CN101851606B - 卵丘-卵母细胞复合体刀切过滤法 - Google Patents

卵丘-卵母细胞复合体刀切过滤法 Download PDF

Info

Publication number
CN101851606B
CN101851606B CN2010101408325A CN201010140832A CN101851606B CN 101851606 B CN101851606 B CN 101851606B CN 2010101408325 A CN2010101408325 A CN 2010101408325A CN 201010140832 A CN201010140832 A CN 201010140832A CN 101851606 B CN101851606 B CN 101851606B
Authority
CN
China
Prior art keywords
ovocyte
oocyte
cumulus
separation sieve
nutrient solution
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Active
Application number
CN2010101408325A
Other languages
English (en)
Other versions
CN101851606A (zh
Inventor
魏红江
姜河海
卿玉波
潘伟荣
陈关雄
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Individual
Original Assignee
Individual
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Individual filed Critical Individual
Priority to CN2010101408325A priority Critical patent/CN101851606B/zh
Publication of CN101851606A publication Critical patent/CN101851606A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN101851606B publication Critical patent/CN101851606B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Images

Landscapes

  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)

Abstract

本发明公开了一种卵丘-卵母细胞复合体刀切过滤法，属于卵丘-卵母细胞复合体采集方法。用手术刀划破卵巢上的卵泡后用TALP培养液漂洗出卵丘-卵母细胞复合体和卵泡液；用支架(1)固定五个不同孔径的卵丘-卵母细胞分离筛(2)，向孔径最大的分离筛中轻轻倒入含有卵丘-卵母细胞复合体、卵泡液和TALP培养液的混合液，摇动支架使卵母细胞分离筛上的卵丘-卵母细胞复合体能充分滤过比自身孔径大的筛网，在显微镜下挑取出卵丘-卵母细胞复合体后用卵母细胞培养液清洗两次后再放入浸有石蜡油覆盖的卵母细胞培养液液滴中培养。

Description

卵丘-卵母细胞复合体刀切过滤法
技术领域
本发明涉及一种卵丘-卵母细胞复合体刀切过滤法，属于卵丘-卵母细胞复合体采集方法。
背景技术
卵母细胞在体外受精、细胞核移植等方面具有非常重要的作用，而卵母细胞采集的最好途径就是直接从屠宰场收集卵巢，再从卵巢上获得卵母细胞。从卵巢上获得卵母细胞有解剖法、抽吸法、刀切法等方法。解剖法在采集效率、挑选效率及每个卵巢上获得卵丘-卵母细胞的个数不及刀切法，抽吸法在每个卵巢上获得卵丘-卵母细胞数和卵细胞体外成熟率也不及刀切法。
发明内容
本发明的目的是针对上述几种方法的不足，提供一种既能提高采集效率、挑选效率、卵细胞体外成熟率又能增加每个卵巢获得卵母细胞个数的方法。提供一种采集卵丘-卵母细胞复合体的刀切过滤法。
本发明提供的卵丘-卵母细胞复合体刀切过滤法，是用手术刀划破卵巢上的卵泡后在用TALP培养液漂洗出卵丘-卵母细胞复合体和卵泡液。为达到充分过滤的目的，操作时用支架固定五个不同孔径的卵丘-卵母细胞分离筛，五个不同大小孔径的卵丘-卵母细胞分离筛从下到上依次排列，孔径大小从上到下由疏到密，放置于一个空的容器中。向分离筛中轻轻倒入含有卵丘-卵母细胞复合体、卵泡液和TALP培养液的混合液，并不断地摇动支架，使卵母细胞分离筛上的卵丘-卵母细胞复合体能充分滤过比自身孔径大的筛网，卵丘-卵母细胞复合体就留在了一定孔径大小的分离筛上，组织碎片则根据不同大小而留在了不同孔径大小的卵母细胞分离筛上或通过所有的分离筛。然后再将留有卵丘-卵母细胞复合体的分离筛放到含有TALP培养液的培养皿中，在显微镜下挑取出卵丘-卵母细胞复合体后用卵母细胞培养液清洗两次后再放入浸有石蜡油覆盖的卵母细胞培养液液滴中培养。
由于此方法在采集卵丘-卵母细胞复合体过程中并没有损害卵丘细胞，再之又通过卵母细胞筛过滤了很多杂质和裸露的卵母细胞(无卵丘细胞附着)，所以在采集效率、挑选效率及每个卵巢获得卵丘-卵母细胞的个数和卵母细胞体外成熟率都明显高于其它方法。
附图说明
图1是本发明的一种实施例五个卵母细胞分离筛结构示意图
图2是本发明的卵母细胞分离筛平面图
具体实施方式
下面结合附图对末发明的一个实施作进一步详述
卵丘-卵母细胞复合体刀切过滤法，是用手术刀划破卵巢上的卵泡后在用TALP培养液漂洗出卵丘-卵母细胞复合体和卵泡液。为达到充分过滤的目的，操作时用支架1固定五个不同孔径的卵丘-卵母细胞分离筛2，五个不同大小孔径的卵丘-卵母细胞分离筛2从下到上依次排列，孔径大小从上到下由疏到密，放置于一个空的容器中。向分离筛2中轻轻倒入含有卵丘-卵母细胞复合体、卵泡液和TALP培养液的混合液，并不断地摇动支架，使卵母细胞分离筛上的卵丘-卵母细胞复合体能充分滤过比自身孔径大的筛网，卵丘-卵母细胞复合体就留在了一定孔径大小的分离筛2上，组织碎片则根据不同大小而留在了不同孔径大小的卵母细胞分离筛上或通过所有的分离筛2。然后再将留有卵丘-卵母细胞复合体的分离筛放到含有TALP培养液的培养皿中，在显微镜下挑取出卵丘-卵母细胞复合体后用卵母细胞培养液清洗两次后再放入浸有石蜡油覆盖的卵母细胞培养液液滴中培养。
在使用时，将卵巢浸在盛有TALP培养液的容器中，左手拿摄子夹住卵巢，右手拿手术刀随机划破2-6mm的卵泡，使卵泡中的卵丘-卵母细胞复合体和卵泡液流出。将卵丘-卵母细胞分离筛2由40目、60目、80目、100目和120目的顺序从上到下孔径依次变小的顺序重叠固定在支架1中，再置于一个空的容器中。向40目的卵母细胞筛中轻轻倒入含有卵丘-卵母细胞复合体、卵泡液和TALP培养液的混合液，然后再用TALP培养液清洗容器两次，清洗液再倒入卵母细胞分离筛2过滤，在此期间要不断的摇动支架使卵母细胞分离筛上的卵丘-卵母细胞复合体能充分滤过比自身孔径大的筛网，卵丘-卵母细胞复合体就留在了一定孔径大小的卵母细胞分离筛2上，组织碎片则根据不同大小而留在了不同孔径大小的卵母细胞分离筛上或通过所有的卵母细胞分离筛2。将含有卵丘-卵母细胞复合体的分离筛2放入盛有TALP培养液的培养皿中，TALP培养液的量是以卵母细胞分离筛2的筛网浸入了TALP培养液中为宜。在显微镜下用毛细吸管挑出卵丘-卵母细胞复合体后用卵母细胞培养液清洗两次后再放入浸有石蜡油覆盖的卵母细胞培养液液滴中培养。

Claims (1)

1.一种卵丘-卵母细胞复合体刀切过滤法，其特征在于：
a、用手术刀划破卵巢上的卵泡后用TALP培养液漂洗出卵丘-卵母细胞复合体和卵泡液；
b、用支架(1)固定五个不同孔径的卵丘-卵母细胞分离筛(2)，五个不同大小孔径的卵丘-卵母细胞分离筛(2)从下到上依次排列，孔径大小从上到下由疏到密，将放好分离筛(2)的支架(1)放置于一个空的容器中；
c、向孔径最大的分离筛中轻轻倒入含有卵丘-卵母细胞复合体、卵泡液和TALP培养液的混合液，再用TALP培养液清洗容器两次，清洗液再倒入卵母细胞分离筛过滤，在此期间要不断的摇动支架使卵母细胞分离筛上的卵丘-卵母细胞复合体能充分滤过比自身孔径大的筛网，卵丘-卵母细胞复合体就留在了一定孔径大小的分离筛上，组织碎片则根据不同大小而留在了不同孔径大小的卵母细胞分离筛上或通过所有的分离筛(2)；
d、再将留有卵丘-卵母细胞复合体的分离筛放到含有TALP培养液的培养皿中，在显微镜下挑取出卵丘-卵母细胞复合体后用卵母细胞培养液清洗两次后再放入浸有石蜡油覆盖的卵母细胞培养液液滴中培养。
CN2010101408325A 2010-04-07 2010-04-07 卵丘-卵母细胞复合体刀切过滤法 Active CN101851606B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN2010101408325A CN101851606B (zh) 2010-04-07 2010-04-07 卵丘-卵母细胞复合体刀切过滤法

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN2010101408325A CN101851606B (zh) 2010-04-07 2010-04-07 卵丘-卵母细胞复合体刀切过滤法

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN101851606A CN101851606A (zh) 2010-10-06
CN101851606B true CN101851606B (zh) 2012-05-30

Family

ID=42803286

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN2010101408325A Active CN101851606B (zh) 2010-04-07 2010-04-07 卵丘-卵母细胞复合体刀切过滤法

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN101851606B (zh)

Families Citing this family (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN102283718A (zh) * 2011-07-12 2011-12-21 中国农业大学 一种分离腔前卵泡的方法及其专用刀
GB201309766D0 (en) * 2013-05-31 2013-07-17 Labman Automation Ltd IVF egg collection chamber and system
CN104450496B (zh) * 2014-12-02 2016-08-24 张丽红 体外受精培养筛及体外受精方法
CN104531612A (zh) * 2015-01-14 2015-04-22 付蕾 卵母细胞培养液及其培养方法
CN106226133B (zh) * 2016-07-01 2019-05-10 内蒙古农业大学 包含多个复合体的新型COCs复合结构组织的制备方法
CN106982763B (zh) * 2017-03-30 2020-09-01 中国水产科学研究院黑龙江水产研究所 一种野生鱼卵分离装置及其使用方法

Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101469321A (zh) * 2007-12-29 2009-07-01 上海交通大学医学院附属第九人民医院 一种快速过滤筛选骨髓基质干细胞方法

Family Cites Families (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US7790039B2 (en) * 2003-11-24 2010-09-07 Northwest Biotherapeutics, Inc. Tangential flow filtration devices and methods for stem cell enrichment

Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101469321A (zh) * 2007-12-29 2009-07-01 上海交通大学医学院附属第九人民医院 一种快速过滤筛选骨髓基质干细胞方法

Non-Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
WANI N A, ET AL.EFFECT OF DIFFERENT FACTORS ON THE RECOVERY RATE OF OOCYTES FOR INVITRO MATURATION AND IN VITRO FERTILIZATION PEOCEDURES IN SHEEP.《SMALL RUMIN RES》.1999,第34卷(第1期),71-76. *
叶 荣,等.牛卵母细胞的采集方法和卵巢贮存条件对其体外成熟的影响.《苏 州 大 学 学 报(自然科学版)》.2004,第20卷(第3期), *

Also Published As

Publication number Publication date
CN101851606A (zh) 2010-10-06

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN101851606B (zh) 卵丘-卵母细胞复合体刀切过滤法
CN101243776A (zh) 一种甘蓝型油菜游离小孢子植株的培育方法
CN102884998A (zh) 一种自动收集鱼卵的装置及方法
CN103289891B (zh) 牛卵母细胞快速采集器
CN102257951A (zh) 马尾藻科海藻受精卵高效采集装置及采集方法
CN108318316A (zh) 一种改良式底栖动物过滤网
CN101372375B (zh) 废水处理方法和废水处理装置
CN102313660A (zh) 一种造礁石珊瑚卵母细胞石蜡切片的制作方法
CN116286594A (zh) 一种用于单细胞核测序的棉花根部单细胞核悬液制备的方法
CN201374955Y (zh) 一种针对虾类、鱼类或蟹类幼体的孵化装置
WO2013138899A1 (en) Euglena biofilter
CN108824341B (zh) 一种浒苔清理铲斗及使用该铲斗的浒苔清理机
CN210386112U (zh) 鱼类粪便破碎颗粒尺寸分布规律的实验装置
CN209475693U (zh) 一种湿地沉积物中微塑料浮选分级分离装置
CN113736667A (zh) 一种长柄类大型真菌的超大原生质体及其制备方法
CN205374318U (zh) 一种浮游动物浓缩计数装置
CN111518864B (zh) 一种快速统计植物花粉-胚珠比的方法
CN213967122U (zh) 一种用于金刚石矿的重矿物分离装置
CN210893875U (zh) 一种简易土壤线虫分离器
CN206488967U (zh) 一种收集蠕虫虫卵的夹层杯
CN201553641U (zh) 富营养化水体中藻类物质磁捕移出装置
CN220422825U (zh) 水生态底泥采样工具
CN202519247U (zh) 体外受精培养皿
CN219043146U (zh) 一种针对植物样品的细胞溶液过滤器
CN218046716U (zh) 一种沼液资源化分离装置

Legal Events

Date Code Title Description
C06 Publication
PB01 Publication
C10 Entry into substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
C14 Grant of patent or utility model
GR01 Patent grant