CN102378630A - 用于治疗精神分裂症的包含2,4,6-三氨基-1,3,5-三嗪衍生物的组合物 - Google Patents

Abstract

本发明可用于提供一种预防和/或治疗精神分裂症的优异药物组合物，其包含BEC1钾通道抑制剂或其可药用的盐作为活性成分，并且本发明特别可用于提供一种预防和/或治疗精神分裂症的阳性症状、阴性症状、认知障碍等的药物组合物。

Description

用于治疗精神分裂症的包含2,4,6-三氨基-1,3,5-三嗪衍生物的组合物

技术领域

本发明涉及BEC1钾通道抑制剂作为治疗精神分裂症用药剂的新的药物用途。 

背景技术

精神分裂症是一种严重的精神障碍，是预后差的疾病，而且终生发病率相对较高，其高达0.7％至2.0％(参见PLoS Med.2：413-433，2005，以引用方式并入本文)。精神分裂症的症状分为阳性症状、阴性症状、认知障碍和心境障碍。精神分裂症的治疗采用心理疗法、职业疗法和药物疗法。其中，药物疗法起着重要作用。然而，精神分裂症患者仍然遭受这种疾病易复发、持续发作、难治愈的问题，或由抗精神病药导致的迟发性运动障碍或锥体外系副作用的问题。 

在用于精神分裂症的药物疗法中，主要使用抗精神病药。抗精神病药可分为第一代抗精神病药和第二代抗精神病药。第一代抗精神病药是中枢多巴胺受体拮抗剂，特别是多巴胺D2受体拮抗剂。具体来说，可提及氯丙嗪、氟哌啶醇、溴哌利多、羟哌氯丙嗪等。另一方面，第二代抗精神病药包括：除了对多巴胺D2受体具有阻断作用之外还对5-羟色胺受体具有额外阻断作用的那些药物(利哌酮、哌罗匹隆、齐拉西酮等)，或对多种其他受体具有额外阻断作用的那些药物(氯氮平、奥氮平等)，以及充当多巴胺D2受体的部分激动剂的那些药物(阿立哌唑等)等。对于上述任何一种抗精神病药而言，认为其改善效果仍然不足，并且基于多巴胺受体阻断作用的不利副作用的出现也是一个问题(参见Japanese Journal of Clinical Psychopharmacology，11：1089-1011，2008，以引用方式并入本文)。 

钾通道是存在于细胞质膜中并使钾离子选择性地通过的蛋白质，并且被认为对控制细胞的膜电位起着重要作用。特别是，钾通道通过 调节神经细胞和肌肉细胞中动作电位的频率、持续性等，来促进中枢及周围神经的神经传递、心脏起搏和肌肉收缩等。 

当根据开闭式机制对通道进行分类时，目前已经识别出电压依赖性钾通道、内向整流型钾通道、钙依赖性钾通道、受体耦合型钾通道等。其中，电压依赖性钾通道具有在膜电位发生去极化时开启的特点。通常，钾离子以细胞外部分约为5mM、细胞内部分约为150mM的非平衡状态存在。因此，当电压依赖性钾通道因发生去极化而开启时，钾离子会由细胞内流出至细胞外，结果引发膜电位的恢复(即复极化)。因而，随着电压依赖性通道的开启，会引起神经细胞和肌肉细胞的兴奋性下降(参见Ionic Channels of Excited Membranes，Sinauer Associates，Sunderland，1992，以引用方式并入本文)。 

使电压依赖性通道的开启发生改变的化合物通过调节神经细胞和肌肉细胞等的兴奋性来调整各种生理现象，并且还可作为各种疾病的治疗药物。例如，已知在神经细胞中发现的A型电压依赖性钾通道的抑制剂4-氨基吡啶通过提高神经兴奋性而引发癫痫(参见EpilepsyRes.11：9-16，2002，以引用方式并入本文)。此外，在电压依赖性钾通道中，在心脏中表达的hERG钾通道的抑制剂多非利特(dofetilide)，根据其控制心肌细胞的兴奋性而被用作治疗心律失常的药物(参见J.Pharmacol.Exp.Ther.256：318-324，1991，以引用方式并入本文)。 

在美国专利No.6,326,168实施例1的SEQ ID NO：2中所阐述的钾通道(以下表示为BEC1或BEC1钾通道)是局部地在脑中表达分布的电压依赖性钾通道(美国专利No.6,326,168以引用方式并入本文)。在海马体或大脑皮层中，这种通道的表达是显著的。海马体和大脑皮层被认为是与学习和记忆有很强关联的区域(参见The Neuron：Cell and Molecular Biology，Oxford University Press，New York，NY，1991，以引用方式并入本文)。 

由此，设想有这样一种可能性：BEC1钾通道与学习和记忆有关。事实上，已经公开了具有美国专利No.7,375,222中所描述的在海马体和大脑皮层中高度表达的BEC1钾通道的转基因鼠，该转基因鼠在 Morris水迷宫学习实验和被动回避学习实验中的学习能力下降(美国专利No.7,375,222以引用方式并入本文)。依据这个事实，人们设想BEC1钾通道抑制剂增强了学习和记忆能力，因此其被认为是极具潜力的老年痴呆症用治疗药物。 

迄今为止，人们报道了大量的钾通道抑制剂，但所报道的抑制BEC 1钾通道的化合物只有2，4，6-三氨基-1，3，5-三嗪衍生物(在美国专利No.7,375,222中有所描述，以引用方式并入本文)。此外，WO2002/050066中披露了1，3，5-三嗪-2，4，6-三胺衍生物的某些类型具有蛋白激酶抑制活性，可以用作治疗阿尔茨海默病和帕金森病的药物(WO2002/050066以引用方式并入本文)。然而，目前为止尚未报道提出，将BEC1钾通道抑制剂用于除痴呆症以外的疾病，如精神分裂症。 

发明内容

本发明的目的在于提供一种精神分裂症治疗药剂，其具有与传统抗精神病药不同的新的作用机制。 

为了实现上述目的，本发明的发明人基于独特的构思进行了研究，并且发现BEC1钾通道抑制剂对精神分裂症表现出显著的治疗作用，从而完成本发明。 

根据本发明的一个方面，提供一种预防和/或治疗精神分裂症的药物组合物，其含有：有效量的BEC1钾通道抑制剂或其可药用的盐，以及可药用载体。 

根据本发明的另一方面，提供一种精神分裂症的预防和/或治疗药剂，其含有BEC1钾通道抑制剂或其可药用的盐作为其活性成分。 

根据本发明的另一方面，提供一种预防和/或治疗精神分裂症的BEC1钾通道抑制剂或其可药用的盐。 

根据本发明的又一方面，提供BEC1钾通道抑制剂或其可药用的盐在制造精神分裂症治疗用药剂中的用途。 

根据本发明的又一方面，提供一种预防和/或治疗精神分裂症的方法，包括对需要这种治疗的人施用有效量的BEC1钾通道抑制剂或其可药用的盐。 

根据本发明的又一方面，提供一种治疗精神分裂症用药物组合物的制备方法，该方法包括将BEC1钾通道抑制剂或其可药用的盐与可药用赋形剂混合。 

根据本发明的又一方面，提供一种商业包装，其包括：含有BEC1钾通道抑制剂或其可药用的盐作为活性成分的药物组合物，以及说明书，该说明书记载了所述BEC1钾通道抑制剂或其可药用的盐能用于或应当用于治疗精神分裂症。 

本发明的详述 

本发明的优选实施方案将在下文示出。 

(1)一种预防和/或治疗精神分裂症的药物组合物，其含有：有效量的式(I)所示的化合物或其可药用的盐，以及可药用载体： 

其中，各符号如下所述： 

R¹和R²可以相同或不同，各自表示H、OH、低级烷基-O-、芳基-CO-、NH₂、可被OH取代的低级烷基-NH、(低级烷基)₂N、可被取代的低级烷基或可被取代的杂环基。 

R³、R⁴、R⁵和R⁶可以相同或不同，各自表示(i)H，(ii)CN，(iii)NO₂，(iv)卤素，(v)可被(1)CN、(2)卤素或(3)OH取代的低级烷基，(vi)环烷基，(vii)可被低级烷基取代的芳基，(viii)可被低级烷基取代的杂环基，(ix)R⁷R⁸N-(其中，R⁷和R⁸可以相同或不同，各自表示(1)H、(2)芳基或(3)可被R⁹-O-CO-(其中，R⁹表示(1)H或(2)可被芳基取代的低级烷基))取代的低级烷基，(x)R¹⁰-T¹-(其中，R¹⁰表示(1)氢，(2)可被芳基、HO-C_1-10亚烷基-O-或OH取代的低级烷基，或(3)芳基；T¹表示O或S)，(xi)R¹¹-T²-(其中，R¹¹表示(1)OH、(2)R⁷R⁸N-、(3)低级烷基-O-、(4)低级烷基、(5)芳基或(6)杂环基；T²表示 CO或SO₂)。 

(2)根据(1)所述的药物组合物，其中，R¹和R²可以相同或不同，各自表示H或可被杂环基取代的低级烷基，其中所述杂环基可被取代R³、R⁴、R⁵和R⁶可以相同或不同，各自表示(i)H、(ii)卤素或(iii)R¹⁰-T¹-(其中，R¹⁰表示低级烷基，T¹表示O)。 

(3)根据(1)或(2)所述的药物组合物，其中，R¹和R²可以相同或不同，各自表示H或可被选自嘧啶或吡啶的杂环基取代的低级烷基，其中所述杂环基可被选自由卤素、低级烷基和低级烷基-O-组成的组中的取代基所取代。 

(4)根据(1)至(3)所述的药物组合物，其中，R¹表示氢；R²表示被选自嘧啶或吡啶的杂环基取代的低级烷基，其中所述杂环基可被选自由卤素、低级烷基和低级烷基-O-组成的组中的取代基所取代；R³和R⁶各自表示氢；R⁴和R⁵可以相同或不同，各自表示(i)H、(ii)卤素或(iii)R¹⁰-T¹-(其中，R¹⁰表示低级烷基，T¹表示O)。 

(5)根据(1)至(4)所述的药物组合物，其中，R¹表示H；R²表示被嘧啶取代的低级烷基，其中嘧啶可被选自由卤素、低级烷基和低级烷基-O-组成的组中的取代基所取代；R³和R⁶各自表示氢R⁴和R⁵可以相同或不同，各自表示(i)H、(ii)卤素或(iii)R¹⁰-T¹-(其中，R¹⁰表示低级烷基，T¹表示O)。 

(6)根据(1)至(4)所述的药物组合物，其中，R¹表示氢；R²表示被吡啶取代的低级烷基，其中吡啶可被选自由卤素、低级烷基和低级烷基-O-组成的组中的取代基所取代；R³和R⁶各自表示氢R⁴和R⁵可以相同或不同，各自表示(i)H、(ii)卤素或(iii)R¹⁰-T¹-(其中，R¹⁰表示低级烷基，T¹表示O)。 

(7)根据(1)至(6)所述的药物组合物，其中，所述精神分裂症选自由如下症状组成的组：与精神分裂症相关的阳性症状(幻觉、妄想、外界体验、言语杂乱、行为高度错乱或行为紧张等)、与精神分裂症相关的阴性症状(情感冷淡、思维贫乏、冷漠、自闭、快感缺乏等)、与精神分裂症相关的认知障碍和与精神分裂症相关的心境障碍(抑郁、焦虑等)。 

关于在本发明中包括的式(I)的具体化合物，可以提及下列化合物。 

N-(4-氟苯基)-N’-苯基-N”-(嘧啶-2-基甲基)-1，3，5-三嗪-2，4，6-三胺、N，N’-二(4-氟苯基)-N”-(嘧啶-2-基甲基)-1，3，5-三嗪-2，4，6-三胺、N-(4-氟苯基)-N’-(4-甲氧基苯基)-N”-(嘧啶-2-基甲基)-1，3，5-三嗪-2，4，6-三胺、N，N’-二(4-氟苯基)-N”-(嘧啶-4-基甲基)-1，3，5-三嗪-2，4，6-三胺或N-(4-氟苯基)-N’-[(2-氟-4-吡啶基)甲基]-N”-苯基-1，3，5-三嗪-2，4，6-三胺。 

针对本申请的上面的描述或下面的描述，以下将包含在本发明的范围之内的各个定义的合适例子进行详细描述。 

术语“低级烷基”指含有1～6个碳原子的直链或支链烷基(以下简写为C_1-6)，并且包括(例如)甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基、叔丁基、正戊基、正己基等。在另一实施方案中，低级烷基为C_1-4烷基，在又一实施方案中，低级烷基为甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、异丁基、叔丁基、戊基或己基。 

术语“卤素”指F、Cl、Br或I。 

术语“C_1-10亚烷基”指直链或支链的C_1-10亚烷基，并且包括(例如)亚甲基、亚乙基、三亚甲基、四亚甲基、五亚甲基、六亚甲基、七亚甲基、八亚甲基、九亚甲基、十亚甲基、亚丙基、甲基亚甲基、乙基亚乙基、1，2-二甲基亚乙基、1，1，2，2-四甲基亚乙基等。 

术语“环烷基”指C_3-10饱和环烃基团，并且其可以是桥接的。环烷基包括(例如)环丙基、环丁基、环戊基、环己基、环庚基、环辛基、金刚烷基等。在另一实施方案中，环烷基为C_3-8环烷基，在又一实施方案中，环烷基为C_3-6环烷基。 

术语“芳基”指C_6-14单环至三环芳烃基团，并且包括(例如)苯基和萘基。在另一实施方案中，芳基为苯基。 

术语“杂环”基团指含有1至4个选自氧、硫和氮中的杂原子的3元至15元(在另一实施方案中，为5元至10元)的单环至三环杂环基团，并且包括饱和环状基团、芳环基团和部分氢化的环状基团。作为成环原子的硫或氮原子可被氧化形成氧化物或二氧化物。具体的 例子包括单环芳杂基，如吡啶基、吡咯基、吡嗪基、嘧啶基、哒嗪基、咪唑基、三唑基、三嗪基、四唑基、噻唑基、吡唑基、异噻唑基、 

唑基、异 

唑基、噻二唑基、 

二唑基、噻吩基或呋喃基；双环芳杂基，如吲哚基、异吲哚基、苯并咪唑基、吲唑基、喹啉基、异喹啉基、喹唑啉基、喹喔啉基、2，3-二氮杂萘基、苯并噻唑基、苯并异噻唑基、苯并噻二唑基、苯并 

唑基、苯并异 

唑基、苯并呋喃基或苯并噻吩基；三环芳杂基，如咔唑基、二苯并[b，d]呋喃基或二苯并[b，d]噻吩基；非芳香单杂环，如氮杂环丁烷基、吡咯烷基、哌啶基、哌嗪基、氮杂环庚烷基、二氮杂环庚烷基、吗啉基、硫代吗啉基、四氢吡啶基、氧杂环丁烷基、四氢呋喃基、四氢吡喃基、二氧戊环基、二 

烷基或四氢噻喃基；非芳香二杂环，如吲哚啉基、四氢喹啉基、四氢异喹啉基、二氢苯并咪唑基、四氢苯并咪唑基、四氢喹喔啉基、二氢喹喔啉基、二氢苯并 

唑基、二氢苯并 

嗪基、二氢苯并呋喃基、色原烷基(chromanyl)、色原烯基(chromenyl)、甲二氧基苯基或乙二氧基苯基；桥杂环，如奎宁环基等。在另一实施方案中，杂环基团为5到10元的单环或双环的杂环基团，在又一实施方案中，杂环基团为5到6元的单环杂环基团，在又一实施方案中，杂环基团为5到6元的单环杂芳基。 

“可被取代的低级烷基”和“可被取代的杂环基团”指可分别被包括下面示出的一个或两个或更多个基团在内的取代基所取代的“低级烷基”和“杂环基团”： 

-OH、-NH₂、-NH(低级烷基)、-N(低级烷基)₂、-CN、-COOH、NO₂、低级烷基、-O-低级烷基、卤素、环烷基、芳基和杂环基(其中，上述环烷基、芳基和杂环基团可以被选自下列基团中的一个或两个或更多个取代基所取代：-OH、-NH₂、-NH(低级烷基)、-N(低级烷基)₂、-CN、-COOH、NO₂、低级烷基、-O-低级烷基、卤素、环烷基、芳基和杂环基)。 

术语“BEC1”或“BEC1钾通道”指在SEQ ID NO.2中阐明的蛋白质，其已经在美国专利No.6,326,168或美国专利No.7,375,222中报道。 

术语“BEC1钾通道抑制剂”是指抑制BEC1钾通道的物质，例如，根据在实施例1中所描述的评价方法，其是指IC₅₀值小于或等于10μM的物质；在另一实施方案中，其是指IC₅₀值小于或等于1μM的物质；在又一实施方案中，其是指IC₅₀值小于或等于0.5μM的物质。BEC 1钾通道抑制剂通过对测试化合物进行代表性的筛选方法(例如在美国专利No.6,326,168或7,375,222中所描述的方法)而得到。 

根据取代基的类型，式(I)的化合物可具有互变异构体或几何异构体。在本说明书中，在某些情况下可将式(I)的化合物仅作为异构体的一种形式进行描述，但本发明还包括其他异构体，以及分离的异构体或其混合物。 

式(I)的化合物还可以具有不对称碳原子或者轴不对称性，由此还可存在光学异构体。本发明包括式(I)化合物的分离的光学异构体或其混合物。 

另外，本发明还包括式(I)所表示的化合物的可药用前药。可药用前药是指具有如下基团的化合物：该基团在溶剂分解作用或在生理条件下能够转化为(本发明的)氨基、羟基、羧基等基团。形成前药的基团的例子包括在Prog.Med.，5，2157-2161(1985)或“Development of Pharmaceutical Products”(Hirokawa-Shoten，Ltd.，1990)，Vol.7Molecular Design，163-198中所描述的基团，两者以引用方式并入本文。 

根据取代基的类型，式(I)的化合物还可以与酸形成酸加成盐，并且只要该盐为可药用盐，其也被包含在本发明的范围之内。具体的例子包括与无机酸(如盐酸、氢溴酸、氢碘酸、硫酸、硝酸或磷酸)、或有机酸(如甲酸、乙酸、丙酸、草酸、丙二酸、丁二酸、富马酸、马来酸、乳酸、苹果酸、扁桃酸、酒石酸、二苯甲酰酒石酸、二甲苯酰酒石酸、柠檬酸、甲磺酸、乙磺酸、苯磺酸、对甲苯磺酸、天冬氨酸或谷氨酸)等形成的酸加成盐。 

式(I)的化合物和/或其药用盐可以通过在美国专利No.7,375,222中所描述的制备方法(该专利以引用方式并入本文)或与之等同的制备方法来获得。 

含有式(I)的化合物或其一种或两种或更多种可药用盐作为活性成分的药物组合物可按照传统使用方法，通过使用在相关技术中常规使用的药物赋形剂、药物载体等来制备。 

可以通过口服给药方式和胃肠外给药方式中的任意一种进行给药，口服给药可借助片剂、丸剂、胶囊剂、颗粒剂、粉末剂、溶液剂等进行，胃肠外给药可借助注射剂(通过关节内注射、静脉注射、肌内途径注射)、栓剂、滴眼剂、眼膏剂、透皮溶液剂、软膏剂、透皮贴片剂、穿粘膜溶液剂、穿粘膜贴片剂、吸入剂等进行。 

作为用于口服给药的固体组合物，使用片剂、粉末剂、颗粒剂等。在这些固体组合物中，将一种或两种或更多种的活性成分与至少一种惰性赋形剂(例如乳糖、甘露醇、葡萄糖、羟丙基纤维素、微晶纤维素、淀粉、聚乙烯吡咯烷酮和/或偏硅酸镁铝等)混合。按照标准方法，该组合物还可以包含惰性添加剂，例如润滑剂(如硬脂酸镁)、崩解剂(如羧甲基淀粉钠)、稳定剂和助溶剂。如果需要，可以用糖衣或用胃溶或肠溶材料膜对片剂或丸剂进行包衣。 

用于口服给药的液体组合物包括可药用乳剂、溶液剂、混悬剂、糖浆剂或酏剂等，并含有常用的惰性稀释剂，如纯水或乙醇。除了惰性稀释剂，液体组合物中还可以包含助剂，如增溶剂、润湿剂、混悬剂、甜味剂、调味剂、芳香剂或防腐剂。 

用于胃肠外给药的注射剂含有无菌水性或非水性溶液剂、混悬剂或乳剂。水性溶剂的例子包括注射用蒸馏水和生理盐水。非水性溶剂的例子包括丙二醇、聚乙二醇、植物油(如橄榄油)、醇类(如乙醇)、聚山梨醇酯80(日本药典命名)等。此外，这些组合物中还可以含有等渗剂、防腐剂、润湿剂、乳化剂、分散剂、稳定剂或助溶剂。这些组合物通过(例如)用细菌截留过滤器过滤、加入杀菌剂或辐照而进行灭菌。另外，在注射使用之前，可以先制备出无菌固体组合物，然后将其溶于或混悬于无菌水或无菌溶剂中。 

局部用制剂包括软膏剂、膏药剂、乳膏剂、凝胶剂、粘性皮肤贴剂、喷雾剂、洗剂、滴眼剂、眼膏剂等。局部用制剂中含有常用的软膏剂基质、洗剂基质、水性或非水性液体、混悬剂、乳剂等。例如， 作为软膏剂基质或洗剂基质，可以提到聚乙二醇、丙二醇、白矿脂、白蜂蜡、聚氧乙烯氢化蓖麻油、单硬脂酸甘油酯、十八烷醇、十六烷醇、聚桂醇、倍半油酸山梨坦等。 

经粘膜制剂(如吸入剂)或经鼻制剂以固态、液态或半固态形式使用，并且可以按照传统已知的方法进行制备。例如，可适当加入已知的赋形剂，此外还可适当加入pH调节剂、防腐剂、表面活性剂、润滑剂、稳定剂或增稠剂等。可以通过适宜的吸入或吹入装置进行给药。例如，化合物可以用已知装置(如定量吸入器或喷雾器)进行单独给药，或可以以规定混合物的粉末形式给药，或可以以与可药用载体组合的溶液剂或混悬剂形式给药。干粉吸入器等装置可用于单剂或多剂给药，并且可以使用干粉剂或含有干粉的胶囊剂。或者，制剂还可以以适宜的喷射剂(例如，使用诸如氯氟烷烃、氢氟烷烃或二氧化碳等适当气体的加压气溶胶喷雾剂)的形式进行给药。 

通常，在口服给药的情况下，日剂量适当地为约0.001mg/kg体重～100mg/kg体重，优选0.1mg/kg体重～30mg/kg体重，更优选0.1mg/kg体重～10mg/kg体重，并且以一次或者分成两份到四份的形式给药。在静脉内给药的情况下，日剂量适当地为约0.001mg/kg体重～10mg/kg体重，并且以每日一次或每日分成多份的形式进行给药。对于经粘膜制剂，日剂量为约0.001mg/kg体重～100mg/kg体重，并且以每日一次或每日分成多份的形式进行给药。在考虑症状、年龄、性别等因素的同时，根据个体差异来合适地确定剂量。 

可将式(I)的化合物与用于治疗或预防精神分裂症的药剂组合使用。该组合可以同时或者分开并且依次给药，或者甚至可以按照所需的时间间隔给药。用于同时给药的制剂可以为混合制剂，或者可以独立配制。 

例子 

以下的参考例和实施例旨在更详细地描述本发明，而本发明并不局限于以下的实施例。虽然通过参考例和实施例对本发明进行了充分描述，但是本领域的普通技术人员将会理解各种变更或修改是确实可 能的。因此，只要该变更或修改没有超出本发明的范围，它们就被包括在本发明的范围之内。 

在下面所述的参考例、实施例和表中，将用到以下缩写。 

Ex：实施例编号，Rex：参考例编号，No：化合物编号，mp：熔点，Data：物化数据(FAB+：FAB-MS(M+H)⁺，EI：EI-MS(M) ⁺，NMR-DMSOd₆：在DMSO-d₆中由¹H NMR得到的δ(ppm))，DMF：N，N-二甲基甲酰胺，DMSO：二甲基亚砜，THF：四氢呋喃，4M氯化氢/二 烷溶液：4mol/L的氯化氢二 

烷溶液，MeCN：乙腈，MeOH：甲醇，EtOH：乙醇。 

参考例1-1 

向2L烧瓶中加入75.0g氯异氰尿酸和680mL THF，然后在-19℃、在搅拌情况下加入51.10g碳酸钾。向其中加入41.80g在-12.4℃或更低温度下用75mL THF稀释的对氟苯胺和75mL THF。在-12.8℃～14.4℃下反应1小时，加入450mL水。在室温下进行液相分离以分出水层，向其中加入300mL水，再次进行液相分离以分离出水层。将1)600mL THF和2)1.1g碳酸钾加入308mL水中以获得水溶液，将该水溶液加入有机层中，进行液相分离以分出水层。向有机层中加入150mL水，进行液相分离以分出水层，并将有机层减压浓缩至溶液残余量为280mL。向浓缩液中加入750mL MeCN，在减压下进行三次浓缩操作直至溶液的残余量为280mL。之后，在冷却下向其中加入600mL MeCN，之后在-5.9℃或更低温度下加入34.43g苯胺和75mL MeCN，并在-9.2℃下加入47.79g N，N-二异丙基乙胺和38mL MeCN。然后，将温度升至室温，并且在搅拌12小时后，在室温下向其中加入48.42g 2-氨甲基嘧啶和75mL MeCN，之后在室温下加入57.35g N，N-二异丙基乙胺和38mL MeCN。将内部温度升至82.4℃，随后搅拌4.5小时，在内部温度等于或高于70℃下向其中加入560mL水，之后冷却。证实内部温度为65.8℃时晶体析出，之后在室温下搅拌过夜，并过滤。将所获得的晶体用MeCN∶水＝2∶1的混合溶液洗涤，然后再用300mL水洗涤。在50℃下将所获得的晶体减压干燥1天，以得到108.54g的N-(4-氟苯基)-N’-苯基-N”-(嘧啶 -2-基甲基)-1，3，5-三嗪-2，4，6-三胺。 

参考例1-2 

向反应容器1中加入414L甲基乙基酮和23.00kg N-(4-氟苯基)-N’-苯基-N”-(嘧啶-2-基甲基)-1，3，5-三嗪-2，4，6-三胺，使其在内部温度为65.0℃下溶解。进行过滤，之后将混合物转移至反应容器2中，再次加热。将6.90kg富马酸和115L EtOH加入反应容器1中，使其在内部温度为58.3℃下溶解，然后将其转移至反应容器2中。冷却后，在内部温度为54.2℃下开始结晶，之后在0℃下搅拌过夜。在过滤后，将晶体用46L EtOH洗涤，将30.34kg所获得的“N-(4-氟苯基)-N’-苯基-N”-(嘧啶-2-基甲基)-1，3，5-三嗪-2，4，6-三胺与富马酸比值为1∶1”的盐晶体”(III型晶体：湿晶)和460L EtOH加入到反应容器2中。在内部温度为52.4～69.2℃下以悬浮状态搅拌42小时，冷却，室温下搅拌过夜。过滤后，将所获得的晶体用46L EtOH洗涤，之后在60℃下减压干燥4天，从而得到20.97kg“N-(4-氟苯基)-N’-苯基-N”-(嘧啶-2-基甲基)-1，3，5-三嗪-2，4，6-三胺与富马酸的比值为2∶1”的无水盐晶体(I型晶体)。 

参考例2-1 

向25g 2-嘧啶氰在100mL乙酸和100mL乙酸乙酯中的混合溶液内加入1g 10％的钯/碳，并在环境压力、氢气气氛、室温下将混合物搅拌14小时。通过使用硅藻土(Celite)进行过滤从反应混合物中除去钯/碳，并且重复以下的操作4次：向通过蒸去溶剂所获得的残余物中加入甲苯，并浓缩混合物。向所获得的残余物中加入MeCN使残余物固化，过滤收集固体，从而得到15.7g无色固体形式的1-嘧啶-2-基甲胺乙酸盐。 

1-嘧啶-2-基甲胺乙酸盐 

NMR-DMSOd₆： 

1.88(3H，s)，3.91(2H，brs)，4.1-5.3(3H，m)，7.38(1H，t，J＝4.9Hz)，8.78(2H，d，J＝4.9Hz). 

EI：109 

参考例2-2 

将4.71g 6-氯-N，N’-二(4-氟苯基)-1，3，5-三嗪-2，4-二胺在50mLMeCN中的溶液内加入2.507g 1-嘧啶-2-基甲胺乙酸盐和5.2mL N，N-二异丙基乙胺，并且将混合物在75℃下搅拌17小时。将反应混合物冷却至室温，之后向通过蒸去溶剂获得的残余物中加入乙酸乙酯。用5％的柠檬酸水溶液和饱和食盐水洗涤有机层，并且使用无水硫酸镁进行干燥，之后蒸去溶剂。将所获得的残余物用硅胶柱层析法(氯仿∶MeOH＝100∶0～95；5)纯化，从而得到6.0g淡黄色非晶材料。将其溶于180mL EtOH中，加入2g活性炭，并且将该混合物搅拌1小时。通过使用Celite过滤除去活性炭，并且将通过蒸去溶剂获得的残余物从150mL EtOH水溶液(EtOH 80％)中固化，从而得到4.84g无色固体形式的N，N’-二(4-氟苯基)-N”-(嘧啶-2-基甲基)-1，3，5-三嗪-2，4，6-三胺。 

将1.5g N，N’-二(4-氟苯基)-N”-(嘧啶-2-基甲基)-1，3，5-三嗪-2，4，6-三胺溶于300mL MeOH中，加入2mL 4M氯化氢/二 烷溶液。然后，蒸去溶剂，并使所获得的残余物从乙醇中结晶，从而得到1.66g无色晶体“N，N’-二(4-氟苯基)-N”-(嘧啶-2-基甲基)-1，3，5-三嗪-2，4，6-三胺与氯化氢的比值为1∶2”的盐”。 

参考例2-3 

将1.0g N，N’-二(4-氟苯基)-N”-(嘧啶-2-基甲基)-1，3，5-三嗪-2，4，6-三胺在50mL乙醇中的溶液内加入285.6mg富马酸在5mL乙醇中的溶液。很快，固体析出开始进行。在回流条件下加热该反应液以将固体完全溶解，之后在搅拌的同时使其冷却。在内部温度降至60℃时，向其中加入极少量的N，N’-二(4-氟苯基)-N”-(嘧啶-2-基甲基)-1，3，5-三嗪-2，4，6-三胺与富马酸的比值为1∶1的盐晶体，之后在室温下搅拌12小时使其冷却。过滤收集析出的晶体，将晶体用乙醇洗涤，在60℃下减压干燥2天，从而得到970mg无色晶体“N，N’-二(4-氟苯基)-N”-(嘧啶-2-基甲基)-1，3，5-三嗪-2，4，6-三胺与富马酸比值为1∶1”的盐”。 

下表2中列出的参考例3中的化合物(“N-(4-氟苯基)-N’-(4-甲氧基苯基)-N”-(嘧啶-2-基甲基)-1，3，5-三嗪-2，4，6-三胺与氯化氢比值为 1∶2”的盐”)和参考例4中的化合物(“N，N’-二(4-氟苯基)-N”-(嘧啶-4-基甲基)-1，3，5-三嗪-2，4，6-三胺·1.7氯化氢·0.2二乙醚·1.8 H₂O的组合物”)可以采用与参考例2-1、2-2、2-3中相同的方法来合成。 

参考例中化合物的结构和性质值列于下表1和2中。 

表1 

表2 

实施例1 

(测试方法) 

以86Rb离子释放量作为指标测定化合物的BEC1抑制活性的方法 

按照美国专利No.6,326,168或美国专利No.7,375,222中所描述的方法(以引用方式并入本文)，以BEC1表达细胞中放射性同位素86Rb的离子释放量为指标来测定BEC1的通道活性。具体来说，当用100mM KCl刺激摄入了86Rb离子的BEC1表达细胞时，将由相同细胞释放的辐射量定义为BEC1的通道活性。将BEC1稳定表达的细胞在86RbCl(0.5μCi/mL)存在下进行培养(37℃，3小时)，使86Rb离子被吸收入细胞中，并且用HEPES缓冲生理盐水(pH 7.4，2.5mM KCl)洗涤3次，除去未被吸收的86Rb离子。将相同细胞在含有测试化合物的DMSO溶液和HEPES缓冲生理盐水的存在下于室温下培养15分钟，之后在含有相同测试化合物的含100mM KCl的HEPES缓冲溶液(pH 7.4)存在下于室温下再培养5分钟。回收细胞外液，之后将剩余的细胞在0.1N NaOH中溶解并回收。分别测定细胞外液和细胞溶解产物的切伦科夫(Cherenkov)放射活性，并且将其总和定义为总放射活性。86Rb离子释放量以细胞外液放射活性相对于总放射活性的百分比表示。将化合物存在时测得的值称为测定 值，将化合物不存在时得到的值作为对照值，并且将未用100mM KCl刺激细胞时测得的值称为空白值。化合物(游离形式，不包括其盐)的抑制作用以从抑制％(即，(对照值-测定值)×100/(对照值-空白值))确定的IC₅₀值表示。另外，关于BEC1表达细胞，采用以中国田鼠卵巢细胞二氢叶酸还原酶(dhfr)缺陷株、参照美国专利No.6,326,168或美国专利No.7,375,222中所描述的方法(以引用方式并入本文)制备的BEC1稳定表达的细胞。 

(测试结果) 

代表性化合物的测试结果列于表3中。确认了相应化合物都具有BEC1钾通道抑制作用。 

实施例2 

(测试方法) 

采用甲基苯丙胺诱导的兴奋性运动(hyperlocomotion)模型对精神分裂症的疗效进行验证。甲基苯丙胺是一种精神兴奋剂，并且已知能通过提高多巴胺神经元中的神经传递而引起类似精神分裂症的症状。对动物施用甲基苯丙胺时所产生的反常行为通常被用作筛选精神分裂症治疗药物的方法(参见Oka等人，1993，J.Pharmacol.Exp.Ther.，264：158-165，以引用方式并入本文)。即：将一只雄性ddY小鼠放入活动监控装置中，30分钟后，施用甲基苯丙胺。在施用甲基苯丙胺后，使小鼠立即返回监控装置中，并从返回时开始即刻测定1小时内的活动。关于活动的测定，使用Muromachi Kikai株式会社生产的Supermex传感器。将溶剂(媒介)或用溶剂稀释的各种浓度下的参考例1-2(测试化合物(1))、2-2(测试化合物(2a))、3(测试化合物(3))和4(测试化合物(4))中所描述的化合物及N-(4-氟苯基)-N’-[(2-氟-4-吡啶基)甲基]-N”-苯基-1，3，5-三嗪-2，4，6-三胺盐酸盐(测试化合物(5))(游离形式，不包括其盐)经口施用给每组小鼠。所使用的溶剂为0.5％甲基纤维素水溶液。采用Dunnett检验，对溶剂施用组和药物施用组之间进行统计分析。 

(测试结果) 

对甲基苯丙胺诱导的兴奋性运动的抑制作用的结果列于表3中。 表中的数值分别代表化合物施用组各自的最小有效剂量(相对于溶剂施用组的活动引起显著小的活动的最小剂量)。测试化合物(1)到(5)均抑制了甲基苯丙胺诱导的兴奋性运动。也就是说，这五个化合物都具有改善精神分裂症症状(尤其是精神分裂症的阳性症状)的效用。 

实施例3 

(测试方法) 

采用苯环己哌啶诱导的延长不动时间模型来验证对精神分裂症的治疗效果。苯环己哌啶是N-甲基-D-天冬氨酸受体(谷氨酸受体类型)的非竞争性拮抗剂，并且滥用会导致难以与精神分裂症的症状区分开的精神病症状加重。已经指出，在强制性游泳实验中长期使用苯环己哌啶处理会延长不动时间(参见Noda et al.，2000，Neuropsychopharmacol.，23：375-87，以引用方式并入本文)。强制性游泳实验被用作抗抑郁药的筛选分析，因为该实验中的静止不动情况被认为反映了抑郁症(如动机减退)的某些方面。精神分裂症的阴性症状也包括类似的方面，我们可以利用这一实验来评价药物对阴性症状(如情感冷淡)的功效。简而言之，将一只雄性ddY小鼠轻轻放入圆柱形池子中，用SCANET(MV20-LAN，MELQUEST)测定其3分钟内的活动。而后，利用SCANET文件积分软件计算其静止不动的时间。两天后，用戊巴比妥钠将小鼠麻醉。将Osmotic微型泵(Alzet1002型，DURECT公司)皮下植入小鼠中。在泵入速率为0.25μL/h情况下，按1.2mg/天/小鼠泵注入盐水或苯环己哌啶。植入微型泵14天后，对小鼠施用测试化合物，并且施用1小时后，将每只小鼠轻轻放入圆柱形池子中，测定其3分钟内的活动。而后，计算其静止不动的时间。将溶剂(媒介)或用溶剂稀释的各种浓度下的测试化合物(1)和(2b)(游离形式，不包括其盐)经口施用给每组小鼠。所使用的溶剂为0.5％甲基纤维素水溶液。采用Dunnett检验，对溶剂施用组和药物施用组之间进行统计分析。 

(测试结果) 

苯环己哌啶诱导的不动时间延长的改善作用的结果列于表3中。 表中的数值分别代表化合物施用组各自的最小有效剂量(相对于溶剂施用组的不活动时间引起显著短的不动时间的最小剂量)。测试化合物(1)和(2b)抑制了苯环己哌啶诱导的不动时间延长。也就是说，这两种化合物都具有改善精神分裂症的症状(尤其是精神分裂症的阴性症状)的效用。 

实例4 

(测试方法) 

对初生期的小鼠用苯环己哌啶处理后、通过水探索试验(water finding task)对精神分裂症的疗效进行验证。已经指出，在初生期阶段用苯环己哌啶处理会产生精神分裂症认知障碍(参见Depoortere等人，2005，Neuropsychopharmacology，30：1963-85，以引用方式并入本文)。另外，据报道，长期用苯环己哌啶处理延长了水探索试验中的探索潜伏期(参见Mouri等人，2007，Mol.Pharmacol.，180：152-60，以引用方式并入本文)。水探索试验中的探索潜伏期提供了一种衡量动物潜在学习能力的手段，而潜在学习能力被认为反映了注意力。注意力是精神分裂症中认知障碍的最重要的领域，我们可以利用这一实验来评价药物对于治疗精神分裂症中认知障碍的功效。简而言之，在雄性ddY小鼠出生后的第7、9、11天，按15mg/kg的剂量给其皮下施用苯环己哌啶或盐水。在成年鼠7周龄时，向其经口施用测试化合物，60分钟后，将其放入开放式区域的一角，使其自由地探索训练装置3分钟。训练试验后，将其立即放回原来的笼子中，在第二天的测试试验前不给其喂水。在测试试验中，再次将小鼠单独放入测试装置中。测定小鼠从进入角落到饮水之间的时间。将溶剂(媒介)或用溶剂稀释的各种浓度下的测试化合物(1)和(2b)(游离形式，不包括其盐)经口施用给每组小鼠。所使用的溶剂为0.5％甲基纤维素水溶液。采用Dunnett检验，对溶剂施用组和药物施用组之间进行统计分析。 

(测试结果) 

苯环己哌啶诱导的延长探索潜伏期的改善作用的结果列于表3中。表中的数值分别代表化合物施用组各自的最小有效剂量(相对于 溶剂施用组引起显著短的探索潜伏期的最小剂量)。测试化合物(1)和(2b)抑制了苯环己哌啶诱导的探索潜伏期的延长。也就是说，这两种化合物都具有改善精神分裂症症状(尤其是精神分裂症的认知障碍)的效用。 

测试化合物 

化合物(1)是指Rex 1-2的化合物， 

化合物(2a)是指Rex 2-2的化合物， 

化合物(2b)是指Rex 2-3的化合物， 

化合物(3)是指Rex 3的化合物， 

化合物(4)是指Rex 4的化合物， 

化合物(5)是指N-(4-氟苯基)-N’-[(2-氟-4-吡啶基)甲基]-N”-苯基-1，3，5-三嗪-2，4，6-三胺盐酸盐， 

化合物(6)是指N，N’-二(4-氟苯基)-N”-[(2-氟-4-吡啶基)甲基]-1，3，5-三嗪-2，4，6-三胺二盐酸盐， 

化合物(7)是指N-(4-氟苯基)-N’-[(2-氟-4-吡啶基)甲基]-N”-(4-甲基苯基)-1，3，5-三嗪-2，4，6-三胺盐酸盐， 

化合物(8)是指N-(4-氟苯基)-N’-[(2-氟-4-吡啶基)甲基]-N”-(4-甲氧基苯基)-1，3，5-三嗪-2，4，6-三胺盐酸盐， 

化合物(9)是指N-(4-氯苯基)-N’-[(2-氟-4-吡啶基)甲基]-N”-(4-氟苯基)-1，3，5-三嗪-2，4，6-三胺盐酸盐， 

化合物(10)是指N-(4-氟苯基)-N’-[(2-氟-4-吡啶基)甲基]-N”-(3-甲氧基苯基)-1，3，5-三嗪-2，4，6-三胺盐酸盐。 

化合物(5)到(10)在美国专利No.7,375,222中有所描述。 

表3 

表中数据显示，BEC1钾通道抑制剂可用于预防和/或治疗精神分裂症。本发明的药用组合物可用于提供优良的预防和/或治疗精神分裂症的药剂，特别是可用于提供预防和/或治疗精神分裂症的阳性症状、阴性症状、认知障碍和心境障碍等的药剂。 

尽管参照具体的实施方案对本发明进行了详细说明，但对于本领域技术人员显而易见的是，可在不脱离本发明的范围内进行各种变更和修改。 

工业应用性 

本发明可用于提供优良的预防和/或治疗精神分裂症的药剂。本发明还特别可用于提供预防和/或治疗与精神分裂症相关的阳性症状(幻觉、妄想、外界体验、言语杂乱、行为高度错乱或紧张等)、阴性症状(情感冷淡、思维贫乏、冷漠、自闭、快感缺乏等)、认知障碍和心境障碍(抑郁、焦虑等)等的药剂。 

Claims (9)

1.一种用于预防和/或治疗精神分裂症的药物组合物，其含有：有效量的BEC1钾通道抑制剂或其可药用的盐，以及可药用载体。

2.根据权利要求1所述的药物组合物，其中，所述BEC1钾通道抑制剂是下述式(I)表示的化合物或其可药用的盐：

其中，各符号如下所述：

R¹和R²可以相同或不同，各自表示H、OH、低级烷基-O-、芳基-CO-、NH₂、可被OH取代的低级烷基-NH、(低级烷基)₂N、可被取代的低级烷基或可被取代的杂环基；并且

R³、R⁴、R⁵和R⁶可以相同或不同，各自表示(i)H，(ii)CN，(iii)NO₂，(iv)卤素，(v)可被(1)CN、(2)卤素或(3)OH取代的低级烷基，(vi)环烷基，(vii)可被低级烷基取代的芳基，(viii)可被低级烷基取代的杂环基，(ix)R⁷R⁸N-(其中，R⁷和R⁸可以相同或不同，各自表示(1)H、(2)可被芳基取代的低级烷基或(3)R⁹-O-CO-(其中，R⁹表示(1)H或(2)可被芳基取代的低级烷基))，(x)R¹⁰-T¹-(其中，R¹⁰表示(1)H，(2)可被芳基、HO-C_1-10亚烷基-O-或OH取代的低级烷基，或(3)芳基；T¹表示氧或硫)，或(xi)R¹¹-T²-(其中，R¹¹表示(1)OH、(2)R⁷R⁸N-、(3)低级烷基-O-、(4)低级烷基、(5)芳基或(6)杂环基T²表示CO或SO₂)。

3.根据权利要求2所述的药物组合物，其中，式(I)为如下的化合物或其可药用的盐，其中，

R¹和R²可以相同或不同，各自表示H或可被取代的低级烷基；并且

R³、R⁴、R⁵和R⁶可以相同或不同，各自表示(i)H、(ii)卤素或(iii)R¹⁰-T¹-(其中，R¹⁰表示低级烷基，T¹表示O)。

4.一种用于预防和/或治疗精神分裂症的BEC1钾通道抑制剂或其可药用的盐。

5.根据权利要求4所述的BEC1钾通道抑制剂，其中，所述BEC1钾通道抑制剂是下述式(I)表示的化合物或其可药用的盐：

其中，各符号如下所述：

R¹和R²可以相同或不同，各自表示H、OH、低级烷基-O-、芳基-CO-、NH₂、可被OH取代的低级烷基-NH、(低级烷基)₂N、可被取代的低级烷基或可被取代的杂环基；并且

R³、R⁴、R⁵和R⁶可以相同或不同，各自表示(i)H，(ii)CN，(iii)NO₂，(iv)卤素，(v)可被(1)CN、(2)卤素或(3)OH取代的低级烷基，(vi)环烷基，(vii)可被低级烷基取代的芳基，(viii)可被低级烷基取代的杂环基，(ix)R⁷R⁸N-(其中，R⁷和R⁸可以相同或不同，各自表示(1)H、(2)可被芳基取代的低级烷基或(3)R⁹-O-CO-(其中，R⁹表示(1)H或(2)可被芳基取代的低级烷基))，(x)R¹⁰-T¹-(其中，R¹⁰表示(1)H，(2)可被芳基、HO-C_1-10亚烷基-O-或OH取代的低级烷基，或(3)芳基T¹表示氧或硫)，或(xi)R¹¹-T²-(其中，R¹¹表示(1)OH、(2)R⁷R⁸N-、(3)低级烷基-O-、(4)低级烷基、(5)芳基或(6)杂环基；T²表示CO或SO₂)。

6.根据权利要求5所述的BEC1钾通道抑制剂，其中，式(I)为如下的化合物或其可药用的盐，其中，

R¹和R²可以相同或不同，各自表示H或可被取代的低级烷基；并且

R³、R⁴、R⁵和R⁶可以相同或不同，各自表示(i)H、(ii)卤素或(iii)R¹⁰-T¹-(其中，R¹⁰表示低级烷基，T¹表示O)。

7.一种预防和/或治疗精神分裂症的方法，包括：对需要治疗这种疾病的人施用有效量的BEC1钾通道抑制剂或其可药用的盐。

8.根据权利要求7所述的方法，其中，所述BEC1钾通道抑制剂是式(I)表示的化合物或其可药用的盐：

其中，各符号如下所述：

R¹和R²可以相同或不同，各自表示H、OH、低级烷基-O-、芳基-CO-、NH₂、可被OH取代的低级烷基-NH、(低级烷基)₂N、可被取代的低级烷基或可被取代的杂环基；并且

R³、R⁴、R⁵和R⁶可以相同或不同，各自表示(i)H，(ii)CN，(iii)NO₂，(iv)卤素，(v)可被(1)CN、(2)卤素或(3)OH取代的低级烷基，(vi)环烷基，(vii)可被低级烷基取代的芳基，(viii)可被低级烷基取代的杂环基，(ix)R⁷R⁸N-(其中，R⁷和R⁸可以相同或不同，各自表示(1)H、(2)可被芳基取代的低级烷基或(3)R⁹-O-CO-(其中，R⁹表示(1)H或(2)可被芳基取代的低级烷基))，(x)R¹⁰-T¹-(其中，R¹⁰表示(1)H，(2)可被芳基、HO-C_1-10亚烷基-O-或OH取代的低级烷基，或(3)芳基；T¹表示氧或硫)，或(xi)R¹¹-T²-(其中，R¹¹表示(1)OH、(2)R⁷R⁸N-、(3)低级烷基-O-、(4)低级烷基、(5)芳基或(6)杂环基；T²表示CO或SO₂)。

9.根据权利要求8所述的方法，其中，式(I)为如下的化合物或其可药用的盐，其中

R¹和R²可以相同或不同，各自表示H或可被取代的低级烷基；并且

R³、R⁴、R⁵和R⁶可以相同或不同，各自表示(i)H、(ii)卤素或(iii)R¹⁰-T¹-(其中，R¹⁰表示低级烷基，T¹表示O)。