CN102276613B - 一种倍半萜生物碱类化合物及其制备方法和用途 - Google Patents
一种倍半萜生物碱类化合物及其制备方法和用途 Download PDFInfo
- Publication number
- CN102276613B CN102276613B CN 201110153202 CN201110153202A CN102276613B CN 102276613 B CN102276613 B CN 102276613B CN 201110153202 CN201110153202 CN 201110153202 CN 201110153202 A CN201110153202 A CN 201110153202A CN 102276613 B CN102276613 B CN 102276613B
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- compound
- formula
- preparation
- cell
- silica gel
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired - Fee Related
Links
Landscapes
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
Abstract
本发明涉及一个倍半萜生物碱类化合物及其制备方法和用途。本发明用中国南海红树林植物根泥样品中的Streptomyces sp.Chq64生产出一个新的倍半萜生物碱类化合物。经实验证实,该类化合物可作为细胞增殖抑制剂或抗肿瘤剂。
Description
技术领域:
本发明涉及用链霉菌Streptomyces sp.Chq64(2011年3月24日保藏在武汉大学中国典型培养物保藏中心,保藏编号:CCTCCM2011070)生产倍半萜生物碱类化合物的方法;本发明还涉及该类化合物在制备细胞增殖抑制剂或抗肿瘤剂中的用途。
背景技术:
倍半萜生物碱类化合物是混源萜类化合物中的一员,展示了多样性的结构与丰富的活性特点。但倍半萜生物碱类化合物多是植物源的,原核生物来源的只有两例。本发明人研究得知,链霉菌Streptomyces sp.Chq64(保藏编号:CCTCC M2011070)液体发酵产物经乙酸乙酯提取后的提取物有很好的细胞增殖抑制活性,遂对其活性成分进行了研究。研究发现所示化合物具有抗肿瘤活性,目前尚未见该化合物的化学结构及细胞增殖抑制活性的报道,因此市场上也尚未见有与此有关的药物。
发明内容:
本发明旨在提供一个具有抑制肿瘤细胞增殖,具有抗肿瘤活性的新化合物。其结构式是
其结构特征是:式I是新的倍半萜生物碱类化合物。
本发明的式I可通过微生物发酵培养来获取富含倍半萜生物碱类化合物的发酵物,然后从发酵物中采用硅胶柱层析、RP-18反相硅胶柱层析和半制备HPLC等方法分离纯化得到。
本发明的下述实施例中列举了利用链霉菌Streptomyces sp.Chq64(保藏编号:CCTCCM2011070)制备本发明式I化合物的实例。
具体实施方式:
在如下的实施例中所指的化合物I的化学结构是:
实施例1化合物I的发酵生产及分离精制
1发酵生产
生产菌的发酵培养:按培养微生物的常规方法,取Streptomyces sp.Chq64(保藏编号:CCTCC M2011070)适量,接种到ISP II固体斜面培养基上,在28摄氏度培养箱中培养6天。
取斜面培养6天的Streptomyces sp.Chq64适量,接种到装有100mL培养液[培养基组成:可溶性淀粉1.0%,酵母膏1.0%,KH2PO4 0.05%,玉米浆0.3%,葡萄糖2.0%,MgSO4·7H2O0.05%,牛肉膏0.1%,CaCO3 0.2%,陈海水配制,pH调至7.0]的500mL锥型瓶中,在28℃静置培养8天,获得菌丝体和发酵液。
2浸膏的获得
将发酵液及菌丝体用乙酸乙酯萃取三次,萃取液减压浓缩,得粗浸膏,共35.5克。
3化合物的分离精制
浸膏35.5克用氯仿-甲醇混合溶剂溶解后,加100克200-300目硅胶拌样,减压除去溶剂后,用硅胶柱层析,以石油醚、氯仿,氯仿-甲醇为溶剂进行梯度洗脱,分为8个流份。Fr-1(氯仿-甲醇99∶1洗脱物),先后以石油醚、石油醚-丙酮为溶剂进行柱层析,得Fr-1-12,再经RP-18反相硅胶柱层析以甲醇∶水(70∶30)为溶剂,最后经半制备反相高效液相色谱(甲醇∶水=85∶15)得化合物I 20mg。
化合物I白色无定形固体,[α]20 D-290.6(c 0.15,MeOH),分子式C31H43N3O2,HRESIMSm/z 490.3446[M+H]+,计算值490.3434。1H和13C-NMR数据见表1。
表1化合物I的1H和13C NMR数据(600和150MHz,in CDCl3)a
a)本表信号归属基于DEPT、HMQC及HMBC图谱解析结果。碳信号的多重度利用DEPT方法确定并分别用s(单重峰)、d(二重峰)、t(三重峰)和q(四重峰)表示。
b)此栏中的数字和代号分别代表在1H-1H COSY谱中与相应行中的1H给出偶合相关信号的1H核。
c)此栏中的数字和代号分别代表在HMBC谱中与相应行中的1H给出偶合相关信号的13C核。
实施例2化合物I体外抗肿瘤活性的测试
细胞增殖抑制活性测试
1实验样品及实验方法
被测样品溶液的配制测试样品为上述实施例1中分离精制的化合物I纯品。精密称取适量样品,用甲醇配制成所需浓度的溶液,供测活性。
细胞系及细胞的继代培养采用人结肠癌HCT-8细胞、人肝癌Be1-7402细胞、人胃癌BGC-823细胞、人非小细胞肺癌A549细胞及人卵巢癌A2780细胞等癌细胞系。各种细胞均用含10%FBS的RPMI-1640培养基,在37℃于通入5%二氧化碳的培养箱中继代培养。
细胞增殖抑制活性测试方法
四氮唑盐(MTT)法取对数生长期的细胞,将细胞密度调至每毫升2×105个细胞,按每孔200微升接种于96孔细胞培养板中,于37℃通入5%CO2的培养箱中培养4小时。每孔加样品液或空白液各2微升,培养24小时后,每孔加MTT液(MTT的每毫升5毫克生理盐水溶液)10微升,继续培养4小时,37℃、2000转/分钟离心8分钟,吸去上清。每孔加入DMSO各100微升,在微量振荡器上振荡15分钟,至结晶完全溶解后,利用MD公司产SPECTRAMAX Plus型酶标仪测定每孔在570nm处的吸光值(OD值)。在同一块96孔板中样品的每个浓度均设置三孔,另设三孔空白对照和无细胞调零孔(如果药物有颜色要做相应药物浓度无细胞调零)。各孔OD值先做相应无细胞调零,再取三孔平均OD值按IR%=(OD空白对照-OD样品)/OD空白对照X100%式计算每个浓度下的细胞增殖抑制率(IR%)。
2.实验结果
细胞增殖抑制活性测试结果
在MTT法测试中,化合物I对人结肠癌HCT-8细胞、人肝癌Be1-7402细胞、人胃癌BGC-823细胞、人非小细胞肺癌A549细胞及人卵巢癌A2780细胞等癌细胞系的IC50(M)分别见表2。
表2MTT筛选结果
3结论
化合物I具有明显的肿瘤细胞增殖抑制作用,可作为细胞增殖抑制剂或抗肿瘤剂用于抗肿瘤的研究。
Claims (4)
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN 201110153202 CN102276613B (zh) | 2011-06-01 | 2011-06-01 | 一种倍半萜生物碱类化合物及其制备方法和用途 |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN 201110153202 CN102276613B (zh) | 2011-06-01 | 2011-06-01 | 一种倍半萜生物碱类化合物及其制备方法和用途 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
CN102276613A CN102276613A (zh) | 2011-12-14 |
CN102276613B true CN102276613B (zh) | 2013-10-23 |
Family
ID=45102396
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
CN 201110153202 Expired - Fee Related CN102276613B (zh) | 2011-06-01 | 2011-06-01 | 一种倍半萜生物碱类化合物及其制备方法和用途 |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
CN (1) | CN102276613B (zh) |
Citations (5)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN1830979A (zh) * | 2005-07-01 | 2006-09-13 | 中国海洋大学 | 喹唑啉生物碱类化合物及其制备方法和用途 |
WO2008019135A1 (en) * | 2006-08-04 | 2008-02-14 | Harbor Branch Oceanographic Institution, Inc. | Antiproliferative activity of the leiodermatolide class of macrolides |
CN101812079A (zh) * | 2010-03-08 | 2010-08-25 | 中国海洋大学 | 一种含多硫键的哌嗪类化合物及其制备方法和用途 |
CN101948472A (zh) * | 2010-05-20 | 2011-01-19 | 中国热带农业科学院热带生物技术研究所 | 一类新颖的十字孢碱类似物及其制备方法和用途 |
WO2011030083A1 (en) * | 2009-09-11 | 2011-03-17 | Imperial Innovations Limited | Method |
-
2011
- 2011-06-01 CN CN 201110153202 patent/CN102276613B/zh not_active Expired - Fee Related
Patent Citations (5)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN1830979A (zh) * | 2005-07-01 | 2006-09-13 | 中国海洋大学 | 喹唑啉生物碱类化合物及其制备方法和用途 |
WO2008019135A1 (en) * | 2006-08-04 | 2008-02-14 | Harbor Branch Oceanographic Institution, Inc. | Antiproliferative activity of the leiodermatolide class of macrolides |
WO2011030083A1 (en) * | 2009-09-11 | 2011-03-17 | Imperial Innovations Limited | Method |
CN101812079A (zh) * | 2010-03-08 | 2010-08-25 | 中国海洋大学 | 一种含多硫键的哌嗪类化合物及其制备方法和用途 |
CN101948472A (zh) * | 2010-05-20 | 2011-01-19 | 中国热带农业科学院热带生物技术研究所 | 一类新颖的十字孢碱类似物及其制备方法和用途 |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
CN102276613A (zh) | 2011-12-14 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
CN103865808B (zh) | 一种源于桔青霉的青霉烯醇a1的抗肿瘤用途 | |
CN107298671A (zh) | 源于草酸青霉的黑麦酮酸h及制备抗人结肠癌药物的应用 | |
CN103865809B (zh) | 一种源于桔青霉的青霉烯醇b1的抗肿瘤用途 | |
CN104592082B (zh) | 源于桔青霉的青霉烯醇 d2制备方法及其应用 | |
CN101812079A (zh) | 一种含多硫键的哌嗪类化合物及其制备方法和用途 | |
CN102276613B (zh) | 一种倍半萜生物碱类化合物及其制备方法和用途 | |
CN104211780B (zh) | 一种环缩肽类化合物及其制备方法和用途 | |
CN103265522B (zh) | 一种源于桔绿木霉的内酯衍生物及其应用 | |
CN102260271B (zh) | 细胞松弛素类化合物及其制备方法和用途 | |
CN104447475B (zh) | 源于桔青霉的青霉烯醇 d1制备方法及其应用 | |
CN103012559A (zh) | 一种棘孢肽类化合物及其应用 | |
CN103030683A (zh) | 棘孢肽类化合物及其制备方法和用途 | |
CN104211670A (zh) | 一种烷基吡喃酮类化合物及其制备方法和用途 | |
CN104211630B (zh) | 一种源于桔绿木霉的生物碱类化合物及其应用 | |
CN103058846A (zh) | 一种源于棘孢曲霉的苯醌衍生物及其应用 | |
CN106432034B (zh) | 源于桔绿木霉的青霉烯醇e1在制备抗乳腺癌药物的应用 | |
CN106420716B (zh) | 源于桔绿木霉的青霉烯醇e1在肠癌方面的应用 | |
CN106389417B (zh) | 源于桔绿木霉的青霉烯醇e1在胃癌方面的应用 | |
CN106491597B (zh) | 源于桔绿木霉的青霉烯醇e1在食管癌方面的应用 | |
CN106420715B (zh) | 源于桔绿木霉的青霉烯醇e1在制备抗淋巴瘤药物的应用 | |
CN106432036B (zh) | 源于桔绿木霉的青霉烯醇e1及制备抗口腔表皮癌药物应用 | |
CN106420717B (zh) | 源于桔绿木霉的青霉烯醇e1在鼻咽癌方面的应用 | |
CN106389418B (zh) | 源于桔绿木霉的青霉烯醇e1在肝癌方面的应用 | |
CN103865807A (zh) | 一种源于桔青霉的青霉烯醇b2的抗肿瘤新用途 | |
CN105061443B (zh) | 源于桔青霉的penicitrinine A及其制备抗人肝癌药物的应用 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
C06 | Publication | ||
PB01 | Publication | ||
C10 | Entry into substantive examination | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
C14 | Grant of patent or utility model | ||
GR01 | Patent grant | ||
C17 | Cessation of patent right | ||
CF01 | Termination of patent right due to non-payment of annual fee |
Granted publication date: 20131023 Termination date: 20140601 |