CN102038722B - 含银杏提取物的防新流感a(h1n1)病毒感染组合物、含其的空气过滤器和含其的空气净化装置 - Google Patents

含银杏提取物的防新流感a(h1n1)病毒感染组合物、含其的空气过滤器和含其的空气净化装置 Download PDF

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Abstract

本发明公开了包含银杏提取物的预防新流感A(H1N1)病毒感染的组合物、涂覆有该组合物的空气过滤器以及包含该空气过滤器的空气净化器。由于对新流感A(H1N1)病毒具有高抑制活性，所以包含银杏提取物的组合物可以应用于预防新流感A(H1N1)病毒感染。还有，涂覆有所述组合物的过滤器可以从空气中除去新流感A(H1N1)病毒，因此其可以用在空气净化器中，用于预防新流感A(H1N1)病毒感染。

Description

含银杏提取物的防新流感A(H1N1)病毒感染组合物、含其的空气过滤器和含其的空气净化装置
技术领域
本发明涉及包含银杏提取物的预防新流感A(H1N1)病毒感染的组合物、包含该组合物的空气过滤器和包含该空气过滤器的空气净化器。 
背景技术
开始于2009年3月的2009流感大流行代表了H1N1流感病毒新毒株的全球爆发。其通常被称为“猪流感”。然而，由于流感A病毒(甲型流感病毒)H1N1亚型不能通过食用猪肉或猪肉产品而扩散，所以其在韩国被重新命名为新流感或新流感A(H1N1)。世界卫生组织(WHO)2009年6月11日宣布该爆发为大流行病。 
根据政府统计数据，到2009年9月16日为止，出现了1万多例新流感，其中8个严重病例住院治疗以及14名患者因慢性或急性并发症而死亡。 
在目前可用于治疗流感的抗病毒药物中有奥塞米韦(商品名：达菲(Tamiflu))、扎那米韦(商品名：瑞乐砂(Relenza))、帕拉米韦和金刚胺，达菲主要用于治疗流感A病毒H1N1亚型。达菲，一种具有世界范围垄断的药物，被开发来治疗禽流感(AI)。通过阻滞病毒神经氨酸酶的活性，奥塞米韦阻止感染的细胞释放新病毒颗粒。当在症状发作48小时内服用奥塞米韦时，可以获得有效的功效。已知达菲的主要功效在于缓解症状，避免继发性并发症如支气管炎或肺炎和减少潜伏期。自1999年以来，达菲已经被用来治疗和预防数千万人的流感病毒A和流感病毒B感染。以商品名瑞乐砂销售的扎那米韦是用于治疗和预防流感病毒A和流感病毒B的神经氨酸酶抑制剂。 
与奥塞米韦治疗相关的副作用包括恶心和呕吐。扎那米韦显示高的抗病毒效果，但生物利用度差，并且从肾脏释放快。 
迄今开发的大部分抗流感药剂都具有副作用。因此，对有效治疗和预防流感病毒感染的抗流感组合物的开发存在需求。 
通常，流感经空气传播途径扩散，即当某人吸入了感染的人咳嗽、打喷嚏或吐痰所产生的浮质时。流感也可以通过直接传播例如通过感染的人的排泄物、唾液、鼻涕和血液而播散。然而，流感的播散最常见的是由飞沫感染如浮质吸入而引起。流感病毒可以通过阳光、消毒剂、表面活性剂，例如肥皂而灭活，然而它们并不能有效地除去空气传播的病毒。 
空气传播病毒的捕获和灭活可以导致流感感染的有效预防。 
空气过滤器为空气可透过的元件，其可以从空气中除去固体颗粒物。空气过滤器被用于空气质量重要的应用中，如空气净化器、空气调节器、真空净化器、增湿器、减湿器等，特别是用于建筑物通风系统和发动机中。 
被设计用来从空气中除去污染物的空气净化器包含多个过滤器，所述过滤器通常的组成为：预处理过滤器，其用于除去大尺寸颗粒；除臭过滤器，其用于除去臭味、挥发性有机化学品、甲醛等；HEPA过滤器，其用于除去微小尺寸直径的空气传播颗粒；以及中间过滤器，其被安排在HEPA过滤器之前，用于保护HEPA过滤器。 
较多过滤器可以导致较高的空气纯化性能，但增加对整个空气循环的阻力。因此，在空气净化器中通常采用3至5个过滤器。 
最近，研究已经聚焦于功能过滤器，该过滤器可以以复杂的方式选择性除去有害物质或将有害物质替换为有益物质。例如，已经开发了这样的过滤器，其用于高效地除去微颗粒或纯化引起病屋综合症的空气传播颗粒物。 
银杏是银杏目中仅存的种。 
银杏树是非常大的树，正常达到30多米的高度和2.5m的直径。该树具有锥形的轮廓并且很少有分枝。寿命长的银杏树的树皮颜色为灰色并且裂纹很深，以及具有像软木一样的质地。木材颜色灰暗并且经济上几乎没有价值，是因为其轻且不耐用。叶子通常为8cm长， 宽为长的两倍。叶子呈扇形，并且叶脉在叶片中向外辐射，有时从中央的V形裂缝分叉。两条叶脉在底部和分叉处反复地进入叶片，将其分成两半。叶子在夏天是浅灰色的或黄绿色的，在秋天变为金黄色，在晚秋掉落。在中药(草药)中，已知干的裸种子清肺和清胃并且可用于治疗咳嗽和痰。在银杏叶中发现的银杏黄酮糖苷被用于改善体内血液循环。 
现在看本发明，本发明人对抗新流感A H1N1的组合物进行了仔细和深入的研究，结果发现银杏提取物对新流感A(H1N1)具有抑制活性并且包含银杏提取物作为活性成分的组合物在预防流感A(H1N1)病毒感染中是有用的以及涂覆有该提取物的过滤器可以有效地除去空气传播的流感A(H1N1)病毒。 
发明内容
因此，本发明的一个目的是提供预防新流感A(H1N1)病毒感染的组合物，该组合物包含银杏提取物。 
本发明的另一个目的是提供包含所述组合物的空气过滤器。 
本发明进一步的目的是提供包含所述过滤器的空气净化器。 
根据其一个方面，本发明提供预防新流感A(H1N1)病毒感染的组合物，该组合物包含银杏提取物作为活性成分。 
在优选的实施方式中，该组合物可以用于准药物(quasi-drugs)。 
根据其另一个方面，本发明提供包含该组合物的空气过滤器。 
根据其进一步的方面，本发明提供包含该空气过滤器的空气净化器。 
具体实施方式
本发明提供预防新流感A(H1N1)病毒感染的组合物，该组合物包含银杏提取物作为活性成分。 
如本文所用，术语“预防(prevention)”或“预防(prophylaxis)”意图包括阻抑新流感A(H1N1)病毒感染或阻止流感爆发的所有作用。 
流感A(H1N1)病毒是流感A病毒的亚型并且是人流感(flu)最普遍的原因。H1N1的一些毒株是人特有的并且引起所有流感样疾病的一 小部分。H1N1的其它毒株是猪特有的(猪流感)和鸟类特有的(禽流感)。流感A的实例包括A/PR/8(H1N1)、A/WSN/33(H1N1)、A/Bervig-Mission/1/18(rvH1N1)和A/新加坡(Singapore)/6/86(H1N1)。 
在引起2009流感大流行的新流感A(H1N1)病毒中有A/加利福尼亚(California)/04/09和A/加利福尼亚(California)/7/2009。 
当感染新流感A(H1N1)病毒时，患者出现发烧、咳嗽、咽痛、支气管炎、肺炎等。 
提取物可以从可商业购得的银杏(Ginkgo biloba)材料获得、从自然界得到或人工培养。 
用于本发明的银杏材料的实例包括但不限于叶子、种子、树皮和根，优选叶子。 
只要其用于从银杏材料提取，任何方法，例如从简单提取方法到提取脂溶性成分的方法，均可以用在本发明中。为了提取方便，可以首先将材料粉碎，接着用溶剂提取、过滤和浓缩。 
用于本发明的提取溶剂的实例包括水、乙醇、甲醇、丁醇、正己烷、正庚烷、DMSO及其组合，但不限于这些。本领域的技术人员可以根据各种因素选择适合的提取方法，所述各种因素包括材料的量、提取方式、时间、温度、效率、溶剂等。优选提取时间为10min至1hr以及提取温度为40至100℃。 
另外，由此获得的提取物可以应用周知的方法如真空过滤进行过滤，然后通过蒸发进行浓缩。这一系列的提取、过滤和浓缩在本领域中是周知的。本领域的技术人员可以选择合适的处理技术，以提供银杏提取物。 
根据本发明的另一个实施方式，预防新流感A(H1N1)病毒感染的组合物可以应用于准药物。 
为了预防新流感A(H1N1)病毒的感染的目的，本发明的组合物可以作为添加剂用于准药物。就此而言，该组合物可以单独或联合另一种准药物或成分以典型的方式使用。准药物中组合物的量可以根据其目的而确定。 
可以应用本发明组合物的准药物的实例包括过滤涂层剂(fltercoating)、洗手液、漱口液、消毒剂、沐浴泡沫、水组织(water tissues)、 洗涤剂肥皂、增湿器填料、面罩(mask)和芳香剂。 
根据其进一步的实施方式，本发明提供空气过滤器，其包含预防新流感A(H1N1)病毒感染的组合物。 
如本文所用，术语“空气过滤器”指这样的过滤器：其起除去空气传播的微生物和灰尘的作用并且其防止过滤器引起的二次污染。本发明的空气过滤器因而可以用于汽车驾驶室(automobile cabins)、家用电器、空气调节系统、防毒面罩、空气净化器和净化室，优选空气净化器。 
进一步，本发明提供制造空气过滤器的方法，该空气过滤器包含预防新流感A(H1N1)病毒感染的组合物。所述方法在下面进行描述。 
制造包含预防新流感A(H1N1)病毒感染的组合物的空气过滤器的方法包括： 
(a)制备预防新流感A(H1N1)病毒感染的组合物； 
(b)用预防新流感A(H1N1)病毒感染的组合物涂覆空气过滤器；以及 
(c)干燥涂覆的过滤器。 
步骤(b)可以通过如下过程进行：将滚子(roller)浸在预防新流感A(H1N1)病毒感染的组合物中并且将所述滚子施用到过滤基底(filterbase)的过程，将结合滚子的过滤基底浸在预防新流感A(H1N1)病毒感染的组合物中的过程，和/或用预防新流感A(H1N1)病毒感染的组合物对过滤基底进行喷雾的过程。 
作为过滤基底，可以使用金属、塑料、非织造织物或薄膜。高度多孔的非织造织物优选用在空气净化器的空气过滤器中。 
塑料的实例包括但不限于聚丙烯、聚乙烯、聚氨酯、丙烯酸树脂(acryl)、PVC和聚苯乙烯，优选聚丙烯。 
非织造织物是由长纤维制成的片状材料，通过化学、机械、热或溶剂处理而结合在一起。根据基础材料，其可以分为纸基和纤维基的非织造织物。用于本发明的非织造织物材料的实例包括人造丝(rayon)、莱赛尔纤维(lyocell)和聚丙烯，但不限于这些。只要其在本领域中是周知的，可以使用任意非织造织物材料。优选的是聚丙烯。 
当用作过滤基底时，塑料树脂可以被熔化和纺线，以产生长丝 (filaments)，所述长丝然后被编织成布料或被形成织网，接着将它们结合在一起形成非织造织物。进一步，起泡剂可以用来形成多孔过滤器。 
最重要的是，首先制备预防新流感A(H1N1)病毒感染的组合物。制备后，可以将预防新流感A(H1N1)病毒感染的组合物溶解或稀释在某种溶剂中，以便其可以用于制造空气过滤器。所述溶剂可以选自水、乙醇、甲醇、丁醇、正己烷、正庚烷、DMSO和其组合。 
将预防新流感A(H1N1)病毒感染的组合物施用于过滤基底。为此，可以将安装有吸收元件如海绵的滚子浸在组合物中并且沿着过滤基底滚动，接着干燥过滤基底。可选地，可以直接将过滤基底浸在组合物中并且干燥。另一可选地，可以用所述组合物对过滤基底进行喷雾并且干燥。 
涂覆过程可以在纤维被编织成过滤基底之前和之后进行。在前者的情况下，可以通过浸渍或喷雾用所述组合物涂覆纤维，其后，可以将它们编织成过滤基底。 
在通过浸渍或喷雾用组合物涂覆后，可以在室温下或用热风干燥过滤器。只要其在本领域中是周知的，可以采用任意干燥方法而没有限制。因为干燥使组合物充分吸收于其中，所以过滤器可以长时间具有抑制流感A(H1N1)病毒的活性。 
除本发明的组合物之外，根据本发明的过滤器可以包含常规的抗菌剂、除臭剂(例如，类黄酮、植物杀菌素、焦油下水、植物提取物、环糊精、金属离子或二氧化钛)、集尘剂(dust collecting agent)等。这些试剂可以单独或联合应用，以及涂覆的顺序没有具体的限制。 
根据其进一步的实施方式，本发明提供装有所述空气过滤器的空气净化器。 
如上所述，空气净化器包含多个过滤器。包含预防新流感A(H1N1)病毒感染的组合物的空气过滤器可以在空气净化器中用作功能过滤器。 
对应用本发明空气过滤器的空气净化器种类没有限制。其可以用于家用、办公室和汽车驾驶室的空气净化器。当然，空气净化器可以包含已知的典型构成要素。优选本发明的空气净化器包含放置在空气 进气和空气排气之间的空气过滤器。 
根据其又一实施方式，本发明提供应用空气净化器纯化空气的方法。 
通过下列实施例可以获得对本发明更好的理解，所述实施例被阐述以说明本发明，而不被解释为是限制本发明。 
制备实施例1：银杏提取物的制备 
为了提取效率，将取自银杏树的叶子干燥并且粉碎成粉末。向1kg粉末中添加5升水，接着在水浴中加热12小时。将如此得到的提取物通过滤纸过滤并且浓缩。 
制备实施例2：涂覆有银杏提取物的空气过滤器的制造 
将制备实施例1中制备的银杏提取物稀释在水中并且喷在聚丙烯过滤基底上，然后将该过滤基底在140℃下干燥4min。 
实验实施例1：银杏提取物对流感A(H1N1)病毒的抑制活性的测定 
如下测定在制备实施例1中获得的银杏提取物对流感病毒的抑制活性。 
将流感A亚型H1N1病毒A/PR/8(H1N1)和A/WSN(H1N1)以及WHO标准株流感A(H1N1)(A/加利福尼亚/04/09)——其引起2009大流行病的爆发——用作待测试的流感病毒株。将在制备实施例1中获得的银杏提取物用作样品。 
将MDCK(马-达二氏犬肾)细胞系以1.5×106细胞/mL的密度接种在6孔板中，然后将所述6孔板在5％CO2气氛中37℃温育24小时。分别将银杏提取物在注射溶液中稀释至100mg/ml(1×)。使该稀释液进行连续10-倍稀释。将所得的试样以每孔90μL的量添加至96孔板。向每个孔添加10μL流感病毒样品，温育10min以及用PBS进行10-倍稀释。已经在板上生长至汇合的MDCK细胞系用1mL稀释液感染并且温育1小时。对于“感染+非施药”对照，MDCK细胞系感染了流感病毒，其没有用银杏提取物处理。 
其后，除去培养基，并且以每孔2mL的量添加含有10μg/ml胰蛋白酶的2×琼脂糖∶2×MEM的1∶1混合物。将MDCK细胞37℃温 育2天，用1mL 4％多聚甲醛固定，并且用水洗涤以除去琼脂糖。第二天，用龙胆紫将细胞染色，以对噬斑计数并且以空斑形成单位(pfu)/mL来表示滴度(效价)。结果总结在下表1至3中。 
[等式1] 
抑制活性(％)＝(1-银杏提取物处理组/对照)×100 
表1 
用样品处理后新流感A(H1N1)(A/加利福尼亚/04/09)的滴度 
  样品   病毒滴度(pfu/ml)   抑制活性(％)
  对照   1.9×106   -
  银杏提取物   1.0×102   99.99
表2 
用样品处理后流感A/WSN/33(H1N1)的滴度 
  样品   病毒滴度(pfu/ml)   抑制活性(％)
  对照   3.4×108   -
  银杏提取物   7.0×103   99.99
表3 
用样品处理后流感A/PR/8(H1N1)的滴度 
  样品   病毒滴度(pfu/ml)   抑制活性(％)
  对照   3.9×109   -
  银杏提取物   6.0×102   99.99
从表1至3的数据中显而易见的是，用银杏提取物处理的组与对照相比病毒计数明显降低，这表明本发明的银杏提取物对流感病毒具有优异的抑制活性。 
实验实施例2：空气过滤器对流感病毒的抑制活性的测试 
如下测试制备实施例2中获得的涂覆有银杏提取物的空气过滤器对流感A(H1N1)病毒的抑制活性。 
作为待测试的流感病毒毒株，使用流感A亚型H1N1病毒A/PR/8(H1N1)和A/WSN(H1N1)以及WHO标准株流感A(H1N1)(A/加利福尼亚/04/09)——其引起2009大流行病的爆发。将在制备实施例2中制造的空气过滤器用作样品。对于对照，使用没有用提取物处理的空气过滤器。 
在切成2×2cm大小后，用预先确定量的病毒溶液涂覆过滤器并且温育10min，以便将病毒吸收在其中。将培养基(1mL)加样在过滤器上，然后将该过滤器振荡10min，以洗涤掉病毒。稀释滤液以制备试样。向96孔板的每个孔中添加90μL每种试样以及10μL流感病毒，接着温育10min以及用PBS进行10-倍稀释。将在板上生长至汇合的MDCK细胞系用1mL稀释液进行感染并且温育1hr。对于“感染+非施药”对照，MDCK细胞系感染了流感病毒，其没有用银杏提取物处理。 
其后，除去培养基，并且以每孔2mL的量添加含有10μg/ml胰蛋白酶的2×琼脂糖∶2×MEM的1∶1混合物。将MDCK细胞37℃温育2天，用1mL 4％多聚甲醛固定，并且用水洗涤以除去琼脂糖。第二天，用龙胆紫将细胞染色，以对噬斑计数并且以空斑形成单位(pfu)/mL来表示滴度。 
结果总结在下表4至6中。 
表4 
用样品处理后新流感A(H1N1)(A/加利福尼亚/04/09)的滴度 
  样品   病毒滴度(pfu/ml)   抑制活性(％)
  对照   1.9×106   -
  银杏提取物处理的空气过滤器   未检测到   99.99
表5 
用样品处理后流感A/WSN/33(H1N1)的滴度 
  样品   病毒滴度(pfu/ml)   抑制活性(％)
  对照   3.4×108   -
  银杏提取物处理的空气过滤器   未检测到   99.99
[0091] 表6 
用样品处理后流感A/PR/8(H1N1)的滴度 
  样品   病毒滴度(pfu/ml)   抑制活性(％)
  对照   3.9×109   -
  银杏提取物处理的空气过滤器   未检测到   99.99
表4至6的数据表明，用本发明银杏提取物处理的空气过滤器对流感病毒具有优异的抑制活性。 
由于对新流感A(H1N1)病毒具有迄今所述的高抑制活性，包含本发明所述银杏提取物的组合物可以用于预防新流感A(H1N1)病毒感染。因此，涂覆有该组合物的过滤器可以从空气中除去流感A(H1N1)病毒，因此其可以用在空气净化器中，用于预防新流感A(H1N1)病毒感染。 
尽管为了说明性目的已经公开了本发明的优选实施方式，但是本领域的技术人员将意识到，各种修改、添加和替换是可能的，而不背离所附权利要求书中公开的本发明的范围和精神。 

Claims (12)

1.包含银杏提取物作为活性成分的组合物在制备用于预防新流感A(H1N1)病毒感染的药物中的应用。
2.权利要求1所述的应用，其中所述银杏提取物通过应用溶剂而得到，所述溶剂选自水、乙醇、甲醇、丁醇、正己烷、正庚烷、DMSO和其组合。
3.权利要求1所述的应用，其中所述银杏提取物获得自银杏的叶子、种子、树皮或根。
4.权利要求1所述的应用，其中所述新流感A(H1N1)是A/加利福尼亚/04/09或A/加利福尼亚/7/2009。
5.权利要求1所述的应用，其中所述新流感A(H1N1)病毒引起发烧、咳嗽、咽痛、支气管炎或肺炎。
6.权利要求1所述的应用，其中所述组合物用于制备准药物。
7.权利要求6所述的应用，其中所述准药物选自过滤涂层剂、洗手液、漱口液、消毒剂、沐浴泡沫、水组织、洗涤剂肥皂、增湿器填料、面罩和芳香剂。
8.用于预防新流感A(H1N1)病毒感染的空气过滤器，其中所述空气过滤器包括包含银杏提取物作为活性成分的组合物。
9.制造用于预防新流感A(H1N1)病毒感染的空气过滤器的方法，包括：
制备包含银杏提取物作为活性成分的组合物；
用所述组合物涂覆过滤基底；以及
干燥所述涂覆组合物的过滤基底，
其中，所述涂覆通过如下过程进行：
将滚子浸在用于预防新流感A(H1N1)病毒感染的所述组合物中并且将所述滚子施用到过滤基底的过程；
将结合滚子的过滤基底浸在用于预防新流感A(H1N1)病毒感染的所述组合物中的过程；和/或
用预防新流感A(H1N1)病毒感染的所述组合物对过滤基底进行喷雾的过程。
10.权利要求9所述的方法，其中所述过滤基底是塑料或非织造织物。
11.权利要求10所述的方法，其中所述非织造织物是纸基非织造织物或纤维基非织造织物。
12.用于预防新流感A(H1N1)病毒感染的空气净化器，其包含权利要求8所述的空气过滤器。
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