CN102520039A - 用于海产品中有机砷化物检测的基于核酸适配子的分子印迹膜电极的制备方法及应用 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了用于海产品中有机砷化物检测的基于核酸适配子的分子印迹膜电极的制备方法及应用，其中分子印迹膜电极的制备方法，包括以下步骤：(1)选择能与有机砷化物合成分子印迹聚合物的功能单体核酸适配子；(2)将有机砷化物模板分子、核酸适配子功能单体、交联剂、致孔剂、引发剂和有机溶剂制成分子印迹聚合物溶液；(3)将基于核酸适配子的分子印迹聚合物修饰到传感器电极表面上。将表面修饰技术应用到用于海产品中有机砷化物检测的基于核酸适配子的分子印迹膜电极的制备当中，使得用于海产品中有机砷化物检测的基于核酸适配子的分子印迹膜电极的制备具有可控性，提高了电极的灵敏度和准确性。
Description
技术领域
本发明属于海产品污染物检测技术领域，具体地说涉及一种检测海产品中有机砷化物的基于核酸适配子的分子印迹膜电极的制备方法,及采用所述的基于核酸适配子的分子印迹膜电极检测样本中有机砷化物的方法。
背景技术
海产品砷污染问题一直是食品安全领域关注的焦点。与陆地生物不同，海洋生物普遍具有较强的砷富集能力，鱼类、贝类、海藻等人类经常食用的海产品中均含有较高浓度的砷。海产品中的砷主要以有机砷化物的形态存在（如甲基胂酸、甲基亚胂酸、砷糖、砷胆碱等），约占总砷的95%左右。目前，砷糖和砷胆碱的毒性尚未被证实，但甲基亚胂酸已被证实具有较强的细胞和生殖毒性，而甲基胂酸可造成DNA损伤。近年来，海产品砷超标的事件屡次见诸报端，使公众对海产品的食用安全性产生了怀疑，严重影响了水产养殖业和出口贸易的发展。因而，控制并监测海产品中砷含量具有十分重要的意义。
目前，世界各国对海产品中砷含量都有严格限制，我国海产品中的砷主要采用GB/T 5009.11-2003《食品中总砷及无机砷的测定》中规定的银盐法和氢化物原子荧光光度法进行检测。氢化物原子荧光光度法是我国海产品中砷检测的主要方法，此方法仅能测定无机砷和总砷含量，不能检测有机砷化物。20世纪70年代以来，电化学分析法、光谱法、色谱法、质谱法和联用技术等先进的仪器测定方法逐步被应用于砷检测。其中，色谱技术可以准确分离海产品中的有机砷化物，但检测灵敏度不尽如人意；质谱法和联用技术（如气相色谱-质谱联用、液相色谱-质谱联用等）能够准确测定海产品中各种有机砷化物的含量，但这两种方法所需仪器昂贵，且样品前处理极为复杂，实用性不高。由此可见，目前急需建立一种简便、可靠且高特异性的针对海产品中有机砷化物的检测方法，以保障海产品的食用安全。
发明内容
针对现有技术中存在的不足，本发明提供了一种检测速度快、灵敏度高的用于海产品中有机砷化物检测的基于核酸适配子的分子印迹膜电极的制备方法。
本发明还提供了使用上述基于核酸适配子的分子印迹膜电极检测海产品中有机砷化物的方法。
本发明是通过以下技术方案实现的：
一种用于海产品中有机砷化物检测的基于核酸适配子的分子印迹膜电极的制备方法，包括以下步骤：
(1) 选择能与有机砷化物合成分子印迹聚合物的功能单体核酸适配子；
(2) 按一定摩尔比将有机砷化物模板分子、核酸适配子功能单体、交联剂、致孔剂、引发剂和有机溶剂混合均匀制成用于海产品中有机砷化物检测的基于核酸适配子的分子印迹聚合物溶液；
(3) 利用电极表面修饰技术，将用于海产品中有机砷化物检测的基于核酸适配子的分子印迹聚合物修饰到传感器电极表面上。
本发明实施例中，所述有机砷化物模板分子、核酸适配子功能单体、交联剂、致孔剂、引发剂和有机溶剂的摩尔比为0.1～3∶5∶0.1～5∶40～90∶0.01～0.5∶1.0～10。
本发明实施例中，所述功能单体为核酸适配子；所述引发剂为偶氮二异丁腈；所述交联剂为三羟甲基丙烷三甲基丙烯酸酯、N，N-亚甲基二丙烯酰胺、N，N-1，4-亚苯基二丙烯酰胺、3，5-二（丙烯酰胺）苯甲酸、乙二醇二甲基丙烯酸酯、二乙烯基苯、N，O-二丙烯酰-L-苯丙胺醇、季戊四醇三丙烯酸酯或季戊四醇四丙烯酸酯；所述致孔剂为二氯甲烷、氯仿、乙腈、甲醇、异丙醇、四氯化碳、杂环化合物酰胺或砜类；所述有机溶剂为二氯甲烷或四氯化碳。
本发明实施例中，所述将用于海产品中有机砷化物检测的基于核酸适配子的分子印迹聚合物修饰到传感器电极表面包括以下步骤：
(1) 将工作电极表面用0.05 μm的氧化铝粉打磨，超声波清洗，再依次用1 mol/L HNO3，1 mol/L NaOH清洗，然后用双蒸水彻底清洗数次，晾干；
(2) 将晾干的工作电极浸泡于用于海产品中有机砷化物检测的基于核酸适配子的分子印迹聚合物溶液中5-10分钟，再取出用洗脱剂洗脱20-30分钟，直至将模板分子有机砷化物完全洗掉，然后在室温下干燥5-10分钟；
(3) 重复步骤(2) 4-7次，制得所述用于海产品中有机砷化物检测的基于核酸适配子的分子印迹膜电极。
上述制备方法还包括将制得的用于海产品中有机砷化物检测的基于核酸适配子的分子印迹膜电极浸入pH6.8-7.5的缓冲液中，保存在4℃冰箱12~24h，然后用去离子水彻底清洗。
所述洗脱剂为乙腈、水、甲醇-乙酸或乙腈-乙酸。所述缓冲液为柠檬酸-磷酸溶液。
本发明所述检测有机砷化物的方法，包括以下步骤：将上述方法制得的用于海产品中有机砷化物检测的基于核酸适配子的分子印迹膜电极连接到电化学工作站，对环境样品提取液中的有机砷化物进行检测。
本发明的有益效果如下：
1．将表面修饰技术应用到用于海产品中有机砷化物检测的基于核酸适配子的分子印迹膜电极的制备当中，使得用于海产品中有机砷化物检测的基于核酸适配子的分子印迹膜电极的制备具有可控性，提高了电极的灵敏度和准确性。
2．本发明所得到的用于海产品中有机砷化物检测的基于核酸适配子的分子印迹膜电极，可以实现样本中有机砷化物的高特异性、高灵敏度、快速检测。
3．本发明的用于海产品中有机砷化物检测的基于核酸适配子的分子印迹膜电极的特异性强，样品中其它非特异性分子对检测结果无影响；灵敏度高，可以达到ng级；检测速度快，完成一个基本检测过程仅需1-2分钟的时间，可在短时间内实现大量样本的高通量筛选；成本低，检测1个样品仅需几分钱。
4. 用于海产品中有机砷化物检测的基于核酸适配子的分子印迹膜电极检测有机砷化物的方法，操作快速简单，反应及结果均由仪器自动完成和记录，避免了主观因素的影响，并保证有很好的重复性，便于现场检测。
具体实施方式
下面结合具体实施例对本发明作进一步说明，以便于本领域人员更好的理解本发明。
实施例1（一甲基胂酸）
一种用于海产品中一甲基胂酸检测的基于核酸适配子的分子印迹膜电极的制备方法，包括以下步骤：
(1) 选择能与一甲基胂酸合成分子印迹聚合物的功能单体核酸适配子；
(2) 将模板分子一甲基胂酸，功能单体核酸适配子核酸适配子，交联剂乙二醇二甲基丙烯酸酯（EGDMA），致孔剂氯仿，引发剂偶氮二异丁腈，有机溶剂二氯甲烷按摩尔比为0.1∶3.5∶0.5∶70∶0.15∶3.0的比例混合均匀，得到用于海产品中一甲基胂酸检测的基于核酸适配子的分子印迹聚合物溶液；
(3) 工作电极选用玻璃碳电极，将工作电极表面用0.05 μm的氧化铝粉打磨，超声波清洗，再分别用1 mol/L HNO3，1 mol/L NaOH清洗，然后用双蒸水彻底清洗数次，吹干，保证电极表面光亮无杂质；
(4)将玻璃碳电极表面浸泡在用于海产品中一甲基胂酸检测的基于核酸适配子的分子印迹聚合物溶液中5分钟，然后将电极取出，用甲醇和乙酸混合液洗脱工作电极表面20分钟，直至把这一层中的模版分子一甲基胂酸分子完全洗掉，在室温下干燥10 min，如此循环，重复上述过程5次；
(5) 将玻璃碳电极浸入到pH 6.8的柠檬酸-磷酸缓冲液中，保存在4℃的冰箱中12h，以便除去电极表面过量的用于海产品中一甲基胂酸检测的基于核酸适配子的分子印迹聚合物，当电极用去离子水彻底清洗以后，制备成功用于海产品中一甲基胂酸检测的基于核酸适配子的分子印迹膜电极。
将制得的用于海产品中一甲基胂酸检测的基于核酸适配子的分子印迹膜电极连接到电化学工作站，对环境样品提取液中的一甲基胂酸进行检测，结果见表1。
实施例2（甲基亚胂酸）
一种用于海产品中甲基亚胂酸检测的基于核酸适配子的分子印迹膜电极的制备方法，包括以下步骤：
(1) 选择能与甲基亚胂酸合成分子印迹聚合物的功能单体核酸适配子；
(2) 模板分子甲基亚胂酸，功能单体核酸适配子，交联剂三羟甲基丙烷三甲基丙烯酸酯，致孔剂二氯甲烷，引发剂偶氮二异丁腈，有机溶剂二氯甲烷按摩尔比0.5∶2.5∶3∶45∶0.1∶5，混合均匀，得到用于海产品中甲基亚胂酸检测的基于核酸适配子的分子印迹聚合物溶液；
(3) 工作电极选用玻璃碳电极，将电极表面用0.05 μm的氧化铝粉打磨，超声波清洗，再分别用1 mol/L HNO3，1 mol/L NaOH清洗，然后用双蒸水彻底清洗数次，吹干，保证电极表面光亮无杂质；
(4) 将玻璃碳电极浸泡在用于海产品中甲基亚胂酸检测的基于核酸适配子的分子印迹聚合物溶液中10分钟，然后将工作电极取出，用甲醇和乙酸混合液洗脱电极表面25分钟，直至把这一层中的模板分子甲基亚胂酸分子完全洗掉，在室温下干燥5 min。如此循环，重复上述过程6次；
(5) 将上述玻璃碳电极浸入到pH 7.2的柠檬酸-磷酸缓冲液中，保存在4℃的冰箱中18h，以便除去电极表面过量的用于海产品中甲基亚胂酸检测的基于核酸适配子的分子印迹聚合物，当电极用去离子水彻底清洗以后，制备成功用于海产品中甲基亚胂酸检测的基于核酸适配子的分子印迹膜电极。
将制得的用于海产品中甲基亚胂酸检测的基于核酸适配子的分子印迹膜电极连接到电化学工作站，对环境样品提取液中的甲基亚胂酸进行检测，结果见表1。
实施例3（砷糖PO4）
一种用于海产品中砷糖PO4检测的基于核酸适配子的分子印迹膜电极的制备方法，包括以下步骤：
(1) 选择能与砷糖PO4合成分子印迹聚合物的功能单体核酸适配子；
(2) 将模板分子砷糖PO4，功能单体核酸适配子，交联剂N、N-亚甲基二丙烯酰胺，致孔剂甲醇，引发剂偶氮二异丁腈，有机溶剂二氯甲烷按摩尔比1∶2.5∶5∶65∶0.08∶10，混合均匀，得到用于海产品中砷糖PO4检测的基于核酸适配子的分子印迹聚合物溶液；
(3) 工作电极选用玻璃碳电极，将电极表面用0.05 μm的氧化铝粉打磨，超声波清洗，再分别用1 mol/L HNO3, 1 mol/L NaOH清洗，然后用双蒸水彻底清洗数次，吹干，保证电极表面光亮无杂质；
(4) 将玻璃碳电极浸泡在用于海产品中砷糖PO4检测的基于核酸适配子的分子印迹聚合物溶液中10 min，然后将电极取出，用甲醇和乙酸混合液洗脱工作电极表面20 min，直至把这一层中的模版分子砷糖PO4分子完全洗掉，在室温下干燥10 min，如此循环，重复上述过程7次；
(5) 将(4)中制备的电极浸入到pH7.0的柠檬酸-磷酸缓冲液中，保存在4℃的冰箱中24h，以便除去电极表面过量的用于海产品中砷糖PO4检测的基于核酸适配子的分子印迹聚合物，当电极用去离子水彻底清洗以后，制备成功用于海产品中砷糖PO4检测的基于核酸适配子的分子印迹膜电极。
将制得的用于海产品中砷糖PO4检测的基于核酸适配子的分子印迹膜电极连接到电化学工作站，对环境样品提取液中砷糖PO4进行检测。结果见表1。
实施例4（砷胆碱）
一种用于海产品中砷胆碱检测的基于核酸适配子的分子印迹膜电极的制备方法，包括以下步骤：
(1) 选择能与砷胆碱合成分子印迹聚合物的功能单体核酸适配子；
(2) 将模板分子砷胆碱，功能单体核酸适配子，交联剂3，5-二（丙烯酰胺）苯甲酸，致孔剂异丙醇，引发剂偶氮二异丁腈，有机溶剂二氯甲烷按摩尔比0.8∶2.5∶1∶80∶0.1∶9，混合均匀，得到用于海产品中砷胆碱检测的基于核酸适配子的分子印迹聚合物溶液；
(3) 工作电极选用玻璃碳电极，将电极表面用0.05 μm的氧化铝粉打磨，超声波清洗，再分别用1 mol/L HNO3，1 mol/L NaOH清洗，然后用双蒸水彻底清洗数次，吹干，保证电极表面光亮无杂质；
(4) 将玻璃碳电极浸泡在用于海产品中砷胆碱检测的基于核酸适配子的分子印迹聚合物溶液中8分钟，然后将电极取出，用甲醇和乙酸混合液洗脱电极表面，直至把这一层中的模版分子砷胆碱分子完全洗掉，在室温下干燥8 min，如此循环，重复上述过程5次；
(5) 将(4)中制备的电极浸入到pH7.5的柠檬酸-磷酸缓冲液中，保存在4℃的冰箱中22h，以便除去电极表面过量的用于海产品中砷胆碱检测的基于核酸适配子的分子印迹聚合物，当工作电极用去离子水彻底清洗以后，制备成功用于海产品中砷胆碱检测的基于核酸适配子的分子印迹膜电极。
将制得的用于海产品中砷胆碱检测的基于核酸适配子的分子印迹膜电极连接到电化学工作站，对环境样品提取液中砷胆碱进行检测，结果见表1。
实施例5
一种基于核酸适配子的二甲基胂酸分子印迹膜电极的制备方法，包括以下步骤：
（1）选择能与二甲基胂酸合成分子印迹聚合物的功能单体核酸适配子；
（2）将模板分子，核酸适配子功能单体，交联剂，致孔剂，引发剂，有机溶剂按摩尔比为1.2∶2.5∶5∶40∶0.01∶8混合均匀，得到基于核酸适配子的二甲基胂酸分子印迹聚合物溶液，模板分子为二甲基胂酸，交联剂为二乙烯基苯，致孔剂为甲醇，引发剂为偶氮二异丁腈，有机溶剂为四氯化碳；
（3）工作电极选用玻璃碳电极，将电极表面用0.05 μm的氧化铝粉打磨，超声波清洗，再分别用1 mol/L HNO3，1 mol/L NaOH清洗，然后用双蒸水彻底清洗数次，吹干，保证电极表面光亮无杂质；
（4）将玻璃碳电极浸泡在用于海产品中二甲基胂酸检测的基于核酸适配子的分子印迹聚合物溶液中6分钟，然后将电极取出，用水洗脱电极表面20分钟，直至把这一层中的模版分子二甲基胂酸分子完全洗掉，在室温下干燥6 min，如此循环，重复上述过程4次；
（5）将(4)中制备的电极浸入到pH6.9的柠檬酸-磷酸缓冲液中，保存在4℃的冰箱中20h，以便除去电极表面过量的用于海产品中二甲基胂酸检测的基于核酸适配子的分子印迹聚合物，当工作电极用去离子水彻底清洗以后，制备成功用于海产品中二甲基胂酸检测的基于核酸适配子的分子印迹膜电极。
将制得的用于海产品中二甲基胂酸检测的基于核酸适配子的分子印迹膜电极连接到电化学工作站，对环境样品提取液中砷胆碱进行检测，结果见表1。
实施例6
一种基于核酸适配子的砷糖OH分子印迹膜电极的制备方法，包括以下步骤：
（1）选择能与砷糖OH合成分子印迹聚合物的功能单体核酸适配子；
（2）将模板分子，核酸适配子功能单体，交联剂，致孔剂，引发剂，有机溶剂按摩尔比为0.2∶2.5∶0.5∶90∶0.01∶1.0混合均匀，得到基于核酸适配子的砷糖OH分子印迹聚合物溶液，模板分子为砷糖OH，核酸适配子功能单体为N-乙酰糖胺，交联剂为季戊四醇三丙烯酸酯，致孔剂为二甲基亚砜，引发剂为偶氮二异丁腈，有机溶剂为四氯化碳；
（3）工作电极选用玻璃碳电极，将电极表面用0.05 μm的氧化铝粉打磨，超声波清洗，再分别用1 mol/L HNO3，1 mol/L NaOH清洗，然后用双蒸水彻底清洗数次，吹干，保证电极表面光亮无杂质；
（4）将玻璃碳电极浸泡在用于海产品中砷糖OH检测的基于核酸适配子的分子印迹聚合物溶液中8分钟，然后将电极取出，用乙腈洗脱电极表面30分钟，直至把这一层中的模版分子砷胆碱分子完全洗掉，在室温下干燥6 min，如此循环，重复上述过程7次；
（5）将(4)中制备的电极浸入到pH6.9的柠檬酸-磷酸缓冲液中，保存在4℃的冰箱中20h，以便除去电极表面过量的用于海产品中砷糖OH检测的基于核酸适配子的分子印迹聚合物，当工作电极用去离子水彻底清洗以后，制备成功用于海产品中砷糖OH检测的基于核酸适配子的分子印迹膜电极。
将制得的用于海产品中砷糖OH检测的基于核酸适配子的分子印迹膜电极连接到电化学工作站，对环境样品提取液中砷胆碱进行检测，结果见表1。
实施例7
一种基于核酸适配子的砷糖SO3分子印迹膜电极的制备方法，包括以下步骤：
（1）选择能与砷糖SO3合成分子印迹聚合物的功能单体核酸适配子；
（2）将模板分子，功能单体核酸适配子，交联剂，致孔剂，引发剂，有机溶剂按摩尔比0.1∶2.5∶1∶80∶0.1∶2，混合均匀，得到基于核酸适配子的砷糖SO3分子印迹聚合物溶液，模板分子为砷糖SO3，核酸适配子功能单体为唾液酸神经节苷脂，交联剂为3，5-二（丙烯酰胺）苯甲酸，致孔剂为异丙醇，引发剂为偶氮二异丁腈，有机溶剂为二氯甲烷；
（3）工作电极选用玻璃碳电极，将电极表面用0.05 μm的氧化铝粉打磨，超声波清洗，再分别用1 mol/L HNO3，1 mol/L NaOH清洗，然后用双蒸水彻底清洗数次，吹干，保证电极表面光亮无杂质；
（4）将玻璃碳电极浸泡在用于海产品中砷糖SO3检测的基于核酸适配子的分子印迹聚合物溶液中10分钟，然后将电极取出，用乙腈-乙酸洗脱电极表面25分钟，直至把这一层中的模版分子砷胆碱分子完全洗掉，在室温下干燥10min，如此循环，重复上述过程7次；
（5）将(4)中制备的电极浸入到pH6.9的柠檬酸-磷酸缓冲液中，保存在4℃的冰箱中12h，以便除去电极表面过量的用于海产品中砷糖SO3检测的基于核酸适配子的分子印迹聚合物，当工作电极用去离子水彻底清洗以后，制备成功用于海产品中砷糖SO3检测的基于核酸适配子的分子印迹膜电极。
将制得的用于海产品中砷糖SO3检测的基于核酸适配子的分子印迹膜电极连接到电化学工作站，对环境样品提取液中砷胆碱进行检测，结果见表1。
实施例8
一种基于核酸适配子的砷糖SO4分子印迹膜电极的制备方法，包括以下步骤：
（1）选择能与砷糖SO4合成分子印迹聚合物的功能单体核酸适配子；
（2）将模板分子，功能单体核酸适配子，交联剂，致孔剂，引发剂，有机溶剂按摩尔比2∶2.5∶5∶60∶0.1∶6，混合均匀，得到基于核酸适配子的砷糖SO4分子印迹聚合物溶液，模板分子为砷糖SO4，核酸适配子功能单体为唾液酸神经节苷脂，交联剂为3，5-二（丙烯酰胺）苯甲酸，致孔剂为异丙醇，引发剂为偶氮二异丁腈，有机溶剂为二氯甲烷；
（3）工作电极选用玻璃碳电极，将电极表面用0.05 μm的氧化铝粉打磨，超声波清洗，再分别用1 mol/L HNO3，1 mol/L NaOH清洗，然后用双蒸水彻底清洗数次，吹干，保证电极表面光亮无杂质；
（4）将玻璃碳电极浸泡在用于海产品中砷糖SO4检测的基于核酸适配子的分子印迹聚合物溶液中5分钟，然后将电极取出，用甲醇-乙酸洗脱电极表面20分钟，直至把这一层中的模版分子砷胆碱分子完全洗掉，在室温下干燥5min，如此循环，重复上述过程4次；
（5）将(4)中制备的电极浸入到pH6.8的柠檬酸-磷酸缓冲液中，保存在4℃的冰箱中12h，以便除去电极表面过量的用于海产品中砷糖SO4检测的基于核酸适配子的分子印迹聚合物，当工作电极用去离子水彻底清洗以后，制备成功用于海产品中砷糖SO4检测的基于核酸适配子的分子印迹膜电极。
将制得的用于海产品中砷糖SO4检测的基于核酸适配子的分子印迹膜电极连接到电化学工作站，对环境样品提取液中砷胆碱进行检测，结果见表1。
表1本发明基于核酸适配子的分子印迹膜电极检测效果
Claims (8)
1.一种用于海产品中有机砷化物检测的基于核酸适配子的分子印迹膜电极的制备方法，其特征在于包括以下步骤：
(1) 选择能与有机砷化物合成分子印迹聚合物的功能单体核酸适配子；
(2) 按一定摩尔比将有机砷化物模板分子、功能单体、交联剂、致孔剂、引发剂和有机溶剂混合均匀制成用于海产品中有机砷化物检测的基于核酸适配子的分子印迹聚合物溶液；
(3) 利用电极表面修饰技术，将用于海产品中有机砷化物检测的基于核酸适配子的分子印迹聚合物修饰到传感器电极表面上。
2.根据权利要求1所述制备方法，其特征在于：所述有机砷化物模板分子、功能单体、交联剂、致孔剂、引发剂和有机溶剂的摩尔比为0.1～3∶5∶0.1～5∶40～90∶0.01～0.5∶1.0～10。
3.根据权利要求1或2所述制备方法，其特征在于：所述功能单体为核酸适配子；所述引发剂为偶氮二异丁腈；所述交联剂为三羟甲基丙烷三甲基丙烯酸酯、N，N-亚甲基二丙烯酰胺、N，N-1，4-亚苯基二丙烯酰胺、3，5-二（丙烯酰胺）苯甲酸、乙二醇二甲基丙烯酸酯、二乙烯基苯、N，O-二丙烯酰-L-苯丙胺醇、季戊四醇三丙烯酸酯或季戊四醇四丙烯酸酯；所述致孔剂为二氯甲烷、氯仿、乙腈、甲醇、异丙醇、四氯化碳、杂环化合物酰胺或砜类；所述有机溶剂为二氯甲烷或四氯化碳。
4.根据权利要求1或2所述制备方法，其特征在于：将用于海产品中有机砷化物检测的基于核酸适配子的分子印迹聚合物修饰到传感器电极表面包括以下步骤：
(1) 将工作电极表面用0.05 μm的氧化铝粉打磨，超声波清洗，再依次用1 mol/L HNO3，1 mol/L NaOH清洗，然后用双蒸水彻底清洗数次，晾干；
(2) 将晾干的工作电极浸泡于用于海产品中有机砷化物检测的基于核酸适配子的分子印迹聚合物溶液中5-10分钟，再取出用洗脱剂洗脱20-30分钟，直至将模板分子有机砷化物完全洗掉，然后在室温下干燥5-10分钟；
(3) 重复步骤(2) 4-7次，制得所述用于海产品中有机砷化物检测的基于核酸适配子的分子印迹膜电极。
5.根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于还包括以下步骤：将制得的用于海产品中有机砷化物检测的基于核酸适配子的分子印迹膜电极浸入pH6.8-7.5的缓冲液中，保存在4℃冰箱12~24h，然后用去离子水彻底清洗。
6.根据权利要求5所述的制备方法，其特征在于所述洗脱剂为乙腈、水、甲醇-乙酸或乙腈-乙酸。
7.所述缓冲液为柠檬酸-磷酸溶液。
8.一种检测有机砷化物的方法，其特征在于包括以下步骤：将上述方法制得的用于海产品中有机砷化物检测的基于核酸适配子的分子印迹膜电极连接到电化学工作站，对环境样品提取液中的有机砷化物进行检测。
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| CN (1) | CN102520039A (zh) |
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