0.01, *** P<0.001
实验结果表明, 大果榕根的乙醇部位和水相部位在三个浓度下对OB细胞都具有明显的促增殖作用。
2、大果榕茎提取物对成骨细胞增殖的影响
实验结果见表2。
表2大果榕茎各极性部位对成骨细胞增殖的影响
注:1、与对照组比较*P<0.05, ** P<0.01, *** P<0.001
实验结果表明, 大果榕茎的乙醇粗提物、石油醚部位、氯仿部位、乙酸乙酯部位、水相部位在三个浓度下都有较好的促进成骨细胞增殖的作用。
3、大果榕叶提取物对成骨细胞增殖的影响
实验结果见表3。
表3 大果榕叶各极性部位部位对成骨细胞增殖的影响
注:1、与对照组比较*P<0.05, ** P<0.01, *** P<0.001
结果表明大果榕叶的乙醇提取物、乙酸乙酯和水相部位在100μg/mL浓度条件下对成骨细胞具有促增殖作用。
二、大果榕根、茎、叶各部位醇粗提物体内药效学实验实施例
1. 实验方法:
1.1 剂量设计与分组:三个实验组的剂量分别为1000、600、400mg/kgBW;另设去势模型对照、雌二醇阳性对照及假手术阴性对照组。
1. 2 卵巢摘除术:
首先经大鼠腹腔注射50mg/kgBW戊巴比妥钠溶液麻醉,中下腹部去毛用碘酒感和酒精进行局部消毒后,沿腹壁正中线做1cm左右切口对大鼠实施去势手术,摘除双侧卵巢。另取一组大鼠手术同上但不摘除双侧卵巢,作假手术对照。
1.3 动物分组:
将手术动物根据体重随机分为三个实验组和两个对照组,即高剂量组、中剂量组、低剂量组、去势模型对照、雌二醇阳性对照,另设假手术阴性对照,每组10只动物单笼饲养。 三个实验组按设计量以1ml/100gBW经口灌胃给予受试物,假手术阴性对照及去势模型对照以等量去离子水灌胃;雌二醇阳性对照给予剂量为2 mg/kgBW。全部实验动物均饮用去离子水,每周称重一次,实验周期为12周。
1.4 测定:
动物喂养12周后断头处死, 用SD-1000骨密度仪,测量大鼠股骨中点及股骨远心端的骨密度。
2. 大果榕根、茎、叶各部位醇粗提物对大鼠骨密度的影响:
实验结果表明, 与模型对照组比较,大果榕根、茎、叶各部位醇粗提物中和高剂量组均显著提高大鼠股骨远心端骨密度值和骨中点骨密度值 (p<0.05)。
以上所述仅是本发明的优选实施方式,应当指出,对于本技术领域的普通技术人员来说,在不脱离本发明技术原理的前提下,还可以做出若干改进和润饰,这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。
Claims (4)
1.一种大果榕提取物在制备治疗骨质疏松药物中的应用,所述大果榕提取物是将大果榕原料烘干并粉碎成粉末,然后用乙醇回流提取,过滤提取液,减压回收尽溶剂,获得浸膏状醇粗提物,醇粗提物加水稀释,再用有机溶剂萃取,将萃取液或萃取后剩余的水溶液浓缩至浸膏状,真空干燥得到的粉末即为大果榕提取物;所述大果榕原料是指大果榕的根、茎或叶;所述有机溶剂是石油醚、氯仿或乙酸乙酯。
2.根据权利要求1所述的大果榕提取物在制备治疗骨质疏松药物中的应用,其特征在于:所述治疗骨质疏松药物是将大果榕提取物与常规辅料配合,采用现有工艺制得的临床上允许的内用制剂。
3.根据权利要求2所述的大果榕提取物在制备治疗骨质疏松药物中的应用,其特征在于:所述常规辅料是溶剂、崩解剂、矫味剂、防腐剂、着色剂、粘合剂、润滑剂、润湿剂、增稠剂、增溶剂或基质。
4.根据权利要求2所述的大果榕提取物在制备治疗骨质疏松药物中的应用,其特征在于:所述内用制剂是散剂、颗粒剂、片剂、胶囊剂、丸剂、口服液、喷雾剂、静脉注射剂、肌肉注射剂、吸入剂或凝胶剂。
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大果榕茎的化学成分;邵泰明等;《第六届海南省科技论坛"医药科技创新与药品质量安全"专题论坛、海南省药学会2012年学术年会》;20121231;152-156 * |
邵泰明等.大果榕茎的化学成分.《第六届海南省科技论坛"医药科技创新与药品质量安全"专题论坛、海南省药学会2012年学术年会》.2012,152-156. |
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