发明内容
本发明的目的在于克服上述不足之处,从而提供一种采取刀鲚灌江纳苗的池塘生态养殖培育成熟亲本的方法,结合刀鲚繁殖池塘生态学和组织细胞学等研究,在充分掌握刀鲚繁殖生态环境和性腺发育规律的基础上,根据鱼类繁殖中内在生理变化和外界环境协同作用的原理,提出了一种刀鲚的全人工繁殖方法;该方法通过加强亲鱼驯养与培育、模拟自然环境、营养及激素调控等手段,促进亲鱼性腺的发育成熟与排放,改进人工授精工艺,并加强孵化期的管理与生态调控,提高刀鲚人工繁殖的催产率、受精率和孵化率。
按照本发明提供的技术方案,本发明一种刀鲚的全人工繁殖方法,采用以下工艺步骤:
1、亲鱼来源
繁殖的亲鱼系江苏省江阴申港段灌江纳苗养殖的F2代刀鲚。
2、亲鱼选育
①前期静水培育。挑选体质健壮、活力好、鳍鳞完整,无伤无病的F2代后备亲鱼,放入面积在6亩以上的静水池塘中,放养密度为80-100尾/亩。后备亲鱼下塘后6天开始投喂青虾、“红虫”等生物活饵料,保持池中饵料生物重量与刀鲚的总重量比约为0.02∶1。日常要管理好池塘水质,及时更换新鲜水和开增氧机。
②后期流水强化培育。到了第2年冬季,将后备亲鱼从静水池按体重规格分池,转入6亩以上的流水池专池培育,放养密度为50-80尾/亩。翌年的2月份开始,流水池每星期冲水2次,每次5-6小时,自4月上旬开始,流水池始终处于流动状态,水流速保持在0.1-0.15m/s;饲料投喂则加重“红虫”的比例。经过半年的强化培育,3足龄雄、雌亲鱼体重分别可达80g和120g以上,性腺成熟。
3、人工催产、授精
①亲鱼选择。雄亲鱼选择体重80g以上,轻压后腹部有乳白色精液流出,遇水即散;雌亲鱼选择腹部膨大,有明显的卵巢轮廓,下腹部松软有弹性。
②采精、挖卵检查。用一次性吸管吸取少量精液激活后,在显微镜下观察精子活力情况,成熟的精子有30~50s的快速运动时间;用挖卵器从亲鱼泄殖孔内取出少许卵样,将卵样放人培养皿中,加入透明液(其配方比例按重量份数计:95%酒精90~95份;10%福尔马林:8~12份;冰乙酸:4~6份;三者按上述比例混合即成)浸没卵样,2~3min后观察卵的形态,成熟的卵粒大小整齐、饱满,全部或绝大多数卵核偏位。
③配组。用于繁殖的雌、雄亲鱼性比为1∶3-1∶3.5。
④催产水温。人工催产操作适宜水温在16~23℃。
⑤激素注射。采用促黄体素释放激素类似物(LRH-A2)和鱼类催产助剂(宁波市激素制品有限公司)配伍对亲鱼进行催产。雌刀鲚注射剂量为:80μg LRH-A2+17mg鱼类催产助剂/Kg,雄鱼为雌鱼的一半,背鳍基部一次注射。注射时,手握成外拳状而内空,使刀鲚头部朝里,随鱼动而带水背鳍基部注射,采用1ml规格一次性无菌注射器(常州悦康医疗器材有限公司生产)操作。
⑥人工授精。注射催产激素后亲鱼放入水深1.2m、面积为20m2的水泥池,冲水刺激,在水温16℃-22℃下,刀鲚产卵的效应时间为12h-16h。
4、孵化管理
孵化桶用塑料制成,孵化桶容水量500~700kg,放卵密度2×104粒/桶~4×104粒/桶;结构如图1所示。孵化期间确保水质清新,水流通畅,水流速控制在0.4m/s,及时清除卵膜;鱼苗出膜后要降低孵化桶中水流速,可控制为0.2m/s,以防止鱼苗体力过分消耗。鱼苗出膜6-8天左右,口器、肠管形成,应及时投喂投喂用150目筛绢过滤的单细胞绿藻、轮虫,单细胞绿藻、轮虫投喂后水体中密度为5-8个/ml或下塘进行夏花培育;
5、夏花及鱼种的培育
①培育池要求及水质控制。培育池3-5亩,水深1.5m左右,池底淤泥厚度小于10cm,进排水方便。鱼苗下塘前14~16天用120Kg/亩生石灰进行消毒,消毒后排尽水将池底晒干。鱼苗下塘前一周进水,进水采用清新无污染的长江水,并用100目的密网布过滤。鱼苗下塘时培育池水深控制在0.7~0.8m,以后根据水质情况和鱼苗的生长情况逐渐补充新鲜水,同时通过泼豆浆和加水来调节水的肥度,保持池中丰富的浮游生物。
②养殖密度为3-5万尾/亩。
③饵料及投喂方法。前期的饲料以豆浆调节水质为主,培养单细胞绿藻;当鱼苗长至15~20mm时,逐渐投喂轮虫,枝角类和桡足类的无节幼体;当鱼苗长至30mm以上时,除投喂“红虫”外适当加投抱卵青虾。
④起捕。幼鱼须拉网锻炼2~3次,到11月份,池中水温在10℃左右时鱼种个体体长为10-14cm,体重在6-10g之间,即可销售。
所述孵化桶由孵化桶体1、溢水管2、出水套管3、增氧管4、进水管5、微孔增氧管6、冲水口7及阀门控制出水管9等组成。在孵化桶体1内分别设置有溢水管2、增氧管4、进水管5;孵化桶体内壁上端设置有4个外接供水设备带阀门控制的冲水口,其中2个冲水口位置与出水套管相同高度8-1,2个冲水口位置与溢水管相同高度8-2。所述溢水管2内设置出水套管3,溢水管2未端穿过孵化桶体1桶底与阀门控制出水管9连接;所述溢水管2上设有小孔2-1,并外套筛绢2-2。所述进水管5一端外接供水设备,另一端为冲水口7;所述增氧管4一端外接增氧机,另一端接微孔增氧管6,并紧贴孵化桶体1桶底;
所述刀鲚鱼苗出膜6-8天,单细胞绿藻、轮虫投喂量为:5-8个/ml;
所述鱼苗长至15~20mm时,逐渐投喂轮虫,枝角类和桡足类的无节幼体量:3-4个/ml;
所述鱼苗长至30mm以上时,除投喂红虫量2-3个/ml外,加投抱卵青虾量:5-8Kg/亩。
本发明与已有技术相比具有以下优点:
1、采用仿生态的“静流水结合,活饵及激素投喂”的方法强化培育刀鲚亲本,使3足龄刀鲚性成熟率达80%以上;
2、采用筛选优质亲鱼,强化培育亲鱼,人工模拟生态环境条件和规范激素注射方法,结合刀鲚繁殖池塘生态学和组织细胞学等研究,使刀鲚性腺发育的内外条件协同作用,共同促进精卵的成熟与排放,提高精卵质量,从而提高亲鱼的催产率、受精率;
3、根据刀鲚受精卵的特性及仔稚幼的生活习性、食性、生长发育等生物学特性,合理营造生态平衡条件,加强生态管理,提高鱼种成活率;
4、本发明为刀鲚等洄游性鱼类的人工繁殖技术的解决提供了确实可行的方案思路,也为实现刀鲚的产业化养殖奠定了基础。
具体实施方式
下面本发明将结合附图中的实施例作进一步描述:
实施例1:本发明一种刀鲚的全人工繁殖方法,采用以下工艺步骤:
1、亲鱼来源
繁殖的亲鱼系江苏省江阴申港段灌江纳苗养殖的F2代刀鲚。
2、亲鱼选育
①前期静水培育。挑选体质健壮、活力好、鳍鳞完整,无伤无病的F2代后备亲鱼,放入面积在6亩以上的静水池塘中,放养密度为80尾/亩。后备亲鱼下塘后6天开始投喂青虾、“红虫”等活饵,保持池中饵料生物重量与刀鲚的总重量比为0.02∶1。日常要管理好池塘水质,及时更换新鲜水和开增氧机。
②后期流水强化培育。到了第2年冬季,将后备亲鱼从静水池按体重规格分池,转入6亩以上的流水池专池培育,放养密度为50尾/亩。翌年的2月份开始,流水池每星期冲水2次,每次5小时,自4月初开始,流水池始终处于流动状态,水流速保持在0.1m/s;饲料投喂则加重“红虫”的比例。经过半年的强化培育,3足龄雄、雌亲鱼体重分别可达80g和120g以上,性腺成熟。
3、人工催产、授精
①亲鱼选择。雄亲鱼选择体重80g以上,轻压后腹部有乳白色精液流出,遇水即散;雌亲鱼选择腹部膨大,有明显的卵巢轮廓,下腹部松软有弹性。
②采精、挖卵检查。用一次性吸管吸取少量精液激活后,在显微镜下观察精子活力情况,成熟的精子有30~50s的快速运动时间;用挖卵器从亲鱼泄殖孔内取出少许卵样,将卵样放人培养皿中,加入透明液(其配方比例按重量份数计:95%酒精:95份;10%福尔马林:10份;冰乙酸:5份;三者按上述比例混合即成)浸没卵样,2~3min后观察卵的形态,成熟的卵粒大小整齐、饱满,全部或绝大多数卵核偏位。
③配组用于繁殖的雌、雄亲鱼性比为1∶3。
④催产水温。人工催产操作适宜水温在16℃左右。
⑤激素注射。采用促黄体素释放激素类似物(LRH-A2)和鱼类催产助剂(宁波市激素制品有限公司)配伍对亲鱼进行催产。雌刀鲚注射剂量为:80μg LRH-A2+17mg鱼类催产助产剂/Kg,雄鱼为雌鱼的一半,背鳍基部一次注射。注射时,手握成外拳内空状,使刀鲚头部朝里,随鱼动而带水背鳍基部注射,采用1ml规格一次性无菌注射器(常州悦康医疗器材有限公司生产)。
⑥人工授精。注射催产激素后亲鱼放入面积为20m2的水泥池,冲水刺激,在水温16℃左右条件下,刀鲚产卵的效应时间为16h。
4、孵化管理
孵化桶用塑料制成,结构如图1所示,容水量500kg左右为宜,放卵密度2×104粒/桶。所述孵化桶由孵化桶体1、溢水管2、出水套管3、增氧管4、进水管5、微孔增氧管6、冲水口7及阀门控制出水口9等组成。在孵化桶体1内分别设置有溢水管2、增氧管4、进水管5;孵化桶体内壁上端设置有4个外接供水设备带阀门控制的冲水口,其中2个冲水口位置与出水套管相同高度8-1,2个冲水口位置与溢水管相同高度8-2。所述溢水管2内设置出水套管3,溢水管2未端穿过孵化桶体1桶底与阀门控制出水管9连接;所述溢水管2上设有小孔2-1,并外套筛绢2-2。所述进水管5一端外接供水设备,另一端为冲水口7;所述增氧管4一端外接增氧机,另一端接微孔增氧管6,并紧贴孵化桶体1桶底。孵化期间确保水质清新,水流通畅,水流速控制在0.4m/s,及时将卵膜清除;鱼苗出膜后要降低孵化桶中水流速,可控制为0.2m/s,以防止鱼苗体力过分消耗。鱼苗出膜8天左右,口器、肠管形成,应及时投喂用150目筛绢过滤的单细胞绿藻、轮虫(投喂后水体中密度为5个/ml)或下塘进行夏花培育。
5、夏花及鱼种的培育
①培育池要求及水质控制。培育池3亩,水深1.5m左右,池底淤泥厚度小于10cm,进排水方便。鱼苗下塘前16天用120Kg/亩生石灰进行消毒,消毒后排尽水将池底晒干。鱼苗下塘前一周进水,进水采用清新无污的长江水,并用100目的密网布过滤。鱼苗下塘时培育池水深控制在0.8m左右,以后根据水质情况和鱼苗的生长情况逐渐补充新鲜水,同时通过泼豆浆和加水来调节水的肥度,保持池中丰富的浮游生物。
②养殖密度为3万尾/亩。
③饵料及投喂方法。前期的饲料以豆浆调节水质为主,培养单细胞绿藻;当鱼苗长至15~20mm时,逐渐投喂轮虫,枝角类和桡足类的无节幼体(投喂后水体中密度为3个/ml);当鱼苗长至30mm以上时,除投喂“红虫”(投喂后水体中密度为2个/ml)外适当加投抱卵青虾(5Kg/亩)。
④起捕。幼鱼须拉网锻炼2~3次,到11月份,池中水温在10℃左右时鱼种个体体长为10-14cm,体重在6-10g之间,即可分池养殖或销售。
2008年4月1日-15日按上述实施步骤及要求催产3批,催产种鱼20组,平均催产率30%;获受精卵70000粒,平均受精率50%;共出水花鱼苗30000尾,平均孵化率43%;土池培育水花至夏花阶段,经测算成活率达40%;至11月上旬,苗种规格已达10-14cm,经多点测算成活率为51%,获鱼种6120尾。
实施例2:本发明一种刀鲚的全人工繁殖方法,采用以下工艺步骤:
地点:江阴市申港三鲜养殖有限公司
1、亲鱼来源
繁殖的亲鱼系江苏省江阴申港段灌江纳苗养殖的F2代刀鲚。
2、亲鱼选育
①前期静水培育。挑选体质健壮、活力好、鳍鳞完整,无伤无病的F2代后备亲鱼,放入面积在6亩以上的静水池塘中,放养密度为90尾/亩。后备亲鱼下塘后6天开始投喂青虾、“红虫”等活饵,保持池中饵料生物重量与刀鲚的总重量比为0.02∶1左右。日常要管理好池塘水质,及时更换新鲜水和开增氧机。
②后期流水强化培育。到了第2年冬季,将后备亲鱼从静水池按体重规格分池,转入6亩以上的流水池专池培育,放养密度为65尾/亩。翌年的2月份开始,流水池每星期冲水2次,每次6小时,自4月上旬开始,流水池始终处于流动状态,水流速保持在0.12m/s;饲料投喂则加重“红虫”的比例。经过半年的强化培育,3足龄雄、雌亲鱼体重分别可达80g和120g以上,性腺成熟。
3、人工催产、授精
①亲鱼选择。雄亲鱼选择体重80g以上,轻压后腹部有乳白色精液流出,遇水即散;雌亲鱼选择腹部膨大,有明显的卵巢轮廓,下腹部松软有弹性。
②采精、挖卵检查。用一次性吸管吸取少量精液激活后,在显微镜下观察精子活力情况,成熟的精子有30~50s的快速运动时间;用挖卵器从亲鱼泄殖孔内取出少许卵样,将卵样放人培养皿中,加入透明液(其配方比例按重量份数计:95%酒精90份;10%福尔马林:8份;冰乙酸:6份;三者按上述比例混合即成)浸没卵样,2~3min后观察卵的形态,成熟的卵粒大小整齐、饱满,全部或绝大多数卵核偏位。
③配组用于繁殖的雌、雄亲鱼性比为1∶3.2。
④催产水温。人工催产操作适宜水温在20℃。
⑤激素注射。采用促黄体素释放激素类似物(LRH-A2)和鱼类催产助剂(宁波市激素制品有限公司)配伍对亲鱼进行催产。雌刀鲚注射剂量为:80μg LRH-A2+17mg鱼类催产助产剂/公斤,雄鱼为雌鱼的一半,背鳍基部一次注射。注射时,手握成外拳内空状,使刀鲚头部朝里,随鱼动而带水背鳍基部注射,采用1ml规格一次性无菌注射器(常州悦康医疗器材有限公司生产)。
⑥人工授精。注射催产激素后亲鱼放入面积为20m2的水泥池,冲水刺激,在水温20℃下,刀鲚产卵的效应时间为14h。
4、孵化管理
孵化桶用塑料制成,结构如图1所示,容水量600kg左右为宜,放卵密度3×104粒/桶。孵化桶结构与实施例1相同。孵化期间确保水质清新,水流通畅,水流速控制在0.4m/s,及时将卵膜清除;鱼苗出膜后要降低孵化桶中水流速,可控制为0.2m/s,以防止鱼苗体力过分消耗。鱼苗出膜7天左右,口器形成,肠管形成,应及时投喂用150目筛绢过滤的萼花臂尾轮虫(投喂后水体中密度6个/ml)或下塘进行夏花培育。
5、夏花及鱼种的培育
①培育池要求及水质控制。培育池4亩,水深1.5m左右,池底淤泥厚度小于10cm,进排水方便。鱼苗下塘前15天用120Kg/亩生石灰进行消毒,消毒后排尽水将池底晒干。鱼苗下塘前一周进水,进水采用清新无污的长江水,并用100目的密网布过滤。鱼苗下塘时培育池水深控制在0.8m左右,以后根据水质情况和鱼苗的生长情况逐渐补充新鲜水,同时通过泼豆浆和加水来调节水的肥度,保持池中丰富的浮游生物。
②养殖密度为4万尾/亩。
③饵料及投喂方法。前期的饲料以豆浆调节水质为主,培养单细胞绿藻;当鱼苗长至15~20mm时,逐渐投喂轮虫,枝角类和桡足类的无节幼体(投喂后水体中密度为3个/ml);当鱼苗长至30mm以上时,除投喂“红虫”(投喂后水体中密度为3个/ml)外适当加投抱卵青虾(6Kg/亩)。
④起捕。幼鱼须拉网锻炼2~3次,到11月份,池中水温在10℃左右时鱼种个体体长为10-14cm,体重在6-10g之间,即可分池养殖或销售。
2008年4月20日至5月10日按上述实施步骤及要求催产4批,催产种鱼25组,平均催产率40%;获受精卵12万粒,平均受精率50%;共出水花鱼苗57600尾,平均孵化率48%;土池培育水花至夏花阶段,经测算成活率达41%;至11月上旬,苗种规格已达10-14cm,经多点测算成活率为50%,获鱼种11808尾。
实施例3:本发明一种刀鲚的全人工繁殖方法,采用以下工艺步骤:
地点:江阴市水产指导站基地
1、亲鱼来源
繁殖的亲鱼系江苏省江阴申港段灌江纳苗养殖的F2代刀鲚。
2、亲鱼选育
①前期静水培育。挑选体质健壮、活力好、鳍鳞完整,无伤无病的F2代后备亲鱼,放入面积在6亩以上的静水池塘中,放养密度为100尾/亩。后备亲鱼下塘后6天开始投喂青虾、“红虫”等活饵,保持池中饵料生物重量与刀鲚的总重量比为0.02∶1左右。日常要管理好池塘水质,及时更换新鲜水和开增氧机。
②后期流水强化培育。到了第2年冬季,将后备亲鱼从静水池按体重规格分池,转入6亩以上的流水池专池培育,放养密度为80尾/亩。翌年的2月份开始,流水池每星期冲水2次,每次6小时,自4月上旬开始,流水池始终处于流动状态,水流速保持在0.15m/s;饲料投喂则加重“红虫”的比例。经过半年的强化培育,3足龄雄、雌亲鱼体重分别可达80g和120g以上,性腺成熟。
3、人工催产、授精
①亲鱼选择。雄亲鱼选择体重80g以上,轻压后腹部有乳白色精液流出,遇水即散;雌亲鱼选择腹部膨大,有明显的卵巢轮廓,下腹部松软有弹性。
②采精、挖卵检查。用一次性吸管吸取少量精液激活后,在显微镜下观察精子活力情况,成熟的精子有30~50s的快速运动时间;用挖卵器从亲鱼泄殖孔内取出少许卵样,将卵样放人培养皿中,加入透明液(其配方比例按重量份数计:95%酒精92份;10%福尔马林:12份;冰乙酸:4份;三者按上述比例混合即成)浸没卵样,2~3min后观察卵的形态,成熟的卵粒大小整齐、饱满,全部或绝大多数卵核偏位。
③配组用于繁殖的雌、雄亲鱼性比为1∶3.5。
④催产水温。人工催产操作适宜水温在23℃。
⑤激素注射。采用促黄体素释放激素类似物(LRH-A2)和鱼类催产助剂(宁波市激素制品有限公司)配伍对亲鱼进行催产。雌刀鲚注射剂量为:80μg LRH-A2+17mg鱼类催产助产剂/公斤,雄鱼为雌鱼的一半,背鳍基部一次注射。注射时,手握成外拳内空状,使刀鲚头部朝里,随鱼动而带水背鳍基部注射,采用1ml规格一次性无菌注射器(常州悦康医疗器材有限公司生产)。
⑥人工授精。注射催产激素后亲鱼放入面积为20m2的水泥池,冲水刺激,在水温23℃下,刀鲚产卵的效应时间为12h。
4、孵化管理
孵化桶用塑料制成,结构如图1所示,容水量700kg左右为宜,放卵密度4×104粒/桶。孵化桶结构与实施例1相同。孵化期间确保水质清新,水流通畅,水流速控制在0.4m/s,及时将卵膜清除;鱼苗出膜后要降低孵化桶中水流速,可控制为0.2m/s,以防止鱼苗体力过分消耗。鱼苗出膜6天左右,口器、肠管形成,应及时投喂用150目筛绢过滤的单细胞绿藻、轮虫(投喂后水体中密度8个/ml)或下塘进行夏花培育。
5、夏花及鱼种的培育
①培育池要求及水质控制。培育池5亩,水深1.5m左右,池底淤泥厚度小于10cm,进排水方便。鱼苗下塘前14天用120Kg/亩生石灰进行消毒,消毒后排尽水将池底晒干。鱼苗下塘前一周进水,进水采用清新无污的长江水,并用100目的密网布过滤。鱼苗下塘时培育池水深控制在0.8m左右,以后根据水质情况和鱼苗的生长情况逐渐补充新鲜水,同时通过泼豆浆和加水来调节水的肥度,保持池中丰富的浮游生物。
②养殖密度为5万尾/亩。
③饵料及投喂方法。前期的饲料以豆浆调节水质为主,培养单细胞绿藻;当鱼苗长至15~20mm时,逐渐投喂轮虫,枝角类和桡足类的无节幼体(投喂后水体中密度为4个/ml);当鱼苗长至30mm以上时,除投喂“红虫”(投喂后水体中密度为3个/ml)外适当加投抱卵青虾(8Kg/亩)。
④起捕。幼鱼须拉网锻炼2~3次,到11月份,池中水温在10℃左右时鱼种个体体长为10-14cm,体重在6-10g之间,即可作为商品鱼销售。
2008年5月15日至6月10日按上述实施步骤及要求催产4批,催产种鱼30组,平均催产率28%;获受精卵80000粒,平均受精率45%;共出水花鱼苗33600尾,平均孵化率42%;土池培育水花至夏花阶段,经测算成活率达43%;至11月上旬,苗种规格已达10-14cm,经多点测算成活率为51%,获鱼种7368尾。