CN102762220A - 人抗淀粉样蛋白抗体、组合物、方法和用途发明背景 - Google Patents

人抗淀粉样蛋白抗体、组合物、方法和用途发明背景 Download PDF

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CN102762220A CN2008801210033A CN200880121003A CN102762220A CN 102762220 A CN102762220 A CN 102762220A CN 2008801210033 A CN2008801210033 A CN 2008801210033A CN 200880121003 A CN200880121003 A CN 200880121003A CN 102762220 A CN102762220 A CN 102762220A
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H·姜
G·拉赫纳桑
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Abstract

本发明涉及至少一种新型人抗淀粉样蛋白抗体，包括编码至少一种抗淀粉样蛋白抗体的分离的核酸、载体、宿主细胞、转基因动物或植物以及制备和使用它们的方法，包括治疗组合物、方法和装置。

Description

人抗淀粉样蛋白抗体、组合物、方法和用途发明背景
优先权申请
本申请要求于2007年10月15日提交的美国临时专利申请号60/979,954的优先权并将该专利全文以引用的方式并入本文。
背景技术
本发明涉及对至少一种β-淀粉样蛋白(淀粉样蛋白)或其片段有特异性的抗体，包括其特定部分或变体在内，以及抗独特型抗体，和编码这种抗淀粉样蛋白抗体的核酸、互补核酸、载体、宿主细胞，及其制备和使用方法，包括治疗制剂、给药和装置在内。
相关领域
阿尔茨海默病(AD)是退行性脑疾病，其临床特征是渐进性的记忆、认知、推理、判断和情感稳定性的丧失，这种丧失会逐渐导致重度精神衰退并最终死亡。AD是老年人中进行性精神障碍(痴呆)的非常常见的病因，并且被认为是美国第四大最常见的医学死因。已经在世界范围内的人种和种族中观察到AD，并且AD代表了当前和将来的主要公共健康问题。据估计仅在美国该疾病当前影响约2到3百万人。AD目前是不能治愈的。目前已知没有治疗方法能够有效防止AD或逆转其症状和病程。
患有AD的个体的脑显示出称作老年(或淀粉样蛋白)斑、淀粉样蛋白血管病(淀粉样蛋白在血管中沉积)和神经原纤维缠结的特征性病变。通常可在AD患者中在对于记忆和认知功能重要的人脑几个区域中发现大量这些病变，尤其是淀粉样蛋白斑和神经原纤维缠结。在多数没有临床AD的老年人的脑中也发现较少数的处于更局限的解剖学分布的这些病变。患有21号染色体三体性(唐氏综合征)、弥散性Lewy体病和具有荷兰型遗传性脑出血伴淀粉样变性(HCHWA-D)的个体的大脑也是以淀粉样蛋白斑和淀粉样蛋白血管病为特征。
淀粉样蛋白斑的主要组分是多种淀粉样蛋白-β(Aβ)肽，它们由β-淀粉样蛋白前体蛋白质(APP)的切割产生。尽管在过去在科学上关于斑和缠结是阿尔茨海默病的原因还是仅为阿尔茨海默病的结果方面存在着激烈的争论，但最近的发现表明淀粉样蛋白斑是病因前体或者因子。具体来讲，已经发现Aβ肽的产生可由编码淀粉样蛋白前体蛋白质的基因的突变所致，该淀粉样蛋白前体蛋白质当被正常加工时是不会不产生Aβ肽的。对淀粉样蛋白前体蛋白质基因中导致家族性、早发作性阿尔茨海默病的突变的鉴定，是淀粉样蛋白代谢为该疾病致病过程的重要事件的最有力证明。目前认为，APP蛋白质的正常(非致病性)加工是通过“α-分泌酶”切割来进行，α-分泌酶在所述蛋白质的Aβ肽区域的氨基酸16和17之间切割。还据信，致病性加工部分上是通过“β-分泌酶”进行，β-分泌酶在所述前体蛋白质的Aβ肽区域的氨基末端切割。还认为β淀粉样蛋白与其他神经障碍和某些心血管疾病潜在相关。
因此，需要提供克服一个或多个这些问题的抗淀粉样蛋白抗体或片段，以及对已知的抗体或其片段的改进。
发明内容
本发明提供分离的人的或嵌合的、人源化的和/或CDR移植的抗淀粉样蛋白抗体、免疫球蛋白、其片段、切割产物和其他特定部分和变体，以及抗淀粉样蛋白抗体组合物、编码核酸或互补核酸、载体、宿主细胞、组合物、制剂、装置、转基因动物、转基因植物，以及它们的制备和使用方法，这在本文中结合本领域已知的进行描述并得以实现。
本发明还提供至少一种如本文描述的分离的抗淀粉样蛋白抗体。根据本发明的抗体包括任何这样的含蛋白质或肽的分子，所述分子包含免疫球蛋白分子的至少一部分，例如但不限于，至少一个配体结合部分(LBP)，例如但不限于，重链或轻链的互补决定区(CDR)(如包含SEQ ID NO：42-47中的至少一者)或其配体结合部分、重链或轻链可变区(如包含SEQ IDNO：1-30中的至少一者的10-125个连续氨基酸的至少一者，或至少一个如表1中所述的FR1、FR2、FR3、FR4或其片段，还任选包含如2004年6月17日提交的PCT申请No.US04/19783的图1-41所提供的至少一个置换、插入或缺失)、重链或轻链恒定区(如包含SEQ ID NO：31-41中的至少一者的10-384个连续氨基酸的至少一者，或至少一个如表1所述的CH1、铰链1、铰链2、铰链3、铰链4、CH2、CH3或其片段，还任选包含如2004年6月17日提交的PCT申请No.US04/19783的图1-41所提供的至少一个置换、插入或缺失)、构架区，或它们的任何可整合进本发明抗体中的部分。本发明的抗体可包括或来源于任何哺乳动物，例如但不限于人、小鼠、兔、大鼠、啮齿类动物、灵长类动物或它们的任何组合等等。
在一个方面，本发明提供包含编码特异性抗淀粉样蛋白抗体(包括其至少一个特定序列、结构域、部分或变体)的多核苷酸、与该多核苷酸互补或杂交的分离的核酸分子。本发明还提供包含所述抗淀粉样蛋白抗体核酸分子的重组载体、包含此类核酸和/或重组载体的宿主细胞，以及制备和/或使用此类抗体核酸、载体和/或宿主细胞的方法。
本发明还提供至少一种抗淀粉样蛋白抗体或特定的部分或变体，其包含至少一种淀粉样蛋白结合序列和SEQ ID NO：1-41中的至少一者的至少10-384个连续氨基酸，或至少一个如表1中所述的FR1、FR2、FR3、FR4、CH1、铰链1、铰链2、铰链3、铰链4、CH2、CH3或其片段，还任选包含如2004年6月17日提交的PCT申请No.US04/19783的图1-41所提供的或本领域已知的至少一个置换、插入或缺失。优选的是，通过将O-连接的糖基化位点(例如但不限于Val-Xaa-Ser)转变为N-连接的糖基化位点(例如但不限于Asn-Xaa-Ser或Gln-Xaa-Ser)而使这种抗体在表达、纯化和/或稳定性方面得以改善。本发明为这种抗体提供这种改良(如丙氨酸)或o-糖基化位点(例如但不限于序列Val-Xaa-Ser)可替换为N-糖基化位点(例如Asn-Xaa-Ser或Gln-Xaa-Ser)，这可能是优选的，例如但不限于在序列表中给出的如下残基进行：Val-Xaa-Ser(O-糖基化位点)改变为N-糖基化位点Asn-Xaa-Ser或在本文所公开的或本领域已知的任何其他合适的位置进行。
本发明的至少一种抗体结合至少一种特定的表位，该表位是至少一种淀粉样蛋白蛋白质、亚基、片段、部分或它们的任何组合所特有的。所述至少一个表位可包含至少一个包含所述蛋白质的至少一个部分的抗体结合区域，所述表位优选由所述蛋白质的至少一个部分(例如但不限于，所述蛋白质的至少一个功能性结构域、胞外结构域、可溶性结构域、亲水性结构域、外部结构域或细胞质结构域，或它们的任何部分)的至少1-5个氨基酸构成。
所述至少一种抗体可任选包含至少一个互补性决定区(CDR)(例如，重链或轻链可变区的CDR1、CDR2或CDR3)的至少一个特定部分，并且任选还包含至少一个恒定或可变构架区或其任何部分。所述至少一种抗体氨基酸序列可进一步任选包含如本文所述或本领域已知的至少一个特定置换、插入或缺失。
本发明还提供如本文中描述的至少一种分离的抗淀粉样蛋白抗体，其中所述抗体具有至少一种活性，例如但不限于一种已知的淀粉样蛋白测定。因而根据已知的方法可以筛选抗淀粉样蛋白抗体的相应活性，例如但不限于，针对淀粉样蛋白的至少一种生物活性。
本发明进一步提供至少一种针对本发明的至少一种淀粉样蛋白抗体的淀粉样蛋白抗独特型抗体。抗独特型抗体包括任何这样的包含蛋白质或肽的分子，所述分子包含免疫球蛋白分子的至少一部分，例如但不限于至少一个配体结合部分(LBP)(例如但不限于重链或轻链的互补决定区(CDR)或其配体结合部分)、重链或轻链可变区、重链或轻链恒定区、构架区或它们的任何可整合进本发明的抗体中的部分。本发明的抗体可包括或来源于任何哺乳动物，例如但不限于，人、小鼠、兔、大鼠、啮齿类动物、灵长类动物等。
在一个方面，本发明提供包含编码至少一种淀粉样蛋白抗独特型抗体(包括其至少一个特定序列、结构域、部分或变体)的多核苷酸、与该多核苷酸互补或杂交的分离的核酸分子。本发明进一步提供包含所述淀粉样蛋白抗独特型抗体编码核酸分子的重组载体、包含此类核酸和/或重组载体的宿主细胞以及制备和/或使用此类抗独特型抗体核酸、载体和/或宿主细胞的方法。
本发明还提供至少一种用于在宿主细胞中表达至少一种抗淀粉样蛋白抗体或淀粉样蛋白抗独特型抗体的方法，其包括如本文所述在其中至少一种抗淀粉状抗体以可检测和/或可回收的量表达的条件下培养宿主细胞。
本发明还提供至少一种组合物，其包含(a)如本文所述的分离的抗淀粉样蛋白抗体编码核酸和/或抗体；和(b)合适的载体或稀释剂。根据已知载体或稀释剂，载体或稀释剂可任选为可药用的。该组合物可任选进一步包含至少一种另外的化合物、蛋白质或组合物。
本发明还提供至少一种抗淀粉样蛋白抗体的方法或组合物，其用于在细胞、组织、器官、动物或患者中和/或在如本领域所知和/或如本文所述的关联状况发展之前、之后或期间施用治疗有效量，以调节或治疗至少一种淀粉样蛋白相关状况。
本发明还提供至少一种递送治疗或预防有效量的至少一种根据本发明的抗淀粉样蛋白抗体的组合物、装置和/或方法。
本发明进一步提供至少一种抗淀粉状抗体的方法或组合物，其用于在细胞、组织、器官、动物或患者中和/或在如本领域所知和/或如本文所述的关联状况发展之前、之后或期间诊断至少一种淀粉样蛋白相关状况。
本发明还提供至少一种递送至少一种根据本发明的抗淀粉样蛋白抗体的组合物、装置和/或方法，以进行诊断。
在一个方面，本发明提供至少一种分离的哺乳动物抗淀粉样蛋白抗体，其包含至少一个包含SEQ ID NO：48A-I和/或49A-M中的至少一者的可变区。
在另一方面，本发明提供至少一种分离的哺乳动物抗淀粉样蛋白抗体，其包含(i)SEQ ID NO：42-44的所有重链互补决定区(CDR)氨基酸序列；或(ii)SEQ ID NO：45-47的所有轻链CDR氨基酸序列。
在另一方面，本发明提供至少一种分离的哺乳动物抗淀粉样蛋白抗体，其包含至少一个具有SEQ ID NOS：42-47中的至少一者的氨基酸序列的重链或轻链CDR。
在一个方面，本发明提供至少一种分离的哺乳动物抗淀粉样蛋白抗体，其包含至少一个包含SEQ ID NO：59或60的可变区。
在另一方面，本发明提供至少一种分离的哺乳动物抗淀粉样蛋白抗体，其包含(i)SEQ ID NO：53-55的所有重链互补决定区(CDR)氨基酸序列；或(ii)SEQ ID NO：56-58的所有轻链CDR氨基酸序列。
在另一方面，本发明提供至少一种分离的哺乳动物抗淀粉样蛋白抗体，其包含至少一个具有SEQ ID NO：53-58中的至少一者的氨基酸序列的重链或轻链CDR。
在一个方面，本发明提供至少一种分离的哺乳动物抗淀粉样蛋白抗体，其包含至少一个人CDR，其中所述抗体特异性地结合至少一个表位，所述表位选自SEQ ID NO：50的氨基酸2-7、3-8、33-42或34-40。
在另一方面，本发明提供至少一种分离的哺乳动物抗淀粉样蛋白抗体，其包含至少一个人CDR，其中所述抗体特异性结合至少一个包含SEQID NO：50的至少1-3至整个氨基酸序列的表位。
所述至少一种抗体还可任选具有至少一种下列性质：(i)以选自至少10-9M、至少10-10M、至少10-11M或至少10-12M中的至少一者的亲和力结合淀粉样蛋白；和/或(ii)基本中和至少一种淀粉样蛋白蛋白质的至少一种活性。还提供的是编码至少一种分离的哺乳动物抗淀粉样蛋白抗体的分离的核酸；包含该分离的核酸的分离的核酸载体，和/或包含该分离的核酸的原核或真核宿主细胞。宿主细胞可任选为选自COS-1、COS-7、HEK293、BHK21、CHO、BSC-1、Hep G2、653、SP2/0、293、HeLa、骨髓瘤或淋巴瘤细胞或它们的任何衍生细胞、无限增殖化细胞或转化细胞中的至少一者。还提供的是生产至少一种抗淀粉样蛋白抗体的方法，其包括在使得该淀粉样蛋白抗体以可检测或可回收的量表达的体外、体内或原位条件下翻译该抗体编码核酸。
还提供的是包含至少一种分离的哺乳动物抗淀粉样蛋白抗体和至少一种可药用载体或稀释剂的组合物。该组合物可任选还包含有效量的至少一种选自以下至少一者的化合物或蛋白质：可检测的标记或报道分子、抗感染药物、心血管(CV)系统药物、中枢神经系统(CNS)药物、自主神经系统(ANS)药物、呼吸道药物、胃肠(GI)道药物、激素药物、用于体液或电解质平衡的药物、血液学药物、抗瘤药、免疫调节药物、眼用、耳用或鼻用药物、局部用药物、营养药物等、TNF拮抗剂、抗风湿药、肌肉松弛药、麻醉药、非类固醇抗炎药(NTHE)、止痛药、麻醉剂、镇静剂、局部麻醉剂、神经肌肉阻滞剂、抗微生物剂、抗牛皮癣剂、皮质类固醇、合成代谢类固醇、促红细胞生成素、免疫剂(immunization)、免疫球蛋白、免疫抑制剂、生长激素、激素替代药、放射性药物、抗抑郁药、抗精神病药、兴奋剂、哮喘药物、β激动剂、吸入类固醇、肾上腺素或类似物、细胞因子或细胞因子拮抗剂。
本发明还提供特异结合本发明的至少一种分离的哺乳动物抗淀粉样蛋白抗体的抗独特型抗体或片段。
还提供的是在细胞、组织、器官或动物中诊断或治疗淀粉样蛋白相关状况的方法，包括
(a)将包含有效量的至少一种本发明的分离的哺乳动物抗淀粉样蛋白抗体的组合物与所述细胞、组织、器官或动物接触或给予所述细胞、组织、器官或动物。该方法可任选还包括每1-24小时、1-7天、1-52周、1-24个月、1-30年(或其中的任何范围或数值)使用0.001-50mg/千克细胞、组织、器官或动物的有效量。该方法可任选还包括通过至少一种选自以下的方式进行接触或给予，所述方式选自：肠胃外、皮下、肌内、静脉内、关节内、支气管内、腹内、囊内、软骨内、腔内、体腔内、小脑内、脑室内、结肠内、颈内、胃内、肝内、心肌内、骨内、骨盆内、心包内、腹膜内、胸膜内、前列腺内、肺内、直肠内、肾内、视网膜内、脊柱内、滑膜内、胸内、子宫内、膀胱内、病灶内、快速浓注(bolus)、阴道、直肠、口腔、舌下、鼻内或经皮。该方法可任选进一步包括在(a)接触或给予之前、同时或之后，给予至少一种包含有效量的至少一种选自以下至少一者的化合物或蛋白质的组合物：抗感染药物、心血管(CV)系统药物、中枢神经系统(CNS)药物、自主神经系统(ANS)药物、呼吸道药物、胃肠(GI)道药物、激素药物、用于体液或电解质平衡的药物、血液学药物、抗肿瘤药物、免疫调节药物、眼用药物、耳用药物或鼻用药物、局部用药物、营养药物等。该方法可任选还包括在(a)接触或给予之前、同时或之后给予至少一种包含有效量的至少一种选自以下至少一者的化合物或蛋白质的组合物：可检测标记物或报道物、TNF拮抗剂、抗风湿药、肌肉松弛剂、麻醉药、非类固醇抗炎药(NTHE)、止痛药、麻醉剂、镇静剂、局部麻醉剂、神经肌肉阻滞剂、抗微生物剂、抗牛皮癣剂、皮质类固醇、合成代谢类固醇、促红细胞生成素、免疫剂、免疫球蛋白、免疫抑制剂、生长激素、激素替代药、放射性药物、抗抑郁药、抗精神病药、兴奋剂、哮喘药物、β激动剂、吸入类固醇、肾上腺素或类似物、细胞因子或细胞因子拮抗剂。
还提供的是包含至少一种本发明的分离的哺乳动物抗淀粉样蛋白抗体的医疗器械，其中所述器械适用于通过至少一种选自以下的方式接触或给予所述至少一种抗淀粉样蛋白抗体：肠胃外、皮下、肌内、静脉内、关节内、支气管内、腹内、囊内、软骨内、腔内、体腔内、小脑内、脑室内、结肠内、颈内、胃内、肝内、心肌内、骨内、骨盆内、心包内、腹膜内、胸膜内、前列腺内、肺内、直肠内、肾内、视网膜内、脊柱内、滑膜内、胸内、子宫内、膀胱内、病灶内、快速浓注(bolus)、阴道、直肠、口腔、舌下、鼻内或透皮。
还提供的是用于人用药物或诊断用途的制品，其包括包装材料和容器，容器装有溶液或冻干形式的至少一种本发明的分离的哺乳动物抗淀粉样蛋白抗体。所述制品可任选包括将所述容器作为肠胃外、皮下、肌内、静脉内、关节内、支气管内、腹内、囊内、软骨内、腔内、体腔内、小脑内、脑室内、结肠内、颈内、胃内、肝内、心肌内、骨内、骨盆内、心包内、腹膜内、胸膜内、前列腺内、肺内、直肠内、肾内、视网膜内、脊柱内、滑膜内、胸内、子宫内、膀胱内、病灶内、快速浓注、阴道、直肠、口腔、舌下、鼻内或经皮递送装置或系统的组件。
还提供的是用于生产本发明的至少一种分离的哺乳动物抗淀粉样蛋白抗体的方法，其包括提供能以可回收的量表达该抗体的宿主细胞或转基因动物或转基因植物或植物细胞。本发明还提供至少一种由上述方法制备的抗淀粉样蛋白抗体。
本发明进一步提供本文描述的任何发明。
具体实施方式
本发明提供分离的、重组的和/或合成的抗淀粉样蛋白人、灵长类动物、啮齿类动物、哺乳动物、嵌合、人源化或CDR移植抗体和针对所述抗体的淀粉样蛋白抗独特型抗体，以及包含至少一种编码至少一种抗淀粉样蛋白抗体或抗独特型抗体的多核苷酸的组合物和编码核酸分子。本发明还包括但不限于，制备和使用此类核酸和抗体及抗独特型抗体的方法，包括诊断和治疗组合物、方法和装置。
本文所用的“抗β-淀粉样蛋白抗体”、“抗淀粉样蛋白抗体”、“抗淀粉样蛋白抗体部分”或“抗淀粉样蛋白抗体片段”和/或“抗淀粉样蛋白抗体变体”等包括任何这样的含蛋白质或肽的分子，所述分子包含免疫球蛋白分子的至少一部分，例如但不限于，重链或轻链的至少一个互补决定区(CDR)或其配体结合部分、重链或轻链可变区、重链或轻链恒定区、构架区或它们的任何部分，或淀粉样蛋白受体或结合蛋白的至少一个可整合进本发明抗体中的部分。此类抗体还任选影响特定配体，例如但不限于其中此类抗体体外、原位和/或体内调节、减少、增加、拮抗、激动、缓和、减轻、阻断、抑制、消除和/或干扰至少一种淀粉样蛋白活性或结合，或淀粉样蛋白受体活性或结合。作为非限制性例子，本发明的合适的抗淀粉样蛋白抗体、特定部分或变体可结合至少一种淀粉样蛋白或其特定部分、变体或结构域。合适的抗淀粉样蛋白抗体、特定部分或变体还可任选影响至少一种淀粉样蛋白活性或功能，例如但不限于RNA、DNA或蛋白质合成、淀粉样蛋白释放、淀粉样蛋白受体信号传导、膜淀粉样蛋白切割、淀粉样蛋白活性、淀粉样蛋白产生和/或合成。
抗体可包括至少一个CDR、至少一个可变区、至少一个恒定区、至少一条重链(如γ1、γ2、γ3、γ4、μ、α1、α2、δ、ε)、至少一条轻链(如κ和λ)或它们的任何部分或片段中的一者或多者，并且可还包含链间和链內二硫键、铰链区、可由铰链区分开的糖基化位点，以及重链和轻链。轻链通常具有约25Kd的分子量，重链通常在50K-77Kd的范围内。轻链可以两种不同的形式或同种型(κ和λ)存在，其可与任何重链类型组合。所有轻链都具有至少一个可变区和至少一个恒定区。IgG抗体被认为是典型的抗体结构，在轻链中具有两个链內二硫键(一个在可变区，一个在恒定区)，在重链中具有4个链內二硫键，并且这些键包围约60-70个氨基酸的肽环区，该环区在链中构成约110个氨基酸的“结构域”。IgG抗体可以分成四类：IgG1、IgG2、IgG3和IgG4。每种免疫球蛋白类型具有不同的功能。下表概述每种免疫球蛋白类型和亚类的物理化学性质的报导例子。
  性质   IgG1   IgG2   IgG3   IgG4   IgM   IgA1   IgA2   SIgA   IgD   IgE
  重链   γ1   γ1   γ1   γ1   μ   α1   α2   α1/α2   δ   E
  平均血清浓度(mg/ml)   9   3   1   0.5   1.5   3.0   0.5   0.05   0.03   0.00005
  沉降常数   7s   7s   7s   7s   19s   7s   7s   11s   7s   8s
  分子量(X103)   146   146   170   146   970   160   160   385   184   188
  半衰期(天)   5-30   5-30   2-10   5-30   5-15   2-10   2-10   1-10   1-10   1-10
  ％血管内分布   45   45   45   45   80   42   42   痕量   75   50
  碳水化合物(％)   2-3   2-3   2-3   2-3   12   7-11   7-11   7-11   9-14   12
下表概述了人抗体类型和亚类的抗体效应子功能的非限制性例子。
  效应子功能   IgG1   IgG2   IgG3   IgG4   IgM   IgA   IgD   IgE
  补体结合   ++   +   +++   -   +++   -   -   -
  胎盘转移   +   +   +   +   -   -   -   -
  与Staph A结合   +++   +++   -   +++   -   -   -   -
  与Strep G结合   +++   +++   +++   +++   -   -   -   -
因此，可基于具体治疗或诊断用途所期望的理想特性和功能(例如但不限于血清半衰期、血管內分布、补体结合等等)，来选择抗体或其片段的类型供根据本发明进行使用。
抗体多样性通过至少5种机制产生，包括(1)使用多个编码抗体的各部分的基因；(2)体细胞突变，如B细胞个体发生期间的原始V基因突变，以在不同的B细胞克隆中产生不同的V基因；(3)体细胞重组，如B细胞个体发生期间基因区段J1-Jn重组而连接V-区基因的主要部分；(4)基因转变，其中来自多个假V区的DNA片段可被拷贝至V区中以改变DNA序列；以及(5)核苷酸添加，如当V和J区在连接前被切割时，额外的核苷酸可以插入以编码另外的氨基酸。非限制性例子包括，但不限于(i)来自种系的Vκ、J和Cκ区选择/重组至B细胞克隆以产生k链；(ii)来自种系的Vλ、J和Cλ区选择/重组至B细胞克隆以产生λ链；(iii)VH、D1-D30和JH1-JH6基因选择/重组以形成编码重链可变区的功能VDJ基因。上述机制以协同方式起作用而产生抗体多样性和特异性。
术语“抗体”还旨在涵盖抗体、其消化片段、特定部分或变体，包括抗体模拟物或包含模拟抗体或其特定片段或部分的结构和/或功能的抗体部分，包括单链抗体及其片段。功能片段包括结合哺乳动物淀粉样蛋白的抗原结合片段。例如，本发明涵盖能够结合淀粉样蛋白或其部分的抗体片段，包括但不限于，Fab片段(如通过木瓜蛋白酶消化得到)、Fab’片段(如通过胃蛋白酶消化和部分还原得到)和F(ab’)2片段(如通过胃蛋白酶消化得到)、facb片段(如通过纤溶酶消化得到)、pFc’片段(如通过胃蛋白酶或纤溶酶消化得到)、Fd片段(如通过胃蛋白酶消化、部分还原以及重聚集得到)、Fv或scFv片段(如通过分子生物学技术得到)(见，例如Colligan，Immunology，同上)。
通过本领域中已知和/或本文描述的酶促切割、合成或重组技术可制备这些片段。使用其中在天然终止位点上游引入了一个或多个终止密码子的抗体基因也可以产生多种截短形式的抗体。例如，可以将编码F(ab’)2重链部分的组合基因设计成包括编码重链的CH1结构域和/或铰链区的DNA序列。抗体的各个部分可通过常规技术用化学方法连接在一起，或可使用遗传工程技术制备为连续蛋白质。
本文所用的术语“人抗体”指其中基本上蛋白质的每个部分(如CDR、构架区、CL结构域、CH结构域(如CH1、CH2、CH3)、铰链区(VL、VH))在人中基本上是非免疫原性的，仅具有小的序列改变或变异。类似地，指明属灵长类(猴、狒狒、黑猩猩等)、啮齿类(小鼠、大鼠、兔、豚鼠、仓鼠等)和其他哺乳动物的抗体表示这些种、亚属、属、亚科、科的特异抗体。此外，本发明的嵌合抗体可包括上述抗体的任何组合。这些改变或变异任选且优选相对于未经修饰的抗体而言保持或减少在人或其他物种中的免疫原性。因此，人抗体不同于嵌合抗体或人源化抗体。应当指出的是，人抗体可由能够表达功能性重排的人免疫球蛋白(例如重链和/或轻链)基因的非人动物或原核或真核细胞产生。此外，当人抗体是单链抗体时，它可包含在天然人抗体中不存在的连接肽。例如，Fv可包含连接重链可变区和轻链可变区的连接肽，例如2至约8个甘氨酸或其他氨基酸残基。此类连接肽被认为是人源的。
还可以使用双特异性抗体、异种特异性抗体、异种缀合抗体或类似抗体，它们是对至少两种不同抗原具有结合特异性的单克隆的、优选人或人源化的抗体。在本情况中，其中一种结合特异性为针对至少一种淀粉样蛋白的，另一种结合特异性针对任何其他抗原。制备双特异性抗体的方法是本领域已知的。通常，双特异性抗体的重组产生是基于两个免疫球蛋白重链-轻链对的共表达，其中两条重链具有不同的特异性(Milstein和Cuello，Nature 305：537(1983))。由于免疫球蛋白重链和轻链的随机分配，这些杂交瘤(四源杂交瘤(quadroma))产生可能的10种不同抗体分子的混合物，其中仅一种具有正确的双特异性结构。正确分子的纯化(通常通过亲和层析步骤进行)相当繁琐，并且产物得率低。类似方法例如在本领域公知的如下文献中有所公开：WO 93/08829、美国专利No.6210668、No.6193967、No.6132992、No.6106833、No.6060285、No.6037453、No.6010902、No.5989530、No.5959084、No.5959083、No.5932448、No.5833985、No.5821333、No.5807706、No.5643759、No.5601819、No.5582996、No.5496549、No.4676980、WO 91/00360、WO92/00373、EP 03089、Traunecker等人，EMBO J.10：3655(1991)、Suresh等人，Methods in Enzymology 121：210(1986)。
可用于本发明的方法和组合物中的抗淀粉样蛋白抗体(也称作淀粉样蛋白抗体)可任选特征在于与淀粉样蛋白高亲和力结合以及任选且优选具有低毒性。具体地讲，本发明的抗体、特定片段或变体(其中各个组分，例如可变区、恒定区和构架区单独和/或共同地任选并优选具有低免疫原性)可用于本发明中。可用于本发明的抗体任选特征在于它们能长期用于治疗患者，可测量地减轻症状并具有低毒性和/或可接受的毒性。低的或可接受的免疫原性和/或高亲和力以及其他合适的特性，可有助于实现治疗结果。“低免疫原性”在文中定义为在低于约75％，或优选低于约50％的受治患者中产生显著的HAHA、HACA或HAMA应答，和/或在受治患者中引起低滴度(以双抗原酶免疫测定法测量小于约300，优选小于约100)(Elliott等人，Lancet 344：1125-1127(1994)，将其以引用的方式并入本文)。
实用性
本发明的分离核酸可用于产生至少一种抗淀粉样蛋白抗体或其特定变体，其可以用于在细胞、组织、器官或动物(包括哺乳动物和人)中测量或实现，以诊断、监控、调节、治疗、减轻、帮助预防至少一种淀粉样蛋白病症的发生或减轻其症状，所述淀粉样蛋白病症选自但不限于免疫障碍或疾病、心血管障碍或疾病、感染性、恶性和/或神经性障碍或疾病，或其他已知的或特定的淀粉样蛋白相关状况中的至少一者。
这种方法可包括向需要对症状、效果或机制进行这种调节、治疗、减轻、预防或减少的细胞、组织、器官、动物或患者给予有效量的含有至少一种抗淀粉样蛋白抗体的组合物或药物组合物。该有效量可包括每单次给予(如快速浓注)、多次给予或连续给予约0.001至500mg/kg的量，或每单次给予、多次给予或连续给予实现0.01-5000μg/ml的血清浓度，或其中的任何有效范围或值，该有效量可通过本文所描述的或相关领域中已知的方法进行给予和测定。
引用
本文引用的所有出版物或专利都以引用方式全文并入本文中，因为它们显示了本发明申请时的技术发展水平和/或提供本发明的描述和实现。出版物指任何科学出版物或专利公布，或可以任何媒体形式获得的任何其他信息，所述媒体形式包括所有记录形式、电子形式或印刷形式。下列参考文献以引用方式全文并入本文中：Ausubel等人(编辑)，CurrentProtocols in Molecular Biology，John Wiley&Sons，Inc.，NY，NY(1987-2001)；Sambrook等人，Molecular Cloning：A LaboratoryManual，第2版，Cold Spring Harbor，NY(1989)；Harlow和Lane，antibodies，a Laboratory Manual，Cold Spring Harbor，NY(1989)；Colligan等人(编辑)，Current Protocols in Immunology，JohnWiley&Sons，Inc.，NY(1994-2001)；Colligan等人，CurrentProtocols in Protein Science，John Wiley&Sons，NY，NY，(1997-2001)。
本发明的抗体
本发明的至少一种抗淀粉样蛋白抗体可任选通过细胞系、混合细胞系、无限增殖化细胞或无限增殖化细胞的克隆群体来生产，这是本领域所熟知的。参见，例如，Ausubel等人(编辑)，Current Protocols inMolecular Biology，John Wiley&Sons，Inc.，NY，NY(1987-2001)；Sambrook等人，Molecular Cloning：A Laboratory Manual，第2版本，Cold Spring Harbor，NY(1989)；Harlow和Lane，antibodies，aLaboratory Manual，Cold Spring Harbor，NY(1989)；Colligan等人(编辑)，Current Protocols in Immunology，John Wiley&Sons，Inc.，NY(1994-2001)；Colligan等人，Current Protocols in ProteinScience，John Wiley&Sons，NY，NY，(1997-2001)，这是本领域所熟知的。
可针对适宜的免疫原性抗原产生对人淀粉样蛋白或其片段特异的人抗体，所述免疫原性抗原为例如分离的和/或淀粉样蛋白或其部分(包括合成分子，例如合成肽)，例如但不限于SEQ ID NO：50的氨基酸1-7、1-40、31-42和36-40中的至少一者。可以类似地产生其他特异或一般性的哺乳动物抗体。使用任何适宜的技术可进行免疫原性抗原的制备和单克隆抗体的产生。
在一种方法中，杂交瘤是通过合适的无限增殖细胞系(如骨髓瘤细胞系，例如但不限于，Sp2/0、Sp2/0-AG14、NS0、NS1、NS2、AE-1、L.5、＞243、P3X63Ag8.653、Sp2 SA3、Sp2 MAI、Sp2 SS1、Sp2 SA5、U937、MLA 144、ACT IV、MOLT4、DA-1、JURKAT、WEHI、K-562、COS、RAJI、NIH 3T3、HL-60、MLA 144、NAMAIWA、NEURO 2A等，或异型骨髓瘤(heteromyloma)，其融合产物，或由其衍生的任何细胞或融合细胞，或本领域已知的任何其他合适的细胞系，参见，例如www.atcc.org，www.lifetech.com.等)与产抗体细胞融合来产生，所述产抗体细胞为例如(但不限于)分离的或克隆的脾细胞、外周血细胞、淋巴细胞、扁桃体细胞或其他免疫细胞或包含B细胞的细胞，或任何这样的其他细胞，它们将重链或轻链恒定序列或可变序列或构架序列或CDR序列表达为内源的或异源的核酸、为重组或内源的、病毒、细菌、藻类、原核生物、两栖动物、昆虫、爬行动物、鱼、哺乳动物、啮齿类动物、马、绵羊、山羊、羊、灵长类动物、真核生物、基因组DNA、cDNA、rDNA、线粒体DNA或RNA、叶绿体DNA或RNA、hnRNA、mRNA、tRNA、单链、双链或三链的、杂交的等或它们的任何组合。参见例如Ausubel(同上)和Colligan，Immunology(同上)，第2章，将其以引用的方式并入本文。
产抗体细胞还可从人或已用所关注的抗原免疫过的其他合适动物的外周血，或优选脾或淋巴结获得。任何其他合适的宿主细胞也可用于表达编码本发明的抗体、其特定片段或变体的异源或内源核酸。融合细胞(杂交瘤)或重组细胞可使用选择性培养条件或其他合适的已知方法进行分离，并且可通过有限稀释或细胞分选或其他已知方法进行克隆。产生具有所需特异性的抗体的细胞可通过合适的测定法(例如ELISA)进行选择。
其他产生或分离具有所需特异性的抗体的合适方法也可以使用，包括但不限于从肽或蛋白质文库(例如但不限于，噬菌体、核糖体、寡核苷酸、RNA、cDNA等展示文库；例如可从如下机构获得的：Cambridgeantibody Technologies，Cambridgeshire，UK；MorphoSys，Martinsreid/Planegg，DE；Biovation，Aberdeen，Scotland，UK；BioInvent，Lund，Sweden；Dyax Corp.，Enzon，Affymax/Biosite；Xoma，Berkeley，CA；Ixsys，参见，例如EP 368,684、PCT/GB91/01134、PCT/GB92/01755、PCT/GB92/002240、PCT/GB92/00883、PCT/GB93/00605、US 08/350260(5/12/94)、PCT/GB94/01422、PCT/GB94/02662、PCT/GB97/01835(CAT/MRC)、WO90/14443、WO90/14424、WO90/14430、PCT/US94/1234、WO92/18619、WO96/07754(Scripps)、WO96/13583、WO97/08320(MorphoSys)、WO95/16027(BioInvent)、WO88/06630、WO90/3809(Dyax)、US4,704,692(Enzon)、PCT/US91/02989(Affymax)、WO89/06283、EP 371998、EP 550 400(Xoma)、EP 229 046、PCT/US91/07149(Ixsys)；或随机产生的肽或蛋白质-US 5723323、5763192、5814476、5817483、5824514、5976862、WO 86/05803、EP 590 689(Ixsys，现为AppliedMolecular Evolution(AME)，这是本领域所熟知的)中选择重组抗体的方法，或者依赖免疫能够产生全套人抗体的转基因动物(例如SCID小鼠，Nguyen等人，Microbiol.Immunol.41：901-907(1997)；Sandhu等人，Crit.Rev.Biotechnol.16：95-118(1996)；Eren等人，Immunol.93：154-161(1998)，将它们以及相关的专利和申请以引用的方式并入本文)的方法，如本领域所知和/或如本文所描述的。此类技术包括(但不限于)核糖体展示(Hanes等人，Proc.Natl.Acad.Sci.USA，94：4937-4942(1997年五月)；Hanes等人，Proc.Natl.Acad.Sci.USA，95：14130-14135(1998年11月))；单细胞抗体生产技术(例如选择的淋巴细胞抗体法(“SLAM”)(美国专利No.5,627,052，Wen等人，J.Immunol.17：887-892(1987)；Babcook等人，Proc.Natl.Acad.Sci.USA 93：7843-7848(1996))；凝胶微滴和流式细胞术(Powell等人，Biotechnol.8：333-337(1990)；One Cell Systems，Cambridge，MA；Gray等人，J.Imm.Meth.182：155-163(1995)；Kenny等人，Bio/Technol.13：787-790(1995))；B-细胞选择(Steenbakkers等人，Molec.Biol.Reports 19：125-134(1994)；Jonak等人，ProgressBiotech，第5卷，In Vitro Immunization in Hybridoma Technology，Borrebaeck(编辑)，Elsevier Science Publishers B.V.，Amsterdam，Netherlands(1988))。
还可使用用于将非人或人抗体进行工程化或人源化的方法，这些方法是本领域所熟知的。一般来讲，人源化或工程化的抗体具有一个或多个来自非人来源的氨基酸残基，所述非人来源是例如(但不限于)小鼠、大鼠、兔、非人灵长类动物或其他哺乳动物。这些人氨基酸残基通常称为“输入”残基，它们一般取自已知人序列的“输入”可变结构域、恒定结构域或其他结构域。
还可使用用于将非人或人抗体进行工程化或人源化的方法，这些方法是本领域所熟知的。一般来讲，人源化或工程化的抗体具有一个或多个来自非人来源的氨基酸残基，所述非人来源是例如(但不限于)小鼠、大鼠、兔、非人灵长类动物或其他哺乳动物。这些人氨基酸残基通常称为“输入”残基，它们一般取自已知人序列的“输入”可变结构域、恒定结构域或其他结构域。
“人源化抗体”意指部分或全部由衍生自人抗体种系的氨基酸序列改变具有非人互补性决定区(CDR)的抗体的序列而组成的抗体。最简单的这种改变可简单地包括将人抗体的恒定区替代鼠恒定区，从而得到人/鼠嵌合体，其可以具有足够低的免疫原性而可被接受用于药物用途。
然而，优选的是，还通过目前本领域所熟知的技术将抗体的可变区甚至CDR进行人源化。将可变区的构架区替代为相应的人构架区，保留非人CDR基本上完整，或甚至将CDR用来源于人基因组的序列替代。在经遗传修饰的小鼠中产生完全人抗体，该小鼠的免疫系统已被改变成对应于人免疫系统。如上面提到的，采用该抗体的免疫特异性片段，包括代表单链形式的片段在内，对于在本发明方法中应用是足够的。
人源化抗体同样指这样的抗体，其含有人构架、至少一个来自非人抗体的CDR，并且其中存在的任何恒定区基本上与人免疫球蛋白恒定区相同，即至少约85-90％，优选至少95％相同。因此，除了可能的CDR之外，人源化抗体的所有部分都与一种或多种天然人免疫球蛋白序列的相应部分基本相同。例如，人源化免疫球蛋白将通常不涵盖嵌合小鼠可变区/人恒定区抗体。
对于在人治疗中的应用，人源化抗体具有至少三个优于非人和嵌合抗体的潜在优点：
1)因为效应子部分是人效应子部分，所以其可与人免疫系统的其他部分更好地相互作用(如，可更有效地通过补体依赖性细胞毒性(CDC)或抗体依赖性细胞毒性(ADCC)来破坏靶细胞)。
2)人免疫系统应该不会将人源化抗体的构架区或C区识别为外源的，因此针对这种注射的抗体的抗体应答应该小于针对完全外源的非人抗体或部分外源的嵌合抗体的抗体应答。
3)注射的非人抗体在人循环中的半衰期据报道比人抗体的半衰期短得多。注射的人源化抗体将具有与天然存在的人抗体基本相同的半衰期，从而使得可以较少地和较不频繁地给予剂量。
已知的人Ig序列有公开，例如，www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi；www.atcc.org/phage/hdb.html；www.sciquest.com/；www.abcam.com/；www.antibodyresource.com/onlinecomp.html；www.public.iastate.edu/～pedro/research_tools.html；www.mgen.uni-heidelberg.de/SD/IT/IT.html；www.whfreeman.com/immunology/CH05/kuby05.htm；www.library.thinkquest.org/12429/Immune/Antibody.html；www.hhmi.org/grants/lectures/1996/vlab/；www.path.cam.ac.uk/～mrc7/mikeimages.html；www.antibodyresource.com/mcb.harvard.edu/BioLinks/Immunology.html.www.immunologylink.com/；pathbox.wustl.edu/～hcenter/index.html；www.biotech.ufl.edu/～hcl/；www.pebio.com/pa/340913/340913.html；www.nal.usda.gov/awic/pubs/antibody/；www.m.ehime-u.ac.jp/～yasuhito/Elisa.html；www.biodesign.com/table.asp；www.icnet.uk/axp/facs/davies/links.html；www.biot ch.ufl.edu/～fccl/protocol.html；www.isac-net.org/sites_geo.html；aximtl.imt.uni-marburg.de/～rek/AEPStart.html；baserv.uci.kun.nl/～jraats/links1.html；www.recab.uni-hd.de/immuno.bme.nwu.edu/；www.mrc-cpe.cam.ac.uk/imt-doc/public/INTRO.html；www.ibt.unam.mx/vir/V_mice.html；imgt.cnusc.fr:8104/；www.biochem.ucl.ac.uk/～martin/abs/index.html；antibody.bath.ac.uk/；abgen.cvm.tamu.edu/lab/wwwabgen.html；www.unizh.ch/～honegger/AHOseminar/Slide01.html；www.cryst.bbk.ac.uk/～ubcg07s/；www.nimr.mrc.ac.uk/CC/ccaewg/ccaewg.htm；www.path.cam.ac.uk/～mrc7/humanisation/TAHHP.html；www.ibt.unam.mx/vir/structure/stat_aim.html；www.biosci.missouri.edu/smithgp/index.html；www.cryst.bioc.cam.ac.uk/～fmolina/Web-pages/Pept/spottech.html；www.jerini.de/fr_products.htm；www.patents.ibm.com/ibm.html，Kabat等人，Sequences of Proteinsof Immunological Interest，U.S.Dept.Health(1983)，如本领域所熟知。
如本领域所知，此类输入序列可用于减少免疫原性，或减少、增强或修饰结合性、亲和力、结合速率、解离速率、亲合力、特异性、半衰期或任何其他合适的特征。一般来讲，保留部分或全部非人或人CDR序列，而可变区和恒定区的非人序列用人或其他氨基酸置换。抗体还可任选是人源化的，保留对抗原的高度亲和力以及其他有利的生物学特性。为了实现该目标，可任选通过这样的过程来制备人源化抗体，该过程是用亲本序列和人源化序列的三维模型对亲本序列和各种构想的人源化产物进行分析。三维免疫球蛋白模型通常是可获得的，并且是为本领域的技术人员所熟悉的。有能说明并显示所选择的候选免疫球蛋白序列的可能三维构象结构的计算机程序可供使用。对这些显示结果进行检查，可以分析残基在候选免疫球蛋白序列的功能发挥中的可能作用，即分析影响候选免疫球蛋白与其抗原结合的能力的残基。以这种方式，可从共有序列和输入序列中选择FR残基并进行组合，从而可实现所需的抗体特征，例如对靶抗原的亲和力增加。通常，CDR残基直接且最显著地参与影响抗原结合。本发明抗体的人源化或工程化的可用任何已知的方法进行，例如但不限于下列文献中描述的那些方法：Winter(Jones等人，Nature 321：522(1986)；Riechmann等人，Nature 332：323(1988)；Verhoeyen等人，Science 239：1534(1988))，Sims等人，J.Immunol.151：2296(1993)；Chothia和Lesk，J.Mol.Biol.196：901(1987)，Carter等人，Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.89：4285(1992)；Presta等人，J.Immunol.151：2623(1993)、美国专利No：5723323、5976862、5824514、5817483、5814476、5763192、5723323、5,766886、5714352、6204023、6180370、5693762、5530101、5585089、5225539；4816567、PCT/：US98/16280、US96/18978、US91/09630、US91/05939、US94/01234、GB89/01334、GB91/01134、GB92/01755；WO90/14443、WO90/14424、WO90/14430、EP229246，将上述文献，包括其中引用的参考文献以引用的方式并入本文。
可通过缔合或共价键合(例如但不限于Cys-Cys二硫键)将本发明抗体的单体CH3-CH2-铰链-CH1序列与其他单体连接。抗体的各个部分可以是变化的，如本文所描述的以及本领域已知的。
可对抗体片段的CH3-CH2-铰链-CH1或铰链-CH1区域部分进行很大的修饰以形成根据本发明的变体，前提是与补救受体(salvage receptor)的结合得到保持。在这种变体中，可将一个或多个提供本发明融合分子不需要的结构特征或功能活性的天然位点除去。可通过例如置换或删除残基、将残基插入位点或将含有位点的部分截去来移除这些位点。这些插入的或置换的残基还可为改变的氨基酸，例如肽模拟物或D-氨基酸。CH3-CH2-铰链的变体可缺少一个或多个影响或涉及以下方面的天然位点或残基：(1)二硫化键形成，(2)与所选择的宿主细胞的不相容性，(3)在所选择的宿主细胞中表达时的异质性，(4)糖基化，(5)与补体的相互作用，(6)与除补救受体之外的Fc受体的结合或(7)抗体依赖性细胞毒性(ADCC)。示例性的CH3-CH2-铰链-CH1变体包括这样的分子和序列，即其中：1.涉及二硫键形成的位点被移除。这种移除可避免与用于生产本发明分子的宿主中存在的其他含半胱氨酸蛋白质反应。为此目的，可删除半胱氨酸残基或用其他氨基酸(如丙氨酰、丝氨酰)置换。即使在移除了半胱氨酸残基时，单链CH3-CH2-铰链-CH1结构域仍可形成以非共价方式保持在一起的二聚化CH3-CH2-铰链-CH1结构域；2.CH3-CH2-铰链-CH1区被修改而使得其与所选择的宿主细胞更相容。例如，当该分子在细菌细胞(例如大肠杆菌)中重组表达时，可移除该铰链中可被大肠杆菌中的消化酶例如脯氨酸亚氨基肽酶识别的PA序列；3.铰链区的一部分被删除或用其他氨基酸置换以在所选择的宿主中表达时防止异质性；4.移除一个或多个糖基化位点。通常被糖基化的残基(如缬氨酸或天冬酰胺)可赋予溶细胞性应答。可删除这些残基或用未糖基化的残基(如丙氨酸)置换，或可将o-糖基化位点(例如但不限于序列Val-Xaa-Ser)置换为N-糖基化位点(例如Asn-Xaa-Ser或Gln-Xaa-Ser)，这可能是优选的，例如在序列表中给出的如下残基处进行：Val-Xaa-Ser(O-糖基化位点)改变为N-糖基化位点Asn-Xaa-Ser，在该位点进行或在本文所公开的或本领域已知的任何其他合适的位置进行；5.移除涉及与补体相互作用的位点，例如C1q结合位点。补体募集可能对本发明的分子不是有利的，因此可用这种变体来避免；6.移除可影响与补救受体之外的Fc受体结合的位点。CH3-CH2-铰链-CH1区可能具有本发明融合分子不需要的与某些白细胞相互作用的位点，因而可以将其移除；7.移除ADCC位点。ADCC位点是本领域已知的；参见例如Molec.Immunol.29(5)：633-9(1992)中关于IgG1中的ADCC位点的内容。同样，这些位点也是本发明的融合分子所不需要的，因而可以移除。如文中描述和/或本领域中已知的，还可以通过对能产生全套人抗体的转基因动物(如小鼠、大鼠、仓鼠、非人灵长类动物等等)进行免疫来产生抗淀粉样蛋白抗体。可使用合适的方法，例如本文描述的方法，从这些动物分离产生人抗淀粉样蛋白的抗体的细胞并使其无限增殖化。
可产生与人抗原结合的全套人抗体的转基因小鼠可通过已知方法产生(例如，但不限于，授予Lonberg等人的美国专利No：5,770,428、5,569,825、5,545,806、5,625,126、5,625,825、5,633,425、5,661,016和5,789,650；Jakobovits等人的WO 98/50433、Jakobovits等人的WO98/24893、Lonberg等人的WO 98/24884、Lonberg等人的WO 97/13852、Lonberg等人的WO 94/25585、Kucherlapate等人的WO 96/34096、Kucherlapate等人的EP 0463 151 B1、Kucherlapate等人的EP 0710719 A1、Surani等人的美国专利No.5,545,807、Bruggemann等人的WO90/04036、Bruggemann等人的EP 0438 474 B1、Lonberg等人的EP 0814259 A2、Lonberg等人的GB 2 272 440 A、Lonberg等人，Nature368：856-859(1994)、Taylor等人，Int.Immunol.6(4)579-591(1994)、Green等人，Nature Genetics 7：13-21(1994)、Mendez等人，Nature Genetics 15：146-156(1997)、Taylor等人，Nucleic AcidsResearch 20(23)：6287-6295(1992)、Tuaillon等人，Proc Natl AcadSci USA 90(8)3720-3724(1993)、Lonberg等人，Int Rev Immunol13(1)：65-93(1995)和Fishwald等人，Nat Biotechnol 14(7)：845-851(1996)，将它们以引用的方式并入本文)。一般来讲，这些小鼠包含至少一种包含来自至少一个发生了功能性重排或可经历功能性重排的人免疫球蛋白基因座的DNA的转基因。可将这种小鼠中的内源性免疫球蛋白基因座破坏或缺失，以消除动物产生由内源基因编码的抗体的能力。
可用肽展示文库方便地实现对与相似蛋白质或片段特异性结合的抗体的筛选。这种方法涉及在一大批肽中筛选具有所需功能或结构的单个成员。肽展示文库的抗体筛选是本领域所熟知的。所展示的肽序列的长度可以为3至5000个或更多个氨基酸，常常长为5-100个氨基酸，通常长为约8-25个氨基酸。除用于产生肽文库的直接化学合成方法之外，有几种重组DNA方法也已得到描述。一种类型涉及在噬菌体或细胞表面上展示肽序列。每个噬菌体或细胞均含有编码具体展示的肽序列的核苷酸序列。此类方法在PCT专利公布No.91/17271、No.91/18980、No.91/19818和No.93/08278中有所描述。其他用于产生肽文库的系统具有体外化学合成和重组方法这两个方面。参见PCT专利公布No.92/05258、No.92/14843和No.96/19256。还可参见，美国专利No.5,658,754和No.5,643,768。肽展示文库、载体和筛选试剂盒可从供应商如Invitrogen(Carlsbad，CA)和Cambridge antibody Technologies(Cambridgeshire，UK)商购获得。参见，例如转让给Enzon的美国专利No.4704692、No.4939666、No.4946778、No.5260203、No.5455030、No.5518889、No.5534621、No.5656730、No.5763733、No.5767260、No.5856456；转让给Dyax的No.5223409、No.5403484、No.5571698、No.5837500；转让给Affymax的No.5427908、No.5580717；转让给Cambridge antibody Technologies的No.5885793；转让给Genentech的No.5750373；转让给Xoma的No.5618920、No.5595898、No.5576195、No.5698435、No.5693493、No.5698417；Colligan，同上；Ausubel，同上；或Sambrook，同上；上述专利和出版物各自以引用方式全文并入本文中。
使用至少一种抗淀粉样蛋白抗体编码核酸来提供转基因动物或哺乳动物，如山羊、奶牛、马、绵羊等，也可以制备本发明的抗体，所述转基因动物或哺乳动物能够在它们的奶中产生所述抗体。此类动物可用已知的方法提供。参见，例如但不限于，美国专利no.5,827,690、no.5,849,992、no.4,873,316、no.5,849,992、no.5,994,616、no.5,565,362、no.5,304,489等等，将它们每一者全文以引用的方式并入本文。
使用至少一种抗淀粉样蛋白抗体编码核酸来提供转基因植物和培养的植物细胞(例如但不限于烟草和玉米)，也可以制备本发明的抗体，所述转基因植物和培养的植物细胞在其植物部分或从植物部分培养得到的细胞中产生这种抗体、其特定部分或变体。举个非限制性例子，表达重组蛋白质的转基因烟草叶已成功地用于提供大量重组蛋白质，例如使用诱导型启动子来提供。参见，例如Cramer等人，Curr.Top.Microbol.Immunol.240：95-118(1999)以及其中引用的参考文献。同样，转基因玉米也已用于以商业生产规模表达哺乳动物蛋白质，其生物活性等同于在其他重组系统中生产或从天然来源纯化的那些哺乳动物蛋白质。参见，例如Hood等人，Adv.Exp.Med.Biol.464：127-147(1999)以及其中引用的参考文献。也可由转基因植物种子(包括烟草种子和马铃薯块茎)大量生产抗体，包括抗体片段，例如单链抗体(scFv)。参见，例如Conrad等人，Plant Mol.Biol.38：101-109(1998)以及其中引用的参考文献。因此，本发明的抗体还可使用转基因植物根据已知方法进行生产。还可参见，例如Fischer等人，Biotechnol.Appl.Biochem.30：99-108(Oct.，1999)，Ma等人，Trends Biotechnol.13：522-7(1995)；Ma等人，Plant Physiol.109：341-6(1995)；Whitelam等人，Biochem.Soc.Trans.22：940-944(1994)；以及其中引用的参考文献。对于抗体的植物表达，通常还可参见(但不限于)上面的参考文献，将上面参考文献的每一篇全文以引用方式并入本文。
本发明的抗体可以以数值范围较大的亲和力(KD)结合人淀粉样蛋白。在一个优选的实施例中，本发明的至少一种人mAb可任选以高的亲和力结合人淀粉样蛋白。例如，人mAb可以以等于或小于约10-7M，例如但不限于0.1-9.9(或其中的任何范围或数值)X10-7、10-8、10-9、10-10、10-11、10- 12、10-13或其中的任何范围或数值的KD结合人淀粉样蛋白。
抗体对于抗原的亲和力或亲合力可用任何合适的方法进行实验测定。(参见，例如Berzofsky等人，“Antibody-Antigen Interactions，”Fundamental Immunology，Paul，W.E.(编辑)，Raven Press：NewYork，NY(1984)；Kuby，Janis Immunology，W.H.Freeman andCompany：New York，NY(1992)；以及本文描述的方法)。如果在不同的条件(例如，盐浓度、pH)下测量，则测得的特定抗体-抗原相互作用的亲和力会不同。因此，亲和力和其他抗原结合参数(例如KD、Ka、Kd)的测量优选用抗体和抗原的标准溶液以及标准缓冲液(例如本文所述的缓冲液)来进行。
核酸分子
采用本文提供的信息，例如编码SEQ ID NO：42-49和53-60中至少一者的至少70-100％的邻接氨基酸的核苷酸序列、其特定片段、变体或共有序列，或者包含这些序列中的至少一者的经寄存载体，可用本文描述的或本领域已知的方法获得编码至少一种抗淀粉样蛋白抗体的本发明核酸分子。
本发明的核酸分子可以是RNA的形式，例如mRNA、hnRNA、tRNA或任何其他形式，或者为DNA的形式，包括但不限于，通过克隆或合成产生的cDNA和基因组DNA，或它们的任何组合。DNA可以为三链的、双链的或单链的或它们的任何组合。DNA或RNA的至少一条链的任何部分可以是编码链，也称为有义链，或其可以是非编码链，也称作反义链。
本发明的分离的核酸分子可包括包含开放阅读框(ORF)的核酸分子，其任选具有一个或多个内含子，例如(但不限于)至少一条重链(例如SEQ ID NO：42-44、53-55)或轻链(例如SEO ID NO：45-47、56-58)的至少一个CDR(如CDR1、CDR2和/或CDR3)的至少一个特定部分；包含抗淀粉样蛋白抗体或可变区(例如SEO ID NO：48A-I、49A-M、59、60)的编码序列的核酸分子，例如但不限于SEQ ID NO：51、52、61和62；以及包含基本上不同于上述那些核苷酸序列的核苷酸序列，但如本文所述和/或如本领域已知由于遗传密码的简并性而仍可编码至少一种抗淀粉样蛋白抗体的核酸分子。当然，遗传密码是本领域所熟知的。因此，对于本领域技术人员而言，应该可以按常规产生编码本发明的特异性抗淀粉样蛋白抗体的此类简并核酸变体。参见，例如Ausubel等人，同上，并且此类核酸变体包括在本发明中。
如本文所指出的，包含编码抗淀粉样蛋白抗体的核酸的本发明核酸分子可包括(但不限于)自身编码抗体片段的氨基酸序列的那些；整个抗体或其部分的编码序列；抗体、片段或部分以及额外序列的编码序列，例如至少一种信号前导序列或融合肽的编码序列，具有或不具有前述的额外编码序列，例如至少一个内含子，连同额外的非编码序列一起，包括但不限于非编码的5′和3′序列，例如在转录、mRNA加工，包括剪接和多腺苷酸化信号(例如mRNA的核糖体结合和稳定性)中起作用的转录的非翻译序列；编码额外的氨基酸例如提供额外功能的那些氨基酸的额外编码序列。因此，编码抗体的序列可与标记序列融合，所述标记序列例如编码可促进包含抗体片段或部分的融合抗体的纯化的肽的序列。
与本文所述的多核苷酸选择性杂交的多核苷酸
本发明提供在选择性杂交条件下与本文所公开的多核苷酸杂交的分离的核酸。因而，本实施例的多核苷酸可用于分离、检测和/或定量包含此类多核苷酸的核酸。例如，本发明的多核苷酸可用于鉴定、分离或扩增寄存文库中的部分或全长克隆。在一些实施例中，多核苷酸是分离的基因组序列或cDNA序列，或与来自人或哺乳动物核酸文库的cDNA互补。
优选的是，cDNA文库包含至少80％的全长序列，优选至少85％或90％的全长序列，且更优选至少95％的全长序列。cDNA文库可以进行标准化以增加罕见序列的表现。低或中等严格杂交条件通常但不是唯一地用于与互补序列的序列同一性较低的序列。中等和高严格条件可任选用于同一性较高的序列。低严格条件可使具有约70％序列同一性的序列进行选择性杂交，并且可用于鉴定直系同源或旁系同源序列。
任选地，本发明的多核苷酸将编码由本文所述多核苷酸编码的抗体的至少一部分。本发明的多核苷酸包含可以用于与编码本发明抗体的多核苷酸选择性杂交的核酸序列。参见，例如，Ausubel，同上；Colligan，同上，如本领域所熟知的。
核酸的构建
本发明的分离的核酸可用本领域熟知的(a)重组方法、(b)合成技术、(c)纯化技术或它们的组合进行制备。
所述核酸可方便地包含除了本发明的多核苷酸之外的序列。例如，可以将包含一个或多个内切核酸酶限制位点的多克隆位点插入核酸中以帮助该多核苷酸的分离。此外，可以插入可翻译序列以帮助分离翻译出的本发明多核苷酸。例如，六组氨酸标记序列为纯化本发明的蛋白质提供了便利手段。本发明的核酸(编码序列除外)任选为用于克隆和/或表达本发明多核苷酸的载体、衔接子或接头。
可将额外序列加入这些克隆和/或表达序列来优化它们在克隆和/或表达中的功能，以帮助分离所述多核苷酸，或改进该多核苷酸向细胞中的导入。克隆载体、表达载体、衔接子或接头的使用是本领域所熟知的(见，例如，Ausubel，同上；或Sambrook，同上)。
用于构建核酸的重组方法
本发明的分离的核酸组合物，例如RNA、cDNA、基因组DNA或它们的任何组合，可用多种本领域技术人员已知的克隆方法从生物学来源获得。在一些实施例中，将在严格条件下与本发明多核苷酸选择性杂交的寡核苷酸探针用于在cDNA或基因组DNA文库中鉴定所需序列。RNA的分离，以及cDNA和基因组文库的构建是本领域技术人员所熟知的(参见，例如Ausubel，同上；或Sambrook，同上)。
核酸筛选和分离方法
cDNA或基因组文库可用基于本发明多核苷酸的序列(例如本文所公开的那些)的探针进行筛选。探针可用于与基因组DNA或cDNA序列杂交以分离相同或不同生物体中的同源基因。本领域的技术人员会知道，可以在测定中采用不同程度的杂交严格性；并且杂交或洗涤介质可以是严格的。随着用于杂交的条件变得更严格，在探针和靶之间必须存在更高程度的互补性才能使双链体形成得以发生。严格性的程度可以由温度、离子强度、pH和部分变性溶剂如甲酰胺的存在中的一者或多者加以控制。例如，杂交的严格性可通过经由例如将甲酰胺浓度在0％至50％内操纵而改变反应物溶液的极性来方便地加以改变。可检测的结合所需的互补性(序列同一性)的程度将根据杂交介质和/或洗涤介质的严格性而变化。互补性程度将最佳为100％或70-100％或其中的任何范围或数值。然而应当理解，探针和引物中较小的序列变异可以通过减少杂交和/或洗涤介质的严格性进行补偿。
扩增RNA或DNA的方法是本领域熟知的，并且基于本文给出的教导和指导，无需过多实验即可根据本发明进行使用。
已知的DNA或RNA扩增方法包括(但不限于)聚合酶链反应(PCR)和相关扩增方法(参见，例如，授予Mullis等人的美国专利No.4,683,195、No.4,683,202、No.4,800,159、No.4,965,188；授予Tabor等人的No.4,795,699和NO.4,921,794；授予Innis的No.5,142,033；授予Wilson等人的No.5,122,464；授予Innis等人的NO.5,091,310；授予Gyllensten等人的No.5,066,584；授予Gelfand等人的No.4,889,818；授予Silver等人的No.4,994,370；授予Biswas的No.4,766,067；Ringold的No.4,656,134)和RNA介导的扩增，其使用靶序列的反义RNA作为双链DNA合成的模板(授予Malek等人的美国专利No.5,130,238，商标名NASBA)，将这些参考文献的全部内容以引用方式并入本文(参见，例如，Ausubel，同上；或Sambrook，同上)。
例如，可用聚合酶链反应(PCR)技术直接从基因组DNA或cDNA文库扩增本发明的多核苷酸和相关基因的序列。例如PCR和其他体外扩增方法也可用于克隆编码待表达的蛋白质的核酸序列、制备核酸以用作探针来检测样品中所需mRNA的存在，用于核酸测序，或用于其他目的。足以指导技术人员进行体外扩增方法的技术的例子可在Berger(同上)、Sambrook(同上)和Ausubel(同上)以及Mullis等人的美国专利No.4,683,202(1987)；和Innis等人，PCR Protocols A Guide to Methods andApplications，Eds.，Academic Press Inc.，San Diego，CA(1990)中找到。用于基因组PCR扩增的市售试剂盒是本领域已知的。参见例如，Advantage-GC Genomic PCR Kit(Clontech)。另外，例如，T4 gene 32protein(Boehringer Mannheim)可用于提高长PCR产物的得率。
用于构建核酸的合成方法
本发明的分离的核酸还可通过已知方法通过直接化学合成进行制备(参见，例如Ausubel等人，同上)。化学合成一般会产生单链寡核苷酸，其可以通过与互补序列杂交，或通过用该单链作为模板用DNA聚合酶进行聚合而转变成双链DNA。本领域技术人员会认识到，虽然DNA的化学合成可能局限于约100个或更多个碱基的序列，但更长的序列可通过连接较短序列来获得。
重组表达盒
本发明还提供包含本发明核酸的重组表达盒。本发明的核酸序列，例如编码本发明抗体的cDNA或基因组序列，可用于构建可导入到至少一种所需宿主细胞中的重组表达盒。重组表达盒通常会包含与转录起始调节序列可操作地连接的本发明多核苷酸，所述转录起始调节序列会引导所述多核苷酸在预定的宿主细胞中的转录。异源和非异源(即內源)启动子两者均可用于引导本发明核酸的表达。
在一些实施例中，可在非异源形式的本发明多核苷酸的合适位置(上游、下游或內含子中)引入作为启动子、增强子或其他元件的分离核酸，以便上调或下调本发明的多核苷酸的表达。例如，可通过突变、缺失和/或替换在体內或体外改变內源启动子。
载体和宿主细胞
本发明还涉及包括本发明的分离的核酸分子的载体、用该重组载体进行遗传工程改造的宿主细胞以及通过本领域熟知的重组技术生产至少一种抗淀粉样蛋白抗体。参见，例如，Sambrook等人，同上；Ausubel等人，同上，将它们以引用的方式并入本文。
可将所述多核苷酸任选与含有可选择标记的载体连接，以在宿主中增殖。一般来讲，质粒载体在沉淀物例如磷酸钙沉淀物中，或在与带电脂质的复合物中被导入。如果载体是病毒，其可用合适的包装细胞系在体外进行包装并随后转导至宿主细胞中。
应将DNA插入物与合适的启动子可操作地连接。表达构建体还会含有转录起始位点、终止位点以及在转录区中含有用于翻译的核糖体结合位点。该构建体表达的成熟转录物的编码部分将优选包括在待翻译的mRNA开始处的翻译起始密码子和在该mRNA末端适宜位置的终止密码子(例如，UAA、UGA或UAG)，对于哺乳动物或真核细胞表达优选UAA和UAG。
表达载体将优选但任选包括至少一个可选择标记。此类标记包括例如(但不限于)用于真核细胞培养的甲氨蝶呤(MTX)、二氢叶酸还原酶(DHFR，美国专利No.4,399,216；No.4,634,665；No.4,656,134；No.4,956,288；No.5,149,636；No.5,179,017)、氨苄青霉素、新霉素(G418)、霉酚酸或谷氨酰胺合成酶(GS，美国专利No.5,122,464；No.5,770,359；No.5,827,739)抗性，以及用于在大肠杆菌和其他细菌或原核生物中培养的四环素或氨苄青霉素抗性基因(藉此将上述专利全文以引用方式并入本文)。用于上述宿主细胞的合适培养基和条件是本领域已知的。合适的载体对于技术人员来说将是显而易见的。载体构建体导入宿主细胞可通过磷酸钙转染、DEAE-葡聚糖介导的转染、阳离子脂质介导的转染、电穿孔、转导、感染或其他已知方法来实现。此类方法已在本领域中有所描述，例如Sambrook(同上)，第1-4和16-18章；Ausubel(同上)，第1、9、13、15、16章。
本发明的至少一种抗体可以以修饰形式(例如融合蛋白)表达，并且可不仅包括分泌信号，而且还可包括额外的异源功能区。例如，可将额外的氨基酸(尤其是带电氨基酸)的区域加至抗体的N-端，以提高纯化期间或随后的处理和保藏期间在宿主细胞中的稳定性和持久性。同样，可将肽部分加至本发明的抗体以帮助纯化。这些区域可在抗体或其至少一个片段的最终制备前除去。这些方法在许多标准实验室手册有所描述，例如Sambrook，同上，第17.29-17.42和18.1-18.74章；Ausubel，同上，第16、17和18章。
本领域技术人员可认识到许多表达系统可用于表达编码本发明蛋白质的核酸。
或者，本发明的核酸可在含有编码本发明抗体的内源DNA的宿主细胞中通过开启(通过操纵)而在宿主细胞中表达。此类方法是本领域所熟知的，例如，如美国专利No.5,580,734、No.5,641,670、No.5,733,746和No.5,733,761中所述，将它们以引用的方式并入本文。
可用于生产抗体、其特定部分或变体的细胞培养物的例子是哺乳动物细胞。哺乳动物细胞系统通常将是细胞单层的形式，但也可使用哺乳动物细胞悬浮液或生物反应器。在本领域中已开发了许多能够表达完整糖基化蛋白质的合适宿主细胞系，包括COS-1(例如ATCC CRL 1650)、COS-7(例如ATCC CRL-1651)、HEK293、BHK21(例如ATCC CRL-10)、CHO(例如ATCC CRL 1610)和BSC-1(例如ATCC CRL-26)细胞系，Cos-7细胞、CHO细胞、hep G2细胞、P3X63Ag8.653、SP2/0-Ag14、293细胞、HeLa细胞等，它们可容易地从(例如)美国典型培养物保藏中心(Manassas，Va(www.atcc.org))获得。宿主细胞包括淋巴来源细胞，例如骨髓瘤和淋巴瘤细胞。宿主细胞为P3X63Ag8.653细胞(ATCC登记号CRL-1580)和SP2/0-Ag14细胞(ATCC登记号CRL-1851)。在尤其优选的实施例中，重组细胞是P3X63Ab8.653或SP2/0-Ag14细胞。
用于这些细胞的表达载体可包括一种或多种以下的表达控制序列，例如(但不限于)复制起点；启动子(例如，晚期或早期SV40启动子、CMV启动子(美国专利No.5,168,062；5,385,839)、HSV tk启动子、pgk(磷酸甘油酸激酶)启动子、EF-1α启动子(美国专利No.5,266,491)、至少一种人免疫球蛋白启动子；增强子和/或加工信息位点，例如核糖体结合位点、RNA剪接位点、多腺苷酸化位点(例如，SV40大T抗原多腺苷酸加入位点)和转录终止序列。参见，例如，Ausubel等人，同上；Sambrook，等人，同上。可用于产生本发明的核酸或蛋白质的其他细胞也是已知的和/或可例如从美国典型培养物保藏中心细胞系和杂交瘤目录(www.atcc.org)或其他已知的来源或商业来源得到。
当采用真核宿主细胞时，通常将多腺苷酸化或转录终止序列整合进载体内。终止序列的例子是来自牛生长激素基因的多腺苷酸化序列。还可包括用于准确剪接转录物的序列。剪接序列的例子是来自SV40的VP1内含子(Sprague等人，J.Virol.45：773-781(1983))。此外，如本领域所知，可将控制在宿主细胞中的复制的基因序列整合进载体内。
抗体的纯化
抗淀粉样蛋白抗体可通过熟知的方法从重组细胞培养物中回收和纯化，所述方法包括(但不限于)A蛋白纯化、硫酸铵或乙醇沉淀、酸提取、阴离子或阳离子交换色谱、磷酸纤维素色谱、疏水相互作用色谱、亲和色谱、羟基磷灰石色谱和凝集素色谱。高效液相色谱(“HPLC”)也可以用于纯化。参见，例如Colligan，Current Protocols in Immunology或Current Protocols in Protein Science，John Wiley&Sons，NY，NY，(1997-2001)，例如第1、4、6、8、9、10章，如本领域所熟知的。
本发明的抗体包括天然纯化的产物、化学合成操作的产物和通过重组技术从真核宿主产生的产物，所述真核宿主包括(例如)酵母、高等植物、昆虫和哺乳动物细胞。根据重组生产方法中所采用的宿主，本发明的抗体可以是糖基化的或可以是非糖基化的，糖基化的是优选的。此类方法在许多标准实验室手册中有所描述，例如Sambrook，同上，第17.37-17.42节；Ausubel，同上，第10、12、13、16、18和20章，Colligan，Protein Science，同上，第12-14章，所有参考文献都以引用方式全文并入本文中。
抗淀粉样蛋白抗体
本发明的分离的抗体包含由任何合适的多核苷酸编码的本文所公开的抗体氨基酸序列，或任何分离的或制备的抗体。优选地，人抗体或抗原结合片段结合人淀粉样蛋白，从而部分或基本上中和该蛋白质的至少一种生物学活性。部分或优选基本上中和至少一种淀粉样蛋白或片段的至少一种生物学活性的抗体或其特定部分或变体可结合该蛋白质或片段，从而抑制通过淀粉样蛋白与淀粉样蛋白受体的结合或通过其他淀粉样蛋白依赖性的或介导的机制所介导的活性。本文所用的术语“中和抗体”指取决于测定法，可以使淀粉样蛋白依赖性活性被抑制约20-120％的抗体，优选至少约10、20、30、40、50、55、60、65、70、75、80、85、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100％或更多。抗淀粉样蛋白抗体抑制淀粉样蛋白依赖性活性的能力，优选通过至少一种本文所述的和/或本领域已知的合适的淀粉样蛋白或受体测定法来进行评估。本发明的人抗体可以是任何类型(IgG、IgA、IgM、IgE、IgD等)或同种型，并且可包含K或λ轻链。在一个实施例中，人抗体包含IgG重链或确定的片段，例如，同种型IgG1、IgG2、IgG3或IgG4中的至少一者。这类抗体可如本文所述的和/或如本领域所知通过采用转基因小鼠或其他转基因非人哺乳动物来制备，所述动物包含至少一种人轻链(如IgG、IgA和IgM(如γ1、γ2、γ3、γ4)转基因。在另一个实施例中，抗人淀粉样蛋白人抗体包含IgG1重链和IgG1轻链。
本发明的至少一种抗体结合至少一种特定表位，该表位对至少一种淀粉样蛋白蛋白质、亚基、片段、部分或它们的任何组合是特异性的。该至少一个表位可包含至少一个抗体结合区，该抗体结合区包含所述蛋白质的至少一部分，该表位优选由所述蛋白质的至少一个细胞外的、可溶性的、亲水的、外部的或胞质的部分构成。该至少一种特定表位可包含这样的至少一种氨基酸序列的任何组合，所述至少一种氨基酸序列为SEO ID NO：50的邻接氨基酸的至少1-3个氨基酸至整个特定部分。作为非限制性实例，本发明的抗体显示出与SEQ ID NO：50的氨基酸2-7、3-8、33-42和/或34-40结合。
一般来讲，本发明的人抗体或抗原结合片段将包含这样的抗原结合区，该抗原结合区包含至少一个人互补决定区(CDR1、CDR2和CDR3)或至少一个重链可变区的变体以及至少一个人互补决定区(CDR1、CDR2和CDR3)或至少一个轻链可变区的变体。作为非限制性实例，抗体或抗原结合部分或变体可包含具有SEQ ID NO：44的氨基酸序列的重链CDR3和/或具有SEQ ID NO：47的氨基酸序列的轻链CDR3中的至少一者。在一个具体实施例中，抗体或抗原结合片段可具有这样的抗原结合区，所述抗原结合区包含至少一个重链CDR(即，CDR1、CDR2和/或CDR3)的至少一部分，所述重链CDR具有相应CDR1、CDR2和/或CDR3的氨基酸序列(例如SEQ ID NO：42、43和/或44；53、54和/或55)。在另一具体实施例中，抗体或抗原结合部分或变体可具有这样的抗原结合区，所述抗原结合区包含至少一种轻链CDR(即CDR1、CDR2和/或CDR3)的至少一部分，所述轻链CDR具有相应CDR1、CDR2和/或CDR3的氨基酸序列(例如SEO IDNO：45、46和/或47；56、57和/或58)。在一个优选的实施例中，抗体或抗原结合片段的三个重链CDR和三个轻链CDR具有本文所述的至少一种mAb C706(CNTO2125)的相应CDR的氨基酸序列。此类抗体可通过如下方法制备：使用常规技术将抗体的各个部分(CDR和构架区)化学连接在一起，使用重组DNA技术的常规技术或通过使用任何其他合适的方法制备并表达编码该抗体的(一种或多种)核酸分子。
抗淀粉样蛋白抗体可包含具有确定氨基酸序列的重链或轻链可变区中的至少一者。可以使用任何合适的Ig可变序列，例如，来自任何亚类或其任何组合或片段。这些序列是本领域众所周知的。
作为非限制性例子，代表性可变序列包括来自IgG1、IgG2、IgG3、IgG4、IgA1、IgA2、IgM等的那些序列，例如，来自Ig亚类的任何组合的HC和LC、FR1、FR2和/或FR3序列，例如，如SEQ ID NO：48A-I、49A-M和59-60所代表的。
举另外一个非限制性例子，在一个优选的实施例中，抗淀粉样蛋白抗体包含至少一个任选具有SEQ ID NO：48A-I中至少一者的氨基酸序列的重链可变区和/或至少一个任选具有SEQ ID NO：49A-M的氨基酸序列的轻链可变区中的至少一者。在另一个优选的实施例中，抗淀粉样蛋白抗体包含至少一个任选具有SEQ ID NO：59的氨基酸序列的重链可变区和/或至少一个任选具有SEQ ID NO：60的氨基酸序列的轻链可变区中的至少一者。
与人淀粉样蛋白结合且包含确定的重链或轻链可变区的抗体，可如本领域已知和/或如本文所述用合适方法例如噬菌体展示(Katsube，Y.等人，Int J Mol.Med，1(5)：863-868(1998))或采用转基因动物的方法制备。例如，可以用人淀粉样蛋白或其片段，对包含功能性重排的人免疫球蛋白重链转基因和包含来自可经历功能性重排的人免疫球蛋白轻链基因座的DNA的转基因的转基因小鼠进行免疫，以引发抗体的产生。如果需要，可以对产生抗体的细胞进行分离，并且可以如本文所述和/或如本领域所知制备杂交瘤或其他无限增殖化的产生抗体的细胞。或者，可以利用编码核酸或其部分在合适的宿主细胞中表达抗体、特定部分或变体。
本发明还涉及其包含的氨基酸序列基本上与本文所述的氨基酸序列相同的抗体、抗原结合片段、免疫球蛋白链和CDR。优选地，此类抗体或抗原结合片段和包含此类链或CDR的抗体可以高的亲和力(例如小于或等于约10-9M的KD)结合人淀粉样蛋白。与本文所述序列基本相同的氨基酸序列包括包含保守氨基酸置换以及氨基酸缺失和/或插入的序列。保守氨基酸置换指用第二种氨基酸置换第一种氨基酸，所述第二种氨基酸具有的化学和/或物理性质(例如电荷、结构、极性、疏水性/亲水性)与第一种氨基酸相似。保守置换包括在下列组内将一种氨基酸用另一种置换：赖氨酸(K)、精氨酸(R)和组氨酸(H)；天冬氨酸(D)和谷氨酸(E)；天冬酰胺(N)、谷氨酰胺(Q)、丝氨酸(S)、苏氨酸(T)、酪氨酸(Y)、K、R、H、D和E；丙氨酸(A)、缬氨酸(V)、亮氨酸(L)、异亮氨酸(I)、脯氨酸(P)、苯丙氨酸(F)、色氨酸(W)、甲硫氨酸(M)、半胱氨酸(C)和甘氨酸(G)；F、W和Y；C、S和T。
氨基酸代码
构成本发明的抗淀粉样蛋白抗体的氨基酸通常采用缩写。如本领域众所周知的，可通过氨基酸的单字母代码、三字母代码、名称或三核苷酸密码子表示氨基酸来指示氨基酸名称
(参见，Alberts，B.等人，Molecular Biology of The Cell，第三版，Garland Publishing，Inc.，New York，1994)：
  单字母代码   三字母代码   名称   三核苷酸密码子
  A   Ala   丙氨酸   GCA，GCC，GCG，GCU
  C   Cys   半胱氨酸   UGC，UGU
  D   Asp   天冬氨酸   GAC，GAU
  E   Glu   谷氨酸   GAA，GAG
  F   Phe   苯丙氨酸   UUC，UUU
  G   Gly   甘氨酸   GGA，GGC，GGG，GGU
  H   His   组氨酸   CAC，CAU
  I   Ile   异亮氨酸   AUA，AUC，AUU
  K   Lys   赖氨酸   AAA，AAG
  L   Leu   亮氨酸   UUA，UUG，CUA，CUC，CUG，CUU
  M   Met   甲硫氨酸   AUG
  N   Asn   天冬酰胺   AAC，AAU
  P   Pro   脯氨酸   CCA，CCC，CCG，CCU
  Q   Gln   谷氨酰胺   CAA，CAG
  R   Arg   精氨酸   AGA，AGG，CGA，CGC，CGG，CGU
  S   Ser   丝氨酸   AGC，AGU，UCA，UCC，UCG，UCU
  T   Thr   苏氨酸   ACA，ACC，ACG，ACU
  V   Val   缬氨酸   GUA，GUC，GUG，GUU
  W   Trp   色氨酸   UGG
  Y   Tyr   酪氨酸   UAC，UAU
如文中说明的，本发明的抗淀粉样蛋白抗体可包括一个或多个来自天然突变或得自人工操纵的氨基酸置换、缺失或添加。
当然，技术人员可进行的氨基酸置换数目取决于许多因素，包括上文所述的那些。如文中说明的，一般来讲，任何给定的抗淀粉样蛋白抗体、片段或变体的氨基酸置换、插入或缺失数目将不超过40、30、20、19、18、17、16、15、14、13、12、11、10、9、8、7、6、5、4、3、2、1个，例如1-30个或其中的任何范围或数值。
本发明的抗淀粉样蛋白抗体中为功能所必需的氨基酸可通过本领域已知方法进行确定，例如定点诱变或丙氨酸扫描诱变(例如，Ausubel(同上)，第8、15章；Cunningham和Wells，Science 244：1081-1085(1989))。后一种方法在分子的每个残基处引入单丙氨酸突变。随后测试所得突变分子的生物学活性，例如但不限于至少一种淀粉样蛋白中和活性。对抗体结合关键的位点也可通过结构分析进行确定，例如结晶、核磁共振法或光亲和标记法(Smith等人，J.Mol.Biol.224：899-904(1992)和de Vos等人，Science 255：306-312(1992))。
本发明的抗淀粉样蛋白抗体可包括(但不限于)选自SEQ ID NO：42-47和53-58中至少一者的5个至全部邻接氨基酸的至少一个部分、序列或组合。
抗淀粉样蛋白抗体还可任选包含SEQ ID NO：48A-I、49A-M、59和60中至少一者的70-100％的邻接氨基酸中的至少一者所成的多肽。
在一个实施例中，免疫球蛋白链或其部分(如可变区、CDR)的氨基酸序列与SEQ ID NO：48A-I、49A-M、59和60中至少一者的相应链的氨基酸序列具有约70-100％的同一性(如70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100或其中的任何范围或数值)。例如，轻链可变区的氨基酸序列可与SEQ ID NO：49A-M、60、70或80的序列相当，或重链CDR 3的氨基酸序列可与SEQ ID NO：48A-I或59相当。优选的是，70-100％的氨基酸同一性(即70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100或其中的任何范围或数值)是用本领域已知的合适的计算机算法测定。
在SEQ ID NO：48A-I、49A-M、59和60中提供了示例性的重链和轻链可变区序列。本发明的抗体，或其特定变体可包含任何数目的来自本发明抗体的邻接氨基酸残基，其中该数目选自抗淀粉样蛋白抗体中邻接残基数目的10-100％的整数。任选地，该邻接氨基酸亚序列长度为至少约10、20、30、40、50、60、70、80、90、100、110、120、130、140、150、160、170、180、190、200、210、220、230、240、250或更多个氨基酸，或其中的任何范围或数值。此外，所述亚序列的数目可以为选自1至20的任何整数，例如至少2、3、4或5。
技术人员将会知道，本发明包括本发明的至少一种生物活性抗体。生物活性抗体的比活性为天然(非合成)的、内源性或相关的和已知的抗体比活性的至少20％、30％或40％，并且优选为至少50％、60％或70％，并且最优选为至少80％、90％或95％-1000％。测定和定量酶促活性和底物特异性的量度的方法是本领域技术人员熟知的。
经修饰的抗体
在另一方面，本发明涉及通过共价连接有机部分进行修饰的、如本文所述的人抗体和抗原结合片段。这种修饰可产生具有改善的药物代谢动力学性质(如体内血清半衰期增加)的抗体或抗原结合片段。有机部分可以是直链或支链的亲水性聚合物基团、脂肪酸基团或脂肪酸酯基团。在具体实施例中，亲水性聚合物基团可具有约800至约120,000道尔顿的分子量，并且可以是聚链烷二醇(例如聚乙二醇(PEG)、聚丙二醇(PPG))、碳水化合物聚合物、氨基酸聚合物或聚乙烯吡咯烷酮，并且脂肪酸或脂肪酸酯基团可包含约8至约40个碳原子。
本发明的经修饰的抗体和抗原结合片段可包含一个或多个与抗体直接或间接共价键合的有机部分。与本发明的抗体或抗原结合片段键合的每个有机部分可独立地是亲水性聚合物基团、脂肪酸基团或脂肪酸酯基团。本文所用的术语“脂肪酸”涵盖单羧酸和二羧酸。本文所用的“亲水性聚合物基团”指在水中比在辛烷中更易溶的有机聚合物。例如，聚赖氨酸在水中比在辛烷中更易溶。因此，通过共价连接聚赖氨酸进行修饰的抗体涵盖在本发明内。适用于修饰本发明抗体的亲水性聚合物可以是直链或支链的，并且包括(例如)聚链烷二醇(例如PEG、单甲氧基-聚乙二醇(mPEG)、PPG等)、碳水化合物(例如葡聚糖、纤维素、寡糖、多糖等)、亲水性氨基酸聚合物(例如聚赖氨酸、聚精氨酸、聚天冬氨酸等)、聚环氧烷烃(例如，聚环氧乙烷、聚环氧丙烷等)和聚乙烯吡咯烷酮。优选地，修饰本发明抗体的亲水性聚合物作为单独的分子实体具有约800至约150,000道尔顿的分子量。例如可以使用PEG5000和PEG20,000，其中下标是以道尔顿为单位的聚合物的平均分子量。亲水性聚合物基团可用1至约6个烷基、脂肪酸或脂肪酸酯基团取代。用脂肪酸或脂肪酸酯基团取代的亲水性聚合物可通过采用合适的方法制备。例如，可将包含胺基的聚合物与脂肪酸或脂肪酸酯的羧酸根偶联，且可将脂肪酸或脂肪酸酯上的活化羧酸根(如用N，N-羰基二咪唑活化)与聚合物上的羟基偶联。
适用于修饰本发明抗体的脂肪酸和脂肪酸酯可以是饱和的或可含有一个或多个不饱和单位。适用于修饰本发明抗体的脂肪酸包括(例如)正十二烷酸(C12，月桂酸)、正十四烷酸(C14，肉豆蔻酸)、正十八烷酸(C18，硬脂酸)、正二十烷酸(C20，花生酸)、正二十二烷酸(C22，山嵛酸)、正三十烷酸(C30)、正四十烷酸(C40)、顺式-Δ9-十八烷酸(C18，油酸)、全顺式-Δ5，8，11，14-二十碳四烯酸(C20，花生四烯酸)、辛二酸、十四烷二酸、十八烷二酸、二十二烷二酸等。合适的脂肪酸酯包括包含直链或支链的低级烷基的二羧酸的单酯。低级烷基可包含1至约12个，优选1至约6个碳原子。
修饰的人抗体和抗原结合片段可使用合适的方法制备，例如通过与一种或多种修饰剂反应来制备。本文所用的“修饰剂”是指包含活化基团的合适有机基团(例如亲水性聚合物、脂肪酸、脂肪酸酯)。“活化基团”是化学部分或官能团，它们可在合适条件下与第二化学基团反应，由此在修饰剂和第二化学基团之间形成共价键。例如，胺反应性活化基团包括亲电子基团，例如甲苯磺酸酯、甲磺酸酯、卤素(氯、溴、氟、碘)、N-羟基琥珀酰亚胺酯(NHS)等。可与硫醇反应的活化基团包括(例如)马来酰亚胺、碘代乙酰基、丙烯酰基(acrylolyl)、吡啶基二硫化物、5-硫醇-2-硝基苯甲酸硫醇(TNB-硫醇)等。可将醛官能团与含胺或酰肼的分子偶联，并且可将叠氮基可与三价磷基团反应以形成磷酰胺酯或磷酰亚胺键。将活化基团引入分子的合适方法是本领域已知的(参见例如Hermanson，G.T.，Bioconjugate Techniques，Academic Press：San Diego，CA(1996))。活化基团可直接或通过连接部分与有机基团(例如亲水性聚合物、脂肪酸、脂肪酸酯)键合，所述连接部分例如为其中一个或多个碳原子可由杂原子(例如氧、氮或硫)取代的二价C1-C12基团。合适的连接部分包括(例如)四乙二醇、-(CH2)3-、-NH-(CH2)6-NH-、-(CH2)2-NH-和-CH2-O-CH2-CH2-O-CH2-CH2-O-CH-NH-。包含连接部分的修饰剂可(例如)通过如下产生：在存在1-乙基-3-(3-二甲氨丙基)碳二亚胺(EDC)的情况下，使单-Boc-烷基二胺(如单-Boc-乙二胺、单-Boc-二氨基己烷)与脂肪酸反应，以在游离胺和脂肪酸羧酸根之间形成酰胺键。Boc保护基团可通过用三氟乙酸(TFA)处理来从产物中去除，以暴露伯胺，所述伯胺可以如所述的与另一羧酸根偶联，或可以与马来酸酐反应，并且所得产物可以环化而产生脂肪酸的活化马来酰亚胺衍生物。(参见，例如Tllompson等人，WO92/16221，其完整教导内容以引用方式并入本文中。)
本发明的经修饰抗体可通过使人抗体或抗原结合片段与修饰剂反应来产生。例如，可通过采用胺反应性修饰剂(例如PEG的NHS酯)以非位点特异性方式将有机部分键合至抗体。经修饰的人抗体或抗原结合片段还可通过使抗体或抗原结合片段的二硫键(例如链内二硫键)还原来制备。还原的抗体或抗原结合片段随后可与硫醇反应性修饰剂反应，以产生本发明的经修饰抗体。包含与本发明抗体特定位点键合的有机部分的经修饰的人抗体或抗原结合片段可使用合适的方法制备，所述方法例如为逆向蛋白水解作用(reverse proteolysis)(Fisch等人，Bioconjugate Chem.，3：147-153(1992)；Werlen等人，Bioconjugate Chem.，5：411-417(1994)；Kumaran等人，Protein Sci.6(10)：2233-2241(1997)；Itoh等人，Bioorg.Chem.，24(1)：59-68(1996)；Capellas等人，Biotechnol.Bioeng.，56(4)：456-463(1997))，以及在Hermanson，G.T.，Bioconjugate Techniques，Academic Press：San Diego，CA(1996)中描述的方法。
针对抗淀粉样蛋白抗体的抗独特型抗体
除了单克隆或嵌合的抗淀粉样蛋白抗体之外，本发明还涉及对本发明的此类抗体有特异性的抗独特型(抗Id)抗体。抗Id抗体是能识别通常与另一抗体的抗原结合区相关的独特决定簇的抗体。抗Id可以通过用该抗体或其包含CDR的区域免疫与Id抗体来源相同的物种和遗传类型(例如小鼠品系)的动物来进行制备。被免疫动物将识别免疫抗体的独特型决定簇且对其应答，从而产生抗Id抗体。抗Id抗体还可以用作“免疫原”以在另一动物中诱导免疫应答，从而产生所谓的抗-抗Id抗体。
淀粉样蛋白抗体组合物
本发明还提供至少一种抗淀粉样蛋白抗体组合物，其包含如本文所述和/或本领域已知的至少1种、至少2种、至少3种、至少4种、至少5种、至少6种或更多种抗淀粉样蛋白抗体，它们以非天然存在的组合物、混合物或形式提供。这些组合物包含非天然存在的组合物，所述非天然存在的组合物包含抗淀粉样蛋白抗体氨基酸序列的至少一个或两个全长序列、C-端和/或N-端缺失的变体、结构域、片段或特定变体，所述抗淀粉样蛋白抗体氨基酸序列选自SEQ ID NO：42-49、53-60的70-100％的邻接氨基酸，或其特定片段、结构域或变体。优选的抗淀粉样蛋白抗体组合物包括至少一个或两个全长序列、片段、结构域或变体作为至少一个含CDR或LBP部分，所述含CDR或LBP部分来自SEQ ID NO：42-47、53-58的70-100％的抗淀粉样蛋白抗体序列或其特定片段、结构域或变体。更优选的组合物包含SEQ ID NO：42-47、53-58的70-100％或其特定片段、结构域或变体中的至少一者的40-99％。这些组合物百分数按照液体或无水溶液、混合物、悬浮液、乳液、颗粒、粉末或胶体的重量、体积、浓度、摩尔浓度或重量摩尔浓度计算，如本领域公知或本文所描述的。
组合物还可任选包含有效量的至少一种选自以下至少一者的化合物或蛋白质：抗感染药、心血管(CV)系统药物、中枢神经系统(CNS)药物、自主神经系统(ANS)药物、呼吸道药物、胃肠(GI)道药物、激素药物、用于体液或电解质平衡的药物、血液学药物、抗肿瘤药物、免疫调节药物、眼用药物、耳用药物或鼻用药物、局部用药物、营养药物、他汀类药物等。此类药物是本领域熟知的，包括本文所提出的每一种药物的制剂、适应症、剂量和给药(参见，例如，Nursing 2001 Handbook of Drugs，第21版，Springhouse Corp.，Springhouse，PA，2001；HealthProfessional’s Drug Guide 2001，Shannon，Wilson，Stang(编辑)，Prentice-Hall，Inc，UpperSaddle River，NJ；PharmcotherapyHandbook，Wells等人(编辑)，Appleton&Lange，Stamford，CT，如本领域所熟知的)。
该CNS药物可以为选自非麻醉性镇痛剂的至少一种或选自解热药、非类固醇类消炎药、麻醉药的至少一种或至少一种阿片类镇痛剂、镇静催眠药、抗惊厥药、抗抑郁药、抗焦虑药、抗精神病药、中枢神经系统兴奋剂、抗帕金森氏病药物、杂项中枢神经系统药。ANS药物可以是至少一种选自如下的药物：胆碱能药物(拟副交感神经药)、抗胆碱能药、肾上腺素能药物(拟交感神经药)、肾上腺素能阻滞药(抗交感神经药)、骨骼肌松弛药、神经肌肉阻滞药。该至少一种非麻醉性镇痛剂或解热药可以为选自对乙酰氨基酚、阿司匹林、三水杨酸胆碱镁、二氟尼柳、水杨酸镁的至少一种。该至少一种非类固醇类消炎药可以是至少一种选自如下的药物：塞来考昔、双氯芬酸钾、双氯芬酸钠、依托度酸、非诺洛芬钙、氟比洛芬、布洛芬、吲哚美辛、吲哚美辛钠三水合物、酮洛芬、酮咯酸氨丁三醇、萘丁美酮、萘普生、萘普生钠、噁丙嗪、吡罗昔康、罗非考昔、舒林酸。该至少一种麻醉性或阿片类镇痛剂可以是至少一种选自如下的药物：盐酸阿芬他尼、盐酸丁丙诺啡，酒石酸环丁甲二羟吗喃、磷酸可待因、硫酸可待因、枸橼酸芬太尼、芬太尼透皮系统、跨粘膜芬太尼、盐酸氢吗啡酮、盐酸哌替啶、盐酸美沙酮、盐酸吗啡、硫酸吗啡、酒石酸吗啡、盐酸纳布啡、盐酸羟氢可待酮、果胶酸羟氢可待酮、盐酸羟吗啡酮、盐酸喷他佐辛、盐酸喷他佐辛和盐酸纳洛酮、乳酸喷他佐辛、盐酸丙氧芬、萘磺酸丙氧芬、盐酸瑞芬太尼、枸橼酸舒芬太尼、盐酸曲马多。该至少一种镇静催眠药可以是至少一种选自如下的药物：水合氯醛、艾司唑仑、盐酸氟胺安定、戊巴比妥、戊巴比妥钠、苯巴比妥钠、司可巴比妥钠、替马西泮、三唑仑、扎来普隆、酒石酸唑吡旦。该至少一种抗惊厥药可以是至少一种选自如下的药物：乙酰唑胺钠、卡马西平、氯硝安定、二钾氯氮卓、安定、双丙戊酸钠、乙琥胺、磷苯妥英钠、加巴喷丁、拉莫三嗪、硫酸镁、苯巴比妥、苯巴比妥钠、苯妥英、苯妥英钠、苯妥英钠(缓释)、扑癫酮、盐酸硫加宾、托吡酯、丙戊酸钠、丙戊酸。该至少一种抗抑郁药可以是至少一种选自如下的药物：盐酸阿米替林、扑酸阿米替林、阿莫沙平、盐酸丁氨苯丙酮、氢溴酸西酞普兰、盐酸氯米帕明、盐酸去甲丙咪嗪、盐酸多塞平、盐酸氟西汀、盐酸丙咪嗪、扑酸丙咪嗪、米氮平，盐酸奈法唑酮、盐酸去甲替林、盐酸帕罗克赛、硫酸苯乙肼、盐酸珊特拉林、硫酸反苯环丙胺、马来酸三甲丙咪嗪、盐酸万拉法新。该至少一种抗焦虑药可以是至少一种选自如下的药物：阿普唑仑、盐酸丁螺旋酮、甲氨二氮卓、盐酸甲氨二氮卓、二钾氯氮卓、安定、盐酸多塞平、双羟萘酸羟嗪、盐酸羟嗪、扑酸羟嗪、氯羟安定、甲丙氨酯(mephrobamate)、盐酸咪达唑仑、去甲羟安定。该至少一种抗精神病药可以是至少一种选自如下的药物：盐酸氯丙嗪、氯氮平、癸酸氟奋乃静、庚酸氟奋乃静、盐酸氟奋乃静、氟哌啶醇、癸酸氟哌啶醇、乳酸氟哌啶醇、盐酸洛沙平、琥珀酸洛沙平、苯磺酸美索达嗪、盐酸吗茚酮、奥氮平、奋乃静、哌迷清、甲哌氯丙嗪、富马酸喹硫平、利哌酮、盐酸硫利哒嗪、氨砜噻吨、盐酸氨砜噻吨、盐酸三氟拉嗪。该至少一种中枢神经系统兴奋剂可以是至少一种选自如下的药物：硫酸苯丙胺、咖啡因、硫酸右旋苯丙胺、盐酸多沙普仑、盐酸脱氧麻黄碱、盐酸哌醋甲酯、莫达非尼、匹莫林、盐酸芬特明。该至少一种抗帕金森氏病药可以是至少一种选自如下的药物：盐酸金刚烷胺、甲磺酸苄托品、盐酸安克痉、乳酸安克痉、甲磺酸溴隐亭、帕金宁、恩他卡朋、左旋多巴、甲磺酸硫丙麦角林、二盐酸派拉米苏、盐酸累匹利洛、盐酸司来吉兰、托卡朋、盐酸苯海索。该至少一种杂项中枢神经系统药物可以是至少一种选自如下的药物：利鲁唑、盐酸丁氨苯丙酮、盐酸多奈哌齐、达哌啶醇、马来酸氟伏沙明、碳酸锂、拘橼酸锂、盐酸那拉曲坦、尼古丁香糖(nicotine polacrilex)、烟碱透皮系统、异丙酚、安息香酸利扎曲坦、盐酸西布茶明一水合物、琥珀酸舒马曲坦、盐酸他克林、佐米曲坦(见，例如，Nursing 2001 Drug Handbook的第337-530页)。
该至少一种胆碱能药物(例如，拟副交感神经药物)可以是至少一种选自如下的药物：氯化氨甲酰甲胆碱、氯化滕喜龙、溴新斯的明、甲基硫酸新斯的明、水杨酸毒扁豆碱、溴化吡啶斯的明。该至少一种抗胆碱能药物可以是至少一种选自如下的药物：硫酸阿托品、盐酸双环胺、甘罗溴铵、莨菪碱、硫酸莨菪碱、溴化丙胺太林、东莨菪碱、丁溴东莨菪碱、氢溴酸东莨菪碱。该至少一种肾上腺素能药物(拟交感神经药)可以是至少一种选自如下的药物：盐酸多巴酚丁胺、盐酸多巴胺、重酒石酸间羟胺、重酒石酸去甲肾上腺素、盐酸脱羟肾上腺素、盐酸伪麻黄碱、硫酸伪麻黄碱。该至少一种肾上腺素能阻滞剂(抗交感神经药)可以是至少一种选自如下的药物：甲磺酸二氢麦角胺、酒石酸麦角胺、马来酸二甲麦角新碱、盐酸普萘洛尔。该至少一种骨骼肌松弛剂可以是至少一种选自如下的药物：巴氯芬、卡立普多、氯唑沙宗、盐酸环苯扎林、丹曲林钠、美索巴莫、盐酸替扎尼定。该至少一种神经肌肉阻滞剂可以是至少一种选自如下的药物：苯磺酸阿曲库铵、苯磺酸顺阿曲库铵、多沙氯铵、氯化米库氯铵、泮库溴铵、哌库溴铵，雷帕库溴铵、罗库溴铵、氯化琥珀胆碱、氯化筒箭毒碱、维库溴铵(见，例如Nursing 2001 Drug Handbook的第531-84页)。
该抗感染药可以是至少一种选自如下的药物：杀阿米巴药或至少一种抗原生动物药、驱肠虫药、抗真菌剂、抗疟药、抗结核药或至少一种抗麻风药、氨基糖苷类、青霉素、头孢菌素、四环素、磺胺药物、氟喹诺酮、抗病毒药物、大环內酯类抗感染药物、杂项抗感染药物。该CV药物可以是至少一种选自如下的药物：正性肌力药、抗心律不齐药、抗心绞痛药物、抗高血压药、抗脂血药、杂项心血管药。该CNS药物可以为选自非麻醉性镇痛剂的至少一种或选自解热药、非类固醇类消炎药、麻醉药的至少一种或至少一种阿片类镇痛剂、镇静催眠药、抗惊厥药、抗抑郁药、抗焦虑药、抗精神病药、中枢神经系统兴奋剂、抗帕金森氏病药物、混杂类型的中枢神经系统药。该ANS药物可以是至少一种选自如下的药物：胆碱能药物(拟副交感神经药)、抗胆碱能药、肾上腺素能药物(拟交感神经药)、肾上腺素能阻滞药(抗交感神经药)、骨骼肌松弛药、神经肌肉阻滞药。该呼吸道药物可以是至少一种选自如下的药物：抗组胺剂、支气管扩张药、祛痰药或至少一种止咳药、杂项呼吸道药物。该胃肠道药物可以是至少一种选如下的药物：抗酸剂或至少一种吸附剂或至少一种抗气胀药、消化酶或至少一种胆结石增溶剂、止泻药、缓泻药、止吐剂、抗溃疡药。该激素药物可以是至少一种选自如下的药物：皮质类固醇、雄性激素或至少一种合成代谢类固醇、雌激素或至少一种孕酮、促性腺激素、抗糖尿病药物或至少一种胰高血糖素、甲状腺激素、甲状腺激素拮抗剂、垂体激素、甲状旁腺样药物。该体液和电解质平衡的药物可以是至少一种选自如下的药物：利尿剂、电解质或至少一种替代溶液、酸化剂或至少一种碱化剂。该血液学药物可以是至少一种选自如下的药物：补血药、抗凝剂、血液衍生物、血栓溶解酶类。该抗肿瘤药可以是至少一种选自如下的药物：烷化药物、抗代谢物、抗生素类抗肿瘤药、改变激素平衡的抗肿瘤药、杂项抗肿瘤药。该免疫调节药物可以是至少一种选自如下的药物：免疫抑制剂、疫苗或至少一种类毒素、抗毒素或至少一种抗毒血清、免疫血清、生物应答修饰剂。该眼用、耳用和鼻用药物可以是至少一种选自如下的药物：眼用抗感染药、眼用消炎药、缩瞳药、放瞳剂、眼用血管收缩剂、杂项眼用、耳用、鼻用药。该局部用药物可以是至少一种选自如下的药物：抗感染药、杀疥螨剂或至少一种杀虱剂、局部用皮质类固醇。该营养药物可以是至少一种选自如下的药物：维生素、矿物质或热质。参见例如，Nursing 2001 Drug Handbook(同上)的內容。
该至少一种杀阿米巴药或抗原生动物药可以是至少一种选自如下的药物：阿托伐醌、盐酸氯喹、磷酸氯喹、甲硝唑、盐酸甲硝唑、羟乙磺酸戊氧苯脒。该至少一种驱肠虫药可以是至少一种选自如下的药物：甲苯咪唑、双羟萘酸噻嘧啶、噻菌灵。该至少一种抗真菌剂可以是至少一种选自如下的药物：两性霉素B、两性霉素B胆甾烯基硫酸酯复合物、两性霉素B脂质复合物、两性霉素B脂质体，氟康唑、氟胞嘧啶、微尺寸灰黄霉素、超微尺寸灰黄霉素、伊曲康唑、酮康唑、制霉菌素、盐酸特比萘芬。该至少一种抗疟药可以是至少一种选自如下的药物：盐酸氯喹、磷酸氯喹、强力霉素、硫酸羟氯喹、盐酸甲氟喹、磷酸伯氨喹、乙胺嘧啶、乙胺嘧啶-磺胺多辛。该至少一种抗结核药或抗麻风药可以是至少一种选自如下的药物：氯苯吩嗪、环丝氨酸、氨苯砜、盐酸乙胺丁醇、异烟肼、吡嗪酰胺、利福布丁、利福平、利福喷丁、硫酸链霉素。该至少一种氨基糖苷类可以是至少一种选自如下的药物：硫酸阿米卡星、硫酸庆大霉素、硫酸新霉素、硫酸链霉素、硫酸妥布霉素。该至少一种青霉素可以是至少一下选自如下的药物：阿莫西林/克拉维酸钾、阿莫西林三水合物、氨苄青霉素、氨苄青霉素钠、三水苄青霉素、氨苄青霉素钠/青霉烷砜钠、氯苯青霉素钠、双氯青霉素钠、美洛西林钠、乙氧萘青霉素钠、苯唑西林钠、苄星青霉素G、青霉素G钾、普鲁卡因青霉素G、青霉素G钠、青霉素V钾、哌拉西林钠、哌拉西林钠/三唑巴坦钠、羧噻酚青霉素钠、羧噻酚青霉素钠/可拉维酸钾。该至少一种头孢菌素可以是至少一种选自如下的药物：头孢克洛、头孢羟氨苄、头孢唑啉钠、头孢地尼、盐酸头孢平、头孢克肟、头孢美唑钠、头孢尼西钠、头孢哌酮钠、头孢氨噻肟钠、头孢替坦二钠、头孢西丁钠、头孢泊肟酯、头孢罗齐、头孢他啶、头孢布坦、头孢唑肟钠、头孢曲松钠、头孢呋肟酯、头孢呋肟钠、盐酸头孢氨苄、头孢氨苄一水合物、头孢霉定、氯拉卡比。该至少一种四环素可以是至少一种选自如下的药物：盐酸去甲金霉素、强力霉素钙、盐酸多西环素、盐酸强力霉素、一水强力霉素、盐酸米诺环素、盐酸四环素。该至少一种磺胺药物可以是至少一种选自如下的药物：复方磺胺甲噁唑、磺胺嘧啶、磺胺甲噁唑、磺胺异噁唑、磺胺乙酰异噁唑。该至少一种氟喹诺酮可以是至少一种选自如下的药物：甲磺酸阿拉曲沙星、环丙沙星、依诺沙星、左氟沙星、盐酸洛美沙星、萘啶酸、诺氟沙星、氧氟沙星、司帕沙星、甲磺酸曲伐沙星。该至少一种氟喹诺酮可以是至少一种选自如下的药物：甲磺酸阿拉曲沙星、环丙沙星、依诺沙星、左氟沙星、盐酸洛美沙星、萘啶酸、诺氟沙星、氧氟沙星、司帕沙星、甲磺酸曲伐沙星。该至少一种抗病毒剂可以是至少一种选自如下的药物：阿波卡韦硫酸、阿昔洛韦钠、盐酸金刚胺、安泼那韦、西多福韦、地拉韦定甲磺酸、地达诺新、依非韦伦、法昔洛韦、福米韦生钠、膦甲酸钠、更昔洛韦、吲哚那韦硫酸、拉米夫定、拉米夫定/叠氮胸苷、甲磺酸奈非那韦、奈韦拉平、磷酸奥塞米韦、三氮唑核苷、盐酸金刚乙胺、利托那韦、沙喹那韦、甲磺酸沙喹那韦、司他夫定、盐酸法昔洛韦、扎西胞苷、扎那米韦、叠氮胸苷。该至少一种大环內酯类抗感染剂可以是至少一种选自如下的药物：阿奇霉素、克拉霉素、地红霉素、红霉素碱、依托红霉素、红霉素乙基琥珀酸酯、乳糖酸红霉素、硬脂酸红霉素。该至少一种杂项抗感染剂可以是至少一种选自如下的药物：氨曲南、杆菌肽、琥珀酸钠氯霉素、盐酸克林霉素、盐酸氯林可霉素棕榈酸酯、磷酸氯林可霉素、泰宁和西拉司丁钠、美罗培南、呋喃妥因大晶体、呋喃妥因微晶、喹奴普丁/达福普汀、盐酸壮观霉素、甲氧苄啶、盐酸万古霉素(见，例如，Nursing 2001 Drug Handbook的24-214页)。
该至少一种正性肌力药可以是至少一种选自如下的药物：乳酸氨利酮，地高辛、乳酸米力农。该至少一种抗心律不齐药可以是至少一种选自如下的药物：腺苷、盐酸胺碘酮、硫酸阿托品、溴苄铵托西酸盐，盐酸地尔硫卓、丙吡胺、磷酸丙吡胺、盐酸艾司洛尔、醋酸氟卡胺、伊布利特富马酸盐、盐酸利多卡因、盐酸美西律、盐酸莫雷西嗪、苯妥英、苯妥英钠、盐酸普鲁卡因胺、盐酸普罗帕酮、盐酸普萘洛尔、奎尼丁重硫酸盐、葡糖酸奎尼丁、奎尼丁聚半乳糖醛酸盐、硫酸奎尼丁、索他洛尔、盐酸妥卡胺、盐酸维拉帕米。该至少一种抗心绞痛药可以是至少一种选自如下的药物：阿罗地平磺酸盐、亚硝戊酯、盐酸苄普地尔、盐酸地尔硫卓、硝酸异山梨酸酯、单硝酸异山梨酯、萘羟心安、盐酸硝吡胺甲酯、硝苯地平、硝酸甘油、盐酸普萘洛尔、维拉帕米、盐酸维拉帕米。该至少一种抗高血压药可以是至少一种选自如下的药物：盐酸醋丁洛尔、阿罗地平磺酸盐、阿替洛尔、盐酸贝那普利、盐酸倍他索洛尔、富马酸比索洛尔、坎地沙坦西酯、卡托普利、盐酸喹酮心安、卡维地洛、可乐定、盐酸可乐定、二氮嗪、盐酸地尔硫卓、甲磺酸多沙唑嗪、伊那普利拉、马来酸伊那普利、甲磺酸伊普沙坦、非洛地平、甲磺酸芬洛多潘、福辛普利钠、醋酸胍那苄、硫酸胍那决尔、盐酸胍法辛，盐酸肼苯哒嗪、依贝沙坦、伊拉地平、盐酸拉贝洛尔、赖诺普利、氯沙坦钾、甲基多巴、盐酸甲基多巴、琥珀酸美托洛尔、酒石酸美托洛尔、米诺地尔、盐酸莫西普利、萘羟心安、盐酸硝吡胺甲酯、硝苯地平、尼索的平、硝普钠、硫酸环戊丁心安、培哚普利特丁胺、甲磺酸酚妥拉明、心得静、盐酸哌唑嗪、盐酸普萘洛尔、盐酸喹那普利、雷米普利、替米沙坦、盐酸特拉唑嗪、马来酸噻马洛尔、群多普利、缬沙坦、盐酸维拉帕米。该至少一种抗脂血药可以是至少一种选自如下的药物：阿托伐他汀钙、西伐他丁钠、消胆胺、盐酸降胆宁、非诺贝特(微粒化)、氟伐他丁钠、吉非贝齐、洛伐他汀、烟酸、普伐他丁钠、辛伐他汀。该至少一种杂项CV药物可以是至少一种选自如下的药物：阿昔单抗、前列地尔，盐酸阿布他明、西洛他唑、氯吡格雷重硫酸盐、双嘧达莫、表非替得、盐酸米多君、己酮可可碱、盐酸噻氯匹定、盐酸替罗非班(见，例如Nursing 2001 Drug Handbook的215-336页)。
该至少一种抗组胺药可以是至少一种选自如下的药物：马来酸溴苯吡胺、盐酸西替利嗪、马来酸氯苯吡胺、富马酸氯苯苄咯、盐酸赛庚啶、盐酸苯海拉明、盐酸非索那汀、氯雷他定、盐酸异丙嗪、异丙嗪茶氯酸盐、盐酸曲普利啶。该至少一种支气管扩张药可以是至少一种选自如下的药物：沙丁胺醇，硫酸沙丁胺醇、氨茶碱、硫酸阿托品、硫酸麻黄碱、肾上腺素、重酒石酸肾上腺素、盐酸肾上腺素、异丙托溴铵、异丙肾上腺素、盐酸异丙肾上腺素、硫酸异丙上腺素、盐酸左沙丁胺醇、硫酸异丙喘宁、胆茶碱、醋酸吡布特罗、沙美特罗昔萘酸酯、硫酸特布他林、茶碱。该至少一种祛痰药或止咳药可以是至少一种选自如下的药物：苯佐那酯、磷酸可待因、硫酸可待因、氢溴酸右美沙芬、盐酸苯海拉明、愈创木酚甘油醚、盐酸氢吗啡酮。该至少一种杂项呼吸药物可以是至少一种选自如下的药物：乙酰半胱氨酸、倍氯美松双丙酸酯、贝雷克坦、布地缩松、calfactant、色甘酸钠、阿法链道酶、环前列烯醇钠、氟尼缩松、丙酸氟替卡松、盂鲁司特钠、奈多罗米钠、帕利珠单抗、曲安奈德、扎鲁司特、齐留通(见，例如Nursing 2001 Drug Handbook的第585-642页)。
该至少一种抗酸剂、吸附剂或抗气胀药可以是至少一种选自如下的药物：碳酸铝、氢氧化铝、碳酸钙、氢氧化镁铝、氢氧化镁、氧化镁、西甲硅油、碳酸氢钠。该至少一种消化酶或胆结石增溶剂可以是至少一种选自如下的药物：胰酶、胰脂酶、熊去氧胆酸。该至少一种止泻药可以是至少一种选自如下的药物：绿坡缕石、次水杨酸铋、多羧钙(calciumpolycarbophil)、盐酸地芬诺酯或硫酸阿托品、洛哌丁胺、醋酸奥曲肽、阿片酊、阿片酊(含樟脑)。该至少一种缓泻药可以是至少一种选自如下的药物：比沙可啶(bisocodyl)、多羧钙、波希鼠李皮、波希鼠李皮芳香流浸膏、波希鼠李皮流浸膏、蓖麻油、琥珀辛酯磺酸钙、琥珀辛酯磺酸钠、甘油、乳酮糖、柠檬酸镁、氢氧化镁、硫酸镁、甲基纤维素、矿物油、聚乙二醇或电解质溶液、车前子、番泻叶、磷酸钠。该至少一种止吐剂可以是至少一种选自如下的药物：盐酸氯丙嗪、茶苯海明、多拉司琼甲磺酸盐、屈大麻酚、盐酸格雷西隆、盐酸氯苯苄嗪、甲氧氯普胺盐酸、盐酸奥丹西隆、奋乃静、甲哌氯丙嗪、乙二磺酸甲哌氯丙嗪、马来酸甲哌氯丙嗪、盐酸异丙嗪、东莨菪碱、马来酸硫乙哌丙嗪、盐酸曲美苄胺。该至少一种抗溃疡药可以是至少一种选自如下的药物：西咪替丁、盐酸西咪替丁、法莫替丁、兰索拉唑、米索前列醇、尼扎替丁、奥美拉唑、雷贝拉唑钠、雷尼替丁枸橼酸铋、盐酸雷尼替丁、硫糖铝(见，例如Nursing 2001Drug Handbook的第643-95页)。该至少一种皮质类固醇可以是至少一种选自如下的药物：倍他米松、醋酸倍他米松或倍他米松磷酸钠、倍他米松磷酸钠、醋酸可的松、地塞米松、醋酸氟美松、地塞米松磷酸钠、醋酸氟氢可的松、氢化可的松、醋酸氢化可的松、氢化可的松环戊丙酸酯、氢可松磷酯钠、氢化可的松琥珀酸钠、甲泼尼龙、醋酸甲泼尼龙、甲泼尼龙琥珀酸钠、泼尼松龙、醋酸泼尼松龙、泼尼松龙磷酸钠、强的松龙叔丁乙酯、泼尼松、曲安西龙、曲安奈德、曲安西龙双醋酸酯。
该至少一种雄性激素或合成代谢类固醇可以是至少一种选自如下的药物：达那唑、氟羟甲睾酮、甲睾酮、癸酸诺龙、苯丙酸诺龙、睾酮、环戊丙酸睾酮，庚酸睾酮、丙酸睾酮、睾酮透皮体系。该至少一种雌激素或孕酮可以是至少一种选自如下的药物：酯化雌激素、雌二醇、环戊丙酸雌二醇、雌二醇/醋炔诺酮透皮体系、戊酸雌二醇、雌激素(缀合物)、哌嗪雌酮、乙炔雌二醇、乙炔雌二醇和炔雌醇、乙炔雌二醇和双醋炔诺醇、乙炔雌二醇和炔雌醇、乙炔雌二醇和双醋炔诺醇、乙炔雌二醇和左旋甲炔诺酮、乙炔雌二醇和炔诺酮、乙炔雌二醇和醋炔诺酮、乙炔雌二醇和炔诺肟酯、乙炔雌二醇和甲基炔诺酮、乙炔雌二醇和炔诺酮和醋酸盐和富马酸铁、左旋甲炔诺酮、醋酸甲羟孕酮、甲氢龙和诺炔酮、炔诺酮、醋酸炔诺酮、甲基炔诺酮、孕酮。该至少一种促性腺激素可以是至少一种选自如下的药物：乙酸加尼瑞克、醋酸高纳瑞林、乙酸希司曲林、绝经促性素。该至少一种抗糖尿病药或高血糖素(glucaon)可以是至少一种选自如下的药物：阿卡波糖、氯磺丙脲、格列美脲、格列甲嗪、胰高血糖素、优降糖、胰岛素、盐酸二甲双胍、米格列醇、盐酸吡格列酮、瑞格列奈、马来酸罗格列酮、曲格列酮。该至少一种甲状腺激素可以是至少一种选自如下的药物：左旋甲状腺素钠、碘甲腺氨酸钠、复方甲状腺素、甲状腺素。该至少一种甲状腺激素拮抗剂可以是至少一种选自如下的药物：甲巯咪唑、碘化钾、碘化钾(饱和溶液)、丙硫尿嘧啶、放射性碘(碘化钠131I)、浓碘溶液。该至少一种垂体激素可以是至少一种选自如下的药物：促皮质素、二十四肽促皮质素、醋酸去氨加压素、醋酸亮丙瑞林、长效促皮质素、人蛋氨生长素、促生长激素、加压素。该至少一种甲状旁腺样药物可以是至少一种选自如下的药物：骨化二醇、降钙素(人)、降钙素(鲑鱼)、钙三醇、双氢速变固醇、羟乙二磷酸二钠(见，例如Nursing 2001 DrugHandbook的第696-796页)。
该至少一种利尿剂可以是至少一种选自如下的物质：乙酰唑胺、乙酰唑胺钠、盐酸阿米洛利、布美他尼、氯噻酮、依他尼酸钠、利尿酸、呋塞米、双氢克尿塞、吲达帕胺、甘露醇、美托拉宗、螺內酯、托塞米、氨苯喋啶、脲。该至少一种电解质或替代溶液可以是至少一种选自如下的物质：乙酸钙、碳酸钙、氯化钙、柠檬酸钙、葡乳醛酸钙、葡庚糖酸钙、葡萄糖酸钙、乳酸钙、磷酸钙(二元)、磷酸钙(三元)、葡聚糖(高分子量)、葡聚糖(低分子量)、羟乙基淀粉、氯化镁、硫酸镁、乙酸钾、碳酸氢钾、氯化钾、葡萄糖酸钾、林格氏注射液、林格注射液(乳酸化)、氯化钠。该至少一种酸化剂或碱化剂可以是至少一种选自如下的物质：碳酸氢钠、乳酸钠、三羟甲基氨基甲烷(见，例如Nursing 2001 DrugHandbook的第797-833页)。
该至少一种补血药可以是至少一种选自如下的物质：富马酸亚铁、葡萄糖酸亚铁、硫酸亚铁、硫酸亚铁(无水的)、右旋糖酐铁、山梨醇铁、多糖-铁络合物、葡糖酸铁钠络合物。该至少一种抗凝剂可以是至少一种选自如下的药物：阿地肝素钠、达肝素钠、达那肝素钠、依诺肝素钠、肝素钙、肝素钠、华法林钠。该至少一种血液衍生物可以是至少一种选自如下的物质：白蛋白5％、白蛋白25％、抗血友病因子、抗抑制剂凝血剂复合物、抗凝血酶III(人)、因子IX(人)、因子IX复合物、血浆蛋白级分。该至少一种血栓溶解酶可以是至少一种选自如下的药物：阿替普酶、艾尼斯屈酶、瑞替普酶(重组的)、链激酶、尿激酶(见，例如，Nursing 2001 Drug Handbook的第834-66页)。
该至少一种烷化药物可以是至少一种选自如下的药物：白消安、卡铂、卡氮芥、苯丁酸氮芥、顺铂、环磷酰胺、异环磷酰胺、环己亚硝脲、盐酸氮芥、苯丙氨酸氮芥、盐酸苯丙氨酸氮芥、链脲霉素、替莫唑胺、噻替哌。该至少一种抗代谢物可以是至少一种选自如下的药物：卡培他滨、克拉利平、阿糖胞苷、氟尿苷、磷酸氟达拉滨、氟尿嘧啶、羟基脲、巯基嘌呤、甲氨蝶呤、甲氨蝶呤钠、硫鸟嘌呤。该至少一种抗生素抗癌瘤药可以是至少一种选自如下的药物：硫酸博来霉素、放线菌素D、柠檬酸柔红霉素脂质体、盐酸柔红霉素、盐酸阿霉素、盐酸阿霉素脂质体、盐酸表阿霉素、盐酸去甲柔毛霉素、丝裂霉素、喷托他丁、普卡霉素、戊柔比星。该改变激素平衡的至少一种抗肿瘤药可以是至少一种选自如下的药物：阿那曲唑、比卡鲁胺、磷雌氮芥钠、依西美坦、氟利坦、醋酸性瑞林、来曲唑、醋酸亮丙瑞林、甲地孕酮、尼鲁米特、枸橼酸他莫昔芬、睾內酯、枸橼酸托瑞米芬。该至少一种杂项抗肿瘤药可以是至少一种选自如下的药物：天冬酰胺酶、卡介苗(BCG)(活膀胱內的)、迭卡巴嗪、多西他赛、依托泊苷、磷酸依托泊苷、盐酸吉西他滨、盐酸依立替康、米托坦、盐酸米托蒽醌、紫杉醇、天门冬酰胺酶，卟吩姆钠、盐酸甲基苄肼、利妥昔单抗、替尼泊苷、盐酸托泊替康、曲妥单抗、维甲酸、硫酸长春碱、硫酸长春新碱、酒石酸长春瑞滨(见，例如Nursing 2001 Drug Handbook的867-963页)。
该至少一种免疫抑制剂可以是至少一种选自如下的物质：硫唑嘌呤、巴利昔单抗、环胞素、达克珠单抗、淋巴细胞免疫球蛋白、鼠单克隆抗体-CD3、麦考酚酸莫酯、盐酸麦考酚酸莫酯、西罗莫司、他克莫司。该至少一种疫苗或类毒素可以是至少一种选自如下的物质：BCG疫苗、霍乱疫苗，白喉和破伤风类毒素(吸附的)、吸附的白喉和破伤风类毒素和无细胞百日咳疫苗、白喉和破伤风类毒素和完整细胞百日咳疫苗、b型嗜血菌(Haemophilius b)缀合物疫苗、甲型肝炎疫苗(灭活的)、乙型肝炎疫苗(重组的)、流感病毒疫苗1999-2000三价A和B型(纯化的表面抗原)、流感病毒疫苗1999-2000三价A和B型(亚病毒体或纯化的亚病毒体)、流感病毒疫苗1999-2000三价A和B型(完整病毒体)、日本脑炎病毒疫苗(灭活的)、莱姆氏病疫苗(重组的OspA)、麻疹和腮腺炎和风疹病毒疫苗(活的)、麻疹和腮腺炎和风疹病毒疫苗(活的减毒的)、麻疹病毒疫苗(活的减毒的)、脑膜炎球菌多糖疫苗、腮腺炎病毒疫苗(活的)、鼠疫疫苗、肺炎球菌疫苗(多价的)、脊髓灰质炎病毒疫苗(灭活的)、脊髓灰质炎病毒疫苗(活的，经口、三价)、狂犬病疫苗(吸附的)、狂犬病疫苗(人二倍体细胞)、风疹和腮腺炎病毒疫苗(活的)、风疹病毒疫苗(活的、减毒的)、破伤风类毒素(吸附的)、破伤风类毒素(流体)、伤寒疫苗(经口)、伤寒疫苗(肠胃外)、伤寒vi多糖疫苗、水痘病毒疫苗、黄热病疫苗。该至少一种抗毒素或抗毒血清可以是至少一种选自如下的药物：抗黑寡妇蜘蛛毒血清、抗响尾蛇科(Crotalidae)毒血清(多价)、白喉抗毒素(马)、抗黄金珊瑚蛇(Micrurus fulvius)毒血清。该至少一种免疫血清可以是至少一种选自如下的药物：巨细胞病毒免疫球蛋白(静脉内)、乙型肝炎免疫球蛋白(人)、肌內免疫球蛋白、静脉內免疫球蛋白、狂犬病免疫球蛋白(人)、静脉內的呼吸道合胞病毒免疫球蛋白(人)、Rh0(D)免疫球蛋白(人)、静脉內的Rh0(D)免疫球蛋白(人)、破伤风免疫球蛋白(人)、水痘-带状疱疹免疫球蛋白。该至少一种生物应答修饰剂可以是至少一种选自如下的物质：阿地白介素、阿法依伯汀、非格司亭、注射用醋酸格拉替雷、复合α干扰素、干扰素α-2a(重组的)、干扰素α-2b(重组的)、干扰素β-1a、干扰素β-1b(重组的)、干扰素γ-1b、盐酸左旋咪唑、奥普瑞白介素、沙莫司亭(见，例如Nursing 2001 Drug Handbook的第964-1040页)。
该至少一种眼用抗感染剂可以是至少一种选自如下的药物：杆菌肽、氯霉素、盐酸环丙沙星、红霉素、硫酸庆大霉素、氧氟沙星0.3％、硫酸多粘菌素B、乙酰磺胺钠10％、乙酰磺胺钠15％、乙酰磺胺钠30％、妥布霉素、阿糖腺苷。该至少一种眼用消炎药可以是至少一种选自如下的药物：地塞米松、地塞米松磷酸钠、双氯芬酸钠0.1％、氟米龙、氟比洛芬钠、酮咯酸氨丁三醇、醋酸泼尼松龙(混悬剂)、泼尼松龙磷酸钠(溶液剂)。该至少一种缩瞳药可以是至少一种选自如下的药物：氯乙酰胆碱、卡巴胆碱(眼內)、卡巴胆碱(局部用)、碘乙膦硫胆碱、毛果芸香碱、盐酸毛果芸香碱、硝酸毛果芸香碱。该至少一种放瞳剂可以是至少一种选自如下的药物：硫酸阿托品、盐酸环戊醇胺酯、盐酸肾上腺素、环硼肾上腺素、氢溴酸后马托品、盐酸去氧肾上腺素、氢溴酸东莨菪碱、托吡卡胺。该至少一种眼用血管收缩剂可以是至少一种选自如下的药物：盐酸萘甲唑啉、盐酸氧甲唑啉、盐酸四氢唑啉。该至少一种杂项眼用药可以是至少一种选自如下的药物：盐酸阿拉可乐定、盐酸倍他索洛尔、酒石酸溴莫尼定、盐酸卡替洛尔、盐酸地匹福林、盐酸多佐胺、富马酸依美斯汀、荧光素钠、富马酸酮替芬、拉坦前列素、盐酸左布诺洛尔、盐酸美替洛尔、氯化钠(高渗)、马来酸噻吗心安。该至少一种耳用药可以是至少一种选自如下的药物：硼酸、过氧化氢脲、氯霉素、油酸三乙醇胺多肽缩合物。该至少一种鼻用药可以是至少一种选自如下的药物：二丙酸倍氯米松、布德松、硫酸麻黄碱、盐酸肾上腺素、氟尼缩松、丙酸氟替卡松、盐酸萘甲唑啉、盐酸氧甲唑啉、盐酸去氧肾上腺素、盐酸四氢唑啉、曲安奈德、盐酸丁苄唑啉(参见，例如Nursing 2001 Drug Handbook的第1041-97页)。
该至少一种局部用抗感染剂可以是至少一种选自如下的药物：阿昔洛韦、两性霉素B、壬二酸乳膏、杆菌肽、硝酸布康唑、磷酸克林霉素、克霉唑、硝酸益康唑、红霉素、硫酸庆大霉素、酮康唑、醋酸磺胺米隆、甲硝唑(局部用)、硝酸咪康唑、莫匹罗星、盐酸萘夫替芬、硫酸新霉素、呋喃西林、制霉素、磺胺嘧啶银、盐酸特比萘芬、曲康唑、盐酸四环素、噻康唑、托萘酯。该至少一种杀疥螨剂或杀虱剂可以是至少一种选自如下的药物：克罗米通、林丹、扑灭司林、除虫菊酯。该至少一种局部皮质类固醇可以是至少一种选自如下的药物：二丙酸倍他米松、戊酸倍他米松、丙酸氯倍他索、丙缩羟强龙、去羟米松、地塞米松、地塞米松磷酸钠，二乙酸二氟拉松、氟轻松、氟轻松醋酸酯、氟氢缩松、丙酸氟替卡松、氯氟舒松(halcionide)、氢化可的松、醋酸氢化可的松、丁酸氢化可的松、戊酸氢化可的松、糠酸莫米松、曲安奈德(见，例如Nursing 2001 DrugHandbook的第1098-1136页)。
该至少一种维生素或矿物质可以是至少一种选自如下的物质：维生素A、复合维生素B、氰钴胺素、叶酸、羟钴胺素、甲酰四氢叶酸钙、烟酸、烟酰胺、盐酸吡哆醇、核黄素、盐酸硫胺素、维生素C、维生素D、胆钙化醇、麦角钙化醇、维生素D类似物、度骨化醇、帕立骨化醇、维生素E、维生素K类似物、维生素K1、氟化钠、氟化钠(局部用)、痕量元素、铬、铜、碘、锰、硒、锌。该至少一种热质可以是至少一种选自如下的物质：氨基酸输注液(结晶)、葡萄糖中的氨基酸输注液、具有电解质的氨基酸输注液、葡萄糖中的具有电解质的氨基酸输注液、用于肝衰竭的氨基酸输注液、用于高代谢应激的氨基酸输注液、用于肾衰竭的氨基酸输注液、葡萄糖、脂肪乳剂、中等链甘油三酯(见，例如Nursing 2001Drug Handbook的第1137-63页)。
本发明的抗淀粉样蛋白抗体组合物可以还包含任何合适且有效的量的至少一者的组合物或药物组合物，其包含至少一种针对需要这种调节、治疗或疗法的细胞、组织、器官、动物或患者的抗淀粉样蛋白抗体，任选还含有至少一种选自如下的物质：至少一种TNF拮抗剂(例如，但不限于：FNF化学或蛋白质拮抗剂、TNF单克隆或多克隆抗体或片段、可溶性TNF受体(如p55、p70或p85)或片段、融合多肽或小分子TNF拮抗剂，如TNF结合蛋白I或II(TBP-1或TBP-II)、奈瑞莫单抗(nerelimonmab)、英夫利昔单、enteracept、CDP-571、CDP-870、阿非莫单抗、来那西普，等等)、抗风湿药(如，甲氨蝶呤、金诺芬、硫代葡萄糖金、硫唑嘌呤、依那西普、硫代苹果酸金钠、硫酸羟氯喹、来氟米特、柳氮磺吡啶)、肌肉松弛药、麻醉药、非类固醇消炎药(NSAID)、镇痛药、麻醉剂、镇静剂、局部用麻醉剂、神经肌肉阻滞剂、抗微生物剂(如，氨基糖苷类、抗真菌剂、抗寄生物剂、抗病毒剂、碳青霉烯、头孢菌素、氟喹诺酮、大环內酯、青霉素、磺胺药物、四环素、其他抗微生物剂)、抗牛皮癣剂、皮质类固醇、合成代谢类固醇、糖尿病相关剂、矿物质、营养物、甲状腺剂、维生素、钙相关激素、止泻剂、止咳药、止吐剂、抗溃疡药、缓泻药、抗凝剂、促红细胞生成素(例如，阿法依伯汀)、非格司亭(如，G-CSF、Neupogen)、沙莫司亭(GM-CSF、白细胞素)、免疫剂、免疫球蛋白、免疫抑制剂(如，巴利昔单抗、环孢菌素、达克珠单抗)、生长激素、激素替代药物、雌激素受体调节剂、扩瞳剂、睫状肌麻痹药、烷化剂、抗代谢物、有丝分裂抑制剂、放射性药剂、抗抑郁药、抗躁狂剂、抗精神病药、抗焦虑药、催眠药、拟交感神经药、兴奋剂、多奈哌齐、他克林、哮喘药、β-激动剂、吸入类固醇、白细胞三烯抑制剂、甲基黄嘌呤、色甘酸、肾上腺素或类似物、阿法链道酶(Pulmozyme)、细胞因子或细胞因子拮抗剂。此类细胞因子的非限制性例子包括(但不限于)IL-1至IL-23中的任一者。合适的剂量是本领域熟知的。参见，例如，Wells等人(编辑)，Pharmacotherapy Handbook，第2版，Appleton and Lange，Stamford，CT(2000)；PDR Pharmacopoeia，Tarascon PocketPharmacopoeia 2000，Deluxe Edition，Tarascon Publishing，LomaLinda，CA(2000)，所述参考文献各自以引用方式全文并入本文中。
此类抗癌药或抗感染药还可包括与本发明的至少一种抗体缔合、结合、共同配制或共同给予的毒素分子。毒素可任选起到选择性杀死病理性细胞或组织的作用。病理性细胞可以是癌细胞或其他细胞。此类毒素可以是(但不限于)纯化的或重组的毒素或包含毒素的至少一个功能性细胞毒性结构域的毒素片段，所述毒素例如选自蓖麻毒素、白喉毒素、毒液毒素或细菌毒素中的至少一者。术语毒素还包括由任何天然存在的、突变型或重组型细菌或病毒产生的内毒素和外毒素，其可在人和其他哺乳动物中引起任何病理状况，包括毒素休克，这可导致死亡。此类毒素可包括(但不限于)肠产毒性大肠杆菌热不稳定肠毒素(LT)、热稳定肠毒素(ST)、志贺氏菌属(Shigella)细胞毒素、气单胞菌属(Aeromonas)肠毒素、中毒性休克综合征毒素-1(TSST-1)、葡萄球菌(Staphylococcal)肠毒素A(SEA)、B(SEB)或C(SEC)、链球菌(Streptococcal)肠毒素等。此类细菌包括(但不限于)下列细菌的菌株：肠产毒性大肠杆菌(ETEC)、肠出血性大肠杆菌(例如血清型0157:H7菌株)、葡萄球菌属(例如金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)、化脓性葡萄球菌(Staphylococcuspyogenes))、志贺氏菌属(例如痢疾志贺氏菌(Shigelladysenteriae)、弗氏志贺氏菌(Shigella flexneri)、鲍氏志贺氏菌(Shigella boydii)和宋内氏志贺氏菌(Shigella sonnei))、沙门氏菌属(例如伤寒沙门氏菌(Salmonella typhi)、猪霍乱沙门氏菌(Salmonellacholera-suis)、肠炎沙门氏菌(Salmonella enteritidis))、梭菌属(例如产气荚膜梭菌(Clostridium perfringens)、艰难梭菌(Clostridium dificile)、肉毒梭菌(Clostridium botulinum))、弯曲菌属(例如Camphlobacter jejuni、Camphlobacter fetus)、螺杆菌属(例如幽门螺杆菌(Heliobacter pylori))、气单胞菌属(例如温和气单胞菌(Aeromona ssobria)、嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)、豚鼠气单胞菌(Aeromona scaviae))、Pleisomonas shigelloides、小肠结肠炎耶尔森氏菌(Yersina enterocolitica)、弧菌属(例如霍乱弧菌(Vibrioscholerae)、副溶血弧菌(Vibrios parahemolyticus))、克雷伯氏菌属，铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa)和链球菌属。参见，例如Stein(编辑)，INTERNAL MEDICINE，第3版，第1-13页，Little，Brownand Co.，Boston，(1990)；Evans等人(编辑)，Bacterial Infectionsof Humans：Epidemiology and Control，第2版，第239-254页，Plenum Medical Book Co.，New York(1991)；Mandell等人，Principles and Practice of Infectious Diseases，第3版，Churchill Livingstone，New York(1990)；Berkow等人(编辑)，TheMerck Manual，第16版，Merck and Co.，Rahway，N.J.，1992；Wood等人，FEMS Microbiology Immunology，76：121-134(1991)；Marrack等人，Science，248：705-711(1990)，所述参考文献的内容以引用方式全文并入本文中。
本发明的抗淀粉样蛋白抗体混合物、组合物或组合还可包含任何合适辅助剂中的至少一种，例如(但不限于)稀释剂、粘结剂、稳定剂、缓冲剂、盐、亲脂性溶剂、防腐剂、辅剂等。可药用辅助剂是优选的。此类无菌溶液的非限制性例子和制备方法是本领域熟知的，例如但不限于：Gennaro(编辑)，Remington’s Pharmaceutical Sciences，第18版，Mack Publishing Co.(Easton，PA)1990。如本领域熟知的或如本文所述的，可以常规选择适合于抗淀粉样蛋白抗体、片段或变体组合物的给予方式、溶解性和/或稳定性的可药用载体。
可用于本发明组合物的药学赋形剂和添加剂包括(但不限于)蛋白质、肽、氨基酸、脂质和碳水化合物(例如糖类，包括单糖、二糖、三糖、四糖和寡糖；衍生糖类，例如糖醇、糖醛酸、酯化糖等；和多糖或糖聚合物)，它可以单独或组合存在，单独或组合占1-99.99重量％或体积％。示例性的蛋白质赋形剂包括血清白蛋白，例如人血清白蛋白(HSA)、重组人白蛋白(rHA)、明胶、酪蛋白等。还可以在缓冲能力方面起作用的代表性氨基酸/抗体组分包括丙氨酸、甘氨酸、精氨酸、甜菜碱、组氨酸、谷氨酸、天冬氨酸、半胱氨酸、赖氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、缬氨酸、甲硫氨酸、苯丙氨酸、阿斯巴甜等。一种优选的氨基酸是甘氨酸。
适用于本发明的碳水化合物赋形剂包括(例如)单糖，例如果糖、麦芽糖、半乳糖、葡萄糖、D-甘露糖、山梨糖等；二糖，例如乳糖、蔗糖、海藻糖、纤维二糖等；多糖，例如棉子糖、松三糖、麦芽糖糊精、葡聚糖、淀粉等；和糖醇，例如甘露糖醇、木糖醇、麦芽糖醇、乳糖醇、木糖醇、山梨糖醇(葡糖醇)、肌醇等。用于本发明的优选碳水化合物赋形剂是甘露糖醇、海藻糖和棉子糖。
抗淀粉样蛋白抗体组合物还可包括缓冲剂或pH调节剂；通常，缓冲剂是由有机酸或碱制备的盐。代表性缓冲剂包括有机酸盐，例如柠檬酸、抗坏血酸、葡糖酸、碳酸、酒石酸、琥珀酸、乙酸或邻苯二甲酸的盐；Tris、盐酸三羟甲基氨基甲烷)或磷酸盐缓冲剂。用于本发明组合物的优选缓冲剂是有机酸盐，例如柠檬酸盐。
此外，本发明的抗淀粉样蛋白抗体组合物可包含聚合物赋形剂/添加剂，例如聚乙烯吡咯烷酮、ficolls(聚合糖)、葡萄糖结合剂(例如环糊精，例如2-羟丙基-β-环糊精)、聚乙二醇、调味剂、抗微生物剂、增甜剂、抗氧化剂、抗静电剂、表面活性剂(例如聚山梨醇酯，例如“TWEEN 20”和“TWEEN 80”)、脂质(例如磷脂、脂肪酸)、类固醇(例如胆固醇)和螯合剂(例如EDTA)。
适用于根据本发明的抗淀粉样蛋白抗体、部分或变体组合物中的这些和另外的已知药学赋形剂和/或添加剂是本领域已知的，例如，如在下列文献中列出的：“Remington：The Science&Practice of Pharmacy”，第19版，Williams&amp；Williams，(1995)，和“Physician’s DeskReference”，第52版，Medical Economics，Montvale，NJ(1998)，将所述参考文献的公开内容以引用方式全文并入本文中。优选的载体或赋形剂材料是碳水化合物(例如糖和醛醇)和缓冲剂(例如柠檬酸盐)或聚合物试剂。
制剂
如上面指出，本发明提供适于药用或兽医用途的稳定制剂，其优选为具有盐水或选定的盐的磷酸缓冲液，以及含有防腐剂的防腐溶液和制剂，以及多用途防腐制剂，所述制剂包含于可药用配方中的至少一种抗淀粉样蛋白抗体。防腐制剂含有至少一种已知的防腐剂或其任选选自至少一种苯酚、间甲酚、对甲酚、邻甲酚、氯甲酚、苄醇、硝酸苯汞、苯氧基乙醇、甲醛、氯代丁醇、氯化镁(例如，六水合物)、对羟基苯甲酸烷基酯(甲基酯、乙基酯、丙基酯、丁基酯，等等)、苯扎氯铵、氯化苄乙氧铵、脱氢醋酸钠和硫柳汞，或者它们在水性稀释剂中的混合物。任何适宜的浓度或者混合物均可使用，如本领域所知，例如0.001-5％，或其中的任何范围或数值，例如但不限于：0.001、0.003、0.005、0.009、0.01、0.02、0.03、0.05、0.09、0.1、0.2、0.3、0.4.、0.5、0.6、0.7、0.8、0.9、1.0、1.1、1.2、1.3、1.4、1.5、1.6、1.7、1.8、1.9、2.0、2.1、2.2、2.3、2.4、2.5、2.6、2.7、2.8、2.9、3.0、3.1、3.2、3.3、3.4、3.5、3.6、3.7、3.8、3.9、4.0、4.3、4.5、4.6、4.7、4.8、4.9，或其中的任何范围或数值。非限制性的例子包括：无防腐剂、0.1-2％间甲酚(如0.2、0.3、0.4、0.5、0.9、1.0％)、0.1-3％苄醇(如0.5、0.9、1.1.、1.5、1.9、2.0、2.5％)、0.001-0.5％乙基汞硫代水杨酸钠(如0.005、0.01)、0.001-2.0％苯酚(如0.05、0.25、0.28、0.5、0.9、1.0％)、0.0005-1.0％对羟基苯甲酸烷基酯(如0.00075、0.0009、0.001、0.002、0.005、0.0075、0.009、0.01、0.02、0.05、0.075、0.09、0.1、0.2、0.3、0.5、0.75、0.9，1.0％)等等。
如上文指出的，本发明提供了包括包装材料和至少一个小瓶的制品，所述小瓶包含至少一种抗淀粉样蛋白抗体与规定的缓冲剂和/或防腐剂的溶液(任选溶于水性稀释剂中)，其中所述包装材料包括标签，该标明此类溶液可以在1、2、3、4、5、6、9、12、18、20、24、30、36、40、48、54、60、66、72小时或更长时间段内保存。本发明还包括制品，该制品包括包装材料、包含冻干的至少一种抗淀粉样蛋白抗体的第一小瓶和包含规定缓冲剂和/或防腐剂的水性稀释剂的第二小瓶，其中所述包装材料包括标签，该标签指导患者在所述水性稀释剂中重构所述至少一种抗淀粉样蛋白抗体以形成可以在24小时或更长时间段内保存的溶液。
根据本发明使用的至少一种抗淀粉样蛋白抗体可以通过重组手段制备，包括从哺乳动物细胞或转基因制品制备，或者可以从其他生物来源纯化，如本文所描述的或如本领域所知的。
如果在湿润/干燥系统中，那么本发明产品中的至少一种抗淀粉样蛋白抗体的范围包括重构后产生约1.0μg/ml至约1000mg/ml的浓度的量，但是更低和更高的浓度是可行的并且取决于预期的递送介质，如溶液制剂将不同于透皮贴剂、经肺、跨粘膜或渗透或微量泵方法。
优选的是，水性稀释剂还任选包含可药用防腐剂。优选的防腐剂包括选自如下的那些：苯酚、间甲酚、对甲酚、邻甲酚、氯甲酚、苄醇、对羟基苯甲酸烷基酯(甲基酯、乙基酯、丙基酯、丁基酯等)、烷基苄基二甲基氯化铵、氯化苄乙氧铵、脱氢乙酸钠和硫柳汞或其混合物。在制剂中使用的防腐剂的浓度是足以产生抗微生物作用的浓度。该浓度取决于所选防腐剂且容易由技术人员确定。
其他辅药例如等渗剂、缓冲剂、抗氧化剂、防腐剂、增强剂可任选并优选加入稀释剂中。等渗剂例如甘油常常以已知的浓度使用。优选加入生理学耐受的缓冲剂以提供改善的pH控制。制剂可以覆盖宽的pH范围，例如约pH 4至约pH 10，优选的范围是约pH 5至约pH 9，最优选的范围是约6.0至约8.0。优选本发明的制剂具有约6.8至约7.8的pH。.优选的缓冲剂包括磷酸盐缓冲剂，最优选磷酸钠，特别是磷酸盐缓冲盐水(PBS)。
可以任选将其他添加剂例如可药用增溶剂如Tween 20(聚氧乙烯(20)脱水山梨糖醇单月桂酸酯)、Tween 40(聚氧乙烯(20)脱水山梨糖醇单棕榈酸酯)、Tween 80(聚氧乙烯(20)脱水山梨糖醇单油酸酯)、PluronicF68(聚氧乙烯聚氧丙烯嵌段共聚物)和PEG(聚乙二醇)或非离子表面活性剂如聚山梨醇酯20或80或泊洛沙姆184或188、polvls、其他嵌段共聚物以及螯合剂如EDTA和EGTA加入制剂或组合物中以减少聚集。如果使用泵或塑料容器来给予制剂，则这些添加剂是特别有用的。可药用表面活性剂的存在减轻了蛋白质聚集的倾向。
本发明的制剂可通过这样一种方法来制备，该方法包括将至少一种抗淀粉样蛋白抗体和防腐剂在水性稀释剂中混合，该防腐剂选自苯酚、间甲酚、对甲酚、邻甲酚、氯甲酚、苄醇、对羟基苯甲酸烷基酯(甲基酯、乙基酯、丙基酯、丁基酯等)、苯扎氯铵，氯化苄乙氧铵、脱氢醋酸钠和硫柳汞或它们的混合物。用常规溶解和混合方法将所述至少一种抗淀粉样蛋白抗体和防腐剂在水性稀释剂中混合。为了制备适宜的制剂，例如，将缓冲液中的测定量的至少一种抗淀粉样蛋白抗体与所需的防腐剂在缓冲液中以一定量组合，所述量足以提供所需浓度的蛋白质和防腐剂。该方法的变型形式会是本领域普通技术人员认识到的。例如，组分添加的顺序、是否使用另外的添加剂、制剂制备时的温度和pH都是可以为所用的给药浓度和方式进行最优化的因素。
受权利要求书保护的制剂可以澄清溶液或双小瓶的形式提供给患者，所述双小瓶包括一小瓶冻干的至少一种抗淀粉样蛋白抗体，所述抗体用第二小瓶在水性稀释剂中重构，所述第二小瓶装有水、防腐剂和/或赋形剂，优选磷酸盐缓冲液和/或盐水和所选的盐。单个溶液小瓶或需要重构的双小瓶都可以多次再次使用，并且可以满足患者治疗的单个或多个周期，且因此可以提供比目前可用的治疗方案更方便的治疗方案。
本发明受权利要求书保护的制品可用于在即刻给予至24小时或更长时间段内给予。因此，本发明受权利要求书保护的制品能给患者提高明显优点。本发明的制剂可以任选安全地贮存于约2至约40℃的温度下，并且在长的时间内保持蛋白质的生物活性，从而使包装标签能标明溶液可在6、12、18、24、36、48、72或96小时或更长的时间段内保持和/或使用。如果使用防腐稀释剂，则此类标签可包括最多1-12个月、半年、一年半和/或2年的使用。
本发明的至少一种抗淀粉样蛋白抗体的溶液可通过包括将至少一种抗体在水性稀释剂中混合的方法来制备。混合是用常规的溶解和混合方法来进行。为了制备合适的稀释液，例如，将水或缓冲液中的测定量的至少一种抗体以一定量合并，所述量足以提供蛋白质和任选的防腐剂或缓冲剂成所需的浓度。这种方法的变型形式会是本领域普通技术人员可认识到的。例如，组分添加的顺序、是否使用另外的添加剂、制剂制备时的温度和pH都是可以为所用的给药浓度和方式进行最优化的因素。
受权利要求保护的产品可以澄清溶液或双小瓶子的形式提供给患者，所述双小瓶包括一小瓶冻干的至少一种抗淀粉样蛋白抗体，其用装有水性稀释剂的第二瓶子进行重构。单个溶液小瓶或需要重构的双小瓶都可以多次再使用，并且可以满足患者治疗的单个或多个周期，并因而提供比目前可用的治疗方案更方便的治疗方案。
所述受权利要求书保护的产品可通过给药房、门诊或其他此类机构和单位提供澄清的溶液或双小瓶来间接地提供给患者，所述双小瓶包括一小瓶冻干的至少一种抗淀粉样蛋白抗体，所述抗体用装有水性稀释剂的第二小瓶进行重构。在这种情况下澄清溶液剂的容积大小可以最多为1升或甚至更大，从而提供大的贮存库，从中可以一次或多次取出较小部分的至少一种抗体溶液用于转移到较小的小瓶内，且通过药房或门诊提供给它们的顾客和/或患者。
包括这类单个小瓶系统的公认的装置包括用于递送溶液剂的那些笔式注射器装置，例如BD Pens、BD
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以及
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例如由BectonDickensen(Franklin Lakes，NJ，www.bectondickenson.com)、Disetronic(Burgdorf，Switzerland，www.disetronic.com；Bioject，Portland，Oregon(www.bioject.com)；National Medical Products、Weston Medical(Peterborough，UK，www.weston-medical.com)、Medi-Ject Corp(Minneapolis，MN，www.mediject.com)制备或开发的。包括双小瓶系统的公认的装置包括用于在药筒中重构冻干药物以用于递送重构溶液剂的那些笔式注射器系统，例如
本发明受权利要求书保护的产品包括包装材料。包装材料除了提供管理机构要求的信息之外，还提供本产品可得以使用的条件。对于双小瓶、湿润/干燥产品，本发明的包装材料提供指导患者在水性稀释剂中重构至少一种抗淀粉样蛋白抗体以形成溶液，以及在2-24小时或更长时间段内使用溶液的说明书。对于单小瓶溶液产品，标签标明此类溶液可以在2-24小时或更长时间段内使用。本发明受权利要求书保护的产品可用于人药物产品用途。
本发明的制剂可通过这样一种方法制备，该方法包括将至少一种抗淀粉样蛋白抗体和所选的缓冲剂混合，所述缓冲剂优选为含有盐水或所选盐的磷酸缓冲液。用常规溶解和混合方法将所述至少一种抗淀粉样蛋白抗体和缓冲剂在水性稀释剂中混合。例如，为了制备合适的制剂，将水或缓冲液中的测定量的至少一种抗体与所需缓冲剂在一定量的水中混合，所述量足以提供所述蛋白质和缓冲剂成所需浓度。这种方法的变型形式会是本领域普通技术人员可认识到的。例如，组分添加的顺序、是否使用另外的添加剂、制剂制备时的温度和pH都是可以为所用的给药浓度和方式进行最优化的因素。
可以将受权利要求保护的稳定或防腐的制剂以澄清溶液或双小瓶的形式提供给患者，所述双小瓶包括一小瓶冻干的至少一种抗淀粉样蛋白抗体，其用装有在水性稀释剂中的防腐剂或缓冲剂和赋形剂的第二小瓶重构。单个溶液小瓶或需要重构的双小瓶都可以多次再使用，并且可以满足患者治疗的单个或多个周期，因而提供比目前可用治疗方案的更方便的治疗方案。
其他使抗淀粉样蛋白抗体稳定的制剂或方法可导致产生包含所述抗体的冻干粉末的非澄清溶液。这种非澄清溶液包括包含颗粒悬浮液的制剂，所述颗粒是在尺寸不同的各称为微球体、微粒、纳米颗粒、纳米球体或脂质体的结构中含有抗淀粉样蛋白抗体的组合物。如U.S.4,589,330中教导的，含有活性物的此类相对均相的基本上为球形的颗粒制剂可以通过这样来形成：使含有活性剂和聚合物的水相与非水相接触，然后蒸发非水相以导致颗粒从水相聚结。如U.S.4,818,542中教导的，多孔微粒可以通过这样制备：使用含有分散于连续溶剂中的活性物和聚合物的第一相，通过冻干或稀释-提取-沉淀从悬浮液中去除所述溶剂。用于此类制备的优选聚合物是天然的或合成的共聚物或聚合物，其选自：明胶琼脂、淀粉、阿拉伯半乳聚糖、白蛋白、胶原、聚乙醇酸、聚乳酸、乙交酯-L(-)丙交酯聚(ε-己内酯、ε-己内酯-乳酸共聚物、ε-己内酯-乙醇酸共聚物、聚(β-羟基丁酸)、聚氧化乙烯、聚乙烯、聚(烷基-2-氰基丙烯酸酯)、聚(甲基丙烯酸羟乙酯)、聚酰胺、聚(氨基酸)、聚(2-羟乙基DL-天冬酰胺)、聚(酯脲)、聚(L-苯丙氨酸/乙二醇/1，6-二异氰酸根合己烷)和聚(甲基丙烯酸甲酯)。特别优选的聚合物是聚酯，例如聚乙醇酸、聚乳酸、乙交酯-L(-)丙交酯、聚(ε-己内酯、ε-己内酯-乳酸共聚物和ε-己内酯-乙醇酸共聚物。可用于溶解聚合物和/或活性物的溶剂包括：水、六氟异丙醇、二氯甲烷、四氢呋喃、己烷、苯或六氟丙酮倍半水合物。将含有活性物的相与第二相分散的方法可包括施加压力迫使所述第一相通过喷嘴中的孔口而实现小滴形成。
干粉制剂可以由冻干之外的方法产生，例如通过喷雾干燥或通过溶剂提取后蒸发而产生，或者通过沉淀结晶组合物后再通过一个或多个步骤去除含水或非含水溶剂而产生。喷雾干燥的抗体制剂的制备在U.S.6,019,968中有教导。基于抗体的干粉组合物可以通过在可提供可吸入干粉的条件下喷雾干燥抗体和任选的赋形剂在溶剂中的溶液或浆液来生产。溶剂可包括容易干燥的极性化合物，例如水和乙醇。可以通过在不存在氧的情况下进行喷雾干燥操作，例如在氮气氛下或通过使用氮作为干燥气体进行喷雾干燥操作，而使抗体的稳定性得到增强。如WO 9916419中所教导的，另一种相对干燥的制剂是许多有孔微结构分散于悬浮介质中所成的分散体，所述悬浮介质一般包含氢氟烷推进剂。可以使用定量吸入器将稳定化的分散体给予患者的肺。可用于喷雾干燥药物的商业制备中的设备由Buchi Ltd.或Niro Corp制造。
在本文所述的稳定的或加防腐剂的制剂或溶液中的至少一种抗淀粉样蛋白抗体可依照本发明经由多种递送方法给予患者，所述递送方法包括本领域所熟知的SC或IM注射；透皮、经肺、跨粘膜、植入、渗透泵、药筒、微型泵或技术人员理解的其他手段。
治疗应用
本发明还提供用至少一种本发明的淀粉样蛋白抗体调节或治疗本领域已知的或本文所述的细胞、组织、器官、动物或患者中的至少一种淀粉样蛋白相关疾病的方法。
本发明还提供用于调节或治疗细胞、组织、器官、动物或患者中的至少一种淀粉样蛋白相关疾病的方法，所述疾病包括(但不限于)肥胖症、免疫相关疾病、心血管疾病、传染性疾病、恶性疾病或神经疾病中的至少一者。这类淀粉样蛋白相关疾病可以包括但不限于：任何淀粉样变性、全身性淀粉样变性、阿尔茨海默病(AD)、散发性阿尔茨海默病、家族性阿尔茨海默病、lewy体变体阿尔茨海默病、朊病毒疾病、原发性全身性淀粉样变性、继发性全身性淀粉样变性、致密全身性淀粉样变性、单克隆蛋白全身性淀粉样变性、反应性全身性淀粉样变性、遗传性apoA1淀粉样变性、遗传性溶菌酶淀粉样变性、胰岛素相关淀粉样蛋白、芬兰型家族性淀粉样变性、家族性角膜上皮下淀粉样变性、家族性淀粉样多神经病、家族性非神经病性淀粉样变性、家族性英国型痴呆、遗传性大脑淀粉样血管病、血液透析相关的淀粉样变性、家族性淀粉样多神经病、家族性淀粉样变性的多神经病、成年型糖尿病、II型糖尿病、遗传性肾淀粉样变性、脑下垂体淀粉样变性、注射-局部化淀粉样变性、髓样癌、甲状腺髓样癌、心房淀粉样变性、孤立性心房淀粉样变性、遗传性大脑淀粉样血管病、遗传性纤维蛋白原α-链淀粉样变性、帕金森氏病、亨廷顿舞蹈病、海绵状脑病、朊病毒相关海绵状脑病、朊病毒相关传染性海绵状脑病、肌萎缩性侧索硬化症(ALS)、家族性肌萎缩性侧索硬化症、慢性阻塞性肺病等等。
本发明还提供调节或治疗细胞、组织、器官、动物或患者中至少一种神经或淀粉样蛋白相关疾病的方法，所述疾病包括(但不限于)如下疾病的至少一种：神经变性疾病、多发性硬化症、偏头痛、AIDS痴呆复合征、脱髓鞘疾病，例如多发性硬化症和急性横贯性脊髓炎；锥体束外和小脑障碍，例如脊髓皮质系统的病变；基底神经节的障碍或小脑障碍；运动机能亢进性运动障碍，例如亨廷顿舞蹈病和老年性舞蹈病；药物-诱发的运动障碍，例如阻断CNS多巴胺受体的药物诱导的运动障碍；运动机能减退性运动障碍，例如帕金森氏病；进行性核上麻痹；小脑的结构病变；脊髓小脑变性，例如脊椎性共济失调、弗里德赖希共济失调、小脑皮质变性、多系统变性(Mencel、Dejerine-Thomas、Shi-Drager和Machado-Joseph)；全身性障碍(雷弗素姆氏病、β-脂蛋白缺乏症、共济失调、毛细血管扩张和线粒体多系统障碍)；脱髓鞘核心障碍，例如多发性硬化症、急性横贯性脊髓炎；和运动单位的障碍，例如神经原性肌萎缩(前角细胞变性，例如肌萎缩性侧索硬化症、婴儿脊髓性肌萎缩和青少年脊髓性肌萎缩)；阿尔茨海默病；中年唐氏综合征；弥漫性Lewy体疾病；Lewy体型老年性痴呆；韦-柯二氏综合征；慢性酒精中毒；克罗伊茨费尔特-雅各布病；亚急性硬化性全脑炎、哈-斯二氏病；和拳击员痴呆等等。这种方法可任选包括将有效量的包含至少一种TNF抗体或特定部分或变体的组合物或药物组合物给予需要此类调节、治疗或疗法的细胞、组织、器官、动物或患者。参见，例如Merck Manual，第16版，Merck&Company，Rahway，NJ(1992)。
本发明还提供在细胞、组织、器官、动物或者患者中调节或治疗至少一种免疫或淀粉样蛋白相关疾病的方法，所述疾病包括(但不限于)如下疾病的至少一种：类风湿性关节炎、青少年类风湿性关节炎、全身性发作的青少年类风湿性关节炎、牛皮癣性关节炎、强直性脊柱炎、胃溃疡、血清阴性关节病、骨关节炎、炎性肠病、溃疡性结肠炎、系统性红斑狼疮、抗磷脂综合征、虹膜睫状体炎/葡萄膜炎/视神经炎、特发性肺纤维化、系统性脉管炎/韦格纳肉芽肿病、结节病、睾丸炎/输精管切除术逆转过程、变应性/特应性疾病、哮喘、变应性鼻炎、湿疹、变应性接触性皮炎、变应性结膜炎、过敏性肺炎，移植、器官移植排斥、移植物抗宿主病、全身性炎性反应综合征、脓毒病综合征、革兰氏阳性脓毒病、革兰氏阴性脓毒病、培养物阴性脓毒病、真菌性脓毒病、嗜中性白细胞减少性发热、尿脓毒病、脑膜炎球菌血症、外伤/出血、灼伤、电离辐射暴露、急性胰腺炎、成人呼吸窘迫综合征、类风湿性关节炎、酒精诱导的肝炎、慢性炎性病、结节病、克罗恩氏病、镰状细胞贫血、糖尿病、肾病、特应性疾病、超敏反应、变应性鼻炎、枯草热、常年性鼻炎、结膜炎、子宫內膜异位、哮喘、荨麻疹、全身性过敏反应、皮炎、恶性贫血、溶血病、血小板减少症、任何器官或者组织的移植排斥、肾移植排斥、心脏移植排斥、肝移植排斥、胰腺移植排斥、肺移植排斥、骨髓移植(BMT)排斥、皮肤同种异体移植排斥、软骨移植排斥、骨移植排斥、小肠移植排斥、胎儿胸腺植入物排斥、甲状旁腺移植排斥、任何器官或组织的异种移植排斥、同种异体移植排斥、抗受体过敏性反应、格雷夫斯病、雷诺氏病、B型胰岛素抗性糖尿病、哮喘、重症肌无力、抗体-介导的细胞毒性，III型过敏性反应、系统性红斑狼疮、POEMS综合征(多发性神经病、器官巨大症、内分泌病、单克隆丙种球蛋白病和皮肤变化综合征)、多发性神经病、器官巨大症、內分泌病、单克隆丙种球蛋白病、皮肤变化综合征、抗磷脂综合征、天疱疮、硬皮病、混合型结缔组织病、特发性阿狄森氏病、糖尿病、慢性活动性肝炎、原发性胆汁性肝硬化、白癜风、脉管炎、MI后心切开术综合征、IV型超敏感性、接触性皮炎、过敏性肺炎、同种异体移植排斥、胞內生物导致的肉芽瘤、药物敏感性、新陈代谢/特发性、威尔逊氏病、血色素沉着、α1-抗胰蛋白酶缺乏综合征、糖尿病性视网膜病、淋巴瘤性甲状腺肿、骨质疏松症、下丘脑-垂体-肾上腺轴评估、原发性胆汁性肝硬化、甲状腺炎、脑脊髓炎、恶病质、囊性纤维变性、新生儿慢性肺病、慢性阻塞性肺病(COPD)、家族性噬血细胞性组织细胞增多症、皮肤病、牛皮癣、秃头、肾病综合征、肾炎、肾小球性肾炎、急性肾功能衰竭、血液透析、尿毒症、毒性、先兆子痫、okt3疗法、抗cd3疗法、细胞因子疗法、化学疗法、放射疗法(例如，包括但不限于无力、贫血、恶病质等等)、慢性水杨酸中毒等等。参见，例如Merck Manual，第12-17版，Merck&Compan，Rahway，NJ(1972，1977，1982，1987，1992，1999)，PharmacotherapyHandbook，Wells等人(编辑)，第二版，Appleton andLange，Stamford，Conn.(1998，2000)，将它们全文以引用方式并入本文。
本发明还提供在细胞、组织、器官、动物或患者中调节或治疗至少一种心血管疾病或淀粉样蛋白相关疾病的方法，所述疾病包括(但不限于)如下疾病中的至少一种：心脏震昏综合征、心肌梗死、充血性心力衰竭、中风、缺血性中风、出血、动脉硬化症、动脉粥样硬化、再狭窄、糖尿病性动脉硬化病、高血压、动脉高压、肾血管性高血压、昏厥、休克、心血管系统梅毒、心力衰竭、肺源性心脏病、原发性肺动脉高压、心律失常、心房异位搏动、心房扑动、心房颤动(持续性或阵发性)、灌注后综合征、心肺分流术炎症反应、紊乱性或多灶性房性心动过速、规则狭窄性QRS心动过速、特殊心律失常、心室颤动、希氏束心律失常、房室传导阻滞、束支传导阻滞、心肌局部缺血障碍、冠状动脉病、心绞痛、心肌梗死、心肌病、扩张性充血性心肌病、限制性心肌病、辦膜心脏病、心內膜炎、心包病，心脏肿瘤、主动脉和周围性动脉瘤、主动脉壁夹层形成、主动脉炎症、腹主动脉及其分支阻塞、外周血管障碍、阻塞性动脉障碍、外周动脉粥样硬化病、血栓闭塞性血管炎、功能性外周动脉障碍、雷诺氏现象和疾病、手足发绀、红斑性肢痛病、静脉病、静脉血栓形成、曲张静脉、动静脉瘘、淋巴水肿、脂肪水肿、不稳定心绞痛、再灌注损伤、泵后综合征、局部缺血-再灌注损伤等等。这种方法可任选包括将有效量的包含至少一种抗淀粉样蛋白抗体的组合物或药物组合物给予需要此类调节、治疗或疗法的细胞、组织、器官、动物或患者。
本发明还提供在细胞、组织、器官、动物或患者中调节或治疗至少一种传染性疾病或淀粉样蛋白相关疾病的方法，所述疾病括(但不限于)如下疾病中的至少一种：急性或慢性细菌感染、急性和慢性寄生或传染过程，包括细菌、病毒和真菌感染、HIV感染/HIV神经病、脑膜炎、肝炎(如甲型、乙型或丙型肝炎等)、脓毒性关节炎、腹膜炎、肺炎、会厌炎、大肠杆菌0157:h7、溶血性尿毒症综合征/溶解血栓性血小板减少性紫癜、疟疾、登革出血热、利什曼病、麻风病、中毒性休克综合征、链球菌性肌炎、气性环疽、结核分枝杆菌(mycobacterium tuberculosis)、细胞内鸟分枝杆菌、卡氏肺囊虫性肺炎、骨盆炎症性疾病、睾丸炎/附睾炎、军团杆菌(legionella)、莱姆氏病、甲型流行性感冒、EB病毒、病毒相关吞噬血细胞综合征、病毒性脑炎/无菌性脑膜炎等。
本发明还提供在细胞、组织、器官、动物或患者中调节或治疗至少一种恶性疾病或淀粉样蛋白相关疾病的方法，所述疾病包括(但不限于)如下疾病中的至少一种：白血病、急性白血病、急性成淋巴细胞性白血病(ALL)、急性淋巴细胞性白血病、B细胞、T细胞或FAB ALL、急性髓细胞样性白血病(AML)、急性髓性白血病、慢性粒细胞性白血病(CML)、慢性淋巴细胞性白血病(CLL)、毛细胞性白血病、骨髓异常增生综合征(MDS)、淋巴瘤、何杰金氏病、恶性淋巴瘤、非何杰金氏淋巴瘤、伯基特淋巴瘤、多发性骨髓瘤、卡波西肉瘤、结肠直肠癌、胰腺癌、鼻咽癌、恶性组织细胞增多病、恶性肿瘤的肿瘤相关综合征/高血钙综合征、实体瘤、膀胱癌、乳腺癌、结肠直肠癌、子宫內膜癌、头癌、颈癌、遗传性非息肉病癌、何杰金氏淋巴瘤、肝癌、肺癌、非小细胞肺癌、卵巢癌、胰癌、前列腺癌、肾细胞癌、睾丸癌、腺癌、肉瘤、恶性黑素瘤、血管瘤、转移性疾病、癌相关骨吸收、癌相关骨痛等等。本发明的任何方法都可包括将有效量的包含至少一种抗淀粉样蛋白抗体的组合物或药物组合物给予需要此类调节、治疗或疗法的细胞、组织、器官、动物或患者。这种方法可任选还包括共同给予或联合疗法以治疗此类疾病或障碍，其中所述至少一种抗淀粉样蛋白抗体、其特定部分或变体的给予还包括在其给予之前、同时和/或之后给予至少一种选自如下的药物：至少一种TNF拮抗剂(例如，但不限于：TNF化学或蛋白质拮抗剂、TNF单克隆或多克隆抗体或片段、可溶性TNF受体(如，p55、p70或p85)或其片段、融合多肽或小分子TNF拮抗剂，例如，TNF结合蛋白I或II(TBP-1或TBP-II)、奈瑞莫单抗、英夫利昔单抗、enteracept、CDP-571、CDP-870、阿非莫单抗、来那西普等等)、抗风湿药(例如，甲氨蝶呤、金诺芬、硫代葡萄糖金、硫唑嘌呤、依那西普、硫代苹果酸金钠、硫酸羟氯喹、来氟米特、柳氮磺吡啶)、肌肉松弛药、麻醉药、非类固醇消炎药(NSAID)、镇痛药、麻醉剂、镇静剂、局部用麻醉剂、神经肌肉阻滞剂、抗微生物剂(如，氨基糖苷类、抗真菌剂、抗寄生物剂、抗病毒剂、碳青霉烯、头孢菌素、氟喹诺酮、大环內酯、青霉素、磺胺药物、四环素、其他抗微生物剂)、抗牛皮癣剂、皮质类固醇、合成代谢类固醇、糖尿病相关剂、矿物质、营养物、甲状腺剂、维生素、钙相关激素、止泻剂、止咳药、止吐剂、抗溃疡药、缓泻药、抗凝剂、促红细胞生成素(例如，阿法依伯汀)、非格司亭(如，G-CSF、Neupogen)、沙莫司亭(GM-CSF、白细胞素)、免疫剂、免疫球蛋白、免疫抑制剂(如，巴利昔单抗、环孢菌素、达克珠单抗)、生长激素、激素替代药物、雌激素受体调节剂、扩瞳剂、睫状肌麻痹药、烷化剂、抗代谢物、有丝分裂抑制剂、放射性药剂、抗抑郁药、抗躁狂剂、抗精神病药、抗焦虑药、催眠药、拟交感神经药、兴奋剂、多奈哌齐、他克林、哮喘药、β-激动剂、吸入类固醇、白细胞三烯抑制剂、甲基黄嘌呤、色甘酸、肾上腺素或类似物、阿法链道酶(Pulmozyme)、细胞因子或细胞因子拮抗剂。合适的剂量是本领域众所周知的。参见，例如Wells等人(编辑)，Pharmacotherapy Handbook，第2版，Appleton and Lange，Stamford，CT(2000)；PDR Pharmacopoeia，Tarascon PocketPharmacopoeia 2000，Deluxe Edition，Tarascon Publishing，LomaLinda，CA(2000)；Nursing 2001 Handbook of Drugs，第21版本，Springhouse Corp.，Springhouse，PA，2001；Health Professional’sDrug Guide 2001，编辑Shannon，Wilson，Stang，Prentice-Hall，Inc，Upper Saddle River，NJ.，将上述每一篇参考文献以引用的方式并入本文。
适于本发明的组合物、联合疗法、共同给予、装置和/或方法的TNF拮抗剂(还包括本发明的至少一种抗体、其特定部分和变体)包括(但不限于)：抗TNF抗体、其抗原结合片段以及特异结合TNF的受体分子；防止和/或抑制TNF合成、TNF释放或其对靶细胞的作用的化合物，例如沙利度胺、替尼达普、磷酸二酯酶抑制剂(如己酮可可碱和咯利普兰)、A2b腺苷受体激动剂和A2b腺苷受体增强剂；防止和/或抑制TNF受体信号转导的化合物，例如有丝分裂原活化蛋白(MAP)激酶抑制剂；阻断和/或抑制膜TNF切割的化合物，例如金属蛋白酶抑制剂；阻断和/或抑制TNF活性的化合物，例如血管紧张素转化酶(ACE)抑制剂(如卡托普利)；以及阻断和/或抑制TNF产生和/或合成的化合物，例如MAP激酶抑制剂。
本文所用的“肿瘤坏死因子抗体”、“TNF抗体”、“TNFα抗体”或片段等可降低、阻断、抑制、消除或干扰体外、原位和/或优选体內的FNFα活性。例如，本发明的适宜的TNF人抗体可结合TNFα并且包括抗TNF抗体、其抗原结合片段以及其特异性结合TNFα的特定突变体或结构域。适宜的TNF抗体或片段也可以降低、阻断、消除、干扰、防止和/或抑制TNF RNA、DNA或蛋白质合成、TNF释放、TNF受体信号转导、膜TNF切割、TNF活性、TNF产生和/或合成。
嵌合抗体cA2由高亲和力中和小鼠抗人TNFα IgG1抗体的抗原结合可变区(称作A2)和人IgG1 k免疫球蛋白的恒定区组成.人IgG1 Fc区域可改善同种异体抗体效应子功能，增加循环血清半衰期和减小抗体的免疫原性。嵌合抗体cA2的亲合力和表位特异性来源于鼠抗体A2的可变区。在具体实施例中，编码鼠抗体A2的可变区的核酸的优选来源是A2杂交瘤细胞系。
嵌合A2(cA2)以依赖剂量的方式中和天然的和重组的人TNFα的细胞毒性效应。根据嵌合抗体cA2和重组人TNFα的结合测定，计算出嵌合抗体cA2的亲和力常数为1.04×1010M-1。通过竞争性抑制测定单克隆抗体特异性和亲和力的优选方法可以在Harlow等人，antibodies：ALaboratory Manual，Cold Spring Harbor Laboratory Press，ColdSpring Harbor，New York，1988；Colligan等人(编辑)，CurrentProtocols in Immunology，Greene Publishing Assoc.and WileyInterscience，New York，(1992-2000)；Kozbor等人，Immunol.Today，4：72-79(1983)；Ausubel等人(编辑)，Current Protocols inMolecular Biology，Wiley Interscience，New York(1987-2000)；以及Muller，Meth.Enzymol.，92：589-601(1983)中找到，将它们以引用的方式并入本文。
在一个具体实施例中，通过标号为c134A的细胞系产生鼠单克隆抗体A2。由标号为c168A的细胞系产生嵌合抗体cA2。
可用于本发明的单克隆抗TNF抗体的额外例子在本领域中有描述(参见，例如美国专利No.5,231,024；
Figure GPA00001159671200681
A.等人，Cytokine2(3)：162-169(1990)；美国专利申请No.07/943,852(提交于1992年9月11日)；Rathjen等人，国际公开No.WO 91/02078(公开于1991年2月21日)；Rubin等人，EPO专利公布No.0 218 868(公开于1987年4月22日)；Yone等人，EPO专利公布No.0 288 088(1988年10月26日)；Liang等人，Biochem.Biophys.Res.Comm.137：847-854(1986)；Meager等人，Hybridoma 6：305-311(1987)；Fendly等人，Hybridoma 6：359-369(1987)；Bringman等人，Hybridoma 6：489-507(1987)；以及Hirai等人，J.Immunol.Meth.96：57-62(1987)，将上述参考文献以引用的方式并入本文)。
TNF受体分子
可用于本发明的优选TNF受体分子为以高亲和力结合TNFα(见，例如Feldmann等人，国际专利公布No.WO 92/07076(于1992年4月30日公开)；Schall等人，Cell 61：361-370(1990)；以及Loetscher等人，Cell 61：351-359(1990)，将上述参考文献以引用方式并入本文)并且任选具有低的免疫原性的那些分子。具体地讲，55kDa(p55 TNF-R)和75kDa(p75 TNF-R)TNF细胞表面受体可用于本发明。这些受体的包含受体的细胞外结构域(ECD)或其功能部分的截短形式(见，例如Corcoran等人，Eur.J.Biochem.223：831-840(1994))也可用于本发明。已在尿和血清中检测到TNF受体的含有ECD的截短形式为30kDa和40kDa的TNFα抑制性结合蛋白质(Engelmann，H.等人，J.Biol.Chem.265：1531-1536(1990))。TNF受体多聚体分子和TNF免疫受体融合分子及其衍生物和片段或部分，是可用于本发明的方法和组合物的TNF受体分子的另外的例子。可用于本发明的TNF受体分子的特征在于它们能够长时间治疗患者，能很好地或极好地减轻症状，且毒性低。低免疫原性和/或高亲和力，以及其他未确定的性质，可有助于所实现的治疗结果。
可用于本发明的TNF受体多聚体分子包含经由一种或多种多肽接头或其他非肽接头(如聚乙二醇(PEG))连接的两个或多个TNF受体的ECD的全部或功能部分。该多聚体分子还可包含分泌蛋白的信号肽以引导该多聚体分子的表达。这些多聚体分子和它们的制备方法已经在美国专利申请No.08/437,533(于1995年5月9日提交)中有所描述，将其內容以引用的方式并入本文。
可用于本发明方法和组合物的TNF免疫受体融合分子包含一种或多种免疫球蛋白分子的至少一部分和一种或多种TNF受体的全部或功能部分。这些免疫受体融合分子可装配成单体或异型多聚体或同型多聚体。免疫受体融合分子也可以是单价的或多价的。这种TNF免疫受体融合分子的例子是TNF受体/IgG融合蛋白。TNF免疫受体融合分子及它们的产生制备已经在本领域有所描述(Lesslauer等人，Eur.J.Immunol.21：2883-2886(1991)；Ashkenazi等人，Proc.Natl.Acad.Sci.USA 88：10535-10539(1991)；Peppel等人，J.Exp.Med.174：1483-1489(1991)；Kolls等人，Proc.Natl.Acad.Sci.USA 91：215-219(1994)；Butler等人，Cytokine 6(6)：616-623(1994)；Baker等人，Eur.J.Immunol.24：2040-2048(1994)；Beutler等人，美国专利申请No.5,447,851；以及美国专利申请No.08/442,133(1995年5月16日提交)，将各参考文献以引用的方式并入本文)。产生免疫受体融合分子的方法也可以在如下文献中找到：Capon等人，美国专利No.5,116,964；Capon等人，美国专利No.5,225,538；和Capon等人，Nature 337：525-531(1989)，将上述文献以引用的方式并入本文。
TNF受体分子的功能等价物、衍生物、片段或区域指TNF受体分子的部分或编码TNF受体分子的TNF受体分子序列的部分，其具有足够的大小和序列以在功能上类似于可用于本发明的TNF受体分子(例如，以高亲和力结合TNFα和具有低免疫原性)。TNF受体分子的功能等价物还包括在功能上类似于可用于本发明的TNF受体分子的经修饰TNF受体分子(例如，以高亲和力结合TNFα和具有低免疫原性)。例如，TNF受体分子的功能等价物可含有“沉默”密码子或一个或多个氨基酸替代、缺失或添加(如，用一个酸性氨基酸替代另一个酸性氨基酸；或用一个编码相同或不同疏水氨基酸的密码子替代另一个编码疏水氨基酸的密码子)。参见Ausubel等人，Current Protocols in Molecular Biology，Greene PublishingAssoc.and Wiley-Interscience，New York(1987-2000)。
细胞因子包括任何已知的细胞因子。见，例如，CopewithCytokines.com。细胞因子拮抗剂包括(但不限于)任何抗体、片段或模拟物、任何可溶受体、片段或模拟物、任何小分子拮抗剂或它们的任何组合。
医疗性治疗。本发明的任何方法可包括用于治疗淀粉样蛋白介导的障碍的方法，其包括将有效量的包含至少一种抗淀粉样蛋白抗体的组合物或药物组合物给予需要此类调节、治疗或疗法的细胞、组织、器官、动物或患者。
这种方法可任选还包括用于治疗此类疾病或障碍的共同给予或联合疗法，其中所述至少一种抗淀粉样蛋白抗体、其特定部分或变体的给予还包括在其给予之前、同时和/或之后给予至少一种选自如下的药物：抗感染药物、心血管(CV)系统药物、中枢神经系统(CNS)药、自主神经系统(ANS)药、呼吸道药物、胃肠(GI)道药物、激素药物、用于体液或电解质平衡的药物、血液学药物、抗肿瘤药、免疫调节药物、眼用、耳用或鼻用药物、局部用药物、营养药物等等；至少一种TNF拮抗剂(例如，但不限于TNF抗体或片段、可溶性TNF受体或片段、融合蛋白或小分子TNF拮抗剂)、抗风湿药(如甲氨蝶呤、金诺芬、硫代葡萄糖金、硫唑嘌呤、依那西普、硫代苹果酸金钠、硫酸羟氯喹、来氟米特、柳氮磺吡啶)、肌肉松弛药、麻醉药、非类固醇消炎药(NSAID)、镇痛药、麻醉剂、镇静剂、局部用麻醉剂、神经肌肉阻滞剂、抗微生物剂(如，氨基糖苷类、抗真菌剂、抗寄生物剂、抗病毒剂、碳青霉烯、头孢菌素、氟喹诺酮、大环內酯、青霉素、磺胺药物、四环素、其他抗微生物剂)、抗牛皮癣剂、皮质类固醇、合成代谢类固醇、糖尿病相关剂、矿物质、营养物、甲状腺剂、维生素、钙相关激素、止泻剂、止咳药、止吐剂、抗溃疡药、缓泻药、抗凝剂、促红细胞生成素(例如，阿法依伯汀)、非格司亭(如，G-CSF、Neupogen)、沙莫司亭(GM-CSF、白细胞素)、免疫剂、免疫球蛋白、免疫抑制剂(如，巴利昔单抗、环孢菌素、达克珠单抗)、生长激素、激素替代药物、雌激素受体调节剂、扩瞳剂、睫状肌麻痹药、烷化剂、抗代谢物、有丝分裂抑制剂、放射性药剂、抗抑郁药、抗躁狂剂、抗精神病药、抗焦虑药、催眠药、拟交感神经药、兴奋剂、多奈哌齐、他克林、哮喘药、β-激动剂、吸入类固醇、白细胞三烯抑制剂、甲基黄嘌呤、色甘酸、肾上腺素或类似物、阿法链道酶(Pulmozyme)、细胞因子或细胞因子拮抗剂。此类药物是本领域熟知的，包括本文所提出的每一种药物的制剂、适应症、剂量和给药(参见，例如，Nursing 2001 Handbook ofDrugs，第21版，Springhouse Corp.，Springhouse，PA，2001；HealthProfessional’s Drug Guide 2001，Shannon，Wilson，Stang(编辑)，Prentice-Hall，Inc，UpperSaddle River，NJ；PharmcotherapyHandbook，Wells等人(编辑)，Appleton&Lange，Stamford，CT，将该文献以引用的方式并入本文)。
通常，对病理性状况的治疗是通过给予有效量或有效剂量的至少一种抗淀粉样蛋白抗体组合物来实现，取决于组合物中包含的比活性，所述组合物总计为平均每剂量每千克患者至少约0.01至500毫克至少一种抗淀粉样蛋白抗体，优选每单次或多次给予每千克患者至少约0.1至100毫克抗体。或者，有效血清浓度可包括0.1-5000μg/ml血清浓度/单次或多次给予。合适的剂量是医学从业者已知的，当然要取决于具体疾病状态、待给予组合物的比活性，以及接受治疗的具体患者。在某些情况下，为了达到所需治疗量，可能有必要提供重复给予，即重复单独给予特定的监控剂量或计量剂量，其中单独给予可以重复直至达到所需日剂量或效果。
优选剂量可任选包括0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、0.6、0.7、0.8、0.9、1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99和/或100-500mg/kg/给予，或其任何范围、数值或分数，或达到下列血清浓度：0.1、0.5、0.9、1.0、1.1、1.2、1.5、1.9、2.0、2.5、2.9、3.0、3.5、3.9、4.0、4.5、4.9、5.0、5.5、5.9、6.0、6.5、6.9、7.0、7.5、7.9、8.0、8.5、8.9、9.0、9.5、9.9、10、10.5、10.9、11、11.5、11.9、20、12.5、12.9、13.0、13.5、13.9、14.0、14.5、4.9、5.0、5.5.、5.9、6.0、6.5、6.9、7.0、7.5、7.9、8.0、8.5、8.9、9.0、9.5、9.9、10、10.5、10.9、11、11.5、11.9、12、12.5、12.9、13.0、13.5、13.9、14、14.5、15、15.5、15.9、16、16.5、16.9、17、17.5、17.9、18、18.5、18.9、19、19.5、19.9、20、20.5、20.9、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、35、40、45、50、55、60、65、70、75、80、85、90、96、100、200、300、400、500、600、700、800、900、1000、1500、2000、2500、3000、3500、4000、4500和/或5000μg/ml血清浓度/单次或多次给予，或其任何范围、数值或分数。
或者，给予的剂量可以根据已知因素而变化，所述因素例如为具体试剂的药物动力学特征及其给予方式和途径；接受者的年龄、健康状况和重量；症状的性质和程度、当前治疗的类型、治疗频率和所需效果。通常活性成分的剂量可以是约0.1至100毫克/千克体重。通常0.1至50、优选0.1至10毫克/千克/给予或以缓释形式给予能有效获得所需效果。
作为一个非限制性实例，人或动物的治疗可以在第1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39或40天中的至少一天，或者作为另外一种选择或除此之外，在第1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51或52周中的至少一周，或者作为另外一种选择或除此之外，在第1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19或20年中的至少一年，或其任何组合，采用单次、输注或重复剂量，作为0.1至100mg/kg的一次或定期剂量的至少一种本发明抗体提供，例如0.5、0.9、1.0、1.1、1.5、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、40、45、50、60、70、80、90或100mg/kg/天。
适合于内部给予的剂型(组合物)，每单位或容器一般包含约0.001毫克至约500毫克的活性成分。在这些药物组合物中，基于组合物总重量，活性成分一般会以约0.5至99.999重量％的量存在。
对于肠胃外给予，抗体可以配制成溶液剂、混悬剂、乳剂、颗粒剂、粉剂或冻干粉剂，它们与可药用肠胃外用介质联合或分开提供。此类介质的例子是水、盐水、林格氏溶液、葡萄糖溶液和1-10％的人血清白蛋白。也可以使用脂质体和非水性介质，例如非挥发油。介质或冻干粉末可含有维持等渗性的添加剂(例如氯化钠、甘露糖醇)和维持化学稳定性的添加剂(例如缓冲剂和防腐剂)。可通过已知的或合适的技术对制剂进行灭菌。
合适的药学载体在Remington′s Pharmaceutical Sciences，A.Osol的最近版本(该领域的标准参考文本)中有所描述。
另选的给予方式
可根据本发明使用许多已知的和开发的方式来给予药学有效量的至少一种根据本发明的抗淀粉样蛋白抗体。尽管在下文描述中使用的是经肺给予，但其他给予方式也可根据本发明使用，得到合适的结果。
本发明的淀粉样蛋白抗体可用适用于通过吸入方式或本文所述或本领域已知的其他方式给予的多种装置和方法中的任何一种，在载体中作为溶液剂、乳剂、胶体或混悬剂递送或作为干粉剂递送。
肠胃外用制剂及给予
用于肠胃外给予的制剂可含有作为普通赋形剂的无菌水或盐水、聚亚烷基二醇例如聚乙二醇、植物来源的油、氢化萘等。注射用水性或油性混悬剂可通过使用合适的乳化剂或湿润剂和悬浮剂根据已知方法来制备。注射用药剂可以是无毒的、非经口给予的稀释剂，例如溶于溶剂的水溶液剂或无菌注射液或混悬剂。作为可用的介质或溶剂，水、林格氏溶液、等渗盐水等是允许的；作为普通溶剂或助悬溶剂，可以使用无菌不挥发性油。为了这些目的，可以使用任何种类的不挥发性油和脂肪酸，包括天然的或合成的或半合成的脂肪油或脂肪酸；天然的或合成的或半合成的甘油单酯或甘油二酯或甘油三酯。肠胃外给予是本领域已知的，包括(但不限于)本领域熟知的常规注射方法、如美国专利No.5,851,198所述的气压无针注射装置或如美国专利No.5,839,446所述的激光穿孔装置，将所述专利以引用方式并入本文。
另选的递送方式
本发明还涉及通过下列方式给予至少一种抗淀粉样蛋白抗体：肠胃外、皮下、肌内、静脉内、关节内、支气管内、腹内、囊内、软骨内、腔内、体腔内、小脑内、脑室内、结肠内、颈内、胃内、肝内、心肌内、骨内、骨盆内、心包内、腹膜内、胸膜内、前列腺内、肺内、直肠内、肾内、视网膜内、脊柱内、滑膜内、胸内、子宫内、膀胱内、病灶内、快速浓注、阴道、直肠、口腔、舌下、鼻内或透皮方式。可制备至少一种抗淀粉样蛋白抗体组合物用于肠胃外(皮下、肌内或静脉内)给予或任何其他途径给予，特别是以液体溶液剂或混悬剂形式；用于阴道或直肠给予，特别是以半固体形式，例如但不限于乳剂和栓剂；用于口腔或舌下给予，例如但不限于片剂或胶囊剂的形式；或鼻内给予，例如但不限于粉剂、鼻滴剂或气溶胶或某些药剂的形式；或透皮给予，例如但不限于，凝胶剂、软膏剂、洗剂、混悬剂或贴剂递送系统，该贴剂递送系统含有化学增强剂如二甲亚砜以修饰皮肤结构或增加透皮贴剂中的药物浓度(Junginger等人的“Drug Permeation Enhancement”；Hsieh，D.S.(编辑)，第59-90页，Marcel Dekker，Inc.New York 1994，以引用方式全文并入本文中)，或含有氧化剂，其使得含有蛋白质和肽的制剂能够施用于皮肤上(WO 98/53847)，或应用电场以产生瞬间转运途径，例如电穿孔，或增加带电药物透过皮肤的运动性，例如离子电渗，或应用超声，例如超声促渗(美国专利No.4,309,989和4,767,402)(上述公开和专利以引用的方式并入本文)。
经肺/鼻给予
对于经肺给予，优选至少一种抗淀粉样蛋白抗体组合物以可有效到达肺下部气道或窦的颗粒大小递送。根据本发明，至少一种抗淀粉样蛋白抗体可通过本领域已知用于通过吸入给予治疗剂的多种吸入装置或鼻装置中的任何一种来递送。这些能够在患者的窦腔或肺泡中沉积气溶胶化制剂的装置包括定量吸入器、雾化器、干粉产生器、喷雾器等等。其他适用于引导抗体的经肺或鼻给予的装置也是本领域已知的。所有此类装置都可以使用适合于以气溶胶形式分配抗体进行给予的制剂。此类气溶胶可由溶液(水性或非水性)或固体颗粒构成。定量吸入器如
Figure GPA00001159671200751
定量吸入器通常利用推进气体并且要求在吸气期间启动(参见，例如WO 94/16970、WO 98/35888)。干粉吸入器如TurbuhalerTM(Astra)、
Figure GPA00001159671200752
(Glaxo)、
Figure GPA00001159671200753
(Glaxo)、SpirosTM吸入器、由Inhale Therapeutics销售的装置，以及
Figure GPA00001159671200754
干粉吸入器(Fisons)利用到混合粉末的呼吸启动(US 4668218 Astra、EP 237507 Astra、WO 97/25086 Glaxo、WO94/08552 Dura、US 5458135 Inhale、WO 94/06498 Fisons，将所述专利以引用方式并入本文中)。雾化器如AERxTMAradigm、
Figure GPA00001159671200755
雾化器(Mallinckrodt)和
Figure GPA00001159671200756
雾化器(Marquest Medical Products)(US5404871 Aradigm，WO 97/22376)(将上述参考文献以引用方式全文并入本文)是从溶液产生气溶胶，而定量吸入器、干粉吸入器等则产生小粒子气溶胶。市售吸入装置的这些具体例子旨在代表适用于实施本发明的具体装置，并且无意于限制本发明的范围。优选的是，包含至少一种抗淀粉样蛋白抗体的组合物通过干粉吸入器或喷雾器递送。吸入装置具有若干合乎需要的特性供给予本发明的至少一种抗体。例如，通过吸入装置进行递送有利的是可靠、可再现且准确。为了有良好的可呼吸性，吸入装置可任选递送小的干燥粒子，例如小于约10μm，优选约1-5μm。
淀粉样蛋白抗体组合物作为喷雾给予
通过施压使至少一种抗淀粉样蛋白抗体的悬浮液或溶液通过喷嘴，可以产生包含淀粉样蛋白抗体组合物的喷雾。可以选择喷嘴大小和构造、所施加的压力和液体加料速率来实现所需的输出和粒子大小。例如，通过电场结合毛细管或喷嘴加料，可产生电喷雾。有利的是，通过雾化器递送的至少一种抗淀粉样蛋白抗体组合物的颗粒的粒径小于约10μm，优选在约1μm至约5μm的范围内，最优选约2μm至约3μm。
适合与喷雾器一起使用的至少一种抗淀粉样蛋白抗体组合物的制剂通常包括以如下浓度存在于水性溶液中的抗体组合物：约0.1mg至约100mg至少一种抗淀粉样蛋白抗体组合物/ml溶液或mg/gm，或其中的任何范围或数值，例如，但不限于.1、.2.、.3、.4、.5、.6、.7、.8、.9、1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、40、45、50、60、70、80、90或100mg/ml或mg/gm。该制剂可包括如诸如赋形剂、缓冲剂、等渗剂、防腐剂、表面活性剂之类的试剂，并且优选包括锌。该制剂还可包括用于稳定抗体组合物的赋形剂或试剂，例如缓冲剂、还原剂、主体蛋白质(bulk protein)或碳水化合物。可用于制备抗体组合物的主体蛋白质包括白蛋白、鱼精蛋白等等。可用于配制抗体组合物的常用碳水化合物包括蔗糖、甘露糖醇、乳糖、海藻糖、葡萄糖等等。所述抗体组合物制剂还可以包括表面活性剂，其可减小或防止在形成气溶胶过程中因溶液雾化引起的表面诱导的抗体组合物聚集。可以采用多种常规表面活性剂，例如聚氧乙烯脂肪酸酯和醇，以及聚氧乙烯山梨糖醇脂肪酸酯。以制剂的重量计，用量将通常在0.001至14％之间。对于本发明的目的而言特别优选的表面活性剂为聚氧乙烯脱水山梨糖醇单油酸酯、聚山梨醇酯80、聚山梨醇酯20等等。用于蛋白质，例如淀粉样蛋白抗体，或特定部分或变体的配制的本领域已知的其他试剂也可以包括在所述制剂中。
通过雾化器给予淀粉样蛋白抗体组合物
抗体组合物可通过雾化器，例如喷射雾化器或超声雾化器给予。通常，在喷射雾化器中，用压缩空气源通过孔口产生高速喷气流。在气体通过喷嘴膨胀时，会产生低压区，其通过连接液体贮液器的毛细管吸取抗体组合物溶液。来自毛细管的液体流在其离开管时被剪切成不稳定的细丝或小滴，从而产生气溶胶。可以采用一系列构造、流速和挡板类型从给定的喷射雾化器产生所需性能特征。在超声雾化器中，用高频率电能产生振动机械能量，通常使用压电转换器。该能量被直接地或通过耦合流体传递至抗体组合物的制剂，从而产生包含该抗体组合物的气溶胶。有利的是，由雾化器递送的抗体组合物粒子的粒径小于约10μm，优选在约1μm至约5μm的范围内，最优选约2μm至约3μm。
适于与雾化器(喷射雾化器或超声雾化器)一起使用的至少一种抗淀粉样蛋白抗体的制剂通常包括约0.1mg至约100mg至少一种抗淀粉样蛋白抗体/ml溶液的浓度。该制剂可包括如诸如赋形剂、缓冲剂、等渗剂、防腐剂、表面活性剂之类的试剂，并且优选包括锌。该制剂还可包括用于使至少一种抗淀粉样蛋白抗体组合物稳定的赋形剂或试剂，例如缓冲剂、还原剂、主体蛋白质或碳水化合物。可用于配制至少一种抗淀粉样蛋白抗体组合物的主体蛋白质包括白蛋白、鱼精蛋白等等。可用于配制至少一种抗淀粉样蛋白抗体的常用碳水化合物包括蔗糖、甘露糖醇、乳糖、海藻糖、葡萄糖等等。所述至少一种抗淀粉样蛋白抗体制剂还可包含表面活性剂，其可减小或防止在形成气溶胶过程中因溶液雾化引起的表面诱导的所述至少一种抗淀粉样蛋白抗体的聚集。可以采用多种常规表面活性剂，例如聚氧乙烯脂肪酸酯和醇，以及聚氧乙烯山梨糖醇脂肪酸酯。以制剂的重量计，用量将通常在0.001至4％之间。对于本发明而言特别优选的表面活性剂为聚氧乙烯脱水山梨糖醇单油酸酯、聚山梨醇酯80、聚山梨醇酯20等等。其他本领域已知的用于蛋白质例如抗体蛋白质的配制的试剂也可以包括在所述制剂中。
通过定量吸入器给予淀粉样蛋白抗体组合物
在定量吸入器(MDI)中，推进剂、至少一种抗淀粉样蛋白抗体以及任何赋形剂或其他添加剂作为包括液化压缩气体的混合物装在罐中。激发计量阀可将该混合物作为气溶胶释放，气溶胶优选含有粒度小于约10μm，优选约1μm至约5μm，最优选约2μm至约3μm的粒子。通过采用由多种本领域技术人员已知的方法制备的抗体组合物的制剂可获得所需的气溶胶粒径，所述方法包括气流磨、喷雾干燥、临界点凝集等等。优选的定量吸入器包括由3M或Glaxo生产并采用氢氟烃推进剂的那些吸入器。
供用于定量吸入器装置的至少一种抗淀粉样蛋白抗体的制剂通常会包括含有至少一种抗淀粉样蛋白抗体的微细粉末在非水性介质中作为悬浮液，例如，在表面活性剂的帮助下悬浮在推进剂中。推进剂可以是用于该目的的任何常规材料，例如氯氟烃、氢氯氟烃、氢氟烃或包括三氯氟甲烷、二氯二氟甲烷、二氯四氟乙醇和1，1，1，2-四氟乙烷、HFA-134a(氢氟烷烃-134a)、HFA-227(氢氟烷烃-227)在内的烃类。优选的是，推进剂为氢氟烃。可选择表面活性剂来使所述至少一种抗淀粉样蛋白抗体在推进剂中作为悬浮液而得到稳定，保护活性剂免受化学降解等等。适宜的表面活性剂包括脱水山梨糖醇三油酸酯、大豆卵磷脂、油酸等等。在一些情况下，使用诸如乙醇之类的溶剂的溶液气溶胶是优选的。其他本领域已知的用于蛋白质例如淀粉样蛋白抗体蛋白的配制的试剂也可包括在所述制剂中。
本领域普通技术人员会认识到，本发明的方法可通过用本文中未描述的装置经肺部给予至少一种抗淀粉样蛋白抗体组合物来实现。
口服制剂及给予
口服制剂依赖于共同给予佐剂(如，间苯二酚和非离子型表面活性剂例如聚氧乙烯油基醚和正十六烷基聚乙烯醚)以人工增加肠壁的渗透性，以及共同给予酶抑制剂(如，胰蛋白酶抑制剂、二异丙基氟磷酸(DFF)和抑肽酶(trasylol))以抑制酶促降解。旨在经口、口腔(buccal)、粘膜、鼻、肺、阴道跨膜、或直肠给予的，用于递送包括蛋白质和抗体在内的亲水性试剂和至少两种表面活性剂的组合的制剂，在U.S.6,309,663中有教导。可将供口服的固体型剂型的活性组分化合物与至少一种添加剂混合，所述添加剂包括蔗糖、乳糖、纤维素、甘露糖醇、海藻糖、棉子糖、麦芽糖醇、葡聚糖、淀粉、琼脂、藻酸盐、几丁质、壳聚糖、果胶、黄蓍胶、阿拉伯树胶、明胶、胶原、酪蛋白、白蛋白、合成的或半合成的聚合物和甘油酯。这些剂型还可含有其他类型的添加剂，例如，无活性稀释剂、润滑剂(例如硬脂酸镁、对羟基苯甲酸酯)、防腐剂(例如山梨酸、抗坏血酸、α-生育酚)、抗氧化剂(例如半胱氨酸)、崩解剂、粘结剂、增稠剂、缓冲剂、增甜剂、调味剂、增香剂等等。
片剂和丸剂可进一步加工成肠溶衣包衣制剂。供口服的液体制剂包括可允许用于医学用途的乳剂、糖浆剂、酏剂、混悬剂和溶液制剂。这些制剂可以含有常用于所述领域的无活性稀释剂，例如水。脂质体作为胰岛素和肝素的药物递送系统已有描述(美国专利No.4,239,754)。最近，混合氨基酸的人工聚合物(类蛋白)的微球体已用于递送药物(美国专利No.4,925,673)。此外，美国专利No.5,879,681和美国专利No.5,5,871,753中描述的载体化合物用于经口递送生物活性剂是本领域已知的。
粘膜用制剂及给予
用于经口给予包囊在一种或多种生物相容性聚合物或共聚物赋形剂(优选可生物降解性聚合物或共聚物)中的生物活性剂的制剂能提供这样的微胶囊，其由于所得微胶囊的适当大小而导致所述药剂到达动物的集合淋巴小结(或称为“派伊尔氏斑”或“GALT”)并被其吸收，而不会由于该活性剂已经穿过了胃肠道而损失有效性。可以在支气管(BALT)和大肠中发现相似的集合淋巴小结。上述组织通常称作粘膜相关的淋巴网状组织(MALT)。为了透过粘膜表面吸收，给予至少一种抗淀粉样蛋白抗体的组合物和方法包括乳剂，其包含许多亚微米粒子、粘膜粘附性大分子、生物活性肽和水性连续相，其通过实现乳剂粒子的粘膜粘附来促进透过粘膜表面的吸收(美国专利No.5,514,670)。适于施用本发明的乳剂的粘膜表面可包括角膜、结膜、口腔、舌下、鼻、阴道、肺、胃、肠和直肠给予途径。用于阴道和直肠给予的制剂，如栓剂，可含有例如聚亚烷基二醇、凡士林、可可脂等作为赋形剂。鼻内给予制剂可以是固体并且含有例如乳糖作为赋形剂，或可以是鼻滴剂的水性或油性溶液。对于口腔给予，赋形剂可包括糖、硬脂酸钙、硬脂酸镁、预胶化淀粉等等(美国专利No.5,849,695)。
透皮制剂及给予
对于透皮给予，将该至少一种抗淀粉样蛋白抗体包囊在递送装置例如脂质体或聚合型纳米粒子、微粒、微胶囊或微球体(统称为微粒，除非特别指出)中。许多合适的装置是已知的，包括由合成的聚合物和天然聚合物制成的微粒，所述合成的聚合物为诸如聚乳酸、聚乙醇酸以及它们的共聚物之类的多羟基酸、聚原酸酯、聚酸酐和聚磷腈，所述天然聚合物为例如胶原、聚氨基酸、白蛋白和其他蛋白质、藻酸盐及其他多糖，以及它们的组合(美国专利No.5,814,599)。
长期给予及制剂
通过一次给予在长时间周期内，例如一周到一年内将本发明化合物递送给受试者，有时候可能是期望的。可以利用多种缓释剂型、储库(depot)剂型或植入剂型。例如，剂型可含有所述化合物的在体液中具有低溶解程度的可药用无毒盐，例如(a)与多元酸例如磷酸、硫酸、柠檬酸、酒石酸、鞣酸、扑酸、藻酸、聚谷氨酸、萘单磺酸或萘二磺酸、聚半乳糖醛酸等的酸加成盐；(b)与多价金属阳离子例如锌、钙、铋、钡、镁、铝、铜、钴、镍、镉等或与从例如N，N‘-二苄基-乙二胺或乙二胺形成的有机阳离子形成的盐；或(c)(a)和(b)的组合，例如，鞣酸锌盐。此外，可将本发明的化合物或，优选地，相对难溶的盐例如上面所述的那些盐在适于注射的凝胶中，例如，在具有例如芝蔴油的单硬脂酸铝凝胶中配制。尤其优选的盐为锌盐、鞣酸锌盐、扑酸盐等等。用于注射的另一种类型的缓释储库型制剂含有经分散以在缓慢降解、无毒、非抗原性聚合物中包囊的化合物或盐，所述聚合物为例如美国专利No.3,773,919中描述的聚乳酸/聚乙醇酸聚合物。还可将化合物或优选地，相对难溶的盐例如上面所述的那些盐配制成胆固醇基质硅橡胶丸，尤其为了用于动物。其他缓释制剂、储库制剂或植入制剂，例如，气体或液体脂质体，是文献中已知的(美国专利No.5,770,222和“Sustained and Controlled Release Drug DeliverySystems”，J.R.Robinson(编辑)，Marcel Dekker，Inc.，N.Y.，1978)。
已总体地描述了本发明，通过参考下面的实例将更容易理解本发明，所述实例仅以示例的方式给出并且无意于作为限制。
实例1：淀粉样蛋白抗体在哺乳动物细胞中的克隆和表达
典型的哺乳动物表达载体含有至少一个启动子元件，其介导抗体编码序列的转录起始，编码与已知恒定区的编码序列相邻的重链和轻链可变区，所述表达载体还含有转录物的转录终止和多腺苷酸化所需的信号。其他元件包括增强子、Kozak序列以及侧接有用于RNA剪接的供体和受体位点的间插序列。高效率的转录可以使用下列序列来实现：来自SV40的早期启动子和晚期启动子，来自逆转录病毒例如RSV、HTLVI、HIVI的长末端重复序列(LTRS)，和巨细胞病毒(CMV)的早期启动子。然而，也可以使用细胞元件(例如人肌动蛋白启动子)。用于实施本发明的合适表达载体包括例如诸如以下的载体：pIRESlneo、pRetro-Off、pRetro-On、PLXSN或pLNCX(Clonetech Labs，Palo Alto，CA)、pcDNA3.1(+/-)、pcDNA/Zeo(+/-)或pcDNA3.1/Hygro(+/-)(Invitrogen)、PSVL和PMSG(Pharmacia，Uppsala，Sweden)、pRSVcat(ATCC 37152)、pSV2dhfr(ATCC 37146)和pBC12MI(ATCC 67109)。可以使用的哺乳动物宿主细胞包括人Hela 293、H9和Jurkat细胞、小鼠NIH3T3和C127细胞、Cos 1、Cos 7和CV 1、quail QC1-3细胞、小鼠L细胞和中国仓鼠卵巢细胞(CHO)细胞。
或者，基因可以在含有整合进染色体内的所述基因的稳定细胞系中表达。与选择标记例如dhfr、gpt、新霉素或潮霉素共转染可使得能鉴定和分离转染的细胞。
还可以扩增所转染的基因以大量表达所编码的抗体。DHFR(二氢叶酸还原酶)标记可用于开发携带几百或甚至几千拷贝的所关注基因的细胞系。另一种可用的选择标记是谷氨酰胺合酶(GS)(Murphy等人，Biochem.J.227：277-279(1991)；Bebbington等人，Bio/Technology 10：169-175(1992))。使用这些标记，将哺乳动物细胞在选择培养基中生长，具有最高抗性的细胞得以选择。这些细胞系含有整合至染色体内的扩增基因。中国仓鼠卵巢(CHO)细胞和NSO细胞通常用于生产抗体。
表达载体pC1和pC4含有Rous肉瘤病毒的强启动子(LTR)(Cullen等人，Molec.Cell.Biol.5：438-447(1985))和CMV-增强子的片段(Boshart等人，Cell 41：521-530(1985))。多克隆位点，例如，具有限制性内切酶切割位点BamHI、XbaI和Asp718的多克隆位点，有助于所关注基因的克隆。载体另外含有大鼠前胰岛素原基因的3′内含子、多腺苷酸化和终止信号。
在CHO细胞中的克隆和表达
将载体pC4用于表达淀粉样蛋白抗体。质粒pC4是质粒pSV2-dhfr(ATCC登记号37146)的衍生物。该质粒含有在SV40早期启动子控制下的小鼠DHFR基因。用这些质粒转染的缺乏二氢叶酸活性的中国仓鼠卵巢细胞或其他细胞，可通过使细胞在补充有化学治疗剂甲氨蝶呤的选择培养基(例如alpha minus MEM，Life Technologies，Gaithersburg，MD)中生长进行选择。DHFR基因在对甲氨蝶呤(MTX)具有抗性的细胞中的扩增已得到充分记载(参见，例如，F.W.Alt等人，J.Biol.Chem.253：1357-1370(1978)；J.L.Hamlin和C.Ma，Biochem.et Biophys.Acta 1097：107-143(1990)；以及M.J.Page和M.A.Sydenham，Biotechnology 9：64-68(1991))。在浓度渐增的MTX中生长的细胞由于DHFR基因扩增造成超量产生靶酶DHFR而发展出对药物的抗性。如果第二基因与DHFR基因连接，那么它通常被共扩增和过表达。本领域已知的是，该方法可用于开发携带超过1,000个拷贝的扩增基因的细胞系。随后，当甲氨蝶呤被取出时，获得含有整合到宿主细胞的一个或多个染色体内的扩增基因的细胞系。
为了表达所关注的基因，质粒pC4含有Rous肉瘤病毒长末端重复序列(LTR)的强启动子(Cullen等人，Molec.Cell.Biol.5：438-447(1985))和从人巨细胞病毒(CMV)即刻早期基因的增强子分离的片段(Boshart等人，Cell 41：521-530(1985))。启动子的下游是使基因能整合的BamHI、XbaI和Asp718限制性内切酶切割位点。在这些克隆位点之后，该质粒含有大鼠前胰岛素原基因的3′内含子和多腺苷酸化位点。其他高效率的启动子也可以用于表达，例如人b-肌动蛋白启动子、SV40早期或晚期启动子或来自其他逆转录病毒例如HIV和HTLVI的长末端重复序列。Clontech的Tet-Off和Tet-On基因表达系统和类似系统可以用于在哺乳动物细胞中以受调控的方式表达淀粉样蛋白(M.Gossen和H.Bujard，Proc.Natl.Acad.Sci.USA 89：5547-5551(1992))。对于mRNA的多腺苷酸化，也可以使用(例如)来自人生长激素或珠蛋白基因的其他信号。携带整合至染色体中的所关注基因的稳定细胞系也可以在与选择标记例如gpt、G418或潮霉素共转染时进行选择。有利的是在开始时使用不止一种选择标记，例如，G418加上甲氨蝶呤。
将质粒pC4用限制性内切酶消化，然后通过本领域已知的方法用小牛肠磷酸酶去磷酸化。然后从1％琼脂糖凝胶分离载体。
在一组实验中，根据已知的方法步骤，使用编码完整淀粉样蛋白抗体的DNA序列，例如，如SEQ ID NO：51或52中给出的序列，其对应SEQID NO：48A-I或49A-M中给出的本发明淀粉样蛋白抗体的HC和LC可变区。在该构建体中还使用编码合适的人恒定区(即HC和LC区)的分离的核酸。在另一组实验中，使用SEQ ID NO：61或62中给出的DNA序列，其对应于SEQ ID NO：59或60中给出的HC和LC可变区。
然后将编码所述分离的可变区和恒定区的DNA与该去磷酸化的载体用T4 DNA连接酶连接。然后转化大肠杆菌HB101或XL-1 Blue细胞，并使用例如限制性内切酶分析来鉴定含有插入到质粒pC4中的片段的细菌。
将缺乏活性DHFR基因的中国仓鼠卵巢(CHO)细胞用于转染。将5μg表达质粒pC4与0.5μg质粒pSV2-neo用lipofectin共转染。质粒pSV2neo含有显性选择标记即来自Tn5的neo基因，其编码赋予对包括G418在内的一组抗生素的抗性的酶。将细胞接种在补充有1μg/ml G418的alpha minus MEM中。2天后，将细胞用胰蛋白酶处理并接种在杂交瘤克隆板(Greiner，德国)中的补充有10、25或50ng/ml甲氨蝶呤加1μg/ml G418的alpha minus MEM中。约10-14天后，将单一克隆用胰蛋白酶处理并接种在6孔培养皿或10ml瓶中，其中使用不同浓度的甲氨蝶呤(50nM、100nM、200nM、400nM、800nM)。然后将在最高浓度甲氨蝶呤下生长的克隆转移至含有更高浓度甲氨蝶呤(1mM、2mM、5mM、10mM、20mM)的新的6孔板中。重复相同的步骤直到获得在100-200mM浓度下生长的克隆。例如，通过SDS-PAGE和蛋白质印迹或通过反相HPLC分析，可对所需基因产物的表达进行分析。
人抗人淀粉样蛋白抗体的结合动力学
ELISA分析证实，从这些宿主细胞纯化的抗体以浓度依赖性方式与淀粉样蛋白结合。在这种情况下，测量抗体对其关连抗原(表位)的亲合力。定量结合常数是用对该人抗体的BIAcore分析来获得，揭示出几种人单克隆抗体具有非常高的亲和力，KD在1×10-9至9×10-12的范围内。
结论
产生了本发明的人淀粉样蛋白反应性IgG单克隆抗体。还进一步对该人抗淀粉样蛋白抗体进行了表征。几种所产生的抗体具有1×108至9×1012之间的亲和力常数。这些完全人单克隆抗体的高亲和力使得它们适用于在淀粉样蛋白依赖性疾病、病理或相关状况中的治疗应用。
实例2：大肠杆菌中的淀粉样蛋白或抗体的表达和纯化
在本实例中将细菌表达载体pQE60用于细菌表达(QIAGEN，Inc.，Chatsworth，CA)。pQE60编码氨苄青霉素抗生素抗性(“Ampr”)并且含有细菌复制起点(“ori”)、IPTG诱导型启动子、核糖体结合位点(“RBS”)、六个编码组氨酸残基的密码子(所述残基使得能用由QIAGEN，Inc.销售的镍-次氮基-三乙酸(“Ni-NTA”)亲和树脂进行亲和纯化)以及合适的单一限制性内切酶切割位点。对这些元件进行排列，使得编码蛋白质或抗体的DNA片段可以以能产生具有六个His残基(即，“6×His标签”)的所述蛋白质或抗体的方式插入，这六个His残基共价连接到所述蛋白质或抗体的羧基末端。然而，蛋白质或抗体编码序列可任选插入成使得六个His密码子的翻译被阻止，因而，产生没有6XHis标签的蛋白质或抗体。
将编码淀粉样蛋白抗体的所需部分，例如，SEQ ID NO：48A-I、49A-M、59和60给出的HC和LC可变区、SEQ ID NO：42-44和53-55给出的HC CDR、SEQ ID NO：45-47和56-58给出的LC CDR，任选还包含已知的人恒定区编码序列的部分或全部并任选且优选缺乏疏水性前导序列的核酸序列，从保藏的cDNA克隆用PCR寡核苷酸引物进行扩增(所述引物是基于给出的序列，其与淀粉样蛋白或抗体的所需部分的氨基末端编码DNA序列和与所保藏的构建体中位于cDNA编码序列的下游(3′)的序列退火)。将含有有利于在pQE60载体中克隆的限制性位点的额外核苷酸分别加到5′和3′序列。
为了克隆淀粉样蛋白或抗体，根据已知的方法步骤，5′和3′引物具有与淀粉样蛋白或抗体的编码序列的一部分对应或互补的核苷酸。本领域技术人员当然会理解，蛋白质或抗体编码序列中5′引物开始点可以变化，以扩增出比成熟形式更短或更长的完整蛋白质或抗体的所需部分。
将扩增的淀粉样蛋白核酸片段和载体pQE60用合适的限制性内切酶消化，然后将所消化的DNA连接在一起。淀粉样蛋白DNA插入经限制酶切的pQE60载体，可将淀粉样蛋白或抗体编码区(包括其相关的终止密码子)置于IPTG诱导型启动子的下游并与起始AUG密码子符合读框。相关的终止密码子可防止插入点下游的6个组氨酸密码子的翻译。
使用标准方法，例如在Sambrook等人，1989；Ausubel，1987-1998中所描述的方法，将连接混合物转化至感受态大肠杆菌细胞中。将大肠杆菌菌株M15/rep4用于实施本文所述的示例性实例，该菌株含有质粒pREP4的多个拷贝，该质粒表达lac阻抑蛋白并赋予卡那霉素抗性(“Kanr”)。该菌株仅仅是适用于表达淀粉样蛋白或抗体的众多菌株之一，可以从QIAGEN，Inc.商购获得。转化株可以通过它们能在LB平板上在氨苄青霉素和卡那霉素存在下生长的能力得以鉴别。从抗性菌落分离质粒DNA并通过限制性酶切分析、PCR和DNA测序来确认所克隆的DNA的种类。
将含有所需构建体的克隆在补充有氨苄青霉素(100mg/ml)和卡那霉素(25mg/ml)的LB培养基中的液体培养物中生长过夜(“O/N”)。将该O/N培养物用于以大约1∶25至1∶250的稀释度接种大的培养基。让细胞生长至600nm处光密度(“OD600”)为0.4至0.6之间。然后加入异丙基-b-D-硫代吡喃型半乳糖苷(“IPTG”)至终浓度1mM，以通过使lacI阻抑蛋白失活来诱导从lac阻抑蛋白敏感性启动子的转录。随后将细胞再温育3到4小时。接着通过离心收获细胞。
然后将细胞在6M盐酸胍(pH8)中于4℃下搅拌3-4小时。通过离心除去细胞碎片，并将含有淀粉样蛋白的上清液对补充有200mM NaCl的50mM醋酸钠缓冲液(pH6)进行透析。或者，通过将蛋白质或抗体对含有蛋白酶抑制剂的500mM NaCl、20％甘油、25mM Tris/HCl pH7.4进行透析可以成功地使该蛋白质或抗体再折叠。
如果产生了不溶性蛋白质，则根据已知的方法步骤使该蛋白质可溶。该蛋白质或抗体复性后，通过离子交换、疏水相互作用和大小排阻层析对其进行纯化。或者，用亲和层析步骤例如抗体柱来获得纯的淀粉样蛋白或抗体。将所纯化的蛋白质或抗体保存在4℃或在-40℃至-120℃下冷冻。
实例3：淀粉样蛋白多肽在杆状病毒表达系统中的克隆和表达
在本示例性实例中，使用杆状病毒前导序列和如Summers等人，AManual of Methods for Baculovirus Vectors and Insect CellCulture Procedures，Texas Agricultural Experimental StationBulletin No.1555(1987)中所描述的标准方法，用质粒穿梭载体pA2 GP将所克隆的编码所述抗体(例如，包含SEQ ID NO：51-52或61-62的可变区)的DNA插入至杆状病毒中以表达淀粉样蛋白抗体。该表达载体含有苜蓿银纹夜蛾核型多角体病毒(Autographa californica nuclearpolyhedrosis virus)(AcMNPV)的强多角体蛋白启动子，接着是杆状病毒gp67蛋白或抗体的分泌型信号肽(前导肽)和便利的限制性位点，例如BamHI、Xba I和Asp718。用猿猴病毒40(“SV40”)的多腺苷酸化位点进行有效多腺苷酸化。为了容易选择重组病毒，该质粒含有在处于相同取向的弱果蝇启动子控制下的来自大肠杆菌的β-半乳糖苷酶基因，然后是多角体蛋白基因的多腺苷酸化信号。所插入的基因的两侧侧接有病毒序列，该病毒序列用于与野生型病毒DNA发生细胞介导的同源重组以产生表达所克隆的多核苷酸的活病毒。
如本领域技术人员会容易理解的，可以用其他杆状病毒载体，例如pAc373、pVL941和pAcIM1代替上述的载体，只要构建物可提供用于转录、翻译、分泌等的合适定位信号，包括信号肽和框內AUG(如果需要的话)。此类载体在例如，Luckow等人，Virology 170：31-39中有所描述。
保藏的克隆或其他克隆中编码淀粉样蛋白抗体并缺少AUG起始密码子和天然相关的核苷酸结合位点的cDNA序列，可用对应于该基因的5′和3′序列PCR的寡核苷酸引物进行扩增。根据已知的方法步骤，非限制性例子包括具有与淀粉样蛋白或抗体的编码序列的一部分对应或互补的核苷酸的5′和3′引物，例如，对于CNTO2125(C706或(JRF/hAb11/1))为如SEQID NO：48A-I-49A-M所给出的，或对于C890A为如SEQ ID NO：59-60所给出的。
使用市售试剂盒(如，“Geneclean，”BIO 101 Inc.，La Jolla，CA)从1％琼脂糖凝胶分离出扩增的片段。然后将该片段用合适的限制性内切酶消化，并再次在1％琼脂糖凝胶上纯化。该片段在本文中称作“F1”。
将该质粒用相应的限制性内切酶消化，并任选可用小牛肠磷酸酶去磷酸化，这可用本领域已知的常规方法进行。然后用市售试剂盒(“Geneclean”BIO 101 Inc.，La Jolla，CA)从1％琼脂糖凝胶分离出DNA。该载体DNA在本文中称作“V1”。
用T4DNA连接酶将片段F1和去磷酸化的质粒V1连接在一起。用该连接混合物转化大肠杆菌HB101或其他合适的大肠杆菌宿主例如XL-1Blue(Stratagene Cloning Systems，La Jolla，CA)细胞并涂布在培养平板上。用PCR方法鉴定含有具有人淀粉样蛋白基因的质粒的细菌，在该PCR方法中，用于扩增所述基因的引物之一和第二引物完全来自该载体中，从而仅仅是那些含有淀粉样蛋白基因片段的细菌菌落才会显示出所述DNA的扩增。通过DNA测序确认所克隆片段的序列。该质粒在本文中称作pBac淀粉样蛋白质粒。
使用Felgner等人，Proc.Natl.Acad.Sci.USA 84：7413-7417(1987)描述的脂质转染方法，用1.0mg市售的线性化杆状病毒DNA(“BaculoGoldTM杆状病毒DNA”，Pharmingen，San Diego，CA)共转染5μg的pBac淀粉样蛋白质粒。将1μg BaculoGoldTM病毒DNA和5μg的pBac淀粉样蛋白质粒在含有50μl无血清Grace′s培养基(LifeTechnologies，Inc.，Rockville，MD)的微量滴定板的无菌孔中混合。之后，加入10μl Lipofectin和90μl Grace′s培养基，混合并在室温下温育15分钟。然后将转染混合物逐滴加至接种在具有1ml无血清Grace’s培养基的35mm组织培养平板中的Sf9昆虫细胞(ATCC CRL 1711)中。来回摇动该培养平板以混合新加入的溶液。然后将该板在27℃下温育5小时。5小时后，从板移除转染溶液并加入1ml补充有10％胎牛血清的Grace′s昆虫培养基。将培养板放回到培养箱并在27℃下继续培养4天。
四天后收集上清液并根据已知的方法进行噬菌斑测定。使用具有“Blue Gal”(Life Technologies，Inc.，Rockville，MD)的琼脂糖凝胶以使能容易地鉴定和分离表达gaI的克隆，这些克隆可产生染成蓝色的噬菌斑。(该类型的“噬菌斑测定”的详细描述也可以在LifeTechnologies，Inc.(Rockville，MD)发布的昆虫细胞培养和杆状病毒学的用户指南的第9-10页找到)。在进行适当的温育后，用微量移液管头(如Eppendorf)挑取染成蓝色的噬菌斑。然后将含有重组病毒的琼脂重新悬浮在含有200μl Grace′s培养基的微量离心管中，并将含有该重组杆状病毒的悬浮液用于感染接种在35mm培养皿中的Sf9细胞。四天后收获这些培养皿的上清液然后在4℃下保存。该重组病毒称作V-淀粉样蛋白。
为了证实淀粉样蛋白基因的表达，将Sf9细胞在补充有10％热灭活的FBS的Grace′s培养基中培养。将细胞用该重组杆状病毒V-淀粉样蛋白以约2的感染复数(“MOI”)进行感染。6小时后，移除培养基并替换为无甲硫氨酸和半胱氨酸的SF900 II培养基(可从例如Life Technologies，Inc.，Rockville，MD得到)。如果需要放射标记的蛋白质或抗体，则在42小时后，加入5mCi的35S-甲硫氨酸和5mCi 35S-半胱氨酸(可得自Amersham)。将细胞进一步温育16小时，然后通过离心收获。将上清液中的蛋白质或抗体以及细胞內蛋白质或抗体通过SDS-PAGE进行分析，然后通过放射自显影(如果进行了放射标记的话)进行分析。对纯化的蛋白质或抗体的氨基末端的氨基酸序列的微测序，可用于确定成熟蛋白质或抗体的氨基末端序列，从而确定分泌信号肽的切割点和长度。
实例4：抗人β淀粉样蛋白抗体的线性表位的表征
引言
阿尔茨海默病(AD)是进行性痴呆，其病理可表征为神经元中有高度磷酸化的tau蛋白和大脑中有β-淀粉样蛋白(Aβ)斑的细胞外沉积。由于淀粉样蛋白前体蛋白质(APP)的高度自聚集的42氨基酸肽过量产生或低效率清除，导致形成Aβ斑。APP或Aβ42肽的正常功能未知，但认为与AD相关的是Aβ42物质。Aβ42可快速自聚集以形成寡聚体结构，这种结构发展成原纤维并最终形成斑。这些斑是AD病理的标志。
在使用Aβ肽进行主动接种或外周给予Aβ-特异性单克隆抗体的转基因AD动物模型中，已经阐明了旨在中断淀粉样蛋白级联的治疗干预。这些方法的基本原理依赖于免疫系统介导的斑和/或Aβ清除。已提出斑清除的机理是通过抗体与大脑內的斑的直接结合，从而通过Fc受体激活小胶质细胞吞噬沉积的Aβ来进行的。或者，外周给予的抗体可结合循环的Aβ部分，从而改变中枢神经系统和血浆之间Aβ浓度的动态平衡并促进Aβ从大脑流出。
方法
纤维素膜上的肽合成
膜从Intavis(Bergisch Gladbach，德国)购得。芴甲氧羰基(Fmoc)氨基酸和N-羟基苯并三唑(HBOT)得自Novabiochem(Meudon，法国)。N，N’-二异丙基碳二亚胺(DIC)来自Fluka(德国)。N，N’-二甲基甲酰胺(DMF)和N-甲基吡咯烷酮-2(NMP)获自AppliedBiosystems。Rink树脂购自Advanced Chem Tech。Aβ即KMDAEFRHDSGYEVHHQKLVFFAEDVGSNKGAIIGLMVGGVVIATVIVITLVML(SEQ IDNO：50)的肽合成是根据Frank R.(2002)，使用Auto Spot Robot ASP222(Abimed GmbH，德国)，如以前所描述的(Kramer等人，1994)进行。将所用的膜用长8至10个乙二醇单位的聚乙二醇间隔物衍生(氨基-PEG500-UC薄片，载荷：400nmol/cm2)(Intavis AG，批号AC112050900)。通过C-末端β-丙氨酸的点样产生栅格。所有肽都进行N-乙酰化并且每单个斑点产生约20nmol肽。
膜探测和再生
在SuperBlock封闭缓冲液(Pierce)中过夜饱和步骤后，向膜添加G蛋白纯化的抗体(1μg/ml，室温下温育2小时)。洗涤膜后，将辣根过氧化物酶缀合的山羊抗小鼠IgG(JJacks on ImmunoResearch LaboratoryInc.)的1∶10,000稀释液在室温温育1小时。通过ECL plus试剂盒(Amersham)检测结合的抗体，该试剂盒对斑点上的抗体结合给出阳性指示。
结论
概括地说，使用斑点膜对抗Aβ单克隆抗体的表位作图表明这些抗体识别线性表位。两种mAb即CNTO2125和C890A对其中一种Aβ序列SEQID NO：50的至少2-5个氨基酸是特异性的。
实例5：抗人β淀粉样蛋白抗体的配体结合
方法
BIAcore 3000、CM5传感器表面、胺偶联试剂盒、HEPES緩冲盐水(HBS，10mM HEPES，150mM NaCl，pH7.4，具有3mM EDTA和0.005％Tween-20)和10mM醋酸钠pH4.5从Biacore，Inc.(Piscataway，NJ)购得。将抗Aβ单克隆抗体(100ug/mL)对用水以1∶10稀释的HBS进行透析。然后，将透析过的mAb溶液以1∶10稀释到10mM醋酸钠pH4.5中。将CM5传感器表面在BIAcore 3000中用HBS平衡。使用操作软件中提供的固定化步骤向导和胺偶联试剂盒中提供的方案将每种抗体固定在流通池上。该向导设定为固定2500RU的抗体。通常，实际上固定2000-3000RU。
结果
对于每次mAb应答，收集随时间变化的数据(图46)。根据传感图，在肽注射前10秒、缔合阶段完成前10秒和进入解离阶段60秒时采集报告点。然后将该数据用于确定结合化学计量，以及稳定性的度量(在60秒后保留在传感器表面上的结合的肽的分数)。通过假设1RU＝1pg肽(或蛋白质)/mm2使得可以进行这些计算。
由于1-38和1-42肽的潜在多聚集状态，结合常数的定量分析是不可能的。然而，定性分析是可能的.图47将mAb按照结合比和在60秒后保留在传感器表面上的分数(反映复合物的稳定性)进行排列。根据该分析，CNTO2125 HUMAN和C890A预计能够结合至“单体”肽和/或聚集的肽。
实例5：抗人β淀粉样蛋白抗体的寡聚体中和
方法
根据已公开的方案(Klein，2002)产生Aβ1-42寡聚体制品。筒言之，将1mg人Aβ1-42(California peptide，目录号641-15)在1，1，1，3，3，3-六氟-2-丙醇(HFIP)中单体化，并取0.45mg等分试样至非硅酮处理的微量离心管中。让HFIP在通风厨中室温下过夜蒸发。如果残存任何HFIP，则将其在speed-vac中除去10分钟。然后通过将20μl无水DMSO(Hybri-Max，Sigma)加入至0.45mg单体化肽薄膜来制备5mM Aβ母液。然后，加入980μl Ham’s F12培养基(BioSource，Inc)以产生100μM寡聚体溶液。将所得溶液在4℃下温育24小时。温育后，将寡聚体溶液以14,000×g在4℃下离心10分钟。小心回收所得上清液，作为100μM寡聚体溶液用于细胞毒性研究。
将大鼠PC12细胞(ATCC)以20,000个细胞/孔铺在胶原包被的96孔板中的F12K培养基(1％马血清，1％Pen/Strep)中，并让其在37℃和5％CO2下过夜贴壁。在开始测定之前将培养基用F12K更新。将所有Aβ抗体(CNTO2125 HUMAN和C890A)和市售的小鼠抗-Aβ抗体6E10(Signet，目录号9320-05)在无菌水中稀释至5.6μg/10μl。然后，将5μM的Aβ1-42寡聚体与每种抗体在4℃下预温育2小时。然后，将寡聚体和抗体组合加入细胞中并在37℃下温育24小时。在这个实验中，将5％乙醇用作细胞毒性的阳性对照。通过向每孔加入10μl的MTT试剂(Roche，#1-465-007)并让其温育4小时来评估细胞生存力。存活细胞会将MTT试剂还原成甲臜盐晶体。将该晶体在提供的缓冲液(Roche)中过夜溶解，然后在分光光度计上在550nm-690nm下读数。
结果
使用大鼠PC12细胞系测试AβmAb抑制Aβ42寡聚体毒性的能力。使用MTT测定法测量毒性，该测定法可测定细胞增殖和活力。MTT测定法还代表着对细胞线粒体功能的度量，这是因为需要线粒体脱氢酶活性来将MTT染料还原成甲臜盐晶体，可在分光光度计上读出。当将介质处理的PC12细胞与用5μM Aβ寡聚体处理的细胞进行比较时，Aβ42寡聚体暴露后MTT还原通常降低40-50％，如图48所示。对抗人Aβ抗体防止Aβ42寡聚体毒性的能力进行了测试。将Aβ寡聚体与抗人Aβ抗体预温育后，将它们暴露于神经元样PC12细胞。
与介质对照相比，细胞暴露于单独5μM寡聚体导致细胞生存力降低27.3％。在与寡聚体预温育2小时后，所有抗人Aβ抗体均能够赋予对PC12细胞的神经保护。预期CNTO2125 HUMAN和C890A两者都能完全防止PC12细胞中Aβ42寡聚体诱导的毒性。市售的小鼠单克隆Ab抗体6E10在所测试的浓度(560μg/ml)下不能保护细胞。
实例6：β淀粉样蛋白抗体的动物模型研究
摘要背景尽管已经对全长肽Ab1-40和Ab1-42的作用进行了大量研究，但各种截断形式在阿尔茨海默病中的作用却知之甚少。Ab的一种特定的截短形式Ab11-40/42是通过BACE1对该Ab在位置11处进一步切割得到，并且发现在来自APP具有瑞典型突变(APP670/671KMàNL)的AD患者的生物样品中增加。已证明，全长Ab1-40/42的低聚形式比单体形式具有更大的神经元毒性作用。由于疏水性增加，Ab11-40/42片段可更易于聚集，因而为Ab的潜在毒性形式。目标：利用对Ab11-40/42有特异性的新型单克隆抗体(JRF/hAb11/1)(具有与CNTO2125或SEQ ID NO：42-47相同的CDR序列的C706，对应于本发明的人抗体可变区序列HC SEQ ID NO：48A-I和LC SEQ ID NO：49A-M)，我们在Tg2576小鼠中检验了特异性地靶向该片段是否会具有任何治疗作用。方法：将Tg2576转基因小鼠暴露于慢性的给药方案：腹膜内给予JRF/hAb11/1抗体或PBS，一周一次，从6月龄开始直至20月龄。在处理后，我们测量了大脑和血浆中的Ab11-40/42水平。对大脑还进行了有关斑沉积的组织学分析。我们进行了行为测试，例如洞板测试、新物体识别实验和Y-迷宫实验，来监控这些小鼠的认知功能。通过表面等离子共振(SPR)从生物物理学上对抗体-淀粉样蛋白肽相互作用进行了表征。结果：在用JRF/hAb11/1处理后，我们观察到全长的Ab和截短形式的Ab两者的血浆水平增加。有趣地是，在已知Ab水平在这个小鼠模型中会增加的时候，观察到认知功能有轻度的改善。结论：JRF/hAb11/1(具有与CNTO2125或SEQ ID NO：42-47相同的CDR序列的C706，对应于本发明的人抗体可变区序列HC SEQ ID NO：48A-I和LC SEQID NO：49A-M)是一种显示对β-淀粉样蛋白片段Ab11-40/42有特异性的新型抗体。在Tg2576小鼠中外周给予该抗体证明在活性Ab沉积的时候，认知功能有轻度改善。体外试验提示，该抗体可用于监控β-淀粉样蛋白原纤维成熟的进程或发展。
引言：
已对b-淀粉样蛋白在阿尔茨海默病中的作用进行了广泛研究。由于淀粉样蛋白前体蛋白(APP)的不同切割，该肽以许多形式存在。b-淀粉样蛋白存在于正常个体中，大多数为全长1-40的形式。该物质高度可溶而不倾向于聚集。某些形式的b-淀粉样蛋白更易于聚集而在体内形成低聚体或原纤维。这些据认为是b-淀粉样蛋白的毒性形式。BACE-1在位置+1对APP进行切割，但该酶的过度表达会导致在位置+11进行另外的切割。已显示这种N-端截短肽在阿尔茨海默病和唐氏综合征患者死后大脑样本中升高(Liu等人)。
为了更好地理解b-淀粉样蛋白的这种特定的截短形式的作用，产生了对b-淀粉样蛋白11-40/42有特异性的单克隆抗体。该抗体即JRF/hAb11/1(具有与CNTO2125或SEQ ID NO：42-47相同的CDR序列的C706，对应于本发明的人抗体可变区序列HC SEQ ID NO：48A-I和LC SEQID NO：49A-M)可识别b-淀粉样蛋白的氨基酸11-16，并且优先结合该截短形式。
在这个研究中，用在APP中携带瑞典型突变的Tg2576(Taconic)小鼠模型体内表征这些Ab截短形式。此外，将动物用JRF/hAb11/1处理以确定靶向该多肽是否具有任何治疗价值。从这些动物获得血浆样品，并通过ELISA检验Ab11-40/42的水平，与PBS处理过的转基因动物或未经处理的野生型对照进行比较。通过ELISA和组织学法检验大脑中的淀粉样蛋白负荷。进行了诸如洞板测试、新物体识别实验和Y迷宫实验之类的行为测试来评估认知功能的改善。
方法：
单克隆抗体的产生：将Balb/c小鼠用完全弗氏佐剂中的肽进行致敏。第一组两种合成肽包含b-分泌酶11切割位点处前6至8个人氨基酸(AA)：EVHHQ(KI)-C(人Ab11(6或8AA))。用于免疫的另一组两种肽含有小鼠Ab11氨基酸序列：EVRHQ(KL)-C。所有的肽均使用Pierce的Imject马来酰胺活化匙孔血蓝蛋白/BSA试剂盒(Imject MaleimideActivated mcKLH/BSA kit)(#77605)，根据生产商的说明书(Pierce，Rockford，IL)，通过将肽经由COOH末端半胱氨酸残基与马来酰亚胺活化的mc(火山透孔螺(Megathura crenulata))KLH偶联，或与马来酰亚胺活化的牛血清白蛋白偶联来制备。每两周用100μg KLH偶联肽对小鼠进行加强免疫，该肽开始在完全弗氏佐剂中，随后在不完全弗氏佐剂中。
分离所有小鼠的脾脏并在液氮中冷冻，用人Ab11(6AA)肽免疫过的小鼠的一个脾脏除外。所选的小鼠显示出最高的血清滴度，因此选取用于融合。在融合或脾脏提取前第4天，用盐水中的100μg与mcKLH偶联的Ab11肽经腹膜内对所有小鼠进行加强免疫。通过改进的的Kohler和Milstein的方法，将小鼠脾脏细胞与SP2/0细胞融合。将该杂交瘤接种于30×96-孔板中，在10天后在直接ELISA中用BSA偶联的6氨基酸hAb11肽进行筛选，并用未偶联的Ab11-40肽进行确认。将游离hAb11-40上的阳性细胞立即进行亚克隆，将阳性克隆在液氮中冷冻。
将所有的杂交瘤在达尔伯克改良伊格尔培养基(#41965-039)中培养，该培养基补充有10％胎牛血清(#SH30071；Hyclone，欧洲)、2.5％ESG杂交瘤补充物(#6010 Elscolab，Kruibeke，比利时)、2％HT(#H-0137；Sigma，美国)、1mM丙酮酸钠(#11360-039)、2mM L-谷氨酰胺(25030-021)和青霉素(100U/ml)和链霉素(50mg/ml)(#15140-122)。所有的产品均购自Life-Technologies(Paisley，英国)。将细胞在加湿的8％CO2空气培养箱中温育。
动物：这个研究使用了雌性半合子Tg2576小鼠以及年龄匹配的野生型小鼠。该Tg2576小鼠模型(Taconic)携带一种转基因，该转基因编码衍生自患有早发型AD的一瑞典人家庭的人APP的695-氨基酸同种型。这些小鼠表达高浓度的突变型Ab，发展出大量淀粉样蛋白斑，并显示出记忆缺陷。将小鼠圈养，每个笼子4-5只，并用耳标签进行标识。从6月龄开始，用介质(无菌PBS)或测试品以25mg/kg每周一次经腹膜内给予。无限制地给动物提供食物或水。
样品采集：在6月龄时和在后续的每个2个月试验周期，通过眶后放血进行血液采集。将血浆在-80oC下冷冻。在该研究的各个具体时间点，以及在实验结束时，动物都以人道的方式处死。移出大脑并在4％多聚甲醛中固定以用于组织学检查。介质(PBS)处理过的动物与JRF/hAb11/1抗体处理过的动物之间没有观察到组织学上的差异。
b-淀粉样蛋白水平的测定：通过免疫测定法来测量b-淀粉样蛋白11-42。将NUNC Maxisorp 96孔板用2mg/ml抗b-淀粉样蛋白1-42包被，然后封闭。洗涤后，加入生物样本1小时，然后洗涤。然后加入生物素酰化的抗b-淀粉样蛋白1小时。洗涤后，加入链霉亲和素-铕溶液并温育1小时，然后洗涤。然后将增强溶液加至每孔，并用EnVision读板器读取各板的读数。用Ab 11-40或11-42标准曲线确定样品中肽的量。
行为测试
洞板测试：对被适度剥夺食物的小鼠进行训练，以学习洞板上食物奖品的位置(16个洞中3个有饵料)。然后从6月龄开始，每2个月对小鼠再测试一次。记录找到三份食物奖品消耗的时间和错误的次数。
物体识别任务：使小鼠习惯于没有任何物体的测试盒子。该习得试验包括将2个相同的物体展示给小鼠，持续5分钟。随后是为期5分钟的测试试验，在该试验中将其中一个初始物体替换为新的物体。该测试试验在习得试验后的第1、4或24小时后进行。测量探索每个物体所耗的时间。该测试在6月龄时开始，每隔一个月重复一次。
Y迷宫测试：在初始的训练试验中，让食物受限的小鼠在迷宫的两个臂之间选择。通过用食物奖赏使动物隐蔽于偏爱的臂中20秒来加强该选择。在随后的试验中，将相对的臂投放食物丸饵料而变成“正确的”选择。在5天的周期中，每天将每只动物测试5次。记录进入正确臂所花费的时间和错误的次数。该测试在6月龄时开始，每隔一个月继续进行。
对采自Tg2576研究动物或野生型同窝出生动物的血浆样本中的b-淀粉样蛋白11-40/42的测量对小鼠每周经腹膜内给药，以2个月的间隔采集血浆样本。用检测用生物素酰化JRF/hAb11/1，通过ELISA测定肽的血浆水平。在16月龄之前在任何组中都没有检测到肽，之后仅在抗体处理组中发现Ab11-40(左边)和Ab11-42(右边)两者水平都增加。
对采自20月龄的Tg2576研究动物或野生型同窝出生动物的大脑匀浆样本中的淀粉样蛋白11-40/42的测量将大脑在二乙胺中匀浆以测量可溶性Ab的水平，在甲酸中匀浆以测量不溶性(斑)Ab。用检测用生物素酰化JRF/hAb11/1，通过ELISA测定Ab11-40/42肽的水平。在介质对照组和抗体处理组之间没有观察到差异。
洞板测试-在6月龄时，抗体处理组中的Tg2576动物显示在完成任务的时间(花费的时间)方面的改善。到18月龄时，在JRF/hAb11/1抗体处理动物中观察到在正确反应次数方面有轻微的改善趋势，但相对于介质处理组动物而言在统计学上不显著。
新物体识别测试-在8月龄时，在JRF/hAb11/1处理的Tg2576动物中观察到较于介质对照有稍许改善，但没有在任何其他测试的时间点观察到这一情况。
Y迷宫测试-在JRF/hAb11/1抗体处理的Tg2576小鼠中观察到在正确选择方面以及在完成任务的时间(花费的时间)方面有改善趋势。
结论：
·产生了一种可识别b-淀粉样蛋白多肽的氨基酸11-16的新型抗体JRF/hAb11/1(具有与CNTO2125或SEQ ID NO：42-47相同的CDR序列的C706，对应于本发明的人抗体可变区序列HC SEQ IDNO：48A-I和LC SEQ ID NO：49A-M)。
·证实JRF/hAb11/1对在氨基酸11处截短的多肽有特异性(具有与CNTO2125或SEQ ID NO：42-47相同的CDR序列的C706，对应于本发明的人抗体可变区序列HC SEQ ID NO：48A-I和LC SEQ IDNO：49A-M)。
·通过ELISA或组织学分析，用该抗体长期处理的Tg2576小鼠显示在较老的小鼠的血浆中b-淀粉样蛋白11-40/42的水平升高，但对大脑Ab负荷没有影响。
·有趣的是，当Tg2576动物用JRF/hAb11/1(具有与CNTO2125或SEQ ID NO：42-47相同的CDR序列的C706，对应于本发明的人抗体可变区序列HC SEQ ID NO：48A-I和LC SEQ ID NO：49A-M)处理时，观察到在行为方面有某些细微的改善。
·用较高剂量的抗体或对该Ab片段有较高亲和力的抗体处理可显示出较大的改善。
参考文献：
Hsiao，K.，Chapman，P.，Nilsen，S.，Eckman，C.，Harigaya，Y.，Younkin，S.，Yang，F.和Cole，G.Correlative memory deficits，Abelevation，and amyloid plaques in transgenic mice.Science(1996)274：99-102
Kohler，G.，Howe，S.C.，Milstein，C.Fusion betweenimmunoglobulin-secreting and non-secreting myeloma celllines.Eur J Immunol(1976)6：292-295
Liu，K.，Solano，I.，Mann，D.，Lemere，C.，Mercken，M.，Trojanowski，J.和Lee，V.M.-Y.Characterization of Ab11-40/42Peptide Deposition in Alzheimer’s Disease(AD)and Young DownSyndrome Brains：Implication of N-terminally Truncated AbSpecies in the Pathogenesis of AD(已提交)
El-Mouedden，M.，Vandermeeren，M.，Meert，T.和Mercken，M.Development of a specific ELISA for the quantitative study ofamino-terminally truncated beta-amyloid peptides.J NeurosciMethods(2005)145：97-105
Kawarabayashi，T.，Younkin，L.H.，Saido，T.，Shoji，M.，Ashe，K.H.和Younkin，S.G.Age-Dependent Changes in Brain，CSF，andPlasma amyloid b Protein in the Tg2576 Transgenic Mouse Model ofAlzheimer’s Disease.J Neurosci，21(2)：372-381
显而易见的是，本发明可以与前面的说明和实例中具体描述的方式不同的方式来实施。
根据上面的教导，可以作出本发明的多种修改形式和变型形式，并且这些修改形式和变型形式落入所附权利要求的范围内。
表1。
Figure GPA00001159671200971
Figure GPA00001159671200972
Figure GPA00001159671200981
序列表
<110>MERCKEN，Marc Hubert
     BENSON，Jacqueline M.
     JUNG，Sun-Vung S.
     JIIANG，Haiyan
     RAGHUNATHAN，Gopalan
     B或OZDINA-BIRCH，Lionella
<120>人抗淀粉样蛋白抗体、组合物、方法及用途
<130>CEN5198WOPCT
<140>PCT/2008/079904
<141>2008-10-15
<150>60/979954
<151>2007-10-15
<160>62
<170>FastSEQ，Windows 4.0版
<210>1
<211>125
<212>PRT
<213>智人(Homo sapiens)
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(1)..(125)
<223>Vh1重链可变区
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(1)..(31)
<223>构架1
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(32)..(32)
<223>互补决定区1(CDR1)，X为任何氨基酸。
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(33)..(46)
<223>构架2
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(47)..(47)
<223>互补决定区2(CDR2)，X为任何氨基酸。
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(48)..(79)
<223>构架3
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(80)..(80)
<223>互补决定区3(CDR3)，X为任何氨基酸。
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(81)..(125)
<223>构架4
<400>1
Gln Val Gln Leu Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly
 1               5                  10                  15
Ala Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Xaa
            20                  25                  30
Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met Gly Xaa Arg
        35                  40                  45
Val Thr Met Thr Arg Asp Thr Ser Thr Ser Thr Ala Tyr Met Glu Leu
    50                  55                  60
Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Arg Xaa
65                  70                  75                  80
Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Gly Ser Thr Lys Gly
                85                  90                  95
Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly
            100                 105                 110
Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro
        115                 120                 125
<210>2
<211>124
<212>PRT
<213>智人
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(1)..(124)
<223>Vh2重链可变区
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(1)..(30)
<223>构架1
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(31)..(31)
<223>互补决定区1(CDR1)，X为任何氨基酸。
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(32)..(45)
<223>构架2
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(46)..(46)
<223>互补决定区2(CDR2)，X为任何氨基酸。
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(47)..(78)
<223>构架3
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(79)..(79)
<223>互补决定区3(CDR3)，X为任何氨基酸。
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(80)..(124)
<223>构架4
<400>2
Gln Ile Thr Leu Lys Glu Ser Gly Pro Ala Leu Val Lys Pro Thr Gln
 1               5                  10                  15
Thr Leu Thr Leu Thr Cys Thr Phe Ser Gly Phe Ser Leu Ser Xaa Trp
            20                  25                  30
Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys Ala Leu Glu Trp Leu Ala Xaa Arg Leu
        35                  40                  45
Thr Ile Thr Lys Asp Thr Ser Lys Asn Gln Val Val Leu Thr Met Thr
    50                  55                  60
Ash Met Asp Pro Val Asp Thr Ala Thr Tyr Tyr Cys Ala Arg Xaa Trp
65                  70                  75                  80
Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Pro Thr Ser Pro
                85                  90                  95
Lys Val Phe Pro Leu Ser Leu Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr
            100                 105                 110
Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro
        115                 120
<210>3
<211>100
<212>PRT
<213>智人
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(1)..(100)
<223>Vh3a重链可变区
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(1)..(31)
<223>构架1
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(32)..(32)
<223>互补决定区1(CDR1)，X为任何氨基酸。
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(33)..(46)
<223>构架2
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(47)..(47)
<223>互补决定区2(CDR2)，X为任何氨基酸。
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(48)..(79)
<223>构架3
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(80)..(80)
<223>互补决定区3(CDR3)，X为任何氨基酸。
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(81)..(100)
<223>构架4
<400>3
Glu Val Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly
 1               5                  10                  15
Gly Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Xaa
            20                  25                  30
Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val Ser Xaa Arg
        35                  40                  45
Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr Leu Gln Met
    50                  55                  60
Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Arg Xaa
65                  70                  75                  80
Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Gly Ser Thr Lys Ala
                85                  90                  95
Pro Ser Val Phe
            100
<210>4
<211>102
<212>PRT
<213>智人
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(1)..(102)
<223>Vh3b重链可变区
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(1)..(30)
<223>构架1
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(31)..(31)
<223>互补决定区1(CDR1)，X为任何氨基酸。
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(32)..(45)
<223>构架2
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(46)..(46)
<223>互补决定区2(CDR2)，X为任何氨基酸。
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(47)..(78)
<223>构架3
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(79)..(79)
<223>互补决定区3(CDR3)，X为任何氨基酸。
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(80)..(102)
<223>构架4
<400>4
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Lys Pro Gly Gly
 1               5                  10                  15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Xaa Trp
            20                  25                  30
Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val Gly Xaa Arg Phe
        35                  40                  45
Thr Ile Ser Arg Asp Asp Ser Lys Asn Thr Leu Tyr Leu Gln Met Asn
    50                  55                  60
Ser Leu Lys Thr Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Thr Thr Xaa Trp
65                  70                  75                  80
Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro
                85                  90                  95
Ser Val Phe Pro Leu Ala
            100
<210>5
<211>101
<212>PRT
<213>智人
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(1)..(101)
<223>Vh3c重链可变区
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(1)..(30)
<223>构架1
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(31)..(31)
<223>互补决定区1(CDR1)，X为任何氨基酸。
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(32)..(45)
<223>构架2
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(46)..(46)
<223>互补决定区2(CDR2)，X为任何氨基酸。
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(47)..(79)
<223>构架3
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(80)..(80)
<223>互补决定区3(CDR3)，X为任何氨基酸。
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(81)..(101)
<223>构架4
<400>5
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Arg
 1               5                  10                  15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Thr Ala Ser Gly Phe Thr Phe Gly Xaa Trp
            20                  25                  30
Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val Gly Xaa Arg Phe
        35                  40                  45
Thr Ile Ser Arg Asp Asp Ser Lys Ser Ile Ala Tyr Leu Gln Met Asn
    50                  55                  60
Ser Leu Lys Thr Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Thr Arg Asn Xaa
65                  70                  75                  80
Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Gly Ser Thr Lys Gly
                85                  90                  95
Pro Ser Val Leu Pro
            100
<210>6
<211>108
<212>PRT
<213>智人
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(1)..(108)
<223>Vh4重链可变区
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(1)..(33)
<223>构架1
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(34)..(34)
<223>互补决定区1(CDR1)，X为任何氨基酸。
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(35)..(48)
<223>构架2
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(49)..(49)
<223>互补决定区2(CDR2)，X为任何氨基酸。
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(50)..(81)
<223>构架3
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(82)..(82)
<223>互补决定区3(CDR3)，X为任何氨基酸。
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(83)..(108)
<223>构架4
<400>6
Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Glu
 1               5                  10                  15
Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Gly Ser Ser Ile Ser Ser
            20                  25                  30
Ser Xaa Trp lle Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile Gly
        35                  40                  45
Xaa Arg Val Thr Ile Ser Val Asp Thr Ser Lys Asn Gln Phe Ser Leu
    50                  55                  60
Lys Leu Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala
65                  70                  75                  80
Arg Xaa Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Pro Thr
                85                  90                  95
Lys Ala Pro Asp Val Phe Pro Ile Ile Ser Gly Cys
            100                 105
<210>7
<211>132
<212>PRT
<213>智人
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(1)..(132)
<223>Vh5重链可变区
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(1)..(31)
<223>MISC_FEATURE
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(32)..(32)
<223>互补决定区1(CDR1)，X为任何氨基酸。
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(33)..(46)
<223>构架2
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(47)..(47)
<223>互补决定区2(CDR2)，X为任何氨基酸。
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(48)..(79)
<223>构架3
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(80)..(80)
<223>互补决定区3(CDR3)，X为任何氨基酸。
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(81)..(132)
<223>构架4
<400>7
Glu Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly
 1               5                  10                  15
Glu Ser Leu Lys Ile Ser Cys Lys Gly Ser Gly Tyr Ser Phe Thr Xaa
            20                  25                  30
Trp Val Arg Gln Met Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Met Gly Xaa Gln
        35                  40                  45
Val Thr Ile Ser Ala Asp Lys Ser Ile Ser Thr Ala Tyr Leu Gln Trp
    50                  55                  60
Ser Ser Leu Lys Ala Ser Asp Thr Ala Met Tyr Tyr Cys Ala Arg Xaa
65                  70                  75                  80
Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Ala
                85                  90                  95
Pro Ser Val Phe Pro Leu Val Ser Cys Glu Asn Ser Pro Ser Asp Thr
            100                 105                 110
Ser Ser Val Ala Val Gly Cys Leu Ala Gln Asp Phe Leu Pro Asp Ser
        115                 120                 125
Ile Thr Phe Ser
    130
<210>8
<211>125
<212>PRT
<213>智人
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(1)..(125)
<223>Vh6重链可变区
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(1)..(30)
<223>构架1
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(31)..(31)
<223>互补决定区1(CDR1)，X为任何氨基酸。
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(32)..(45)
<223>构架2
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(46)..(46)
<223>互补决定区2(CDR2)，X为任何氨基酸。
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(47)..(78)
<223>构架3
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(79)..(79)
<223>互补决定区3(CDR3)，X为任何氨基酸。
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(80)..(125)
<223>构架4
<400>8
Gln Val Gln Leu Gln Gln Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Gln
 1               5                  10                  15
Thr Leu Ser Leu Thr Cys Ala Ile Ser Gly Asp Ser Val Ser Xaa Trp
            20                  25                  30
Ile Arg Gln Ser Pro Ser Arg Gly Leu Glu Trp Leu Gly Xaa Arg Ile
        35                  40                  45
Thr Ile Asn Pro Asp Thr Ser Lys Asn Gln Phe Ser Leu Gln Leu Asn
    50                  55                  60
Ser Val Thr Pro Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Arg Xaa Trp
65                  70                  75                  80
Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Gly Ser Ala Ser Ala Pro
                85                  90                  95
Thr Leu Phe Pro Leu Val Ser Cys Glu Asn Ser Pro Ser Asp Thr Ser
            100                 105                 110
Ser Val Ala Val Gly Cys Leu Ala Gln Asp Phe Leu Pro
        115                 120                 125
<210>9
<211>91
<212>PRT
<213>智人
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(1)..(91)
<223>Vh7重链可变区
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(1)..(30)
<223>构架1
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(31)..(31)
<223>互补决定区1(CDR1)，X为任何氨基酸。
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(32)..(45)
<223>构架2
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(46)..(46)
<223>互补决定区2(CDR2)，X为任何氨基酸。
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(47)..(78)
<223>构架3
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(79)..(79)
<223>互补决定区3(CDR3)，X为任何氨基酸。
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(80)..(91)
<223>构架4
<400>9
Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ser Glu Leu Lys Lys Pro Gly Ala
 1               5                  10                  15
Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Xaa Trp
            20                  25                  30
Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met Gly Xaa Arg Phe
        35                  40                  45
Val Phe Ser Leu Asp Thr Ser Val Ser Thr Ala Tyr Leu Gln Ile Ser
    50                  55                  60
Ser Leu Lys Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Arg Xaa Trp
65                  70                  75                  80
Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ser
                85                  90
<210>10
<211>93
<212>PRT
<213>智人
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(1)..(93)
<223>k1_4轻链可变区
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(1)..(24)
<223>构架1
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(25)..(25)
<223>互补决定区1(CDR1)，X为任何氨基酸。
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(26)..(40)
<223>构架2
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(41)..(41)
<223>互补决定区2(CDR2)，X为任何氨基酸。
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(42)..(73)
<223>构架3
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(74)..(74)
<223>互补决定区3(CDR3)，X为任何氨基酸。
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(75)..(93)
<223>构架4
<400>10
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
 1               5                  10                  15
Asp Arg Arg Val Thr Ile Thr Cys Xaa Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly
            20                  25                  30
Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Xaa Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser
        35                  40                  45
Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln
    50                  55                  60
Pro Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Xaa Phe Gly Gln Gly Thr Lys
65                  70                  75                  80
Val Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe
                85                  90
<210>11
<211>92
<212>PRT
<213>智人
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(1)..(92)
<223>k2轻链可变区
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(1)..(23)
<223>构架1
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(24)..(24)
<223>互补决定区1(CDR1)，X为任何氨基酸。
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(25)..(39)
<223>构架2
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(40)..(40)
<223>互补决定区2(CDR2)，X为任何氨基酸。
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(41)..(72)
<223>构架3
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(73)..(73)
<223>互补决定区3(CDR3)，X为任何氨基酸。
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(74)..(92)
<223>构架4
<400>11
Asp Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Leu Ser Leu Pro Val Thr Pro Gly
 1               5                  10                  15
Gln Pro Ala Ser Ile Ser Cys Xaa Trp Tyr Leu Gln Lys Pro Gly Gln
            20                  25                  30
Ser Pro Gln Leu Leu Ile Tyr Xaa Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser Gly
        35                  40                  45
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Lys Ile Ser Arg Val Glu Ala
    50                  55                  60
Glu Asp Val Gly Val Tyr Tyr Cys Xaa Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val
65                  70                  75                  80
Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe
                85                  90
<210>12
<211>91
<212>PRT
<213>智人
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(1)..(91)
<223>k3轻链可变区
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(1)..(23)
<223>构架1
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(24)..(24)
<223>互补决定区1(CDR1)，X为任何氨基酸。
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(25)..(39)
<223>构架2
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(40)..(40)
<223>互补决定区2(CDR2)，X为任何氨基酸。
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(41)..(72)
<223>构架3
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(73)..(73)
<223>互补决定区3(CDR3)，X为任何氨基酸。
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(74)..(91)
<223>构架4
<400>12
Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Gly Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly
 1               5                  10                  15
Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Xaa Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln
            20                  25                  30
Ala Pro Arg Leu Leu Ile Tyr Xaa Gly Ile Pro Asp Arg Phe Ser Gly
        35                  40                  45
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Arg Leu Glu Pro
    50                  55                  60
Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Xaa Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val
65                  70                  75                  80
Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala Ala Pro Ser Val
                85                  90
<210>13
<211>85
<212>PRT
<213>智人
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(1)..(85)
<223>k5轻链可变区
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(1)..(23)
<223>构架1
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(24)..(24)
<223>互补决定区1(CDR1)，X为任何氨基酸。
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(25)..(39)
<223>构架2
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(40)..(40)
<223>互补决定区2(CDR2)，X为任何氨基酸。
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(41)..(72)
<223>构架3
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(73)..(73)
<223>互补决定区3(CDR3)，X为任何氨基酸。
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(74)..(85)
<223>构架4
<400>13
Glu Thr Thr Leu Thr Gln Ser Pro Ala Phe Met Ser Ala Thr Pro Gly
 1               5                  10                  15
Asp Lys Val Asn Ile Ser Cys Xaa Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Glu
            20                  25                  30
Ala Ala Ile Phe Ile Ile Gln Xaa Gly Ile Pro Pro Arg Phe Ser Gly
        35                  40                  45
Ser Gly Tyr Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Asn Asn Ile Glu Ser
    50                  55                  60
Glu Asp Ala Ala Tyr Tyr Phe Cys Xaa Leu Arg His Phe Trp Pro Gly
65                  70                  75                  80
Asp Gln Ala Ala Gly
                85
<210>14
<211>79
<212>PRT
<213>智人
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(1)..(67)
<223>kNew1轻链可变区
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(1)..(17)
<223>构架1
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(18)..(18)
<223>互补决定区1(CDR1)，X为任何氨基酸。
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(19)..(33)
<223>构架2
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(34)..(34)
<223>互补决定区2(CDR2)，X为任何氨基酸。
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(35)..(66)
<223>构架3
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(67)..(67)
<223>互补决定区3(CDR3)，X为任何氨基酸。
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(68)..(79)
<223>构架4
<400>14
Glu Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Val Asn Leu Ser Met Ser Ala Gly
 1               5                  10                  15
Glu Xaa Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Phe Ile
            20                  25                  30
Tyr Xaa Gly Ile Ser Ala Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp
        35                  40                  45
Phe Thr Leu Thr Ile Thr Ser Leu Gln Ser Glu Asp Phe Ala Val Tyr
    50                  55                  60
Tyr Cys Xaa Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Asp Ile Lys Arg Thr
65                  70                  75
<210>15
<211>77
<212>PRT
<213>智人
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(1)..(65)
<223>kNew2轻链可变区
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(1)..(15)
<223>构架1
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(16)..(16)
<223>互补决定区1(CDR1)，X为任何氨基酸。
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(17)..(31)
<223>构架2
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(32)..(32)
<223>互补决定区2(CDR2)，X为任何氨基酸。
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(33)..(64)
<223>构架3
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(65)..(65)
<223>互补决定区3(CDR3)，X为任何氨基酸。
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(66)..(77)
<223>构架4
<400>15
Glu Leu Thr Gln Ser Pro Gly Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly Glu Xaa
 1               5                  10                  15
Trp Tyr Gln His Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Val Ile His Xaa
            20                  25                  30
Gly Ile Ser Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr
        35                  40                  45
Leu Thr Ile Thr Arg Leu Glu Pro Glu Asp Phe Ala Leu Tyr Tyr Cys
    50                  55                  60
Xaa Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Asp Phe Lys Arg Thr
65                  70                  75
<210>16
<211>98
<212>PRT
<213>智人
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(1)..(98)
<223>λ1a轻链可变区
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(1)..(22)
<223>构架1
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(23)..(23)
<223>互补决定区1(CDR1).X为任何氨基酸。
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(24)..(38)
<223>构架2
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(39)..(39)
<223>互补决定区2(CDR2).X为任何氨基酸。
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(40)..(71)
<223>构架3
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(72)..(72)
<223>互补决定区3(CDR3).X为任何氨基酸。
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(73)..(98)
<223>构架4
<400>16
Gln Ser Val Leu Thr Gln Pro Pro Ser Val Ser Gly Ala Pro Gly Gln
 1               5                  10                  15
Arg Val Thr Ile Ser Cys Xaa Trp Tyr Gln Gln Leu Pro Gly Thr Ala
            20                  25                  30
Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Xaa Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser Gly Ser
        35                  40                  45
Lys Ser Gly Thr Ser Ala Ser Leu Ala Ile Ser Gly Leu Gln Ser Glu
    50                  55                  60
Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Xaa Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr
65                  70                  75                  80
Val Leu Gly Gln Pro Lys Ala Ala Pro Ser Val Thr Leu Phe Pro Pro
                85                  90                  95
Ser Ser
<210>17
<211>99
<212>PRT
<213>智人
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(1)..(99)
<223>λ1b轻链可变区
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(1)..(23)
<223>构架1
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(24)..(24)
<223>互补决定区1(CDR1)，X为任何氨基酸。
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(25)..(39)
<223>构架2
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(40)..(40)
<223>互补决定区2(CDR2)，X为任何氨基酸。
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(41)..(72)
<223>构架3
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(73)..(73)
<223>互补决定区3(CDR3)，X为任何氨基酸。
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(74)..(99)
<223>构架4
<400>17
Ala Gln Ser Val Leu Thr Gln Pro Pro Ser Val Ser Ala Ala Pro Gly
 1               5                  10                  15
Gln Lys Val Thr Ile Ser Cys Xaa Trp Tyr Gln Gln Leu Pro Gly Thr
            20                  25                  30
Ala Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Xaa Gly Ile Pro Asp Arg Phe Ser Gly
        35                  40                  45
Ser Lys Ser Gly Thr Ser Ala Thr Leu Gly Ile Thr Gly Leu Gln Thr
    50                  55                  60
Gly Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Xaa Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu
65                  70                  75                  80
Thr Val Leu Gly Gln Pro Lys Ala Ala Pro Ser Val Thr Leu Phe Pro
                85                  90                  95
Pro Ser Ser
<210>18
<211>99
<212>PRT
<213>智人
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(1)..(72)
<223>λ2轻链可变区
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(1)..(22)
<223>构架1
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(23)..(23)
<223>互补决定区1(CDR1)，X为任何氨基酸。
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(24)..(38)
<223>构架2
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(39)..(39)
<223>互补决定区2(CDR2)，X为任何氨基酸。
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(40)..(71)
<223>构架3
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(72)..(72)
<223>互补决定区3(CDR3)，X为任何氨基酸。
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(73)..(99)
<223>构架4
<400>18
Gln Ser Ala Leu Thr Gln Pro Ala Ser Val Ser Gly Ser Pro Gly Gln
 1               5                  10                  15
Ser Ile Thr Ile Ser Cys Xaa Trp Tyr Gln Gln His Pro Gly Lys Ala
            20                  25                  30
Pro Lys Leu Met Ile Tyr Xaa Gly Val Ser Asn Arg Phe Ser Gly Ser
        35                  40                  45
Lys Ser Gly Asn Thr Ala Ser Leu Thr Ile Ser Gly Leu Gln Ala Glu
    50                  55                  60
Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Xaa Phe Gly Gly Gly Thr Thr Lys Leu
65                  70                  75                  80
Thr Val Leu Gly Gln Pro Lys Ala Ala Pro Ser Val Thr Leu Phe Pro
                85                  90                  95
Pro Ser Ser
<210>19
<211>107
<212>PRT
<213>智人
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(1)..(107)
<223>λ3a轻链可变区
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(1)..(22)
<223>构架1
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(23)..(23)
<223>互补决定区1(CDR1)，X为任何氨基酸。
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(24)..(38)
<223>构架2vv
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(39)..(39)
<223>互补决定区2(CDR2)，X为任何氨基酸。
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(40)..(71)
<223>构架3
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(72)..(72)
<223>互补决定区3(CDR3)，X为任何氨基酸。
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(73)..(107)
<223>构架4
<400>19
Ser Tyr Glu Leu Thr Gln Pro Pro Ser Val Ser Val Ser Pro Gly Gln
 1               5                  10                  15
Thr Ala Arg Ile Thr Cys Xaa Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala
            20                  25                  30
Pro Val Leu Val Ile Tyr Xaa Gly Ile Pro Glu Arg Phe Ser Gly Ser
        35                  40                  45
Ser Ser Gly Thr Thr Ala Thr Leu Thr Ile Ser Gly Val Gln Ala Glu
    50                  55                  60
Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Xaa Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr
65                  70                  75                  80
Val Leu Gly Gln Pro Lys Ala Ala Pro Ser Val Thr Leu Phe Pro Pro
                85                  90                  95
Ser Ser Glu Glu Leu Gln Ala Asn Lys Ala Thr
            100                 105
<210>20
<211>93
<212>PRT
<213>智人
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(1)..(93)
<223>λ3b轻链可变区
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(1)..(22)
<223>构架1
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(23)..(23)
<223>互补决定区1(CDR1)，X为任何氨基酸。
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(24)..(39)
<223>构架2
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(40)..(40)
<223>互补决定区2(CDR2)，X为任何氨基酸。
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(41)..(72)
<223>构架3
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(73)..(73)
<223>互补决定区3(CDR3)，X为任何氨基酸。
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(74)..(93)
<223>构架4
<400>20
Ser Tyr Val Leu Thr Gln Pro Pro Ser Val Ser Val Ala Pro Gly Gln
 1               5                  10                  15
Thr Ala Arg Ile Thr Cys Xaa Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala
            20                  25                  30
Pro Val Leu Val Val Tyr Asp Xaa Gly Ile Pro Glu Arg Phe Ser Gly
        35                  40                  45
Ser Asn Ser Gly Asn Thr Ala Thr Leu Thr Ile Ser Arg Val Glu Ala
    50                  55                  60
Gly Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Xaa Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu
65                  70                  75                  80
Thr Val Leu Gly Gln Pro Lys Ala Ala Pro Thr Val Thr
                85                  90
<210>21
<211>98
<212>PRT
<213>智人
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(1)..(98)
<223>λ3c轻链可变区
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(1)..(22)
<223>构架1
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(23)..(23)
<223>互补决定区1(CDR1)，X为任何氨基酸。
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(24)..(38)
<223>构架2
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(39)..(39)
<223>互补决定区2(CDR2)，X为任何氨基酸。
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(40)..(71)
<223>构架3
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(72)..(72)
<223>互补决定区3(CDR3)，X为任何氨基酸。
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(73)..(98)
<223>构架4
<400>21
Ser Tyr Glu Leu Thr Gln Pro Pro Ser Val Ser Val Ser Pro Gly Gln
 1               5                  10                  15
Thr Ala Ser Ile Thr Cys Xaa Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ser
            20                  25                  30
Pro Val Leu Val Ile Tyr Xaa Gly Ile Pro Glu Arg Phe Ser Gly Ser
        35                  40                  45
Asn Ser Gly Asn Thr Ala Thr Leu Thr Ile Ser Gly Thr Gln Ala Met
    50                  55                  60
Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Xaa Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr
65                  70                  75                  80
Val Leu Gly Gln Pro Lys Ala Ala Pro Ser Arg Ser Leu Cys Pro Pro
                85                  90                  95
Pro Pro
<210>22
<211>98
<212>PRT
<213>智人
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(1)..(98)
<223>λ3e轻链可变区
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(1)..(22)
<223>构架1
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(23)..(23)
<223>互补决定区1(CDR1)，X为任何氨基酸。
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(24)..(38)
<223>构架2
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(39)..(39)
<223>互补决定区2(CDR2)，X为任何氨基酸。
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(40)..(71)
<223>构架3
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(72)..(72)
<223>互补决定区3(CDR3)，X为任何氨基酸。
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(73)..(98)
<223>构架4
<400>22
Ser Ser Glu Leu Thr Gln Asp Pro Ala Val Ser Val Ala Leu Gly Gln
 1               5                  10                  15
Thr Val Arg Ile Thr Cys Xaa Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala
            20                  25                  30
Pro Val Leu Val Ile Tyr Xaa Gly Ile Pro Asp Arg Phe Ser Gly Ser
        35                  40                  45
Ser Ser Gly Asn Thr Ala Ser Leu Thr Ile Thr Gly Ala Gln Ala Glu
    50                  55                  60
Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Xaa Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr
65                  70                  75                  80
Val Leu Gly Gln Pro Lys Ala Ala Pro Ser Val Thr Leu Phe Pro Pro
                85                  90                  95
Ser Ser
<210>23
<211>94
<212>PRT
<213>智人
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(1)..(94)
<223>λ4a轻链可变区
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(1)..(22)
<223>构架1
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(23)..(23)
<223>互补决定区1(CDR1)，X为任何氨基酸。
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(24)..(38)
<223>构架2
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(39)..(39)
<223>互补决定区2(CDR2)，X为任何氨基酸。
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(40)..(71)
<223>构架3
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(72)..(72)
<223>互补决定区3(CDR3)，X为任何氨基酸。
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(73)..(94)
<223>构架4
<400>23
Gln Pro Val Leu Thr Gln Ser Ser Ser Ala Ser Ala Ser Leu Gly Ser
 1               5                  10                  15
Ser Val Lys Leu Thr Cys Xaa Trp His Gln Gln Gln Pro Gly Lys Ala
            20                  25                  30
Pro Arg Tyr Leu Met Lys Xaa Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser Gly Ser
        35                  40                  45
Ser Ser Gly Ala Asp Arg Tyr Leu Thr Ile Ser Asn Leu Gln Ser Glu
    50                  55                  60
Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Xaa Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr
65                  70                  75                  80
Val Leu Gly Gln Pro Lys Ala Ala Pro Ser Val Thr Leu Phe
                85                  90
<210>24
<211>95
<212>PRT
<213>智人
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(1)..(95)
<223>λ4b轻链可变区
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(1)..(22)
<223>构架1
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(23)..(23)
<223>互补决定区1(CDR1)，X为任何氨基酸。
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(24)..(38)
<223>构架2
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(39)..(39)
<223>互补决定区2(CDR2)，X为任何氨基酸。
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(40)..(71)
<223>构架3
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(72)..(72)
<223>互补决定区3(CDR3)，X为任何氨基酸。
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(73)..(95)
<223>构架4
<400>24
Gln Leu Val Leu Thr Gln Ser Pro Ser Ala Ser Ala Ser Leu Gly Ala
 1               5                  10                  15
Ser Val Lys Leu Thr Cys Xaa Trp His Gln Gln Gln Pro Glu Lys Gly
            20                  25                  30
Pro Arg Tyr Leu Met Lys Xaa Gly Ile Pro Asp Arg Phe Ser Gly Ser
        35                  40                  45
Ser Ser Gly Ala Glu Arg Tyr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Ser Glu
    50                  55                  60
Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Xaa Phe Gly Gly Ile Gly Gly Gly Thr
65                  70                  75                  80
Lys Leu Thr Val Leu Gly Gln Pro Lys Ala Ala Pro Ser Val Ser
                85                  90                  95
<210>25
<211>88
<212>PRT
<213>智人
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(1)..(75)
<223>λ5轻链可变区
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(1)..(22)
<223>构架1
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(23)..(23)
<223>互补决定区1(CDR1)，X为任何氨基酸。
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(24)..(39)
<223>构架2
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(40)..(40)
<223>互补决定区2(CDR2)，X为任何氨基酸。
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(41)..(74)
<223>构架3
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(75)..(75)
<223>互补决定区3(CDR3)，X为任何氨基酸。
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(76)..(88)
<223>构架4
<400>25
Gln Ala Val Leu Thr Gln Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Pro Gly Ala
 1               5                  10                  15
Ser Ala Ser Leu Thr Cys Xaa Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Ser Pro
            20                  25                  30
Pro Gln Tyr Leu Leu Arg Tyr Xaa Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
        35                  40                  45
Ser Lys Asp Ala Ser Ala Asn Ala Gly Ile Leu Leu Ile Ser Gly Leu
    50                  55                  60
Gln Ser Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Xaa Phe Gly Gly Gly Thr
65                  70                  75                  80
Lys Leu Thr Val Leu Ser Gln Pro
                85
<210>26
<211>101
<212>PRT
<213>智人
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(1)..(101)
<223>λ6轻链可变区
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(1)..(22)
<223>构架1
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(23)..(23)
<223>互补决定区1(CDR1)，X为任何氨基酸。
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(24)..(38)
<223>构架2
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(39)..(39)
<223>互补决定区2(CDR2)，X为任何氨基酸。
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(40)..(73)
<223>构架3
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(74)..(74)
<223>互补决定区3(CDR3)，X为任何氨基酸。
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(75)..(101)
<223>构架4
<400>26
Asn Phe Met Leu Thr Gln Pro His Ser Val Ser Glu Ser Pro Gly Lys
 1               5                  10                  15
Thr Val Thr Ile Ser Cys Xaa Trp Tyr Gln Gln Arg Pro Gly Ser Ala
            20                  25                  30
Pro Thr Thr Val Ile Tyr Xaa Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser Gly Ser
        35                  40                  45
Ile Asp Ser Ser Ser Asn Ser Ala Ser Leu Thr Ile Ser Gly Leu Lys
    50                  55                  60
Thr Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Xaa Phe Gly Gly Gly Thr Lys
65                  70                  75                  80
Leu Thr Val Leu Gly Gln Pro Lys Ala Ala Pro Ser Val Thr Leu Phe
                85                  90                  95
Pro Pro Ser Ser Ser
            100
<210>27
<211>89
<212>PRT
<213>智人
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(1)..(72)
<223>λ7轻链可变区
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(1)..(22)
<223>构架1
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(23)..(23)
<223>互补决定区1(CDR1)，X为任何氨基酸。
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(24)..(38)
<223>构架2
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(39)..(39)
<223>互补决定区2(CDR2)，X为任何氨基酸。
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(40)..(71)
<223>构架3
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(72)..(72)
<223>互补决定区3(CDR3)，X为任何氨基酸。
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(73)..(89)
<223>构架4
<400>27
Gln Ala Val Val Thr Gln Glu Pro Ser Leu Thr Val Ser Pro Gly Gly
 1               5                  10                  15
Thr Val Thr Leu Thr Cys Xaa Trp Phe Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala
            20                  25                  30
Pro Arg Ala Leu Ile Tyr Xaa Trp Thr Pro Ala Arg Phe Ser Gly Ser
        35                  40                  45
Leu Leu Gly Gly Lys Ala Ala Leu Thr Leu Ser Gly Val Gln Pro Glu
    50                  55                  60
Asp Glu Ala Glu Tyr Tyr Cys Xaa Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr
65                  70                  75                  80
Val Leu Gly Gln Pro Lys Ala Ala Pro
                85
<210>28
<211>89
<212>PRT
<213>智人
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(1)..(89)
<223>λ8轻链可变区
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(1)..(22)
<223>构架1
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(23)..(23)
<223>互补决定区1(CDR1)，X为5-25(14)个任何氨基酸。
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(24)..(38)
<223>构架2
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(39)..(39)
<223>互补决定区2(CDR2)，X为任何氨基酸。
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(40)..(71)
<223>构架3
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(72)..(72)
<223>互补决定区3(CDR3)，X为任何氨基酸。
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(73)..(89)
<223>构架4
<400>28
Gln Thr Val Val Thr Gln Glu Pro Ser Phe Ser Val Ser Pro Gly Gly
 1               5                  10                  15
Thr Val Thr Leu Thr Cys Xaa Trp Tyr Gln Gln Thr Pro Gly Gln Ala
            20                  25                  30
Pro Arg Thr Leu Ile Tyr Xaa Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser Gly Ser
        35                  40                  45
Ile Leu Gly Asn Lys Ala Ala Leu Thr Ile Thr Gly Ala Gln Ala Asp
    50                  55                  60
Asp Glu Ser Asp Tyr Tyr Cys Xaa Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr
65                  70                  75                  80
Val Leu Gly Gln Pro Lys Ala Ala Pro
                85
<210>29
<211>91
<212>PRT
<213>智人
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(1)..(91)
<223>λ9轻链可变区
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(1)..(22)
<223>构架1
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(23)..(23)
<223>互补决定区1(CDR1)，X为任何氨基酸。
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(24)..(38)
<223>构架2
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(39)..(39)
<223>互补决定区2(CDR2)，X为任何氨基酸。
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(40)..(79)
<223>构架3
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(80)..(80)
<223>互补决定区3(CDR3)，X为任何氨基酸。
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(81)..(91)
<223>构架4
<400>29
Gln Pro Val Leu Thr Gln Pro Pro Ser Ala Ser Ala Ser Leu Gly Ala
 1               5                  10                  15
Ser Val Thr Leu Thr Cys Xaa Trp Tyr Gln Gln Arg Pro Gly Lys Gly
            20                  25                  30
Pro Arg Phe Val Met Arg Xaa Gly Ile Pro Asp Arg Phe Ser Val Leu
        35                  40                  45
Gly Ser Gly Leu Asn Arg Tyr Leu Thr Ile Lys Asn Ile Gln Glu Glu
    50                  55                  60
Asp Glu Ser Asp Tyr His Cys Xaa Phe Gly GIy Gly Thr Lys Leu Thr
65                  70                  75                  80
Val Leu Gly Gln Pro Lys Ala Ala Pro Ser Val
                85                  90
<210>30
<211>87
<212>PRT
<213>智人
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(1)..(87)
<223>λ10轻链可变区
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(1)..(22)
<223>构架1
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(23)..(23)
<223>互补决定区1(CDR1)，X为任何氨基酸。
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(24)..(38)
<223>构架2
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(39)..(39)
<223>互补决定区2(CDR2)，X为任何氨基酸。
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(40)..(71)
<223>构架3
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(72)..(72)
<223>互补决定区3(CDR3)，X为任何氨基酸。
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(73)..(87)
<223>构架4
<400>30
Gln Ala Gly Leu Thr Gln Pro Pro Ser Val Ser Lys Gly Leu Arg Gln
 1               5                  10                  15
Thr Ala Thr Leu Thr Cys Xaa Trp Leu Gln Gln His Gln Gly His Pro
            20                  25                  30
Pro Lys Leu Leu Ser Tyr Xaa Gly Ile Ser Glu Arg Phe Ser Ala Ser
        35                  40                  45
Arg Ser Gly Asn Thr Ala Ser Leu Thr Ile Thr Gly Leu Gln Pro Glu
    50                  55                  60
Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Xaa Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr
65                  70                  75                  80
Val Leu Gly Gln Pro Lys Ala
                85
<210>31
<211>354
<212>PRT
<213>智人
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(1)..(354)
<223>IgA1重链恒定区
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(1)..(102)
<223>CH1
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(103)..(121)
<223>hinge
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(122)..(222)
<223>CH2
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(223)..(354)
<223>CH3
<400>31
<400>31
Ala Ser Pro Thr Ser Pro Lys Val Phe Pro Leu Ser Leu Cys Ser Thr
 1               5                  10                  15
Gln Pro Asp Gly Asn Val Val Ile Ala Cys Leu Val Gln Gly Phe Phe
            20                  25                  30
Pro Gln Glu Pro Leu Ser Val Thr Trp Ser Glu Ser Gly Gln Gly Val
        35                  40                  45
Thr Ala Arg Asn Phe Pro Pro Ser Gln Asp Ala Ser Gly Asp Leu Tyr
    50                  55                  60
Thr Thr Ser Ser Gln Leu Thr Leu Pro Ala Thr Gln Cys Leu Ala Gly
65                  70                  75                  80
Lys Ser Val Thr Cys His Val Lys His Tyr Thr Asn Pro Ser Gln Asp
                85                  90                  95
Val Thr Val Pro Cys Pro Val Pro Ser Thr Pro Pro Thr Pro Ser Pro
            100                 105                 110
Ser Thr Pro Pro Thr Pro Ser Pro Ser Cys Cys His Pro Arg Leu Ser
        115                 120                 125
Leu His Arg Pro Ala Leu Glu Asp Leu Leu Leu Gly Ser Glu Ala Asn
    130                 135                 140
Leu Thr Cys Thr Leu Thr Gly Leu Arg Asp Ala Ser Gly Val Thr Phe
145                 150                 155                 160
Thr Trp Thr Pro Ser Ser Gly Lys Ser Ala Val Gln Gly Pro Pro Glu
                165                 170                 175
Arg Asp Leu Cys Gly Cys Tyr Ser Val Ser Ser Val Leu Pro Gly Cys
            180                 185                 190
Ala Glu Pro Trp Asn His Gly Lys Thr Phe Thr Cys Thr Ala Ala Tyr
        195                 200                 205
Pro Glu Ser Lys Thr Pro Leu Thr Ala Thr Leu Ser Lys Ser Gly Asn
    210                 215                 220
Thr Phe Arg Pro Glu Val His Leu Leu Pro Pro Pro Ser Glx Glu Glu
225                 230                 235                 240
Leu Ala Leu Asn Glu Leu Val Thr Leu Thr Cys Leu Ala Arg Gly Phe
                245                 250                 255
Ser Pro Lys Asp Val Leu Val Arg Trp Leu Gln Gly Ser Gln Glu Leu
            260                 265                 270
Pro Arg Glu Lys Tyr Leu Thr Trp Ala Ser Arg Gln Glu Pro Ser Gln
        275                 280                 285
Gly Thr Thr Thr Phe Ala Val Thr Ser Ile Leu Arg Val Ala Ala Glu
    290                 295                 300
Asp Trp Lys Lys Gly Asp Thr Phe Ser Cys Met Val Gly His Glu Ala
305                 310                 315                 320
Leu Pro Leu Ala Phe Thr Gln Lys Thr Ile Asp Arg Leu Ala Gly Lys
                325                 330                 335
Pro Thr His Val Asn Val Ser Val Val Met Ala Glu Val Asp Gly Thr
            340                 345                 350
Cys Tyr
<210>32
<211>340
<212>PRT
<213>智人
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(1)..(340)
<223>IgA2重链恒定区
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(1)..(102)
<223>CH1
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(103)..(108)
<223>hinge
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(109)..(209)
<223>CH2
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(210)..(340)
<223>CH3
<400>32
Ala Ser Pro Thr Ser Pro Lys Val Phe Pro Leu Ser Leu Asp Ser Thr
 1               5                  10                  15
Pro Gln Asp Gly Asn Val Val Val Ala Cys Leu Val Gln Gly Phe Phe
            20                  25                  30
Pro Gln Glu Pro Leu Ser Val Thr Trp Ser Glu Ser Gly Gln Asn Val
        35                  40                  45
Thr Ala Arg Asn Phe Pro Pro Ser Gln Asp Ala Ser Gly Asp Leu Tyr
    50                  55                  60
Thr Thr Ser Ser Gln Leu Thr Leu Pro Ala Thr Gln Cys Pro Asp Gly
65                  70                  75                  80
Lys Ser Val Thr Cys His Val Lys His Tyr Thr Asn Pro Ser Gln Asp
                85                  90                  95
Val Thr Val Pro Cys Pro Val Pro Pro Pro Pro Pro Cys Cys His Pro
            100                 105                 110
Arg Leu Ser Leu His Arg Pro Ala Leu Glu Asp Leu Leu Leu Gly Ser
        115                 120                 125
Glu Ala Asn Leu Thr Cys Thr Leu Thr Gly Leu Arg Asp Ala Ser Gly
    130                 135                 140
Ala Thr Phe Thr Trp Thr Pro Ser Ser Gly Lys Ser Ala Val Gln Gly
145                 150                 155                 160
Pro Pro Glu Arg Asp Leu Cys Gly Cys Tyr Ser Val Ser Ser Val Leu
                165                 170                 175
Pro Gly Cys Ala Gln Pro Trp Asn His Gly Glu Thr Phe Thr Cys Thr
            180                 185                 190
Ala Ala His Pro Glu Leu Lys Thr Pro Leu Thr Ala Asn Ile Thr Lys
        195                 200                 205
Ser Gly Asn Thr Phe Arg Pro Glu Val His Leu Leu Pro Pro Pro Ser
    210                 215                 220
Glu Glu Leu Ala Leu Asn Glu Leu Val Thr Leu Thr Cys Leu Ala Arg
225                 230                 235                 240
Gly Phe Ser Pro Lys Asp Val Leu Val Arg Trp Leu Gln Gly Ser Gln
                245                 250                 255
Glu Leu Pro Arg Glu Lys Tyr Leu Thr Trp Ala Ser Arg Gln Glu Pro
            260                 265                 270
Ser Gln Gly Thr Thr Thr Phe Ala Val Thr Ser Ile Leu Arg Val Ala
        275                 280                 285
Ala Glu Asp Trp Lys Lys Gly Asp Thr Phe Ser Cys Met Val Gly His
    290                 295                 300
Glu Ala Leu Pro Leu Ala Phe Thr Gln Lys Thr Ile Asp Arg Leu Ala
305                 310                 315                 320
Gly Lys Pro Thr His Val Asn Val Ser Val Val Met Ala Glu Val Asp
                325                 330                 335
Gly Thr Cys Tyr
            340
<210>33
<211>384
<212>PRT
<213>智人
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(1)..(384)
<223>IgD重链恒定区
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(1)..(101)
<223>CH1
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(102)..(135)
<223>hinge 1
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(136)..(159)
<223>hinge 2
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(160)..(267)
<223>CH2
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(268)..(384)
<223>CH3
<400>33
Ala Pro Thr Lys Ala Pro Asp Val Phe Pro Ile Ile Ser Gly Cys Arg
 1               5                  10                  15
His Pro Lys Asp Asn Ser Pro Val Val Leu Ala Cys Leu Ile Thr Gly
            20                  25                  30
Tyr His Pro Thr Ser Val Thr Val Thr Trp Tyr Met Gly Thr Gln Ser
        35                  40                  45
Gln Pro Gln Arg Thr Phe Pro Glu Ile Gln Arg Arg Asp Ser Tyr Tyr
    50                  55                  60
Met Thr Ser Ser Gln Leu Ser Thr Pro Leu Gln Gln Trp Arg Gln Gly
65                  70                  75                  80
Glu Tyr Lys Cys Val Val Gln His Thr Ala Ser Lys Ser Lys Lys Glu
                85                  90                  95
Ile Phe Arg Trp Pro Glu Ser Pro Lys Ala Gln Ala Ser Ser Val Pro
            100                 105                 110
Thr Ala Gln Pro Gln Ala Glu Gly Ser Leu Ala Lys Ala Thr Thr Ala
        115                 120                 125
Pro Ala Thr Thr Arg Asn Thr Gly Arg Gly Gly Glu Glu Lys Lys Lys
    130                 135                 140
Glu Lys Glu Lys Glu Glu Gln Glu Glu Arg Glu Thr Lys Thr Pro Glu
145                 150                 155                 160
Cys Pro Ser His Thr Gln Pro Leu Gly Val Tyr Leu Leu Thr Pro Ala
                165                 170                 175
Val Gln Asp Leu Trp Leu Arg Asp Lys Ala Thr Phe Thr Cys Phe Val
            180                 185                 190
Val Gly Ser Asp Leu Lys Asp Ala His Leu Thr Trp Glu Val Ala Gly
        195                 200                 205
Lys Val Pro Thr Gly Gly Val Glu Glu Gly Leu Leu Glu Arg His Ser
    210                 215                 220
Asn Gly Ser Gln Ser Gln His Ser Arg Leu Thr Leu Pro Arg Ser Leu
225                 230                 235                 240
Trp Asn Ala Gly Thr Ser Val Thr Cys Thr Leu Asn His Pro Ser Leu
                245                 250                 255
Pro Pro Gln Arg Leu Met Ala Leu Arg Glu Pro Ala Ala Gln Ala Pro
            260                 265                 270
Val Lys Leu Ser Leu Asn Leu Leu Ala Ser Ser Asp Pro Pro Glu Ala
        275                 280                 285
Ala Ser Trp Leu Leu Cys Glu Val Ser Gly Phe Ser Pro Pro Asn Ile
    290                 295                 300
Leu Leu Met Trp Leu Glu Asp Gln Arg Glu Val Asn Thr Ser Gly Phe
305                 310                 315                 320
Ala Pro Ala Arg Pro Pro Pro Gln Pro Arg Ser Thr Thr Phe Trp Ala
                325                 330                 335
Trp Ser Val Leu Arg Val Pro Ala Pro Pro Ser Pro Gln Pro Ala Thr
            340                 345                 350
Tyr Thr Cys Val Val Ser His Glu Asp Ser Arg Thr Leu Leu Asn Ala
        355                 360                 365
Ser Arg Ser Leu Glu Val Ser Tyr Val Thr Asp His Gly Pro Met Lys
    370                 375                 380
<210>34
<211>497
<212>PRT
<213>智人
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(1)..(497)
<223>IgE重链恒定区
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(1)..(103)
<223>CH1
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(104)..(210)
<223>CH2
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(211)..(318)
<223>CH3
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(319)..(497)
<223>CH4
<400>34
Ala Ser Thr Gln Ser Pro Ser Val Phe Pro Leu Thr Arg Cys Cys Lys
 1               5                  10                  15
Asn Ile Pro Ser Asn Ala Thr Ser Val Thr Leu Gly Cys Leu Ala Thr
            20                  25                  30
Gly Tyr Phe Pro Glu Pro Val Met Val Thr Trp Asp Thr Gly Ser Leu
        35                  40                  45
Asn Gly Thr Thr Met Thr Leu Pro Ala Thr Thr Leu Thr Leu Ser Gly
    50                  55                  60
His Tyr Ala Thr Ile Ser Leu Leu Thr Val Ser Gly Ala Trp Ala Lys
65                  70                  75                  80
Gln Met Phe Thr Cys Arg Val Ala His Thr Pro Ser Ser Thr Asp Trp
                85                  90                  95
Val Asp Asn Lys Thr Phe Ser Val Cys Ser Arg Asp Phe Thr Pro Pro
            100                 105                 110
Thr Val Lys Ile Leu Gln Ser Ser Cys Asp Gly Gly Gly His Phe Pro
        115                 120                 125
Pro Thr Ile Gln Leu Leu Cys Leu Val Ser Gly Tyr Thr Pro Gly Thr
    130                 135                 140
Ile Asn Ile Thr Trp Leu Glu Asp Gly Gln Val Met Asp Val Asp Leu
145                 150                 155                 160
Ser Thr Ala Ser Thr Thr Gln Glu Gly Glu Leu Ala Ser Thr Gln Ser
                165                 170                 175
Glu Leu Thr Leu Ser Gln Lys His Trp Leu Ser Asp Arg Thr Tyr Thr
            180                 185                 190
Cys Gln Val Thr Tyr Gln Gly His Thr Phe Glu Asp Ser Thr Lys Lys
        195                 200                 205
Cys Ala Asp Ser Asn Pro Arg Gly Val Ser Ala Tyr Leu Ser Arg Pro
    210                 215                 220
Ser Pro Phe Asp Leu Phe Ile Arg Lys Ser Pro Thr Ile Thr Cys Leu
225                 230                 235                 240
Val Val Asp Leu Ala Pro Ser Lys Gly Thr Val Asn Leu Thr Trp Ser
                245                 250                 255
Arg Ala Ser Gly Lys Pro Val Asn His Ser Thr Arg Lys Glu Glu Lys
            260                 265                 270
Gln Arg Asn Gly Thr Leu Thr Val Thr Ser Thr Leu Pro Val Gly Thr
        275                 280                 285
Arg Asp Trp Ile Glu Gly Glu Thr Tyr Gln Cys Arg Val Thr His Pro
    290                 295                 300
His Leu Pro Arg Ala Leu Met Arg Ser Thr Thr Lys Thr Ser Gly Pro
305                 310                 315                 320
Val Gly Pro Arg Ala Ala Pro Glu Val Tyr Ala Phe Ala Thr Pro Glu
                325                 330                 335
Trp Pro Gly Ser Arg Asp Lys Arg Thr Leu Ala Cys Leu Ile Gln Asn
            340                 345                 350
Phe Met Pro Glu Asp Ile Ser Val Gln Trp Leu His Asn Glu Val Gln
        355                 360                 365
Leu Pro Asp Ala Arg His Ser Thr Thr Gln Pro Arg Lys Thr Lys Gly
    370                 375                 380
Ser Gly Phe Phe Val Phe Ser Arg Leu Glu Val Thr Arg Ala Glu Trp
385                 390                 395                 400
Glu Gln Lys Asp Glu Phe Ile Cys Arg Ala Val His Glu Ala Ala Ser
                405                 410                 415
Pro Ser Gln Thr Val Gln Arg Ala Val Ser Val Asn Pro Gly Lys Asp
            420                 425                 430
Val Cys Val Glu Glu Ala Glu Gly Glu Ala Pro Trp Thr Trp Thr Gly
        435                 440                 445
Leu Cys Ile Phe Ala Ala Leu Phe Leu Leu Ser Val Ser Tyr Ser Ala
    450                 455                 460
Ala Leu Thr Leu Leu Met Val Gln Arg Phe Leu Ser Ala Thr Arg Gln
465                 470                 475                 480
Gly Arg Pro Gln Thr Ser Leu Asp Tyr Thr Asn Val Leu Gln Pro His
                485                 490                 495
Ala
<210>35
<211>339
<212>PRT
<213>智人
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(1)..(98)
<223>CH1
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(99)..(113)
<223>hinge
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(114)..(223)
<223>CH2
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(224)..(339)
<223>CH3
<400>35
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys
 1               5                  10                  15
Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
            20                  25                  30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
        35                  40                  45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
    50                  55                  60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr
65                  70                  75                  80
Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys
                85                  90                  95
Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys
            100                 105                 110
Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro
        115                 120                 125
Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys
    130                 135                 140
Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp
145                 150                 155                 160
Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu
                165                 170                 175
Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu
            180                 185                 190
His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn
        195                 200                 205
Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly
    210                 215                 220
Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu
225                 230                 235                 240
Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr
                245                 250                 255
Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asx Asn Gly Gln Pro Glu
            260                 265                 270
Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe
        275                 280                 285
Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly
    290                 295                 300
Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr
305                 310                 315                 320
Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys Thr His Thr Cys Pro
                325                 330                 335
Pro Cys Pro
<210>36
<211>326
<212>PRT
<213>智人
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(1)..(326)
<223>IgG2重链恒定区
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(1)..(98)
<223>CH1
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(99)..(110)
<223>hinge
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(111)..(219)
<223>CH2
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(220)..(326)
<223>CH3
<400>36
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg
 1               5                  10                  15
Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
            20                  25                  30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
        35                  40                  45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
    50                  55                  60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Asn Phe Gly Thr Gln Thr
65                  70                  75                  80
Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys
                85                  90                  95
Thr Val Glu Arg Lys Cys Cys Val Glu Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro
            100                 105                 110
Pro Val Ala Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp
        115                 120                 125
Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp
    130                 135                 140
Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly
145                 150                 155                 160
Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn
                165                 170                 175
Ser Thr Phe Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Val His Gln Asp Trp
            180                 185                 190
Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro
        195                 200                 205
Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Thr Lys Gly Gln Pro Arg Glu
    210                 215                 220
Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn
225                 230                 235                 240
Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile
                245                 250                 255
Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr
            260                 265                 270
Thr Pro Pro Met Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys
        275                 280                 285
Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys
    290                 295                 300
Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu
305                 310                 315                 320
Ser Leu Ser Pro Gly Lys
                325
<210>37
<211>377
<212>PRT
<213>智人
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(1)..(377)
<223>IgG3重链恒定区
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(1)..(98)
<223>CH1
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(99)..(115)
<223>hinge 1
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(116)..(130)
<223>hinge 2
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(131)..(145)
<223>hinge 3
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(146)..(160)
<223>hinge 4
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(161)..(270)
<223>CH2
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(271)..(377)
<223>CH3
<400>37
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg
 1               5                  10                  15
Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
            20                  25                  30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
        35                  40                  45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
    50                  55                  60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr
65                  70                  75                  80
Tyr Thr Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys
                85                  90                  95
Arg Val Glu Leu Lys Thr Pro Leu Gly Asp Thr Thr His Thr Cys Pro
            100                 105                 110
Arg Cys Pro Glu Pro Lys Ser Cys Asp Thr Pro Pro Pro Cys Pro Arg
        115                 120                 125
Cys Pro Glu Pro Lys Ser Cys Asp Thr Pro Pro Pro Cys Pro Arg Cys
    130                 135                 140
Pro Glu Pro Lys Ser Cys Asp Thr Pro Pro Pro Cys Pro Arg Cys Pro
145                 150                 155                 160
Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys
                165                 170                 175
Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val
            180                 185                 190
Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe Lys Trp Tyr
        195                 200                 205
Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu
    210                 215                 220
Gln Tyr Asn Ser Thr Phe Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His
225                 230                 235                 240
Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys
                245                 250                 255
Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Thr Lys Gly Gln
            260                 265                 270
Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met
        275                 280                 285
Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro
    290                 295                 300
Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Ser Gly Gln Pro Glu Asn Asn
305                 310                 315                 320
Tyr Asn Thr Thr Pro Pro Met Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu
                325                 330                 335
Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Ile
            340                 345                 350
Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn Arg Phe Thr Gln
        355                 360                 365
Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
    370                 375
<210>38
<211>327
<212>PRT
<213>智人
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(1)..(327)
<223>IgG4重链恒定区
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(1)..(98)
<223>CH1
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(99)..(110)
<223>hinge
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(111)..(220)
<223>CH2
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(221)..(327)
<223>CH3
<400>38
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg
 1               5                  10                  15
Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
            20                  25                  30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
        35                  40                  45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
    50                  55                  60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Lys Thr
65                  70                  75                  80
Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys
                85                  90                  95
Arg Val Glu Ser Lys Tyr Gly Pro Pro Cys Pro Ser Cys Pro Ala Pro
            100                 105                 110
Glu Phe Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys
        115                 120                 125
Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val
    130                 135                 140
Asp Val Ser Gln Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp
145                 150                 155                 160
Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe
                165                 170                 175
Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp
            180                 185                 190
Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu
        195                 200                 205
Pro Ser Ser Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg
    210                 215                 220
Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Gln Glu Glu Met Thr Lys
225                 230                 235                 240
Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp
                245                 250                 255
Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys
            260                 265                 270
Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser
        275                 280                 285
Arg Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Glu Gly Asn Val Phe Ser
    290                 295                 300
Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser
305                 310                 315                 320
Leu Ser Leu Ser Leu Gly Lys
                325
<210>39
<211>476
<212>PRT
<213>智人
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(1)..(476)
<223>IgM重链恒定区
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(1)..(104)
<223>CH1
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(105)..(217)
<223>CH2
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(218)..(323)
<223>CH3
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(324)..(476)
<223>CH4
<400>39
Gly Ser Ala Ser Ala Pro Thr Leu Phe Pro Leu Val Ser Cys Glu Asn
 1               5                  10                  15
Ser Pro Ser Asp Thr Ser Ser Val Ala Val Gly Cys Leu Ala Gln Asp
            20                  25                  30
Phe Leu Pro Asp Ser Ile Thr Phe Ser Trp Lys Tyr Lys Asn Asn Ser
        35                  40                  45
Asp Ile Ser Ser Thr Arg Gly Phe Pro Ser Val Leu Arg Gly Gly Lys
    50                  55                  60
Tyr Ala Ala Thr Ser Gln Val Leu Leu Pro Ser Lys Asp Val Met Gln
65                  70                  75                  80
Gly Thr Asp Glu His Val Val Cys Lys Val Gln His Pro Asn Gly Asn
                85                  90                  95
Lys Glu Lys Asn Val Pro Leu Pro Val Ile Ala Glu Leu Pro Pro Lys
            100                 105                 110
Val Ser Val Phe Val Pro Pro Arg Asp Gly Phe Phe Gly Asn Pro Arg
        115                 120                 125
Ser Lys Ser Lys Leu Ile Cys Gln Ala Thr Gly Phe Ser Pro Arg Gln
    130                 135                 140
Ile Gln Val Ser Trp Leu Arg Glu Gly Lys Gln Val Gly Ser Gly Val
145                 150                 155                 160
Thr Thr Asp Gln Val Gln Ala Glu Ala Lys Glu Ser Gly Pro Thr Thr
                165                 170                 175
Tyr Lys Val Thr Ser Thr Leu Thr Ile Lys GIu Ser Asp Trp Leu Ser
            180                 185                 190
Gln Ser Met Phe Thr Cys Arg Val Asp His Arg Gly Leu Thr Phe Gln
        195                 200                 205
Gln Asn Ala Ser Ser Met Cys Val Pro Asp Gln Asp Thr Ala Ile Arg
    210                 215                 220
Val Phe Ala Ile Pro Pro Ser Phe Ala Ser Ile Phe Leu Thr Lys Ser
225                 230                 235                 240
Thr Lys Leu Thr Cys Leu Val Thr Asp Leu Thr Thr Tyr Asp Ser Val
                245                 250                 255
Thr Ile Ser Trp Thr Arg Gln Asn Gly Glu Ala Val Lys Thr His Thr
            260                 265                 270
Asn Ile Ser Glu Ser His Pro Asn Ala Thr Phe Ser Ala Val Gly Glu
        275                 280                 285
Ala Ser Ile Cys Glu Asp Asp Trp Asn Ser Gly Glu Arg Phe Thr Cys
    290                 295                 300
Thr Val Thr His Thr Asp Leu Pro Ser Pro Leu Lys Gln Thr Ile Ser
305                 310                 315                 320
Arg Pro Lys Gly Val Ala Leu His Arg Pro Asp Val Tyr Leu Leu Pro
                325                 330                 335
Pro Ala Arg Glu Gln Leu Asn Leu Arg Glu Ser Ala Thr Ile Thr Cys
            340                 345                 350
Leu Val Thr Gly Phe Ser Pro Ala Asp Val Phe Val Gln Trp Gln Met
        355                 360                 365
Gln Arg Gly Gln Pro Leu Ser Pro Glu Lys Tyr Val Thr Ser Ala Pro
    370                 375                 380
Met Pro Glu Pro Gln Ala Pro Gly Arg Tyr Phe Ala His Ser Ile Leu
385                 390                 395                 400
Thr Val Ser Glu Glu Glu Trp Asn Thr Gly Glu Thr Tyr Thr Cys Val
                405                 410                 415
Val Ala His Glu Ala Leu Pro Asn Arg Val Thr Glu Arg Thr Val Asp
            420                 425                 430
Lys Ser Thr Gly Lys Pro Thr Ser Ala Asp Glu Glu Gly Phe Glu Asn
        435                 440                 445
Leu Trp Ala Thr Ala Ser Thr Phe Ile Val Leu Tyr Asn Val Ser Leu
    450                 455                 460
Val Met Ser Asp Thr Ala Gly Thr Cys Tyr Val Lys
465                 470                 475
<210>40
<211>107
<212>PRT
<213>智人
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(1)..(107)
<223>轻链k恒定区(IgKc)
<400>40
Arg Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu
 1               5                  10                  15
Gln Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe
            20                  25                  30
Tyr Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln
        35                  40                  45
Ser Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser
    50                  55                  60
Thr Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu
65                  70                  75                  80
Lys His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser
                85                  90                  95
Pro Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys
            100                 105
<210>41
<211>107
<212>PRT
<213>智人
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(1)..(107)
<223>轻链λ恒定区(Igλ)
<400>41
Gly Gln Pro Lys Ala Ala Pro Ser Val Thr Leu Phe Pro Pro Ser Ser
 1               5                  10                  15
Glu Glu Leu Gln Ala Asn Lys Ala Thr Leu Val Cys Leu Ile Ser Asp
            20                  25                  30
Phe Tyr Pro Gly Ala Val Thr Val Ala Trp Lys Ala Asp Ser Ser Pro
        35                  40                  45
Val Lys Ala Gly Val Glu Thr Thr Thr Pro Ser Lys Gln Ser Asn Asn
    50                  55                  60
Lys Tyr Ala Ala Ser Ser Tyr Leu Ser Leu Thr Pro Glu Gln Trp Lys
65                  70                  75                  80
Ser His Arg Lys Ser Tyr Ser Cys Gln Val Thr His Glu Gly Ser Thr
                85                  90                  95
Val Glu Lys Thr Val Ala Pro Thr Glu Cys Ser
            100                 105
<210>42
<211>10
<212>PRT
<213>智人
<400>42
Gly Tyr Thr Phe Ser Thr Ser Trp Ile Glu
 1               5                  10
<210>43
<211>17
<212>PRT
<213>智人
<400>43
Glu Val Leu Pro Gly Ser Gly Lys Ser Asn His Asn Ala Asn Phe Lys
 1               5                  10                  15
Gly
<210>44
<211>10
<212>PRT
<213>智人
<400>44
Glu Gly Ser Asn Asn Asn Ala Leu Ala Tyr
 1               5                  10
<210>45
<211>10
<212>PRT
<213>智人
<400>45
Ser Ala Ser Ser Ser Val Ser Tyr Met His
 1               5                  10
<210>46
<211>7
<212>PRT
<213>智人
<400>46
Asp Ser Ser Arg Leu Ala Ser
 1               5
<210>47
<211>8
<212>PRT
<213>智人
<400>47
Gln Asn Trp Arg Ser Ser Pro Thr
 1               5
<210>48A
<211>119
<212>PRT
<213>智人
<400>48A
Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala
 1               5                  10                  15
Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Ser Thr Ser
            20                  25                  30
Trp Ile Glu Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met
        35                  40                  45
Gly Glu Val Leu Pro Gly Ser Gly Lys Ser Asn His Asn Ala Asn Phe
    50                  55                  60
Lys Gly Arg Val Thr Met Thr Arg Asp Thr Ser Ile Ser Thr Ala Tyr
65                  70                  75                  80
Met Glu Leu Ser Arg Leu Arg Ser Asp Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
                85                  90                  95
Ala Arg Glu Gly Ser Asn Asn Asn Ala Leu Ala Tyr Trp Gly Gln Gly
            100                 105                 110
Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
        115
<210>48B
<211>119
<212>PRT
<213>智人
<400>48B
Gln Met Gln Leu Val Gln Ser Gly Pro Glu Val Lys Lys Pro Gly Thr
 1               5                  10                  15
Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Ser Thr Ser
            20                  25                  30
Trp Ile Glu Trp Val Arg Gln Ala Arg Gly Gln Arg Leu Glu Trp Ile
        35                  40                  45
Gly Glu Val Leu Pro Gly Ser Gly Lys Ser Asn His Asn Ala Asn Phe
    50                  55                  60
Lys Gly Arg Val Thr Ile Thr Arg Asp Met Ser Thr Ser Thr Ala Tyr
65                  70                  75                  80
Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
                85                  90                  95
Ala Ala Glu Gly Ser Asn Asn Asn Ala Leu Ala Tyr Trp Gly Gln Gly
            100                 105                 110
Thr Met Val Thr Val Ser Ser
        115
<210>48C
<211>119
<212>PRT
<213>智人
<400>48C
Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ser Glu Leu Lys Lys Pro Gly Ala
 1               5                  10                  15
Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Ser Thr Ser
            20                  25                  30
Trp Ile Glu Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met
        35                  40                  45
Gly Glu Val Leu Pro Gly Ser Gly Lys Ser Asn His Asn Ala Ash Phe
    50                  55                  60
Lys Gly Arg Phe Val Phe Ser Leu Asp Thr Ser Val Ser Thr Ala Tyr
65                  70                  75                  80
Leu Gln Ile Cys Ser Leu Lys Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
                85                  90                  95
Ala Arg Glu Gly Ser Asn Asn Asn Ala Leu Ala Tyr Trp Gly Gln Gly
            100                 105                 110
Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
        115
<210>48D
<211>119
<212>PRT
<213>智人
<400>48D
Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ser
 1               5                  10                  15
Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Ser Thr Ser
            20                  25                  30
Trp Ile Glu Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met
        35                  40                  45
Gly Glu Val Leu Pro Gly Ser Gly Lys Ser Asn His Asn Ala Asn Phe
    50                  55                  60
Lys Gly Arg Val Thr Ile Thr Ala Asp Lys Ser Thr Ser Thr Ala Tyr
65                  70                  75                  80
Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
                85                  90                  95
Ala Arg Glu Gly Ser Asn Asn Asn Ala Leu Ala Tyr Trp Gly Gln Gly
            100                 105                 110
Thr Met Val Thr Val Ser Ser
        115
<210>48E
<211>119
<212>PRT
<213>智人
<400>48E
Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala
 1               5                  10                  15
Thr Val Lys Ile Ser Cys Lys Val Ser Gly Tyr Thr Phe Ser Thr Ser
            20                  25                  30
Trp Ile Glu Trp Val Gln Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Met
        35                  40                  45
Gly Glu Val Leu Pro Gly Ser Gly Lys Ser Asn His Asn Ala Asn Phe
    50                  55                  60
Lys Gly Arg Val Thr Ile Thr Ala Asp Thr Ser Thr Asp Thr Ala Tyr
65                  70                  75                  80
Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
                85                  90                  95
Ala Thr Glu Gly Ser Asn Asn Asn Ala Leu Ala Tyr Trp Gly Gln Gly
            100                 105                 110
Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
        115
<210>48F
<211>119
<212>PRT
<213>智人
<400>48F
Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Glu
 1               5                  10                  15
Ser Leu Lys Ile Ser Cys Lys Gly Ser Gly Tyr Thr Phe Ser Thr Ser
            20                  25                  30
Trp Ile Glu Trp Val Arg Gln Met Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Met
        35                  40                  45
Gly Glu Val Leu Pro Gly Ser Gly Lys Ser Asn His Asn Ala Asn Phe
    50                  55                  60
Lys Gly Gln Val Thr Ile Ser Ala Asp Lys Ser Ile Ser Thr Ala Tyr
65                  70                  75                  80
Leu Gln Trp Ser Ser Leu Lys Ala Ser Asp Thr Ala Met Tyr Tyr Cys
                85                  90                  95
Ala Arg Glu Gly Ser Asn Asn Asn Ala Leu Ala Tyr Trp Gly Gln Gly
            100                 105                 110
Thr Met Val Thr Val Ser Ser
        115
<210>48G
<211>119
<212>PRT
<213>智人
<400>48G
Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Glu
 1               5                  10                  15
Ser Leu Arg Ile Ser Cys Lys Gly Ser Gly Tyr Thr Phe Ser Thr Ser
            20                  25                  30
Trp Ile Glu Trp Val Arg Gln Met Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Met
        35                  40                  45
Gly Glu Val Leu Pro Gly Ser Gly Lys Ser Asn His Asn Ala Asn Phe
    50                  55                  60
Lys Gly His Val Thr Ile Ser Ala Asp Lys Ser Ile Ser Thr Ala Tyr
65                  70                  75                  80
Leu Gln Trp Ser Ser Leu Lys Ala Ser Asp Thr Ala Met Tyr Tyr Cys
                85                  90                  95
Ala Arg Glu Gly Ser Asn Asn Asn Ala Leu Ala Tyr Trp Gly Gln Gly
            100                 105                 110
Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
        115
<210>48H
<211>119
<212>PRT
<213>智人
<400>48H
Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala
 1               5                  10                  15
Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Ser Thr Ser
            20                  25                  30
Trp Ile Glu Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met
        35                  40                  45
Gly Glu Val Leu Pro Gly Ser Gly Lys Ser Asn His Asn Ala Asn Phe
    50                  55                  60
Lys Gly Arg Val Thr Met Thr Thr Asp Thr Ser Thr Ser Thr Ala Tyr
65                  70                  75                  80
Met Glu Leu Arg Ser Leu Arg Ser Asp Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
                85                  90                  95
Ala Arg Glu Gly Ser Asn Asn Asn Ala Leu Ala Tyr Trp Gly Gln Gly
            100                 105                 110
Thr Met Val Thr Val Ser Ser
        115
<210>48I
<211>119
<212>PRT
<213>智人
CENT02125重链可变区序列I
共有序列，属
Xaa1选自Q或E
Xaa9选自A、P或S
Xaa11选自V或L
Xaa16选自A，T，S或E
Xaa17选自S或T
Xaa18选自V或L
Xaa19选自K或R
Xaa20选自V或I
Xaa24选自A，V或G
Xaa38选自R或Q
Xaa40选自A或M
Xaa43选自Q或K
Xaa44选自G或R
Xaa48为M或I
Xaa67为R，Q或H
Xaa68为V或F
Xaa69为V或T
Xaa70为F，I或M
Xaa71为T或S
Xaa72为R，L，A或T
Xaa73为T，M或K
Xaa75为S或T
Xaa76为I，T或V
Xaa77为S或D
Xaa81为M或L
Xaa82为E或Q
Xaa83为L或I
Xaa84为L，W或I
Xaa85为S，C或R
Xaa87为R或K
Xaa88为S或A
Xaa89为D，S或E
Xaa93为V或M
Xaa114为M或L
<400>48I
Xaa Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Xaa Glu Xaa Lys Lys Pro Gly Xaa
 1               5                  10                  15
Xaa Xaa Xaa Xaa Ser Cys Lys Xaa Ser Gly Tyr Thr Phe Ser Thr Ser
            20                  25                  30
Trp Ile Glu Trp Val Xaa Gln Xaa Pro Gly Xaa Xaa Leu Glu Trp Xaa
        35                  40                  45
Gly Glu Val Leu Pro Gly Ser Gly Lys Ser Asn His Asn Ala Asn Phe
    50                  55                  60
Lys Gly Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Thr Xaa Xaa Xaa Thr Ala Tyr
65                  70                  75                  80
Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Leu Xaa Xaa Xaa Asp Thr Ala Xaa Tyr Tyr Cys
                85                  90                  95
Ala Xaa Glu Gly Ser Asn Asn Asn Ala Leu Ala Tyr Trp Gly Gln Gly
            100                 105                 110
Thr Xaa Val Thr Val Ser Ser
        115
<210>49A
<211>105
<212>PRT
<213>智人
<400>49A
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser AIa Ser Val Gly
 1              5                  10                  15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Ser Ala Ser Ser Ser Val Ser Tyr Met
            20                  25                  30
His Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile Tyr
        35                  40                  45
Asp Ser Ser Arg Leu Ala Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser
    50                  55                  60
Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro Glu
657                  0                  75                  80
Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Asn Trp Arg Ser Ser Pro Thr Phe
                85                  90                  95
Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys
            100                 105
<210>49B
<211>105
<212>PRT
<213>智人
<400>49B
Ala Ile Arg Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Phe Ser Ala Ser Thr Gly
 1               5                  10                  15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Ser Ala Ser Ser Ser Val Ser Tyr Met
            20                  25                  30
His Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile Tyr
        35                  40                  45
Asp Ser Ser Arg Leu Ala Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser
    50                  55                  60
Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Cys Leu Gln Ser Glu
65                  70                  75                  80
Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Asn Trp Arg Ser Ser Pro Thr Phe
                85                  90                  95
Gly Gln Gly Thr Arg Leu Glu Ile Lys
            100                 105
<210>49C
<211>105
<212>PRT
<213>智人
<400>49C
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
 1               5                  10                  15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Ser Ala Ser Ser Ser Val Ser Tyr Met
            20                  25                  30
His Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Val Pro Lys Leu Leu Ile Tyr
        35                  40                  45
Asp Ser Ser Arg Leu Ala Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser
    50                  55                  60
Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro Glu
65                  70                  75                  80
Asp Val Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Asn Trp Arg Ser Ser Pro Thr Phe
                85                  90                  95
Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys
            100                 105
<210>49D
<211>105
<212>PRT
<213>智人
<400>49D
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
 1               5                  10                  15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Ser Ala Ser Ser Ser Val Ser Tyr Met
            20                  25                  30
His Trp Phe Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Ser Leu Ile Tyr
        35                  40                  45
Asp Ser Ser Arg Leu Ala Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser
    50                  55                  60
Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro Glu
65                  70                  75                  80
Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Asn Trp Arg Ser Ser Pro Thr Phe
                85                  90                  95
Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys
            100                 105
<210>49E
<211>105
<212>PRT
<213>智人
<400>49E
Ala Ile Arg Met Thr Gln Ser Pro Phe Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
 1               5                  10                  15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Ser Ala Ser Ser Ser Val Ser Tyr Met
            20                  25                  30
His Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Ala Lys Ala Pro Lys Leu Phe Ile Tyr
        35                  40                  45
Asp Ser Ser Arg Leu Ala Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser
    50                  55                  60
Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro Glu
65                  70                  75                  80
Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Asn Trp Arg Ser Ser Pro Thr Phe
                85                  90                  95
Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys
            100                 105
<210>49F
<211>105
<212>PRT
<213>智人
<400>49F
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
 1               5                  10                  15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Ser Ala Ser Ser Ser Val Ser Tyr Met
            20                  25                  30
His Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile Tyr
        35                  40                  45
Asp Ser Ser Arg Leu Ala Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser
    50                  55                  60
Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Phe Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro Glu
65                  70                  75                  80
Asp Ile Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Asn Trp Arg Ser Ser Pro Thr Phe
                85                  90                  95
Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys
            100                 105
<210>49G
<211>105
<212>PRT
<213>智人
<400>49G
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
 1               5                  10                  15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Ser Ala Ser Ser Ser Val Ser Tyr Met
            20                  25                  30
His Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile Tyr
        35                  40                  45
Asp Ser Ser Arg Leu Ala Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser
    50                  55                  60
Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Phe Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro Glu
65                  70                  75                  80
Asp Ile Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Asn Trp Arg Ser Ser Pro Thr Phe
                85                  90                  95
Gly Gln Gly Thr Arg Leu Glu Ile Lys
            100                 105
<210>49H
<211>105
<212>PRT
<213>智人
<400>49H
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Thr Leu Ser Ala Ser Val Gly
 1               5                  10                  15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Ser Ala Ser Ser Ser Val Ser Tyr Met
            20                  25                  30
His Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile Tyr
        35                  40                  45
Asp Ser Ser Arg Leu Ala Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser
    50                  55                  60
Gly Ser Gly Thr Glu Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro Asp
65                  70                  75                  80
Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Asn Trp Arg Ser Ser Pro Thr Phe
                85                  90                  95
Gly Gln Gly Thr Arg Leu Glu Ile Lys
            100                 105
<210>49I
<211>105
<212>PRT
<213>智人
<400>49I
Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly
 1               5                  10                  15
Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Ser Ala Ser Ser Ser Val Ser Tyr Met
            20                  25                  30
His Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Leu Ala Pro Arg Leu Leu Ile Tyr
        35                  40                  45
Asp Ser Ser Arg Leu Ala Ser Gly Ile Pro Asp Arg Phe Ser Gly Ser
    50                  55                  60
Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Arg Leu Glu Pro Glu
65                  70                  75                  80
Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Asn Trp Arg Ser Ser Pro Thr Phe
                85                  90                  95
Gly Gln Gly Thr Arg Leu Glu Ile Lys
            100                 105
<210>49J
<211>105
<212>PRT
<213>智人
<400>49J
Ala Ile Gln Leu Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
 1               5                  10                  15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Ser Ala Ser Ser Ser Val Ser Tyr Met
            20                  25                  30
His Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile Tyr
        35                  40                  45
Asp Ser Ser Arg Leu Ala Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser
    50                  55                  60
Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro Glu
65                  70                  75                  80
Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Asn Trp Arg Ser Ser Pro Thr Phe
                85                  90                  95
Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys
            100                 105
<210>49K
<211>105
<212>PRT
<213>智人
<400>49K
Asp Ile Gln Leu Thr Gln Ser Pro Ser Phe Leu Ser Ala Ser Val Gly
 1               5                  10                  15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Ser Ala Ser Ser Ser Val Ser Tyr Met
            20                  25                  30
His Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile Tyr
        35                  40                  45
Asp Ser Ser Arg Leu Ala Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser
    50                  55                  60
Gly Ser Gly Thr Glu Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro Glu
65                  70                  75                  80
Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Asn Trp Arg Ser Ser Pro Thr Phe
                85                  90                  95
Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys
            100                 105
<210>49L
<211>105
<212>PRT
<213>智人
<400>49L
Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly
 1               5                  10                  15
Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Ser Ala Ser Ser Ser Val Ser Tyr Met
            20                  25                  30
His Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu Ile Tyr
        35                  40                  45
Asp Ser Ser Arg Leu Ala Ser Gly Ile Pro Ala Arg Phe Ser Gly Ser
    50                  55                  60
Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Glu Pro Glu
65                  70                  75                  80
Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Asn Trp Arg Ser Ser Pro Thr Phe
                85                  90                  95
Gly Pro Gly Thr Lys Val Asp Ile Lys
            100                 105
<210>49M
<211>105
<212>PRT
<213>智人
CNTO2125人轻链可变区共有序列，属
Xaa1为D，A，或E
Xaa3为Q，R，或V
Xaa4为M，或L
Xaa9为S，A，或F
Xaa10为S，T或F
Xaa11为L或F
Xaa13为A或L
Xaa15为V，T或P
Xaa17为D或E
Xaa19为A或V
Xaa21为I或L
Xaa22为T或S
Xaa35为F或Y
Xaa40为G或A
Xaa41为K或Q
Xaa42为A或V
Xaa44为R或K
Xaa45为L或S
Xaa46为L或F
Xaa57为V或I
Xaa59为A，S或D
Xaa69为D或E
Xaa70为F或Y
Xaa71为L或F
Xaa76为S，R或C
Xaa78为Q或E
Xaa79为P或S
Xaa80为D或E
Xaa81为F，V或I
Xaa82为A或V
Xaa83为T或V
Xaa98为P，G或Q
Xaa101为K或R
Xaa102为V或L
Xaa103为D或E
<400>49M
Xaa Ile Xaa Xaa Thr Gln Ser Pro Xaa Xaa Xaa Ser Xaa Ser Xaa Gly
 1               5                  10                  15
Xaa Arg Xaa Thr Xaa Xaa Cys Ser Ala Ser Ser Ser Val Ser Tyr Met
            20                  25                  30
His Trp Xaa Gln Gln Lys Pro Xaa Xaa Xaa Pro Xaa Xaa Xaa Ile Tyr
        35                  40                  45
Asp Ser Ser Arg Leu Ala Ser Gly Xaa Pro Xaa Arg Phe Ser Gly Ser
    50                  55                  60
Gly Ser Gly Thr Xaa Xaa Xaa Leu Thr Ile Ser Xaa Leu Xaa Xaa Xaa
65                  70                  75                  80
Xaa Xaa Xaa Val Tyr Tyr Cys Xaa Asn Trp Arg Ser Ser Pro Thr Phe
                85                  90                  95
Gly Pro Gly Thr Xaa Xaa Xaa Ile Lys
            100                 105
<210>50
<211>42
<212>PRT
<213>智人
<400>50
Asp Ala Glu Phe Arg His Asp Ser Gly Tyr Glu Val His His Gln Lys
 1               5                  10                  15
Leu Val Phe Phe Ala Glu Asp Val Gly Ser Asn Lys Gly Ala Ile Ile
            20                  25                  30
Gly Leu Met Val Gly Gly Val Val Ile Ala
        35                  40
<210>51
<211>357
<212>DNA
<213>智人
<400>51
caggtgcagc tggtgcagag cggcgccgag gtgaagaagc ccggcgccag cgtgaaggtg 60
agctgcaagg ccagcggcta caccttcagc accagctgga tcgagtgggt gcggcaggcc 120
cccggccagg gcctggagtg gatgggcgag gtgctgcccg gcagcggcaa gagcaaccac 180
aacgccaact tcaagggccg ggtgaccatg acccgggaca ccagcatcag caccgcctac 240
atggagctga gccggctgcg gagcgacgac accgccgtgt actactgcgc ccgggagggc 300
agcaacaaca acgccctggc ctactggggc cagggcaccc tggtgaccgt gagcagc    357
<210>52
<211>315
<212>DNA
<213>智人
<400>52
gacatccaga tgacccagag ccccagcagc ctgagcgcca gcgtgggcga ccgggtgacc 60
atcacctgca gcgccagcag cagcgtgagc tacatgcact ggtaccagca gaagcccggc 120
aaggccccca agctgctgat ctacgacagc agccggctgg ccagcggcgt gcccagccgg 180
ttcagcggca gcggcagcgg caccgacttc accctgacca tcagcagcct gcagcccgag 240
gacttcgcca cctactactg ccagaactgg cggagcagcc ccaccttcgg ccagggcacc 300
aaggtggaga tcaag                                                  315
<210>53
<211>5
<212>PRT
<213>智人
<400>53
Asn Tyr Phe Met His
 1               5
<210>54
<211>17
<212>PRT
<213>智人
<400>54
Glu Ile Ile Pro Thr Ser Gly Arg Ser Asn Tyr Asn Glu Lys Phe Lys
 1               5                  10                  15
Asn
<210>55
<211>12
<212>PRT
<213>智人
<400>55
Gly Gly Ala Tyr Tyr Asp Thr Tyr Pro Phe Ala Tyr
 1               5                  10
<210>56
<211>16
<212>PRT
<213>智人
<400>56
Arg Ser Ser Lys Ser Leu Leu Tyr Lys Asp Gly Lys Thr Tyr Leu Asn
 1               5                  10                  15
<210>57
<211>7
<212>PRT
<213>智人
<400>57
Leu Met Ser Thr Arg Ala Ser
 1               5
<210>58
<21l>9
<212>PRT
<213>智人
<400>58
Gln Gln Leu Thr Asp Tyr Pro Phe Thr
 1               5
<210>59
<211>140
<212>PRT
<213>智人
<400>59
Met Gly Trp Ser Tyr Ile Ile Leu Phe Leu Val Ala Thr Ala Thr Asp
 1               5                  10                  15
Val His Ser Gln Val Gln Leu Gln Gln Pro Gly Ala Glu Leu Val Lys
            20                  25                  30
Pro Gly Ala Ser Val Lys Leu Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe
        35                  40                  45
Ile Asn Tyr Phe Met His Trp Val Lys Gln Arg Pro Gly Gln Gly Leu
    50                  55                  60
Glu Trp Ile Gly Glu Ile Ile Pro Thr Ser Gly Arg Ser Asn Tyr Asn
65                  70                  75                  80
Glu Lys Phe Lys Asn Arg Ala Ala Leu Thr Val Asp Lys Ser Ser Ser
                85                  90                  95
Thr Ala Tyr Met Gln Leu Ser Ser Leu Thr Ser Glu Asp Ser Ala Val
            100                 105                 110
Tyr Tyr Cys Ala Arg Gly Gly Ala Tyr Tyr Asp Thr Tyr Pro Phe Ala
        115                 120                 125
Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ala
    130                 135                 140
<210>60
<211>133
<212>PRT
<213>智人
<400>60
Met Arg Cys Ser Leu Gln Phe Leu Gly Val Leu Met Phe Trp Ile Ser
 1               5                  10                  15
Gly Val Ser Gly Asp Ile Val Leu Thr Gln Asp Glu Leu Ser Asn Pro
            20                  25                  30
Val Ile Ser Gly Gln Ser Val Ser Ile Ser Cys Arg Ser Ser Lys Ser
        35                  40                  45
Leu Leu Tyr Lys Asp Gly Lys Thr Tyr Leu Asn Trp Phe Leu Gln Arg
    50                  55                  60
Pro Gly Gln Ser Pro Gln Leu Leu Ile Tyr Leu Met Ser Thr Arg Ala
65                  70                  75                  80
Ser Gly Val Ser Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe
                85                  90                  95
Thr Leu Glu Ile Ser Arg Val Thr Ala Glu Asp Val Gly Val Tyr Tyr
            100                 105                 110
Cys Gln Gln Leu Thr Asp Tyr Pro Phe Thr Phe Gly Ser Gly Thr Lys
        115                 120                 125
Leu Glu Ile Lys Arg
    130
<210>61
<211>420
<212>DNA
<213>智人
<400>61
atgggatgga gctatatcat cctctttttg gtagcaacag ctacagatgt ccactcccag 60
gtccaattgc agcagcctgg ggctgaactg gtgaagcctg gggcttcagt gaagctgtcc 120
tgcaaggctt ctggctacac cttcatcaac tacttcatgc actgggtgaa gcagaggcct 180
ggacaaggcc ttgagtggat tggggagatt attcctacca gcggtcgttc taactacaat 240
gagaagttca agaacagggc cgcactgact gtagacaaat cctccagcac agcctacatg 300
caactcagca gcctgacatc tgaggactct gcggtctatt actgtgcaag agggggggcc 360
tactatgata cctacccctt tgcttactgg ggccaaggga ctctggtcac tgtctctgca 420
<210>62
<211>399
<212>DNA
<213>智人
<400>62
atgaggtgct ctcttcagtt cctgggggtg cttatgttct ggatctctgg agtcagtggg 60
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ttcacgttcg gctcggggac aaagttggaa ataaaacgg                        399

Claims (25)

1.至少一种分离的人淀粉样蛋白抗体，其包含至少一个包含SEQ IDNO：48A-I和SEQ ID NO：49A-M中至少一者的至少一条重链和至少一条轻链的可变区。
2.至少一种分离的人淀粉样蛋白抗体，其包含(i)SEQ ID NO：42-44中至少一者的重链互补决定区(CDR)氨基酸序列的至少两个；或(ii)SEQ ID NO：45-47中至少一者的轻链CDR氨基酸序列的至少两个，并且还包含至少一个选自CH1、CH2、CH3或CH4的人重链或轻链恒定区片段。
3.至少一种分离的人淀粉样蛋白抗体，其包含至少一个具有SEQ IDNO：48A和SEQ ID NO：I-49A-M中至少一者的氨基酸序列的重链或轻链CDR。
4.至少一种分离的人淀粉样蛋白抗体，其结合的淀粉样蛋白多肽区域与如下的抗体相同：该抗体包含至少一个具有SEQ ID NO：42-47中至少一者的氨基酸序列的重链或轻链CDR，并且还包含至少一个选自CH1、CH2、CH3或CH4的人重链或轻链恒定区片段。
5.至少一种分离的人淀粉样蛋白抗体，其包含至少一个包含SEQ IDNO：48I和49M的至少一条重链和至少一条轻链的可变区，并且还包含至少一个选自CH1、CH2、CH3或CH4的人重链或轻链恒定区片段。
6.根据权利要求1-5任一项所述的淀粉样蛋白抗体，其中所述抗体以至少一种选自以下的亲和力结合淀粉样蛋白：至少10-9M、至少10- 10M、至少10-11M或至少10-12M。
7.根据权利要求1-5任一项所述的淀粉样蛋白抗体，其中所述抗体基本上调节至少一种淀粉样蛋白多肽的至少一种活性。
8.一种分离的核酸，其编码至少一种根据权利要求1-10任一项所述的分离的人淀粉样蛋白抗体。
9.一种分离的核酸载体，其包含根据权利要求8所述的分离的核酸。
10.一种原核宿主细胞或真核宿主细胞，其包含根据权利要求8所述的分离的核酸。
11.根据权利要求8所述的核酸，其中所述核酸选自SEQ ID NO：51-52。
12.一种用于产生至少一种淀粉样蛋白抗体的方法，其包括在使得所述淀粉样蛋白抗体以可检测或可回收的量表达的体外、体内或原位条件下翻译根据权利要求8所述的核酸。
13.一种组合物，其包含至少一种具有至少一个人CDR的根据权利要求1-5任一项所述的分离的人淀粉样蛋白抗体和至少一种可药用载体或稀释剂，其中所述抗体特异性结合至少一个包含SEQ ID NO：50的至少1-3至整个氨基酸序列的表位。
14.根据权利要求13所述的组合物，其还包含至少一种选自以下至少一者的化合物或多肽：可检测标记或报道分子、TNF拮抗剂、抗感染药物、心血管(CV)系统药物、中枢神经系统(CNS)药物、自主神经系统(ANS)药物、呼吸道药物、胃肠(GI)道药物、激素药物、用于体液或电解质平衡的药物、血液学药物、抗肿瘤药物、免疫调节药物、眼用药物、耳用药物或鼻用药物、局部用药物、营养药物、细胞因子或细胞因子拮抗剂。
15.一种抗独特型抗体或片段，其特异性结合至少一种根据权利要求1-5任一项所述的淀粉样蛋白抗体。
16.一种诊断或治疗细胞、组织、器官或动物中的淀粉样蛋白相关状况的方法，包括
(a)使包含有效量的至少一种根据权利要求1-5任一项所述的抗体的组合物与所述细胞、组织、器官或动物接触或将其给予所述细胞、组织、器官或动物。
17.根据权利要求16所述的方法，其中所述有效量为0.001-50mg/千克所述细胞、组织、器官或动物。
18.根据权利要求17所述的方法，其中所述接触或所述给予是通过至少一种选自以下的方式进行：肠胃外、皮下、肌内、静脉内、关节内、支气管内、腹内、囊内、软骨内、腔内、体腔内、小脑内、脑室内、结肠内、颈内、胃内、肝内、心肌内、骨内、骨盆内、心包内、腹膜内、胸膜内、前列腺内、肺内、直肠内、肾内、视网膜内、脊柱内、滑膜内、胸内、子宫内、膀胱内、病灶内、快速浓注、阴道、直肠、口腔、舌下、鼻内或透皮。
19.根据权利要求16所述的方法，其还包括：在所述(a)接触或给予之前、同时或之后，给予至少一种包含有效量的至少一种选自以下至少一者的化合物或多肽的组合物：可检测标记或报道分子、抗感染药物、心血管(CV)系统药物、中枢神经系统(CNS)药物、自主神经系统(ANS)药物、呼吸道药物、胃肠(GI)道药物、激素药物、用于体液或电解质平衡的药物、血液学药物、抗肿瘤药物、免疫调节药物、眼用药物、耳用药物或鼻用药物、局部用药物、营养药物、细胞因子或细胞因子拮抗剂。
20.一种医疗装置，其包含至少一种根据权利要求1-5任一项所述的淀粉样蛋白抗体，其中所述装置适于通过至少一种选自以下的方式接触或给予所述至少一种淀粉样蛋白抗体：肠胃外、皮下、肌内、静脉内、关节内、支气管内、腹内、囊内、软骨内、腔内、体腔内、小脑内、脑室内、结肠内、颈内、胃内、肝内、心肌内、骨内、骨盆内、心包内、腹膜内、胸膜内、前列腺内、肺内、直肠内、肾内、视网膜内、脊柱内、滑膜内、胸内、子宫内、膀胱内、病灶内、快速浓注、阴道、直肠、口腔、舌下、鼻内或透皮。
21.一种用于人医药或诊断用途的制品，其包括包装材料和容器，所述容器包含溶液或冻干形式的至少一种根据权利要求1-5任一项所述的淀粉样蛋白抗体。
22.权利要求21所述的制品，其中所述容器是肠胃外、皮下、肌内、静脉内、关节内、支气管内、腹内、囊内、软骨内、腔内、体腔内、小脑内、脑室内、结肠内、颈内、胃内、肝内、心肌内、骨内、骨盆内、心包内、腹膜内、胸膜内、前列腺内、肺内、直肠内、肾内、视网膜内、脊柱内、滑膜内、胸内、子宫内、膀胱内、病灶内、快速浓注、阴道、直肠、口腔、舌下、鼻内或透皮递送装置或系统的组件。
23.一种用于产生至少一种根据权利要求1-5任一项所述的分离的人淀粉样蛋白抗体的方法，其包括提供能够以可回收的量表达所述抗体的宿主细胞或转基因动物或转基因植物或植物细胞。
24.至少一种淀粉样蛋白抗体，其通过根据权利要求23所述的方法产生。
25.本文描述的任何发明。
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Cited By (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN106344931A (zh) * 2016-08-29 2017-01-25 苏州普罗达生物科技有限公司 一种小分子淀粉样蛋白抗体多肽与雌激素的偶联结合物
CN108704125A (zh) * 2018-06-20 2018-10-26 深圳大学 一种治疗二型糖尿病的疫苗、制备方法及应用
CN110267987A (zh) * 2017-01-27 2019-09-20 微药有限公司 治疗炎性病症的治疗剂
CN110511276A (zh) * 2019-08-13 2019-11-29 王跃驹 植物作为宿主在表达Aducanumab抗体中的应用
CN113138276A (zh) * 2020-01-19 2021-07-20 厦门万泰凯瑞生物技术有限公司 用于检测HBcAg的方法及抗体
CN113178001A (zh) * 2021-04-01 2021-07-27 北京科技大学 面向孔源性视网膜脱离的硅油填充模拟方法及电子设备
CN114650866A (zh) * 2019-09-10 2022-06-21 Ac免疫有限公司 新的用于诊断的分子

Families Citing this family (12)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR101140934B1 (ko) 2010-08-05 2012-05-03 삼성전기주식회사 초음파 영상의 음속도 추정 방법 및 이를 적용한 초음파 진단 장치
US9156917B2 (en) 2011-02-11 2015-10-13 Research Corporation Technologies, Inc. CH2 domain template molecules derived from rational grafting of donor loops onto CH2 scaffolds
AR085302A1 (es) 2011-02-24 2013-09-18 Sanofi Sa Metodo de produccion de anticuerpos sialilados
WO2012123562A1 (en) * 2011-03-16 2012-09-20 Probiodrug Ag Diagnostic antibody assay
CN106456595A (zh) 2014-02-10 2017-02-22 帕塔拉制药有限责任公司 用于系统性病症的肥大细胞稳定剂治疗
CN106535889A (zh) 2014-02-10 2017-03-22 帕塔拉制药有限责任公司 用于治疗肺疾病的肥大细胞稳定剂
WO2017027387A1 (en) 2015-08-07 2017-02-16 Patara Pharma, LLC Methods for the treatment of mast cell related disorders with mast cell stabilizers
US10265296B2 (en) 2015-08-07 2019-04-23 Respivant Sciences Gmbh Methods for the treatment of systemic disorders treatable with mast cell stabilizers, including mast cell related disorders
WO2018044942A1 (en) 2016-08-31 2018-03-08 Patara Pharma, LLC Cromolyn compositions for treatment of chronic cough due to idiopathic pulmonary fibrosis
WO2018067341A1 (en) 2016-10-07 2018-04-12 Patara Pharma, LLC Cromolyn compositions for treatment of pulmonary fibrosis
US20200171128A1 (en) * 2017-05-19 2020-06-04 The Regents Of The University Of Colorado, A Body Corporate Compositions and methods for improving cognition
JP2023506450A (ja) * 2019-12-11 2023-02-16 アンベテックス ピーティーワイ エルティーディー 拡張機能障害の防止及び治療のためのアミロイドベータ抗体又はワクチンを含む療法組成物

Family Cites Families (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US7179892B2 (en) * 2000-12-06 2007-02-20 Neuralab Limited Humanized antibodies that recognize beta amyloid peptide
AR038568A1 (es) * 2002-02-20 2005-01-19 Hoffmann La Roche Anticuerpos anti-a beta y su uso
WO2004029629A1 (en) * 2002-09-27 2004-04-08 Janssen Pharmaceutica N.V. N-11 truncated amyloid-beta nomoclonal antibodies, compositions, methods and uses
EA200501524A1 (ru) * 2003-03-28 2006-06-30 Сентокор, Инк. Антитела против амилоида, композиции, способы и применения
NZ552480A (en) * 2004-07-30 2010-01-29 Rinat Neuroscience Corp Antibodies directed against amyloid-beta peptide and methods of using same
WO2006039470A2 (en) * 2004-09-29 2006-04-13 Centocor, Inc. Anti- amyloid antibodies, compositions, methods and uses

Cited By (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN106344931A (zh) * 2016-08-29 2017-01-25 苏州普罗达生物科技有限公司 一种小分子淀粉样蛋白抗体多肽与雌激素的偶联结合物
CN110267987A (zh) * 2017-01-27 2019-09-20 微药有限公司 治疗炎性病症的治疗剂
CN108704125A (zh) * 2018-06-20 2018-10-26 深圳大学 一种治疗二型糖尿病的疫苗、制备方法及应用
CN110511276A (zh) * 2019-08-13 2019-11-29 王跃驹 植物作为宿主在表达Aducanumab抗体中的应用
CN114650866A (zh) * 2019-09-10 2022-06-21 Ac免疫有限公司 新的用于诊断的分子
CN113138276A (zh) * 2020-01-19 2021-07-20 厦门万泰凯瑞生物技术有限公司 用于检测HBcAg的方法及抗体
CN113178001A (zh) * 2021-04-01 2021-07-27 北京科技大学 面向孔源性视网膜脱离的硅油填充模拟方法及电子设备
CN113178001B (zh) * 2021-04-01 2023-07-04 北京科技大学 面向孔源性视网膜脱离的硅油填充模拟方法及电子设备

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