CN102257967A - 一种石竹杂交制种方法 - Google Patents

Abstract

一种石竹杂交制种方法，其母本育苗采用组培和扦插结合的方式，父本育苗为直接将播种，经过定植、田间管理、授粉等步骤，最后完成收获种子。本发明具有制种产量高，种子质量好，不易病毒感染，生产效率高等优点。

Description

一种石竹杂交制种方法

技术领域

本发明涉及一种花卉养殖方法，尤其是一种石竹杂交制种方法。

背景技术

石竹是石竹科石竹属的多年生草本植物，石竹的原产地为中国，现世界各地广泛栽培，同属还有须苞石竹，即美国石竹。虽然石竹目前已作为观赏植物由人工在世界范围内引种广泛栽培，已培育出大量栽培种，现用于规模化生产的石竹，基本均采用播种繁殖，但也可通过分株和扦插繁殖。由于其母本本身的雄性不孕特性，现有方法繁殖种子很困难，又易感染病毒，影响花期。此外，对于一些花卉养殖企业而言，现有的种子繁殖方法产量有限，工序落后，无法满足市场需求。

发明内容

本发明的目的在于提供一种不仅制种产量高，种子质量好，不易病毒感染而且生产效率高，成本低，满足市场需求的石竹杂交制种方法。

本发明是以如下方案实现的：由于石竹杂交方式灵活，根据品种的不同，可选择不同的父本和母本，可选择中国石竹的父本和母本杂交，美国石竹的父本和母本杂交，中国石竹母本与美国石竹父本杂交，美国石竹母本和中国石竹父本杂交，步骤如下：

1、          育苗

（1）母本育苗：由于母本具有稳定的不育性，母本育苗采用组织培养结合扦插的方式，组织培养选用的是茎尖作为离体的母本组织，茎尖杀毒灭菌后进行组织培养，其组织培养基包括分化培养基、生根培养基和继代培养基，三种培养基分别配制，配套使用，分化培养基是由BA即苄氨基腺嘌呤、NAA 即a-萘乙酸、蔗糖以及琼脂粉溶解于基本培养基即MS中而成的，其各组分的用量：MS为1L，BA为1mg，NAA为0.2mg，蔗糖为4000mg，琼脂粉为5500mg；生根培养基是由NAA 即a-萘乙酸、蔗糖以及琼脂粉溶解于基本培养基MS中而成的，其各组分的用量：MS为1L，NAA为0.2mg，蔗糖为4000mg，琼脂粉为550mg；继代培养基还包括小苗培养基和大苗培养基，其中小苗培养基是由BA即苄氨基腺嘌呤、NAA 即a-萘乙酸、蔗糖以及琼脂粉溶解于基本培养基MS中而成的，其各组分的用量：MS为1L，BA为0.5mg，NAA为0.2mg，蔗糖为4000mg，琼脂粉为5500mg和MS为1L，BA为1mg，NAA为0.4mg，蔗糖为4000mg，琼脂粉为5500mg，应用时采用两种用量交替培养的方式。

按照上述配方配制的培养基液根据现有组织培养方法对茎尖进行培养，一段时间后得到母本组培苗。组培苗需经过一周左右的时间适应自然环境，可先将装有组培苗的瓶子放置在正常环境下，然后逐渐打开瓶口，使组培苗适应自然温度、空气和阳光，但避免强光照射。

然后将组培苗从培养瓶中取出，洗净根际周围的培养基液，栽到配有营养土的苗床中，营养土用草炭、沙子和珍珠岩以2：1：1比例配制，在18-25℃，100%湿度，70-80%光照的条件下，15天长出新根，初期每天向幼苗表面喷水3-4次，随着幼苗的生长逐渐减少湿度和增加光照。

由于培育出的组培苗数量不能满足生产上的实际需要，对已有的组培苗进行扩繁，即选取健壮植株的嫩茎3节，共有6个叶片并带生长点，进行扦插扩繁，扦插时间为8月25日～9月10日，扦插温度为18～25℃，扦插基质采用草炭、沙子以及珍珠岩，其比例为：2∶1∶1，扦插后育苗时间为35～40天，育苗前期不需要添加肥料，中后期添加浓度为100～150mg/L的20-10-20肥料。

（2）父本育苗：父本育苗采用直接将种子播种在穴盘的方式，播种期为9月1日前后，播种基质选择加拿大生产的“发发得”牌育苗基质，出苗15天后，使用浓度为50mg/L的20-10-20肥料喷淋，后期喷淋浓度为100～150mg/L的20-10-20的肥料，每周一次，育苗期为30～40天。

上述母本和父本育苗的比例在1～2，以免由于比例不当导致花粉不足影响生产。

2、定植

将上述母本幼苗和父本幼苗定植在大棚内，其步骤如下：

（1）整地：大棚内土地每亩施用粉碎秸秆1000kg，喷EM菌剂1kg，旋耕使秸秆与土壤混合均匀。

（2）做畦：大棚内制作高畦，畦高30～40cm，畦面宽为55～60cm，畦间距70～75cm，并畦面铺设地膜，为畦面平整，保持植株长势平整，作业道宽敞，最好使用木板做成长方形畦模，然后在畦模内做畦。

（3）定植：定植时间一般选在10月1日至10月15日，定植前3天对高畦进行滴灌，使土壤含水量达到70%以上。首先在高畦内打苗孔，然后将幼苗定植在苗孔内，定植时需按5g∕亩的用量施17-17-17化肥作为底肥，其中定植母本的畦内打孔两行，畦内行间距30～35cm，畦间行距95～100cm，孔距30cm，母本定植3000～4000株∕亩；定植父本的畦内打孔三行，畦内行间距20cm，畦间行距90cm，孔距20cm，父本定植6000～8000株∕亩。

3、田间管理

（1）温度：定植后苗生长的温度随时间的推进而变化：10月份为5～20℃，11月份为2～18℃，12月份为0～15℃，翌年1月份为-10～12℃，2月份为0～15℃，3月份为5～20℃，4月以后苗生长的温度是白天22～28℃，夜间12～15℃。

（2）水分：冬季结冰之前要浇灌一次防冻水，避免冬季因浇水不便导致植株干旱死亡，并根据苗生长情况及时供水，授粉期不可缺水，授粉结束后，一般在六月下旬后应减少供水。

（3）追肥：翌年3月以后，要随滴灌进行追肥，一般采用冲施肥，10～15天一次。

（4）植株调整：母本一般需要根据植株的长势进行剪枝，母本植株12月份剪第一次，剪枝时保留基部7～10cm；在翌年4月中旬剪第二次，剪枝时保留基部5～8cm；父本一般不需要剪枝。

4、授粉

（1）花粉的提取及保存：翌年4月下旬以后即可收集花粉，一般在清晨露水退去后在父本植株上提取花粉，花粉提取后低温干燥，一般采用生石灰对花粉进行干燥，干燥后的花粉一般可以保存一个月。

（2）授粉 ：授粉的最佳时期是5月中旬至6月初，全天即可授粉，授粉主要采用人工授粉的方式，即利用棉签、毛笔等工具将父本花粉涂抹在母本柱头的绒毛上，授粉时期最好选在母本柱头微弯，柱头上的绒毛比较清晰时。

5、采收及采后处理

当果实前端变黄，种子与胎座分离时及时采收；采收后将果实晒干，轻搓使种子与果实完全分离，晒干入袋。

本发明具有如下优点：

1、          品种广泛、制种产量高，种子质量好；

2、          育苗期时间短，不易病毒感染，植株长势好，授粉及时；

3、          生产成本低、效率高，产品供应满足市场需求。

附图说明    本发明无附图。

具体实施方式    实施例1，以中国石竹父本和美国石竹母本杂交为例：

1、育苗

（1）母本育苗：选用美国石竹的茎尖作为离体的母本组织，茎尖杀毒灭菌后进行组织培养，其组织培养基包括分化培养基、生根培养基和继代培养基，三种培养基分别配制，配套使用，其中分化培养基配方：MS加BA1.0mg/L、NAA0.2 mg/L、蔗糖4000 mg/L、琼脂粉5500 mg/L；生根培养基配方：MS加NAA0.2 mg/L、蔗糖4000 mg/L、琼脂粉550 mg/L；继代培养基配方：大苗MS加IBA0.4 mg/L、BA0.5 mg/L、蔗糖4000 mg/L、琼脂粉5500 mg/L，小苗MS加BA0.5 mg/L、NAA0.2 mg/L、蔗糖4000 mg/L、琼脂粉5500 mg/L和MS加BA1.0 mg/L、NAA0.4 mg/L、蔗糖4000 mg/L、琼脂粉5500 mg/L交替培养。

经组织培养后得到美国石竹母本组培苗，组培苗需经过一周左右的时间适应自然环境，可先将装有组培苗的瓶子放置在正常环境下，然后逐渐打开瓶口，使组培苗适应自然温度、空气和阳光，但避免强光照射。

然后将组培苗从培养瓶中取出，洗净根际周围的培养基液，栽到配有营养土的苗床中，营养土用草炭、沙子和珍珠岩以2：1：1比例配制，在18-25℃，100%湿度，70-80%光照的条件下，15天长出新根，初期每天向幼苗表面喷水3-4次，随着幼苗的生长逐渐减少湿度和增加光照。

由于培育出的组培苗数量不能满足生产上的实际需要，对已有的组培苗进行扩繁，即选取健壮植株的嫩茎3节，共有6个叶片并带生长点，进行扦插扩繁，扦插时间为8月25日～9月10日，扦插温度为18～25℃，扦插基质采用草炭、沙子以及珍珠岩，其比例为：2∶1∶1，扦插后育苗时间为35～40天，育苗前期不需要添加肥料，中后期添加浓度为100～150mg/L的20-10-20肥料。

（2）父本育苗：父本育苗采用直接将中国石竹种子播种在穴盘的方式，播种期为9月1日前后，播种基质选择加拿大生产的“发发得”牌育苗基质，出苗15天后，使用浓度为50mg/L的20-10-20肥料喷淋，后期喷淋浓度为100～150mg/L的20-10-20的肥料，每周一次，育苗期为30～40天。

2、定植

将上述母本幼苗和父本幼苗定植在大棚内，其步骤如下：

（1）整地：大棚内土地每亩施用粉碎秸秆1000kg，喷EM菌剂1kg，旋耕使秸秆与土壤混合均匀。

（2）做畦：大棚内制作高畦，畦高30～40cm，畦面宽为55～60cm，畦间距70～75cm，并畦面铺设地膜，为畦面平整，保持植株长势平整，作业道宽敞，最好使用木板做成长方形畦模，然后在畦模内做畦。

（3）定植：定植时间选在10月1日至10月15日，定植前3天对高畦进行滴灌，使土壤含水量达到70%以上。首先在高畦内打苗孔，然后将幼苗定植在苗孔内，定植时需按5g∕亩的用量施17-17-17化肥作为底肥，其中定植母本的畦内打孔两行，畦内行间距30～35cm，畦间行距95～100cm，孔距30cm，母本定植3000株∕亩；定植父本的畦内打孔三行，畦内行间距20cm，畦间行距90cm，孔距20cm，父本定植6000株∕亩。

3、田间管理

（1）温度：定植后苗生长的温度随时间的推进而变化：10月份为5～20℃，11月份为2～18℃，12月份为0～15℃，翌年1月份为-10～12℃，2月份为0～15℃，3月份为5～20℃，4月以后苗生长的温度是白天22～28℃，夜间12～15℃。

（2）水分：冬季结冰之前要浇灌一次防冻水，避免冬季因浇水不便导致植株干旱死亡，并根据苗生长情况及时供水，授粉期不可缺水，授粉结束后，在六月下旬后应减少供水。

（3）追肥：翌年3月以后，要随滴灌进行追肥，采用冲施肥，10～15天一次。

（4）植株调整：母本需要根据植株的长势进行剪枝，母本植株12月份剪第一次，剪枝时保留基部7～10cm；在翌年4月中旬剪第二次，剪枝时保留基部5～8cm；父本不需要剪枝。

4、授粉

（1）花粉的提取及保存：翌年4月下旬以后即可收集花粉，在清晨露水退去后在父本植株上提取花粉，花粉提取后低温干燥，采用生石灰对花粉进行干燥，干燥后的花粉可以保存一个月。

（2）授粉 ：授粉的最佳时期是5月中旬至6月初，全天即可授粉，授粉主要采用人工授粉的方式，即利用棉签、毛笔等工具将父本花粉涂抹在母本柱头的绒毛上，授粉时期最好选在母本柱头微弯，柱头上的绒毛比较清晰时。

5、采收及采后处理

当果实前端变黄，种子与胎座分离时及时采收；采收后将果实晒干，轻搓使种子与果实完全分离，晒干入袋。

    实施例2，以美国石竹父本和中国石竹母本杂交为例：

1、育苗

（1）母本育苗：选用中国石竹的茎尖作为离体的母本组织，茎尖杀毒灭菌后进行组织培养，其组织培养基包括分化培养基、生根培养基和继代培养基，三种培养基分别配制，配套使用，其中分化培养基配方：MS加BA1.0mg/L、NAA0.2 mg/L、蔗糖4000 mg/L、琼脂粉5500 mg/L；生根培养基配方：MS加NAA0.2 mg/L、蔗糖4000 mg/L、琼脂粉550 mg/L；继代培养基配方：大苗MS加IBA0.4 mg/L、BA0.5 mg/L、蔗糖4000 mg/L、琼脂粉5500 mg/L，小苗MS加BA0.5 mg/L、NAA0.2 mg/L、蔗糖4000 mg/L、琼脂粉5500 mg/L和MS加BA1.0 mg/L、NAA0.4 mg/L、蔗糖4000 mg/L、琼脂粉5500 mg/L交替培养。

经组织培养后得到中国石竹母本组培苗，组培苗需经过一周左右的时间适应自然环境，可先将装有组培苗的瓶子放置在正常环境下，然后逐渐打开瓶口，使组培苗适应自然温度、空气和阳光，但避免强光照射。

然后将组培苗从培养瓶中取出，洗净根际周围的培养基液，栽到配有营养土的苗床中，营养土用草炭、沙子和珍珠岩以2：1：1比例配制，在18-25℃，100%湿度，70-80%光照的条件下，15天长出新根，初期每天向幼苗表面喷水3-4次，随着幼苗的生长逐渐减少湿度和增加光照。

由于培育出的组培苗数量不能满足生产上的实际需要，对已有的组培苗进行扩繁，即选取健壮植株的嫩茎3节，共有6个叶片并带生长点，进行扦插扩繁，扦插时间为8月25日～9月10日，扦插温度为18～25℃，扦插基质采用草炭、沙子以及珍珠岩，其比例为：2∶1∶1，扦插后育苗时间为35～40天，育苗前期不需要添加肥料，中后期添加浓度为100～150mg/L的20-10-20肥料。

（2）父本育苗：父本育苗采用直接将美国石竹种子播种在穴盘的方式，播种期为9月1日前后，播种基质选择加拿大生产的“发发得”牌育苗基质，出苗15天后，使用浓度为50mg/L的20-10-20肥料喷淋，后期喷淋浓度为100～150mg/L的20-10-20的肥料，每周一次，育苗期为30～40天。

2、定植

将上述母本幼苗和父本幼苗定植在大棚内，其步骤如下：

（1）整地：大棚内土地每亩施用粉碎秸秆1000kg，喷EM菌剂1kg，旋耕使秸秆与土壤混合均匀。

（2）做畦：大棚内制作高畦，畦高30～40cm，畦面宽为55～60cm，畦间距70～75cm，并畦面铺设地膜，为畦面平整，保持植株长势平整，作业道宽敞，最好使用木板做成长方形畦模，然后在畦模内做畦。

（3）定植：定植时间选在10月1日至10月15日，定植前3天对高畦进行滴灌，使土壤含水量达到70%以上。首先在高畦内打苗孔，然后将幼苗定植在苗孔内，定植时需按5g∕亩的用量施17-17-17化肥作为底肥，其中定植母本的畦内打孔两行，畦内行间距30～35cm，畦间行距95～100cm，孔距30cm，母本定植3000株∕亩；定植父本的畦内打孔三行，畦内行间距20cm，畦间行距90cm，孔距20cm，父本定植6000株∕亩。

3、田间管理

（1）温度：定植后苗生长的温度随时间的推进而变化：10月份为5～20℃，11月份为2～18℃，12月份为0～15℃，翌年1月份为-10～12℃，2月份为0～15℃，3月份为5～20℃，4月以后苗生长的温度是白天22～28℃，夜间12～15℃。

（2）水分：冬季结冰之前要浇灌一次防冻水，避免冬季因浇水不便导致植株干旱死亡，并根据苗生长情况及时供水，授粉期不可缺水，授粉结束后，在六月下旬后应减少供水。

（3）追肥：翌年3月以后，要随滴灌进行追肥，采用冲施肥，10～15天一次。

（4）植株调整：母本需要根据植株的长势进行剪枝，母本植株12月份剪第一次，剪枝时保留基部7～10cm；在翌年4月中旬剪第二次，剪枝时保留基部5～8cm；父本不需要剪枝。

4、授粉

（1）花粉的提取及保存：翌年4月下旬以后即可收集花粉，在清晨露水退去后在父本植株上提取花粉，花粉提取后低温干燥，采用生石灰对花粉进行干燥，干燥后的花粉可以保存一个月。

（2）授粉 ：授粉的最佳时期是5月中旬至6月初，全天即可授粉，授粉主要采用人工授粉的方式，即利用棉签、毛笔等工具将父本花粉涂抹在母本柱头的绒毛上，授粉时期最好选在母本柱头微弯，柱头上的绒毛比较清晰时。

5、采收及采后处理

当果实前端变黄，种子与胎座分离时及时采收；采收后将果实晒干，轻搓使种子与果实完全分离，晒干入袋。

Claims (1)

1.一种石竹杂交制种方法，其特征是：

1、育苗

（1）母本育苗：母本育苗采用组织培养结合扦插的方式，组织培养选用的是茎尖作为离体的母本组织，茎尖杀毒灭菌后进行组织培养，其组织培养基包括分化培养基、生根培养基和继代培养基，三种培养基分别配制，配套使用，分化培养基是由BA即苄氨基腺嘌呤、NAA 即a-萘乙酸、蔗糖以及琼脂粉溶解于基本培养基即MS中而成的，其各组分的用量：MS为1L，BA为1mg，NAA为0.2mg，蔗糖为4000mg，琼脂粉为5500mg；生根培养基是由NAA 即a-萘乙酸、蔗糖以及琼脂粉溶解于基本培养基MS中而成的，其各组分的用量：MS为1L，NAA为0.2mg，蔗糖为4000mg，琼脂粉为550mg；继代培养基还包括小苗培养基和大苗培养基，其中小苗培养基是由BA即苄氨基腺嘌呤、NAA 即a-萘乙酸、蔗糖以及琼脂粉溶解于基本培养基MS中而成的，其各组分的用量：MS为1L，BA为0.5mg，NAA为0.2mg，蔗糖为4000mg，琼脂粉为5500mg和MS为1L，BA为1mg，NAA为0.4mg，蔗糖为4000mg，琼脂粉为5500mg，应用时采用两种用量交替培养的方式；

按照上述配方配制的培养基液根据现有组织培养方法对茎尖进行培养，一段时间后得到母本组培苗；组培苗需经过一周左右的时间适应自然环境，可先将装有组培苗的瓶子放置在正常环境下，然后逐渐打开瓶口，使组培苗适应自然温度、空气和阳光，但避免强光照射；

然后将组培苗从培养瓶中取出，洗净根际周围的培养基液，栽到配有营养土的苗床中，营养土用草炭、沙子和珍珠岩以2：1：1比例配制，在18-25℃，100%湿度，70-80%光照的条件下，15天长出新根，初期每天向幼苗表面喷水3-4次，随着幼苗的生长逐渐减少湿度和增加光照；

由于培育出的组培苗数量不能满足生产上的实际需要，对已有的组培苗进行扩繁，即选取健壮植株的嫩茎3节，共有6个叶片并带生长点，进行扦插扩繁，扦插时间为8月25日～9月10日，扦插温度为18～25℃，扦插基质采用草炭、沙子以及珍珠岩，其比例为：2∶1∶1，扦插后育苗时间为35～40天，育苗前期不需要添加肥料，中后期添加浓度为100～150mg/L的20-10-20肥料；

（2）父本育苗：父本育苗采用直接将种子播种在穴盘的方式，播种期为9月1日前后，播种基质选择加拿大生产的“发发得”牌育苗基质，出苗15天后，使用浓度为50mg/L的20-10-20肥料喷淋，后期喷淋浓度为100～150mg/L的20-10-20的肥料，每周一次，育苗期为30～40天；

2、定植

将上述母本幼苗和父本幼苗定植在大棚内，其步骤如下：

（1）整地：大棚内土地每亩施用粉碎秸秆1000kg，喷EM菌剂1kg，旋耕使秸秆与土壤混合均匀；

（2）做畦：大棚内制作高畦，畦高30～40cm，畦面宽为55～60cm，畦间距70～75cm，并畦面铺设地膜，为畦面平整，保持植株长势平整，作业道宽敞，最好使用木板做成长方形畦模，然后在畦模内做畦；

（3）定植：定植时间一般选在10月1日至10月15日，定植前3天对高畦进行滴灌，使土壤含水量达到70%以上；首先在高畦内打苗孔，然后将幼苗定植在苗孔内，定植时需按5g∕亩的用量施17-17-17化肥作为底肥，其中定植母本的畦内打孔两行，畦内行间距30～35cm，畦间行距95～100cm，孔距30cm，母本定植3000～4000株∕亩；定植父本的畦内打孔三行，畦内行间距20cm，畦间行距90cm，孔距20cm，父本定植6000～8000株∕亩；

3、田间管理

（1）温度：定植后苗生长的温度随时间的推进而变化：10月份为5～20℃，11月份为2～18℃，12月份为0～15℃，翌年1月份为-10～12℃，2月份为0～15℃，3月份为5～20℃，4月以后苗生长的温度是白天22～28℃，夜间12～15℃；

（2）水分：冬季结冰之前要浇灌一次防冻水，避免冬季因浇水不便导致植株干旱死亡，并根据苗生长情况及时供水，授粉期不可缺水，授粉结束后，一般在六月下旬后应减少供水；

（3）追肥：翌年3月以后，要随滴灌进行追肥，一般采用冲施肥，10～15天一次；

（4）植株调整：母本一般需要根据植株的长势进行剪枝，母本植株12月份剪第一次，剪枝时保留基部7～10cm；在翌年4月中旬剪第二次，剪枝时保留基部5～8cm；父本一般不需要剪枝；

4、授粉

（1）花粉的提取及保存：翌年4月下旬以后即可收集花粉，一般在清晨露水退去后在父本植株上提取花粉，花粉提取后低温干燥，一般采用生石灰对花粉进行干燥，干燥后的花粉一般可以保存一个月；

（2）授粉 ：授粉的最佳时期是5月中旬至6月初，全天即可授粉，授粉主要采用人工授粉的方式，即利用棉签、毛笔等工具将父本花粉涂抹在母本柱头的绒毛上，授粉时期最好选在母本柱头微弯，柱头上的绒毛比较清晰时；

5、采收及采后处理

当果实前端变黄，种子与胎座分离时及时采收；采收后将果实晒干，轻搓使种子与果实完全分离，晒干入袋。