CN102242067B - 一株产低温中性纤维素酶菌株及所产纤维素酶的制备 - Google Patents
一株产低温中性纤维素酶菌株及所产纤维素酶的制备 Download PDFInfo
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Abstract
本发明涉及一株产低温中性纤维素酶的地丝霉菌株，该菌系低温环境微生物。本发明提供了鉴定的菌株培养物的rDNA序列。本发明还提供了该菌株的产酶培养基和培养条件，以及该菌株所产纤维素酶的酶学性质和复配技术。本发明涉及到的中性纤维素酶低温活力高，生产成本低廉、发酵周期短。所得到的中性纤维素酶可广泛应用于棉类织物或含棉织物的生物抛光及牛仔布水洗工艺，提升产品品质，降低生产能耗。
Description
技术领域
本发明涉及生物领域，具体涉及到一株产低温中性纤维素酶菌株及所产纤维素酶的制备，属于生物酶培育和应用领域。
背景技术
纤维素酶是指能降解纤维素生成纤维二糖和葡萄糖等小分子物质的一组酶的总称，是一种复合的诱导水解酶。通常认为，纤维素酶对纤维素的分解作用至少需要三种不同的酶的协同作用：(1)，葡萄糖内切酶，它作用于纤维素的非结晶区，随机水解β-1,4-糖苷键生成带非还原端的较短的寡聚糖，(2)，葡萄糖外切酶，它作用于纤维素分子的非还原末端水解β-1,4-糖苷键生成纤维二糖，(3)β-葡萄糖苷酶，它将纤维二糖水解为葡萄糖。
菌种的选育是纤维素酶生产的基础性工作。迄今，已有近200种微生物能降解纤维素，包括细菌、真菌和放线菌等。细菌类有红黄纤维弧菌(Cellvibrio fulvus)、普通纤维弧菌(C.vulgaris)和瘤胃球菌(Ruminococcus)等；放线菌纲有链霉属(Streptomyces)QMB814和高温放线菌属(Thermoactinomycete)等；真菌类有黑曲霉（Aspergillus niger）、绿色木霉(Trichoderma viride)和里氏木霉(T.reesei)等。
依据分泌纤维素酶及其酶活性关系，大体可分为三类：（1）对天然木质纤维素的降解能力比较弱，但可以大量合成可分泌到胞外的纤维素酶，如常见的木霉、青霉等；（2）对天然木质纤维素降解能力强，但分泌到胞外的纤维素酶活力较低，如担子菌；（3）对天然纤维素分解能力强，但其纤维素酶基本不分泌到胞外，而是存在于细胞壁上，如细菌。
而根据纤维素酶的应用条件,又将纤维酶分为酸性纤维酶、中性纤维素酶、碱性纤维素酶。纤维素酶的工业化应用主要集中在生物能源、洗涤剂行业、纺织品整理和牛仔水洗等领域。在生物能源领域，纤维素酶能够通过水解作用将纤维素物质彻底降解，其水解产物能进一步发酵生产乙醇、氢气及生产生物柴油等，此领域需要高活力的酸性纤维素酶；在洗涤剂行业，碱性纤维素酶可添加到洗涤剂中，提升洗涤效果；在纺织品整理和牛仔水洗领域，中性纤维酶由于其反应温度低、反应条件平和、织物整理效果好而具有很大的优势。
但是，目前国产商品化纤维素酶多为酸性高温酶，国内使用的中性纤维素酶几乎都是国外厂家生产的。技术垄断导致其商品化中性纤维素酶价格昂贵，制约了其市场推广。因此，本领域迫切需要开发新的生产高活力中性纤维素酶的菌株，以生产低温中性条件下使用的高活力纤维素酶，满足纺织行业加工的需要。
发明内容
本发明目的在于：开发极端微生物资源，筛选一株产低温中性纤维素酶微生物菌株。通过诱导培养获得纤维素酶，加入适当助剂和保护剂，开发出适合牛仔布水洗和织物抛光的纤维素酶制剂。
本发明公开了一株产低温中性纤维素酶菌株筛选、及其诱导培养和发酵方法,以及所产低温中性纤维素酶的复配及应用方法。
本发明所述的一株产低温中性纤维素酶菌株,所述菌株为地丝霉菌KDN-2（Geomycessp.KDN-2）保藏编号CCTCC NO:M2010109，其rDNA序列为：
1 CTTCCGTAGG TAACCTGCGG AAGGATCATT ACAGTAGTCA CCCGGGGCGC CGCAAGGCCT
61 CCCGGGTAAC CTACCACCCT TTGTTTATTA CACTTTGTTG CTTTGGCAGG CCTGCCCTCG
121 GGCTGCTGGC TCCGGCCGGC GAGCGCTTGC CAGAGGACCT AAACTCTGTT TGTCTATACT
181 GTCTGAGTAC TATATAATAG TTAAAACTTT CAACAACGGA TCTCTTGGTT CTGGCATCGA
241 TGAAGAACGC AGCGAAATGC GATAAGTAAT GTGAATTGCA GAATTCAGTG AATCATCGAA
301 TCTTTGAACG CACATTGCGC CCCCTGGTAT TCCGGGGGGC ATGCCTGTCC GAGCGTCATT
361 ACAACCCTCA AGCTCAGCTT GGTGTTGGGC CCCGCCGCCC CGGCGGGCCC TAAAGTCAGT
421 GGCGGTGCCG TCCGGCTCCG AGCGTAGTAA TTCTTCTCGC TCTGGAGGTC CGGTCGTGTG
481 CTTGCCATCA ACCCCCAATT TTTTTCAGGT GACCTCGGAT CAGGTAGGAG CCGTCGTCTT
其中1-31为18S rDNA部分序列，32-203为ITS1序列，204-361为5.8S序列，362-509为ITS2序列，510-530为28S rDNA部分序列。
本申请人已于2010年5月7日在中国武汉武汉大学“中国典型培养物保藏中心”以培养物名称为：Geomyces sp.KDN-2培养物登记，保藏编号CCTCC NO:M2010109。
本发明所述的一株产低温中性纤维素酶菌株,其筛选方法通过以下途径实现：
1.利用采自南极低温环境土壤，进行10×系列稀释后，涂布于初筛培养基；5～10℃培养3～5天后，加入适量的刚果红染色1小时，然后弃除染液加入1M NaCl洗涤1小时；最后挑取产透明圈的初筛菌株，经过连续的平板划线纯化菌株。
2．通过一对ITS通用引物（ITS1和ITS4）进行PCR扩增所筛选的菌株的rDNA序列，然后测序分析得到SEQ1；将SEQ1进行BLSAT比对分析显示该菌为地丝霉（Geomyces）。
所述的初筛培养基按照：每1L去离子水中掺K2HPO4 0.5g、MgSO4·7H2O 0.25g、刚果红0.2g、明胶2g、羧甲基纤维素钠1.88g、琼脂18g的比例配制。
以地丝酶菌株为菌种进行产酶发酵得到纤维素酶浓缩酶液，将浓缩酶液进行复配得到中性纤维素酶产品。
所述纤维素酶菌株的产酶发酵方法如下：
1将筛选到的菌株由斜面接到50mL液体发酵培养基中，于5～10℃、100rpm培养24小时，制成种子液，然后按5～10%的接种量将种子液加到相应液体产酶培养基中，于5～10℃、150rpm条件下进行产酶培养，定时取样，5000g离心10min后测定发酵液中的酶的滤纸酶活。
2，在5～10℃条件下，以10%接种量逐步扩大培养制备种子液，培养时间为3～4天。最后接种到内置产酶培养基的发酵罐培养100～120小时。
3选择板框过滤和超滤浓缩膜对产出的酶液进行过滤，最后，获得滤纸酶活10～20IU/mL纤维素酶浓缩酶液。
本发明所述产酶培养基组分如下：按照每1L去离子水中掺入(NH4)2SO4 5g、MgSO4·7H2O 0.2g、麸皮18g的比例配制。
本发明所述发酵培养基组分，按玉米粉2%、豆饼粉2%、麸皮1%、(NH4)2SO40.2%MgSO4 0.02%、K2HPO4 0.03%的重量百分比量配制，余量为水。
本发明所述的中性纤维素酶的复配,包括了纤维素酶(浓缩酶液)跟以下组分的一种或多种进行复配：表面活性助剂、活性促进剂、防腐剂、保护剂等,其比例为：纤维素酶30－95%，表面活性剂1－20%，活性促进剂1－20%，防腐剂0.1－3%，保护剂1－30%。复配成可用于纺织领域的中性纤维素酶制剂。
本发明所述表面活性剂，主要由以下一种或几种物料组成：脂肪醇聚氧乙烯醚，脂肪酸聚氧乙烯醚，脂肪酸甲酯乙氧化合物，APG，吐温系列。
本发明所述活性促进剂，主要由以下一种或几种物料组成：食盐，元明粉，氯化镁。
本发明所述防腐剂，主要由以下一种或几种物料组成：1,2-苯并异噻唑啉-3-酮，苯甲酸钠，山梨酸钾，脱氧乙酸钠。
本发明所述保护剂，主要由以下一种或几种物料组成：甘油，山梨醇，丙二醇，EDTA。
根据以上技术方案提出的这种一株产低温中性纤维素酶菌株，不仅培养方法简单，更重要的是为国内用户提供了一种价格比较合理、市场前景更为广阔的低温中性条件下使用的高活力纤维素酶，打破了对国外技术的依赖，能满足纺织行业加工的需要。
附图说明
图1：为刚果红平板筛选产纤维素酶菌株；
图2：SEQ1的核苷酸序列；
图3：酶液的最适pH分析；
图4：酶液的最适温度分析。
具体实施方式
为了进一步了解本发明，下面结合实施例对本发明的优选实施方案进行描述，但是应当理解，这些描述只是为进一步说明本发明的特征和优点而不是对本发明专利要求的限制。
为了更明确的阐述本发明，以下使用具体实施例来说明本发明的实施方案。
实施例1：培养基的制备
筛选培养基：K2HPO4 0.5g，MgSO4·7H2O 0.25g，刚果红0.2g，明胶2g，羧甲基纤维素钠(CMC-Na)1.88g，琼脂18g，去离子水1L。
产酶培养基：(NH4)2SO4 5g，MgSO4·7H2O 0.2,麸皮18g，去离子水1L。
发酵培养基：玉米粉2%，豆饼粉2%，麸皮1%，(NH4)2SO4 0.2%，MgSO4 0.02%，K2HPO40.03%、余量为水。
实施例2：菌株的鉴定
在筛选培养基上获得一株透明圈清晰的菌株。
ITS1:5’-TCCGTAGGTGAACCTGCGG-3’，
ITS4:5’-TCCTCCGCTTATTGATATGC-3’
以ITS1和ITS4为引物PCR扩增，反应体积50μL，反应条件：95℃4min；94℃40s，52℃40s，72℃20s，共25个循环；72℃7min。凝胶回收PCR产物并连接到pEASY-T载体进行测序分析。序列分析结果见SEQ1，其中1-31为18S rDNA部分序列，32-203为ITS1序列，204-361为5.8S序列，362-509为ITS2序列，510-530为28S rDNA部分序列。测序的ITS序列在NCBI上进行BLAST比对，结果显示该菌株为地丝霉属（Geomyces）。
实施例3：、产酶培养
活化后的种子液以10%的接种量接种到产酶培养基，5-10℃培养5天。离心取上清液并测定其滤纸酶活，酶活性为2IU/ml；将该菌株命名为Geomyces sp.KDN-2（保藏号CCTCC NO:M2010109）。
取适当稀释酶液0.5mL和1.5mL pH7.0的磷酸缓冲液混合；加入滤纸条50mg（定量滤纸，约1cm×6cm），38℃水浴中反应1小时后，加入1.5mL DNS溶液终止酶反应，充分摇匀后沸水浴5min，取出冷却后用蒸馏水定容至20mL，充分混匀，测定540nm波长下吸光值。其中，沸水浴10min使酶失活，作为空白对照。
实施例4：酶学性质分析
最适pH值的测定缓冲液体系：乙酸钠(pH4.0-6.0),磷酸钠(pH6.0-8.0)，甘氨酸-氢氧化钠(pH8.0-10.0)。
最适pH值的测定：加以上缓冲液，测定酶活力，以最大值为100％。结果显示，反应最适pH值为7.0，pH5.0～8.0之间能保持80%以上的活性（图3）。
最适温度的测定：20-55℃的范围内测定酶的活力，以最大值为100％。结果显示，反应最适温度为43℃，33～46℃之间能保持80%以上的活性（图4）。
实施例5：酶的复配
通过发酵培养基在发酵罐获得发酵液，利用板框过滤和10000分子量超滤浓缩膜制备浓缩酶液（纤维素酶）。在浓缩酶液中加入适量的表面活性剂、活性促进剂、防腐剂、保护剂等，即可成为纺织工业中广泛使用的低温中性纤维素酶制品。根据不同织物的要求，复配时其比例为：纤维素酶30－95%，表面活性剂1－20%，活性促进剂1－20%，防腐剂0.1－3%，保护剂1－30%。
在实际使用中可参照如下百分量进行：
复配组合1
纤维素酶 48%
脂肪酸聚氧乙烯醚 10%
聚丙烯酸钠（PAA） 10%
食盐 11%
苯甲酸钠 1%
丙二醇 10%
山梨醇 10%
复配组合2
纤维素酶 60%
吐温系列 5%
AGP 5%
食盐 14%
山梨酸钾 1%
山梨醇 15%
复配组合3
纤维素酶 80%
脂肪醇聚氧乙烯醚 4%
食盐 4%
脱氧乙酸钠 2%
甘油 10%
实施例6：牛仔布水洗
水温30-45℃,优选为40℃。pH为5－8,优选为中性pH6.5－7.5。浴比1：5-1：15,优选为1：8。纤维素酶用量0.5-3%(o.w.f)。防回沾剂Lutensol AT-80(BASF生产)用量为1－5g/L，处理时间为20-80分钟,优选为30-50分钟。
实施例7：针织物生物抛光应用
水温30--45℃,优选为40℃。pH为5－8,优选为中性pH6.5-7.5。浴比1：5--1：15,优选为1：10。纤维素酶用量0.5--3%(o.w.f)。处理时间为20-80分钟,优选为30-50分钟。
以上对本发明所提供的一株产低温中性纤维素酶的地丝霉菌株及其筛选、培养和发酵方法,以及所产低温中性纤维素酶的复配及应用方法，进行了详细的介绍。本文中应用了具体个例对本发明的原理及实施方式进行了阐述，以上实施例的说明只是用于帮助理解本发明的方法及其核心思想，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以对本发明进行若干改进和修饰，这些改进和修饰也落入本发明权利要求的保护范围内。
rDNA序列为：
1 CTTCCGTAGG TAACCTGCGG AAGGATCATT ACAGTAGTCA CCCGGGGCGC CGCAAGGCCT
61 CCCGGGTAAC CTACCACCCT TTGTTTATTA CACTTTGTTG CTTTGGCAGG CCTGCCCTCG
121 GGCTGCTGGC TCCGGCCGGC GAGCGCTTGC CAGAGGACCT AAACTCTGTT TGTCTATACT
181 GTCTGAGTAC TATATAATAG TTAAAACTTT CAACAACGGA TCTCTTGGTT CTGGCATCGA
241 TGAAGAACGC AGCGAAATGC GATAAGTAAT GTGAATTGCA GAATTCAGTG AATCATCGAA
301 TCTTTGAACG CACATTGCGC CCCCTGGTAT TCCGGGGGGC ATGCCTGTCC GAGCGTCATT
361 ACAACCCTCA AGCTCAGCTT GGTGTTGGGC CCCGCCGCCC CGGCGGGCCC TAAAGTCAGT
421 GGCGGTGCCG TCCGGCTCCG AGCGTAGTAA TTCTTCTCGC TCTGGAGGTC CGGTCGTGTG
481 CTTGCCATCA ACCCCCAATT TTTTTCAGGT GACCTCGGAT CAGGTAGGAG CCGTCGTCTT
SEQ1
1 CTTCCGTAGG TAACCTGCGG AAGGATCATT ACAGTAGTCA CCCGGGGCGC CGCAAGGCCT
61 CCCGGGTAAC CTACCACCCT TTGTTTATTA CACTTTGTTG CTTTGGCAGG CCTGCCCTCG
121 GGCTGCTGGC TCCGGCCGGC GAGCGCTTGC CAGAGGACCT AAACTCTGTT TGTCTATACT
181 GTCTGAGTAC TATATAATAG TTAAAACTTT CAACAACGGA TCTCTTGGTT CTGGCATCGA
241 TGAAGAACGC AGCGAAATGC GATAAGTAAT GTGAATTGCA GAATTCAGTG AATCATCGAA
301 TCTTTGAACG CACATTGCGC CCCCTGGTAT TCCGGGGGGC ATGCCTGTCC GAGCGTCATT
361 ACAACCCTCA AGCTCAGCTT GGTGTTGGGC CCCGCCGCCC CGGCGGGCCC TAAAGTCAGT
421 GGCGGTGCCG TCCGGCTCCG AGCGTAGTAA TTCTTCTCGC TCTGGAGGTC CGGTCGTGTG
481 CTTGCCATCA ACCCCCAATT TTTTTCAGGT GACCTCGGAT CAGGTAGGAG CCGTCGTCTT
Claims (7)
1.一株产低温中性纤维素酶的菌株，其特征在于：所述菌株为地丝霉菌KDN-2（Geomyces sp.KDN-2），保藏编号为CCTCC NO：M2010109，其rDNA序列为：
1 CTTCCGTAGG TAACCTGCGG AAGGATCATT ACAGTAGTCA CCCGGGGCGC CGCAAGGCCT
61 CCCGGGTAAC CTACCACCCT TTGTTTATTA CACTTTGTTG CTTTGGCAGG CCTGCCCTCG
121 GGCTGCTGGC TCCGGCCGGC GAGCGCTTGC CAGAGGACCT AAACTCTGTT TGTCTATACT
181 GTCTGAGTAC TATATAATAG TTAAAACTTT CAACAACGGA TCTCTTGGTT CTGGCATCGA
241 TGAAGAACGC AGCGAAATGC GATAAGTAAT GTGAATTGCA GAATTCAGTG AATCATCGAA
301 TCTTTGAACG CACATTGCGC CCCCTGGTAT TCCGGGGGGC ATGCCTGTCC GAGCGTCATT
361 ACAACCCTCA AGCTCAGCTT GGTGTTGGGC CCCGCCGCCC CGGCGGGCCC TAAAGTCAGT
421 GGCGGTGCCG TCCGGCTCCG AGCGTAGTAA TTCTTCTCGC TCTGGAGGTC CGGTCGTGTG
481 CTTGCCATCA ACCCCCAATT TTTTTCAGGT GACCTCGGAT CAGGTAGGAG CCGTCGTCTT
其中1-31为18S rDNA部分序列，32-203为ITS1序列，204-361为5.8S序列，362-509为ITS2序列，510-530为28S rDNA部分序列。
2.一种以权利要求1所述地丝霉菌株为菌种的中性纤维素酶的制备方法，其特征在于：以所述地丝霉菌株为菌种进行产酶发酵得到纤维素酶浓缩酶液，将浓缩酶液进行复配得到中性纤维素酶产品。
3.如权利要求2所述的中性纤维素酶的制备方法，其特征在于：所述地丝霉菌株产酶发酵方法为：
a)将筛选出的菌株由斜面接到50mL液体发酵培养基中，于10℃、100rpm培养24小时，制成种子液，然后按体积比（mL/mL）为5～10%的接种量将种子液加到相应液体产酶培养基中，于10℃、150rpm条件下进行产酶培养，定时取样，5000g离心10min后测定发酵液中的酶的滤纸酶活；
b）在5～10℃条件下，按体积比（mL/mL）为10%的接种量逐步扩大培养制备种子液，培养时间为3～4天；最后接种到内置产酶培养基的发酵罐培养继续100～120小时获得所需酶液；
c）选择板框过滤和超滤浓缩膜对产出的酶液进行过滤，获得滤纸酶活10～20IU/mL浓缩酶液。
4.如权利要求3所述的中性纤维素酶的制备方法，其特征在于：所述发酵培养基的组分及其重量百分比（g/g）分别为：玉米粉2%，豆饼粉2%，麸皮1%，(NH4)2SO4 0.2%，MgSO4 0.02%，K2HPO4 0.03%的百分比含量组成，水余量。
5.如权利要求3所述的中性纤维素酶的制备方法,其特征在于：所述的产酶培养基按照：每1L去离子水中掺(NH4)2SO4 5g、MgSO4·7H2O 0.2g、麸皮18g的比例配制。
6.如权利要求2所述中性纤维素酶的制备方法，其特征在于：其以纤维素酶浓缩溶液为原料的复配酶制剂由纤维素酶和表面活性助剂、活性促进剂、防腐剂、保护剂组成；其各组分的重量百分比（g/g）分别为：纤维素酶30－95%，表面活性剂1－20%，活性促进剂1－20%，防腐剂0.1－3%，保护剂1－30%。
7.如权利要求6所述的中性纤维素酶的制备方法，其特征在于：所述表面活性剂，由脂肪醇聚氧乙烯醚、脂肪酸聚氧乙烯醚、脂肪酸甲酯乙氧化合物、APG、吐温系列中的一种或几种物料组成；所述活性促进剂，由食盐、元明粉、氯化镁中的一种或几种物料组成；所述防腐剂，由1,2-苯并异噻唑啉-3-酮、苯甲酸钠、山梨酸钾、脱氧乙酸钠中的一种或几种物料组成：所述保护剂，由甘油、山梨醇、丙二醇、EDTA中的一种或几种物料组成。
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Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN101280326A (zh) * | 2008-05-14 | 2008-10-08 | 中国科学院微生物研究所 | 一种抑制烟曲霉活性的化合物制备方法及其应用 |
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Patent Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN101280326A (zh) * | 2008-05-14 | 2008-10-08 | 中国科学院微生物研究所 | 一种抑制烟曲霉活性的化合物制备方法及其应用 |
Non-Patent Citations (2)
| Title |
|---|
| LI ZHONGQING ET AL.STUDY ON THE PSYCHROPHILIC/PSYCHROTROPHIC MICROORGANISMS.《ACTA MYCOLOGICA SINICA》.1989,第8卷(第1期),47-50. * |
| 卢月霞等.纤维素降解菌的筛选及相互作用分析.《安徽农业科学》.2007,第35卷(第1期),11,17. * |
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Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| C06 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| C10 | Entry into substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| C14 | Grant of patent or utility model | ||
| GR01 | Patent grant | ||
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Application publication date: 20111116 Assignee: Qingdao Weilan Biology Group Co., Ltd. Assignor: Shanghai KDN Biotech Co. Ltd. Contract record no.: 2013370000211 Denomination of invention: Bacterial strain for producing low temperature neutral cellulase and method for preparing said cellulose Granted publication date: 20130731 License type: Common License Record date: 20130909 |
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| LICC | Enforcement, change and cancellation of record of contracts on the licence for exploitation of a patent or utility model |