CN102532288B - 与磷吸收相关蛋白AtLPT3及其编码基因与应用 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种与磷吸收相关蛋白AtLPT3及其编码基因与应用。该蛋白是如下1)或2)的蛋白质：1)序列表中序列2所示的氨基酸序列组成的蛋白质；2)在序列表中序列2的氨基酸序列经过取代和/或缺失和/或添加一个或几个氨基酸且与与磷吸收相关的由1)衍生的蛋白质。将上述植物蛋白的编码基因导入目的植物，得到的耐低磷胁迫性能提高的转基因植物。本发明的方法可用于培育耐低磷的植物新品种。本发明的基因对培育耐低磷新品种，以及植物对低磷耐受的研究具有重要意义。
Description
技术领域
本发明涉及生物技术领域，特别涉及一种与磷吸收相关蛋白AtLPT3及其编码基因与应用。
背景技术
磷是植物必需的大量元素之一，参与植物的生长发育。植物细胞中的磷浓度一般在mM水平，而土壤磷浓度极低，一般低于10μM，因此植物经常面临低磷胁迫，土壤缺磷成为限制农业生产的重要限制因素。磷矿是不可再生的资源，大量施用磷肥会造成环境污染。因此，认识植物对低磷胁迫的反应机制，提高植物自身对低磷胁迫的耐受能力，已成为如何进一步提高作物产量的重要研究工作，倍受世界各国政府和植物及农业科学家的关注。
拟南芥(Arabidopsis thaliana)是一种典型的模式植物(其作用与实验鼠、果蝇等模式生物相当)，已被广泛应用于植物遗传学、发育生物学和分子生物学的研究。拟南芥共有约1.3亿个碱基对，约2.7万个基因。现在已知拟南芥基因组中含有超过1500个编码转录因子的基因，其中WRKY基因有74个，这些WRKY基因在植物响应低磷胁迫中的作用还不清楚。拟南芥的大多数基因在其他植物中都能找到与之同源的基因，有关拟南芥的绝大多数发现都能应用于其他植物的研究。以往的研究已经证明，对拟南芥的研究将帮助科学家找到提高农作物产量的方法。面对农作物生产中日益严重的土壤低磷胁迫问题，克隆调控植物响应低磷胁迫的转录因子基因并对其功能进行研究，对尽快培育磷营养作物品种有重要的实践意义。
发明内容
本发明的目的是提供一种与磷吸收相关的蛋白及其编码基因与应用。
本发明所提供的与磷吸收相关的蛋白，名称为AtLPT3，来源于拟南芥(Arabidopsis thaliana)Col-0生态型，是如下1)或2)的蛋白质：
1)序列表中序列2所示的氨基酸序列组成的蛋白质；
2)在序列表中序列2的氨基酸序列经过取代和/或缺失和/或添加一个或几个氨基酸且与与磷吸收相关的由1)衍生的蛋白质。
其中，序列表中的序列2所示的蛋白序列由330个氨基酸残基组成。在该蛋白质序列中，疏水氨基酸占103个，亲水氨基酸占88个，碱性氨基酸占60个，酸性氨基酸占24个，该蛋白质的分子量为36.4KD，等电点为10.17。
为了使1)中的AtLPT3分泌到细胞周质或培养基中或使其功能稳定，可在由序列表中序列2的氨基酸残基序列组成的蛋白质的N端连接上信号肽序列，为了1)中的AtLPT3便于纯化，可在由序列表中序列2的氨基酸残基序列组成的蛋白质的N端或C端连接上如表1所示的标签。
表1.标签的序列
| 标签 | 残基 | 序列 |
| Poly-Arg | 5-6(通常为5个) | RRRRR |
| Poly-His | 2-10(通常为6个) | HHHHHH |
| FLAG | 8 | DYKDDDDK |
| Strep-tag II | 8 | WSHPQFEK |
| c-myc | 11 | EQKLISEEDL |
上述2)中的AtLPT3可人工合成，也可先合成其编码基因，再按照下述方法进行生物表达得到。上述2)中的AtLPT3的编码基因可通过将序列表中序列1的18-1010的DNA序列中缺失一个或几个氨基酸残基的密码子，和/或进行一个或几个碱基对的错义突变，和/或在其5′端连上信号肽的编码序列，和/或在其5′端和/或3′端连上表1所示的标签的编码序列得到。
上述与磷吸收相关的蛋白的编码基因(命名为AtLPT3)也属于本发明的保护范围。
与磷吸收相关的蛋白的编码基因具体可为如下1)-4)中任一所述的核苷酸序列：
1)编码序列如序列表中序列1的第18-1010位所示；
2)核苷酸序列如序列表中序列1所示；
3)在高严谨条件下与1)或2)的核苷酸序列杂交且编码上述蛋白的基因；
4)与1)或2)的核苷酸序列具有90％以上的同源性且编码上述与磷吸收相关的蛋白的基因。
其中，序列表中的序列1由1010个碱基组成，其开放阅读框架(ORF)为序列表中序列1自5′末端第18-1010位碱基，编码具有序列表中序列2的氨基酸序列的AtLPT3蛋白。
上述3)或4)所述的基因具体可以是序列表中序列3。
序列表中序列3由1489个核苷酸组成，自序列3的5′端第260-979位核苷酸为第一个外显子，自序列3的5′端第1055-1180位核苷酸为第二个外显子，自序列3的5′端第1269-1415位核苷酸为第三个外显子。自序列3的5′端第980-1054位核苷酸为第一个内含子，自序列3的5′端第1181-1268位核苷酸为第二个内含子。自序列3的5′端第1-259位核苷酸为5’UTR，自序列3的5′端第1416-1489位核苷酸为3’UTR。
上述高严谨条件可为用0.1×SSPE(或0.1×SSC)，0.1％SDS的溶液，在DNA或者RNA杂交实验中65℃下杂交并洗膜。
含有上述与磷吸收相关的蛋白的编码基因的转基因细胞系、重组菌及表达盒均属于本发明的保护范围。
含有上述与磷吸收相关的蛋白的编码基因的重组载体也属于本发明的保护范围。
可用现有的植物表达载体构建含有AtLPT3基因的重组表达载体。所述植物表达载体包括双元农杆菌载体和可用于植物微弹轰击的载体等，如pBIB、pCAMBIA3301、pCAMBIA1300、pBI121、pBin19、pCAMBIA2301、pCAMBIA1301-UbiN、pBY505或其它衍生植物表达载体。
使用AtLPT3基因构建重组表达载体时，可在其转录起始核苷酸前加上任何一种增强型、组成型、组织特异型或诱导型启动子，如花椰菜花叶病毒(CAMV)35S启动子、泛素(Ubiquitin)基因启动子(pUbi)、Actin、Super启动子启动子等，它们可单独使用或与其它的植物启动子结合使用。
此外，使用本发明的基因构建植物表达载体时，还可使用增强子，包括翻译增强子或转录增强子，这些增强子区域可以是ATG起始密码子或邻接区域起始密码子等，但必需与编码序列的阅读框相同，以保证整个序列的正确翻译。所述翻译控制信号和起始密码子的来源是广泛的，可以是天然的，也可以是合成的。翻译起始区域可以来自转录起始区域或结构基因。
为了便于对转基因植物细胞或植物进行鉴定及筛选，可对所用植物表达载体进行加工，如加入在植物中表达可产生颜色变化的酶或发光化合物的基因(GUS基因、GFP基因、萤光素酶基因等)、具有抗性的抗生素标记物(庆大霉素标记物、卡那霉素标记物等)或是抗化学试剂标记基因(如抗除莠剂基因)等。
上述重组载体具体的构建方法如下：是将上述与磷吸收相关蛋白的编码基因插入pCAMBIA1300：Super载体的多克隆位点之间构成的重组表达载体；
所述pCAMBIA1300：Super载体是将核苷酸序列如序列表中序列4的自5’端第113-1112位所示的Super启动子插入pCAMBIA1300质粒的多克隆位点之间构成的载体。
本发明的另一目的是在于提供一种培育耐低磷胁迫性提高的转基因植物的方法。
本发明提供的培育耐低磷胁迫性提高的转基因植物的方法，是将上述与磷吸收相关蛋白的编码基因入目的植物，得到耐低磷胁迫性能高于所述目的植物的转基因植物。
本发明的又一个目的是提供一种磷含量和/或生物量提高的转基因植物的方法。该方法是将上述的与磷吸收相关蛋白的编码基因(AtLPT3基因)转入目的植物中，得到磷含量和/或生物量高于所述目的植物的转基因植物。
上述生物量提高是目的植物的根部和/或冠部的干重增加。
上述磷含量提高是目的植物的根部和/或冠部磷含量增加。
上述植物基因可以是通过上述重组载体导入目的植物中。携带有本发明的AtLPT3基因的植物表达载体可通过Ti质粒、Ri质粒、植物病毒载体、如基因枪法、花粉管通道、显微注射、电导、农杆菌介导等常规生物学方法转化到植物细胞或组织中。
上述目的植物可为双子叶植物，也可为单子叶植物；具体可为拟南芥。
实验证明：AtLPT3基因可以提高植物吸收磷营养的能力，特别是可以提高植物响应低磷胁迫的能力。本发明转基因拟南芥AtLPT3过表达植株在正常供磷(MS)和低磷(LP)培养基上，均表现出较野生型磷营养更高效的表型，且与野生型比较有明显的生长优势。AtLPT3过表达植株的冠部和根部磷含量都明显高于野生型(WT)的冠部根部磷含量。因此，AtLPT3过量表达后，导致植物无论正常条件还是低磷条件下植物的磷含量都升高。
本发明的方法可用于培育耐低磷的植物新品种。本发明的基因对培育耐低磷新品种，以及植物对低磷耐受的研究具有重要意义，如利用本发明的基因可对该基因进行过量表达，从而提高植物对低磷的耐受能力。
附图说明
图1为AtLPT3基因过量表达株系的分子检测。
图2为野生型(WT)和AtLPT3过量表达植株在正常供磷(MS)和低磷(LP)条件下的表型观察结果。
图3为野生型(WT)和AtLPT3过量表达植株在正常供磷(MS)条件下的干重测定结果。
图4为野生型(WT)和AtLPT3过量表达植株在低磷(LP)条件下的干重测定结果。
图5为野生型(WT)和AtLPT3过量表达植株在正常供磷(MS)条件下的单株磷含量测定结果。
图6为野生型(WT)和AtLPT3过量表达植株在低磷(LP)条件下的单株磷含量测定结果。
具体实施方式
下面结合具体实施例对本发明作进一步说明，但本发明并不限于以下实施例。
下述实施例中，如无特殊说明，均为常规方法。
实施例1、转基因AtLPT3植物的获得及检测分析
一、转基因AtLPT3拟南芥的获得
1、cDNA的获得
提取10天拟南芥(Columbia型(Col-0生态型))，(购自美国拟南芥生物资源中心(Arabidopsis Biological Resource Center，ABRC))幼苗总RNA、反转录为cDNA。以此cDNA为模板、利用分别设有SmaI和KpnI酶切位点的一对引物(Primer1和Primer2)进行PCR扩增，得到磷营养相关基因的cDNA全长。引物序列如下：
Primer1：5′-tcccccggg CCTTTGTGAAGAAGAAAATGGAAGAAG-3′(SmaI)；
Primer2：5′-ggggtaccTCAAGTATGAGCTGATTGAGAAGAGAG-3′(KpnI)。
采用Takara公司的高保真的Pyrobest DNA聚合酶进行扩增，扩增体系为50μL，含10×Pyrobest PCR缓冲液5.0μL，10mM dNTP mix 1.0μL，引物各1.0μL，Pyrobest酶0.5μL，模板3.0μL(0.1μg)，补充灭菌超纯水至50μL，反应体系在冰上进行操作。在PE 9700仪器上进行扩增，预变性5min，95℃变性30s，56℃30s，72℃1.5min，循环数30个，72℃延伸10min。
将扩增片段用0.8％的琼脂糖凝胶进行电泳，回收扩增片段，连接到pMD18-T载体，酶切、扩增、测序鉴定，测序结果表明，上述PCR扩增得到的片段为具有序列表中序列1的核苷酸序列，为本发明的与植物磷营养相关蛋白的cDNA基因，将其命名为AtLPT3，序列表中序列1的核苷酸序列由1010个碱基组成，其编码序列为自序列表中序列1的第18-1010位核苷酸，编码具有序列表中序列2的氨基酸残基序列。将上述获得的正确的含有AtLPT3的重组载体命名为pMD18-AtLPT3。
2、基因组DNA的获得
提取10天拟南芥(Columbia型)幼苗总DNA，以此DNA为模板、利用Primer3和Primer4进行PCR扩增，得到磷营养相关基因的基因组DNA全长。引物序列如下：
Primer3：5’-CGACCATCTCCACTCTCCCTTCT-3’
Primer4：5’-AAGCCAAATTGTTATGCAC-3’
采用Takara公司的高保真的Pyrobest DNA聚合酶进行扩增，扩增体系为50μL，含10×Pyrobest PCR缓冲液5.0μL，10mM dNTP mix 1.0μL，引物各1.0μL，Pyrobest酶0.5μL，模板3.0μL(0.1μg)，补充灭菌超纯水至50μL，反应体系在冰上进行操作。在PE 9700仪器上进行扩增，预变性5min，95℃变性30s，56℃30s，72℃1.5min，循环数30个，72℃延伸10min。
对PCR产物进行测序，得到1489bp的核苷酸片段，是具有序列表中序列3的核苷酸序列，为本发明的与植物磷营养相关的基因组基因，将其命名为gAtLPT3。将gAtLPT3连接到pMD18-T载体得到的重组载体命名为pMD18-gAtLPT3。序列表中序列3由1489个核苷酸组成，自序列3的5′端第260-979位核苷酸为第一个外显子，自序列3的5′端第1055-1180位核苷酸为第二个外显子，自序列3的5′端第1269-1415位核苷酸为第三个外显子。自序列3的5′端第980-1054位核苷酸为第一个内含子，自序列3的5′端第1181-1268位核苷酸为第二个内含子。自序列3的5′端第1-259位核苷酸为5’UTR，自序列3的5′端第1416-1489位核苷酸为3’UTR。
3、重组载体的获得
上述步骤1中得到含有AtLPT3基因的重组载体pMD18-AtLPT3和pCAMBIA1300：Super载体，同时用内切酶SmaI和KpnI进行大体系酶切。将所切得的AtLPT3基因片段和线性化的pCAMBIA1300：Super质粒片段进行回收，连接，并测序验证，即获得验证正确的含有AtLPT3基因的重组载体并将其命名为Super：AtLPT3。
上述pCAMBIA1300：Super载体的构建方法为：利用引物aagcttGTGGGCCTGTGGTCTCAAGAT和tctagaCTAGAGTCGATTTGGT从质粒pMSP-1(GenBank号为EU181145)中扩增出核苷酸序列如序列表中序列4的自5’端第113-1112位所示的Super启动子；将扩增得到的Super启动子用HindIII和XbaI双酶切，回收Super启动子片段，插入到质粒pCAMBIA1300(GenBank号为FJ362601)的HindIII和XbaI酶切位点之间中，得到pCAMBIA1300：Super质粒。
4、得到转基因AtLPT3拟南芥
将上述步骤3中得到的重组载体Super：AtLPT3质粒利用农杆菌转化侵染Columbia野生型拟南芥植株。从而获得AtLPT3过量表达T1代转Super：AtLPT3拟南芥植株。经过在含50μg/L潮霉素的MS培养基上筛选转Super：AtLPT3拟南芥阳性植株并进行分离比统计，在T 3代即得到转Super：AtLPT3拟南芥单拷贝纯合株系，即AtLPT3过量表达株系。本实验得到的AtLPT3过量表达株系为：Super：AtLPT3-6、Super：AtLPT3-10、Super：AtLPT3-11、Super：AtLPT3-12和Super：AtLPT3-13。
野生型拟南芥(Columbia型)幼苗、Super：AtLPT3-6、Super：AtLPT3-10、Super：AtLPT3-11、Super：AtLPT3-12和Super：AtLPT3-13在MS培养基上萌发生长2周，取根和叶，分别提取总RNA，总RNA的提取按Invitrogen Trizol Reagent的产品说明书进行。将上述提取的总RNA经1.0％琼脂糖凝胶电泳检查完整性后，用紫外分光光度计和电泳方法相结合作精确定量。然后分别取相同量的RNA进行电泳然后Northern杂交。Northern杂交的探针片段的获得方法如下：
以AtLPT3基因的cDNA全长产物为模板，用下述引物对进行扩增
Primer5：5′-CCTTTGTGAAGAAGAAAATGGAAGAAG-3′；
Primer6：5′-TCAAGTATGAGCTGATTGAGAAGAGAG-3′。
PCR扩增出长度为1010bp的AtLPT3基因全长作为探针。
检测结果如图1所示，AtLPT3基因在5个AtLPT3基因过量表达株系均过量表达。
二、检测分析
1、野生型和AtLPT3过量表达植株(Super：AtLPT3-6、Super：AtLPT3-11和Super：AtLPT3-12)在正常供磷(MS)和低磷(LP)条件下的表型观察结果
按照获得转AtLPT3基因株系的方法将空载体pCAMBIA1300：Super导入野生型拟南芥中，制备得到空载体对照植株。
取野生型和上述步骤一中得到的AtLPT3过量表达植株中的Super：AtLPT3-6、Super：AtLPT3-11和Super：AtLPT3-12以及空载体对照，在低磷条件下的表型观察结果。
在MS培养基上萌发后生长一周的野生型拟南芥(Columbia型)、空载体对照和AtLPT3过量表达植株(Super：AtLPT3-6、Super：AtLPT3-11和Super：AtLPT3-12)拟南芥幼苗移入正常供磷(MS)和含有100μM Pi的低磷(LP)培养基(以正常MS培养基为基础，将Pi浓度由1.25mM调整为100μM，其它成分与正常MS培养基一致。正常MS培养基组成为：每升溶液含1650mg NH4NO3，1900mg KNO3，370mg MgSO4·7H2O，170mg KH2PO4，440mg CaCl2·2H2O，22.3mg MnSO4·4H2O，0.83mg KI，0.025mgCuSO4·5H2O，6.25mg H3BO5，0.025mg CoCl·6H2O，8.65mg ZnSO4·7H2O，0.25mgNa2MoO4·2H2O，27.8mg FeSO4·7H2O，37.3mg Na2EDTA)上继续生长10天，观察其性状。以继续在MS培养基培养的各株系做为对照。培养条件采用全日照光照培养，温度22℃，光强80μmo1·m-2·s-1。
结果如图2(图中空载体对照与野生型对照的实验结果表型一致，故省略空载体对照结果)所示，在正常供磷(MS)和低磷(LP)培养基上生长10天后，AtLPT3过量表达植株(Super：AtLPT3-6、Super：AtLPT3-11和Super：AtLPT3-12)均表现出较野生型磷营养高效表型，过量表达株系明显较野生型和空载体对照生长有优势。
2、植株干重的测定结果
将野生型(WT)和上述步骤一中得到的AtLPT3过量表达植株中的Super：AtLPT3-6、Super：AtLPT3-11和Super：A tLPT3-12在MS培养基上生长，7天后分别移至正常MS培养基(如图3中正常处理)或低磷MS培养基(如图4中低磷处理)(含100μM Pi，即以正常MS培养基为基础，将Pi浓度由1.25mM调整为100μM，其它成分与正常MS培养基一致。正常MS培养基溶液组成为：1650mg NH4NO3，1900mg KNO3，370mg MgSO4·7H2O，170mg KH2PO4，440mg CaCl2·2H2O，22.3mg MnSO4·4H2O，0.83mg KI，0.025mg CuSO4·5H2O，6.25mg H3BO5，0.025mg CoCl·6H2O，8.65mgZnSO4·7H2O，0.25mg Na2MoO4·2H2O，27.8mg FeSO4·7H2O，37.3mg Na2EDTA)上继续生长10天，分根部和冠部取样。样品在80℃烘干过夜，称量干重。
结果如图3和图4所示，结果表明，在正常供磷条件下，AtLPT3过量表达植株(Super：AtLPT3-6、Super：AtLPT3-11和Super：AtLPT3-12)的冠部和根部干重较野生型明显增加，其中冠部干重增加29-155％，根部干重增加28-235％；在低磷处理(LP)条件下，AtLPT3过量表达植株(Super：AtLPT3-6、Super：AtLPT3-11和Super：AtLPT3-12)的冠部和根部干重也较野生型明显增加，其中冠部干重增加23-60％，根部单株干重增加46-112％。以上结果表明，AtLPT3过量表达后，导致植物无论正常条件还是低磷条件下植物的干重都升高，AtLPT3过量表达株系较野生型有生长优势。
3、磷含量测定结果
将野生型(WT)和上述步骤一中得到的AtLPT3过量表达植株中的Super：AtLPT3-6、Super：AtLPT3-11和Super：A tLPT3-12在MS培养基上生长，7天后分别移至MS培养基(如图5中正常处理)或低磷MS培养基(如图6中低磷处理)(含100μM Pi，即以正常MS培养基为基础，将Pi浓度由1.25mM调整为100μM，其它成分与正常MS培养基一致。正常MS培养基溶液组成为：1650mg NH4NO3，1900mg KNO3，370mgMgSO4·7H2O，170mg KH2PO4，440mg CaCl2·2H2O，22.3mg MnSO4·4H2O，0.83mg KI，0.025mg CuSO4·5H2O，6.25mg H3BO5，0.025mg CoCl·6H2O，8.65mgZnSO4·7H2O，0.25mg Na2MoO4·2H2O，27.8mg FeSO4·7H2O，37.3mg Na2EDTA)上继续生长10天，分根部和冠部取样。样品在80℃烘干过夜，然后在马福炉中进行灰化处理(300℃1小时，575℃6小时)。灰化后的样品用5mL 0.1N HCl浸提，浸提液用钒钼黄法进行磷含量测定。钒钼黄法方法具体如下所述：吸取定容后的提取液2.00mL放入10mL容量瓶中，加2滴二硝基酚指示剂，滴加6mol/L NaOH中和至溶液刚呈黄色，加入2.00mL钒钼酸铵试剂，用水定容10mL。15分钟后在波长450nm处进行测定，以空白溶液(空白试验的浸提液按上述步骤进行显色)调节仪器零点。标准曲线：准确吸取50g/L Pi标准液(利用KH2PO4和双蒸水配制标准液)0、0.2、0.5、1、1.5、2、3mL分别放入10mL容量瓶中，按上述步骤显色，即得0、1.0、2.5、5.0、7.5、10、15μg/mL Pi(利用KH2PO4和双蒸水配制标准液)的标准系列溶液，与待测液一起测定，读取吸光度，然后绘制标准曲线和求直线回归方程。
结果如图5和图6所示，结果表明，在正常供磷条件(MS培养基中，图5中正常处理)下，AtLPT3过量表达植株(Super：AtLPT3-6、Super：AtLPT3-11和Super：AtLPT3-12)的冠部和根部单株磷含量较野生型明显增加，其中冠部单株磷含量增加14.8-126％，根部单株磷含量增加25-157％；在低磷处理条件(低磷MS培养基中，图6中低磷处理)下，AtLPT3过量表达植株(Super：AtLPT3-6、Super：AtLPT3-11和Super：AtLPT3-12)的冠部和根部单株磷含量也较野生型明显增加，其中冠部单株磷含量增加55-80％，根部单株磷含量增加22-66％。结果表明，AtLPT3过量表达后，导致植物无论正常条件还是低磷条件下植物的磷含量都升高。
Claims (4)
1.由序列表中序列2所示的氨基酸序列组成的蛋白质在培育耐低磷胁迫性提高的转基因植物中的应用，其中，培育耐低磷胁迫性提高的转基因植物的方法，是将由序列表中序列2所示的氨基酸序列组成的蛋白质的编码基因导入目的植物，得到耐低磷胁迫性能高于所述目的植物的转基因植物；所述目的植物为拟南芥。
2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于：所述由序列表中序列2所示的氨基酸序列组成的蛋白质的编码基因为如下1）或2）所述的基因：
1）编码序列如序列表中序列1的第18-1010位所示；
2）核苷酸序列如序列表中序列1所示。
3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于：所述的编码基因是通过重组载体导入目的植物中；所述重组载体的构建方法如下：是将所述编码基因插入pCAMBIA1300:Super载体的多克隆位点之间构成的重组表达载体；
所述pCAMBIA1300:Super载体是将核苷酸序列如序列表中序列4的自5’端第113-1112位所示的Super启动子插入pCAMBIA1300质粒的多克隆位点之间构成的载体。
4.由序列表中序列2所示的氨基酸序列组成的蛋白质在培育磷含量提高的转基因植物中的应用，其中，培育磷含量提高的转基因植物的方法，是将由序列表中序列2所示的氨基酸序列组成的蛋白质的编码基因导入目的植物，得到磷含量高于所述目的植物的转基因植物；所述目的植物为拟南芥。
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| Lee L.-Y. et al..EU181145.《GenBank》.2007,DEFINITION、TITLE、FEATURES、ORIGIN. |
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