CN102645542A - Bdnf酶联免疫测定试剂盒 - Google Patents
Bdnf酶联免疫测定试剂盒 Download PDFInfo
- Publication number
- CN102645542A CN102645542A CN2012101165341A CN201210116534A CN102645542A CN 102645542 A CN102645542 A CN 102645542A CN 2012101165341 A CN2012101165341 A CN 2012101165341A CN 201210116534 A CN201210116534 A CN 201210116534A CN 102645542 A CN102645542 A CN 102645542A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- bdnf
- reagent kit
- enzyme
- measuring reagent
- igg
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
Abstract
本发明公开了一种BDNF酶联免疫检测试剂盒，其包括：已包被BDNF-牛血清白蛋白连接物酶标；明胶；BDNF标准品；单克隆抗体BDNF-IgG；兔抗鼠IgG-辣根过氧化物酶结合物；邻苯二胺；稀释液和底物液。本发明的BDNF酶联免疫测定试剂盒合具有良好的特异性，可准确测定人血浆和体液中的BDNF的浓度。
Description
技术领域
本发明属于酶联免疫测定试剂盒，具体的涉及一种BDNF酶联免疫测定试剂盒。
背景技术
脑源性神经营养因子, Brain-derived neurotrophic factor, 简称BDNF, 是一个分泌性蛋白。最初发现在脑组织中。后来在其它组织中如视网膜, 神经组织, 肾和前列腺中。申请人首次发现BDNF在骨髓源间充质干细胞(MSC)中也有表达。申请人还首次发现BDNF在来源于骨髓增生异常综合症的MSC中表达比来源于正常人MSC中的表达明显增高。提示BDNF可用于MDS的临床诊断.
发明内容
本发明的目的在于提供一种BDNF酶联免疫测定试剂盒，可准确测定人血浆和体液中的BDNF的浓度。
为实现上述技术目的，达到上述技术效果，本发明通过以下技术方案实现：
BDNF酶联免疫测定试剂盒，其包括：
1）已包被BDNF-牛血清白蛋白连接物酶标板，-20℃保存；
2）明胶；
3）BDNF标准品，4℃保存；
4）抗体BDNF-IgG，4℃保存；
5）兔抗鼠IgG-辣根过氧化物酶结合物，-20℃保存；
6）邻苯二胺；
7）稀释液，用前用蒸馏水作1:10稀释；
8）底物液，用前用蒸馏水作1:10稀释。
本发明的检测原理如下：
固定在载体上的抗原（BDNF-BSA）与游离在溶液中的抗原（病人血浆标本）与随后加入的抗体发生竞争性结合，洗涤后加入酶标抗体，经洗涤再加底物显色。根据显色程度（OD值）即可从标准曲线上推算出待测样品BDNF含量。
与现有技术相比，本发明具有以下有益效果：
1、本发明的BDNF酶联免疫测定试剂盒合具有良好的特异性，可准确测定人血浆和体液中的BDNF的浓度；
2、本发明的BDNF酶联免疫测定试剂盒合在MDS的鉴别诊断灵敏度高，可保证良好的线性关系；
3、本发明的BDNF酶联免疫测定试剂盒合在-20℃条件下可以.保存6个月。
上述说明仅是本发明技术方案的概述，为了能够更清楚了解本发明的技术技术方案，并可依照说明书的内容予以实施，以下以本发明的较佳实施例。
具体实施方式
一种BDNF酶联免疫测定试剂盒，其包括：
1）已包被BDNF-牛血清白蛋白连接物酶标板，-20℃保存；
2）明胶，1.5g/瓶；
3）BDNF标准品，2000 pg/ml，4℃保存；
4）抗体BDNF-IgG，2 ml，滴度为1:1000，4℃保存；
5）兔抗鼠IgG-辣根过氧化物酶结合物，200 ug/ml，-20℃保存；
6）邻苯二胺（OPD），20 mg/瓶；
7）稀释液（PBS），0.1 M，用前用蒸馏水作1:10稀释；
8）底物液（Buffer2），0.2M，用前用蒸馏水作1:10稀释。
利用本发明的BDNF酶联免疫测定试剂盒的检测步骤如下：
1、一次反应
将BDNF标准品用0.1%明胶倍比稀释成8个浓度：1、2、4、8、16、32、64和128 pg/0.1ml，用0.1%明胶（PBS配制）将抗BDNF-IgG作1:10稀释。
零标准（B0）孔加稀释液100ul，标准（ST）孔加BDNF标准品100ul，样品（SMP）孔加待测样品100ul。
各孔均加抗体BDNF-IgG100ul。
37℃ 1hr或室温下3hr。
tween-20/PBS稀释液洗板3次。
2、二次反应
用0.1%明胶（稀释液配制）12 ml将兔抗鼠IgG-HRP稀释，各孔均加100ul（TA孔除外）。37℃ 1hr或室温下3hr。
tween-20/PBS洗板3次。
3、反应测定
用底物液新鲜配制OPD-H2O2基质（OPD浓度1mg/ml，每毫升底物液中加入0.5微升30% H2O2），每孔注入100ul。
室温放置20min或至显色较好时，用3M硫酸20ul终止反应。
置室温10min，在酶标检测仪上测定OD490，以TA孔调零。
4、计算
以BDNF标准品含量为横坐标，相应的B/B0%值为纵坐标，在半对数纸上作标准曲线，以样品孔B/B0%值从标准曲线上推算其BDNF浓度。
标本采集与保存：用2%EDTA-Na2(含0.7%NaCl)1:9抗凝，采血过程需顺利无气泡，防止血小板活化,标本均需立即3000rpm/min，离心15min后，取血浆，冻-20℃，可保存3个月。
试剂适用范围及有效期:测定人和动物的血浆、体液或组织中的BDNF的浓度，本药盒有效期可保存6个月（-20℃）。
以上所述仅为本发明的优选实施案例而已，并不用于限制本发明，对于本领域的技术人员来说，本发明可以有各种更改和变化。凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。
Claims (8)
1. BDNF酶联免疫测定试剂盒，其特征在于，包括：
1）已包被BDNF-牛血清白蛋白连接物酶标板；
2）明胶；
3）BDNF标准品；
4）抗体BDNF-IgG；
5）羊抗兔IgG-辣根过氧化物酶结合物；
6）邻苯二胺；
7）稀释液；
8）底物液。
2. 根据权利要求1所述的BDNF酶联免疫测定试剂盒，其特征在于：所述明胶为1.5 克/瓶。
3. 根据权利要求1所述的BDNF酶联免疫测定试剂盒，其特征在于：所述BDNF标准品为2000 pg/ml。
4. 根据权利要求1所述的BDNF酶联免疫测定试剂盒，其特征在于：所述抗体BDNF-IgG为2 ml，滴度为1:1000。
5. 根据权利要求1所述的BDNF酶联免疫测定试剂盒，其特征在于：所述兔抗鼠IgG-辣根过氧化物酶结合物为200 ug/ml。
6. 根据权利要求1所述的BDNF酶联免疫测定试剂盒，其特征在于：所述邻苯二胺为20 mg/瓶。
7. 根据权利要求1所述的BDNF酶联免疫测定试剂盒，其特征在于：稀释液为0.1M。
8.根据权利要求1至7中任意一项所述的BDNF酶联免疫测定试剂盒，其特征在于：底物液为0.2M。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN2012101165341A CN102645542A (zh) | 2012-04-20 | 2012-04-20 | Bdnf酶联免疫测定试剂盒 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN2012101165341A CN102645542A (zh) | 2012-04-20 | 2012-04-20 | Bdnf酶联免疫测定试剂盒 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN102645542A true CN102645542A (zh) | 2012-08-22 |
Family
ID=46658493
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN2012101165341A Pending CN102645542A (zh) | 2012-04-20 | 2012-04-20 | Bdnf酶联免疫测定试剂盒 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN102645542A (zh) |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN104483486A (zh) * | 2014-12-22 | 2015-04-01 | 扬州大学 | 一种鉴别鹿茸血片的试剂盒 |
| CN112098652A (zh) * | 2020-07-29 | 2020-12-18 | 西安交通大学 | 一种基于共价键合法固定捕获抗体的纸基酶联免疫吸附法 |
Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN101273064A (zh) * | 2005-06-06 | 2008-09-24 | 惠氏公司 | 抗-TrkB单克隆抗体及其用途 |
| US20090275496A1 (en) * | 2004-05-07 | 2009-11-05 | Peptimmune, Inc. | Effective quantitation of complex peptide mixtures in tissue samples and improved therapeutic methods |
| CN101605556A (zh) * | 2006-12-20 | 2009-12-16 | 瑞纳神经科学公司 | 治疗自体免疫疾病的trkb激动剂 |
-
2012
- 2012-04-20 CN CN2012101165341A patent/CN102645542A/zh active Pending
Patent Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US20090275496A1 (en) * | 2004-05-07 | 2009-11-05 | Peptimmune, Inc. | Effective quantitation of complex peptide mixtures in tissue samples and improved therapeutic methods |
| CN101273064A (zh) * | 2005-06-06 | 2008-09-24 | 惠氏公司 | 抗-TrkB单克隆抗体及其用途 |
| CN101605556A (zh) * | 2006-12-20 | 2009-12-16 | 瑞纳神经科学公司 | 治疗自体免疫疾病的trkb激动剂 |
Non-Patent Citations (2)
| Title |
|---|
| BETINA ELFVING ET AL: "Detection of brain-derived neurotrophic factor (BDNF) in rat blood and brain preparations using ELISA: Pitfalls and solutions", 《JOURNAL OF NEUROSCIENCE METHODS》 * |
| 何杨等: "酶联前列腺素E2方法的建立及临床应用", 《实验血液学杂志》 * |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN104483486A (zh) * | 2014-12-22 | 2015-04-01 | 扬州大学 | 一种鉴别鹿茸血片的试剂盒 |
| CN112098652A (zh) * | 2020-07-29 | 2020-12-18 | 西安交通大学 | 一种基于共价键合法固定捕获抗体的纸基酶联免疫吸附法 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Tabrizi et al. | High prevalence of vitamin D deficiency among Iranian population: a systematic review and meta-analysis | |
| Jukic et al. | Measurement of vitamin D for epidemiologic and clinical research: shining light on a complex decision | |
| CN101738473B (zh) | 梅毒螺旋体抗体诊断试剂盒及其制备方法 | |
| WO2000060357A1 (en) | Tandem immuno-assay for cancer | |
| CN103091499B (zh) | 一种肿瘤标志物钙网蛋白检测试剂盒的制备及应用 | |
| CN104502599B (zh) | 25-羟基维生素d定量检测试纸条及其应用 | |
| CN108139392A (zh) | Pivka-ii的测定方法及pivka-ii免疫测定试剂或试剂盒的制造方法 | |
| CN106771258A (zh) | 一种半乳糖凝集素‑3结合蛋白的检测试剂盒及其方法和应用 | |
| CN101329339B (zh) | 一种检测牛免疫球蛋白g的方法及其专用酶联免疫试剂盒 | |
| CN107709995A (zh) | 肺炎支原体检测用免疫层析分析装置 | |
| CN102621304A (zh) | 鹿布氏杆菌病间接酶联免疫吸附检测法 | |
| Salman et al. | Prevalence and predictors of vitamin D inadequacy: a sample of 2,547 patients in a Mediterranean country | |
| CN109444421A (zh) | 一种nse检测试纸条的制备方法、试纸条、检测卡及nse检测试剂盒 | |
| CN102735850A (zh) | 定量检测人血清促甲状腺素受体抗体的酶联免疫分析试剂盒及检测方法 | |
| CN102645542A (zh) | Bdnf酶联免疫测定试剂盒 | |
| Whicher | BCR/IFCC reference material for plasma proteins (CRM 470) | |
| McLachlan et al. | Studies of thyroglobulin autoantibody synthesis using a micro-ELISA assay | |
| CN101236200A (zh) | 氯丙嗪的酶联免疫试剂盒及其检测方法 | |
| CN102520156A (zh) | 血栓烷b2酶联免疫测定试剂盒 | |
| CN105651996A (zh) | 一种新型隐球菌荚膜多糖抗原免疫检测试剂盒及其制备方法与应用 | |
| Lanzillo et al. | Development of competitive enzyme immunoassays for human serum angiotensin-1-converting enzyme: a comparison of four assay configurations | |
| Liang et al. | A luciferase immunosorbent assay for quantitative detection of IgG antibodies against SARS-CoV-2 nucleoprotein | |
| CN104330562B (zh) | 梅毒螺旋体特异性抗体高通量检测试剂盒及其制备方法 | |
| WO2020211317A1 (zh) | 一种检测人体可溶性去唾液酸糖蛋白受体的方法 | |
| CN105866409A (zh) | 一种念珠菌甘露聚糖抗原免疫检测试剂盒及其制备方法与应用 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| C06 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| C10 | Entry into substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| C02 | Deemed withdrawal of patent application after publication (patent law 2001) | ||
| WD01 | Invention patent application deemed withdrawn after publication |
Application publication date: 20120822 |