CN102603372A - 简易烟草专用am真菌菌肥生产工艺 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种简易烟草专用AM真菌菌肥生产工艺。它是通过盆栽法繁殖与烟草互作良好的AM真菌摩西球囊霉获得接种剂，进一步田间扩大生产获得富含真菌孢子、菌丝、基质和植物根段的细颗粒状混合物，风干后再加入等体积的腐殖质，混合均匀后配制成烟草专用AM真菌菌肥。该菌肥既能够促进烟草的生长，提高烟叶的品质，降低和减轻植物病害，又充分利用了土壤中营养成分。在正常肥水管理条件下，使用该菌肥能够增加25～30％的亩产量，中下部烟叶K含量增加4～5％；在氮磷肥减半条件下，使用该菌肥能够增加15～20％的亩产量，中下部烟叶K含量增加5％以上，因此降低了烟草专用肥使用量。

Description

简易烟草专用AM真菌菌肥生产工艺
技术领域
本发明涉及一种AM真菌的肥料制品生产工艺，尤其是能够促进烟草的生长，提高烟叶的品质，降低和减轻植物病害，减少化肥使用量的AM真菌菌肥生产工艺。
背景技术
微生物肥料又称接种剂、生物肥料、菌肥等，是指含有特定微生物活体的制品。它应用于农业生产，通过其中所含微生物的生命活动，增加植物养分的供应量或促进植物生长，提高产量，改善农产品品质及农业生态环境。目前我国的微生物菌肥主要是以根瘤菌等形式的微生物菌肥，而丛枝菌根(Arbuscularmycorrhiza，AM)真菌作为一种菌肥，其使用对经济和环境发展的促进作用逐渐被重视，在国外已有AM菌肥产品销售，而我国对于AM菌肥的研制尚处于起步阶段。由于AM真菌是专性活体营养型真菌，AM菌剂常用的生产方法有盆栽培养法、静止液培养法、流动液培养法、气雾培养法、大田培养法等。上述方法各有利弊，通常一般微生物菌肥都会存在菌种繁殖量少，菌种的有效性低，接种后在植株根系存活时间短，效果差，产品保质期短等问题。因而在筛选出与作物共生良好的AM真菌菌株后，如何提高AM真菌繁殖效率和改进AM菌肥生产工艺成为AM真菌菌肥生产应用的至关重要的课题。但是AM真菌对于不同的植物具有选择性，并且不同的AM真菌菌株对相同植株的影响效果也不相同，因此在深入了解有关微生物特性的基础上，需要进行菌株的筛选、繁殖条件的改善、有机添加物的比例的研究，尤其是在产品保质期方面需要开展深入的研究，使其发挥互惠、协同、共生等作用。
发明内容
为了解决上述问题，本发明提供了一种简易烟草专用AM真菌菌肥生产工艺，并进行了大田实验验证，使得该微生物菌肥菌种繁殖量可根据繁殖面积控制，且繁殖方法简单，接种后在植株根系存活时间长，可以随根系的生长进行扩繁，效果良好，收获后在基质中至少存活2年以上。
本发明解决其技术问题所采用的技术方案是：一种简易烟草专用AM真菌菌肥生产工艺，其特征是，
(1)AM真菌的繁殖：以高丹草为宿主，通过盆栽法繁殖与烟草互作良好的AM真菌摩西球囊霉(Glomus mosseae)，待宿主植株生长周期结束后，停止施水肥，待地上部分完全死亡后，将根系和基质风干、打碎(根系粉碎)后，作为接种剂保存；所述繁殖用基质为：体积比为2∶2∶1的草炭土、田间土和河沙，接种量为5～15g/kg基质；
(2)AM真菌的扩大生产：将田间(或花盆)表层土消毒后，将田间土下翻40～50cm，按草炭土、田间土、河沙为2∶2∶1的体积比添加草炭土和河沙；将步骤(1)的接种剂撒施于其中，同时播种三叶草、高丹草和烟草(三叶草和高丹草的种植数量比为1∶1～2，所述烟草的种植数量与三叶草和高丹草种植总量的比例为1∶45～55)的种子；生长3～4个月后，收获表层20cm的土壤，打碎(根系粉碎)，获得富含真菌孢子、菌丝、基质和植物根段的细颗粒状混合物；所述接种剂的加入量为基质(草炭土、田间土和河沙)体积的1/3；
(3)菌肥的配制：步骤(2)的细颗粒状混合物经风干后，加入等体积的腐殖质，混合均匀后配制成烟草专用AM真菌菌肥；所述腐殖质的组成为50％(体积)的菌糠和50％(体积)的牛粪。
本发明的创新点为：
(1)建立AM真菌的最佳繁殖方法。选用与烟草互作良好的AM真菌摩西球囊霉(Glomus mosseae)为菌株，以高丹草为宿主，使用盆钵培养法，在6种不同比例的繁殖基质Ⅰ，Ⅱ，Ⅲ，Ⅳ，Ⅴ，Ⅵ进行繁殖(繁殖方法同实施例1，基质理化性质如表1所示)。利用繁殖参数和生长参数进行筛选(表2)，确定了一种最佳的繁殖基质(体积比为2∶2∶1的草炭土、田间土和河沙)，并确定了AM真菌繁殖的最适基本理化性质(表1中第Ⅵ组)。
表1 各基质理化性质一览表
Figure BDA0000150727580000031
表2 AM真菌繁殖参数和宿主生长参数
Figure BDA0000150727580000032
(2)确定了一个最佳的菌肥生产方法及菌肥配比，并在位于山东青岛平度的烟草基地进行推广试验(如实施3)。结果表明，本发明能够降低叶片的感病率(如图1所示)，使烟草开花时间提前(如图2所示)，增加根系侧根数量(如图3所示)，并且增加30％的亩产量，下部烟叶K含量增加4～5％；在烟草专用肥使用量减半后使用本发明与正常施肥效果基本一致(表3)。
本发明的有益效果是：本发明简化了AM真菌菌肥生产工艺，可根据繁殖面积控制菌肥生产，所生产的AM真菌菌肥能够促进烟草的生长，提高烟叶的品质，降低和减轻植物病害，又充分利用了土壤中营养成分。
附图说明
图1为AM真菌菌肥处理对烟草生长的影响图；
图2为AM真菌菌肥处理对烟草开花的影响图；
图3为AM真菌菌肥处理对烟草根系侧根生长的影响图；
具体实施方式
实施例1 AM真菌繁殖
(a)繁殖基质配制：将草炭土、田间土、河沙按照2∶2∶1(体积比)预混，使用聚乙烯袋装袋(1kg/袋)，繁殖基质理化性质如表1中第Ⅵ组所示。
(b)灭菌：将装好的灭菌袋放入灭菌锅，121℃保持6h以上，培养容器(或花盆)经甲醛灭菌24h。
(c)接种：先在培养容器底部装入约1/5的基质后，每隔1～5cm基质，开始逐层撒匀AM真菌摩西球囊霉接种物(接种量为10g/kg基质)，直至培养容器体积的4/5，接种前需将手洗净。
(d)播种：宿主高丹草种子经灭菌后用蒸馏水冲洗3次，于26℃恒温箱内催芽后，均匀播种于基质表面，覆膜；播种后第1周开始，每周施1/4Hoagland营养液2次，每次100mL/盆(2.5kg基质)。
(e)培养：在常规的光照、温度、水分条件下生长3个月后进行AM真菌繁殖参数检测和收集。其AM真菌繁殖参数和宿主生长参数如表2第Ⅵ组所示。
(f)收集和保存：待宿主植株高丹草生长周期结束后，停止施水肥，待地上部分完全死亡后，将根系和基质风干、粉碎或打碎后，作为接种剂放置于通风、干燥、避免阳光直射的4～20℃室内保存。
实施例2 AM真菌菌肥制作方法
材料：草炭土，田间土，河沙，腐殖质(50％(体积)的菌糠和50％(体积)的牛粪)；菌糠的原料为普通蘑菇残渣，牛粪为普通奶牛粪便经过腐熟后使用。
(a)灭菌：草炭土、田间土、河沙、腐殖质混匀后必须经过高温121℃干热灭菌6h以上。
(b)菌肥的配制：在排水良好的田间，用95％的甲醛溶液熏蒸，将表层土消毒，然后将田间土下翻40～50cm，田间(或花盆)中添加草炭土和河沙(按草炭土、田间土、河沙体积比为2∶2∶1的比例)，将步骤(1)制作的接种剂(接种剂为基质体积的1/3)撒施在土壤中，再同时播种三叶草、高丹草和烟草的种子(三叶草、高丹草和烟草的种植比例为25∶25∶1)。常规管理，不施磷肥和施少量N肥(施氮肥量为25～30mg/kg)；不用杀菌剂。生长3～4个月后，收获表层20cm的土壤，打碎(根系粉碎)，获得富含真菌孢子、菌丝、基质和植物根段的细颗粒状混合物，经风干后，加入等体积的腐殖质作为烟草AM真菌菌肥。
实施例3烟草AM真菌菌肥使用方法
(a)接种：将菌肥与假植期烟草的专用基质(每666.7m2按20kg粉碎的麦秸、10kg圈肥、10kg土表土的比例进行沤制)按比例1∶2(体积比)混合使用。
(b)管理：按烟草常规管理进行，施用烟草专用化肥(绥化隆福肥料责任有限公司生产)。
表3 AM真菌菌肥对全肥和半肥处理后烟草的产量和K含量的影响
Figure BDA0000150727580000061
结果如图1-3和表3(全肥)所示，结果表明：AM真菌菌肥能够降低叶片的感病率，使烟草开花时间提前，增加根系侧根数量。在正常肥水管理条件下使用该菌肥能够增加25～30％的亩产量，中下部烟叶K含量增加4～5％；在氮磷肥减半条件下，使用该菌肥能够增加15～20％的亩产量，中下部烟叶K含量增加5％以上(表3中为11.2％)。

Claims (3)

1.一种简易烟草专用AM真菌菌肥生产工艺，其特征是，
(1)AM真菌的繁殖：以高丹草为宿主，通过盆栽法繁殖AM真菌摩西球囊霉，待宿主植株生长周期结束后，停止施水肥，待地上部分完全死亡后，将根系和基质风干、打碎后，作为接种剂保存；所述繁殖用基质为：体积比为2∶2∶1的草炭土、田间土和河沙，接种量为5-15g/kg基质；
(2)AM真菌的扩大生产：将田间表层土消毒后，将田间土下翻40～50cm，按草炭土、田间土、河沙为2∶2∶1的体积比添加草炭土和河沙；将步骤(1)的接种剂撒施于其中，同时播种三叶草、高丹草和烟草的种子；生长3～4个月后，收获表层20cm的土壤，打碎，获得富含真菌孢子、菌丝、基质和植物根段的细颗粒状混合物；所述接种剂的加入量为草炭土、田间土和河沙总体积的1/3；
(3)菌肥的配制：步骤(2)的细颗粒状混合物经风干后，加入等体积的腐殖质，混合均匀后配制成烟草专用AM真菌菌肥；所述腐殖质的组成为50％(体积)的菌糠和50％(体积)的牛粪。
2.如权利要求1所述的简易烟草专用AM真菌菌肥生产工艺，其特征是，所述步骤(2)中三叶草和高丹草的种植数量比为1∶1～2，所述烟草的种植数量与三叶草和高丹草种植总量的比例为1∶45～55。
3.权利要求1或2所生产的烟草专用AM真菌菌肥。
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