CN102247358A

CN102247358A - 3，3′-二(5，6-二氯吲哚)基甲烷的新应用

Info

Publication number: CN102247358A
Application number: CN 201110187623
Authority: CN
Inventors: 樊赛军
Original assignee: SUZHOU SAIFU QITIAN PHARMACEUTICAL CO Ltd
Current assignee: SUZHOU SAIFU QITIAN PHARMACEUTICAL CO Ltd
Priority date: 2011-07-06
Filing date: 2011-07-06
Publication date: 2011-11-23

Abstract

本发明属于放射损伤防护药物领域，涉及3，3’-二(5，6-二氯吲哚)基甲烷的新用途，即在制备放射损伤防护药物中的应用，所述3，3’-二(5，6-二氯吲哚)基甲烷的结构式如下所示：本发明所述3，3’-二(5，6-二氯吲哚)基甲烷可以用于制备放射损伤防护药物，可以在无毒副作用的低浓度下，提高受到电离辐射照射后细胞的存活率。

Description

3,3′-二(5,6-二氯吲哚)基甲烷的新应用

技术领域

本发明属于辐射损伤防护药物领域，涉及3，3′-二(5，6-二氯吲哚)基甲烷的新用途，即在制备放射损伤防护药物中的应用。

背景技术

据世界卫生组织统计，目前恶性肿瘤的治愈率大约在45％左右，其中手术占22％，放射治疗占18％，化疗占5％。其中，在恶性肿瘤治疗过程中大约70-80％的病人在不同阶段因不同的目的都需要放射治疗。放射治疗是一种采用高能量的电离辐射对肿瘤进行治疗，以达到治疗肿瘤的治疗方法。导致男子死亡的肺癌、胃癌、肝癌、结肠直肠癌和食道癌五种最常见恶性肿瘤以及造成妇女死亡的乳腺癌、肺癌、胃癌、结肠直肠癌和宫颈癌五种最常见恶性肿瘤可以通过单纯放射治疗就可以治愈或通过结合手术、化疗和其他治疗手段的综合治疗也可以达到治疗目的。另外，肿瘤手术前使用放射治疗，可缩小肿瘤体积，更方便手术的切除。手术后使用放射治疗可以清除手术后可能残留的肿瘤细胞，降低原肿瘤局部和区域淋巴结复发率，以提高病人治愈率和生存率。而对于一些晚期无法手术和化疗的病人，放射治疗可以快速缓解肿瘤带来的疼痛，减轻肿瘤过大所带来的压迫症状，以延长寿命和提高生活质量。因此，放射治疗是恶性肿瘤的主要治疗手段和辅助治疗方法，是目前恶性肿瘤治疗中不可缺少的治疗方法。

然而，我们也清醒地知道，在采用高能量电离辐射治疗恶性肿瘤的同时，由于电离辐射的非特异性以及目前照射技术和辐射防护条件的限制，高能量的电离辐射照射也导致了肿瘤组织周边，乃至全身的正常组织和器官的急性辐射损伤。例如，在进行肿瘤根治性放射治疗时，对肿瘤区域给以根治大剂量的照射，由于照射范围较大，照射剂量也高，周边和全身正常组织的损伤也就越大。因此，放射治疗是一种非常有效的治疗手段，但治疗同时对正常组织和细胞的急性辐射损伤所带来的副作用也严重地限制了放射治疗在恶性肿瘤治疗中的广泛应用。为了减轻肿瘤放射治疗中电离辐射对正常组织人体的危害，研究放射损伤的防治手段，特别是寻找高效、低毒副作用的辐射防护药物，降低肿瘤放射治疗中正常组织和细胞的放射损伤是肿瘤放射治疗研究中迫切需要解决的问题。肿瘤放射治疗防护药物是指给予肿瘤病人受到放射治疗照射前或者照射后早期能防护或减轻电离辐射照射所带来的组织和细胞损伤的化合物(或药物)的总称。针对性的放射防护药物应用是防护电离辐射造成急性放射损伤的最有效和直接的手段之一。

3，3′-二(5，6-二氯吲哚)基甲烷(简称BCIM，C₁₇H₁₄ Cl₄N₂)结构式如下所示：

其制备方法可参见：于良民，王利，李霞，徐焕志.二吲哚基甲烷及其衍生物的合成与表征.精细化工，2006，23(5)，483-486。3，3′-二(5，6-二氯吲哚)基甲烷是一种重要的保健品和医药中间体。

现有技术中未见任何有关3，3′-二(5，6-二氯吲哚)基甲烷具有放射损伤防护作用方面的报道。

发明内容

本发明的发明目的是提供3，3′-二(5，6-二氯吲哚)基甲烷的新用途，即在制备放射损伤防护药物中的应用。

为达到上述发明目的，本发明采用的技术方案是：3，3′-二(5，6-二氯吲哚)基甲烷在制备放射损伤防护药物中的应用，所述3，3′-二(5，6-二氯吲哚)基甲烷的结构式如下所示：

发明人将无明显毒副作用浓度(＜1μmol/L)的3，3′-二(5，6-二氯吲哚)基甲烷直接加到正常细胞培养液中，处理24小时后采用MTT细胞染色法和细胞克隆形成方法检测细胞生长和存活率，结果发现：小于20μmol/L的3，3′-二(5，6-二氯吲哚)基甲烷对正常细胞的生长不产生任何的影响。

同时，发明人采用不同浓度(0，0.5，1μmol/L)的3，3′-二(5，6-二氯吲哚)基甲烷处理正常两种正常细胞24小时后，再给予细胞不同剂量(0-10Gy)的γ-射线照射。照射后的细胞继续培养24小时，并采用细胞克隆形成法检测细胞存活率。研究结果表明：无毒副作用浓度的3，3′-二(5，6-二氯吲哚)基甲烷(＜1μmol/L)处理可以明显降低正常细胞对辐射照射的敏感性，从而降低了细胞的放射损伤。

因此，本发明要求保护3，3′-二(5，6-二氯吲哚)基甲烷在制备放射损伤防护药物中的应用。对正常细胞生长无任何明显作用的用药浓度条件下，采用3，3′-二(5，6-二氯吲哚)基甲烷处理正常细胞，可以提高电离辐射照射后的细胞存活率。

优选的技术方案中，所述放射损伤防护药物为：肿瘤放射治疗中的放射防护药、预防或治疗放射性事故中电离辐射损伤的放射防护药；优选地，所述肿瘤放射治疗中的放射防护药为乳腺癌放射治疗中的放射防护药。

由于上述技术方案运用，本发明与现有技术相比具有下列优点：

1.本发明所述3，3′-二(5，6-二氯吲哚)基甲烷可以用于制备放射损伤防护药物，在无毒副作用的低浓度下，显著性地降低了正常细胞所遭到辐射照射导致的辐射损伤。

附图说明

图1是实施例一中3，3′-二(5，6-二氯吲哚)基甲烷预处理和辐射照射对正常细胞存活率的影响。

具体实施方式

下面结合附图及实施例对本发明作进一步描述：

材料：人正常的乳腺上皮细胞系184A1和Hs578Bst购于美国细胞收藏中心(ATCC)；D-MEM、培养基干粉，小牛血清，胰酶粉末购自Gibco公司(美国)；培养皿和各种规格离心管等实验用品购自美国Fisher Science公司。

实施例一：

(1)细胞培养：Hs578Bst细胞培养于含10％小牛血清，谷氨酸胺及100万U/L青霉素和100μg/ml链霉素的D-MEM培养基。184A1细胞培养于含MEGM SingleQuot Kit Supplement和生长因子哺育上皮细胞基本培养基。细胞置于5％CO₂，37℃培养箱内培养，每2-3天传代1次，取对数生长期细胞用于实验。

(2)将无明显毒副作用浓度(＜1μmol/L)的3，3′-二(5，6-二氯吲哚)基甲烷直接加到正常细胞培养液中，处理24小时后采用MTT细胞染色法和细胞克隆形成方法检测细胞生长和存活率，结果发现：小于20μmol/L的3，3′-二(5，6-二氯吲哚)基甲烷对正常细胞的生长不产生任何的影响。

(3)细胞存活率测定：将处于对数生长期的184A1和Hs578Bst细胞(6×10⁴/mL)接种至96孔板中，培养24小时后加入0.5μmol/L或1μmol/L的3，3′-二(5，6-二氯吲哚)基甲烷，然后给予不同剂量(0，2，4，6，8，10Gy)的γ-射线照射(照射条件：一⁶⁰Co γ-射线辐照源，剂量率为0.9Gy/min)。受照后的细胞按照射剂量接种不同的细胞到100mm培养皿，然后连续培养3周后用甲醇固定，加姬姆萨应用液染色30分钟，流水洗净，计数细胞数≥50的克隆个数。通过克隆形成率PE＝(对照组克隆数/实验组细胞数)x100％和存活分数＝克隆数/(实验组细胞数xPE)计算克隆形成率和存活分数。所得结果如图1所示(其中，BCIM为3，3’-二(5，6-二氯吲哚)基甲烷，DMSO为二甲基亚砜，(3，3′-二(5，6-二氯-1-氢吲哚)甲烷溶剂作为阴性对照)。数据为来自三个独立实验结果的平均值±平均差)，由图1可知：采用无毒副作用浓度(＜1μmol/L)的3，3′-二(5，6-二氯吲哚)基甲烷预处理可以明显提高受到γ-射线照射正常细胞的存活率。

Claims

1.3，3′-二(5，6-二氯吲哚)基甲烷在制备放射损伤防护药物中的应用，所述3，3′-二(5，6-二氯吲哚)基甲烷结构式如下所示：

2.根据权利要求1所述3，3′-二(5，6-二氯吲哚)基甲烷在制备放射损伤防护药物中的应用，其特征在于，所述放射损伤防护药物为：肿瘤放射治疗中的放射防护药、预防或治疗放射性事故中电离辐射损伤的放射防护药。

3.根据权利要求2所述3，3′-二(5，6-二氯吲哚)基甲烷在制备放射损伤防护药物中的应用，其特征在于，所述肿瘤放射治疗中的放射防护药为乳腺癌放射治疗中的放射防护药。