CN101949850A - 一种用拉曼光谱法检测多糖类物质分子量和结构的方法 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及一种用拉曼光谱法检测多糖类物质分子量和结构的方法，属于多糖类化合物检测领域。其方法步骤如下：(1)、取20mg多糖样品于无色玻璃器皿中，固定于玻璃器皿上，用保护罩覆盖避光后备用；(2)、设置仪器参数，采用拉曼光谱进行测试，得到多糖样品的拉曼光谱谱图；(3)、将步骤(2)中所得到的拉曼光谱谱图进行数据处理，得到处理后的多糖样品的拉曼光谱指纹谱图；(4)、将步骤(3)中所得到的多糖样品的拉曼光谱指纹谱图与同系列多糖的拉曼光谱指纹谱图进行比对，然后得出该多糖样品中的物质分子量和结构。本发明需要测量和分析的时间短，快速、简便，需要样品量极少，检测成本低。
Description
技术领域：
本发明涉及一种用拉曼光谱法检测多糖类物质分子量和结构的方法，属于多糖类化合物检测领域，具体涉及采用拉曼光谱技术对多糖的固体粉末进行测试分析，发现多糖分子量和基本结构的拉曼光谱特征。
背景技术：
多糖是由多个单糖分子缩合、失水而成，是一类分子机构复杂且庞大的糖类物质。凡符合高分子化合物概念的碳水化合物及其衍生物均称为多糖。多糖存在于植物和动物之中，在高等植物和藻类中，它们是细胞壁或细胞内部的组分；在细菌和真菌中，它们可能既是细胞组分，又是新陈代谢的产物。多糖分子量很大，其性质也大大不同于单糖和低聚糖。研究发现茯苓、黄芪、猪苓、枸杞、柴胡、人参、香菇、云芝、银耳、灵芝、冬虫夏草等中药其生物活性成分之一是多糖，具有免疫调节、抗辐射、抗凝血、降血糖、降血脂等功效，而它们的生理活性与多糖分子量和分子量分布及化学结构有密切关系。多糖的分子量检测通常用凝胶渗透色谱法(GPC)；红外光谱法(IR)和紫外光谱法(UV)；核磁共振光谱法(NMR)；质谱和气-质联；多糖的结构分析中常应用x射线衍射法(XRD)、毛细管电泳法(CE)、核磁共振法(NMR)，旋光度(ORD)和圆二色谱(CD)、快原子轰击质谱(FAD-MS)、气质联用(GC-MS)、原子力显微镜(AFM)等检测手段，其中旋光度(ORD)是最通用的仪器，但只能做做最简单的分析。示差折光也是类似的常用仪器。而使用其他的方法检测成本高、时间长。
发明内容：
本发明的目的是：利用拉曼光谱技术，对多糖类物质进行测试分析，发现多糖分子量结构特征和基本结构的拉曼光谱特征，以此作为多糖类化合物的检测标准，同时对生产、临床中的多糖类物质进行质量控制。
本发明解决其技术问题所采用的技术方案是：一种用拉曼光谱法检测多糖类物质分子量和结构的方法，其方法步骤如下：
(1)、取20mg多糖样品于无色玻璃器皿中，固定于玻璃器皿上，用保护罩覆盖避光后备用；
(2)、设置仪器参数，采用拉曼光谱进行测试，得到多糖样品的拉曼光谱谱图；
(3)、将步骤(2)中所得到的拉曼光谱谱图进行数据处理，得到处理后的多糖样品的拉曼光谱指纹谱图；
(4)、将步骤(3)中所得到的多糖样品的拉曼光谱指纹谱图与同系列多糖的拉曼光谱指纹谱图进行比对，然后得出该多糖样品中的物质分子量和结构。
进一步的：
所述多糖的基本结构为：
在所述步骤(2)中设置仪器参数如下：(1)扫描参数：10×2×1(积分时间×扫描次数×平滑系数)；(2)激光功率：200mW；(3)激发波长：785nm。
在所述步骤(3)中所采用的数据处理的方式为：采用多波长线性回归方法处理。
在所述步骤(4)中所使用的比对的方法如下：通过判断不同种类多糖的荧光特征进行检测确定。
拉曼光谱能够提供快速、简单、可重复、且更重要的是无损伤的定性定量分析，它无需样品准备，样品可直接通过光纤探头或者通过玻璃、石英、和光纤测量。因此本发明所述的方法，可以从谱线相对强度和位移的变化，不同种类多糖分子量不同所呈现出来的荧光的不同，来区分鉴定不同种类的多糖物质，以此对多糖类物质进行质量控制。本发明需要测量和分析的时间短，快速、简便，需要样品量极少，检测成本低。
具体实施方式：
多糖的基本结构为：
下面通过具体实施例对本发明进行进一步的说明。
实施例1
1、取20mg多糖BT-01于无色玻璃器皿中，固定玻璃器皿，用保护罩覆盖避光后备用；
2、设置仪器参数，采用拉曼光谱进行测试，得到BT-01的拉曼光谱谱图；
3、将BT-01的拉曼光谱谱图进行数据处理，得到处理后BT-01的拉曼光谱指纹谱图；
4、将BT-01和其它同系列多糖的拉曼光谱指纹谱图进行比对，得出BT-01区分其它类多糖的物质分子量和结构。
实施例2
1、取20mg多糖BT-02于无色玻璃器皿中，固定玻璃器皿，用保护罩覆盖避光后备用；
2、设置仪器参数，采用拉曼光谱进行测试，得到BT-02的拉曼光谱谱图；
3、将BT-02的拉曼光谱谱图进行数据处理，得到处理后BT-02的拉曼光谱指纹谱图；
4、将BT-02和其它同系列多糖的拉曼光谱指纹谱图进行比对，得出BT-02区分其它类多糖的物质分子量和结构。
在此需要说明的是：
在上述两个实施例中，步骤2的仪器参数如下：(1)扫描参数：10×2×1(积分时间×扫描次数×平滑系数)；(2)激光功率：200mW；(3)激发波长：785nm；步骤3的数据处理的方式为：采用多波长线性回归方法处理；步骤4的比对的方法为：通过判断不同种类多糖的荧光特征进行检测确定。
Claims (5)
1.一种用拉曼光谱法检测多糖类物质分子量和结构的方法，其特征是：所述方法步骤如下：
(1)、取20mg多糖样品于无色玻璃器皿中，固定于玻璃器皿上，用保护罩覆盖避光后备用；
(2)、设置仪器参数，采用拉曼光谱进行测试，得到多糖样品的拉曼光谱谱图；
(3)、将步骤(2)中所得到的拉曼光谱谱图进行数据处理，得到处理后的多糖样品的拉曼光谱指纹谱图；
(4)、将步骤(3)中所得到的多糖样品的拉曼光谱指纹谱图与同系列多糖的拉曼光谱指纹谱图进行比对，然后得出该多糖样品中的物质分子量和结构。
2.根据权利要求1所述的用拉曼光谱法检测多糖类物质分子量和结构的方法，其特征在于：所述多糖的基本结构为：
3.根据权利要求1所述的用拉曼光谱法检测多糖类物质分子量和结构的方法，其特征在于：在所述步骤(2)中设置的仪器参数如下：(1)扫描参数：10×2×1；(2)激光功率：200mW；(3)激发波长：785nm。
4.根据权利要求1所述的用拉曼光谱法检测多糖类物质分子量和结构的方法，其特征在于：在所述步骤(3)中所采用的数据处理的方式为：采用多波长线性回归方法处理。
5.根据权利要求1所述的用拉曼光谱法检测多糖类物质分子量和结构的方法，其特征在于：在所述步骤(4)中所使用的比对的方法如下：通过判断不同种类多糖的荧光特征进行检测确定。
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|---|---|---|---|---|
| CN112730376A (zh) * | 2020-12-17 | 2021-04-30 | 山东省科学院生物研究所 | 一种基于拉曼光谱检测发酵液中多糖的装置及其方法和应用 |
| CN112730382A (zh) * | 2021-01-20 | 2021-04-30 | 河南恒都生物科技开发有限公司 | 一种牛骨胶原蛋白多肽的快速鉴定方法 |
| CN113533298A (zh) * | 2021-07-14 | 2021-10-22 | 成都特普生物科技股份有限公司 | 石斛质量、多糖检测和定位物质在细胞具体位置的方法 |
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2010
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