CN101724687A - 一种儿童智商基因检测评估试剂盒 - Google Patents

一种儿童智商基因检测评估试剂盒 Download PDF

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CN101724687A
CN101724687A CN200810201220A CN200810201220A CN101724687A CN 101724687 A CN101724687 A CN 101724687A CN 200810201220 A CN200810201220 A CN 200810201220A CN 200810201220 A CN200810201220 A CN 200810201220A CN 101724687 A CN101724687 A CN 101724687A
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CN
China
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gene
child
kit
primer
detecting
Prior art date
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CN200810201220A
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English (en)
Inventor
穆海东
汪宁梅
穆宇豪
黎飒
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Shanghai Yulong Biological Science and Technology Co Ltd
Original Assignee
Shanghai Yulong Biological Science and Technology Co Ltd
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Abstract

一种用于儿童智商基因检测评估试剂盒,可以克服传统儿童智商检测方法在原理和操作上的局限性。本试剂盒由DNA抽提试剂,预混PCR反应液,标准阳性对照品,标准阴性对照品组成。使用时以被测儿童的DNA样本为检测对象,经过样本DNA抽提后,使用试剂盒在荧光定量PCR仪上进行反应,结合反应结果进行诊断。本发明提供的儿童智商测试方法简便而客观,并且免受外界因素的影响;有助于及早诊断儿童智商遗传学特性,提供给父母养育孩子时重要的参考信息,对下一代的培养有非常积极的意义。

Description

一种儿童智商基因检测评估试剂盒
技术领域
本发明涉及一种易感基因检测产品,具体的说,涉及一种有关儿童智商基因检测评估的试剂盒。
背景技术
智力,也叫智能或者智慧,是认识客观事物并运用知识的、技能去解决实际问题的一种能力。它是人所有能力的基础,是保证各种活动正常进行的关键。智力高的人,思维敏捷,学习能力强,分析问题深刻,容易在某个专业领域做出杰出的成就,成为该领域的专家。
智商是以科学的方法来量化智力。智商集中表现在认识客观事物本质的深刻程度、全面程度和正确程度,还表现在应用知识技能解决问题的速度和质量上。一般来说,智商有两种:一种是比率智商,智力年龄÷实足年龄=智力商数。如果某人智龄与实龄相等,他的智商即为100,表示其智力中等;另一种是离差智商,把一个人的测验分数与同龄组正常人的智力平均数之比作为智商。现在大多数智力测验都采用离差智商。
智商是先天素质、教育的影响以及个人努力三方面因素相互作用的产物。人一出生智商急速直线增长,到了13-14岁的时候这种增长速度减缓,在26岁以后基本不变。科学家们对400多名儿童进行长期跟踪调查研究发现智商的遗传因素占到61%,而后天智力开发与环境因素占39%。
目前生物学界发现几个涉及智商形成的基因。其中重要的有COMT基因与MCPH1基因。COMT基因编码的蛋白COMT主要存在与脑中,它会干扰机体解决问题的中心--最前脑皮层的活动。COMT是降解儿茶酚胺的主要代谢酶,可以使体内儿茶酚失去生物活性或毒性。如果产生基因突变,则会降低思考弹性。而MCPH1基因编码的蛋白MCPH1在人类的进化中起了巨大的作用。它与DNA损伤反应有关,此基因的突变会影响机体智力甚至脑部疾病,其功能丧失可能促进癌症的发生。MCPH1与人脑的体积密切相关,决定智力水平。
这些基因的变化将严重影响到一个人的智商潜力。对一个儿童来说,如果家长因为不知道所存在的遗传缺陷,而没有特别注意孩子的智商培养,错过了最佳提高智商的时间,将会对孩子的终生造成不可弥补的损失。
目前智商测试一般采用心理学量表编制法问卷测试。该类智商测试易受情绪、身体好坏的影响,重复性低,可信度低。即测试的准确性受外界环境影响较大。由于对被测者配合程度的要求,一般都不适于对年幼儿童,尤其是5岁以前孩童做测试。但由于人在幼时智商的急剧增加,早教对个人的一生都至关重要。倘若一个人与智商相关的生物学遗传特性有缺陷,早期发现和及时采取措施更会起到重大作用。
提供一种简便而客观的方法进行儿童智商生物学遗传特性的测试,提供给父母养育孩子时重要的参考信息,对下一代的培养有非常积极的意义。
发明内容
为了可以简便而客观地对儿童智商进行测试,本发明提供一种儿童智商基因检测评估试剂盒,可以以儿童DNA样本为测试样本,对儿童智商的基因进行检测,从而简便快捷地测试其智商,而不需要经过繁锁的多方位测试,并且免受儿童临时身体状况的影响。
该试剂盒由DNA抽提试剂,预混PCR反应液,标准阳性对照品,标准阴性对照品组成。使用时以被测儿童的DNA样本为检测对象,经过样本DNA抽提后,使用试剂盒在荧光定量PCR仪上进行反应,结合反应结果进行诊断。
上述的预混PCR反应液含有SYBR green I,以及与儿童智商相关的COMT和MCPH1基因突变位点的扩增引物;扩增引物为包含突变位点的上游引物和下游引物,序列如下:
扩增COMT基因的引物:
上游引物F1A     5-GGATGGTGGATTTCGCTGTCA-3  21bp,
上游引物F1G     5-GATGGTGGATTTCGCTGTCG-3   20bp,
下游引物R1      5-CTGGTGGGGAGGACAAAGTG-3   20bp;
扩增MCPH1基因的引物:
上游引物F2T     5-TTGCCGACCAGCCCGT-3       16bp,
上游引物F2C     5-TGCCGACCAGCCCGC-3        15bp,
下游引物R2      5-CGGGGGACTTGGCTGAC-3      17bp。
上述的儿童智商基因检测评估试剂盒,所述的阳性对照品有4个,分别包含如下的序列:
SEQ1:
CTGTGCCGCC    ATCACCCAGC    GGATGGTGGA    TTTCGCTGGC    ATGAAGGACA
AGGTGTGCAT    GCCTGACCCG    TTGTCAGACC    TGGAAAAAGG    GCCGGCTGTG
GGCAGGGAGG    GCATGCGCAC    TTTGTCCTCC    CCACCAGGTG    TTCACACCAC
GTTCACTGAA    AACCCACTAT    CACCAGGCCC    CTCAGTGCTT    CC;
SEQ2:
CTGTGCCGCC    ATCACCCAAG    CGGATGGTGG    ATTTCGCTGG    CGTGAAGGAC
AAGGTGTGCA    TGCCTGACCC    GTTGTCAGAC    CTGGAAAAAG    GGCCGGCTGT
GGGCACGGAG    GGCATGCGCA    CTTTGTCCTC    CCCACCAGGT    GTTCACACCA
CGTTCACTGA    AAACCCACTA    TCACCAGGCC    CCTCAGTGCT    TCC;
SEQ3:
GTCTGCAGGG    CCGTACCGCG    GAAACCCTCT    TTGCCGACCA    GCCAGTGATG
TTTGTCTCGC    CTGCCAGCAG    CCCCCCAGTG    CCAAGCTCTG    TGAACTAGTC
CACCTGTGTG    GAGGCCGGGT    CAGCCAAGTC    CCCCGCCAGG    CCAGCATCGT
CATCGGGCCC    TACAGCGGAA    AGAAGAAAGC    CACAGTCAAG    TATCT;
SEQ4:
AGATACTTGA    CTGTGGCTTT    CTTCTTTCCG    CTGTAGGGCC    CGATGACGAT
GCTGGCCTGG    CGGGGGACTT    GGCTGACCCG    GCCTCCGCAC    AGGTGGACTA
GTTCACAGAG    CTTGGCCACT    GGGGGGCTGC    TGGCAGGCGA    GACAAACATC
GCTGGCTGGT    CGGCAAAGAG    GGTTCCGCGG    TACGGCCCTG    CAGAC。
上述的儿童智商基因检测评估试剂盒,所述的阴性对照品包含的序列为:
SEQ5:
TTCGTTATTG    AATCTTGTTT    TGGTTCTCTT    GTGTGGAATG    CATTGTTCTT
GCTTCTCTGG    AACTTGGGAT    ATGATGACAA    AAATACGATA    TCTCTAAGGC
TAATTGCTGT    GCGGATGAAA    TATATTTGCA    CGTCAGTCTG    ATCCCATTAT
GTATATAACA    TTAGGAGTTG    GTGCATGCTC。
本发明的使用不需要儿童本人到场,只需取其DNA样本,比如口腔样本,更有效保护对方隐私。不用问答形式,减轻人为因素对诊断结果的影响。可以对儿童智商的生物学遗传特性进行简便而客观地分析,便于推广应用,有助于及早诊断儿童智商遗传学特性。
附图说明
图1,图2,图3,图4,图5,图6为荧光定量PCR仪上的扩增曲线图。各图上方的DeltaRn vs Cycle,是指ΔRn随循环变化的对数扩增图谱;ΔRn(Delta Rn)是指在给定的一组PCR条件下所生成荧光信号的对数值。该图的横坐标表示循环数(Cycle Number),纵坐标表示荧光值(Delta Rn)。横线表示荧光域值,曲线与荧光域值线的交叉点所对应的循环数即为Ct值。
图1、图2、图3中横线3表示荧光域值;曲线1表示为扩增COMT基因的引物对F1A+R1,扩增样本所生成的扩增曲线;曲线2为扩增COMT基因的引物对F1G+R1,这对引物扩增样本所生成的扩增曲线。
图1表示COMT基因AA纯合型样本的产物扩增曲线图:曲线1与荧光域值线的交叉点表示达到域值的Ct循环数值为C1,曲线2与荧光域值线的交叉点表示达到域值的Ct循环数值为C2。
图2表示COMT基因GG纯合型样本的产物扩增曲线图:曲线1与荧光域值线的交叉点表示达到域值的Ct循环数值为C3,曲线2与荧光域值线的交叉点表示达到域值的Ct循环数值为C4。
图3表示COMT基因AG杂合型样本的产物扩增曲线图:曲线2与荧光域值线的交叉点表示达到域值的Ct循环数值为C5,曲线1与荧光域值线的交叉点表示达到域值的Ct循环数值为C6。
图4、图5、图6中横线4表示荧光域值;曲线5表示为扩增MCPH1基因的引物对F2T+R2,扩增样本所生成的扩增曲线;曲线6为扩增MCPH1基因的引物对F2C+R2,这对引物扩增样本所生成的扩增曲线。
图4表示MCPH1基因CC纯合型样本的产物扩增曲线图:曲线5与荧光域值线的交叉点表示达到域值的Ct循环数值为C7,曲线6与荧光域值线的交叉点表示达到域值的Ct循环数值为C8。
图5表示MCPH1基因CT杂合型样本的产物扩增曲线图:曲线5与荧光域值线的交叉点表示达到域值的Ct循环数值为C9,曲线6与荧光域值线的交叉点表示达到域值的Ct循环数值为C10。
图6表示MCPH1基因TT纯合型样本的产物扩增曲线图:曲线6与荧光域值线的交叉点表示达到域值的Ct循环数值为C11,曲线5与荧光域值线的交叉点表示达到域值的Ct循环数值为C12。
具体实施例:
下面结合具体实施例,进一步阐述本发明。
应当理解,下面实施例中未说明的常规条件和方法,通常按照所属领域实验人员常规采用方法:如萨姆布鲁克和拉塞尔主编的《分子克隆实验指南》第三版,或按照制造厂商所建议的步骤和条件。
实施例1:
试剂盒的制备。包括(1)探针的准备;(2)DNA抽提试剂;(3)预混反应液;(4)标准阳性对照;(5)标准阴性对照。
(1)探针的准备;
由通常的核苷酸引物合成仪合成。序列如下:
扩增COMT基因的引物:
上游引物F1A  5-GGATGGTGGATTTCGCTGTCA-3   21bp,
上游引物F1G  5-GATGGTGGATTTCGCTGTCG-3    20bp,
下游引物R1   5-CTGGTGGGGAGGACAAAGTG-3    20bp;
扩增MCPH1基因的引物:
上游引物F2T  5-TTGCCGACCAGCCCGT-3        16bp,
上游引物F2C  5-TGCCGACCAGCCCGC-3         15bp,
下游引物R2   5-CGGGGGACTTGGCTGAC-3       17bp。
使用前按每OD引物稀释为100μmol/L(即100pmol/μl)浓度的加水量,开启瓶盖溶解之前最好在3000-4000转/分钟的转速下离心1分钟,防止开盖时引物散失。使用前,将浓溶液稀释成工作液10pmol/ml后进行实验。
(2)DNA抽提试剂:
Figure G2008102012205D0000041
(3)预混PCR反应液
预混反应液包括4种,每种内含一对上下游扩增引物,各对应一个基因型。按1ml配比量计算,共同的成分配制为:100μM的dNTP,20μl;500U/μl Taq DNA Polymerase20μl;2×Quant One Step SYBR 1300μl;10μM的上游引物50μl;10μM的下游引物50μl;RNase-free ddH2O 860μl。
管1的1对引物为:
上游引物FA    5-GGATGGTGGATTTCGCTGTCA-3    21bp,
下游引物R     5-CTGGTGGGGAGGACAAAGTG-3     20bp;
管2的1对引物为:
上游引物FG    5-GATGGTGGATTTCGCTGTCG-3     20bp,
下游引物R     5-CTGGTGGGGAGGACAAAGTG-3     20bp;
管3的1对引物为:
上游引物FT    5-TTGCCGACCAGCCCGT-3         16bp,
下游引物R     5-CGGGGGACTTGGCTGAC-3        17bp;
管4的1对引物 为:
上游引物FC    5-TGCCGACCAGCCCGC-3          15bp,
下游引物R     5-CGGGGGACTTGGCTGAC-3        17bp。
(4)标准阳性对照:
标准阳性模板是含有COMT和MCPH1基因中含突变核苷酸片段构成的Puc18-T重组质粒,该重组质料转化大肠杆菌DH5α增殖后用碱裂解法提取,经DNA纯化试剂盒纯化,用分光光度计测A260定量并稀释到109Copy/μl,-20℃保存。贮存存为109Copy/μl,使用浓度为105Copy/μl。
标准阳性模板提供4种,每种浓度为105Copy/μl。序列如下:
SEQ1:
CTGTGCCGCC    ATCACCCAGC    GGATGGTGGA    TTTCGCTGGC    ATGAAGGACA
AGGTGTGCAT    GCCTGACCCG    TTGTCAGACC    TGGAAAAAGG    GCCGGCTGTG
GGCAGGGAGG    GCATGCGCAC    TTTGTCCTCC    CCACCAGGTG    TTCACACCAC
GTTCACTGAA    AACCCACTAT    CACCAGGCCC    CTCAGTGCTT    CC,
SEQ2:
CTGTGCCGCC    ATCACCCAAG    CGGATGGTGG    ATTTCGCTGG    CGTGAAGGAC
AAGGTGTGCA    TGCCTGACCC    GTTGTCAGAC    CTGGAAAAAG    GGCCGGCTGT
GGGCACGGAG    GGCATGCGCA    CTTTGTCCTC    CCCACCAGGT    GTTCACACCA
CGTTCACTGA    AAACCCACTA    TCACCAGGCC    CCTCAGTGCT    TCC,
SEQ3:
GTCTGCAGGG    CCGTACCGCG    GAAACCCTCT    TTGCCGACCA    GCCAGTGATG
TTTGTCTCGC    CTGCCAGCAG    CCCCCCAGTG    CCAAGCTCTG    TGAACTAGTC
CACCTGTGTG    GAGGCCGGGT    CAGCCAAGTC    CCCCGCCAGG    CCAGCATCGT
CATCGGGCCC    TACAGCGGAA    AGAAGAAAGC    CACAGTCAAG    TATCT,
SEQ4:
AGATACTTGA    CTGTGGCTTT    CTTCTTTCCG    CTGTAGGGCC    CGATGACGAT
GCTGGCCTGG    CGGGGGACTT    GGCTGACCCG    GCCTCCGCAC    AGGTGGACTA
GTTCACAGAG    CTTGGCCACT    GGGGGGCTGC    TGGCAGGCGA    GACAAACATC
GCTGGCTGGT    CGGCAAAGAG    GGTTCCGCGG    TACGGCCCTG    CAGAC。
(5)标准阴性对照:
标准阴性模板是含有拟南芥基因片断180个核苷酸构成的Puc18-T重组质粒。该重组质料转化大肠杆菌DH5α增殖后用碱裂解法提取,经DNA纯化试剂盒纯化,用分光光度计测A260定量并稀释到109Copy/μl,-20℃保存。贮存存为109Copy/μl,使用浓度为105Copy/μl。序列如下:
SEQ5:
TTCGTTATTG    AATCTTGTTT    TGGTTCTCTT    GTGTGGAATG    CATTGTTCTT
GCTTCTCTGG    AACTTGGGAT    ATGATGACAA    AAATACGATA    TCTCTAAGGC
TAATTGCTGT    GCGGATGAAA    TATATTTGCA    CGTCAGTCTG    ATCCCATTAT
GTATATAACA    TTAGGAGTTG    GTGCATGCTC。
实施例2:试剂盒的使用
(1)样本的制备
取样方式:使用棉签在面颊内擦拭10次。
注意:为了保证样本不被食物或者饮料污染,取样前30分钟内请勿进食和饮水。
a)处理材料:将在面颊内擦拭过的棉签转置于2ml离心管中,用剪刀将棉签部分从其杆上剪下,加入400μl缓冲液GA。
b)加入20μl蛋白酶K溶液,涡旋10秒混匀,56℃放置60分钟,其间每15分钟涡旋混匀数次。
c)加入400μl缓冲液GB,充分颠倒混匀,70℃放置10分钟,此时溶液应变清亮,简短离心以去除管盖内壁的液滴。
d)加200μl无水乙醇,充分颠倒混匀,简短离心以去除管盖内壁的液滴。
e)将上一步所得溶液和絮状沉淀都加入一个吸附柱CR中(吸附柱CR放入收集管中),12,000rpm(~13,400×g)离心30秒,倒掉收集管中的废液,将吸附柱CR放回收集管中。
f)向吸附柱CR中加入500μl缓冲液GD,12,000rpm(~13,400×g)离心30秒,倒掉收集管中的废液,将吸附柱CR放回收集管中。
g)向吸附柱CR中加入700μl漂洗液PW,12,000rpm(~13,400×g)离心30秒,倒掉收集管中的废液,将吸附柱CR放回收集管。
h)向吸附柱CR中加入500μl漂洗液PW,12,000rpm(~13,400×g)离心30秒,倒掉收集管中的废液。
i)将吸附柱CR放回收集管中,12,000rpm(~13,400×g)离心2分钟,倒掉废液。将吸附柱CR室温放置数分钟,以彻底晾干吸附材料中残余的漂洗。
j)将吸附柱CR转入一个干净的离心管中,向吸附膜中间位置悬空滴加20-50μl洗脱缓冲液TB,室温放置2-5分钟,12,000rpm(~13,400×g)离心2分钟。重复一次。
(2)实验过程
a)按样品数n(样品数=待测样本数+阴性对照1个+阳性对照1个)取预混PCR反应液每管23μl分装于反应管中。
b)将上述处理好的待测样本和阴性、阳性对照(务必振荡混匀数秒)各取2ul分别加入反应管中,混匀,低速离心数秒,立即进行PCR扩增反应。
c)PCR条件
95℃10sec
(95℃15sec,60℃60sec)×40个循环
(3)结果分析与判断:
a)定量检测SNP的判断标准:
两曲线的Ct值之差的绝对值记为|ΔCt|,当|ΔCt|≤1,判断为杂合型;当|ΔCt|≥5,判断为纯合型。
如图,图1中|ΔCt|≥5,表示该样本为COMT基因AA纯合型样本。图2中,|ΔCt|≥5,表示该样本为COMT基因GG纯合型样本。图3中,|ΔCt|≤1,表示该样本为COMT基因AG杂合型样本。图4中|ΔCt|≥5,表示该样本为MCPH1基因CC纯合型样本。图5中,|ΔCt|≤1,表示该样本为MCPH1基因CT杂合型样本。图6中,|ΔCt|≥5,表示该样本为MCPH1基因TT纯合型样本。
b)结果分析:
Figure G2008102012205D0000071
序列表
<110>上海裕隆生物科技有限公司
<120>一种儿童智商基因检测评估试剂盒
<160>11
<210>1
<211>21
<212>DNA
<213>人工序列
<220>
<223>根据核酸碱基配对原理和基因芯片杂交条件设计,以用作儿童智商基因检测评估试剂盒中检测COMT基因序列相关突变的DNA引物,命名为上游引物F1A。
<400>1
ggatggtgga tttcgctgtc a                                        21
<210>2
<211>20
<212>DNA
<213>人工序列
<220>
<223>根据核酸碱基配对原理和基因芯片杂交条件设计,以用作儿童智商基因检测评估试剂盒中检测COMT基因序列相关突变的DNA引物,命名为上游引物F1G。
<400>2
gatggtggat ttcgctgtcg                                          20
<210>3
<211>20
<212>DNA
<213>人工序列
<220>
<223>根据核酸碱基配对原理和基因芯片杂交条件设计,以用作儿童智商基因检测评估试剂盒中检测COMT基因序列相关突变的DNA引物,命名为下游引物R1。
<400>3
ctggtgggga ggacaaagtg                                          20
<210>4
<211>16
<212>DNA
<213>人工序列
<220>
<223>根据核酸碱基配对原理和基因芯片杂交条件设计,以用作儿童智商基因检测评估试剂盒中检测MCPH1基因序列相关突变的DNA引物,命名为上游引物F2T。
<400>4
ttgccgacca gcccgt                                              16
<210>5
<211>15
<212>DNA
<213>人工序列
<220>
<223>根据核酸碱基配对原理和基因芯片杂交条件设计,以用作儿童智商基因检测评估试剂盒中检测MCPH1基因序列相关突变的DNA引物,命名为上游引物F2C。
<400>5
tgccgaccag cccgc                                                     15
<210>6
<211>17
<212>DNA
<213>人工序列
<220>
<223>根据核酸碱基配对原理和基因芯片杂交条件设计,以用作儿童智商基因检测评估试剂盒中检测MCPH1基因序列相关突变的DNA引物,命名为下游引物R2。
<400>6
cgggggactt ggctgac                                                   17
<210>7
<211>192
<212>DNA
<213>人属(Homo)
<400>7
ctgtgccgcc atcacccagc ggatggtgga tttcgctggc atgaaggaca aggtgtgcat    60
gcctgacccg ttgtcagacc tggaaaaagg gccggctgtg ggcagggagg gcatgcgcac   120
tttgtcctcc ccaccaggtg ttcacaccac gttcactgaa aacccactat caccaggccc   180
ctcagtgctt cc                                                       192
<210>8
<211>193
<212>DNA
<213>人属(Homo)
<400>8
ctgtgccgcc atcacccaag cggatggtgg atttcgctgg cgtgaaggac aaggtgtgca    60
tgcctgaccc gttgtcagac ctggaaaaag ggccggctgt gggcacggag ggcatgcgca   120
ctttgtcctc cccaccaggt gttcacacca cgttcactga aaacccacta tcaccaggcc   180
cctcagtgct tcc                                                      193
<210>9
<211>195
<212>DNA
<213>人属(Homo)
<400>9
gtctgcaggg ccgtaccgcg gaaaccctct ttgccgacca gccagtgatg tttgtctcgc    60
ctgccagcag ccccccagtg ccaagctctg tgaactagtc cacctgtgtg gaggccgggt   120
cagccaagtc ccccgccagg ccagcatcgt catcgggccc tacagcggaa agaagaaagc    180
cacagtcaag tatct                                                     195
<210>10
<211>195
<212>DNA
<213>人属(Homo)
<400>10
agatacttga ctgtggcttt cttctttccg ctgtagggcc cgatgacgat gctggcctgg     60
cgggggactt ggctgacccg gcctccgcac aggtggacta gttcacagag cttggccact    120
ggggggctgc tggcaggcga gacaaacatc gctggctggt cggcaaagag ggttccgcgg    180
tacggccctg cagac                                                     195
<210>11
<211>180
<212>DNA
<213>拟南芥(Arabidopsis thaliana)
<400>11
ttcgttattg aatcttgttt tggttctctt gtgtggaatg cattgttctt gcttctctgg     60
aacttgggat atgatgacaa aaatacgata tctctaaggc taattgctgt gcggatgaaa    120
tatatttgca cgtcagtctg atcccattat gtatataaca ttaggagttg gtgcatgctc    180

Claims (3)

1.一种儿童智商基因检测评估试剂盒,其特征在于:由DNA抽提试剂,预混PCR反应液,标准阳性对照品,标准阴性对照品组成;所述的预混PCR反应液含有SYBR green I,以及扩增与儿童智商相关的COMT和MCPH1基因突变位点的扩增引物;扩增引物为包含突变位点的上游引物和正常型下游引物,序列如下:
扩增COMT基因的相关引物:
上游引物F1A  5-GGATGGTGGATTTCGCTGTCA-3    21bp,
上游引物F1G  5-GATGGTGGATTTCGCTGTCG-3     20bp,
下游引物R1   5-CTGGTGGGGAGGACAAAGTG-3     20bp;
扩增MCPH1基因的相关引物:
上游引物F2T    5-TTGCCGACCAGCCCGT-3      16bp,
上游引物F2C    5-TGCCGACCAGCCCGC-3       15bp,
下游引物R2     5-CGGGGGACTTGGCTGAC-3     17bp。
2.如权利要求1所述的儿童智商基因检测评估试剂盒,其特征在于:所述的阳性对照品有4个,分别包含如下的序列:
SEQ1:
CTGTGCCGCC ATCACCCAGC GGATGGTGGA TTTCGCTGGC ATGAAGGACA
AGGTGTGCAT GCCTGACCCG TTGTCAGACC TGGAAAAAGG GCCGGCTGTG
GGCAGGGAGG GCATGCGCAC TTTGTCCTCC CCACCAGGTG TTCACACCAC
GTTCACTGAA AACCCACTAT CACCAGGCCC CTCAGTGCTT CC;
SEQ2:
CTGTGCCGCC ATCACCCAAG CGGATGGTGG ATTTCGCTGG CGTGAAGGAC
AAGGTGTGCA TGCCTGACCC GTTGTCAGAC CTGGAAAAAG GGCCGGCTGT
GGGCACGGAG GGCATGCGCA CTTTGTCCTC CCCACCAGGT GTTCACACCA
CGTTCACTGA AAACCCACTA TCACCAGGCC CCTCAGTGCT TCC;
SEQ3:
GTCTGCAGGG CCGTACCGCG GAAACCCTCT TTGCCGACCA GCCAGTGATG
TTTGTCTCGC CTGCCAGCAG CCCCCCAGTG CCAAGCTCTG TGAACTAGTC
CACCTGTGTG GAGGCCGGGT CAGCCAAGTC CCCCGCCAGG CCAGCATCGT
CATCGGGCCC TACAGCGGAA AGAAGAAAGC CACAGTCAAG TATCT;
SEQ4:
AGATACTTGA CTGTGGCTTT CTTCTTTCCG CTGTAGGGCC CGATGACGAT
GCTGGCCTGG CGGGGGACTT GGCTGACCCG GCCTCCGCAC AGGTGGACTA
GTTCACAGAG CTTGGCCACT GGGGGGCTGC TGGCAGGCGA GACAAACATC
GCTGGCTGGT CGGCAAAGAG GGTTCCGCGG TACGGCCCTG CAGAC。
3.如权利要求1或2所述的儿童智商基因检测评估试剂盒,其特征在于:所述的阴性对照品包含的序列为:
SEQ5:
TTCGTTATTG AATCTTGTTT TGGTTCTCTT GTGTGGAATG CATTGTTCTT
GCTTCTCTGG AACTTGGGAT ATGATGACAA AAATACGATA TCTCTAAGGC
TAATTGCTGT GCGGATGAAA TATATTTGCA CGTCAGTCTG ATCCCATTAT
GTATATAACA TTAGGAGTTG GTGCATGCTC。
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* Cited by examiner, † Cited by third party
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CN110931082A (zh) * 2019-12-12 2020-03-27 爱尔生基因医学科技有限公司 一种用于基因检测评估的方法及系统

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