CN102696881B

CN102696881B - 一种绿色饲料添加剂

Info

Publication number: CN102696881B
Application number: CN 201210143714
Authority: CN
Inventors: 王玉; 苏俊; 其他发明人请求不公开姓名
Original assignee: 邵素英
Current assignee: Beijing Durun Science and Technology Co., Ltd.
Priority date: 2012-05-09
Filing date: 2012-05-09
Publication date: 2013-10-23
Anticipated expiration: 2032-05-09
Also published as: CN102696881A

Abstract

本发明公开了一种绿色饲料添加剂，本发明产品可以有效降低抗生素类药物在饲养动物中的使用量，提高动物肉制品的安全性，提高动物的饲料利用效率，增强动物的免疫力，提高饲养效益。

Description

一种绿色饲料添加剂

技术领域：

本发明属于饲料领域，特别涉及一种绿色饲料添加剂。

背景技术：

牛膝多糖是苋科植物牛膝的根中提取的一种水溶性多糖，水溶性好，易被机体吸收，且具有免疫调节、抗氧化等广泛的生物学功能，被视为替代抗生素的天然绿色添加剂，以牛膝多糖等为代表的绿色饲料添加剂成为今后饲料添加剂的发展方向。本发明饲料添加剂以牛膝多糖等为主要原料，复配而成，是一种替代抗生素类产品的绿色饲料添加剂产品。

发明内容：

本发明提供一种绿色饲料添加剂；所述一种绿色饲料添加剂组成为：

牛膝多糖5-15%，紫苏提取物40-60%，酵母细胞壁提取物15-20%，枯草芽孢杆菌冻干菌粉20-40%；枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）为CGMCC6012，上述比例为质量百分比。

所述紫苏提取物制备方法如下：紫苏子粉碎过40-60目筛后添加紫苏子7-10倍重量无水乙醇浸渍提取，控制温度30-45℃，1-2小时后调整温度为55-60℃2-3小时，提取液浓缩、干燥得到乙醇提取物；乙醇提取后的紫苏子残渣中添加75～85℃热水，热水添加量为紫苏子残渣重量的3-6倍，处理时间30-50分钟，连续提取2-3次，将提取液真空浓缩后喷雾干燥，得到热水提取物；将上述乙醇提取物和热水提取物合并粉碎，过60目筛，即得紫苏提取物。所述牛膝多糖制备方法如下：

川牛膝粉碎后过30-60目筛，添加川牛膝重量3-6倍量70-85℃热水连续提取2-3次，每次30-50分钟；收集提取液，向提取液中添加乙醇使提取液中乙醇浓度达到70-85％，保持2-3小时，收集沉淀60-75℃干燥后粉碎，过40目筛，即得牛膝多糖。

所述枯草芽孢杆菌为枯草芽孢杆菌CGMCC6012，冻干菌粉中活菌数量为2-8*10⁸个/g。

所述植物提取物复合饲料添加剂由以下方法制得：

酵母细胞壁提取物粉碎过50-60目筛，将上述粉碎物与牛膝多糖和紫苏提取物及枯草芽孢杆菌冻干菌粉按照比例混合得到植物提取物复合饲料添加剂。

本发明提供一种饲料生产用枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）菌种，该菌株已经于2012年4月16日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏地址位于北京市朝阳区北辰西路1号院3号，（邮编100101），保藏编号为CGMCC No6012。

有益效果：

酵母细胞壁提取物是以酿酒酵母为原料，经过细胞破壁、酶解、分离提纯和干燥等工艺精制而成的一类真菌提取物，成品通常为浅灰色至深灰色的粉状物。研究证实，酵母细胞壁分为3层：外层为甘露寡糖和蛋白质结合物，中间层为β-(1，3)、β-(1，6)葡聚糖，内层为几丁质。其特殊的构型可与多种霉菌毒素形成特异的互补构造，从而与多种霉菌毒素牢牢的结合，并通过肠道排出动物体外。

药用植物紫苏为唇形科植物紫苏[Perilla frutescens（L.）Brltt．var.arguta Benth．Hand．－Mazz．]的带叶嫩枝。以茎、叶及子实入药。紫苏属于综合交叉商品，既可药用，是临床常用药，又能食用。入药形式以茎称紫梗，叶又称苏叶，解表，子又称苏子、黑苏子、赤苏子，是苏子降气汤的重要成分。散寒解表，理气宽中。主治感冒发热，怕冷，无汗，胸闷，咳嗽，解蟹中毒引起的腹痛，腹泻，呕吐等症。

枯草芽孢杆菌：具有如下功能：1.耗氧产酸，调节肠道微生态平衡，达到预防腹泻、下痢等疾病；2.分泌多种酶类，提高饲料消化利用率；3.产生多种营养素，参与机体新陈代谢；4.提高动物免疫力。

本发明紫苏子进行粉碎破壁处理，使紫苏子中功能因子实现全价溶出和高效提取利用，分别采用有机溶剂和热水实现其中不同功效成分的有效提取，特别是控制温度分段提取更是有效提高了提取收率，提高了紫苏子的提取物的提取效率和质量。

本发明通过科学复配，将枯草芽孢杆菌、紫苏、牛膝多糖实现了有机组合，本发明产品可以有效降低抗生素类药物在饲养动物中的使用数量，提高饲养动物的免疫力，提高动物肉制品的安全性，提高动物的饲料利用效率，减少常规饲养中抗生素及药品的使用，增强动物的抵抗能力，提高饲养效益。

具体实施方法：

下面的实施例可以使本专业技术人员更全面地理解本发明，但不以任何方式限制本发明。菌种筛选方法:

菌种诱变

采取紫外诱变方法：以CICC10023为出发菌株，制成菌悬液，涂布于培养基平皿上，紫外照射90s后37℃培养箱中培养。

菌种筛选

从90s平皿上挑30个长得强壮的单菌落，接种于斜面上，37℃培养箱中，培养24小时，0--4℃冷藏保存；以原始菌种作为对照，采用常规选育条件羧甲基纤维素纳作为碳源和蛋白水解圈方法筛选产纤维素酶和蛋白酶强的菌株，筛选获得产纤维素酶和蛋白酶强的菌株枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）L1，此菌株产纤维素酶能力比原始菌株提高了25%，产蛋白酶能力比原始菌株提高了52%。将该菌种在中国普通微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心保藏，保藏编号为CGMCC No 6012。

培养基组成：蛋白胨5克；牛肉膏3克；氯化钠5克；琼脂20克；蒸馏水1000毫升；PH7.0。本发明中“酵母细胞壁提取物”购自海思特集团公司或其他公司。

实施例1：

10公斤饲料添加剂组成为：

牛膝多糖10%，紫苏提取物50%，酵母细胞壁提取物20%，枯草芽孢杆菌冻干菌粉30%，枯草芽孢杆菌为CGMCC6012，上述比例为质量百分比。

所述紫苏提取物制备方法如下：紫苏子粉碎过50目筛后添加紫苏子8倍重量无水乙醇浸渍提取，温度40℃2小时，后调整温度为58℃时间2小时，提取液真空浓缩、干燥得到乙醇提取物；乙醇提取后的紫苏子残渣中添加80℃热水，热水添加量为紫苏子残渣重量的5倍，处理时间40分钟，连续提取2次，将提取液真空浓缩后喷雾干燥，得到热水提取物；将上述乙醇提取物和热水提取物合并粉碎，过60目筛，即得紫苏提取物；

所述牛膝多糖制备方法如下：

川牛膝粉碎后过40目筛，添加川牛膝重量4倍量80℃热水连续提取2次，每次40分钟；收集提取液，向提取液中添加乙醇使提取液中乙醇浓度达到75％，控制温度在25℃保持2小时，收集沉淀75℃干燥后粉碎，过40目筛，即得牛膝多糖；

所述枯草芽孢杆菌为枯草芽孢杆菌为CGMCC6012冻干菌粉，活菌数量为5*10⁸个/g；

所述植物提取物复合饲料添加剂由以下方法制得：

酵母细胞壁提取物粉碎过60目筛，将上述粉碎物与牛膝多糖和紫苏提取物及枯草芽孢杆菌冻干菌粉按照比例混合混合得到植物提取物复合饲料添加剂。

本产品所用枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis）菌种，该菌株已经于2012年4月16日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏地址位于北京市朝阳区北辰西路1号院3号，（邮编100101），保藏编号为CGMCC No6012。

枯草芽孢杆菌菌剂的制备：

1.发酵液的获得：采用斜面菌种逐级扩培获得枯草芽孢杆菌发酵液；

（1）一级种子培养：将枯草芽孢杆菌CGMCC6012斜面菌种接入500毫升摇瓶中，培养基装量100毫升，旋转式摇床180转/分，培养温度30℃，培养时间24小时；

（2）二级种子培养：将一级种子按照10%的接种量接入500毫升二级种子摇瓶中，培养条件与一级种子相同；

（3）三级种子培养：将二级种子以10%接种量接入5000毫升三级种子摇瓶中，培养基装量1000毫升，旋转式摇床100转/分，培养温度30℃，培养时间24小时；

（4）一级种子罐培养：将三级种子以10%接种量接入总容积为150L的一级种子罐，发酵培养基装量100L，培养温度28℃，搅拌速度100转/分，通风量（V/V）1:0.5,罐压0.05Mpa,培养时间24小时；

（5）发酵培养：将一级种子罐菌种以10%接种量接入总容积为1.5吨二级种子罐，发酵培养基装量1吨，培养条件培养温度28℃，搅拌速度100转/分，通风量（V/V）1:0.5,罐压0.05Mpa,培养时间24小时,培养结束菌浓度在11×10⁸个/ml。

（6）离心分离：采用离心机分离获得菌体。

（7）真空冷冻干燥：添加保护剂后采用喷雾干燥工艺处理获得干粉菌剂；保护剂组成为脱脂奶10%、乳糖5%、甘油5%。真空冷冻干燥工艺参见中国科学院微生物研究所编著菌种保藏手册，1980年出版.第610-653.

培养基组成：蛋白胨5克；牛肉膏3克；氯化钠5克；琼脂20克；蒸馏水1000毫升；PH7.0。

产品使用效果

本发明例1饲料添加剂使用效果试验

试验方法：

选择东莞市双胞胎饲料有限公司下属猪场，选择日龄、体重相近的健康母猪、仔猪和公猪各50头，均随机分成2组（试验组和对照组），试验组使用本发明产品，对照组不添加本发明产品；本发明产品的添加量为饲料用量的1-2%，连续饲喂60天。与对照组相比，使用发明饲料添加剂可获得如下效果：

(1)母猪产仔数平均增加0.6头；

(2)公猪精子数增加20%～24%，提高受胎率；

(3)分娩前后，母猪便秘次数减少34%以上；

(4)断奶仔猪体重平均从5.4kg增加至6.3kg，比对照组体重平均增加11%；

(5)仔猪期抗生素使用量减少了83-95%；

上述结果表明本发明产品可改善母猪、仔猪和公猪机体免疫能力，减少抗生素用量，增加养殖质量和效益。

实施例2：实施方法基本同例1；

10公斤饲料添加剂组成为：

牛膝多糖5%，紫苏提取物55%，酵母细胞壁提取物15%，枯草芽孢杆菌冻干菌粉25%，枯草芽孢杆菌为CGMCC6012，上述比例为质量百分比。

实施例3：实施方法基本同例1；

10公斤饲料添加剂组成为：

牛膝多糖15%，紫苏提取物40%，酵母细胞壁提取物20%，枯草芽孢杆菌冻干菌粉25%，枯草芽孢杆菌为CGMCC6012，上述比例为质量百分比。

实施例4：实施方法基本同例1；

10公斤饲料添加剂组成为：

牛膝多糖5%，紫苏提取物40%，酵母细胞壁提取物15%，枯草芽孢杆菌冻干菌粉40%，枯草芽孢杆菌为CGMCC6012，上述比例为质量百分比。

Claims

1.一种绿色饲料添加剂，其特征在于组成为：牛膝多糖5-15%，紫苏提取物40-60%，酵母细胞壁提取物15-20%，枯草芽孢杆菌冻干菌粉20-40%；枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）为CGMCC6012，上述比例为质量百分比，所述紫苏提取物制备方法如下：紫苏子粉碎过40-60目筛后添加紫苏子7-10倍重量无水乙醇浸渍提取，温度30-45℃1-2小时后调整温度为55-60℃2-3小时，提取液浓缩、干燥得到乙醇提取物；乙醇提取后的紫苏子残渣中添加75～85℃热水，热水添加量为紫苏子残渣重量的3-6倍，处理时间30-50分钟，连续提取2-3次，将提取液真空浓缩后喷雾干燥，得到热水提取物；将上述乙醇提取物和热水提取物合并粉碎，过60目筛，即得紫苏提取物；所述牛膝多糖制备方法为川牛膝粉碎后过30-60目筛，添加川牛膝重量3-6倍量70-85℃热水连续提取2-3次，每次30-50分钟；收集提取液，向提取液中添加乙醇使提取液中乙醇浓度达到70-85％，保持2-3小时，收集沉淀60-75℃干燥后粉碎，过40目筛，即得牛膝多糖。

2.根据权利要求1所述绿色饲料添加剂，其特征在于所述枯草芽孢杆菌CGMCC6012冻干菌粉活菌数量为2×10⁸-8×10⁸个/g。

3.根据权利要求2所述绿色饲料添加剂，其特征在于所述枯草芽孢杆菌CGMCC6012冻干菌粉活菌数量为5×10⁸个/g。

4.根据权利要求1所述绿色饲料添加剂，其特征在于添加剂组成为：牛膝多糖5%，紫苏提取物40%，酵母细胞壁提取物15%，枯草芽孢杆菌冻干菌粉40%，枯草芽孢杆菌为CGMCC6012，上述比例为质量百分比。