CN102559836A - 用于检测亲密度影响指数的试剂、试剂盒、方法及其应用 - Google Patents
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Abstract
本发明提供了用于从哺乳动物口腔内释放嗜中性白血球细胞的溶液，以及包含所述溶液的试剂盒。此外，本发明还提供了检测哺乳动物亲密度影响指数的方法。所述亲密度影响指数可以由从口腔中所获取的嗜中性白血球细胞数或嗜中性白血球细胞特有的成分或产物的浓度所表达。此外，本发明还公开了检测哺乳动物口腔卫生改善情况的方法。
Description
技术领域
本发明属于卫生健康领域，具体而言，本发明涉及检测亲密度影响指数的方法、该方法所涉及的试剂和试剂盒及其应用。
背景技术
人类作为一个庞大的生物群体，时时刻刻存在着人际之间的交往。人际关系和交往对其个人的生活素质和发展有着极为重要的影响，尤其是在经济高速发展的全球化时代，人们都希望得到尊重和喜爱。
人们往往通过衣着、妆扮、体育锻炼、生活卫生习惯以及提升生活素养和品质等方面来提升自己的形象，达到营造和谐社会关系的目的。这些都是可以看见和感觉到的影响人际关系的现象和事物，也是人际关系参与者本人可掌控和感受到的，属于视觉范畴。
属于嗅觉范畴的现象和事物也直接影响着人际关系，例如来自口腔的各种气味也在不同程度上直接对人与人之间的交往造成影响。口腔是进入人体内的通道，许多事件在此发生。口腔接受食物，并将固体的食物颗粒变小，与唾液混合，启动消化过程。口腔粘膜以及唾液腺体分泌提供润滑液，帮助言语表达、吞咽和食物消化。因此，口腔特别容易发生感染、损伤或各种有害状况，包括龋齿、牙周疾病、口腔溃疡等。而口腔内发生的有些情况如不良嗅觉、口臭，甚至多痰、打鼾等都是影响人际关系的因素。
目前，针对上述影响人际交往中的亲密度的各种因素，尚未有一个统一的检测方法或判断标准。尤其目前尚无统一的检测方法来检测由不良嗅觉引起的影响人际关系的因素，更没有一个指标来量化这些因素。
发明内容
为了解决上述技术问题，本发明提供涉及这一领域的检测方法及相关产品。具体而言，本发明涉及检测不良气味对亲密度的影响，该不良气味的主要来源为口腔。
为有助于理解本发明，下面定义了一些术语。本文定义的术语具有本发明相关领域的普通技术人员通常理解的含义。
除非另外说明，本文所用的术语“亲密度影响指数”是指影响人际关系和亲密程度的、可以进行科学检测的量化性指标。亲密度指数的建立和检测有利于人们科学地了解自身的状态，及时进行科学干预、消除影响人际关系和亲密程度的负面性因素。在人与人的交往过程中，口头上的语言表达是至关重要的；语言上的表达和沟通需要人与人之间相对近距离的接触而实现。口腔的健康状态是影响近距离交流的重要因素。。在本申请中，所述“亲密度影响指数”具体由口腔内可收集到的嗜中性白血球细胞的数量代表。
除非另外说明，本文所用的术语“个性化的亲密度影响指数”由检测对象口腔内嗜中性白血球细胞数或其特异性成分(或产物)浓度的增长倍数表示，该指数的计算公式如下：
Ii＝nt/nh
其中的Ii为个性化的亲密度影响指数；nt为从检测对象中获取的嗜中性白血球细胞数目或其特异性成分(或产物)浓度；nh为该检测对象在无炎症的健康情况下所获取的嗜中性白血球细胞数目或其特异性成分(或产物)浓度。
除非另外说明，本文所用的术语“比较性亲密度影响指数”由检测对象的嗜中性白血球细胞数或其特异性成分(或产物)浓度，相对于无炎症的健康参照者的增长倍数。该指数的计算公式如下：
Ic＝nt/nr
其中的Ic为比较性亲密度影响指数；nt为从检测对象中获取的嗜中性白血球细胞数目或其特异性成分(或产物)浓度；nr为无炎症的健康参照者的嗜中性白血球细胞数目或其特异性成分(或产物)浓度。根据本发明的一个具体实施方式，无炎症的健康参照者的嗜中性白血球细胞数目(nr)为10,000。
为了解决上述技术问题，本发明的一个目的是提供一种用于检测亲密度指数和/或释放口腔内嗜中性白血球细胞的溶液。
本发明的另一个目的是提供用于检测亲密度指数和/或口腔内嗜中性白血球细胞数量的试剂盒。
本发明又一个目的是上述溶液和试剂盒在制备检测口腔内嗜中性白血球细胞数量的产品中的用途。
本发明再一个目的是提供检测哺乳动物亲密度影响指数的方法。
本发明还一个目的是提供一种检测哺乳动物口腔卫生改善情况的方法。
本发明的目的是通过以下技术方案来实现的。
一方面，本发明提供一种用于释放口腔内嗜中性白血球细胞的溶液，其特征在于，所述溶液包括用于释放口腔内嗜中性白血球细胞的盐离子和酸离子；
其中盐离子和酸离子由化合物提供，优选地，提供所述盐离子和酸离子的化合物选自氯化钾，氯化钠和磷酸钠的一种或多种；
所述溶液可进一步包含用于提供细胞所需能量的化合物；优选地，提供所述细胞所需能量的化合物为D-葡萄糖。
所述溶液可进-步包含用于调节该溶液的PH值和缓冲性能的化合物；优选地，所述化合物为无水磷酸二氢钾，磷酸钠和无水磷酸氢二铵的一种或多种。
此外，所述溶液还可进一步包含用于着色的化合物；优选地，所述化合物为酚红钠。
进一步优选地，所述溶液中包含：0.01-10.00克/L氯化钾，0.01-10.00克/L无水磷酸二氢钾，0.01-10.00克/L氯化钠，0.01-10.00克/L无水二元磷酸钠，0.01-10.00克/LD-葡萄糖和0.01-0.02克/L酚红钠；
更优选地，所述溶液包括0.4克/L氯化钾，0.06克/L无水磷酸二氢钾，8.0克/L氯化钠，0.04788克/L无水二元磷酸钠，1.0克/L D-葡萄糖和0.011克/L酚红钠。
并且，所述溶液可以为水溶液、酒精溶液或葡萄糖溶液；
优选地，所述酒精溶液中的酒精浓度为1-70％(V/V)；或
优选地，所述葡萄糖溶液中的葡萄糖浓度为0.1-15％(g/ml)。
另一方面，本发明提供一种用于检测口腔内嗜中性白血球细胞数量的试剂盒，所述试剂盒包括上述用于释放口腔内嗜中性白血球细胞的溶液。
在上述试剂盒中，还可以进一步包括用于特异性固定所述嗜中性白血球细胞的固定剂和/或用于对所述嗜中性白血球细胞进行特异性染色的染色剂；
优选地，所述固定剂为甲醛，所述染色剂为吖啶橙。
此外，所述试剂盒还可以进一步包括检测嗜中性白血球细胞的特异成分或产物所需的检测试剂；优先地，所述特异性成分为：中性粒细胞弹性蛋白酶，组织蛋白酶G，髓过氧化物酶，乳铁蛋白和明胶酶的一种或多种；其检测试剂包括检测该特异蛋白所需的抗体及其相应的检测试剂；其检测试剂为酶联反应所需的试剂。
又一方面，本发明提供上述溶液或上述试剂盒在制备检测哺乳动物口腔内嗜中性白血球细胞数量的产品中的用途；优选地，所述哺乳动物是人。
再一方面，本发明提供一种检测哺乳动物亲密度影响指数的方法，所述方法包括：检测包含所述哺乳动物口腔内含物的样本中嗜中性白血球细胞的数量；
优选地，所述亲密度影响指数为个性化的亲密度影响指数或比较性亲密度影响指数；
优选地，所述哺乳动物是人。
其中，上述方法优选具体包括：
1)使所述哺乳动物用适量溶液漱口，从而获得包含所述哺乳动物口腔内含物的溶液；
2)使用固定剂固定经步骤1)获得的溶液中的嗜中性白血球细胞；
3)使用染色剂将经步骤2)固定的嗜中性白血球细胞进行染色并计数；
优选地，在步骤2)前，先离心所述包含哺乳动物口腔内含物的溶液；进一步优选地，所述离心速度为20-100g，时间为10-30分钟；更优选地，所述离心速度为20g，时间为10分钟。
并且，所述步骤1)中的溶液优选为上述用于从哺乳动物口腔内释放嗜中性白血球细胞的溶液；
所述步骤2)中的固定剂优选为甲醛；进一步优选地，所述固定剂为2.5％(g/ml)的甲醛水溶液；
所述步骤3)中的染色剂优选为吖啶橙；进一步优选地，所述染色剂为1.6％(g/ml)的吖啶橙水溶液。
此外，所述方法进一步包括通过将所述样本中检测到的嗜中性白血球细胞的数量和被检测哺乳动物在健康状态下口腔内的嗜中性白血球细胞的数量进行比较，计算所述哺乳动物的个性化的亲密度影响指数。
可选地，所述方法进一步包括通过将所述样本中检测到的嗜中性白血球细胞的数量和健康状态下的哺乳动物参照者口腔内的嗜中性白血球细胞的数量进行比较，计算所述哺乳动物的比较性亲密度影响指数；优选地，所述健康状态下的哺乳动物参照者口腔内的嗜中性白血球细胞的数量为10000。
本发明还提供另外一种检测哺乳动物亲密度影响指数的方法，所述方法包括：检测包含所述哺乳动物口腔内含物的样本中嗜中性白血球细胞特异成分或产物的含量，所述特异成分如中性粒细胞弹性蛋白酶，组织蛋白酶G，髓过氧化物酶，乳铁蛋白和明胶酶。这些特异蛋白可以采用本领域常规技术，使用相应的抗体，通过酶联反应来进行检测。
优选地，所述亲密度影响指数为个性化的亲密度影响指数或比较性亲密度影响指数；
优选地，所述哺乳动物是人。
此外，所述方法进一步包括通过将所述样本中检测到的嗜中性白血球细胞特异成分或产物的含量和被检测哺乳动物在健康状态下口腔内的嗜中性白血球细胞特异成分或产物的含量进行比较，计算所述哺乳动物的个性化的亲密度影响指数。
可选地，所述方法进一步包括通过将所述样本中检测到的嗜中性白血球细胞特异成分或产物的含量和健康状态下的哺乳动物参照者口腔内的嗜中性白血球细胞特异成分或产物的含量进行比较，计算所述哺乳动物的比较性亲密度影响指数。
还一方面，本发明提供一种检测哺乳动物口腔卫生改善情况的方法，所述方法包括：
在对哺乳动物口腔卫生进行改善之前和之后，根据上述任一项方法分别检测哺乳动物亲密度影响指数，然后比较改善之前和之后的亲密度影响指数；
优选地，所述亲密度影响指数为个性化的亲密度影响指数或比较性亲密度影响指数；
优选地，所述哺乳动物是人。
以下是本发明的详细描述：
炎症是一种应对感染、损伤或各种有害状况的重要免疫反应。炎症过程对机体来说是很重要的，因为它服务于修复损伤、杀伤病原微生物和肿瘤的过程中。
本发明在下文披露了发生并嵌入口腔黏膜组织中的以前未知的炎症来源。清除该炎症来源，可以治愈病人的慢性牙周炎和经常性溃疡，以及口臭等不良口腔状态。这表明，嵌入黏膜组织的炎症是与炎症相关的口腔疾病和不良口腔状态的一种诱因。
选择参与这项研究的志愿者，该志愿者45岁，患有15年的牙周炎病，由三个不同的牙周炎专家确诊。该患者每三月就需要到牙周炎专科进行专业清理，也经常遭受口腔溃疡的困扰(图1A)。
采用一个Y形的特制清洗工具对该患者粘膜和牙龈组织进行了彻底的清洁。该工具的设计专门优化了清洗能力、并可避免伤害任何有关组织(图1B)，被称之为除炎刷(具体参见CN201010109442.1)。用除炎刷对口腔黏膜组织进行刷擦，然后用水冲洗。发白的残渣从口腔黏膜组织中释放出来，偶尔会有血迹的出现，但没有发生持续出血现象。
随后，溃疡样点(ulcer-like spot)出现在附近的黏膜牙龈交界处(图1C)的黏膜组织上。令人惊奇的是，褐色分泌物从溃疡样点中释放出来(图2A)。该分泌物用Türk’s溶液进行染色，然后在荧光显微镜下进行了观察。很显然，该分泌物中含有大量的嗜中性白血球(neutrophil)(图2B)，这些细胞都含有典型的多形核特征(图2C)。该样本由吖啶橙(Acridine orange)进行了染色，在荧光显微镜下被证实含有嗜中性白血球(图2D)。
该褐色分泌物似乎含有一个具有结构单元的嗜中性白血球聚集群体，这些汇集一起的嗜中性白血球群体被称之为口炎斑(oral inflammatory plague)。在褐色分泌物中出现的嗜中性白血球是一种炎症症状；嗜中性白血球释放可以损伤牙齿和组织的分解酶。从一个溃疡样点中可释放出多于10个口炎斑，随后溃疡样点被治愈。然后口炎斑将不会再从患过溃疡样点的部位中释放出来。口炎斑存在于溃疡样点中的时侯，患者会在该部位有一种热度和不舒服的感觉。一旦口炎斑被释放出来，患者就立刻感到一种如释重负的感觉。这些都表明口炎斑是一种炎症反应。
据推测，口炎斑嵌入在黏膜组织中(图3)。支持这一想法的事实是，需要花时间和力量将口炎斑从黏膜组织中释放出来。很多口炎斑可汇集在一起，由于黏膜组织的折叠，口炎斑被嵌入其中，形成一种“结”状构造，被称之为“口炎结”(oral inflammatory knotitis)。口炎结可导致可见的炎症症状，如上述所说的溃疡样点(图3)。在溃疡样点处可见的白色残渣或沉淀物可能是由嗜中性白血球所致的细胞死亡而造成的。
通过除炎刷清洗的过程，发现在这个病患者含有12个以上的溃疡样点。这些溃疡样点存在于黏膜牙龈交界处附近、舌头下边、腭扁桃体附近，并在脸颊内部；这些都是不能轻易被当前口腔清洁措施所清理的地方。有些溃疡样点比其它更难清除，可能是因为其所在部位、大小和复杂程度所致。从一个溃疡样点中释放出来的口炎斑的数目有所不同，有的有10个左右，有的高达100个以上。有的口炎斑为褐色，有的口炎斑为黄色。口炎斑的体积也有所变化，有的在10微升左右，有的高达200微升以上。从这个病患者中释放的口炎斑总量估计在10毫升以上。口炎斑中嗜中性白血球的浓度估测在107/ml左右。因此，该病患者的口腔黏膜组织中含有至少108个嗜中性白血球。这可能是一个具有显著影响力的炎症反应，由此而导致口腔疾病。
当12个溃疡样点中的3至5个被清除后，该病患者注意到他已经没有牙周炎疾病了。这表明清除溃疡样点是治疗牙周炎的有效措施。令人惊喜的是，随着溃疡样点的进一步清除，患者的口腔溃疡也较少发生。在溃疡样点清除结束后，该患者也不再遭受口腔溃疡的困扰了。这表明口腔炎症是导致口腔复发性溃疡的诱因。
该病患者也注意到，在溃疡样点清除以后，他的口臭问题也得以消除。可以想象，被困在溃疡样点里面的微生物是导致口臭的原因(图3)。有趣的是，他的感觉系统改善了，他能闻到更多的气味。据推测，在口腔中的嗜中性白血球可能会破坏呼吸系统中的感觉细胞。因此，清除溃疡样点可治疗牙龈疾病，也有益于身体健康。
上述研究表明，当前口腔卫生习惯的不足，导致了食品残留(图2B)，细胞碎片(白色沉淀物，如图1)和微生物(口臭问题)的积累，这些将导致炎症和不良口腔状态，诱发嗜中性白血球的聚集(图3)。
因此，在口腔内的口臭等不良口腔状态可以由口腔内可收集的嗜中性白血球数目来代表。亲密度影响指数可以采用从口腔中取得的嗜中性白血球数量来进行计算。这些嗜中性白血球细胞的数目可以在进行特异性染色之后，在显微镜下进行计算；此外，这些嗜中性白血球细胞的数目可以通过计算这些嗜中性白血球细胞的特异性成分或产物的浓度所代表。
根据本发明的一个具体实施方式，个性化的亲密度影响指数(intimacy-interfering index of an individual)(Ii)的表达方式，为该个体由炎症所致的嗜中性白血球细胞数或其特异性成分(或产物)浓度的增长倍数。该指数的计算公式如下：
Ii＝nt/nh
其中Ii为个性化的亲密度影响指数；nt为从检测对象中获取的嗜中性白血球细胞数目或其特异性成分(或产物)浓度；nh为该检测对象在无炎症的健康情况下所获取的嗜中性白血球细胞数目或其特异性成分(或产物)浓度。
在另一个具体实施方式中，比较性亲密度影响指数(intimacy-interferingindex of comparison)(Ic)的表达方式为检测对象的嗜中性白血球细胞数或其特异性成分(或产物)浓度，相对于无炎症的健康参照者的增长倍数。该指数的计算公式如下：
Ic＝nt/nr
其中Ic为比较性亲密度影响指数；nt为从检测对象中获取的嗜中性白血球细胞数目或其特异性成分(或产物)浓度；nr为无炎症的健康参照者的嗜中性白血球细胞数目或其特异性成分(或产物)浓度。在其中的一个实施例中，无炎症的健康参照者的嗜中性白血球细胞数目(nr)为10,000。
需要指出的是，亲密度影响指数是嗜中性白血球细胞数或其特异性成分(或产物)浓度的增长倍数，这可以反映亲密度影响的程度。
此外，嗜中性白血球细胞数目或其特异性成分(或产物)从口腔释放出的效率，受所用取样缓冲液和条件的影响。本发明公开了可以产生一致性和可重复性结果的取样缓冲液、程序和条件。
本发明提供了涉及检测亲密度影响指数的方法及其相关产品。首先，本发明提供了一种用于从哺乳动物口腔内释放嗜中性白血球细胞的新型溶液，采用该溶液作为口腔内含物中嗜中性白血球细胞的取样溶液，可以从口腔释放嗜中性白血球，而不伤害人体，并能固定保留嗜中性白血球的多形核特征，可以确保获得具有一致性和可重复性的结果；其次，基于上述溶液以及包括该溶液的试剂盒，本发明提供了检测亲密度影响指数的方法，通过测量口腔内嗜中性白血球细胞的数量，可间接检测和评价影响人际关系度的指数。
附图说明
以下，结合附图来详细说明本发明的实施例，其中：
图1为溃疡样点及其清除工具，其中1A：溃疡出现在腭扁桃体附近；1B：一个专门设计的工具“除炎刷”，它可以用来清除嵌入在口腔中的炎症源；1C：一个溃疡样点出现在黏膜牙龈交界处附近；1D：溃疡样点清洗后痊愈。
图2为口炎斑和嗜中性白血球，其中2A：用除炎刷清洗后，从一个溃疡样点释放来的褐色分泌物(箭头所示)；2B：褐色分泌物用Türk’s溶液染色，该分泌物含有大量的嗜中性白血球，食物残渣似乎是相关的(箭头)；2C：分泌物中的细胞具有典型的多形核特征；2D：样品用吖啶橙(Acridineorange)染色，在荧光显微镜下观察。
图3为口腔内发生炎症提出的模型。
具体实施方式
下面结合具体的实施例，并参照数据进一步详细描述本发明。应理解，这些实施例只是为了举例说明本发明，而非以任何方式限制发明的范围。
在以下的实施例中，未详细描述的各种过程和方法是本领域中公知的常规方法。所用试剂的来源、商品名以及有必要列出其组成成分者，均在首次出现时标明，其后所用相同试剂如无特殊说明，均以首次标明的内容相同。
实施例1：对口腔中释放的嗜中性白血球细胞数的检测
此实施例中测试了接受溃疡样点清除治疗的患者(下称“一号病人”)和未接受相应治疗的普通患者(下称“二号病人”)在10个月前后的口腔内的嗜中性白血球细胞数目。
所述一号病人45岁，患有15年牙周炎，伴随有偶尔的口臭和口腔溃疡；二号病人30岁，患有口腔溃疡并且经常发生口臭。
在2010年1月1日和2010年10月2日分别对一号病人和二号病人分别进行了口腔嗜中性白血球细胞数目的检测，具体检测步骤如下：
1、收集口腔中的嗜中性白血球细胞，用适量的取样缓冲液漱口，以释放口腔中的嗜中性白血球细胞。采用15毫升的取样缓冲液进行两次洗漱口腔，每次30秒，从口中释放嗜中性白血球细胞，将所得的漱口液样本混合为30毫升的样本。该取样缓冲液为0.4克/L氯化钾，0.06克/L无水磷酸二氢钾，8.0克/L氯化钠，0.04788克/L无水二元磷酸钠，1.0克/L D-葡萄糖和0.011克/L酚红钠；
2、用固定液将嗜中性白血球细胞固定。采用2.5％的甲醛固定嗜中性白血球细胞，然后在4摄氏度环境下储藏，直至使用。
3、如果嗜中性白血球细胞浓度偏低，需要将其浓缩，以便于准确计算。在这一具体的实施例中，在20g的离心转速下，集中嗜中性白血球细胞。
4、在进行特异性染色之后，检测和计算嗜中性白血球细胞数。在这一具体的实施例中，嗜中性白血球细胞由1.6％的吖啶橙(Aridine orange)(AO)染色，然后在荧光显微镜下进行观察和计数。
嗜中性白血球细胞数也可以由该细胞所特有的成分(或产物)浓度所反映；在口腔取样时，可收集这一特有的成分(或产物)，然后进行定量分析，测定其浓度。所测定的嗜中性白血球细胞特有成分(或产物)可能是蛋白质、去氧核糖核酸、核糖酸或其它在其细胞所特有的成分(或产物)。这些特有成分(或产物)的检测和定量分析，可以由现有的可知的方法进行。在科技文献中，现有很多方法用来检测蛋白质、去氧核糖核酸、核糖酸和其它化合物。比如说，ELISA可以检测蛋白质；PCR可以检测去氧核糖核酸；特异性探针杂交可以检测RNA；小分子化合物可以由高压液相色谱或气象色谱检测等等。
检测结果见下表1。
表1、一号病人和二号病人的嗜中性白血球细胞数和亲密度影响指标的比较
如表1所述，一号病人接受了清除溃疡样点的治疗，而二号病人没有接受相应的治疗。一号病人在2010年1月1日取样时，偶尔患有口臭和口腔溃疡，此时所释放的嗜中性白血球细胞数目为25×104。令人惊讶的是，当同一病人在9个月之后取样(即2010年10月2日)，该病人也不再患有任何的口臭和口腔溃疡，此时所释放的嗜中性白血球细胞数目为1×104。另一方面，从二号病人口腔中所释放的嗜中性白血球细胞数，在两次不同的取样中，几乎一致，即使取样时间相隔9个月。二号病人继续经常患有口臭和口腔溃疡。这些研究表明从口腔中释放的嗜中性白血球细胞数能反映口腔中炎症的程度。
实施例2：根据实施例1中口腔嗜中性白血球细胞数检测结果计算亲密
度影响指数
本实施例根据实施例1中口腔嗜中性白血球细胞数检测结果来进行亲密度影响指数的计算。如表1中所述，一号病人接受了溃疡样点清除治疗，在2010年1月1日(即治疗之前)，在该病人口腔中所收集的嗜中性白血球细胞(nt)为：25X104；在2010年10日2日(即治疗之后)，从该病人的口腔中所收集的嗜中性白血球细胞数(nh)为：1X104，也就是说该病人的嗜中性白血球细胞数减少了25倍。由此可以反推出，该病人在治疗之前的个性化亲密度影响指数(Ii)为：25X104/1X104＝25。而该病人在治疗之后，其个性化亲密度影响指数(Ii)为：1X104/1X104＝1。
上述一号病人经过溃疡样点清除治疗之后，可以被指定为无炎症的健康参照者。治疗之后，此人的嗜中性白血球细胞数可以指定为无炎症的健康参照者的嗜中性白血球细胞数目(nr)，即10,000。由此可以推算出表1中的比较性亲密度影响指数。
二号病人未接受任何治疗，该病人的嗜中性白血球细胞数目没有发生明显的变化。该病人在无炎症的健康情况下所获取的嗜中性白血球细胞数目(nh)是未知的。该病人的个性化亲密度影响指数(Ii)也是未知的。
实施例3：不同检测对象的嗜中性白血球细胞计数及亲密度影响指数的
检测结果比较
采用和实施例1和2相同的方法从9个不同的检测对象中收集了嗜中性白血球细胞，对其比较性亲密度影响指数(Ic)进行了检测，其结果列入如下的表2中。
表2、九个检测对象的口腔健康状况和亲密度影响指数
如表2所述，从检测对象中获取的嗜中性白血球细胞数目(nt)和比较性亲密度影响指数(Ic)的数值与年龄并无直接关系；令人鼓舞的是，这些数值可以显示出口腔中的健康问题。5号检测对象的“nt”和“Ic”值最高，该检测对象经常受口臭和口腔溃疡的困扰。3号检测对象的“nt”和“Ic”值第二高，该检测对象是一个吸烟者。接着，3号检测对象的“nt”和“Ic”值也偏高，该检测对象曾患有龋齿疾病。其他的检测对象的“nt”和“Ic”值都相对的比较低，这些检测对象并无明显的口腔健康问题。这些研究再次证明，这些“nt”和“Ic”数值可以显示亲密度影响程度。
由于人群中的遗传基因不一样，不同人群之间的嗜中性白血球细胞数可能有所差异。在同一个个体内的嗜中性白血球细胞的变化，更能真实反映口腔内的炎症程度。所以，个性化的亲密度影响指数(Ii)对亲密度影响程度的了解极具有参考价值，但是该指数的获取需要该个体进行相应的溃疡样点清除治疗。因此在很多情况下，检测者只能将检测对象与无炎症的健康参照者进行比较，获取其比较性亲密度影响指数(Ic)。为了计算方便，无炎症的健康参照者的嗜中性白血球细胞数目(nt)应取值为上述中提到的10000。
应该指出的是，亲密度影响指数是嗜中性白血球细胞数或其特异性成分(或产物)浓度的增长倍数，这可以反映炎症的程度，使医生和检测对象都可以直接理解和解释问题的严重性。
本发明所公开的实例参数可以有所变动，但并不影响本发明所涉及的发明概念，因此并不局限本发明所涉及的权利要求。
Claims (19)
1.一种用于释放口腔内嗜中性白血球细胞的溶液，其特征在于，所述溶液包括用于释放口腔内嗜中性白血球细胞的盐离子和酸离子；
优选地，所述盐离子和酸离子由化合物提供，所述化合物选自氯化钾，氯化钠和磷酸钠的一种或多种。
2.如权利要求1所述的溶液，其特征在于，所述溶液可进一步包含用于提供细胞所需能量的化合物；
优选地，提供所述细胞所需能量的化合物为D-葡萄糖。
3.如权利要求1或2所述的溶液，其特征在于，所述溶液可进一步包含用于调节该溶液的PH值和缓冲性能的化合物；
优选地，所述化合物选自无水磷酸二氢钾，磷酸钠和无水磷酸氢二铵的一种或多种。
4.如权利要求1-3中任一项所述的溶液，其特征在于，所述溶液可进一步包含用于着色的化合物；
优选地，所述化合物为酚红钠。
5.如权利要求1-4中任一项所述的溶液，其特征在于，所述溶液包含：0.01-10.00克/L氯化钾，0.01-10.00克/L无水磷酸二氢钾，0.01-10.00克/L氯化钠，0.01-10.00克/L无水二元磷酸钠，0.01-10.00克/L D-葡萄糖和0.01-0.02克/L酚红钠；
优选地，所述溶液包括0.4克/L氯化钾，0.06克/L无水磷酸二氢钾，8.0克/L氯化钠，0.04788克/L无水二元磷酸钠，1.0克/L D-葡萄糖和0.011克/L酚红钠。
6.如权利要求1-5中任一项所述的溶液，其特征在于，所述溶液为水溶液、酒精溶液或葡萄糖溶液；
优选地，所述酒精溶液中的酒精浓度为1-70％；
优选地，所述葡萄糖溶液中的葡萄糖浓度为0.1-15％。
7.一种用于检测口腔内嗜中性白血球细胞数量的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括如权利要求1-6中任一项所述的溶液。
8.如权利要求7所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒进一步包括：
用于特异性固定所述嗜中性白血球细胞的固定剂；和/或
用于对所述嗜中性白血球细胞进行特异性染色的染色剂；
优选地，所述固定剂为甲醛；
优选地，所述染色剂为吖啶橙。
9.如权利要求7或8所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒进一步包括检测嗜中性白血球细胞的特异成分或产物所需的检测试剂；优先地，所述特异性成分为：中性粒细胞弹性蛋白酶，组织蛋白酶G，髓过氧化物酶，乳铁蛋白和明胶酶的一种或多种；其检测试剂包括检测该特异蛋白所需的抗体及其相应的检测试剂；其检测试剂为酶联反应所需的试剂。
10.如权利要求1-6中任一项所述的溶液或如权利要求7-9中任一项所述的试剂盒在制备用于检测口腔内嗜中性白血球细胞数量的产品中的应用。
11.一种检测哺乳动物亲密度影响指数的方法，其特征在于，所述方法包括：检测包含所述哺乳动物口腔内含物的样本中嗜中性白血球细胞的数量；
优选地，所述亲密度影响指数为个性化的亲密度影响指数或比较性亲密度影响指数；
优选地，所述哺乳动物是人。
12.如权利要求11所述的方法，其特征在于，所述方法包括：
1)使所述哺乳动物用适量溶液漱口，从而获得包含所述哺乳动物口腔内含物的溶液；
2)使用固定剂固定经步骤1)获得的溶液中的嗜中性白血球细胞；
3)使用染色剂将经步骤2)固定的嗜中性白血球细胞进行染色并计数；
优选地，在步骤2)前，先离心所述包含哺乳动物口腔内含物的溶液；进一步优选地，所述离心速度为20-100g，时间为10-30分钟；更优选地，所述离心速度为20g，时间为10分钟。
13.如权利要求12所述的方法，其特征在于，所述步骤1)中的溶液为如权利要求1-6中任一项所述的溶液；
优选地，所述步骤2)中的固定剂为甲醛；进一步优选地，所述固定剂为2.5％的甲醛；
优选地，所述步骤3)中的染色剂为吖啶橙；进一步优选地，所述染色剂为1.6％的吖啶橙。
14.如权利要求10-13中任一项所述的方法，其特征在于，所述方法进一步包括通过将所述样本中检测到的嗜中性白血球细胞的数量和被检测哺乳动物在健康状态下口腔内的嗜中性白血球细胞的数量进行比较，计算所述哺乳动物的个性化的亲密度影响指数。
15.如权利要求10-14中任一项所述的方法，其特征在于，所述方法进一步包括通过将所述样本中检测到的嗜中性白血球细胞的数量和健康状态下的哺乳动物参照者口腔内的嗜中性白血球细胞的数量进行比较，计算所述哺乳动物的比较性亲密度影响指数；
优选地，所述健康状态下的哺乳动物参照者口腔内的嗜中性白血球细胞的数量为10000。
16.一种检测哺乳动物亲密度影响指数的方法，其特征在于，所述方法包括：检测包含所述哺乳动物口腔内含物的样本中嗜中性白血球细胞特异成分或产物的含量，所述特异性成分选自中性粒细胞弹性蛋白酶，组织蛋白酶G，髓过氧化物酶，乳铁蛋白和明胶酶的一种或多种；
优选地，所述亲密度影响指数为个性化的亲密度影响指数或比较性亲密度影响指数；
优选地，所述哺乳动物是人。
17.如权利要求16所述的方法，其特征在于，所述方法进一步包括通过将所述样本中检测到的嗜中性白血球细胞特异成分或产物的含量和被检测哺乳动物在健康状态下口腔内的嗜中性白血球细胞特异成分或产物的含量进行比较，计算所述哺乳动物的个性化的亲密度影响指数。
18.如权利要求16所述的方法，其特征在于，所述方法进一步包括通过将所述样本中检测到的嗜中性白血球细胞特异成分或产物的含量和健康状态下的哺乳动物参照者口腔内的嗜中性白血球细胞特异成分或产物的含量进行比较，计算所述哺乳动物的比较性亲密度影响指数。
19.一种检测哺乳动物口腔卫生改善情况的方法，其特征在于，所述方法包括：
在对哺乳动物口腔卫生进行改善之前和之后，根据权利要求10-18中任一项所述方法分别检测哺乳动物亲密度影响指数，然后比较改善之前和之后的亲密度影响指数；
优选地，所述亲密度影响指数为个性化的亲密度影响指数或比较性亲密度影响指数；
优选地，所述哺乳动物是人。
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