CN102108334A - 一种脱铬红细菌及其应用 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及微生物领域,具体地,本发明涉及一种脱铬红细菌及其应用。根据本发明的脱铬红细菌,其保藏编号为CGMCC No.3512。本发明提供的脱铬红细菌CGMCCNo.3512是从自然界筛选分离得到的,该菌无论是生长状态、还是静止细胞均能表现出专一、快速、有效地将废水中Cr(VI)还原为Cr(III),同时生成Cr(OH)3沉淀,从而降低了废水中的总铬浓度,避免了对环境的污染。本发明的新菌株脱铬红细菌CGMCC No.3512能够在碱性环境下生长并处理含Cr(VI)废水,并且还原速率快,具有普通细菌还原法无可比拟的优势。同时推动了生物法治理碱性Cr(VI)废水技术的发展,有助于解决困扰我国铬盐、电镀等化工行业的含铬废水污染问题。
Description
技术领域
本发明涉及微生物领域,具体地,本发明涉及一种脱铬红细菌及其应用。
背景技术
铬盐工业是无机盐工业的一个重要分支,其主要产品有重铬酸钠、铬酸酐、重铬酸钾、氧化铬等。铬的化合物广泛存在于铬盐生产、纺织品染色、染料生产及制革、电镀等行业所排放的废水中。1991-1995年有关部门对国内城市河流、七大水系及湖泊水库的监测中发现Cr和Pb是比较普遍的重金属污染物。水体中的重金属通过直接饮水、食用被污水灌溉过的蔬菜和粮食等途径进人人体,威胁着人们的身体健康。工业废水中常见的铬化合物为Cr(III)和Cr(VI)两种价态,其中Cr(III)是人体必需的微量元素,其毒性是Cr(VI)的百分之一。Cr(III)参与体内糖类的新陈代谢过程,成人每天需要从食物中摄入50-200μg的Cr(III),若缺乏会导致高血脂和高胆固醇等(Baral,A.and R.D.Engelken,Chromium-based regulations and greening in metalfinishing industries in the USA.Environmental Science & Policy,2002.5(2):121-133.)。但是Cr(VI)属于高毒性污染物,也是铬盐工业排放的主要污染物之一,对人体危害极大。这是由于Cr(VI)在自然界水体中常以CrO4 2-形态存在,在人体的生理pH值时,CrO4 2-极易通过阴离子转运蛋白进入细胞体内,从而引起基因变异和致癌。中华人民共和国《污水综合排放标准》将Cr(VI)列为优先考虑的一类污染物之一,规定工业排放物中六价铬含量不高于0.5mg/l,包括三价铬在内的总铬含量不高于1.5mg/l。同时世界卫生组织规定饮用水中六价铬含量应不高于0.05mg/l。因此,Cr(VI)的污染治理也就成为环保工作者的重要课题之一。
现有的Cr(VI)处理技术以物理化学法为主,包括将Cr(VI)还原成低毒的Cr(III),再进行化学沉淀、机械过滤、离子交换以及膜分离和活性炭吸附等。但是这些方法通常需要大量的化学还原剂和沉淀剂,同时会产生大量的有毒污泥。另外,当废水中金属离子浓度低至1-100mg/l时,化学沉淀法和电化学法的效率过低,而离子交换、膜分离和活性炭吸附的成本则过高,因此现有方法并不能从根本上解决问题(Wang,J.and C.Chen,Biosorption of heavy metals by Saccharomyces cerevisiae:Areview.Biotechnology Advances.24(5):427-451;Nourbakhsh,M.,et al.,A comparativestudy of various biosorbents for removal of chromium(VI)ions from industrial waste waters.Process Biochemistry,1994.29(1):1-5;Volesky,B.,Detoxification ofmetal-bearing effluents:biosorption for the next century.Hydrometallurgy,2001.59(2-3):203-216.)。鉴于此,国内外已经将水体重金属污染的研究重点集中在新兴的生物技术领域。迅速发展的生物技术使得重金属废水的无害化处理成为可能,同时生物材料的天然性质使生物吸附剂具备良好的发展前景。
生物富集技术处理含铬重金属废水是指利用具有Cr(VI)耐受性的活体微生物的新陈代谢作用将废水中具有生物毒性的Cr(VI)还原为毒性较低的Cr(III),从而脱除了废水中的Cr(VI)。很多细菌类微生物的细胞内含有铬还原酶,能将Cr(VI)还原为毒性较低的Cr(III),而且会降低Cr(III)的可溶性,为生物技术处理含铬废水提供了一种可行方法。另外,由于微生物具有选择性地吸附重金属离子、能不断繁殖、被富集的金属离子不会返回环境中,还可以利用新陈代谢作用连续地富集重金属离子等优点,因此生物富集技术为含Cr(VI)重金属废水的处理提供了更广泛的空间(Malik,A.,Metal bioremediation through growing cells.Environment International,2004.30(2):261-278.)。
自发现微生物对Cr(VI)的还原作用以来,人们就不断分离、筛选对Cr(VI)具有生物转化功能的高效功能菌。国内外最早有关纯种微生物处理含Cr(VI)废水的报道要追溯到上个世纪70年代,前苏联的Romanenko在文中写到脱色杆菌(Dechromaticans)在厌氧环境下可用于处理含铬废水,3天内每千克生物量可将2.1克K2Cr2O4还原成三价铬沉淀。1988年Bopp和Ehrlich从荧光假单胞菌(Pseudomonas fluorescens)LB300的细胞膜上发现了具有Cr(VI)还原能力的还原酶。并在细胞膜表面,观察到Cr(VI)还原后生成的三价铬沉淀物。近年来对还原Cr(VI)的细菌及其处理含铬废水的研究在国内也有所报道。例如中科院成都微生物研究所筛选出5株复合功能菌,建成了微生物净化电镀废水和回收污泥中的铬等重金属的示范工程。目前,研究者相继筛选出了许多铬(VI)还原细菌,主要包括假单胞菌(Pseudomonas)、芽孢杆菌(Bacillus)、肠杆菌(Enterobacter)等。这些菌种以相关基质作为营养物及电子供体,Cr(VI)作为电子受体,在厌氧或好氧条件下还原Cr(VI),实现Cr(VI)的解毒,且还原过程中没有有害产物生成,显示了良好的应用前景。但目前所分离的细菌都存在着耐受及还原Cr(VI)浓度较低的情况,细菌生长所需要的培养基及培养条件也比较苛刻,且大多局限于酸性或中性含铬废水的处理,还原速率慢,工业应用甚少。
发明内容
因此,本发明的目的是提供一种能有效脱除废水中的Cr(VI)的红细菌。
本发明的再一目的是提供上述脱铬红细菌的应用。
本发明的另一目的是提供一种治理含Cr(VI)污水的方法。
本发明从细菌冶金的角度出发,成功地从自然界筛选、分离出一株能高效还原碱性介质中高浓度Cr(VI)的细菌,并针对该菌种的特点,提供一种易于大规模培养、成本低廉的培养方法。该菌无论是生长状态还是静止细胞均能表现出专一、快速、有效地将废水中Cr(VI)还原为Cr(III),同时生成了Cr(OH)3沉淀,从而降低了废水中的总铬浓度,避免了对环境的污染。根据本发明的脱铬红细菌CGMCC No.3512(Pannonibacterphragmitetus LSSE-09),其保藏编号为CGMCC No.3512(于2009年12月16日保藏于“中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心”,地址:北京市朝阳区北辰西路1号院3号,中国科学院微生物研究所,100101)。根据本发明的菌株LSSE-09菌体为杆状,长1.5-2.0μm,侧生鞭毛,可运动,属革兰氏阴性,可在pH 5.5-10.0的环境中生长。菌株LSSE-09细胞内的主要脂肪酸为C18∶1ω7c,与菌株呼吸作用相关的醌主要为醌10。
本发明的Pannonibacter phragmitetus菌CGMCC No.3512是从铬盐堆旁被铬Cr(VI)污染的土壤中采集土样,以K2Cr2O7为铬源选择性培养分离纯化而得到,其生物学特征如下:
A形态学特征
菌株CGMCC No.3512(Pannonibacter phragmitetus LSSE-09)菌体为杆状(见图1和图2),长1.5-2.0μm,侧生鞭毛,可运动,属革兰氏阴性,耐碱。在液体培养条件下,沿玻璃管壁生长,形成菌膜。
B培养特征
菌株CGMCC No.3512(Pannonibacter phragmitetus LSSE-09)在LB(Luria-Bertani)固体培养基上菌落突起呈圆形,浅棕色,半透明,边缘光滑且整齐,菌落较小,直径为1.0-2.5mm。本菌株适宜生长温度15-45℃,适宜生长pH 5.5-10.0,可耐受NaCl浓度(w/v)高达5%。
C生理生化
参照《Bergey’s Manual of Systematic Bacteriology》vol.IV.的方法,菌株CGMCCNo.3512(Pannonibacter phragmitetus LSSE-09)的生理生化特征如表1所示。
表1菌株LSSE-09的生理生化特征
特征 | 结果 | 碳源利用特征 | 结果 |
过氧化氢酶 | + | 柠檬酸钠 | + |
氧化酶 | + | D-甘露糖醇 | + |
[0019]
脲酶 | + | N-乙酰葡糖胺 | + |
精氨酸水解酶 | + | 苹果酸 | + |
β-半乳糖苷酶 | + | 苯乙酸 | + |
淀粉水解 | - | H2S产生 | + |
酪素水解 | - | 吲哚产生 | - |
明胶水解 | - | D-葡萄糖 | + |
七叶灵水解 | + | D-甘露糖 | + |
甲基红反应 | - | L-阿拉伯糖 | + |
硝酸盐还原 | + | D-麦芽糖 | + |
根据本发明的脱铬红细菌CGMCC No.3512,其中,所述菌的16SrRNA序列如SEQ ID No.1所示。
AGGCCTTTAACACATGCAAGTCGAACGCATCGCAAGATGAGTGGCAGACGGGTGAGTAACACGTGGGAACATACCCTTTGGTGCGGAACAACAGCTGGAAACGGCTGCTAATACCGCATGCGCCCTACGGGGGAAAGATTTATCGCCGAAGGATTGGCCCGCGTCTGATTAGCTAGTTGGTGAGGTAATGGCTCACCAAGGCGACGATCAGTAGCTGGTCTGAGAGGATGATCAGCCACACTGGGACTGAGACACGGCCCAGACTCCTACGGGAGGCAGCAGTGGGGAATATTGGACAATGGGCGCAAGCCTGATCCAGCCATGCCGCGTGAGTGATGAAGGCCCTAGGGTTGTAAAGCTCTTTCAGCGAGGAGGATAATGACGTTACTCGCAGAAGAAGCCCCGGCTAACTTCGTGCCAGCAGCCGCGGTAATACGAAGGGGGCTAGCGTTGTTCGGAATCACTGGGCGTAAAGCGCACGTAGGCGGACTTTTAAGTCAGGGGTGAAATCCCGGGGCTCAACCTCGGAACTGCCTTTGATACTGGAAGTCTGGAGTCCGAGAGAGGTGAGTGGAACTCCGAGTGTAGAGGTGAAATTCGTAGATATTCGGAAGAACACCAGTGGCGAAGGCGGCTCACTGGCTCGGTACTGACGCTGAGGTGCGAAAGCGTGGGGAGCAAACAGGATTAGATACCCTGGTAGTCCACGCCGTAAACGATGGAAGCTAGCCGTCAGGGTGCATGCATCTTGGTGGCGCAGTTAACGCATTAAGCTTCCCGCCTGGGGAGTACGGTCGCAAGATTAAAACTCAAAGGAATTGACGGGGGCCCGCACAAGCGGTGGAGCATGTGGTTTAATTCGAAGCAACGCGCAGAACCTTACCAGCTCTTGACATTTGGTGCTACCACGGGAGACCGTGGGTTCCCTTCGGGGACGCCAGGACAGGTGCTGCATGGCTGTCGTCAGCTCGTGTCGTGAGATGTTGGGTTAAGTCCCGCAACGAGCGCAACCCTCGCCCTTAGTTGCCAGCATTGAGTTGGGCACTCTAGGGGGACTGC CGGTGATAAGCCGAGAGGAAGGTGGGGATGACGTCAAGTCCTCATGGCCCTTACGGGCTGGGCTACACACGTGCTACAATGGCGGTGACAGTGGGCAGCGAAGGGGTGACCCGGAGCTAATCTCCAAAAGCCGTCTCAGTTCGGATTGTTCTCTGCAACTCGAGAGCATGAAGTTGGAATCGCTAGTAATCGCGTAACAGCATGACGCGGTGAATACGTTCCCGGGCCTTGTACACACCGCCCGTCACACCATGGGAGTTGGGTTTACCCGAAGGTGGTGCGCTAACCGCAAGGAGGCAGCCAACCAACGG
本发明的脱铬红细菌CGMCC No.3512的16SrRNA基因序列有1370个碱基。通过检索GenBank,测得的16SrRNA序列输入GenBank数据库用BLAST软件进行比对处理,同Pannonibacter phragmitetus strain 31801(Genebank登记号:FJ882624.1)同源性为99%。结合16SrRNA分子鉴定与前面的生理生化鉴定结果,鉴定脱铬红细菌CGMCC No.3512(LSSE-09)为Pannonibacter phragmitetus。
本发明的脱铬红细菌CGMCC No.3512既可以在营养培养基中培养,也可以在含有Cr(VI)源(无机可溶性含Cr(VI)化合物如K2Cr2O7或Na2CrO4等)的基础培养基中培养。若菌体生长中没有Cr(VI),则处理废水前在培养基中加入Cr(VI)进行适当诱导能大大提高脱铬速度。脱铬红细菌CGMCC No.3512在pH 5.5-10.0均能良好地生长,生长温度15-45℃,耐碱。
本发明还提供了生物脱铬菌剂,其包含上述脱铬红细菌CGMCC No.3512。
本发明还提供了上述脱铬红细菌CGMCC No.3512在脱除含铬工业废水中Cr(VI)的应用,其中,菌株以碳氮源等有机物作为营养物及电子供体,氧化分解有机物的同时将电子专一性地转移给Cr(VI),将所述的Cr(VI)还原为Cr(III),同时生成了Cr(OH)3沉淀。
本发明的脱铬红细菌CGMCC No.3512的应用方法有:(1)用LB培养基迅速培养的菌体,直接用于废水中Cr(VI)的脱除;(2)用冷冻干燥的菌体细胞进行脱铬;(3)用该菌中提纯的生物活性成份进行脱铬。(4)该菌进行进一步的诱变处理后进行脱除Cr(VI)。
根据本发明的治理污水的方法包括向污水中投加上述脱铬红细菌CGMCC No.3512的步骤。
根据本发明的方法,其中,菌体活化培养时采用的培养基成份为:去离子水1000ml,胰蛋白胨10g/L,酵母提取物5g/L,氯化钠10g/L;培养条件为:pH 7.0-7.5,温度37℃;生长菌体或静止菌体脱铬时的培养条件:温度37℃,pH 8.0-10.0,其中静止菌体脱铬时需要加入电子供体,采用的电子供体为醋酸钠、乳酸钠、丙酮酸钠或葡萄糖。
本发明提供的脱铬红细菌CGMCC No.3512是从自然界筛选分离得到的,该菌无论是生长状态、还是静止细胞均能表现出专一、快速、有效地将废水中Cr(VI)还原为Cr(III),同时生成Cr(OH)3沉淀,从而降低了废水中的总铬浓度,避免了对环境的污染。本发明的新菌株脱铬红细菌CGMCC No.3512能够在碱性环境下生长并处理含Cr(VI)废水,并且还原速率快,具有普通细菌还原法无可比拟的优势。同时推动了生物法治理碱性Cr(VI)废水技术的发展,有助于解决困扰我国铬盐、电镀等化工行业的含铬废水污染问题。因此,本发明的新菌株LSSE-09具有广阔的工业应用前景和理论研究价值。
附图说明
图1为本发明的脱铬红细菌CGMCC No.3512的扫描电镜照片,其中图:a为5000×,b为50000×;
图2为本发明的脱铬红细菌CGMCC No.3512的鞭毛负染色透射电镜照片;
图3为本发明的脱铬红细菌CGMCC No.3512菌株还原Cr(VI)后的电子顺磁共振(EPR)谱图。
根据本发明的脱铬红细菌,Pannonibacter phragmitetus LSSE-09,其保藏编号为CGMCC No.3512(于2009年12月16日保藏于“中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心”,地址:北京市朝阳区北辰西路1号院3号,中国科学院微生物研究所,100101)。
具体实施方式
实施例1、脱铬红细菌CGMCC No.3512(Pannonibacter phragmitetus LSSE-09)菌株的筛选
从铬盐堆旁被铬Cr(VI)污染的土壤中采集土样。取5g土壤样品悬浮于25ml的生理盐水中,置摇床中混合30-60min后,静置,吸以上清液,于100ml的选择性培养基中(水样可以直接取上清液加于选择性培养基中)培养。选择性培养基的组成为:去离子水1000ml,胰蛋白胨10g/L,酵母提取物5g/L,氯化钠10g/L,其中加入K2Cr2O7(Cr(VI)浓度为300mg/l)作为铬源,调整pH 8.0-10.0,置摇床以150rpm,37℃培养三天后,稀释菌悬液,涂布于选择性固体培养基平板中。分离得到的单菌落分别接种于Cr(VI)浓度为300mg/l的选择性培养基中,置摇床以150rpm,37℃培养一到三天。培养过程中间隔一定时间检测Cr(VI)浓度,直至检测Cr(VI)浓度为零。选取反应速率最快的菌株即为本发明的保藏菌株脱铬红细菌CGMCC No. 3512(Pannonibacter phragmitetus LSSE-09)。
Cr(VI)浓度检测方法:
取培养液1ml,10000g/min离心5min,取0.1ml上清液加入50ml比色管中,用去离子水稀释至标线,加入0.5ml(1+1)H2SO4,0.5ml(1+1)H3PO4,再加入二苯碳酰二肼显色液2ml,混匀后静置10min,以水作为参比,在540nm波长处检测吸光度并作空白校正,从标准曲线上查得Cr(VI)含量。
二苯碳酰二肼显色液的配制:
称取0.2g二苯碳酰二肼,加入50ml丙酮,再加水稀释至100ml,置于棕色瓶冰箱中保存,颜色变深后不能使用。
标准曲线的绘制:
向一系列50ml标准比色管中分别加入0,0.20,0.50,1.0,2.00,4.00,6.00,8.00和10.00ml铬标准溶液(预先配制1mg/l),用水稀释至标线,加入0.5ml(1+1)H2SO4,0.5ml(1+1)H3PO4,再加入二苯碳酰二肼显色液2ml,混匀后静置10min,以去离子水作为参比,在540nm波长处检测吸光度并作空白校正,绘制标准曲线。
实施例2、脱铬红细菌CGMCC No.3512(Pannonibacter phragmitetus LSSE-09)静止菌体的获得
挑取营养斜面培养的脱铬红细菌CGMCC No.3512(Pannonibacter phragmitetusLSSE-09),加入40ml的基础培养基中。培养基的成份:去离子水1000ml,胰蛋白胨10g/L,酵母提取物5g/L,氯化钠10g/L。调整pH 7.0,温度37℃,150rpm摇床活化培养12h后,再按1%接种量将其加入500ml的基础培养基中。12h后,离心得到菌体后再用0.9%的生理盐水洗涤,往复三遍获得菌体。
实施例3、脱铬红细菌CGMCC No.3512(Pannonibacter phragmitetus LSSE-09)活性干菌体的获得
挑取营养斜面培养的脱铬红细菌CGMCC No.3512(Pannonibacter phragmitetusLSSE-09),加入40ml的基础培养基中。培养基的成份:去离子水1000ml,胰蛋白胨10g/L,酵母提取物5g/L,氯化钠10g/L。调整pH 7.0,温度37℃,150rpm摇床活化培养12h后,再按1%接种量将其加入500ml的基础培养基中。12h后,离心得到菌体后再用0.9%的生理盐水洗涤,往复三遍获得菌体。冷冻真空干燥获得具有活性的干细胞。
实施例4、生长菌体CGMCC No.3512(Pannonibacter phragmitetus LSSE-09)脱除模拟废水中的Cr(VI)
挑取营养斜面培养的脱铬红细菌CGMCC No.3512(Pannonibacter phragmitetusLSSE-09)菌株,加入40ml的基础培养基中。培养基的成份:去离子水1000ml,胰蛋白胨10g/L,酵母提取物5g/L,氯化钠10g/L。调整pH 7.0,温度37℃,150rpm摇床活化培养12h后,再按1%接种量将其加入三份平行的40ml的基础培养基中。分别加入K2Cr2O7浓溶液使Cr(VI)浓度为300mg/l左右,调整pH 9.0,摇床培养12h后Cr(VI)按实例1所述的方法检测为零,表明Cr(VI)被全部脱除,电子顺磁共振(EPR)结果显示其产物为Cr(III)(如图3所示),并形成Cr(OH)3沉淀。若相同条件下改变Cr(VI)浓度为500mg/l,则生长16h即可将Cr(VI)全部脱除。
实施例5、静止菌体脱铬红细菌CGMCC No.3512(Pannonibacter phragmitetusLSSE-09)脱除模拟废水中的Cr(VI)
挑取营养斜面培养的脱铬红细菌CGMCC No.3512(Pannonibacter phragmitetusLSSE-09)菌株,加入40ml的基础培养基中。培养基的成份:去离子水1000ml,胰蛋白胨10g/L,酵母提取物5g/L,氯化钠10g/L。调整pH 7.0,温度37℃,150rpm摇床活化培养12h后,再按1%接种量将其加入500ml的基础培养基中。12h后,离心得到菌体后再用0.9%的生理盐水洗涤,往复三遍获得菌体。将一定质量的菌体加入0.05M Tris-Hcl缓冲体系,加入K2Cr2O7浓溶液使Cr(VI)浓度为300mg/l左右,再加入3.0g/l的醋酸钠或乳酸钠作为营养物及电子供体,并调整pH 9.0,温度37℃,150rpm摇床培养45min后Cr(VI)按实例1所述的方法检测为零,表明Cr(VI)被全部脱除,电子顺磁共振(EPR)结果显示其产物为Cr(III)。
以丙酮酸钠或葡萄糖作为电子供体时,相同条件下反应速率各不相同,但当电子供体浓度为3.0g/l时,都在120min内全部将Cr(VI)还原为Cr(III)。
序列表
<110>中国科学院过程工程研究所
<120>一种脱铬红细菌及其应用
<160>1
<210>1
<211>1370
<212>RNA
<213>红细菌(Pannonibacter phragmitetus)
<400>1
aggcctttaa cacatgcaag tcgaacgcat cgcaagatga gtggcagacg ggtgagtaac 60
acgtgggaac ataccctttg gtgcggaaca acagctggaa acggctgcta ataccgcatg 120
cgccctacgg gggaaagatt tatcgccgaa ggattggccc gcgtctgatt agctagttgg 180
tgaggtaatg gctcaccaag gcgacgatca gtagctggtc tgagaggatg atcagccaca 240
ctgggactga gacacggccc agactcctac gggaggcagc agtggggaat attggacaat 300
gggcgcaagc ctgatccagc catgccgcgt gagtgatgaa ggccctaggg ttgtaaagct 360
ctttcagcga ggaggataat gacgttactc gcagaagaag ccccggctaa cttcgtgcca 420
gcagccgcgg taatacgaag ggggctagcg ttgttcggaa tcactgggcg taaagcgcac 480
gtaggcggac ttttaagtca ggggtgaaat cccggggctc aacctcggaa ctgcctttga 540
tactggaagt ctggagtccg agagaggtga gtggaactcc gagtgtagag gtgaaattcg 600
tagatattcg gaagaacacc agtggcgaag gcggctcact ggctcggtac tgacgctgag 660
gtgcgaaagc gtggggagca aacaggatta gataccctgg tagtccacgc cgtaaacgat 720
ggaagctagc cgtcagggtg catgcatctt ggtggcgcag ttaacgcatt aagcttcccg 780
cctggggagt acggtcgcaa gattaaaact caaaggaatt gacgggggcc cgcacaagcg 840
gtggagcatg tggtttaatt cgaagcaacg cgcagaacct taccagctct tgacatttgg 900
tgctaccacg ggagaccgtg ggttcccttc ggggacgcca ggacaggtgc tgcatggctg 960
tcgtcagctc gtgtcgtgag atgttgggtt aagtcccgca acgagcgcaa ccctcgccct 1020
tagttgccag cattgagttg ggcactctag ggggactgcc ggtgataagc cgagaggaag 1080
gtggggatga cgtcaagtcc tcatggccct tacgggctgg gctacacacg tgctacaatg 1140
gcggtgacag tgggcagcga aggggtgacc cggagctaat ctccaaaagc cgtctcagtt 1200
cggattgttc tctgcaactc gagagcatga agttggaatc gctagtaatc gcgtaacagc 1260
atgacgcggt gaatacgttc ccgggccttg tacacaccgc ccgtcacacc atgggagttg 1320
ggtttacccg aaggtggtgc gctaaccgca aggaggcagc caaccaacgg 1370
Claims (9)
1.一种脱铬红细菌,Pannonibacter phragmitetus LSSE-09,其特征在于,其保藏编号为CGMCC No.3512。
2.根据权利要求1所述的脱铬红细菌,其特征在于,所述菌的16SrRNA序列如SEQ ID No.1所示。
3.一种生物脱铬菌剂,其特征在于,包含权利要求1所述的脱铬红细菌CGMCCNo.3512。
4.权利要求1所述的脱铬红细菌在治理污水中的应用。
5.一种治理污水的方法,其特征在于,所述方法包括向污水中投加权利要求1所述脱铬红细菌CGMCC No.3512的步骤。
6.根据权利要求5所述的方法,其特征在于,投加的脱铬红细菌CGMCC No.3512为生长菌体或静止菌体。
7.根据权利要求6所述的方法,其特征在于,菌体活化培养时采用的培养基成份为:去离子水1000ml,胰蛋白胨10g/L,酵母提取物5g/L,氯化钠10g/L;培养条件为:pH 7.0-7.5,温度37℃;生长菌体或静止菌体脱铬时的培养条件:温度37℃,pH 8.0-10.0,其中静止菌体脱铬时需要加入电子供体。
8.根据权利要求7所述的方法,其特征在于,采用的电子供体为醋酸钠、乳酸钠、丙酮酸钠或葡萄糖。
9.根据权利要求5所述的方法,其特征在于,所述方法包括:
(1)培养所述脱铬红细菌菌体,直接投入含铬废水中进行脱铬的步骤;或
(2)用冷冻干燥的所述脱铬红细菌菌体细胞进行脱铬的步骤;或
(3)用所述脱铬红细菌中提纯的生物活性成份进行脱铬的步骤;或
(4)所述脱铬红细菌被诱变处理后进行脱铬的步骤。
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CN200910243481A CN102108334B (zh) | 2009-12-25 | 2009-12-25 | 一种脱铬红细菌及其应用 |
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CN106497570A (zh) * | 2016-08-19 | 2017-03-15 | 常州大学 | 一种用于固化土壤中重金属复合污染的固化剂及其使用方法 |
CN110144308A (zh) * | 2019-05-14 | 2019-08-20 | 大江环境股份有限公司 | 一种耐受高盐、高效降解硝酸盐的反硝化菌及其制备与用途 |
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CN106497570A (zh) * | 2016-08-19 | 2017-03-15 | 常州大学 | 一种用于固化土壤中重金属复合污染的固化剂及其使用方法 |
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