发明内容
本发明的一个实施方案提供了一种组合,其含有:
(i)结构(I)的化合物:
或其可药用盐,和
(ii)结构(II)的化合物:
或其可药用盐。
本发明的一个实施方案提供了一种治疗需要的人中的癌症的方法,其包括向该人体内给药治疗有效量的N-{3-[5-(2-氨基-4-嘧啶基)-2-(1,1-二甲基乙基)-1,3-噻唑-4-基]-2-氟苯基}-2,6-二氟苯磺酰胺或其可药用盐(适当地为其甲磺酸盐)和N-{(1S)-2-氨基-1-[(3-氟苯基)甲基]乙基}-5-氯-4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺或其可药用盐(适当地为其盐酸盐)的组合。
本发明的一个实施方案提供了一种治疗需要的人中癌症的方法,其包括向该人体内给药治疗有效量的N-{3-[5-(2-氨基-4-嘧啶基)-2-(1,1-二甲基乙基)-1,3-噻唑-4-基]-2-氟苯基}-2,6-二氟苯磺酰胺或其可药用盐(适当地为其甲磺酸盐)和N-{(1S)-2-氨基-1-[(3-氟苯基)甲基]乙基}-5-氯-4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺或其可药用盐(适当地为其盐酸盐)的组合,
其中所述组合在规定的期间内给药,和
其中所述组合给药一段持续时间。
本发明的一个实施方案提供了一种治疗需要的人中的癌症的方法,其包括向该人体内给药治疗有效量的N-{3-[5-(2-氨基-4-嘧啶基)-2-(1,1-二甲基乙基)-1,3-噻唑-4-基]-2-氟苯基}-2,6-二氟苯磺酰胺或其可药用盐(适当地为其甲磺酸盐)和N-{(1S)-2-氨基-1-[(3-氟苯基)甲基]乙基}-5-氯-4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺或其可药用盐(适当地为其盐酸盐)的组合,
其中顺序给药所述组合中的各化合物。
发明详述
本发明涉及显示抗增殖活性的组合。适当地,该方法涉及通过共同给药下列化合物治疗癌症的方法:N-{3-[5-(2-氨基-4-嘧啶基)-2-(1,1-二甲基乙基)-1,3-噻唑-4-基]-2-氟苯基}-2,6-二氟苯磺酰胺、或其可药用盐(适当地为其甲磺酸盐)(下文称为化合物A或其可药用盐,适当地为其甲磺酸盐,
该化合物由结构I表示:
和N-{(1S)-2-氨基-1-[(3-氟苯基)甲基]乙基}-5-氯-4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺或其可药用盐(适当地为其盐酸盐)(下文称为化合物B或其可药用盐,适当地为其盐酸盐
该化合物由结构II表示:
在国际申请PCT/US2009/042682号(国际申请日2009年5月4日;国际公开WO 2009/137391号,国际公开日2009年11月12日)中公开并要求保护化合物A及其可药用盐,它们特别在癌症治疗中用作B-Raf活性的抑制剂,该文献的全文公开在此引入作为参考,化合物A为实施例58的化合物。化合物A可以根据国际申请PCT/US2009/042682号中的说明制备。
合适地,化合物A呈甲磺酸盐的形式。本领域技术人员可以根据国际申请PCT/US2009/042682号(国际申请日2009年5月4日)中的说明制备该盐形式。
在国际申请PCT/US2008/053269号(国际申请日2008年2月7日;国际公开号WO 2008/098104,国际公开日2008年8月14日)中公开并要求保护化合物B及其可药用盐,它们特别在癌症治疗中用作AKT活性的抑制剂,该文献的全文公开在此引入作为参考,化合物B为实施例96的化合物。化合物B可以根据在国际申请PCT/US2008/053269号中的说明制备。
合适地,化合物B呈盐酸盐的形式。本领域技术人员可以根据2009年1月30日提交的美国临时申请61/148490号中的说明制备该盐形式。
给药治疗有效量的本发明的组合相对于单个的组分化合物是有利的,因为与单独给药治疗有效量的的组分化合物相比,该组合将会提供一个或多个下列改进的性质:i)与活性最大的单个药物(agent)相比有更高的抗癌作用,ii)协同的或高度协同的抗癌活性,iii)提供增强的抗癌活性和减少的副作用的给药方案,iv)毒性作用减少,v)治疗窗口增加,或者vi)组分化合物中的一个或两者的生物利用度增加。
本发明的各化合物可以含有一个或多个手性原子,或者可以以两个对映异构体存在。因此,本发明的化合物包括对映异构体的混合物以及纯化的对映异构体或对映异构体富集的混合物。还应当理解所有的互变异构体和互变异构体的混合物均包括在化合物A和其可药用盐以及化合物B和其可药用盐的范围内。
本发明的化合物可以形成溶剂化物,其可以理解为由溶质(在本发明中,化合物A或其盐和/或化合物B或其盐)和溶剂形成的各种化学计量的复合物。用于本发明目的的这些溶剂不可以干扰溶质的生物学活性。合适溶剂的实例包括但不限于:水、甲醇、二甲基亚砜、乙醇和乙酸。适当地,所使用的溶剂为可药用的溶剂。适当地,所用的溶剂为水。
本领域技术人员可以容易地制备本发明化合物的可药用盐。
本发明还包括使用本发明的组合治疗癌症的方法,其中给药以前药形式的化合物A或其可药用盐和/或化合物B或其可药用盐。本领域技术人员可以容易地制备本发明化合物的可药用前药。
当涉及给药方案(dosing protocol)时,术语“天”、“每天”等是指日历上一天内的时间,其从子夜开始,结束于下一个子夜。
如本文所使用的,术语“治疗”及其相关表述表示治疗性治疗。当涉及具体的病症时,治疗表示:(1)改善或预防该病症的一个或多个生物学表现的状况,(2)干扰(a)引起或响应于该病症的生物学级联中的一个或多个点,或(b)该病症的一个或多个生物学表现,(3)减轻与该病症或其治疗相关联的一个或多个症状、作用或副作用,或者(4)减缓该病症的进展,或者减缓该病症的一个或多个生物学表现。由此,也包括了预防性治疗。本领域技术人员将会理解“预防”不是绝对的术语。在医学中,将“预防”理解为预防性给药以基本上减少病症或其生物学表现的可能性或严重性,或者以延缓这种病症或其生物学表现的开始。例如,当受治疗者被认为处于患癌症的高风险时,例如当受治疗者具有强大的癌症家族史时或者当受治疗者已经暴露于致癌物质时,预防性治疗是合适的。
如本文所使用的,术语“有效量”表示产生例如研究者或临床医师所寻求的组织、系统、动物或人的生物学或药学响应的药物或药用制剂的量。此外,术语“治疗有效量”表示,与没有接受该量的相应受治疗者相比,引起疾病、病症或副作用的改进治疗、治愈、预防或减轻的量,或者引起疾病或病症的进展的速率降低的量。该术语还包括在其范围内有效地增强正常生理功能的量。
如本文所使用的,术语“组合”及其相关表述表示同时给药或者以任何分开的顺序给药治疗有效量的化合物A或其可药用盐和化合物B或其可药用盐。优选地,如果给药不是同时的,那么所述化合物以紧密相邻的时间给药。此外,化合物是否以相同的剂型给药是无关紧要的,例如一个化合物可以局部给药,另一个化合物可以口服给药。适当地,这两个化合物均口服给药。
如本文所使用的,术语“组合试剂盒”,表示用于给药根据本发明的化合物A或其可药用盐和化合物B或其可药用盐的一种或多种药物组合物。当该两种化合物同时给药时,所述组合试剂盒可以含有在单个药物组合物如片剂或在分开的药物组合物中的化合物A或其可药用盐和化合物B或其可药用盐。当不同时给药所述化合物时,所述组合试剂盒将含有在分开的药物组合物中的化合物A或其可药用盐和化合物B或其可药用盐。该组合试剂盒可以包括在分开的药物组合物中,在单个包装中或在分开包装中的分开药物组合物中的化合物A或其可药用盐和化合物B或其可药用盐。
在一个方面中提供了包含下列成分的组合试剂盒:
化合物A或其可药用盐,以及可药用载体;和
化合物B或其可药用盐,以及可药用载体。
在本发明的一个实施方案中,该组合试剂盒包含下列成分:
化合物A或其可药用盐,以及可药用载体;和
化合物B或其可药用盐,以及可药用载体,其中各成分以适于顺序、分开和/或同时给药的形式提供。
在一个实施方案中,该组合试剂盒包含:
第一容器,其包含化合物A或其可药用盐以及可药用载体;和
第二容器,其包含化合物B或其可药用盐以及可药用载体;和
用于容纳所述第一容器和第二容器的容器装置。
所述“组合试剂盒”还可以提供说明书,如剂量和给药说明书。这些剂量和给药说明书可以为向医师提供的资料(kind),例如药物产品标签,或者它们可以为由医师提供的资料,如向患者提供的说明书。
除非另有说明,在本文所述的所有给药方案中,给药化合物的方案没有必要在治疗开始时开始,也没有必要在治疗结束时终止,仅要求给药该两种化合物的连续天数以及任选仅给药组分化合物中的一种的连续天数,或者所指明的给药方案-包括所给予的化合物量,在治疗过程中的一些点发生。
如本文所使用的,术语“化合物A2”表示---化合物A或其可药用盐---。
如本文所使用的,术语“化合物B2”表示---化合物B或其可药用盐---。
本文所使用的术语“负荷剂量(loading dose)”,应理解为表示向受治疗者给药高于维持剂量以例如快速增加药物的血液浓度的化合物A或化合物B的单个剂量或短期治疗方案。适当地,这里使用的短期治疗方案可以为1至14天;适当地为1至7天;适当地为1至3天;适当地为三天;适当地为两天;适当地为一天。在一些实施方案中,所述“负荷剂量”可以将药物的血液浓度增加到治疗有效水平。在一些实施方案中,所述“负荷剂量”可以将药物的血液浓度增加到与药物的维持剂量相关的治疗有效水平。所述“负荷剂量”可以每天给药一次,或每天给药多于一次(例如,每天最多4次)。适当地,所述“负荷剂量”可以一天给药一次。适当地,所述负荷剂量为维持剂量的2至100倍的量;适当地为2至10倍;适当地为2至5倍;适当地2倍;适当地3倍;适当地4倍;适当地5倍。适当地,所述负荷剂量给药1至7天;适当地1至5天;适当地1至3天;适当地1天;适当地2天;适当地3天,接着进行维持给药方案。
本文所使用的术语“维持剂量”,应理解为表示连续(serially)给药(例如,至少两次)的剂量,并用于将化合物的血液浓度水平缓慢增加至治疗有效水平或者维持该治疗有效水平。所述维持剂量一般每天给药一次,维持剂量的每日剂量低于所述负荷剂量的全部每日剂量。
适当地,本发明的组合“在规定的期间内”给药。
如本文所使用的术语“规定的期间(specified period)”及其类似表达,表示给药化合物A2和化合物B2中的一个以及给药化合物A2和化合物B2中的另一个之间的时间间隔。除非另有说明,规定的期间可以包括同时给药。当一天一次给药本发明的两个化合物时,规定的期间是指在一天内给药化合物A2和化合物B2。当给药本发明的一个或两个化合物一天多于一次时,基于首次给药各化合物的具体日期计算规定的期间。在计算规定的期间时,不考虑在该具体日期中接着首次给药的所有本发明化合物的给药。
适当地,如果在“规定的期间”内给药所述化合物而不同时给药,它们均可以在彼此相隔约24小时内给药-在该情况中,所述规定的期间将为约24小时;适当地,它们均可以在彼此相隔约12小时内给药-在该情况中,所述规定的期间将为约12小时;适当地,它们均可以在彼此相隔约11小时内给药-在该情况中,所述规定的期间将为约11小时;适当地,它们均可以在彼此相隔约10小时内给药-在该情况中,所述规定的期间将为约10小时;适当地,它们均可以在彼此相隔约9小时内给药-在该情况中,所述规定的期间将为约9小时;适当地,它们均可以在彼此相隔约8小时内给药–在该情况中,所述规定的期间将为约8小时;适当地,它们均可以在彼此相隔约7小时内给药–在该情况中,所述规定的期间将为约7小时;适当地,它们均可以在彼此相隔约6小时内给药–在该情况中,所述规定的期间将为约6小时;适当地,它们均可以在彼此相隔约5小时内给药–在该情况中,所述规定的期间将为约5小时;适当地,它们均可以在彼此相隔约4小时内给药–在该情况中,所述规定的期间将为约4小时;适当地,它们均可以在彼此相隔约3小时内给药–在该情况中,所述规定的期间将为约3小时;适当地,它们可以在彼此相隔约2小时内给药–在该情况中,所述规定的期间将为约2小时;适当地,它们均可以在彼此相隔约1小时内给药–在该情况中,所述规定的期间将为约1小时。如本文所使用的,化合物A2和化合物B2的给药相隔小于约45分钟被认为是同时给药。
适当地,当本发明的组合给药一段“规定的期间”时,各化合物共同给药一段“持续时间”。
如本文所使用的术语“持续时间”及其类似表述,表示本发明的两个化合物在“规定的期间”内给药指定数目的连续天数,任选接着仅给药一种组分化合物一定的连续天数。
关于“规定的期间”给药:
适当地,两个化合物在规定的期间内给药至少一天–在该情况中,所述持续时间为至少一天;适当地,在治疗过程中,两个化合物在规定的期间内给药至少连续3天-在该情况中,所述持续时间为至少3天;适当地,在治疗过程中,两个化合物在规定的期间内给药至少连续5天-在该情况中,所述持续时间为至少5天;适当地,在治疗过程中,两个化合物在规定的期间内给药至少连续7天–在该情况中,所述持续时间为至少7天;适当地,在治疗过程中,两个化合物在规定的期间内给药至少连续14天-在该情况中,所述持续时间为至少14天;适当地,在治疗过程中,两个化合物在规定的期间内给药至少连续30天-在该情况中,所述持续时间为至少30天。
适当地,在治疗过程中,两个化合物在规定的期间内给药至少1天-在该情况中,所述持续时间为至少1天;适当地,在治疗过程中,两个化合物在规定的期间内给药至少连续2天-在该情况中,所述持续时间为至少2天;适当地,在治疗过程中,两个化合物在规定的期间内给药至少连续3天–在该情况中,所述持续时间为至少3天;适当地,在治疗过程中,两个化合物在规定的期间内给药至少连续5天–在该情况中,所述持续时间为至少5天;适当地,在治疗过程中,两个化合物在规定的期间内给药至少连续7天–在该情况中,所述持续时间为至少7天;适当地,在治疗过程中,两个化合物在规定的期间内给药至少连续14天–在该情况中,所述持续时间为至少14天;适当地,在治疗过程中,两个化合物在规定的期间内给药至少连续30天–在该情况中,所述持续时间为至少30天。当在治疗过程中,两个化合物在规定的期间内给药超过30天时,该治疗被认为是长期治疗,并且将会持续直到改变事件(altering event),如癌症情况的重新评定或者患者的病症的改变、证明改变治疗方案(protocol)是正确的。
进一步关于“规定的期间”给药:
适当地,在治疗过程中,两个化合物在规定的期间内给药至少1天,接着给药仅化合物A2至少1天–在该情况中,所述持续时间为至少2天;适当地,在治疗过程中,两个化合物在规定的期间内给药至少1天,接着仅给药化合物A2至少2天–在该情况中,所述持续时间为至少3天;适当地,在治疗过程中,两个化合物在规定的期间内给药至少1天,接着仅给药化合物A2至少3天-在该情况中,所述持续时间为至少4天;适当地,在治疗过程中,两个化合物在规定的期间内给药至少1天,接着仅给药化合物A2至少4天–在该情况中,所述持续时间为至少5天;适当地,在治疗过程中,两个化合物在规定的期间内给药至少1天,接着仅给药化合物A2至少5天-在该情况中,所述持续时间为至少6天;适当地,在治疗过程中,两个化合物在规定的期间内给药至少1天,接着仅给药化合物A2至少6天-在该情况中,所述持续时间为至少7天;适当地,在治疗过程中,两个化合物在规定的期间内给药至少1天,接着仅给药化合物A2至少7天-在该情况中,所述持续时间为至少8天;适当地,在治疗过程中,两个化合物在规定的期间内给药至少连续2天,接着仅给药化合物A2至少1天-在该情况中,所述持续时间为至少3天;适当地,在治疗过程中,两个化合物在规定的期间内给药至少连续2天,接着仅给药化合物A2至少连续2天-在该情况中,所述持续时间为至少4天;适当地,在治疗过程中,两个化合物在规定的期间内给药至少连续2天,接着仅给药化合物A2至少连续3天-在该情况中,所述持续时间为至少5天;适当地,在治疗过程中,两个化合物在规定的期间内给药至少连续2天,接着仅给药化合物A2至少连续4天–在该情况中,所述持续时间为至少6天;适当地,在治疗过程中,两个化合物在规定的期间内给药至少连续2天,接着仅给药化合物A2至少连续5天–在该情况中,所述持续时间为至少7天;适当地,在治疗过程中,两个化合物在规定的期间内给药至少连续2天,接着仅给药化合物A2至少连续6天–在该情况中,所述持续时间为至少8天;适当地,在治疗过程中,两个化合物在规定的期间内给药至少连续2天,接着仅给药化合物A2至少连续7天–在该情况中,所述持续时间为至少9天;适当地,在治疗过程中,两个化合物在规定的期间内给药至少连续3天,接着仅给药化合物A2至少1天–在该情况中,所述持续时间为至少4天;适当地,在治疗过程中,两个化合物在规定的期间内给药至少连续3天,接着仅给药化合物A2至少连续2天–在该情况中,所述持续时间为至少5天;适当地,在治疗过程中,两个化合物在规定的期间内给药至少连续3天,接着仅给药化合物A2至少连续3天–在该情况中,所述持续时间为至少6天;适当地,在治疗过程中,两个化合物在规定的期间内给药至少连续3天,接着仅给药化合物A2至少连续4天–在该情况中,所述持续时间为至少7天;适当地,在治疗过程中,两个化合物在规定的期间内给药至少连续3天,接着仅给药化合物A2至少连续5天-在该情况中,所述持续时间为至少8天;适当地,在治疗过程中,两个化合物在规定的期间内给药至少连续3天,接着仅给药化合物A2至少连续6天–在该情况中,所述持续时间为至少9天;适当地,在治疗过程中,两个化合物在规定的期间内给药至少连续3天,接着仅给药化合物A2至少连续7天-在该情况中,所述持续时间为至少10天;适当地,在治疗过程中,两个化合物在规定的期间内给药至少连续4天,接着仅给药化合物A2至少1天–在该情况中,所述持续时间为至少连续5天;适当地,在治疗过程中,两个化合物在规定的期间内给药至少连续4天,接着仅给药化合物A2至少连续2天-在该情况中,所述持续时间为至少连续6天;适当地,在治疗过程中,两个化合物在规定的期间内给药至少连续4天,接着仅给药化合物A2至少连续3天-在该情况中,所述持续时间为至少连续7天;适当地,在治疗过程中,两个化合物在规定的期间内给药至少连续4天,接着仅给药化合物A2至少连续4天-在该情况中,所述持续时间为至少连续8天;适当地,在治疗过程中,两个化合物在规定的期间内给药至少连续4天,接着仅给药化合物A2至少连续7天–在该情况中,所述持续时间为至少连续11天;适当地,在治疗过程中,两个化合物在规定的期间内给药至少连续5天,接着仅给药化合物A2至少1天–在该情况中,所述持续时间为至少连续6天;适当地,在治疗过程中,两个化合物在规定的期间内给药至少连续5天,接着仅给药化合物A2至少连续2天–在该情况中,所述持续时间为至少连续7天;适当地,在治疗过程中,两个化合物在规定的期间内给药至少连续5天,接着仅给药化合物A2至少连续3天–在该情况中,所述持续时间为至少连续8天;适当地,在治疗过程中,两个化合物在规定的期间内给药至少连续5天,接着仅给药化合物A2至少连续4天–在该情况中,所述持续时间为至少连续9天;适当地,在治疗过程中,两个化合物在规定的期间内给药至少连续5天,接着仅给药化合物A2至少连续5天–在该情况中,所述持续时间为至少连续10天;适当地,在治疗过程中,两个化合物在规定的期间内给药至少连续7天,接着仅给药化合物A2至少连续2天–在该情况中,所述持续时间为至少连续9天;适当地,在治疗过程中,两个化合物在规定的期间内给药至少连续14天,接着仅给药化合物A2至少连续7天–在该情况中,所述持续时间为至少连续21天;适当地,在治疗过程中,两个化合物在规定的期间内给药至少连续30天,接着仅给药化合物A2至少连续7天–在该情况中,所述持续时间为至少连续37天。适当地,在治疗过程中,两个化合物在规定的期间内给药连续1至3天,接着仅给药化合物A2连续3至7天。适当地,在治疗过程中,两个化合物在规定的期间内给药连续3至6天,接着仅给药化合物A2连续1至4天。适当地,在治疗过程中,两个化合物在规定的期间内给药连续5天,接着仅给药化合物A2连续2天。适当地,在治疗过程中,两个化合物在规定的期间内给药连续2天,接着仅给药化合物A2连续3至7天。
进一步关于“规定的期间”给药:
适当地,在治疗过程中,两个化合物在规定的期间内给药至少1天,接着仅给药化合物B2至少1天-在该情况中,所述持续时间为至少2天;适当地,在治疗过程中,两个化合物在规定的期间内给药至少1天,接着仅给药化合物B2至少2天-在该情况中,所述持续时间为至少3天;适当地,在治疗过程中,两个化合物在规定的期间内给药至少1天,接着仅给药化合物B2至少3天-在该情况中,所述持续时间为至少4天;适当地,在治疗过程中,两个化合物在规定的期间内给药至少1天,接着仅给药化合物B2至少4天–在该情况中,所述持续时间为至少5天;适当地,在治疗过程中,两个化合物在规定的期间内给药至少1天,接着仅给药化合物B2至少5天–在该情况中,所述持续时间为至少6天;适当地,在治疗过程中,两个化合物在规定的期间内给药至少1天,接着仅给药化合物B2至少6天–在该情况中,所述持续时间为至少7天;适当地,在治疗过程中,两个化合物在规定的期间内给药至少1天,接着仅给药化合物B2至少7天–在该情况中,所述持续时间为至少8天;适当地,在治疗过程中,两个化合物在规定的期间内给药至少连续2天,接着仅给药化合物B2至少1天–在该情况中,所述持续时间为至少3天;适当地,在治疗过程中,两个化合物在规定的期间内给药至少连续2天,接着仅给药化合物B2至少连续2天–在该情况中,所述持续时间为至少4天;适当地,在治疗过程中,两个化合物在规定的期间内给药至少连续2天,接着仅给药化合物B2至少连续3天–在该情况中,所述持续时间为至少5天;适当地,在治疗过程中,两个化合物在规定的期间内给药至少连续2天,接着仅给药化合物B2至少连续4天–在该情况中,所述持续时间为至少6天;适当地,在治疗过程中,两个化合物在规定的期间内给药至少连续2天,接着仅给药化合物B2至少连续5天-在该情况中,所述持续时间为至少7天;适当地,在治疗过程中,两个化合物在规定的期间内给药至少连续2天,接着仅给药化合物B2至少连续6天–在该情况中,所述持续时间为至少8天;适当地,在治疗过程中,两个化合物在规定的期间内给药至少连续2天,接着仅给药化合物B2至少连续7天-在该情况中,所述持续时间为至少9天;适当地,在治疗过程中,两个化合物在规定的期间内给药至少连续3天,接着仅给药化合物B2至少1天–在该情况中,所述持续时间为至少4天;适当地,在治疗过程中,两个化合物在规定的期间内给药至少连续3天,接着仅给药化合物B2至少连续2天-在该情况中,所述持续时间为至少5天;适当地,在治疗过程中,两个化合物在规定的期间内给药至少连续3天,接着仅给药化合物B2至少连续3天-在该情况中,所述持续时间为至少6天;适当地,在治疗过程中,两个化合物在规定的期间内给药至少连续3天,接着仅给药化合物B2至少连续4天-在该情况中,所述持续时间为至少7天;适当地,在治疗过程中,两个化合物在规定的期间内给药至少连续3天,接着仅给药化合物B2至少连续5天-在该情况中,所述持续时间为至少8天;适当地,在治疗过程中,两个化合物在规定的期间内给药至少连续3天,接着仅给药化合物B2至少连续6天–在该情况中,所述持续时间为至少9天;适当地,在治疗过程中,两个化合物在规定的期间内给药至少连续3天,接着仅给药化合物B2至少连续7天–在该情况中,所述持续时间为至少10天;适当地,在治疗过程中,两个化合物在规定的期间内给药至少连续4天,接着仅给药化合物B2至少1天–在该情况中,所述持续时间为至少连续5天;适当地,在治疗过程中,两个化合物在规定的期间内给药至少连续4天,接着仅给药化合物B2至少连续2天–在该情况中,所述持续时间为至少连续6天;适当地,在治疗过程中,两个化合物在规定的期间内给药至少连续4天,接着仅给药化合物B2至少连续3天–在该情况中,所述持续时间为至少连续7天;适当地,在治疗过程中,两个化合物在规定的期间内给药至少连续4天,接着仅给药化合物B2至少连续4天–在该情况中,所述持续时间为至少连续8天;适当地,在治疗过程中,两个化合物在规定的期间内给药至少连续4天,接着仅给药化合物B2至少连续7天–在该情况中,所述持续时间为至少连续11天;适当地,在治疗过程中,两个化合物在规定的期间内给药至少连续5天,接着仅给药化合物B2至少1天-在该情况中,所述持续时间为至少连续6天;适当地,在治疗过程中,两个化合物在规定的期间内给药至少连续5天,接着仅给药化合物B2至少连续2天–在该情况中,所述持续时间为至少连续7天;适当地,在治疗过程中,两个化合物在规定的期间内给药至少连续5天,接着仅给药化合物B2至少连续3天-在该情况中,所述持续时间为至少连续8天;适当地,在治疗过程中,两个化合物在规定的期间内给药至少连续5天,接着仅给药化合物B2至少连续4天–在该情况中,所述持续时间为至少连续9天;适当地,在治疗过程中,两个化合物在规定的期间内给药至少连续5天,接着仅给药化合物B2至少连续5天-在该情况中,所述持续时间为至少连续10天;适当地,在治疗过程中,两个化合物在规定的期间内给药至少连续7天,接着仅给药化合物B2至少连续2天-在该情况中,所述持续时间为至少连续9天;适当地,在治疗过程中,两个化合物在规定的期间内给药至少连续14天,接着仅给药化合物B2至少连续7天-在该情况中,所述持续时间为至少连续21天;适当地,在治疗过程中,两个化合物在规定的期间内给药至少连续30天,接着仅给药化合物B2至少连续7天-在该情况中,所述持续时间为至少连续37天。适当地,在治疗过程中,两个化合物在规定的期间内给药连续1至3天,接着仅给药化合物B2连续3至7天。适当地,在治疗过程中,两个化合物在规定的期间内给药连续3至6天,接着仅给药化合物B2连续1至4天。适当地,在治疗过程中,两个化合物在规定的期间内给药连续5天,接着仅给药化合物B2连续2天。适当地,在治疗过程中,两个化合物在规定的期间内给药连续2天,接着仅给药化合物B2连续3至7天。
进一步关于“规定的期间”给药:
适当地,在治疗过程中,化合物A2和化合物B2将在规定的期间内在7天周期中给药1至3天,在7天周期的其他天将仅给药化合物A2。适当地,该7天的方案重复2个周期或14天;适当地4个周期或28天;适当地连续给药。
适当地,在治疗过程中,化合物A2和化合物B2将在规定的期间内在7天周期中给药1至3天,在7天周期的其他天将仅给药化合物B2。适当地,该7天的方案重复2个周期或14天;适当地4个周期或28天;适当地连续给药。
适当地,在治疗过程中,化合物A2和化合物B2将在规定的期间内在7天周期中给药3天,在7天周期的其他天将仅给药化合物A2。适当地,该7天的方案重复2个周期或14天;适当地4个周期或28天;适当地连续给药。
适当地,在治疗过程中,化合物A2和化合物B2将在规定的期间内在7天周期中给药3天,在7天周期的其他天将仅给药化合物B2。适当地,该7天的方案重复2个周期或14天;适当地4个周期或28天;适当地连续给药。
适当地,在治疗过程中,化合物A2和化合物B2将在规定的期间内在7天周期中给药2天,在7天周期的其他天将仅给药化合物A2。适当地,该7天的方案重复2个周期或14天;适当地4个周期或28天;适当地连续给药。
适当地,在治疗过程中,化合物A2和化合物B2将在规定的期间内在7天周期中给药2天,在7天周期的其他天将仅给药化合物B2。适当地,该7天的方案重复2个周期或14天;适当地4个周期或28天;适当地连续给药。
适当地,在治疗过程中,化合物A2和化合物B2将在规定的期间内在7天周期中给药1天,在7天周期的其他天将仅给药化合物A2。适当地,该7天的方案重复2个周期或14天;适当地4个周期或28天;适当地连续给药。
适当地,在治疗过程中,化合物A2和化合物B2将在规定的期间内在7天周期中给药1天,在7天周期的其他天将仅给药化合物B2。适当地,该7天的方案重复2个周期或14天;适当地4个周期或28天;适当地连续给药。
适当地,在治疗过程中,化合物A2和化合物B2将在规定的期间内在14天周期中给药1至5天,在14天周期的其他天将仅给药化合物A2。适当地,该14天的方案重复2个周期或28天;适当地连续给药。
适当地,在治疗过程中,化合物A2和化合物B2将在规定的期间内在14天周期中给药1至5天,在14天周期的其他天将仅给药化合物B2。适当地,该14天的方案重复2个周期或28天;适当地连续给药。
适当地,如果所述化合物不在“规定的期间内(during a specifiled period)”给药,那么它们就顺序给药。如本文所使用的术语“顺序给药”及其相关表述,表示给药化合物A2和化合物B2中的一个连续两天或更多天,接着给药化合物A2和化合物B2中的另一个连续两天或更多天。同样地,本发明还包括在顺序给药化合物A2和化合物B2中的一个以及给药化合物A2和化合物B2中的另一个之间所使用的休药期。如本文所使用的,休药期为在顺序给药化合物A2和化合物B2中的一个之后和在给药化合物A2和化合物B2中的另一个之前不给药化合物A2也不给药化合物B2的间隔天数。休药期为选自以下的一段天数:1天、2天、3天、4天、5天、6天、7天、8天、9天、10天、11天、12天、13天和14天。
适当地,如果所述化合物不在“规定的期间内(during a specifiled period)”给药,那么它们就顺序给药。如本文所使用的术语“顺序给药”及其相关表述,表示一天一次给药化合物A2和化合物B2中的一个连续一天或多天,接着一天一次给药化合物A2和化合物B2中的另一个连续一天或多天。同样地,本发明还包括在顺序给药化合物A2和化合物B2中的一个与化合物A2和化合物B2中的另一个之间所使用的休药期。如本文所使用的,休药期为在顺序给药化合物A2和化合物B2中的一个之后和在给药化合物A2和化合物B2中的另一个之前不给药化合物A2也不给药化合物B2的间隔天数。休药期为选自以下的一段天数:1天、2天、3天、4天、5天、6天、7天、8天、9天、10天、11天、12天、13天和14天。
关于顺序给药(sequential administration):
适当地,给药化合物A2和化合物B2中的一个连续2至30天,接着任选的休药期,接着给药化合物A2和化合物B2中的另一个连续2至30天。适当地,给药化合物A2和化合物B2中的一个连续2至21天,接着任选的休药期,接着给药化合物A2和化合物B2中的另一个连续2至21天。适当地,给药化合物A2和化合物B2中的一个连续2至14天,接着1至14天的休药期,接着给药化合物A2和化合物B2中的另一个连续2至14天。适当地,给药化合物A2和化合物B2中的一个连续3至7天,接着3至10天的休药期,接着给药化合物A2和化合物B2中的另一个连续3至7天。
适当地,给药化合物A2和化合物B2中的一个连续1至30天,接着任选的休药期,接着给药化合物A2和化合物B2中的另一个连续1至30天。适当地,给药化合物A2和化合物B2中的一个连续1至21天,接着任选的休药期,接着给药化合物A2和化合物B2中的另一个连续1至21天。适当地,给药化合物A2和化合物B2中的一个连续1至14天,接着1至14天的休药期,接着给药化合物A2和化合物B2中的另一个连续1至14天。适当地,给药化合物A2和化合物B2中的一个连续2至7天,接着2至10天的休药期,接着给药化合物A2和化合物B2中的另一个连续2至7天。
适当地,化合物B2首先连续给药,接着任选的休药期,接着给药化合物A2。适当地,给药化合物B2连续3至21天,接着任选的休药期,接着给药化合物A2连续3至21天。适当地,给药化合物B2连续3至21天,接着1至14天的休药期,接着给药化合物A2连续3至21天。适当地,给药化合物B2连续3至21天,接着3至14天的休药期,接着给药化合物A2连续3至21天。适当地,给药化合物B2连续21天,接着任选的休药期,接着给药化合物A2连续14天。适当地,给药化合物B2连续14天,接着1至14天的休药期,接着给药化合物A2连续14天。适当地,给药化合物B2连续7天,接着3至10天的休药期,接着给药化合物A2连续7天。适当地,给药化合物B2连续3天,接着3至14天的休药期,接着给药化合物A2连续7天。适当地,给药化合物B2连续3天,接着3至10天的休药期,接着给药化合物A2连续3天。
适当地,化合物B2首先连续给药,接着任选的休药期,接着给药化合物A2。适当地,给药化合物B2连续1至21天,接着任选的休药期,接着给药化合物A2连续1至21天。适当地,给药化合物B2连续3至21天,接着1至14天的休药期,接着给药化合物A2连续3至21天。适当地,给药化合物B2连续3至21天,接着3至14天的休药期,接着给药化合物A2连续3至21天。适当地,给药化合物B2连续21天,接着任选的休药期,接着给药化合物A2连续14天。适当地,给药化合物B2连续14天,接着1至14天的休药期,接着给药化合物A2连续14天。适当地,给药化合物B2连续7天,接着3至10天的休药期,接着给药化合物A2连续7天。适当地,给药化合物B2连续3天,接着3至14天的休药期,接着给药化合物A2连续7天。适当地,给药化合物B2连续3天,接着3至10天的休药期,接着给药化合物A2连续3天。
适当地,化合物A2首先连续给药,接着任选的休药期,接着给药化合物B2。适当地,给药化合物A2连续3至21天,接着任选的休药期,接着给药化合物B2连续3至21天。适当地,给药化合物A2连续3至21天,接着1至14天的休药期,接着给药化合物B2连续3至21天。适当地,给药化合物A2连续3至21天,接着3至14天的休药期,接着给药化合物B2连续3至21天。适当地,给药化合物A2连续21天,接着任选的休药期,接着给药化合物B2连续14天。适当地,给药化合物A2连续14天,接着1至14天的休药期,接着给药化合物B2连续14天。适当地,给药化合物A2连续7天,接着3至10天的休药期,接着给药化合物B2连续7天。适当地,给药化合物A2连续3天,接着3至14天的休药期,接着给药化合物B2连续7天。适当地,给药化合物A2连续3天,接着3至10天的休药期,接着给药化合物B2连续3天。
适当地,化合物A2首先连续给药,接着任选的休药期,接着给药化合物B2。适当地,给药化合物A2连续1至21天,接着任选的休药期,接着给药化合物B2连续1至21天。适当地,给药化合物A2连续3至21天,接着1至14天的休药期,接着给药化合物B2连续3至21天。适当地,给药化合物A2连续3至21天,接着3至14天的休药期,接着给药化合物B2连续3至21天。适当地,给药化合物A2连续21天,接着任选的休药期,接着给药化合物B2连续14天。适当地,给药化合物A2连续14天,接着1至14天的休药期,接着给药化合物B2连续14天。适当地,给药化合物A2连续7天,接着3至10天的休药期,接着给药化合物B2连续7天。适当地,给药化合物A2连续3天,接着3至14天的休药期,接着给药化合物B2连续7天。适当地,给药化合物A2连续3天,接着3至10天的休药期,接着给药化合物B2连续3天。适当地,给药化合物A2连续7天,接着给药化合物B21天。适当地,给药化合物A2连续6天,接着给药化合物B21天。适当地,给药化合物B21天,接着给药化合物A2连续7天。适当地,给药化合物B21天,接着给药化合物A2连续6天。
应当理解,“规定的期间”给药和“顺序”给药可以接着重复给药(dosing)或者可以接着交替的给药方案,休药期可以在重复给药或交替的给药方案之前。
适当地,作为本发明组合的一部分的化合物A2的给药量为选自约10mg至约300mg的量。适当地,所述量选自约30mg至约280mg;适当地,所述量选自约40mg至约260mg;适当地,所述量选自约60mg至约240mg;适当地,所述量选自约80mg至约220mg;适当地,所述量选自约90mg至约210mg;适当地,所述量选自约100mg至约200mg;适当地,所述量选自约110mg至约190mg;适当地,所述量选自约120mg至约180mg;适当地,所述量选自约130mg至约170mg;适当地,所述量选自约140mg至约160mg;适当地,该量可以为约150mg。因此,作为本发明组合的一部分的化合物A2的给药量为选自约10mg至约300mg的量。例如,作为本发明组合的一部分的化合物A2的给药量合适地选自:10mg、20mg、30mg、40mg、50mg、60mg、70mg、80mg、85mg、90mg、95mg、100mg、105mg、110mg、115mg、120mg、125mg、130mg、135mg、140mg、145mg、150mg、155mg、160mg、165mg、170mg、175mg、180mg、185mg、190mg、195mg、200mg、205mg、210mg、215mg、220mg、225mg、230mg、235mg、240mg、245mg、250mg、255mg、260mg、265mg、270mg、275mg、280mg、285mg、290mg、295mg和300mg。适当地,一天1-4次给药所选量的化合物A2。适当地,一天两次给药所选量的化合物A2。适当地,一天一次给药所选量的化合物A2。适当地,化合物A2的给药将以负荷剂量开始。适当地,该负荷剂量将为维持剂量的2至100倍的量;适当地2至10倍;适当地2至5倍;适当地为2倍;适当地为3倍;适当地为4倍;适当地为5倍。适当地,所述负荷剂量给药1至7天;适当地1至5天;适当地1至3天;适当地为1天;适当地为2天;适当地为3天,接着为维持剂量给药方案。
适当地,作为本发明组合的一部分的化合物B2的给药量为选自约5mg至约500mg的量;适当地,所述量选自约25mg至约400mg;适当地,所述量选自约30mg至约375mg;适当地,所述量选自约35mg至约350mg;适当地,所述量选自约40mg至约300mg;适当地,所述量选自约45mg至约275mg;适当地,所述量选自约50mg至约250mg;适当地,所述量选自约55mg至约225mg;适当地,所述量选自约60mg至约200mg;适当地,所述量选自约65mg至约175mg;适当地,所述量选自约70mg至约150mg;适当地,所述量选自约50mg至约300mg;适当地,所述量选自约75mg至约150mg;适当地,该量为约100mg。因此,作为本发明组合的一部分的化合物B2的给药量为选自约5mg至约500mg的量。例如,作为本发明组合的一部分的化合物B2的给药量可以为5mg、10mg、15mg、20mg、25mg、30mg、35mg、40mg、45mg、50mg、55mg、60mg、65mg、70mg、75mg、80mg、85mg、90mg、95mg、100mg、105mg、110mg、115mg、120mg、125mg、130mg、135mg、140mg、145mg、150mg、175mg、200mg、225mg、250mg、275mg、300mg、325mg、350mg、375mg、400mg、425mg、450mg、475mg或500mg。适当地,一天两次给药所选量的化合物B2。适当地,一天一次给药所选量的化合物B2。适当地,化合物A2的给药将从负荷剂量开始。适当地,该负荷剂量将为维持剂量的2至100倍的量;适当地2至10倍;适当地2至5倍;适当地为2倍;适当地为3倍;适当地为4倍;适当地为5倍。适当地,所述负荷剂量给药1至7天;适当地1至5天;适当地1至3天;适当地为1天;适当地为2天;适当地为3天,接着为维持剂量给药方案。
适当地,作为本发明组合的一部分的化合物B2的给药量为选自约75mg至约1,000mg的量;适当地,所述量选自约100mg至约900mg;适当地,所述量选自约150mg至约850mg;适当地,所述量选自约200mg至约800mg;适当地,所述量选自约250mg至约750mg;适当地,所述量选自约300mg至约6000mg;适当地,该量可以为约450mg。因此,作为本发明组合的一部分的化合物B2的给药量为选自约75mg至约1,000mg的量。例如,作为本发明组合的一部分的化合物B2的给药量可以为75mg、100mg、125mg、150mg、175mg、200mg、225mg、250mg、275mg、300mg、325mg、350mg、375mg、400mg、425mg、450mg、475mg、500mg、525mg、550mg、575mg、600mg、625mg、650mg、675mg、700mg、725mg、750mg、775mg、800mg、825mg、850mg、875mg、900mg、925mg、950mg、975mg或1,000mg。适当地,一天两次给药所选量的化合物B2。适当地,一天一次给药所选量的化合物B2。
如本文所使用的,针对化合物A2和化合物B2详细说明的所有量均为每剂量给药游离的或未成盐的和未溶剂化的化合物的量。
本发明的方法还可以与其他治疗癌症的治疗方法一起使用。
尽管对于治疗应用而言,治疗有效量的本发明的组合可以以粗化学品(raw chemical)给药,但是优选该组合以一种或多种药物组合物存在。因此,本发明还提供药物组合物,其包括化合物A2和/或化合物B2以及一种或多种可药用载体。本发明的组合如上文所述。所述载体在以下方面必须是可接受的:与制剂中其他成分相容,能够形成药用制剂以及对其接受者无害。根据本发明的其他方面,还提供了制备药物制剂的方法,该方法包括混合化合物A2和/或化合物B2与一种或多种可药用载体。如上文所示,所用药物组合中的这些要素可以存在于分开的药物组合物中,或者一起配制成一种药物制剂。
药物制剂可以以含有预定量的活性成分/单位剂量的单位剂型存在。如本领域技术人员所已知的,活性成分的量/剂量取决于所治疗的病症,给药途径和患者的年龄、体重和状况。优选的单位剂量的制剂为那些含有每日剂量或亚剂量或其合适部分的活性成分的单位剂量制剂。此外,这些药物制剂可以通过药物领域公知的任何方法制备。
化合物A2和化合物B2可以通过任何适合的途径给药。合适的途径包括经口、经直肠、经鼻、局部(包括含服(buccal)和舌下)、经阴道和肠胃外(包括皮下、肌内、静脉内、真皮内、鞘内和硬膜外)。可以理解优选途径可随着例如该组合的受治疗者的状况和所治疗的癌症而变化。还可以理解各个药物可以通过相同或不同的途径给药,化合物A2和化合物B2可以一起配制成药物组合物/制剂。
将本发明的化合物或组合混合成方便的剂型,如胶囊、片剂或可注射制剂。可以使用固体或液体药用载体。固体载体包括:淀粉、乳糖、硫酸钙二水合物、石膏粉、蔗糖、滑石、明胶、琼脂、果胶、阿拉伯胶、硬脂酸镁和硬脂酸。液体载体包括糖浆、花生油、橄榄油、盐水和水。类似地,载体可以包括延时释放材料,如单独的或与蜡混合的甘油单硬脂酸酯或甘油二硬脂酸酯。固体载体的量变化范围广,但是优选从约25mg至约1g/剂量单位。当使用液体载体时,该制剂合适的为糖浆、酏剂、乳剂、软明胶胶囊剂、无菌可注射液体(如安瓿)或者含水或非含水液体混悬剂的形式。
例如,对于片剂或胶囊剂形式的口服给药,活性药物组分可以与口服的、无毒的可药用载体如乙醇、甘油、水等混合。粉末剂可以通过将所述化合物研磨成合适的细小尺寸并与类似粉末化的药用载体(如可食用碳水化合物,例如,淀粉或甘露醇)混合而制备。还可以存在调味剂、防腐剂、分散剂和着色剂。
应当理解,除了上述成分之外,所述制剂还可以含有在本领域中与所关注制剂类型相关的其他试剂,例如那些适于口服给药的试剂可以包括调味剂。
如所说明的,将治疗有效量的本发明组合(化合物A2与化合物B2组合)给药于人。典型地,给药的治疗有效量的本发明药物将取决于许多因素,包括,例如,受治疗者的年龄和重量、需要治疗的精确病症、该病症的严重程度、制剂的性质和给药途径。最后,治疗有效量依据主治医师的决定。
根据已知的方法测试本发明的组合的功效、有利和协同性质。
适当地,一般根据以下的联合细胞增殖试验测试本发明的组合的功效、有利和协同性质。在384-孔板中在适于各细胞类型、且补充了10%FBS和1%青霉素/链霉素的培养基中以500细胞/孔将细胞铺板,并在37°C、5%CO
2温育过夜。在384孔板上从左往右使用化合物A
2的各稀释液(20个稀释液,包括无化合物、1-20μM 2-倍稀释液,根据组合)以格栅方式处理细胞,并在384孔板上从上向下用化合物B
2(20个稀释液,包括无化合物、1-20μM 2-倍稀释液,根据组合)处理,并如上再温育72小时。在一些情况中,以交错方式添加化合物,并且可以将温育时间延长到最多达7天。使用CellTiter-
试剂根据制造商的实验规范测量细胞生长,在PerkinElmerEnVision
TM读取器上读取信号(设为发光模式,0.5秒一个读数)。如下所述对数据进行分析。
结果表达为t=0时的值的百分比,并且针对化合物浓度作图。t=0时的值归一化为100%,并且表示添加化合物时存在的细胞数。各个化合物和/或化合物组合的细胞响应如下确定:使用用于Microsoft Excel软件的IDBSXLfit plug-in对细胞存活力-浓度进行4-或6-参数曲线拟合,并确定50%抑制细胞生长所需要的浓度(gIC50)。背景校正通过减去不含细胞的孔中的值来进行。对于各药物组合,组合指数(Combination Index,CI)、超过最高单药物的量(Excess Over Highest Single Agent,EOHSA)和超过Bliss的量(Excess OverBliss,EOBliss)根据例如记载于Chou and Talalay(1984)Advances in EnzymeRegulation,22,37至55;和Berenbaum,MC(1981)Adv.Cancer Research,35,269-335中的已知方法计算。
化合物A(BRAF化合物)、化合物B(AKT化合物)和它们的组合在肿瘤细胞系中的体外细胞生长抑制
方法:
细胞系和生长条件
人结肠肿瘤细胞系Colo205、DLD1、HCC2998、HCT15、HCT8、HT29、KM-12、LS1034、LS174T、RKO、SW1463、SW480、SW837和T84,以及人乳腺肿瘤细胞系EFM19和MDA-MB-175VII在含有10%胎牛血清(FBS)的RPMI 1640培养基中培养。
细胞生长抑制检测和组合数据分析
所有的细胞均至少培养72小时,然后细胞铺板。在对所有细胞都在含10%FBS的RPMI培养基的96孔组织培养板(NUNC 136102)中以1000细胞/孔检测细胞。铺板后约24小时,使细胞暴露于化合物的十个三倍的系列稀释液,或者暴露于在含10%FBS的RPMI培养基中的,以化合物A对化合物B的恒定摩尔比为1:10的这两个药物的组合的十个三倍系列稀释液。细胞在化合物的存在下温育3天。通过添加Cell Titer
(Promega)根据制造商的实验规范确定ATP水平。简单来说,将Cell Titer
加入各板中,温育30分钟,然后在SpectraMax L光吸收酶标仪(plate reader)上读取发光信号(0.5秒整合时间(integration time))。
在用化合物或各化合物的组合处理三天后,与用载体(DMSO)处理的细胞比较信号,以此评估细胞生长的抑制。计算相对于用载体(DMSO)处理的对照孔细胞的细胞生长。当y=50%载体对照时用非线性回归内插(interpolate)得到抑制50%对照细胞生长的化合物浓度(IC50),公式为y=(A+(B-A)/(1+(C/x)^D))),其中A为最小响应(ymin),B为最大响应(ymax),C为曲线的拐点(EC50),D为希尔系数(Hill coefficient)。
对效能的组合作用使用组合指数(CI)评估,组合指数使用后向插入(back-interpolated)的IC50值以及Chou和Talalay推导的彼此非排他性方程(1)计算:
CI=Da/IC50(a)+Db/IC50(b)+(DaxDb)/(IC50(a)xIC50(b))
其中IC50(a)为化合物A的IC50;IC50(b)为化合物B的IC50;Da为化合物A在抑制50%细胞生长的与化合物B组合中的浓度;Db为化合物B在抑制50%细胞生长的与化合物A组合中的浓度。一般而言,CI值<0.9,在0.9和1.1之间,或者>1.1,分别表明协同效应、相加效应和拮抗效应。一般而言,CI数越小,协同效应的强度越大。
对响应程度的组合作用通过超过最高单药物的量(EOHSA)定量表示,其基于非线性混合的概念,如Peterson and Novick(2007)和Peterson(2010)[(2;3)[Peterson and Novick,2007;Peterson,2010]所详细描述的。EOHSA值定义为,由所述组合产生的相比于最佳单个药物在该组合中的组分剂量水平时的改善的增加(在此,表示为‘百分比点’(ppt)差异)。对于单个药物和组合治疗,将细胞暴露于固定的剂量比的化合物,并且将剂量响应曲线拟合于实验数据,并且使用回归模型进行分析。沿着剂量响应曲线上指定的IC50总剂量水平处,确定剂量组合(相应于IC50)以作出EOHSA统计学结论。更具体地,对于涉及以剂量d1的药物1和以剂量d2的药物2的组合药物实验,(即总剂量等于d1+d2),如果组合时的平均响应好于对剂量d1的药物1或剂量d2的药物2的平均响应,被认为具有正EOHSA。
结果:
在一组人肿瘤细胞系中确定BRAF抑制剂化合物A、AKT抑制剂化合物B和它们的组合引起的细胞生长抑制作用。关于BRAF、KRAS和PIK3CA突变状态的平均IC50(来自至少两个独立的实验)和在各IC50处的组合作用总结于表1中。具有BRAF V600E和PIK3CA H1047R突变的RKO结肠细胞系对单独的化合物A或单独的化合物B不是很敏感(IC50>1μM),然而其对化合物A和化合物B的组合敏感(IC50=0.060μM)。化合物A和化合物B的组合在RKO细胞中具有高度的协同效应,其CI值为0.08。该组合在对单独的化合物A高度敏感的HT29和Colo205 BRAF V600E突变细胞系中具有相加效应或轻微的拮抗效应。没有BRAF V600E突变体的其它10个结肠细胞系(KRAS野生型或突变型)对化合物A敏感(IC50>10μM)。化合物A和化合物B的组合在70%的细胞系中显示出增加的细胞生长抑制,其通过12至48ppt的EOHSA值证明。对于表1中所列出的EFM19和MDA-MB-175VII乳腺肿瘤细胞系,化合物A和化合物B的组合显示出增加的细胞生长抑制,其EOHSA值分别为6和11ppt。
表1.化合物A、化合物B和它们的组合在人肿瘤细胞系中对细胞生长的抑制
表1关键词:
IC50:在等摩尔化合物B存在下,引起细胞生长减少50%的化合物的浓度或化合物A的浓度;
CI=组合指数;N/A=无法获得;
EOHSA:超过最高单药物的量,以百分比形式测定。
文献列表
(1)Chou TC,Talalay P.Quantitative analysis of dose-effect relationships:the combined effects of multiple drugs or enzyme inhibitors.Adv Enzyme Regul1984;22:27-55.
(2)Peterson JJ,Novick SJ.Nonlinear blending:a useful general conceptfor the assessment of combination drug synergy.J Recept Signal Transduct Res2007;27(2-3):125-46.
(3)Peterson J.A Review of Synergy Concepts of Nonlinear Blending andDose-Reduction Profiles.Frontiers of Bioscience S2,483-503.2010.
由于本发明的组合在上述测定中具有活性,因此它们在癌症治疗中显示出有利的治疗实用性。
适当地,本发明涉及治疗选自下列的癌症或减轻其严重性的方法:脑癌(神经胶质瘤)、恶性胶质瘤、星形细胞瘤、多形性恶性胶质瘤、Bannayan-Zonana综合征、考登病、Lhermitte-Duclos病、乳腺癌、炎性乳腺癌、维尔姆斯肿瘤、尤因肉瘤、横纹肌肉瘤、室管膜细胞瘤、成神经管细胞瘤、结肠癌、头颈癌、肾癌、肺癌、肝癌、黑素瘤、卵巢癌、胰腺癌、前列腺癌、肉瘤、骨肉瘤、骨巨细胞瘤、甲状腺癌,
淋巴母细胞T细胞白血病、慢性髓细胞性白血病、慢性淋巴细胞性白血病、毛细胞白血病、急性成淋巴细胞性白血病、急性髓细胞性白血病、慢性中性粒细胞性白血病、急性淋巴母细胞T细胞性白血病、浆细胞瘤、免疫母细胞大细胞白血病、套细胞白血病、多发性骨髓瘤巨核母细胞白血病、多发性骨髓瘤、急性巨核细胞白血病、前髓细胞性白血病、红白血病,
恶性淋巴瘤、何杰金淋巴瘤、非-何杰金淋巴瘤、淋巴母细胞T细胞淋巴瘤、伯基特淋巴瘤、滤泡性淋巴瘤,
神经母细胞瘤、膀胱癌、膀胱上皮癌、肺癌、外阴癌、子宫颈癌、子宫内膜癌、肾癌、间皮瘤、食管癌、唾液腺癌、肝细胞癌、胃癌、鼻咽癌、颊癌、口腔癌、GIST(胃肠道间质瘤)和睾丸癌。
适当地,本发明涉及治疗选自下列的癌症或减轻其严重性的方法:脑癌(神经胶质瘤)、恶性胶质瘤、星形细胞瘤、多形性恶性胶质瘤、Bannayan-Zonana综合征、考登病、Lhermitte-Duclos病、乳腺癌、结肠癌、头颈癌、肾癌、肺癌、肝癌、黑素瘤、卵巢癌、胰腺癌、前列腺癌、肉瘤和甲状腺癌。
适当地,本发明涉及治疗选自下列的癌症或减轻其严重性的方法:卵巢癌、乳腺癌、胰腺癌和前列腺癌。
适当地,本发明涉及治疗哺乳动物包括人中的癌前期综合征或减轻其严重性的方法,其中所述癌前期综合征选自:宫颈上皮内瘤变、意义未明的单克隆丙种球蛋白病(MGUS)、骨髓增生异常综合征、再生障碍性贫血、宫颈病变、皮肤痣(前黑素体)、前列腺上皮内(导管内)肿瘤(PIN)、导管原位癌(DCIS)、结肠息肉和严重的肝炎或肝硬化。
适当地,本发明涉及治疗Raf野生型或突变型的癌症和PI3K/PTEN野生型或突变型的癌症或减轻其严重性的方法。该方法包括Raf和PI3K/PTEN均为野生型、Raf和PI3K/PTEN均为突变型、Raf为突变型和PI3K/PTEN为野生型以及Raf为野生型和PI3K/PTEN为突变型的患者。
术语“野生型”,如本领域中所理解的,是指在未经基因修饰的天然种群中存在的多肽或多核苷酸序列。本领域中还应当理解的是,“突变型”包括,分别与野生型多肽或多核苷酸中相应的氨基酸或核酸相比,具有至少一个对氨基酸或核酸的修饰的多肽或多核苷酸序列。在术语突变型中包括单核苷酸多态性(SNP),其中,与最普遍存在的(野生型)核酸链相比,单个碱基对差异存在于核酸链序列中。
通过已知的方法鉴定Raf野生型或突变型癌症和PI3K/PTEN野生型或突变型癌症。
例如,野生型或突变型的Raf或PI3K/PTEN肿瘤细胞可以通过DNA扩增和测序技术、DNA和RNA检测技术(分别包括但不限于RNA印迹(Northern blot)和DNA印迹(Southern blot))和/或各种生物芯片和阵列技术鉴定。野生型和突变型多肽可以通过多种技术包括但不限于免疫诊断学技术如ELISA、蛋白质印迹(Western blot)、免疫细胞化学进行检测。合适地,可使用焦磷酸解-激活的聚合反应(PAP)和/或PCR方法。Liu,Q等人;HumanMutation 23:426-436(2004)。
本发明提供了一种包含N-{3-[5-(2-氨基-4-嘧啶基)-2-(1,1-二甲基乙基)-1,3-噻唑-4-基]-2-氟苯基}-2,6-二氟苯磺酰胺或其可药用盐和N-{(1S)-2-氨基-1-[(3-氟苯基)甲基]乙基}-5-氯-4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺或其可药用盐的组合。
本发明还提供了一种包含N-{3-[5-(2-氨基-4-嘧啶基)-2-(1,1-二甲基乙基)-1,3-噻唑-4-基]-2-氟苯基}-2,6-二氟苯磺酰胺或其可药用盐和N-{(1S)-2-氨基-1-[(3-氟苯基)甲基]乙基}-5-氯-4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺或其可药用盐的组合,其用于治疗。
本发明还提供了一种包含N-{3-[5-(2-氨基-4-嘧啶基)-2-(1,1-二甲基乙基)-1,3-噻唑-4-基]-2-氟苯基}-2,6-二氟苯磺酰胺或其可药用盐和N-{(1S)-2-氨基-1-[(3-氟苯基)甲基]乙基}-5-氯-4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺或其可药用盐的组合,其用于治疗癌症。
本发明还提供了一种药物组合物,其包含N-{3-[5-(2-氨基-4-嘧啶基)-2-(1,1-二甲基乙基)-1,3-噻唑-4-基]-2-氟苯基}-2,6-二氟苯磺酰胺或其可药用盐和N-{(1S)-2-氨基-1-[(3-氟苯基)甲基]乙基}-5-氯-4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺或其可药用盐的组合。
本发明还提供了一种组合试剂盒,其包含N-{3-[5-(2-氨基-4-嘧啶基)-2-(1,1-二甲基乙基)-1,3-噻唑-4-基]-2-氟苯基}-2,6-二氟苯磺酰胺或其可药用盐和N-{(1S)-2-氨基-1-[(3-氟苯基)甲基]乙基}-5-氯-4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺或其可药用盐。
本发明还提供了包含N-{3-[5-(2-氨基-4-嘧啶基)-2-(1,1-二甲基乙基)-1,3-噻唑-4-基]-2-氟苯基}-2,6-二氟苯磺酰胺或其可药用盐和N-{(1S)-2-氨基-1-[(3-氟苯基)甲基]乙基}-5-氯-4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺或其可药用盐的组合在制备药物中的用途。
本发明还提供了包含N-{3-[5-(2-氨基-4-嘧啶基)-2-(1,1-二甲基乙基)-1,3-噻唑-4-基]-2-氟苯基}-2,6-二氟苯磺酰胺或其可药用盐和N-{(1S)-2-氨基-1-[(3-氟苯基)甲基]乙基}-5-氯-4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺或其可药用盐的组合在制备治疗癌症的药物中的用途。
本发明还提供了治疗癌症的方法,其包括向需要的受治疗者给药N-{3-[5-(2-氨基-4-嘧啶基)-2-(1,1-二甲基乙基)-1,3-噻唑-4-基]-2-氟苯基}-2,6-二氟苯磺酰胺或其可药用盐和N-{(1S)-2-氨基-1-[(3-氟苯基)甲基]乙基}-5-氯-4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺或其可药用盐的组合。
下面的实施例仅用于解释本发明,不以任何方式限制本发明的范围。
实验说明
实施例1-胶囊组合物
按照下面表I中所示比例,将各成分填充标准双部分硬明胶胶囊中,制备用于给药本发明组合的口服剂型。
表I
实施例2-胶囊组合物
按照下面表II中所示比例,将各成分填充标准双部分硬明胶胶囊中,制备用于给药本发明化合物之一的口服剂型。
表II
实施例3-胶囊组合物
按照下面表III中所示比例,将各成分填充标准双部分硬明胶胶囊中,制备用于给药本发明化合物之一的口服剂型。
表III
实施例4-片剂组合物
用10%的明胶溶液,将下面表IV所示的蔗糖、微晶纤维素和本发明组合中的化合物按所示的比例混合和造粒。将湿的颗粒筛分,干燥,并与淀粉、滑石和硬脂酸混合;然后筛分并压制成片剂。
表IV
实施例5-片剂组合物
用10%的明胶溶液,将下面表V所示的蔗糖、微晶纤维素和本发明组合中的一种化合物按所示的比例混合和造粒。将湿的颗粒筛分,干燥,并与淀粉、滑石和硬脂酸混合;然后筛分并压制成片剂。
表V
实施例6-片剂组合物
用10%的明胶溶液,将下面表VI所示的蔗糖、微晶纤维素和本发明组合中的一种化合物按所示的比例混合和造粒。将湿的颗粒筛分,干燥,并与淀粉、滑石和硬脂酸混合;然后筛分并压制成片剂。
表VI
尽管上面已经说明了本发明的优选实施方案,但是应当理解,本发明并不限于本文中所公开的明确说明,而且保留在权利要求书范围内的所有修改的权利。