CN101653355A - 一种活体小动物成像系统及成像方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种微型CT与荧光层析成像双模式活体小动物成像系统及成像方法,所述的微型CT与荧光层析双模式小动物成像系统由主控计算机,X射线源与X射线探测装置,激发光源与激发光/荧光探测装置,旋转扫描装置,所述X射线源与X射线探测装置,激发光源与激发光/荧光探测装置,旋转扫描装置均分别受主控计算机控制。本发明能够同时对小动物进行微型CT成像获得结构信息和荧光层析成像获得荧光标记的分子信息,使荧光层析成像获得的分子信息能够在小动物体内准确定位,有利于提高诊断的准确率。
Description
技术领域
本发明涉及生物医学成像技术领域,具体涉及一种用于活体小动物成像系统及成像方法。
背景技术
分子成像是近年来兴起的可以在活体小动物身上动态地观察细胞与分子水平生物事件的成像手段。它可以应用于癌症早期诊断,肿瘤生长、转移的动态检测,新药的开发等方面。主要使用传统的医学仪器如MRI(magnetic resonance imaging,磁共振成像),PET(positron emission tomography,正电子发射层析成像),SPECT(single photonemission computed tomography,单光子发射层析成像)等,结合不同的分子探针进行分子成像。荧光层析成像是一种无损的光学层析成像技术,它相对传统的成像手段优点在于价格便宜,并且可以实现多通道同时测量。荧光层析成像虽然能够重建出小动物体内荧光分子标记物,但是它不能对小动物样品的结构进行成像。因而单纯的荧光层析成像获得的分子信息无法准确的在小动物体内定位。这就容易导致错误的诊断结果(Ralf B.Schulz等,Comparison of noncontact and fiber-based fluorescence-mediated tomography,《Optics Letters》,2006:769-771)。中国专利公开号CN 101057788A,公开日2007年10月24日,发明创造的名称为荧光分子断层成像装置,该申请案公开了基于光纤的荧光断层成像系统,不足之处在于使用的光纤照明不能提供三维空间内光束扫描。中国专利公开号CN 101317765A,公开日2008年12月10日,发明创造的名称一种集成核素成像与荧光成像的双模式成像系统,该申请案公开了正电子发射层析成像和荧光层析成像系统集成的双模式系统,不足之处在于两种成像方式都可以提供分子成像结果,但是正电子发射层析成像也无法提供样品的结构信息,两种成像方式的互补性不高。X射线断层成像能够对小动物的结构,特别是小动物的骨骼和各器官的位置结构进行成像。将能够提供单纯荧光层析成像中无法提供的小动物的结构信息,通过微型CT系统提供的结构信息,可以为荧光分子层析成像提供边界条件和重建模板,在分子成像的同时提供结构成像。
发明内容
本发明的目地在于提供一套活体小动物成像系统,它实现对小动物的结构与分子信息同时成像。
本发明的特征在于:包括主控计算机,X射线源与X射线探测装置,激发光源与激发光/荧光探测装置,旋转扫描装置,所述X射线源与X射线探测装置,激发光源与激发光/荧光探测装置,旋转扫描装置均分别受主控计算机控制。
优选的,所述X射线源与X射线探测装置与激发光源与激发光/荧光探测装置均工作于透射模式且围绕样本安装。
所述X射线源与X射线探测装置包括X射线管控制器,微焦点X射线管,X射线探测器。X射线管控制器连接到微焦点X射线管,微焦点射线源发出X射线,X射线通过样品后投影在X射线探测器成像面。
优选的,所述X射线探测器是面阵列探测器,包括相应X射线能量范围在10keV-150eV之间的基于非晶硅,非晶硒,CMOS的平板探测器,和基于CCD的面阵列探测器。
所述激发光源与激发光/荧光探测装置包括,激光器控制器,激光器,聚焦镜头,光束扫描控制器,光束扫描器,滤光器,CCD相机(包括镜头)。激光器控制器连接到激光器,光束扫描控制器连接到光束扫描器,光束扫描器将激光器输出激光进行扫描,聚焦镜头将光束扫描器输出激光聚焦到样品表面,CCD相机放于聚焦镜头对测,滤光器放于CCD相机前。
优选的,所述激光器波长在450nm-1000nm之间。
优选的,所述激发光源与激发光/荧光探测装置使用的荧光标记物包括发射荧光波长在500nm-1500nm之间的化学染料,荧光蛋白,量子点,纳米颗粒。
优选的,所述光束扫描器能够对激光进行二维扫描,包括二维振镜和二维电动扫描台。
优选的,所述聚焦镜头包括工作距离在20mm-500mm之间的普通凸透镜,显微物镜,f-θ镜头,远心扫描镜头。
优选的,所述旋转扫描装置由旋转控制器,旋转扫描台,小动物固定容器。旋转控制连接旋转扫描台,小动物固定装置放于旋转扫描台上。
优选的,所述小动物固定容器,其外形为圆柱形或长方体,容器壁厚度为0.1mm-5mm,其内径为10mm-50mm,其材料CT值小于2000,对500nm-1000nm的光衰减小于50%。
所述主控计算机通过X射线管控制器控制X射线管的开关、功率等参数,通过激光控制器控制激光器的开关与输出功率,通过光束扫描控制器控制光束扫描器对光束进行扫描,通过旋转控制器控制旋转扫描台的旋转,控制滤光器转轮旋转选择使用的滤光片,控制相机的数据采集并将数据传输到主控计算机,控制X射线探测器的数据采集并将数据传输到主控计算机。
本发明所述的活体小动物成像系统,其成像方法包括以下步骤:
对样品进行荧光和CT两种模式的三维成像,设CT获得的具有结构信息的三维成像结果矩阵为IC,荧光成像获得的具有分子信息的三维成像结果矩阵为IF;
根据MIF=RIC+T,其中,M为差值矩阵,T为平移矩阵,R为旋转矩阵,计算CT三维成像与荧光成像三维成像融合所需的参数M,R,T;
对活体小动物进行荧光和CT两种模式的三维成像;
用参数M,R,T调整CT三维成像数据,调整后的数据直接叠加到荧光成像的结果中,即实现两种成像模式的联合成像,该联合成像同时具有结构信息和分子信息。
优选的,所述主控计算机控制X射线源与X射线探测装置、激发光源与激发光/荧光探测装置,可以按先后顺序/交替顺序完成CT成像和荧光层析成像。
本发明能够同时对小动物进行微型CT成像获得结构信息和荧光层析成像获得荧光标记的分子信息,使荧光层析成像获得的分子信息能够在小动物体内准确定位,有利于提高诊断的准确率。
附图说明:
图1是本发明系统的结构俯视示意图。
图2是本发明系统各部件作用关系示意图。
具体实施方案
为使本发明的目的、技术方案和优点更加清楚,下面将结合附图对本发明实施方式作进一步地详细描述。
如图1,图2所示,本发明属于一种双模式成像系统,它包括荧光层析成像子系统和微型CT子系统,并通过设计将两种成像模式耦合到一个系统中,实现小动物的在体双模式成像。所述成像系统包括主控计算机14,射线源与X射线探测部分,激发光源与激发光/荧光探测部分,旋转扫描部分组成。
所述微焦点射线源1与所述X射线探测器2分别放置于样品的两侧,X射线通过样品后投影在所述X射线探测器2成像面上,所述微焦点射线源1由所述主控计算机14通过所述X射线管控制器10控制,所述微焦点射线源1工作于连续输出模式,其控制电压和电流由操作人员根据样品、成像时间、分辨率等因素综合考虑进行选择。为实现高分辨成像所述微焦点射线源1的焦点尺寸小于100微米。所述X射线探测器2与所述主控计算机14通讯进行数据采集,并将采集数据传输到所述主控计算机14中。所述X射线探测器2可以包括基于非晶硅、非晶硒、CMOS(互补金属氧化物半导体)的平板探测器和基于CCD的平面型X射线探测器。
所述光束扫描器5与所述CCD相机4分别放置于样品的对测,工作于透射模式。如图2所示,荧光探测光路与上述X射线探测光路成正交位置摆放,样品放于中心位置。所述激光器3由所述主控计算机14通过所述激光控制器10控制,所述激光器3输出连续激光或者脉冲激光(脉冲宽度在皮秒或飞秒量级),其输出强度由操作人员根据荧光样品的深度,浓度,量子效率等综合考虑设定。所述激光器3的激光波长由使用的荧光样品的激发波长决定,通常在450nm-1000nm的范围内。激光通过所述的光束扫描器5在二维平面内进行扫描,所述光束扫描器5是二维振镜或者二维电移台,其由所述主控计算机14通过光束扫描控制器13控制,扫描范围和扫描的点数由操作人员设定。扫描光束通过所述聚焦镜头6汇聚到样品表面,所述聚焦透镜6是普通凸透镜、物镜,f-θ透镜或者远心扫描透镜。所述滤光器7由所述主控计算机14控制,在扫描成像时由程序设定切换激发光滤光片和荧光滤光片。所述CCD相机4与所述主控计算机14通讯进行数据采集,并将采集数据传输到所述主控计算机14中。所述CCD相机4是致冷CCD相机或是增强型CCD相机(intensified CCD camera)。
所述旋转扫描台8由所述主控计算机14通过所述旋转控制器10控制,所述旋转扫描台8扫描时的扫描点数和扫描时间由操作人员设定,所述旋转扫描台8是涡轮-蜗杆结构,由步进电机或伺服电机驱动。所述小动物固定容器9固定于所述旋转扫描台8上,用于装小动物样品,在旋转扫描时随所述旋转扫描台8一起旋转。所述小动物固定容器9外形是长方体或圆柱体,材料是CT值在2000以下,并且对可见光透过率在50%。所述小动物固定容器9在内表面和外表面可以镀增透膜(荧光较弱时)或不镀膜。在进行扫描成像时,所述小动物固定容器9中可以加入组织耦合液也可以不加入耦合液。
本系统的具体操作步骤如下:
(1)将小动物样品麻醉后,放于所述小动物固定容器9中固定。
(2)设定扫描成像时的参数,包括所述的CCD相机4、X射线探测器2的积分时间,激光、X射线强度,微型CT和荧光层析成像的扫描点数和扫描时间等。
(3)所述微焦点X射线源1首先打开,稳定5秒。
(4)所述X射线探测器2进行数据采集,在当前位置完成数据采集后将结果传输到所述主控计算机14,同时所述旋转扫描台8按照设定的角度进行旋转。
(5)重复步骤4中的动作直到微型CT扫描结束。关闭所述微焦点射线源1。
(6)打开所述激光器3。
(7)所述主控计算机14控制所述滤光器7将滤光片切换为激发光滤光片。所述CCD相机4进行数据采集,在当前位置完成数据采集后将结果传输到所述主控计算机14,同时所述主控计算机14控制所述滤光器7将滤光片切换为荧光滤光片,所述CCD相机4进行数据采集,在当前位置完成数据采集后将结果传输到所述主控计算机14,同时所述光束扫描器5将聚焦后的光斑移动到下一指定位置。
(8)重复步骤7中的动作,若荧光层析成像只需一个角度则执行下一步,如需要多角度的结果,则所述旋转扫描台8旋转到指定角度并重复步骤7中的动作。
(9)重复步骤8中的动作直到荧光层析成像扫描结束并关闭激光器。
所述的运行步骤不限于上述描述的过程,所述步骤7中使用所述光束扫描器5对设定位置进行一次扫描,在每个位置切换激发光滤光片和荧光滤光片。也可以使用所述光束扫描器5对设定位置进行两次扫描,每次分别使用激发光滤光片和荧光滤光片进行数据采集。所述步骤6-9在微型CT扫描完成后开始进行荧光层析成像扫描。也可以在微型CT扫描时插入荧光层析成像扫描,进行交替扫描成像。
在多模式成像系统中当各子系统间相对位置确定时,通常使用非基于图像的方法进行图像融合,而当各子系统相对位置无法确定时通常使用基于图像的方法。由于所述系统中的微型CT部分与荧光分子成像部分相对位置是确定的,因此本发明图像的融合使用非基于图像的方法。在进行动物实验前,首先对两子系统的相对成像位置进行校准,以确定两系统重建的三维矩阵的间的空间关系;此后在系统相对位置固定的情况下,在校准时获得的相对空间关系皆可用来对每次成像的三维矩阵进行调整,以实现两种成像模式三维成像结果在空间上位置重合,实现图像融合具体操作步骤如下:
(1)调节CCD相机的角度,使得CCD成像平面与小动物固定容器相平行。
(2)在小动物固定容器内注入10%脂肪乳溶液,并放置一注满荧光溶液的玻璃棒于其内。
(3)对样品进行微型CT和荧光成像,并通过计算机处理重建得到两种模式的三维成像结果。
(4)假设微型CT获得的结构信息的三维成像结果矩阵为IC,荧光成像获得的分子信息三维成像结果矩阵为IF,由于荧光成像模式的成像像素通常小于微型CT的,因此需要对IF进行差值,假设差值矩阵为M。为使IC与IF能代表相同位置的三维空间,对IC进行平移和旋转,假设平移矩阵为T,旋转矩阵为R,则:
MIF=RIC+T
(5)由于两种成像模式的成像结果中小动物固定容器的位置是已知的,因此对微型CT获得的三维成像结果中小动物固定容器的位置,按照荧光成像三维成像结果进行调整,可获得参数M,R,T。
(6)当整个系统相对位置不发生变化,则在实际试验时参数M,R,T可用来调整微型CT的数据,调整后的数据即可直接叠加到荧光成像的结果中。即可实现两种成像模式的联合成像,这种联合成像同时具有结构信息和分子信息。
另外,所述系统经过微小的改动即可实现其它模式成像,当使用荧光素酶等生物发光蛋白作为标记物,且成像时不使用激光器,即可实现生物发光层析成像与微型CT双模式成像系统。在进行数据采集时不采集荧光信号即可实现扩散光学层析成像与微型CT双模式成像系统。
以上所述仅为本发明的较佳实施例,并不用以限制本发明,凡在本发明的精神和原则之内,所作的任何修改、等同替换、改进等,均应包含在本发明的保护范围之内。
Claims (10)
1.一种活体小动物成像系统,其特征在于所述系统包括主控计算机,X射线源与X射线探测装置,激发光源与激发光/荧光探测装置,旋转扫描装置,所述X射线源与X射线探测装置,激发光源与激发光/荧光探测装置,旋转扫描装置均分别受主控计算机控制;所述X射线源与X射线探测装置包括X射线管控制器,微焦点X射线管,X射线探测器;所述激发光源与激发光/荧光探测装置包括激光器控制器,激光器,聚焦镜头,光束扫描控制器,光束扫描器,滤光器,CCD相机;所述旋转扫描装置包括旋转控制器,旋转扫描台,小动物固定容器。
2.如权利要求1所述活体小动物成像系统,其特征在于,所述X射线源与X射线探测装置与激发光源与激发光/荧光探测装置均工作于透射模式且围绕样本安装。
3.如权利要求1所述活体小动物成像系统,其特征在于,所述的X射线探测器是面阵列探测器,包括相应X射线能量范围在10keV-150eV之间的基于非晶硅,非晶硒,CMOS的平板探测器,和基于CCD的面阵列探测器。
4.如权利要求1所述活体小动物成像系统,其特征在于,所述激光器波长在450nm-1000nm之间。
5.如权利要求1所述活体小动物成像系统,其特征在于,所述激发光源与激发光/荧光探测装置使用的荧光标记物包括发射荧光波长在500nm-1500nm之间的化学染料,荧光蛋白,量子点,纳米颗粒。
6.如权利要求1所述活体小动物成像系统,其特征在于,所述光束扫描器能够对激光进行二维扫描,包括二维振镜和二维电动扫描台。
7.如权利要求1所述活体小动物成像系统,其特征在于,所述聚焦镜头包括工作距离在20mm-500mm之间的普通凸透镜,显微物镜,f-θ镜头,远心扫描镜头。
8.如权利要求1所述活体小动物成像系统,其特征在于,所述小动物固定容器,其外形为圆柱形或长方体,容器壁厚度为0.1mm-5mm,其内径为10mm-50mm,其材料CT值小于2000,对500nm-1000nm的光衰减小于50%。
9.如权利要求1所述活体小动物成像系统的成像方法,其特征在于包括以下步骤:
对样品进行荧光和CT两种模式的三维成像,设CT获得的具有结构信息的三维成像结果矩阵为IC,荧光成像获得的具有分子信息的三维成像结果矩阵为IF;
根据MIF=RIC+T,其中,M为差值矩阵,T为平移矩阵,R为旋转矩阵,计算CT三维成像与荧光成像三维成像融合所需的参数M,R,T;
对活体小动物进行荧光和CT两种模式的三维成像;
用参数M,R,T调整CT三维成像数据,调整后的数据直接叠加到荧光成像的结果中,即实现两种成像模式的联合成像,该联合成像同时具有结构信息和分子信息。
10.如权利要求9所述活体小动物成像系统的成像方法,其特征在于,所述主控计算机控制X射线源与X射线探测装置、激发光源与激发光/荧光探测装置,可以按先后顺序或交替顺序完成CT成像和荧光层析成像。
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