CN101563330B - 作为葡糖激酶(glk)激活剂的苯甲酰氨基杂环化合物 - Google Patents

作为葡糖激酶(glk)激活剂的苯甲酰氨基杂环化合物 Download PDF

Info

Publication number
CN101563330B
CN101563330B CN2007800474769A CN200780047476A CN101563330B CN 101563330 B CN101563330 B CN 101563330B CN 2007800474769 A CN2007800474769 A CN 2007800474769A CN 200780047476 A CN200780047476 A CN 200780047476A CN 101563330 B CN101563330 B CN 101563330B
Authority
CN
China
Prior art keywords
compound
oxygen base
methyl
methoxy
group
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Expired - Fee Related
Application number
CN2007800474769A
Other languages
English (en)
Other versions
CN101563330A (zh
Inventor
N·G·马丁
D·麦克雷彻
K·G·皮克
M·J·瓦林
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
AstraZeneca AB
Original Assignee
AstraZeneca AB
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by AstraZeneca AB filed Critical AstraZeneca AB
Priority claimed from PCT/GB2007/004057 external-priority patent/WO2008050117A1/en
Publication of CN101563330A publication Critical patent/CN101563330A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN101563330B publication Critical patent/CN101563330B/zh
Expired - Fee Related legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Images

Abstract

本发明涉及新的式(I)化合物组或其盐，其中R1、R2、R3、n、A和HET-1如在本说明书中所述，其可用于治疗或预防通过葡糖激酶(GLK)介导的疾病或病症例如2型糖尿病。本发明也涉及包含所述化合物的药用组合物、采用所述化合物治疗通过GLK介导疾病的方法和制备式(I)化合物的方法。

Description

作为葡糖激酶(GLK)激活剂的苯甲酰氨基杂环化合物
本发明涉及一组苯甲酰氨基杂环化合物，其用于治疗或预防通过葡糖激酶(GLK或GK)介导的疾病或病症，导致对胰岛素分泌的降低的糖阈值。另外，预期所述化合物通过增加肝脏葡萄糖摄取降低血糖。这样的化合物可在治疗2型糖尿病和肥胖症方面具有用途。本发明也涉及包含所述化合物的药用组合物和涉及使用所述化合物治疗通过GLK介导疾病的方法。
在胰腺β-细胞和肝实质细胞中的主要质膜葡糖转运蛋白为GLUT2。在生理葡萄糖浓度下，GLUT2跨膜转运葡萄糖的速率不为限于这些细胞中葡萄糖摄取总速率的速率。葡萄糖摄取的速率受到由葡糖激酶(GLK)催化的葡萄糖磷酸化为葡糖-6-磷酸(G-6-P)速率的限制[1]。GLK对葡萄糖具有高的(6-10mM)Km并且不受G-6-P的生理浓度的抑制[1]。GLK表达局限于几种组织和细胞类型，最显著的是胰腺β-细胞和肝脏细胞(肝细胞)[1]。在这些细胞中，GLK活性为葡萄糖利用的速率极限并因此调节葡萄糖诱的导胰岛素分泌和肝糖原合成的程度。这些过程在维持总体葡萄糖动态平衡方面是关键的并且两者在糖尿病中是功能异常的[2]。
在一种亚型的糖尿病，即青年的成年发生的糖尿病2型(MODY-2)中，糖尿病由功能突变的GLK丧失引起[3，4]。MODY-2患者的高血糖由胰腺和肝脏中的缺损的葡萄糖利用引起[5]。MODY-2患者胰腺中的缺损的葡萄糖利用对葡萄糖刺激的胰岛素分泌导致升高的阈值。相反地，极少激活GLK的突变减少该导致家族性胰岛素过多症的阈值[6，6a，7]。除了在MODY-2糖尿病观察到的减少的GLK活性以外，肝葡糖激酶活性在2型糖尿病中也被降低[8]。重要地是GLK的总体或肝脏选择性过量表达在糖尿病的饮食和遗传两种模型中防止或逆转糖尿病表型的发展[9-12]。另外，2型糖尿病用果糖急性治疗通过刺激肝糖利用改善葡糖耐量[13]。确信该作用是通过在肝细胞中经下述机制的果糖诱导的胞质GLK活性增加来介导的[13]。
肝GLK活性通过与GLK调节蛋白(GLKRP)缀合来抑制。GLK/GLKRP缀合物因果糖-6-磷酸(F6P)结合于GLKRP而变得稳定并因果糖-1-磷酸(F1P)替代该糖磷酸酯而不稳定。F1P通过果糖激酶介导的饮食果糖的磷酸化作用产生。因此，GLK/GLKRP缀合物整体和肝GLK活性以营养依赖的方式调节，因为F6P在吸收后状态下是显性的，而F1P在餐后状态下是显性的。与肝细胞相反，胰腺β-细胞在不存在GLKRP下表达GLK。因此，β-细胞GLK活性受到其底物葡萄糖可利用度的广泛调节。小分子可直接或通过使GLK/GLKRP缀合物不稳定而激活GLK。预计前一类化合物在肝和胰腺两者刺激葡萄糖利用，而预计后一类化合物选择性地在肝脏作用。然而，可预期具有两者中任何一种性质的化合物在治疗2型糖尿病中具有疗效益处，因为糖尿病特征为在两种组织中缺损的葡萄糖利用。
GLK、GLKRP和KATP通道在下丘脑的神经元中表达，后者为调节能量平衡和控制食物摄取方面重要的脑区域[14-18]。已经显示这些神经元表达增进食欲和抑制食欲的神经肽[15，19，20]并且假定是由周围葡萄糖浓度变化抑制或兴奋的下丘脑中葡萄糖敏感的神经元[17，19，21，22]。这些神经元感觉葡萄糖水平变化的能力在多种遗传和试验诱导的肥胖症模型中是缺损的[23-28]。脑室内(icv)注入为葡糖激酶竞争性抑制剂的葡萄糖类似物刺激瘦型大鼠的食物摄取[29，30]。相反，icv注入葡萄糖抑制摄食[31]。因此，小分子的GLK激活剂通过对GLK的中枢作用可减少食物摄取和体重增加。因此，除了糖尿病以外，GLK激活剂还可在治疗饮食障碍，包括肥胖症方面具有用途。对在肝脏和/或胰腺起作用使葡萄糖稳态正常化用于治疗2型糖尿病的相同化合物的作用，下丘脑作用将是叠加或协同的。因此，GLK/GLKRP体系可描述为潜在的“糖尿肥胖症(Diabesity)”靶标(在糖尿病和肥胖症两者具有益处)。
GLK也在特异性肠内分泌细胞中表达，其中确信后者控制肠促胰岛素肽GIP(糖依赖性促胰岛素多肽)和GLP-1(胰高血糖素样肽-1)分别自消化道K-细胞和L-细胞的葡萄糖敏感性分泌(32，33，34)。因此，小分子的GLK激活剂由于可刺激GIP和GLP-1自这些肠内分泌细胞分泌而对胰岛素分泌、b-细胞功能和存活及体重具有另外的有益作用。
在WO00/58293和WO01/44216(Roche)中，一系列苄基氨基甲酰基化合物被描述为葡糖激酶激活剂。这样化合物激活GLK的机制通过测量这样化合物在其中GLK活性与NADH产生相关联的试验中的直接作用得到评价，NADH产生依次被任选地测量-参见下文描述的体外实验细节。本发明化合物可直接激活GLK或者可通过抑制GLKRP与GLK的相互作用激活GLK。
另外的GLK激活剂已经在WO03/095438(取代的苯乙酰胺，Roche)、WO03/055482(甲酰胺和磺酰胺衍生物，Novo Nordisk)、WO2004/002481(芳基羰基衍生物，Novo Nordisk)和在WO03/080585(氨基取代的苯甲酰氨基杂环，Banyu)中得到描述。
我们的国际申请第WO03/000267号描述了一组为酶葡糖激酶(GLK)激活剂的苯甲酰氨基吡啶羧酸。
我们的国际申请第WO03/015774号描述式(A)的化合物：
Figure G2007800474769D00031
其中R3为苯基或除羧酸取代的吡啶基以外的取代的杂环。
国际申请WO2004/076420(Banyu)描述了其一般地为在WO03/015774中描述化合物的亚组的化合物，其中例如R1为(取代的)烷基醚和R2为(取代的)苯氧基。
我们已经意外地发现一小组化合物，通常为在WO03/015774中描述的化合物中所选择的小组，通常对GLK酶具有优良的效力和更有利的物理性质，包括例如较高的水溶性、较高的渗透性和/或较低的血浆蛋白结合。因此，期待具有这些性质的平衡的此类化合物在口服给药后呈现更高的血浆游离药物水平和优良的体内效力，如例如通过口服葡糖耐量实验(Oral Glucose Tolerance Tests)(OGTTs)中的活性确定的那样。因此期待该组化合物在较低剂量提供优良的口服给药并因而尤其适用于治疗或预防通过GLK介导的疾病或病症。与本领域已知的其它GLK激活剂以及在WO03/015774中描述的那些化合物相比较，本发明化合物也可具有优良的效力和/或有利的物理性质(如以上描述的)和/或有利的毒性分布和/或有利的代谢分布。
因此，根据本发明的第一个方面，提供式(I)的化合物或其盐：
Figure G2007800474769D00041
其中：
R1选自氟代甲氧基甲基、二氟甲氧基甲基和三氟甲氧基甲基；
R2为环A碳原子上的取代基并且选自-C(O)NR4R5、-SO2NR4R5、-S(O)pR4和HET-2；
HET-1为在相对于环连接的酰胺氮原子的2-位含有氮原子和任选地含有1或2个独立选自O、N和S的其它环杂原子的5-或6-元C-连接的杂芳基环，该环在可利用的碳原子上或在环氮原子上被1或2个独立选自R6的取代基任选取代，条件是它不因此而被季铵化；
HET-2为含有1、2、3或4个独立选自O、N和S的杂原子的4-、5-或6-元C-或N-连接的杂环基环，其中-CH2-基团可用-C(O)-任选替代和其中杂环上的硫原子可被任选氧化为S(O)或S(O)2基团，该环在可利用的碳或氮原子上被1或2个独立选自R7的取代基任选取代；
R3为环A碳原子上的取代基并且选自卤代；
R4选自氢、(1-4C)烷基[被1或2个独立选自HET-2、-OR5、-SO2R5、(3-6C)环烷基(被1个选自R7的基团任选取代)和-C(O)NR5R5的取代基任选取代]、(3-6C)环烷基(被1个选自R7的基团任选取代)和HET-2；
R5为氢或(1-4C)烷基；
R6独立选自(1-4C)烷基、羟基(1-4C)烷基、(1-4C)烷氧基(1-4C)烷基、(1-4C)烷基S(O)p(1-4C)烷基、氨基(1-4C)烷基、(1-4C)烷基氨基(1-4C)烷基、二(1-4C)烷基氨基(1-4C)烷基和/或(对于R6作为碳上的取代基)卤代；
R7选自(1-4C)烷基、-C(O)(1-4C)烷基、-C(O)NR4R5、(1-4C)烷氧基(1-4C)烷基、羟基(1-4C)烷基、S(O)pR5和/或(适于R7作为碳上的取代基)羟基和(1-4C)烷氧基；
环A为含有1、2或3个独立选自O、S和N的环杂原子的5-或6-元杂芳基环，该环在可利用的氮原子上被选自R8的取代基任选地进一步取代(条件是它不因此被季铵化)；
R8选自(1-4C)烷基、(3-6C)环烷基、羟基(1-4C)烷基、(1-4C)烷氧基(1-4C)烷基、-C(O)(1-4C)烷基、苄基和(1-4C)烷基磺酰基；
P(在每次出现时独立地)为0、1或2；
n为0、1或2。
应该理解当R4为用-C(O)NR5R5取代的(1-4C)烷基时，每一个R5独立地选自氢和(1-4C)烷基并且因此R4的该定义包括(但不限于)用-CONH2、-CONHMe、-CONMe2或-CONMeEt取代的(1-4C)烷基。
应该理解当式(I)化合物包含多于1个HET-2环时，它们可为相同或不同的。
应该理解当式(I)化合物包含多于1个基团R4时，它们可为相同或不同的。
应该理解当式(I)化合物包含多于1个基团R5时，它们可为相同或不同的。
应该理解当式(I)化合物包含多于1个基团R3时，它们可为相同或不同的。
类似的约定适用于如在上文定义的式(I)化合物上的所有其它基团和取代基。
式(I)化合物可形成盐，后者处于本发明的范围内。药学上可接受的盐为优选的，尽管其它盐可用于例如分离或纯化化合物。
在另一方面，本发明涉及如上文定义的式(I)化合物或涉及药学上可接受的盐。
在另一方面，本发明涉及如上文定义的式(I)化合物或涉及其前药。式(I)化合物的前药的合适实例为式(I)化合物的体内可水解的酯。因此在另一方面，本发明涉及如上文定义的式(I)化合物或涉及其体内可水解的酯。
在本说明书中，通用术语“烷基”包括直链和分支链烷基两者。然而，涉及单个烷基例如“丙基”时仅特指直链类型和涉及单个支链烷基例如叔丁基时仅特指分支链类型。例如，“(1-4C)烷基”包括甲基、乙基、丙基、异丙基和叔丁基。类似的约定适用于其它通用术语。
为了避免疑问，涉及在2-位含有氮的基团HET-1时，打算指相对于该基团所连接的酰胺氮原子的2-位。例如，式(I)的定义包括(但不限于)以下结构：
作为如上文定义的5-或6-元C-连接的杂芳基环的HET-1的合适实例包括噻唑基、异噻唑基、噻二唑基、吡啶基、吡嗪基、哒嗪基、吡唑基、咪唑基、嘧啶基、噁唑基、异噁唑基、噁二唑基和三唑基。
应该理解HET-2可为饱和的或者部分或完全不饱和的环。
HET-2的合适实例包括氮杂环丁烷基、呋喃基、噻吩基、噻唑基、异噻唑基、噻二唑基、吡啶基、吡嗪基、哒嗪基、吡唑基、咪唑基、嘧啶基、噁唑基、异噁唑基、噁二唑基、吗啉代、吗啉基、哌啶基、哌嗪基、吗啉基、硫代吗啉基、吡咯基、吡咯烷基、吡咯烷酮基、2，5-二氧代吡咯烷基、1，1-二氧代四氢噻吩基、2-氧代咪唑烷基、2，4-二氧代咪唑烷基、2-氧代-1，3，4-(4-三唑啉基)、2-噁唑烷酮基、2-氧代四氢呋喃基、四氢呋喃基、四氢吡喃基、1，1-二氧代硫代吗啉代、1，3-二氧戊环基、1，2，4-三唑基、1，2，3-三唑基、吡喃基和4-吡啶酮基。
应该理解HET-2可通过任何合适的可利用的C或N原子连接，因此例如HET-2作为“咪唑基”包括1-、2-、4-和5-咪唑基。
如上文定义的环A的合适实例包括噻吩基、呋喃基、噻唑基、异噻唑基、噻二唑基、吡啶基、吡嗪基、哒嗪基、吡唑基、咪唑基、嘧啶基、噁唑基、异噁唑基、噁二唑基和三唑基。环A的另外的合适实例包括其中环氮或硫原子已经被氧化但仍保持芳香性的芳族杂环，例如吡啶N-氧化物。环A的另外的合适实例包括噻唑基、吡啶基、吡嗪基、哒嗪基和嘧啶基。
应该意识到HET-1、HET-2和环A的以上合适值均可如上文定义的那样被任选取代。
应该意识到当杂环基HET-1、HET-2和环A的定义包括其可在氮上取代的杂芳基或杂环基环时，这样的取代不可导致荷电季氮原子或不稳定结构(例如N-卤代化合物)。应该意识到HET-1、HET-2和环A的定义不打算包括任何O-O、O-S或S-S键合。应该意识到HET-1、HET-2和环A的定义不打算包括不稳定结构。
(1-4C)烷基的实例包括甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基和叔丁基；(1-4C)烷氧基的实例包括甲氧基、乙氧基、丙氧基、异丙氧基和叔丁氧基；(3-6C)环烷基的实例包括环丙基、环丁基、环戊基和环己基；卤代的实例包括氟、氯、溴和碘；羟基(1-4C)烷基的实例包括羟基甲基、1-羟基乙基、2-羟基乙基、2-羟基丙基、3-羟基丙基、1-羟基异丙基和4-羟基丁基；(1-4C)烷氧基(1-4C)烷基的实例包括甲氧基甲基、乙氧基甲基、叔丁氧基甲基、2-甲氧基乙基、2-乙氧基乙基、甲氧基丙基、2-甲氧基丙基和甲氧基丁基；(1-4C)烷基S(O)p(1-4C)烷基的实例包括甲基亚硫酰基甲基、乙基亚硫酰基甲基、乙基亚硫酰基乙基、甲基亚硫酰基丙基、甲基亚硫酰基丁基、甲基磺酰基甲基、乙基磺酰基甲基、乙基磺酰基乙基、甲基磺酰基丙基、甲基磺酰基丁基、甲基硫代甲基、乙基硫基甲基、乙基硫基乙基、甲基硫基丙基和甲基硫基丁基；氨基(1-4C)烷基的实例包括氨基甲基、氨基乙基、2-氨基丙基、3-氨基丙基、1-氨基异丙基和4-氨基丁基；(1-4C)烷基氨基(1-4C)烷基的实例包括(N-甲基)氨基甲基、(N-乙基)氨基甲基、1-((N-甲基)氨基)乙基、2-((N-甲基)氨基)乙基、(N-乙基)氨基乙基、(N-甲基)氨基丙基和4-((N-甲基)氨基)丁基；二(1-4C)烷基氨基(1-4C)烷基的实例包括二甲基氨基甲基、甲基(乙基)氨基甲基、甲基(乙基)氨基乙基、(N，N-二乙基)氨基乙基、(N，N-二甲基)氨基丙基和(N，N-二甲基)氨基丁基；(1-4C)烷基氨基的实例包括甲基氨基、乙基氨基、丙基氨基、异丙基氨基、丁基氨基和叔丁基氨基；二(1-4C)烷基氨基的实例包括二甲基氨基、甲基(乙基)氨基、二乙基氨基、二丙基氨基、二异丙基氨基和二丁基氨基；-C(O)(1-4C)烷基的实例包括甲基羰基、乙基羰基、丙基羰基和叔丁基羰基；(1-4C)烷基磺酰基的实例包括甲基磺酰基、乙基磺酰基、异丙基磺酰基和叔丁基磺酰基。
应该理解就以上定义的某些式(I)化合物可由于一个或多个不对称碳原子而以光学活性或外消旋形式存在而论，本发明在其定义范围内包括具有直接刺激GLK或抑制GLK/GLKRP相互作用性质的任何这样的光学活性或外消旋形式。通过本领域熟知的有机化学标准技术，例如通过自光学活性起始原料合成或者通过拆分外消旋形式，可实施光学活性形式的合成。也应该理解某些化合物可以互变异构形式存在并且本发明也涉及激活GLK的本发明化合物的任何和所有互变异构形式。
也应该理解某些式(I)化合物及其盐可以溶剂化及未溶剂化形式例如水合形式存在。应该理解本发明包括所有这样的激活GLK的溶剂化形式。
在本发明的一个实施方案中提供式(I)化合物，在另一个可供选择的实施方案中提供式(I)化合物的药学上可接受的盐，在另一个可供选择的实施方案中提供式(I)化合物的体内可水解的酯，并且在另一个可供选择的实施方案中提供式(I)化合物的体内可水解酯的药学上可接受的盐。
每一个可变基团的优选值如下。当对于上下文定义的任何值、定义、权利要求、方面或实施方案合适时，可使用这样的值。具体地讲，每一个可作为式(I)最广泛定义上的各自限定使用。另外，每一个以下值可与一个或多个其它以下值联合使用以限制式(I)的最广泛定义。
(1)R1为氟代甲氧基甲基或二氟甲氧基甲基
(2)R1为氟代甲氧基甲基并且构型优选地为(S)，其为以下的侧链：
(3)R1为二氟甲氧基甲基并且构型优选地为(S)，其为以下的侧链：
Figure G2007800474769D00092
(4)R2为-C(O)NR4R5
(5)R2为-SO2NR4R5
(6)R2为-S(O)pR4
(7)R2为HET-2
(8)R2为-C(O)NR4R5或-SO2NR4R5
(9)R2在相对于醚键的对位
(10)n为0或1
(11)n为0
(12)n为1，R2在相对于醚键的对位，R3在相对于醚键的邻位
(13)n为1，R2在相对于醚键的对位，R3在相对于醚键的间位
(14)n为1
(15)n为2
(16)n为2和两个R3为卤代
(17)n为2和两个R3独立地为氟或氯
(18)n为2，R2在相对于醚键的对位和R3在相对于醚键的邻位
(19)n为2，两个R3为卤代，R2在相对于醚键的对位和每一个R3在相对于醚键的邻位
(20)n为2，两个R3为卤代，R2在相对于醚键的对位和每一个R3在相对于醚键的邻位且另一个R3在相对于醚键的间位
(21)R3为氯或氟
(22)R3为氟
(23)R3为氯
(24)n为2和两个R3为氟
(25)n为2和一个R3为氟且另一个为氯
(26)p为0
(27)p为1
(28)p为2
(29)HET-1为5-元杂芳基环
(30)HET-1为6-元杂芳基环
(31)HET-1被1或2个独立选自R6的取代基取代
(32)HET-1被1个选自R6的取代基取代
(33)HET-1为未取代的
(34)HET-1选自噻唑基、异噻唑基、噻二唑基、吡啶基、吡嗪基、哒嗪基、吡唑基、咪唑基、嘧啶基、噁唑基、异噁唑基、噁二唑基和三唑基
(35)HET-1选自噻唑基、异噻唑基、噻二唑基、吡唑基、咪唑基、噁唑基、异噁唑基和噁二唑基
(36)HET-1选自吡啶基、吡嗪基、哒嗪基和嘧啶基
(37)HET-1为任选取代的吡唑基例如吡唑基或N-甲基吡唑基
(38)HET-1为吡啶基或吡嗪基
(39)HET-1为吡嗪基
(40)HET-1选自吡唑基、N-甲基吡唑基和甲基吡嗪基(例如5-甲基吡嗪-2-基)
(41)HET-1为吡唑基(用乙基、异丙基或者1或2个甲基任选取代)、噻唑基(用甲基任选取代)、吡嗪基(用甲基任选取代)、吡啶基(用氟任选取代)、异噻唑基(用甲基任选取代)和噻二唑基(用甲基任选取代)
(42)HET-1为吡唑基(用乙基、异丙基、二氟甲基或者1或2个甲基任选取代)、噻唑基(用甲基任选取代)、吡嗪基(用甲基任选取代)、吡啶基(用氟任选取代)、异噁唑基(用甲基任选取代)和噻二唑基(用甲基任选取代)
(43)HET-1选自吡嗪基(用甲基任选取代)、吡唑基(在碳上用甲基任选取代)、甲基噻二唑基(特别是1，2，4-噻二唑-5-基，更特别是3-甲基-1，2，4-噻二唑-5-基)、噻唑基(用甲基任选取代)、吡啶基(用氟任选取代)和异噁唑基
(44)R6选自(1-4C)烷基、卤代、羟基(1-4C)烷基、二(1-4C)烷基氨基(1-4C)烷基
(45)R6选自甲基、乙基、氯、氟、羟基甲基、甲氧基甲基、氨基甲基、N-甲基氨基甲基、二甲基氨基甲基
(46)R6选自甲基、乙基、氯、氟、羟基甲基和甲氧基甲基
(47)R6选自甲基或乙基
(48)R6为甲基
(49)R6选自(1-4C)烷基和(1-4C)烷氧基(1-4C)烷基
(50)R6选自甲基、乙基、异丙基和甲氧基甲基
(51)当存在两个取代基R6时，两者选自甲基、乙基、溴、氯和氟；优选地两者为甲基并且至少一个在可利用的氮原子上
(52)R4为氢
(53)R4为(1-4C)烷基[被1或2个独立选自HET-2、-OR5、-SO2R5、(3-6C)环烷基(被1个选自R7的基团任选取代)和-C(O)NR5R5的取代基取代]
(54)R4为(1-4C)烷基[被1个选自HET-2、-OR5、-SO2R5、(3-6C)环烷基和-C(O)NR5R5的取代基取代]
(55)R4为(1-4C)烷基
(56)R4为用-OR5取代的(1-4C)烷基
(57)R4为用HET-2取代的(1-4C)烷基
(58)R4为(3-6C)环烷基，尤其是环丙基或环丁基
(59)R4为用选自R7的基团取代的(3-6C)环烷基
(60)R4为用选自-OR5和(1-4C)烷基的基团取代的(3-6C)环烷基
(61)R4选自(1-4C)烷基和(3-6C)环烷基
(62)R4选自甲基、乙基、环丙基和环丁基
(63)R4为HET-2
(64)R4选自氢、(1-4C)烷基和用-OR5取代的(1-4C)烷基
(65)HET-2为未取代的
(66)HET-2被1或2个独立选自(1-4C)烷基、羟基和(1-4C)烷氧基的取代基取代
(67)HET-2为完全饱和的环系统
(68)HET-2为完全不饱和的环系统
(69)HET-2选自氮杂环丁烷基、吗啉代、吗啉基、哌啶基、哌嗪基、3-氧代哌嗪基、硫代吗啉基、吡咯烷基、吡咯烷酮基、2，5-二氧代吡咯烷基、1，1-二氧代四氢噻吩基、2-噁唑烷酮基、2-氧代四氢呋喃基、四氢呋喃基、四氢吡喃基、1，1-二氧代硫代吗啉基、1，3-二氧戊环基、2-氧代咪唑烷基、2，4-二氧代咪唑烷基、吡喃基和4-吡啶酮基
(70)HET-2选自氮杂环丁烷基、吗啉代、吗啉基、哌啶基、哌嗪基、吡咯烷基、硫代吗啉基、四氢呋喃基和四氢吡喃基
(71)HET-2选自呋喃基、噻吩基、噻唑基、异噻唑基、噻二唑基、吡啶基、吡嗪基、哒嗪基、吡唑基、咪唑基、嘧啶基、噁唑基、异噁唑基、噁二唑基、吡咯基、1，2，4-三唑基和1，2，3-三唑基
(72)HET-2选自呋喃基、噻吩基、噻唑基、异噻唑基、噻二唑基、吡啶基、咪唑基、嘧啶基、噁唑基、异噁唑基、噁二唑基、哌啶基、哌嗪基、3-氧代哌嗪基、吡咯烷基、吡咯烷酮基、2-噁唑烷酮基、四氢呋喃基、四氢吡喃基、1，1-二氧代四氢噻吩基和2-氧代咪唑烷基
(73)HET-2选自吗啉代、呋喃基、咪唑基、噁唑基、异噁唑基、噁二唑基、哌啶基、哌嗪基、3-氧代哌嗪基、吡咯烷基、2-吡咯烷酮基、2-噁唑烷酮基、四氢呋喃基、四氢吡喃基、1，1-二氧代四氢噻吩基和2-氧代咪唑烷基
(74)HET-2选自吗啉代、呋喃基、咪唑基、异噁唑基、噁二唑基、哌啶基、哌嗪基、3-氧代哌嗪基、吡咯烷基、2-吡咯烷酮基、四氢吡喃基、1，1-二氧代四氢噻吩基和2-氧代咪唑烷基
(75)HET-2为噁二唑基或吡唑基
(76)R5为氢
(77)R5为(1-4)烷基，优选为甲基
(78)R5为氢或甲基
(79)R7为碳上的取代基并且选自羟基、(1-4C)烷氧基、(1-4C)烷基、-C(O)(1-4C)烷基、-C(O)NR4R5、(1-4C)烷氧基(1-4C)烷基和羟基(1-4C)烷基
(80)R7为碳上的取代基并且选自羟基、(1-4C)烷氧基、(1-4C)烷基、-C(O)(1-4C)烷基、-C(O)NR4R5和羟基(1-4C)烷基
(81)R7为碳上的取代基并且选自羟基、甲氧基、-COMe、-CONH2、-CONHMe、-CONMe2和羟基甲基
(82)R7为碳上的取代基并且选自(1-4C)烷基、羟基和(1-4C)烷氧基
(83)R7为碳上的取代基并且选自甲基、乙基、甲氧基和羟基
(84)R7为氮上的取代基并且选自(1-4C)烷基、-C(O)(1-4C)烷基、-C(O)NR4R5、(1-4C)烷氧基(1-4C)烷基和羟基(1-4C)烷基
(85)R7为氮上的取代基并且选自(1-4C)烷基、羟基和(1-4C)烷氧基
(86)R7为甲基
(87)R8选自甲基、羟基、甲氧基、-CONH2、-CONHMe、-CONMe2、羟基甲基、羟基乙基、-NHMe和-NMe2
(88)R8选自甲基、-CONH2、羟基乙基和羟基
(89)R8选自(1-4C)烷基和(1-4C)烷氧基
(90)R8选自甲基、甲氧基和异丙氧基
(91)R8为甲基
(92)R9选自甲基、羟基、甲氧基、-CONH2、-CONHMe、-CONMe2、羟基甲基、羟基乙基、-NHMe和-NMe2
(93)R9为甲基
(94)HET-2为5-元环
(95)HET-2为6-元环
(96)HET-2选自噻吩基、呋喃基、噻唑基、异噻唑基、噻二唑基、吡啶基、吡嗪基、哒嗪基、吡唑基、咪唑基、嘧啶基、噁唑基、异噁唑基和噁二唑基
(97)HET-2选自噻吩基、呋喃基、噻二唑基、吡啶基、吡嗪基、哒嗪基、吡唑基、咪唑基、嘧啶基和噁二唑基
(98)HET-2选自吡啶基、吡嗪基、噻唑基和噻吩基
(99)HET-2选自吡啶基、吡嗪基和噻唑基
(101)HET-2选自吡啶基、吡嗪基、哒嗪基和噻唑基
(102)HET-2选自吡啶基和吡嗪基
(103)HET-2为吡嗪基
(104)HET-2在氮上未被取代
(105)HET-2具有1个选自R8的氮取代基
(106)R8为(1-4C)烷基
(107)R8为(3-6C)环烷基
(108)R8为羟基(1-4C)烷基或(1-4C)烷氧基(1-4C)烷基
(109)R8为-C(O)(1-4C)烷基
(110)R8为苄基
(111)R8为(1-4C)烷基磺酰基
(112)R8为(1-4C)烷基或苄基
根据本发明的另一个特征，提供以下优选的几组本发明化合物：
本发明的一个方面提供式(I)化合物或其盐，其中
R1选自氟代甲氧基甲基和二氟甲氧基甲基(尤其是二氟甲氧基甲基)；
R2选自-C(O)NR4R5、-SO2NR4R5和-SOpR4；
环A为吡啶基或吡嗪基；
R3选自氟和氯；
n为0或1；
HET-1选自吡唑基(用乙基、异丙基、二氟甲基或者1或2个甲基任选取代)、噻唑基(用甲基任选取代)、吡嗪基(用甲基任选取代)、吡啶基(用氟任选取代)、异噁唑基(用甲基任选取代)和噻二唑基(用甲基任选取代)；
R4为氢或(1-4C)烷基；
R5为氢或(1-4C)烷基；
p为0、1或2，尤其是2。
本发明的另一个方面提供式(I)化合物或其盐，其中
R1选自氟代甲氧基甲基和二氟甲氧基甲基(尤其是二氟甲氧基甲基)；
R2选自-C(O)NR4R5和-SOpR4；
环A为吡啶基或吡嗪基；
R3选自氟和氯；
n为0或1；
HET-1选自吡唑基(用甲基任选取代)和吡嗪基(用甲基任选取代)；
R4为(1-4C)烷基；
R5为氢或(1-4C)烷基；
p为0、1或2，尤其是2。
本发明的另一个方面提供式(I)化合物或其盐，其中
R1选自氟代甲氧基甲基和二氟甲氧基甲基(尤其是二氟甲氧基甲基)；
R2选自-C(O)NR4R5和-SOpR4；
环A为吡啶基或吡嗪基；
R3选自氟和氯；
n为0或1；
HET-1选自吡唑基(用甲基任选取代)和吡嗪基(用甲基任选取代)；
R4为甲基；
R5为氢或甲基；
p为0、1或2，尤其是2。
本发明另外优选的化合物为实施例中的每一个，其中每一个提供本发明另外的独立的方面。在另外的方面，本发明也包括实施例的任何两个或更多个化合物。
本发明的具体化合物包括以下的任何一个或多个化合物或其盐：
3-[(2S)-1-(二氟甲氧基)丙-2-基]氧基-N-(5-甲基吡嗪-2-基)-5-(6-甲基磺酰基吡啶-3-基)氧基-苯甲酰胺；
5-[3-[(2S)-1-(二氟甲氧基)丙-2-基]氧基-5-[(5-甲基吡嗪-2-基)氨基甲酰基]苯氧基]-N，N-二甲基-吡嗪-2-甲酰胺；
5-[3-[(2S)-1-(二氟甲氧基)丙-2-基]氧基-5-(1H-吡唑-3-基氨基甲酰基)苯氧基]-N，N-二甲基-吡嗪-2-甲酰胺；
3-[(2S)-1-(二氟甲氧基)丙-2-基]氧基-5-(6-甲基磺酰基吡啶-3-基)氧基-N-(1H-吡唑-3-基)苯甲酰胺；
5-[3-[(2S)-1-(二氟甲氧基)丙-2-基]氧基-5-[(1-甲基吡唑-3-基)氨基甲酰基]苯氧基]-N，N-二甲基-吡嗪-2-甲酰胺；
3-[(2S)-1-(二氟甲氧基)丙-2-基]氧基-N-(1-甲基吡唑-3-基)-5-(6-甲基磺酰基吡啶-3-基)氧基-苯甲酰胺。
本发明化合物可以前药的形式给药。前药为可在体内降解产生本发明化合物的生物学前体(bioprecursor)或药学上可接受的化合物(例如本发明化合物的酯或酰胺，尤其是体内可水解的酯)。各种形式的前药是本领域已知的。这样前药衍生物的实例参见：
a)Design of Prodrugs，H.Bundgaard编辑，(Elsevier，1985)和Methods in Enzymology，第42卷，第309-396页，K.Widder等编辑.(Academic Press，1985)；
b)药物设计和开发教科书(A Textbook of Drug Design andDevelopment)，Krogsgaard-Larsen编辑；
c)H.Bundgaard，第5章“前药的设计和应用(Design andApplication of Prodrugs)”，H.Bundgaard编辑，第113-191页(1991)；
d)H.Bundgaard，现代药物传递评述(Advanced Drug DeliveryReviews)，8，1-38(1992)；
e)H.Bundgaard等.Journal of Pharmaceutical Sciences，77，285(1988)；和
f)N.Kakeya等.Chem Pharm Bull，32，692(1984)。
以上引用文献的内容在此通过参照结合到本文中。
前药的实例如下。含有羧基或羟基的本发明化合物的体内可水解的酯为例如其在人或动物体内水解产生母体酸或醇的药学上可接受的酯。对于羧基合适的药学上可接受的酯包括C1-C6烷氧基甲基酯例如甲氧基甲基、C1-C6链烷酰氧基甲基酯例如新戊酰氧基甲基、酞基酯；C3-C8环烷氧基羰氧基C1-C6烷基酯例如1-环己基羰氧基乙基；1，3-二氧杂环戊烯-2-酮基(dioxolen-2-onyl)甲基酯例如5-甲基-1，3-间二氧杂环戊烯-2-酮基甲基；以及C1-6烷氧基羰氧基乙基酯。
含有羟基的本发明化合物的体内可水解的酯包括无机酯例如磷酸酯(包括氨基磷酸环状酯)和α-酰氧基烷基酯及作为体内酯水解降解的结果得到母体羟基的相关化合物。α-酰氧基烷基酯的实例包括乙酰氧基甲氧基和2，2-二甲基丙酰氧基-甲氧基。对于羟基的体内可水解酯形成基团的选择包括链烷酰基、苯甲酰基、苯乙酰基和取代的苯甲酰基与苯乙酰基、烷氧基羰基(得到烷基碳酸酯)、二烷基氨基甲酰基和N-(二烷基氨基乙基)-N-烷基氨基甲酰基(得到氨基甲酸酯)、二烷基氨基乙酰基和羧基乙酰基。
在某些情况下，式(I)化合物可形成药学上可接受的盐。本发明化合物合适的药学上可接受的盐为例如其为足够碱性的本发明化合物的酸加成盐，例如与无机或有机酸如盐酸、氢溴酸、硫酸、磷酸、三氟乙酸、柠檬酸或马来酸形成的酸加成盐。应该理解酸加成盐可用任何足够碱性的其可为例如以HET-1形式存在或者例如可为取代基R2的基团形成。另外足够酸性的本发明化合物合适的药学上可接受的盐为碱金属盐例如钠或钾盐、碱土金属盐例如钙或镁盐、铵盐或与提供生理学上可接受的阳离子的有机碱形成的盐，例如与甲胺、二甲胺、三甲胺、哌啶、吗啉或三-(2-羟基乙基)胺形成的盐。
本发明的另一个特征为含有如上定义的式(I)化合物或其药学上可接受的盐与药学上可接受的稀释剂或载体一起的药用组合物。
本发明的另一个方面提供用作药物的如上定义的式(I)化合物或其药学上可接受的盐。
本发明的另一个方面提供如上定义的式(I)化合物或其药学上可接受的盐，其用作治疗通过GLK介导的疾病，尤其是2型糖尿病的药物。
另外本发明提供式(I)化合物或其药学上可接受的盐在制备用于治疗通过GLK介导的疾病，尤其是2型糖尿病的药物中的用途。
所述化合物适合配制为用于该方法的药用组合物。
本发明的另一个方面提供通过给予需要这样治疗的哺乳动物有效量的式(I)化合物或其药学上可接受的盐治疗GLK介导的疾病，尤其是糖尿病的方法。
本发明的另一个方面提供式(I)化合物或其药学上可接受的盐用于治疗通过GLK介导的疾病的用途。
本发明的另一个方面提供式(I)化合物或其药学上可接受的盐用于治疗2型糖尿病的用途。
可用本发明的化合物或组合物治疗的具体疾病包括：2型糖尿病中血液葡萄糖降低而没有严重的低血糖风险(并且可能治疗1型)，血脂异常、肥胖症、胰岛素抗性、代谢综合征X、受损的糖耐量。
如以上讨论的那样，因此GLK/GLKRP系统可被描述为潜在的“糖尿肥胖症”靶标(在糖尿病和肥胖症两者具有益处)。因此，本发明的另一个方面提供式(I)化合物或其药学上可接受的盐在制备用于联合治疗或预防，尤其是治疗糖尿病和肥胖症的药物中的用途。
本发明的另一个方面提供式(I)化合物或其药学上可接受的盐在制备用于治疗或预防肥胖症的药物中的用途。
本发明的另一个方面提供通过给予需要这样治疗的哺乳动物有效量的式(I)化合物或其药学上可接受的盐联合治疗肥胖症和糖尿病的方法。
本发明的另一个方面提供用作治疗或预防，尤其是治疗肥胖症的药物的如上定义的式(I)化合物或其药学上可接受的盐。
本发明的另一个方面提供通过给予需要这样治疗的哺乳动物有效量的式(I)化合物或其药学上可接受的盐治疗肥胖症的方法。
例如由于有利的物理和/或药物动力学性质和/或毒性状况，本发明化合物可尤其适合用作药物。
本发明的组合物可以适合于口服使用(例如作为片剂、锭剂、硬或软胶囊剂、水或油混悬剂、乳剂、可分散粉末或颗粒剂、糖浆剂或酏剂)、局部使用(例如作为霜剂、软膏剂、凝胶剂或者水或油溶液剂或混悬剂)、通过吸入给药(例如作为细分的粉末或液体气雾剂)、通过吹入给药(例如作为细分的粉末)或非肠道给药(例如作为用于静脉内、皮下、肌内或肌内给药的灭菌水或油溶液剂或者作为用于直肠给药的栓剂)的形式存在。适合于口服的剂型为优选。
通过常规方法，采用本领域熟知的常规药用赋形剂，可得到本发明的组合物。因此，打算用于口服的组合物可包含例如一种或多种着色剂、甜味剂、矫味剂和/或防腐剂。
用于片剂的合适的药学上可接受的赋形剂包括例如惰性稀释剂如乳糖、碳酸钠、磷酸钙或碳酸钙；颗粒剂和崩解剂例如玉米淀粉或藻酸、粘合剂例如淀粉；润滑剂例如硬脂酸镁、硬脂酸或滑石粉；防腐剂例如对-羟基苯甲酸乙酯或丙酯、抗氧剂例如抗坏血酸等。片剂可为未包衣或被包衣以改变其在胃肠道内崩解和活性组分的随后吸收或者改善它们的稳定性和/或外观，在两者中的任何一种情况下，采用本领域熟知的常规包衣剂和方法。
用于口服用途的组合物可以其中活性组分与惰性固体稀释剂例如碳酸钙、磷酸钙或高岭土混合的硬明胶胶囊形式或者作为其中活性组分与水或油例如花生油、液体石蜡或橄榄油混合的软明胶胶囊存在。
水混悬剂通常包含以与一种或多种悬浮剂例如羧甲基纤维素钠、甲基纤维素、羟丙基甲基纤维素、藻酸钠、聚乙烯-吡咯烷酮、黄蓍胶和阿拉伯胶；分散或湿润剂例如卵磷脂或环氧烷烃与脂肪酸的缩合产物(例如聚氧乙烯硬脂酸酯)或环氧乙烷与长链脂肪醇的缩合产物例如十七碳亚乙基氧基鲸蜡醇(heptadecaethyleneoxycetanol)，或环氧乙烷与衍生于脂肪酸和己糖醇的偏酯的缩合产物例如聚氧乙烯山梨醇单油酸酯，或环氧乙烷与长链脂肪醇的缩合产物例如十七碳亚乙基氧基鲸蜡醇，或环氧乙烷与衍生于脂肪酸和己糖醇的偏酯的缩合产物例如聚氧乙烯山梨醇单油酸酯，或环氧乙烷与衍生于脂肪酸和己糖醇酐的偏酯的缩合产物例如聚乙烯脱水山梨糖醇单油酸酯一起的细粉末形式存在的活性组分。水混悬剂也可包含一种或多种防腐剂(例如对-羟基苯甲酸乙酯或丙酯)、抗氧剂(例如抗坏血酸)、着色剂、矫味剂和/或甜味剂(例如蔗糖、糖精或阿司帕坦)。
通过将活性组分悬浮于植物油(例如花生油、橄榄油、芝麻油或椰子油)或矿物油(例如液体石蜡)中可配制油混悬剂。油混悬剂也可包含增稠剂例如蜂蜡、硬石蜡或鲸蜡醇。可加入甜味剂例如以上提及的那些甜味剂和矫味剂以提供适口的口服制剂。通过加入抗氧剂例如抗坏血酸可使这些组合物防腐。
适合于通过加入水制备水混悬剂的可分散粉末和颗粒通常含有与分散或润湿剂、悬浮剂和一种或多种防腐剂一起的活性组分。合适的分散或润湿剂与悬浮剂通过以上已经提及的那些举例说明。也可存在另外的赋形剂例如甜味剂、矫味剂和着色剂。
本发明的药用组合物也可以水包油乳剂的形式存在。油相可为植物油例如橄榄油或花生油或者矿物油例如液体石蜡或任何这些的混合物。合适的乳化剂可为例如天然存在的树胶例如阿拉伯树胶或黄蓍胶、天然存在的磷脂例如大豆、卵磷脂；衍生于脂肪酸和己糖醇酐混合物的酯或偏酯(例如脱水山梨糖醇单油酸酯)和所述偏酯与环氧乙烷的缩合产物例如聚氧乙烯脱水山梨糖醇单油酸酯。乳剂也可包含甜味剂、矫味剂和防腐剂。
糖浆剂和酏剂可用甜味剂例如甘油、丙二醇、山梨醇、阿司帕坦或蔗糖配制并且也可包含缓和剂、防腐剂、矫味剂和/或着色剂。
药用组合物也可以灭菌注射水或油混悬剂的形式存在，其可按照已知方法，采用一种或多种以上已经提及的合适的分散或润湿剂和悬浮剂配制。灭菌注射制剂也可为在非毒性非肠道可接受的稀释剂或溶剂中的灭菌注射溶液剂或混悬剂，例如在1，3-丁二醇中的溶液。
用于通过吸入给药的组合物可以被为常规加压气雾剂的形式，其被配制为或者作为含有细分的固体或者为液体小滴的气雾剂分配活性成分。可使用常规气雾抛射剂例如挥发性氟化烃或烃并且气雾装置被便利地设计为分配计量定量的活性组分。
为获得关于制剂的更多信息，读者参阅综合性药物化学的第5卷中的章节25.2(Comprehensive Medicinal Chemistry)(Corwin Hansch；Chairman of Editorial Board)，Pergamon Press 1990。
与一种或多种赋形剂联合产生单一剂型的活性组分的量将依所治疗的宿主和具体给药途径而定进行必要地变化。例如，打算用于口服给予人的制剂通常含有例如与可在约5-98％(重量)的总组合物变化的合适和便利量的赋形剂一起的0.5mg-2g活性药物化合物。剂量单位形式通常含有约1mg-500mg的活性组分。关于给药途径和剂量方案的更多信息，读者参阅综合性药物化学的第5卷中的章节25.3(Comprehensive Medicinal Chemistry)(Corwin Hansch；Chairman ofEditorial Board)，Pergamon Press 1990。
用于式(I)化合物的治疗或预防性目的的给药量自然根据病症的性质和严重性、动物或患者的年龄和性别及给药途径，根据熟知的医学原理而变化。
在采用式(I)化合物用于治疗或预防性目的时，如果要求分开的剂量，通常给药以接受例如在0.5mg-75mg/kg体重范围内的每天剂量。当采用非肠道途径时，通常给予较低剂量。因此，例如对于静脉给药，通常采用例如在0.5mg-30mg/kg体重范围内的剂量。类似地，对于通过吸入给药，将采用例如在0.5mg-25mg/kg体重范围内的剂量。然而，口服给药为优选。
在此描述的提高GLK活性可用作单一疗法或者与一种或多种其它用于所治疗适应症的物质和/或治疗联合使用。这样的联合治疗可通过同时、连续或分开给予各治疗组分实现。同时治疗可以单一片剂或分开的片剂形式呈现。例如在治疗糖尿病中，化疗可包括以下主要治疗种类：
1)胰岛素和胰岛素类似物；
2)胰岛素促分泌素包括磺酰脲类(例如格列本脲、格列吡嗪)、餐时血糖调节剂(例如瑞格列奈、那格列奈)；
3)改善肠促胰岛素作用的药物(例如二肽基肽酶IV抑制剂和GLP-1激动剂)；
4)胰岛素增敏剂包括PPARγ激动剂(例如吡格列酮和罗格列酮)和具有PPARα和γ联合活性的药物；
5)调节肝葡萄糖平衡的药物(例如二甲双胍、果糖-1，6-二磷酸酯酶抑制剂、糖原磷酸化酶抑制剂、糖原合酶激酶抑制剂)；
6)被设计减少葡萄糖自肠吸收的药物(例如阿卡波糖)；
7)防止葡萄糖经肾脏再吸收的药物(SGLT抑制剂)；
8)被设计治疗延长的高血糖并发症的药物(例如醛糖还原酶抑制剂)；
9)减肥药(例如西布曲明和奥利司他)；
10)抗血脂紊乱药物例如HMG-CoA还原酶抑制剂(如他汀类)、PPARα激动剂(贝特类如吉非贝齐)、胆汁螫合剂(考来稀胺)、胆固醇吸收抑制剂(植物甾烷醇，合成抑制剂)；胆汁酸吸收抑制剂(IBATi)和烟酸及类似物(烟酸和慢释放制剂)；
11)抗高血压药物例如β-阻断剂(例如阿替洛尔、盐酸普萘洛尔)、ACE抑制剂(例如赖诺普利)、钙拮抗剂(例如硝苯地平)、血管紧张素受体拮抗剂(例如坎地沙坦)、α拮抗剂和利尿药(例如呋塞米、苄噻嗪)；
12)淤血(Haemostasis)调节剂例如抗血栓药、纤维蛋白溶解激活剂和抗血小板药物、凝血酶拮抗剂、Xa因子抑制剂、VIIa因子抑制剂)、抗血小板药物(例如阿司匹林、氯吡格雷)、抗凝血药(肝素和低分子量类似物、水蛭素)和华法林；
13)拮抗胰高血糖素作用的药物；和
14)抗炎药例如非甾体抗炎药(例如阿司匹林)和甾体抗炎药(例如可的松)。
本发明的另一个方面提供作为在以下阐述的实施例中的终产物产生的各化合物及其盐。
本发明化合物或其盐可通过已知可用于制备这样化合物或结构相关化合物的任何方法制备。官能团可采用常规方法保护和脱保护。保护基的实例例如氨基和羧酸保护基(以及形成和最终脱保护的方法)参见T.W.Greene和P.G.M.Wuts，“有机合成中的保护基(ProtectiveGroups in Organic Synthesis)”，第二版，John Wiley & Sons，New York，1991。
用于合成式(I)化合物的方法作为本发明的另外特征提供。因此，本发明的另一个方面提供用于制备式(I)化合物的方法，方法包括步骤a)-e)(其中变量如上文对式(I)化合物的定义，除非另外指明)：
(a)使式(III)的酸或其活性衍生物与式(IV)化合物反应，其中R1如对式(I)的定义或者为其前体；
Figure G2007800474769D00241
或者
(b)使式(V)化合物与式(VI)化合物反应，
其中X1为离去基团和X2为羟基或者X1为羟基和X2为离去基团，并且其中R1如对式(I)的定义或者为其前体；
步骤(b)也可采用中间体酯式(VII)实现，其中P1为如上文描述的保护基，随后通过在别处描述的和本领域技术人员熟知的方法进行酯水解和形成酰胺；
Figure G2007800474769D00251
或者
(c)使式(VIII)化合物与式(IX)化合物反应
Figure G2007800474769D00252
其中X3为离去基团或有机金属试剂和X4为羟基或者X3为羟基和X4为离去基团或有机金属试剂，并且其中R1如对式(I)的定义或者为其前体；
步骤(c)也可采用中间体酯式(X)实现，随后通过在别处描述的和本领域技术人员熟知的方法进行酯水解和形成酰胺；
Figure G2007800474769D00253
或者
(d)使式(XI)化合物与式(XII)化合物反应，
Figure G2007800474769D00254
其中X5为离去基团；并且其中R1如对式(I)的定义或者为其前体；或者
e)使式(XIII)化合物与式-NR4R5的胺反应
Figure G2007800474769D00261
其中R2a为R2作为-CONR4R5或-SO2R4R5的前体，例如羧酸、酯或酸酐(适于R2＝-CONR4R5)或磺酸等价物(适于R2为-SO2NR4R5)；
并且之后，如果必要：
i)将式(I)化合物转化为另一种式(I)化合物；
ii)将R1的前体转化为R1；
iii)除去任何保护基；和/或
iv)形成其盐。
用于步骤b)-d)的合适的离去基团X1-X5为本领域已知用于这些反应类型的任何离去基团例如卤代、烷氧基、三氟甲磺酰氧基、甲磺酰氧基或对-甲苯磺酰氧基或者可原位转化为离去基团(例如氧基三苯基磷鎓基团)的基团(例如羟基)。
R1的合适前体包括羟基或保护的羟基，例如本领域已知的任何适当保护的羟基，如简单醚类例如甲醚或甲硅烷基醚例如-OSi[(1-4C)烷基]3(其中每一个(1-4C)烷基独立地选自甲基、乙基、丙基、异丙基和叔丁基)。这样的三烷基甲硅烷基的实例为三甲基甲硅烷基、三乙基甲硅烷基、三异丙基甲硅烷基和叔丁基二甲基甲硅烷基。其它合适的甲硅烷基醚为含有苯基和取代苯基的那些，例如-Si(PhMe2)和-Si(TolMe2)(其中Tol＝甲基苯)。对于羟基保护基的另外合适的值在下文给出。然后R1本身可通过除去羟基保护基(如果存在的话)产生，并且然后通过与例如2-(氟磺酰基)二氟乙酸在碘化铜(I)存在下反应得到所述化合物，其中R1为二氟甲氧基甲基。该反应阐述于流程1中。R1的其它值可类似地或通过本领域熟知的方法产生，参见例如Bull.Chem.Soc.Japan，73(2000)，471-484，471-484，国际专利申请WO2002/050003和Bioorganic and Medicinal Chemistry Letters，(2001)，11，407。
式(III)-(XII)化合物为市售可得到的或者是本领域已知的或者可通过本领域已知的方法制备，例如如在所附实施例中显示的。关于制备这样化合物方法的更多信息，我们参照我们的PCT公布号WO03/000267、WO 03/015774、WO 03/000262、WO 2004/076420、WO2005/054200、WO 2005/054233、WO 2005/044801和WO 2005/056530及其中的参考文献。通常我们应意识到任何芳基-O或烷基-O键可通过任选地在合适的碱存在下的亲核取代或金属催化方法形成。
式(XIII)化合物可通过方法例如在步骤a)-d)中显示的那些方法和/或通过以上有关对式(III)-(XII)化合物提及的那些方法制备。
通过使合适的前体与式(V)化合物或其衍生物反应，这取决于R1基团或其前体的性质，例如通过式(V)化合物中的离去基团X1的亲核置换，可制备式(III)、(IX)、(X)、(XI)和(XIII)的化合物。式(V)化合物通常为市售可得到的或者可通过自市售可得到的化合物简的单官能团变换或者通过文献方法制备。当式(V)化合物含有R1的前体时，合适时，采用例如在以下流程1和2中阐述的那些反应，可生成式(III)、(IX)、(X)、(XI)或(XIII)化合物中的R1基团。例证性实例显示在以下流程1和2中和/或在伴随的实施例中。
Figure G2007800474769D00281
流程1
其中：
PG为保护基和R2、R3、A、n和HET-1如对式(I)的定义。
Figure G2007800474769D00282
流程2
其中：
R2、R3、A和n如对式(I)的定义，P1和P2为合适的保护基，例如(1-4C)烷基，和X3为离去基团。例如氯。用于流程2的步骤(i)-(v)的合适的反应条件如下：
步骤(i)包括在合适的碱例如碳酸铯存在下，在合适的溶剂例如DMSO中和在合适的温度例如0-60℃下，更合适地在约50℃下，使式(XIV)与式(VIII)化合物例如5-氯-N，N-二甲基-吡嗪-2-甲酰胺反应。
步骤(ii)包括在合适的膦例如三苯基膦和偶氮二羧酸酯例如偶氮二羧酸二乙基酯存在下，在合适的溶剂例如THF中和在合适的温度例如0-10℃下，更合适地在约0℃，使式(VII)化合物与R-醇例如(2R)-1-[(2-甲基丙-2-基)氧基]丙-2-醇反应。
步骤(iii)包括在合适的酸例如甲酸中，于合适的温度例如0-50-100℃下，更合适地在约90℃下，加热式(XV)的溶液。
步骤(iv)包括在合适的催化剂例如碘化铜(I)存在下，于合适的溶剂例如乙腈中和在合适的温度例如0-100℃下，更合适地在约55℃下，使式(XVI)化合物与2，2-二氟-2-氟磺酰基-乙酸反应。
步骤(v)包括在合适的溶剂例如NMP和水中和于合适的温度例如0-25℃下，更合适地在约0℃，使式(XVIIa)化合物与合适的碱例如NaOH反应。
或者，可按照如以下显示的流程3制备其中R1表示二氟甲氧基甲基的式(IIIa)化合物。
流程3
其中：
R2、R3、A和n如对式(I)的定义，P1和P2为合适的保护基，例如分别为(1-4C)烷基和TIPS并且X3为离去基团例如氯。用于流程2的步骤(i)-(v)合适的反应条件如下：
步骤(i)包括在合适的催化剂例如10％披钯活性炭存在下和于合适的温度例如0-25℃下，更合适地在约21℃下，使式(XVIII)化合物与氢反应。
步骤(ii)包括在合适的碱例如碳酸钾存在下，于合适的溶剂例如乙腈中和在合适的温度例如0-200℃下，更合适地在约回流温度下，使式(XIX)化合物与式(VIII)化合物例如5-氯-N，N-二甲基-吡嗪-2-甲酰胺反应。
步骤(iii)包括在合适的溶剂例如THF中和于合适的温度例如0-25℃下，更合适地在约21℃下，使式(XV)化合物与氟化氢反应。
步骤(iv)包括在合适的催化剂例如碘化铜(I)存在下，于合适的溶剂例如乙腈中和在合适的温度例如0-100℃下，更合适地在约55℃下，使式(XVI)化合物与2，2-二氟-2-氟磺酰基-乙酸反应。
步骤(v)包括在合适的溶剂例如THF和甲醇中和于合适的温度例如0-25℃下，更合适地在约21℃下，使式(XVIIa)化合物与合适的碱例如LiOH反应。
本领域技术人员熟知的式(I)化合物转化为另一种式(I)化合物的实例包括官能团互换例如水解、氢化、氢解、氧化或还原和/或通过标准反应例如酰胺或金属催化的偶合或者亲核置换反应的官能作用。一个实例为例如通过在合适的溶剂例如THF/甲醇或乙醇中，于大气压或升高的压力下与氢反应，除去R3＝氯取代基。
应该理解取代基R2、R3和/或R6可以合成顺序，在任何便利的位点引入到分子中或者可存在于起始原料中。这些取代基之一的前体可在以上方法步骤a)-e)期间存在于分子中并然后作为最后步骤转化为要求的取代基以形成式(I)化合物；随后，必要时
i)将式(I)化合物转化为另一种式(I)化合物；
ii)将R1的前体转化为R1；
iii)除去任何保护基；和/或
iv)形成其盐。
用于以上反应的具体反应条件如下，其中当P1为保护基时，P1优选地为(1-4C)烷基，例如甲基或乙基：
方法a)-氨基与羧酸的偶合反应形成酰胺是本领域熟知的。例如，
(i)采用合适的偶合反应，例如在二甲基氨基吡啶(DMAP)存在下，于合适的溶剂例如二氯甲烷(DCM)、氯仿或二甲基甲酰胺(DMF)中，在室温下，用EDAC(1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐)实施碳二亚胺偶合反应；或者
(ii)在合适的溶剂例如DCM或DMF中，其中羧基通过与草酰氯或1-氯-N，N，2-三甲基-1-丙烯基胺反应活化为酰氯的反应。然后在碱例如三乙胺或吡啶存在下，于合适的溶剂例如氯仿或DCM中，在0℃-80℃之间的温度下，酰氯可与式(IV)化合物反应。
方法b)-在合适的溶剂例如DMF或四氢呋喃(THF)中，用碱例如氢化钠或叔丁醇钾，于0-200℃范围内的温度下，任选地采用微波加热或金属催化作用例如乙酸钯(II)、披钯炭、乙酸铜(II)或碘化铜(I)，式(V)和(VI)化合物可一起反应；或者，在合适的溶剂例如THF或DCM中，用合适的膦例如三苯基膦和偶氮二羧酸酯例如偶氮二羧酸二乙基酯，式(V)和(VI)化合物可一起反应；也可采用式(VII)酯的前体例如芳基腈或三氟甲基衍生物实施方法b)，随后如先前描述转化为羧酸和形成酰胺；
方法c)-在合适的溶剂例如DMF或THF中，用碱例如氢化钠或叔丁醇钾，于0-200℃范围内的温度下，任选地采用微波加热或金属催化作用例如乙酸钯(II)、披钯炭、乙酸铜(II)、碘化铜(I)或溴化三(三苯基膦)铜(I)，式(VIII)和(IX)化合物可一起反应；也可采用式(X)酯的前体例如芳基腈或三氟甲基衍生物实施方法c)，随后如先前描述的那样转化为羧酸和形成酰胺；
方法d)-在极性溶剂例如DMF或非极性溶剂例如THF中，用强碱例如氢化钠或叔丁醇钾，于0-200℃之间的温度下，任选地采用微波加热或金属催化例如乙酸钯(II)、披钯炭、乙酸铜(II)或碘化铜(I)，可实施式(XI)化合物与式(XII)化合物的反应；
方法e)-氨基与羧酸或磺酸或酸衍生物形成酰胺的偶合反应是本领域熟知的并且在以上对方法a)中得到描述。
确信式(III)、(VI)、(VII)、(IX)和/或(XI)的某些中间体是新的并且包括本发明的独立方面。
确信其中R1如在此定义的式(III)、(IX)和/或(XI)的某些中间体是新的并且包括本发明的独立方面。
确信式(XIII)的某些中间体是新的并且包括本发明的独立方面。
在制备方法期间，可以有利的是对分子内的官能团采用保护基。在合适时，通过如在文献中描述的或熟练化学工作者已知用于除去所涉及保护基的任何便利方法可除去保护基，选择这样的方法以有效除去保护基而对分子中的别处基团的干扰最小。
为便利起见，以下给出保护基的具体实例，其中“低级”意指所应用的基团优选地具有1-4个碳原子。应该理解这些实例不是穷举的。当以下给出用于除去保护基的方法的具体实例时，这些同样不是穷举的。未具体提及的保护基和去保护方法的使用属于本发明的范围内。
羧基保护基可为酯形成脂族或芳脂族(araliphatic)醇的残基或者酯形成硅烷醇的残基(所述醇或硅烷醇优选地含有1-20个碳原子)。羧基保护基的实例包括直或支链(1-12C烷基(例如异丙基、叔丁基)、低级烷氧基低级烷基(例如甲氧基甲基、乙氧基甲基、异丁氧基甲基)、低级脂族酰氧基低级烷基(例如乙酰氧基甲基、丙酰氧基甲基、丁酰氧基甲基、新戊酰氧基甲基)、低级烷氧基羰氧基低级烷基(例如1-甲氧基羰氧基乙基、1-乙氧基羰氧基乙基)、芳基低级烷基(例如对-甲氧基苄基、邻-硝基苄基、对-硝基苄基、二苯甲基和酞基)、三(低级烷基)甲硅烷基(例如三甲基甲硅烷基和叔丁基二甲基甲硅烷基)、三(低级烷基)甲硅烷基低级烷基(例如三甲基甲硅烷基乙基)和(2-6C)链烯基(例如烯丙基和乙烯基乙基)。
尤其适合于除去羧基保护基的方法包括例如酸-、金属-或酶-催化的水解。
羟基保护基的实例包括甲基、叔丁基、低级链烯基(例如烯丙基)、低级链烷酰基(例如乙酰基)、低级烷氧基羰基(例如叔丁氧基羰基)、低级链烯氧基羰基(例如烯丙氧基羰基)、芳基低级烷氧基羰基(例如苯甲酰氧基羰基、对-甲氧基苄氧基羰基、邻-硝基苄氧基羰基、对-硝基苄氧基羰基)、三低级烷基/芳基甲硅烷基(例如三甲基甲硅烷基、叔丁基二甲基甲硅烷基、叔丁基二苯基甲硅烷基)、四氢吡喃-2-基、芳基低级烷基(例如苄基)和三芳基低级烷基(例如三苯基甲基)。
氨基保护基的实例包括甲酰基、芳烷基(例如苄基和取代的苄基，如对-甲氧基苄基、硝基苄基和2，4-二甲氧基苄基及三苯基甲基)、二-对-甲氧苯基甲基和呋喃基甲基、低级烷氧基羰基(例如叔丁氧基羰基)、低级链烯氧基羰基(例如烯丙氧基羰基)、芳基低级烷氧基羰基(例如苄氧基羰基、对-甲氧基苄氧基羰基、邻-硝基苄氧基羰基、对-硝基苄氧基羰基)、三烷基甲硅烷基(例如三甲基甲硅烷基和叔丁基二甲基甲硅烷基)、亚烷基(例如亚甲基)、亚苄基和取代的亚苄基。
适合于除去羟基和氨基保护基的方法包括例如对基团如邻-硝基苄氧基羰基的亲核置换；酸-、碱-、金属-或酶-催化的水解；催化氢解/氢化或光解或者对甲硅烷基用氟离子。例如，对羟基的甲醚保护基可用三甲基甲硅烷基碘除去。对羟基的叔丁基醚保护基可通过水解除去，例如通过使用甲醇中的盐酸。
用于酰胺基团的保护基的实例包括芳烷氧基甲基(例如苄氧基甲基和取代的苄氧基甲基)、烷氧基甲基(例如甲氧基甲基和三甲基甲硅烷基乙氧基甲基)、三烷基/芳基甲硅烷基(例如三甲基甲硅烷基、叔丁基二甲基甲硅烷基、叔丁基二苯基甲硅烷基)、三烷基/芳基甲硅烷基氧基甲基(例如叔丁基二甲基甲硅烷基氧基甲基、叔丁基二苯基甲硅烷基氧基甲基)、4-烷氧基苯基(例如4-甲氧基苯基)、2，4-二(烷氧基)苯基(例如2，4-二甲氧基苯基)、4-烷氧基苄基(例如4-甲氧基苄基)、2，4-二(烷氧基)苄基(例如2，4-二(甲氧基)苄基)和链-1-烯基(例如烯丙基、丁-1-烯基和取代的乙烯基如2-苯基乙烯基)。
通过使酰胺基团与合适的芳烷氧基甲基氯化物反应并通过催化氢化除去，可向酰胺基团引入芳烷氧基甲基。通过使酰胺与合适的氯化物反应并用酸除去；或者在含有甲硅烷基的基团的情况下用氟离子，可引入烷氧基甲基、三烷基/芳基甲硅烷基和三烷基/甲硅烷基氧基甲基。通过用合适的卤化物芳基化或烷基化和通过用硝酸铈铵氧化除去，便利地引入烷氧基苯基和烷氧基苄基。最后，通过使酰胺与合适的醛反应并用酸除去，可引入链-1-烯基。
在以上其它药用组合物、步骤、方法、用途和药物制备特征中，在此描述的本发明化合物的可供选择和优选的方面与实施方案也适用。
以下实施例用于阐述目的并且不打算限制本说明书的范围。每一个例证性的化合物表示本发明的具体和独立方面。除非另外指明，在以下非限定性实施例中：
(i)通过减压下旋转蒸发实施蒸发并在经过滤除去残余固体例如干燥剂后实施后处理程序；
(ii)在室温，即在18-25℃范围和在惰性气体例如氩气或氮气氛围下，实施操作；
(iii)给出收率仅用于阐述并且不必是可达到的最大收率；
(iv)通过核(通常为质子)磁共振(NMR)和质谱技术确证式(I)终产物的结构；质子磁共振化学位移值以δ标度测量并且峰多重性显示如下：s，单峰；d，双峰；t，三重峰；m，多重峰；br，宽峰；q，四重峰；quin，五重峰；六重峰
(v)中间体通常不用完全表征并且纯度经薄层层析(TLC)、高效液相层析(HPLC)、红外(IR)或NMR分析确定；
(vi)在硅胶上实施快速层析，除非另外指明。
缩写
DCM     二氯甲烷；
DEAD    偶氮二羧酸二乙基酯；
DIAD    偶氮二羧酸二异丙基酯；
DIPEA   N，N-二异丙基乙胺；
DMA     二甲基乙酰胺；
DMSO    二甲亚砜；
DMF     二甲基甲酰胺；
EDAC    1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐；
HATU    O-(7-氮杂苯并三唑-1-基)-N，N，N’，N’-四甲基
        脲鎓六氟磷酸盐；
HPLC    高效液相层析；
HPMC    羟丙基甲基纤维素；
LCMS    液相层析/质谱
NMP     N-甲基-2-吡咯烷酮；
NMR     核磁共振光谱；
RT      室温；
THF     四氢呋喃；
TFA     三氟乙酸；
CDCl3   氘化氯仿；
MgSO4   硫酸镁；
PTFE    聚四氟乙烯
TIPS    三异丙基甲硅烷基。
实施例1：3-[(2S)-1-(二氟甲氧基)丙-2-基]氧基-N-(5-甲基吡嗪-2- 基)-5-(6-甲基磺酰基吡啶-3-基)氧基-苯甲酰胺
Figure G2007800474769D00361
将3-[(2S)-1-(二氟甲氧基)丙-2-基]氧基-5-羟基-N-(5-甲基吡嗪-2-基)苯甲酰胺(190mg，0.54mmol)、5-溴-2-甲基磺酰基-吡啶(CAS号98626-95-0)(140mg，0.59mmol)、碳酸铯(350mg，1.08mmol)和溴代三(三苯基膦)铜(I)(101mg，0.11mmol)在DMA(5mL)中的混合物在微波反应器中于160℃下搅拌6小时。加入乙酸乙酯(50mL)并用水(50mL)、盐水(50mL)洗涤混合物，干燥(MgSO4)并真空下减量。将粗品残余物在硅胶上层析，用在异己烷中的10-100％乙酸乙酯洗脱，得到要求的化合物(19mg)。
1H NMRδ(CDCl3)：1.40(d，3H)，2.56(s，3H)，3.23(s，3H)，3.96-4.05(m，2H)，4.65-4.72(m，1H)，6.26(t，1H)，6.86(t，1H)，7.21(t，1H)，7.36(t，1H)，7.46-7.49(m，1H)，8.08(d，1H)，8.15(s，1H)，8.30(s，1H)，8.49(d，1H)，9.52(d，1H)；m/z 509(M+H)+
以下描述3-[(2S)-1-(二氟甲氧基)丙-2-基]氧基-5-羟基-N-(5-甲基吡嗪-2-基)苯甲酰胺的制备。
3-[(2S)-1-(二氟甲氧基)丙-2-基]氧基-5-羟基-N-(5-甲基吡嗪-2-基)苯甲 酰胺
将3-[(2S)-1-(二氟甲氧基)丙-2-基]氧基-N-(5-甲基吡嗪-2-基)-5-苯基甲氧基-苯甲酰胺(0.48g，1.08mmol)溶于乙醇(10mL)和THF(10mL)中，将烧瓶抽真空并用氩气冲洗(3次)。加入10％披钯炭(48mg)并将烧瓶进一步抽真空，最后用氢气冲洗。在室温下搅拌反应混合物20小时。将反应混合物抽真空并用氩气冲洗(3次)，通过Celite过滤除去催化剂。真空浓缩滤液，得到要求的化合物(0.38g)。
1H NMRδ(d6-DMSO)：1.19(d，3H)，2.39(s，3H)，3.85-3.95(m，2H)，4.65-4.72(m，1H)，6.46(s，1H)，6.65(t，1H)，6.93(s，1H)，7.06(s，1H)，8.27(s，1H)，9.16(s，1H)，9.74(s，1H)，10.82(s，1H)；m/z 354(M+H)+
3-[(2S)-1-(二氟甲氧基)丙-2-基]氧基-N-(5-甲基吡嗪-2-基)-5-苯基甲氧 基-苯甲酰胺
Figure G2007800474769D00372
将1-氯-N，N，2-三甲基-丙-1-烯-1-胺(0.26mL，2.0mmol)加入到3-[(2S)-1-(二氟甲氧基)丙-2-基]氧基-5-苯基甲氧基-苯甲酸(0.54g，1.5mmol)在DCM(20mL)中的溶液中并搅拌1小时。先后加入5-甲基吡嗪-2-胺(CAS号5521-58-4)(335mg，3.1mmol)和吡啶(0.25mL，3.1mmol)并搅拌反应物另外30分钟，之后真空下减量并在乙酸乙酯(50mL)和水(50mL)之间分配。用乙酸乙酯(50mL)进一步提取水层并用水(50mL)、盐水(50mL)洗涤合并的有机物，干燥(MgSO4)并真空下减压。将粗品残余物在硅胶上层析化，用在异己烷中的40-100％乙酸乙酯洗脱，得到要求的化合物(0.48g)。
1H NMRδ(CDCl3)：1.39(d，3H)，2.58(s，3H)，3.96-4.05(m，2H)，4.63-4.70(m，1H)，5.13(s，2H)，6.30(t，1H)，6.78(t，1H)，7.09(t，1H)，7.16(t，1H)，7.35-7.48(m，5H)，8.17(s，1H)，8.39(s，1H)，9.58(d，1H)；m/z 444(M+H)+
3-[(2S)-1-(二氟甲氧基)丙-2-基]氧基-5-苯基甲氧基-苯甲酸
将在水(2mL)中的氢氧化锂单水合物(19mg，0.45mmol)加入到在THF(4mL)中的3-[(2S)-1-(二氟甲氧基)丙-2-基]氧基-5-苯基甲氧基-苯甲酸甲酯(0.11g，0.3mmol)中并在室温下搅拌混合物20小时。真空除去THF并用枸橼酸将水层调节至pH3，然后用乙酸乙酯(2×30mL)提取。用水(30mL)、盐水(30mL)洗涤有机物，干燥(MgSO4)，过滤并真空除去溶剂，得到要求的化合物(0.1g)。
1H NMRδ(d6-DMSO)：1.27(d，3H)，4.00(m，2H)，4.75(六重峰，1H)，5.15(s，2H)，6.72(t，1H)，6.87(t，1H)，7.08(t，1H)，7.16(t，1H)，7.41(m，5H)，12.95(s，1H)；m/z 351(M+H)+
3-[(2S)-1-(二氟甲氧基)丙-2-基]氧基-5-苯基甲氧基-苯甲酸甲酯
Figure G2007800474769D00382
伴随搅拌下，将2，2-二氟-2-氟磺酰基-乙酸(CAS号1717-59-5)(0.239mL，2.31mmol)滴加到3-[(2S)-1-羟基丙-2-基]氧基-5-苯基甲氧基-苯甲酸甲酯(0.73g，2.31mmol)和碘化铜(I)(88mg，0.46mmol)在乙腈(10mL)中于45℃下的脱气混合物中。在45℃下搅拌反应物24小时。真空除去溶剂并加入乙酸乙酯(30mL)。用水(30mL)、盐水(30mL)洗涤有机物，干燥(MgSO4)，过滤并真空除去溶剂。将残余物在硅胶上层析，用在异己烷中的0-30％乙酸乙酯梯度洗脱，得到要求的化合物(0.11g)。
1H NMRδ(CDCl3)：1.37(d，3H)，3.93(s，3H)，4.00(m，2H)，4.63(六重峰，1H)，5.10(s，2H)，6.28(t，1H)，6.77(t，1H)，7.28(t，1H)，7.41(m，6H)；m/z 367(M+H)+
3-[(2S)-1-羟基丙-2-基]氧基-5-苯基甲氧基-苯甲酸甲酯
将溴代甲基苯(1.89g，7.20mmol)加入到3-羟基-5-[(2S)-1-羟基丙-2-基]氧基-苯甲酸甲酯(1.55g，6.86mmol)和碳酸钾(1.89g，0.014mol)在DMF(16mL)中的混合物中并在室温下搅拌反应物20小时。加入乙酸乙酯(40mL)并用水(40mL)、饱和碳酸氢钠溶液(40mL)、盐水(40mL)洗涤混合物，干燥(MgSO4)，过滤并真空除去溶剂。将残余物在硅胶上层析，用在异己烷中的0-100％乙酸乙酯梯度洗脱，得到要求的化合物(1.7g)。
1H NMRδ(CDCl3)：1.30(d，3H)，1.95(m，1H)，3.76(m，2H)，3.92(s，3H)，4.53(m，1H)，5.11(s，2H)，6.78(t，1H)，7.25(m，1H)，7.32(m，1H)，7.45(m，5H)；m/z 317(M+H)+
3-羟基-5-[(2S)-1-羟基丙-2-基]氧基-苯甲酸甲酯
Figure G2007800474769D00392
将碘代三甲基硅烷(CAS号16029-98-4)(115mL，0.79mol)加入到3-羟基-5-[(2S)-1-甲氧基丙-2-基]氧基-苯甲酸甲酯(CAS号863504-77-2)(38.01g，0.158mol)在乙腈(500mL)中的溶液中并搅拌24小时。加入甲醇(300mL)并搅拌反应物10分钟。向混合物中加入10％w/v硫代硫酸钠五水合物水溶液(100mL)并搅拌20分钟。用饱和碳酸氢钠水溶液中和反应混合物，真空除去有机溶剂并用乙酸乙酯(4×100mL)提取产物。干燥(MgSO4)合并的有机层，过滤并真空除去溶剂。自乙酸乙酯中将粗品物料结晶，得到要求的化合物(16.8g)。
1H NMRδ(d6-DMSO)：1.18(d，3H)，3.40-3.55(m，2H)，3.80(s，3H)，4.35(六重峰，1H)，4.80(t，1H)，6.57(m，1H)，6.90(m，2H)，9.75(s，1H)；m/z304(M+H)+
3-羟基-5-[(2S)-1-甲氧基丙-2-基]氧基-苯甲酸甲酯
Figure G2007800474769D00401
将3-[(2S)-1-甲氧基丙-2-基]氧基-5-苯基甲氧基-苯甲酸甲酯(CAS号851885-42-2)(50.0g，0.152mmol)溶解于THF：乙醇混合物(600mL)中，将烧瓶抽真空并用氮气冲洗(3次)。加入10％披钯炭(5.0g)并将烧瓶进一步抽真空，最后用氢气冲洗。在环境温度下搅拌反应混合物20小时直到完成。将反应混合物抽真空并用氮气冲洗(3次)。滤除催化剂并真空浓缩滤液，得到要求的化合物(36.7g)。
1H NMRδ(d6-DMSO)：1.2(d，3H)，3.25(s，3H)，3.44(m，2H)，3.82(s，3H)，4.55(m，1H)，6.6(s，1H)，6.9(s，1H)，6.95(s，1H)，9.8(s，1H)
实施例2：5-[3-[(2S)-1-(二氟甲氧基)丙-2-基]氧基-5-[(5-甲基吡嗪-2-基) 氨基甲酰基]苯氧基]-N，N-二甲基-吡嗪-2-甲酰胺
Figure G2007800474769D00402
将3-[(2S)-1-(二氟甲氧基)丙-2-基]氧基-5-羟基-N-(5-甲基吡嗪-2-基)苯甲酰胺(0.19g，0.54mmol)、5-氯-N，N-二甲基-吡嗪-2-甲酰胺(100mg，0.54mmol)和碳酸钾(149mg，1.08mmol)在乙腈(5mL)中的混合物在微波反应器中于140℃下搅拌5小时并真空减少混合物。加入乙酸乙酯(50mL)并用水(50mL)、盐水(50mL)洗涤混合物，干燥(MgSO4)并真空下减量将粗品残余物在硅胶上层析，用在DCM中的0-5％甲醇洗脱，得到要求的化合物(150mg)。
1H NMRδ(CDCl3)：1.40(d，3H)，2.55(s，3H)，3.15(s，3H)，3.18(s，3H)，3.95-4.05(m，2H)，4.64-4.71(m，1H)，6.26(t，1H)，6.97(t，1H)，7.32(t，1H)，7.40(t，1H)，8.13(s，1H)，8.38(d，1H)，8.41(s，1H)，8.53(d，1H)，9.53(d，1H)；m/z 503(M+H)+
3-[(2S)-1-(二氟甲氧基)丙-2-基]氧基-5-羟基-N-(5-甲基吡嗪-2-基)苯甲酰胺的制备在前文中描述。
以下描述5-氯-N，N-二甲基-吡嗪-2-甲酰胺的制备。
5-氯-N，N-二甲基-吡嗪-2-甲酰胺
在室温、氩气下，将草酰氯(1.7mL，19mmol)加入到5-氯吡嗪-2-羧酸(CAS号36070-80-1)(2.53g，16.0mmol)在二氯甲烷(25mL)和DMF(4滴)中的混悬液中。将混合物搅拌1.5小时，真空浓缩并使残余物再次溶解于二氯甲烷(25mL)中。然后滴加二甲胺(2M在THF中，8.77mL，17.6mmol)，随后加入三乙胺(4.9mL，35mmol)并搅拌另外5.5小时。真空浓缩反应混合物，使残余物再次溶解于二氯甲烷中并过滤。将滤液在硅胶上层析化，用在异己烷中的50-100％乙酸乙酯梯度洗脱，得到要求的化合物(1.88g)。
1H NMRδ(CD3OD)：3.34(s，3H)，3.38(s，3H)，8.90(s，1H)，8.92(s，1H)；m/z 186(M+H)+
以下给出另一种可供选择的制备5-[3-[(2S)-1-(二氟甲氧基)丙-2-基]氧基-5-[(5-甲基吡嗪-2-基)氨基甲酰基]苯氧基]-N，N-二甲基-吡嗪-2-甲酰胺的方法：
Figure G2007800474769D00421
将1-氯-N，N，2-三甲基-1-丙胺(6.9mL，52.3mmol)加入到3-[(2S)-1-(二氟甲氧基)丙-2-基]氧基-5-[5-(二甲基氨基甲酰基)吡嗪-2-基]氧基-苯甲酸(17.2g，41.8mmol)在DCM(250mL)中的溶液中并在环境温度下搅拌30分钟。加入5-甲基吡嗪-2-胺(9.1g，83.6mmol)和吡啶(6.8mL，83.6mmol)并搅拌反应物过夜。减压蒸发溶剂。使残余物溶于乙酸乙酯(200mL)中，用水(2×100mL)、柠檬酸(1N，100mL)、饱和碳酸氢钠溶液(2×100mL)和饱和盐水(10mL)洗涤，干燥(MgSO4)，过滤并减压蒸发。通过硅胶上的快速层析纯化残余物，用在异己烷中的25-100％乙酸乙酯梯度洗脱，得到为无色泡沫的产物(11.2g)。向200mg该物料样品中加入乙醚(1mL)并伴随剧烈搅拌下将生成的混悬液浆化过夜。过滤分离生成的白色固体并真空干燥。X-射线粉末衍射确定该物料含有大的结晶度特性。将该剩余物料(9.2g)分成两批(3.5g和5.7g)。向较小批次(3.5g)中加入乙醚(12.5mL)和向较大批次(5.7g)加入乙醚(20mL)。将较大批次用先前得到的结晶物料(50mg)种晶。在室温下搅拌两个批次16小时。经过滤分离生成的无色固体，合并并真空干燥。生成的物料(6.1g，29％)具有与先前得到的结晶物料和对以下描述的5-[3-[(2S)-1-(二氟甲氧基)丙-2-基]氧基-5-[(5-甲基吡嗪-2-基)氨基甲酰基]苯氧基]-N，N-二甲基-吡嗪-2-甲酰胺形式A一致的X-射线粉末衍射图。1H NMR和质谱数据与采用先前方法得到的那些一致。
5-[3-[(2S)-1-(二氟甲氧基)丙-2-基]氧基-5-[(5-甲基吡嗪-2-基)氨基甲酰基]苯氧基]-N，N-二甲基-吡嗪-2-甲酰胺形式A以提供采用CuKa辐射测量的至少一个以下2θ值表征：20.3和15.6。5-[3-[(2S)-1-(二氟甲氧基)丙-2-基]氧基-5-[(5-甲基吡嗪-2-基)氨基甲酰基]苯氧基]-N，N-二甲基-吡嗪-2-甲酰胺形式A以提供基本上如在图A中显示的X-射线粉末衍射图表征。10个最显著的峰显示在表A中：
表A
5-[3-[(2S)-1-(二氟甲氧基)丙-2-基]氧基-5-[(5-甲基吡嗪-2-基)氨基甲酰 基]苯氧基]-N，N-二甲基-吡嗪-2-甲酰胺形式A的10个最显著的X-射线 粉末衍射峰
  角2-θ(2θ)   强度％   相对强度
  20.325   100   vs
  15.646   94.3   vs
  23.15   46.2   vs
  22.424   43.8   vs
  9.266   39.1   vs
  25.707   34.8   vs
  26.21   32.9   vs
  18.72   28.5   vs
  26.485   28.5   vs
  8.425   28.5   vs
Vs＝非常强
本发明提供5-[3-[(2S)-1-(二氟甲氧基)丙-2-基]氧基-5-[(5-甲基吡嗪-2-基)氨基甲酰基]苯氧基]-N，N-二甲基-吡嗪-2-甲酰胺的结晶形式，形式A，其具有在约2-θ＝20.3°有至少一个特征峰的X-射线粉末衍射图。
本发明提供结晶形式，形式A，其具有在约2-θ＝15.6°的至少一个特征峰的X-射线粉末衍射图。
本发明提供5-[3-[(2S)-1-(二氟甲氧基)丙-2-基]氧基-5-[(5-甲基吡嗪-2-基)氨基甲酰基]苯氧基]-N，N-二甲基-吡嗪-2-甲酰胺的结晶形式，形式A，其具有在约2-θ＝20.3°和15.6°处的至少两个特征峰的X-射线粉末衍射图。
本发明提供5-[3-[(2S)-1-(二氟甲氧基)丙-2-基]氧基-5-[(5-甲基吡嗪-2-基)氨基甲酰基]苯氧基]-N，N-二甲基-吡嗪-2-甲酰胺的结晶形式，形式A，其具有在约2-θ＝20.3、15.6、23.2、22.4、9.3、25.7、26.2、18.7、26.5和8.4°处的特征峰的X-射线粉末衍射图。
本发明提供5-[3-[(2S)-1-(二氟甲氧基)丙-2-基]氧基-5-[(5-甲基吡嗪-2-基)氨基甲酰基]苯氧基]-N，N-二甲基-吡嗪-2-甲酰胺的结晶形式，形式A，其具有与在图A中显示的X-射线粉末衍射图基本相同的X-射线粉末衍射图。
本发明提供5-[3-[(2S)-1-(二氟甲氧基)丙-2-基]氧基-5-[(5-甲基吡嗪-2-基)氨基甲酰基]苯氧基]-N，N-二甲基-吡嗪-2-甲酰胺的结晶形式，形式A，其具有在2-θ＝20.3°加或减0.5°2-θ处的至少一个特征峰的X-射线粉末衍射图。
本发明提供5-[3-[(2S)-1-(二氟甲氧基)丙-2-基]氧基-5-[(5-甲基吡嗪-2-基)氨基甲酰基]苯氧基]-N，N-二甲基-吡嗪-2-甲酰胺的结晶形式，形式A，其具有在2-θ＝15.6°加或减0.5°2-θ处的至少一个特征峰的X-射线粉末衍射图。
本发明提供5-[3-[(2S)-1-(二氟甲氧基)丙-2-基]氧基-5-[(5-甲基吡嗪-2-基)氨基甲酰基]苯氧基]-N，N-二甲基-吡嗪-2-甲酰胺的结晶形式，形式A，其具有在2-θ＝20.3°和15.6°处的至少两个特征峰的X-射线粉末衍射图，其中所述值可加或减0.5°2-θ。
本发明提供5-[3-[(2S)-1-(二氟甲氧基)丙-2-基]氧基-5-[(5-甲基吡嗪-2-基)氨基甲酰基]苯氧基]-N，N-二甲基-吡嗪-2-甲酰胺的结晶形式，形式A，其具有在2-θ＝20.3、15.6、23.2、22.4、9.3、25.7、26.2、18.7、26.5和8.4°处的特征峰的X-射线粉末衍射图，其中所述值可加或减0.5°2-θ。
本发明提供5-[3-[(2S)-1-(二氟甲氧基)丙-2-基]氧基-5-[(5-甲基吡嗪-2-基)氨基甲酰基]苯氧基]-N，N-二甲基-吡嗪-2-甲酰胺的结晶形式，形式A，其具有在2-θ＝20.3°处的至少一个特征峰的X-射线粉末衍射图。
本发明提供5-[3-[(2S)-1-(二氟甲氧基)丙-2-基]氧基-5-[(5-甲基吡嗪-2-基)氨基甲酰基]苯氧基]-N，N-二甲基-吡嗪-2-甲酰胺的结晶形式，形式A，其具有在2-θ＝15.6°处的至少一个特征峰的X-射线粉末衍射图。
本发明提供5-[3-[(2S)-1-(二氟甲氧基)丙-2-基]氧基-5-[(5-甲基吡嗪-2-基)氨基甲酰基]苯氧基]-N，N-二甲基-吡嗪-2-甲酰胺的结晶形式，形式A，其具有在2-θ＝20.3°和15.6°处的至少两个特征峰的X-射线粉末衍射图。
本发明提供5-[3-[(2S)-1-(二氟甲氧基)丙-2-基]氧基-5-[(5-甲基吡嗪-2-基)氨基甲酰基]苯氧基]-N，N-二甲基-吡嗪-2-甲酰胺的结晶形式，形式A，其具有在2-θ＝20.3、15.6、23.2、22.4、9.3、25.7、26.2、18.7、26.5和8.4°处的特征峰的X-射线粉末衍射图。
本发明提供5-[3-[(2S)-1-(二氟甲氧基)丙-2-基]氧基-5-[(5-甲基吡嗪-2-基)氨基甲酰基]苯氧基]-N，N-二甲基-吡嗪-2-甲酰胺的结晶形式，形式A，其具有如在图A中显示的X-射线粉末衍射图。
DSC分析显示5-[3-[(2S)-1-(二氟甲氧基)丙-2-基]氧基-5-[(5-甲基吡嗪-2-基)氨基甲酰基]苯氧基]-N，N-二甲基-吡嗪-2-甲酰胺形式A为具有在75.0℃初现熔化和83.1℃峰(图B)的低熔点固体。
本发明因此提供具有在约75.0℃初现熔化和约83.1℃峰的5-[3-[(2S)-1-(二氟甲氧基)丙-2-基]氧基-5-[(5-甲基吡嗪-2-基)氨基甲酰基]苯氧基]-N，N-二甲基-吡嗪-2-甲酰胺的结晶形式，形式A。
本发明因此提供用于形成5-[3-[(2S)-1-(二氟甲氧基)丙-2-基]氧基-5-[(5-甲基吡嗪-2-基)氨基甲酰基]苯氧基]-N，N-二甲基-吡嗪-2-甲酰胺的结晶形式的方法，方法包括使5-[3-[(2S)-1-(二氟甲氧基)丙-2-基]氧基-5-[(5-甲基吡嗪-2-基)氨基甲酰基]苯氧基]-N，N-二甲基-吡嗪-2-甲酰胺自5-[3-[(2S)-1-(二氟甲氧基)丙-2-基]氧基-5-[(5-甲基吡嗪-2-基)氨基甲酰基]苯氧基]-N，N-二甲基-吡嗪-2-甲酰胺在乙醚中的溶液中结晶。
当指出本发明涉及5-[3-[(2S)-1-(二氟甲氧基)丙-2-基]氧基-5-[(5-甲基吡嗪-2-基)氨基甲酰基]苯氧基]-N，N-二甲基-吡嗪-2-甲酰胺的结晶形式，形式A时，结晶度合适地大于约60％，更合适地大于约80％，优选地大于约90％和更优选地大于约95％。
5-[3-[(2S)-1-(二氟甲氧基)丙-2-基]氧基-5-[(5-甲基吡嗪-2-基)氨基甲酰基]苯氧基]-N，N-二甲基-吡嗪-2-甲酰胺形式A提供与在图A中显示的X-射线粉末衍射图基本相同的X-射线粉末衍射图并且基本上具有10个在表A中显示的最显著峰(角2-θ值)。应该理解X-射线粉末衍射图的2-θ值从一台机器至另一台机器或者从一个样品至另一个样品可稍微变化并且因此提供的值不视为绝对值。
已知可得到的X-射线粉末衍射图具有一个或多个测量误差，这取决于测量条件(例如所使用的设备或机器)。具体地讲，通常已知X-射线粉末衍射图的强度可取决于测量条件而发生波动。因此应该理解本发明的5-[3-[(2S)-1-(二氟甲氧基)丙-2-基]氧基-5-[(5-甲基吡嗪-2-基)氨基甲酰基]苯氧基]-N，N-二甲基-吡嗪-2-甲酰胺形式A不限于提供与在图A中显示的X-射线粉末衍射图相同的X-射线粉末衍射图的结晶，并且任何提供与在图A中显示的那些基本相同的X-射线粉末衍射图的结晶落入本发明的范围内。X-射线粉末衍射领域的技术人员能够判断X-射线粉末衍射图的基本同一性。
X-射线粉末衍射领域的技术人员认识到相对峰强度可受到例如可影响样品分析的大于3-微米颗粒大小和非单一长径比(aspect ratios)的影响。技术人员也将认识到反射位点可受到样品在衍射仪中所处的准确高度和衍射仪的零标定影响。样品的表面平面性也可具有小的影响。因此所呈现的衍射图数据不当作绝对值(Jenkins，R & Snyder，R.L.‘Introduction to X-Ray Powder Diffractometry’John Wiley & Sons 1996；Bunn，C.W.(1948)，Chemical Crystallography，Clarendon Press，London；Klug，H.P. & Alexander，L.E.(1974)，X-Ray Diffraction Procedures)。
通常，X-射线粉末衍射图的衍射角测量误差为约5％或更少，具体地讲为加或减0.5°2-θ，并且当考虑图A中的X-射线粉末衍射图和当读取表A时，这样程度的测量误差应该考虑到。另外，应该理解取决于试验条件和样品制备(优选的取向)，强度可能波动。
所采用的技术细节
X-射线粉末衍射
表B
Figure G2007800474769D00471
*相对强度来自用固定狭缝测量的衍射仪
分析仪器：Siemens D5000。
通过将结晶物料的样品固定在Siemens单硅晶(SSC)晶片载片上并借助于显微镜载物片把样品铺开成薄层测定X-射线粉末衍射光谱。将样品以每分钟30转旋转(以改善计数统计)并用由在40kV和40mA下操作的铜长细聚焦管产生的具有1.5406埃波长的X-射线照射。校准的X-射线源通过设置在V20的自动变化的发散狭缝(divergence slit)并且反射的射线直接通过2mm抗散射狭缝和0.2mm检测器狭缝。样品在2度-40度2-θ范围内以θ-θ模式每0.02度2-θ增幅(连续扫描方式)暴露1秒。操作时间为31分41秒。仪器装备有闪烁计数仪作为检测器。控制和数据收集通过用Diffract+软件操作的Dell Optiplex 686 NT 4.0工作站进行。X-射线粉末衍射领域的技术人员将认识到，峰的相对强度可受到例如可影响样品分析的大于30微米颗粒大小和非单一长径比的影响。技术人员也将认识到反射位点可受到样品在衍射仪中所处的准确高度和衍射仪的零标定影响。样品的表面平面性也可具有小的影响。因此所呈现的衍射图数据不应当作绝对值。
差示扫描量热法
分析仪器：Mettler DSC820e。
通常将在装配冲孔盖的40μl铝盘中含有的少于5mg物料以每分钟10℃的恒定加热速率在25℃-325℃温度范围加热。采用流速每分钟100ml的使用氮气的冲洗气体。
5-[3-[(2S)-1-(二氟甲氧基)丙-2-基]氧基-5-[(5-甲基吡嗪-2-基)氨基甲酰 基]苯氧基]-N，N-二甲基-吡嗪-2-甲酰胺的浆化
5-[3-[(2S)-1-(二氟甲氧基)丙-2-基]氧基-5-[(5-甲基吡嗪-2-基)氨基甲酰基]苯氧基]-N，N-二甲基-吡嗪-2-甲酰胺的X-射线粉末衍射光谱显示初始原料为无定形的。为了产生结晶形式，形式A，将约500mg物料置于具有磁力从动件的小瓶中并加入约2ml乙醚，然后将小瓶用盖子紧紧密封。然后将浆状物在环境温度(25℃)下于磁板上搅拌。2天后，自板上除去样品，取下盖并使浆状物在环境条件下干燥，之后经XRPD和DSC分析。生成的物料(形式A)经XRPD确定为结晶并看到与初始无定形物料不同。该物料(形式A)具有75.0℃(初现)熔点。
3-[(2S)-1-(二氟甲氧基)丙-2-基]氧基-5-[5-(二甲基氨基甲酰基)吡嗪-2- 基]氧基-苯甲酸
将3-[(2S)-1-(二氟甲氧基)丙-2-基]氧基-5-[5-(二甲基氨基甲酰基)吡嗪-2-基]氧基-苯甲酸甲酯溶于THF(300mL)和甲醇(100mL)中并加入LiOH(1N，51.3mL)，随后滴加水直到变为混浊。在室温下搅拌生成的溶液16小时。经减压蒸发除去有机物。用水(100mL)稀释含水的浆状物，用乙酸乙酯(200mL)洗涤，然后通过加入盐酸(2N)酸化直到沉淀出固体。用乙酸乙酯(2×200mL)提取生成的悬浮液。用水(200mL)和盐水(200mL)洗涤合并的有机提取物，干燥(MgSO4)，过滤并减压浓缩，得到产物(17.2g，90％)。1H NMRδ(CDCl3)：1.39(d，3H)，3.17(s，3H)，3.19(s，3H)，3.93-4.05(m，2H)，4.60-4.69(m，1H)，6.26(t，1H)，6.99(t，1H)，7.50-7.55(m，2H)，8.38(d，1H)，8.55(d，1H)，10.17(s，1H)；m/z412(M+H)+
3-[(2S)-1-(二氟甲氧基)丙-2-基]氧基-5-[5-(二甲基氨基甲酰基)吡嗪-2- 基]氧基-苯甲酸甲酯
Figure G2007800474769D00491
将在乙腈(20mL)中的2，2-二氟-2-氟磺酰基-乙酸(CAS号1717-59-5)(0.84mL，8.05mmol)用注射泵经90分钟滴加入到3-[5-(二甲基氨基甲酰基)吡嗪-2-基]氧基-5-[(2S)-1-羟基丙-2-基]氧基-苯甲酸甲酯(1.5g，22.0mmol)和碘化铜(I)(154mg，4.55mmol)在乙腈(300mL)中于55℃下的脱气的搅拌混合物中。减压除去挥发物并用DCM处理残余物。过滤混合物并减压除去溶剂。经硅胶上的快速层析纯化残余物，用在异己烷中的25％-100％乙酸乙酯梯度洗脱，得到产物(16.5g，62％)。1H NMRδ(CDCl3)：1.38(3H，d)，3.15(3H，s)，3.18(3H，s)，3.91(3H，s)，3.93-4.05(2H，m)，4.62-4.68(1H，m)，6.27(1H，t)，6.95(1H，t)，7.44-7.45(1H，m)，7.49-7.51(1H，m)，8.36(1H，s)，8.53(1H，s)；m/z 404(M+H+)
3-[5-(二甲基氨基甲酰基)吡嗪-2-基]氧基-5-[(2S)-1-羟基丙-2-基]氧基- 苯甲酸甲酯
将氟化氢溶液(70％在吡啶中，3.25mL)加入到在PTFE容器中于THF(300mL)中的3-[5-(二甲基氨基甲酰基)吡嗪-2-基]氧基-5-[(2S)-1-三丙-2-基甲硅烷基氧基丙-2-基]氧基-苯甲酸甲酯中并在室温下搅拌生成的溶液18小时。加入另外的氟化氢溶液(70％在吡啶中，3.25mL)并搅拌反应物另外66小时。通过非常小心地加入饱和碳酸氢钠水溶液直到溶液达到pH 8猝灭反应物。用乙酸乙酯(2×500mL)提取水层并干燥(MgSO4)合并的有机物。减压除去溶剂并经硅胶上的快速柱层析纯化残余物，用在异己烷中的25％-100％乙酸乙酯洗脱，得到产物(13.2g，98％)。1H NMRδ(CDCl3)：1.32(3H，d)，1.93(1H，d)，3.17(6H，d)，3.74-3.79(1H，m)，3.91(3H，s)，4.54-4.60(1H，m)，6.96(1H，t)，7.43(1H，d)，7.51(1H，d)，8.36(1H，d)，8.53(1H，d)；m/z 376(M+H+)
3-[5-(二甲基氨基甲酰基)吡嗪-2-基]氧基-5-[(2S)-1-三丙-2-基甲硅烷基 氧基丙-2-基]氧基-苯甲酸甲酯
将3-羟基-5-[(2S)-1-三丙-2-基甲硅烷基氧基丙-2-基]氧基-苯甲酸甲酯(40.2g，105mmol)、5-氯-N，N-二甲基-吡嗪-2-甲酰胺(20.5g，110mmol)和碳酸钾(36.3g，263mmol)在乙腈(500mL)中的混合物在回流下搅拌6小时。减压除去挥发物并加入乙酸乙酯(500mL)和水(500mL)。分离有机层，水层用乙酸乙酯(250mL)再提取并用水(500mL)、盐水(500mL)洗涤合并的有机物，干燥(MgSO4)，过滤并减压浓缩，得到产物(55.6g，100％)。1H NMRδ(CDCl3)：1.01-1.07(21H，m)，1.34(3H，d)，3.14-3.16(3H，s)，3.17(3H，s)，3.72-3.77(1H，m)，3.87-3.92(4H，m)，4.51(1H，m)，6.95(1H，t)，7.39-7.40(1H，m)，7.50-7.51(1H，m)，8.34(1H，d)，8.53(1H，d)；m/z 532(M+H+)
5-氯-N，N-二甲基-吡嗪-2-甲酰胺的制备已在前文描述。
3-羟基-5-[(2S)-1-三丙-2-基甲硅烷基氧基丙-2-基]氧基-苯甲酸甲酯
Figure G2007800474769D00511
在氮气保护下，向3-苯基甲氧基-5-[(2S)-1-三丙-2-基甲硅烷基氧基丙-2-基]氧基-苯甲酸甲酯(CAS号871657-71-5)(47.3g，0.1mol)在乙醇(500mL)中的溶液中加入10％披钯活性炭(5g)。在氢气氛下搅拌反应物16小时。之后滤除催化剂并减压蒸发溶剂，得到产物(38.1g，100％)。
1H NMRδ(CDCl3)：1.01-1.12(22H，m)，1.32(3H，d)，3.69-3.77(2H，m)，3.89(3H，s)，4.48(1H，q)，6.62(1H，t)，7.10(1H，d)，7.18(1H，t)；m/z 381(M-H-)
以下给出制备5-[3-[(2S)-1-(二氟甲氧基)丙-2-基]氧基-5-[(5-甲基吡嗪-2-基)氨基甲酰基]苯氧基]-N，N-二甲基-吡嗪-2-甲酰胺的另一种可供选择的方法：
向3-[(2S)-1-(二氟甲氧基)丙-2-基]氧基-5-[5-(二甲基氨基甲酰基)吡嗪-2-基]氧基-苯甲酸(74.2g，180mmol)中加入DMF(1.4mL，18mmol)。加入二氯甲烷(810mL)和草酰氯(25.2mL，289mmol)并在环境温度下搅拌反应物2小时。减压蒸发溶剂，与甲苯(2×600mL)共沸并使生成的油溶于吡啶(392ml)和二氯甲烷(500ml)中。
将5-甲基吡嗪-2-胺(CAS号5521-58-4)(29.7g，272mmol)在吡啶(549mL)中的溶液滴加入到搅拌的溶液中并在环境温度下搅拌反应物20小时。减压蒸发溶剂并用乙酸乙酯(1200mL)吸收残余物，先后用水(1200mL)、1M柠檬酸(2×780mL)、饱和碳酸氢钠水溶液(2×780mL)饱和盐水(780mL)洗涤，干燥(MgSO4)合并的有机提取液并减压蒸发，经快速层析纯化残余物，得到标题化合物(66g)。
向该物料的样品(64g，127mmol)中加入乙醚(640mL)并把生成的浆状物搅拌过夜。
过滤固体，用乙醚(320mL)洗涤并在环境温度下真空干燥过夜，得到白色结晶固体(56g)。
该物料具有与对先前描述的5-[3-[(2S)-1-(二氟甲氧基)丙-2-基]氧基-5-[(5-甲基吡嗪-2-基)氨基甲酰基]苯氧基]-N，N-二甲基-吡嗪-2-甲酰胺形式A描述的一致的X-射线粉末衍射图。1H NMR和质谱数据与先前描述的一致。
3-[(2S)-1-(二氟甲氧基)丙-2-基]氧基-5-[5-(二甲基氨基甲酰基)吡嗪-2-基]氧基-苯甲酸的制备在下面描述。
3-[(2S)-1-(二氟甲氧基)丙-2-基]氧基-5-[5-(二甲基氨基甲酰基)吡嗪-2- 基]氧基-苯甲酸
向3-[(2S)-1-(二氟甲氧基)丙-2-基]氧基-5-[5-(二甲基氨基甲酰基)吡嗪-2-基]氧基-苯甲酸甲酯(76.3g，179mmol)中加入NMP(534mL)、水(305mL)并在0℃下搅拌溶液。滴加2N氢氧化钠(152mL，305mmol)并搅拌反应物4小时。滴加乙酸(41mL，718mmol)，随后加入水(1068mL)和1N HCl(400mL)直到达到pH3并且一些物料成油析出。用甲苯(3×988mL)提取水层并与成油析出溶于乙酸乙酯(988mL)中的物料合并，用水(988mL)、饱和盐水(988mL)洗涤合并的有机层，干燥(MgSO4)并减压蒸发。经快速层析纯化残余物，用在二氯甲烷中的5％MeOH洗脱，得到标题化合物(64g)。
1H NMRδ(DMSO-d6)1.27(3H，d)，3.03(6H，s)，3.99-4.04(2H，m)，4.76-4.80(1H，m)，6.52-6.91(1H，t)，7.21(1H，t)，7.34-7.38(2H，m)，8.42(1H，d)，8.56(1H，d)，
3-[(2S)-1-(二氟甲氧基)丙-2-基]氧基-5-[5-(二甲基氨基甲酰基)吡嗪-2- 基]氧基-苯甲酸甲酯
将3-[5-(二甲基氨基甲酰基)吡嗪-2-基]氧基-5-[(2S)-1-羟基丙-2-基]氧基-苯甲酸甲酯(94g，250mmol)在乙腈(1130mL)中的溶液用氮气脱气，然后加入碘化铜(I)(9.54g，50mmol)并将溶液加热至55℃。滴加2，2-二氟-2-氟磺酰基-乙酸(CAS号1717-59-5)(46.6mL，450mmol)在乙腈(188mL)中的溶液。3小时后，于25℃下减压蒸发溶剂。用二氯甲烷(500mL)吸收残余物并过滤。用二氯甲烷进一步洗涤固体直到洗液澄清。在25℃下减压蒸发溶剂并经快速层析纯化残余物，用100％乙酸乙酯洗脱，得到标题化合物(54g)。
1H NMRδ(DMSO-d6)1.28(3H，d)，2.99-3.08(6H，m)，3.86(3H，s)，3.98-4.07(2H，m)，4.78-4.82(1H，m)，6.50-6.90(1H，t)，7.25(1H，t)，7.38-7.40(2H，m)，8.42(1H，d)，8.55(1H，d)
3-[5-(二甲基氨基甲酰基)吡嗪-2-基]氧基-5-[(2S)-1-羟基丙-2-基]氧基- 苯甲酸甲酯
Figure G2007800474769D00532
将3-[5-(二甲基氨基甲酰基)吡嗪-2-基]氧基-5-[(2S)-1-[(2-甲基丙-2-基)氧基]丙-2-基]氧基-苯甲酸甲酯(170g，0.39mol)在甲酸(850mL)中的溶液加热至90℃反应3小时。加入乙酸乙酯(1700mL)、水(1700mL)和饱和盐水(850mL)并分离水层，用乙酸乙酯(850mL)提取并用饱和盐水(850mL)洗涤合并的有机层，干燥(MgSO4)并减压蒸发。将残余物溶于乙酸乙酯(1500mL)、水(1500mL)和甲醇(150mL)中。加入碳酸钠(170g)并将两相溶液加热至回流反应2小时。分离水层并用水(1700mL)洗涤有机层。用乙酸乙酯(850mL)提取合并的水相，干燥(MgSO4)合并的有机层并减压蒸发。经快速层析纯化残余物，被100％乙酸乙酯洗脱，得到标题化合物(148g)。
1H NMRδ(DMSO-d6)：1.23(3H，d)，3.04(6H，s)，3.47-3.56(2H，m)，3.86(3H，s)，4.49-4.53(1H，m)，4.86(1H，t)，7.19(1H，t)，7.34-7.35(1H，m)，7.38-7.39(1H，m)，8.42(1H，d)，8.55(1H，d)
3-[5-(二甲基氨基甲酰基)吡嗪-2-基]氧基-5-[(2S)-1-[(2-甲基丙-2-基)氧 基]丙-2-基]氧基-苯甲酸甲酯
Figure G2007800474769D00541
向3-[5-(二甲基氨基甲酰基)吡嗪-2-基]氧基-5-羟基-苯甲酸甲酯(10g，32mmol)中加入三苯基膦(10.3g，39.4mmol)、THF(100mL)和(2R)-1-[(2-甲基丙-2-基)氧基]丙-2-醇(CAS号136656-73-0)(5.21g，39.4mmol)。使生成的浆状物冷却至0℃并保持温度低于10℃下滴加偶氮二羧酸二乙酯(50％w/v在甲苯中，13.7mL，39.4mmol)。2小时后，减压蒸发溶剂并用乙酸乙酯(23mL)吸收。过滤崩溃的固体并减压蒸发母液，用乙酸乙酯(23mL)和异己烷(53mL)吸收并过滤生成的固体，减压蒸发母液并经快速层析纯化生成的残余物，用80％乙酸乙酯/20％异己烷洗脱，得到产物(13.5g)。
1H NMRδ(DMSO-d6)：1.12(9H，s)，1.25(3H，d)，3.03(6H，s)，3.41-3.45(1H，m)，3.47-3.51(1H，m)，3.85(3H，s)，4.55-4.57(1H，m)，7.20(1H，t)，7.34-7.35(1H，m)，7.40-7.41(1H，m)，8.41(1H，d)，8.54(1H，d)
3-[5-(二甲基氨基甲酰基)吡嗪-2-基]氧基-5-羟基-苯甲酸甲酯
Figure G2007800474769D00551
向3，5-二羟基苯甲酸甲酯(CAS号2150-44-9)(85g，0.49mol)中加入5-氯-N，N-二甲基-吡嗪-2-甲酰胺(88.9g，0.48mol)、DMSO(1000mL)和碳酸铯(418g，1.2mol)并将混合物加热至50℃反应3小时。先后加入水(1577mL)和乙醚(540mL)。向水层加入5M盐酸溶液(395mL，1.97mol)并过滤生成的白色固体，用水(2×311mL)洗涤并在40℃下经P2O5真空干燥过夜，得到要求的化合物(143g)。
1H NMRδ(DMSO-d6)：3.03(6H，s)，3.84(3H，s)，6.92(1H，t)，7.21-7.22(1H，m)，7.28-7.29(1H，m)，8.41(1H，d)，8.53(1H，d)，10.20(1H，s)。
5-氯-N，N-二甲基-吡嗪-2-甲酰胺的制备已在前文描述。
实施例3：5-[3-[(2S)-1-(二氟甲氧基)丙-2-基]氧基-5-(1H-吡唑-3-基氨基 甲酰基)苯氧基]-N，N-二甲基-吡嗪-2-甲酰胺
Figure G2007800474769D00552
将三氟乙酸(2mL)加入到3-[[3-[(2S)-1-(二氟甲氧基)丙-2-基]氧基-5-[5-(二甲基氨基甲酰基)吡嗪-2-基]氧基-苯甲酰基]氨基]吡唑-1-羧酸叔丁基酯(150mg，0.26mmol)在DCM(16mL)中的溶液中并在室温下搅拌2小时。真空除去溶剂，加入DCM(20mL)并用水(20mL)、饱和碳酸氢钠溶液(20mL)、盐水(20mL)洗涤混合物，干燥(MgSO4)并真空下减压，得到要求的化合物(94mg)。
1H NMRδ(CDCl3)：1.38(d，3H)，3.15(s，3H)，3.18(s，3H)，3.95-4.03(m，2H)，4.62-4.69(m，1H)，6.25(t，1H)，6.84(s，1H)，6.92(t，1H)，7.31(s，1H)，7.37(s，1H)，7.44(d，1H)，8.39(d，1H)，8.49(d，1H)，9.71(s，1H)，10.04(s，1H)；m/z 477(M+H)+
实施例4：3-[(2S)-1-(二氟甲氧基)丙-2-基]氧基-5-(6-甲基磺酰基吡啶-3- 基)氧基-N-(1H-吡唑-3-基)苯甲酰胺
以与实施例3类似的方式，自3-[[3-[(2S)-1-(二氟甲氧基)丙-2-基]氧基-5-(6-甲基磺酰基吡啶-3-基)氧基-苯甲酰基]氨基]吡唑-1-羧酸叔丁基酯制备以下化合物。
1H NMRδ(CDCl3)：1.39(d，3H)，3.23(s，3H)，3.95-4.04(m，2H)，4.64-4.71(m，1H)，6.26(t，1H)，6.83-6.86(m，2H)，7.19(s，1H)，7.35(s，1H)，7.45-7.48(m，1H)，7.52(s，1H)，8.07(d，1H)，8.48(d，1H)，8.65(s，1H)；m/z 483(M+H)+
3-[[3-[(2S)-1-(二氟甲氧基)丙-2-基]氧基-5-(6-甲基磺酰基吡啶-3-基)氧 基-苯甲酰基]氨基]吡唑-1-羧酸叔丁基酯
Figure G2007800474769D00562
将1-氯-N，N，2-三甲基-丙-1-烯-1-胺(0.11mL，0.80mmol)加入到3-[(2S)-1-(二氟甲氧基)丙-2-基]氧基-5-[5-(二甲基氨基甲酰基)吡嗪-2-基]氧基-苯甲酸(0.22g，0.53mmol)在DCM(5mL)中的溶液中并搅拌1小时。先后加入3-氨基吡唑-1-羧酸叔丁基酯(CAS号863504-94-1)(147mg，0.80mmol)和吡啶(0.09mL，1.07mmol)并搅拌反应物另外45分钟，之后真空下减量并在乙酸乙酯(50mL)和水(50mL)之间分配。用乙酸乙酯(50mL)进一步提取水层并用水(50mL)、盐水(50mL)洗涤合并的有机物，干燥(MgSO4)并真空下减压。将粗品残余物在硅胶上层析，用在异己烷中的20-50％乙酸乙酯洗脱，得到要求的化合物(0.15g)。
1H NMRδ(CDCl3)：1.38(d，3H)，1.60(s，9H)，3.16(s，3H)，3.19(s，3H)，3.93-4.04(m，2H)，4.60-4.64(m，1H)，6.26(t，1H)，6.95(t，1H)，7.09(d，1H)，7.27-7.28(m，1H)，7.34(t，1H)，8.01(d，1H)，8.37(d，1H)，8.53(d，1H)，8.97(s，1H)；m/z 577(M+H)+
在实施例4的制备中使用的3-[[3-[(2S)-1-(二氟甲氧基)丙-2-基]氧基-5-(6-甲基磺酰基吡啶-3-基)氧基-苯甲酰基]氨基]吡唑-1-羧酸叔丁基酯以类似的方式自3-[(2S)-1-(二氟甲氧基)丙-2-基]氧基-5-(6-甲基磺酰基吡啶-3-基)氧基-苯甲酸制备。
Figure G2007800474769D00571
3-[(2S)-1-(二氟甲氧基)丙-2-基]氧基-5-[5-(二甲基氨基甲酰基)吡嗪-2- 基]氧基-苯甲酸
将在水(5mL)中的氢氧化锂(45mg，1.06mol)加入3-[(2S)-1-(二氟甲氧基)丙-2-基]氧基-5-[5-(二甲基氨基甲酰基)吡嗪-2-基]氧基-苯甲酸甲酯(0.3g，0.71mmol)在THF(10mL)中的溶液中并在室温下搅拌20小时。真空下除去THF并用乙酸乙酯(50mL)洗涤水层以除去任何杂质。酸化水层并用乙酸乙酯(2×50mL)提取，然后用盐水(50mL)洗涤合并的有机物，干燥(MgSO4)并真空除去溶剂，得到要求的化合物(0.22g)。
1H NMRδ(CDCl3)：1.39(d，3H)，3.17(s，3H)，3.19(s，3H)，3.93-4.05(m，2H)，4.60-4.69(m，1H)，6.26(t，1H)，6.99(t，1H)，7.50-7.55(m，2H)，8.38(d，1H)，8.55(d，1H)，10.17(s，1H)；m/z 412(M+H)+
3-[(2S)-1-(二氟甲氧基)丙-2-基]氧基-5-[5-(二甲基氨基甲酰基)吡嗪-2- 基]氧基-苯甲酸甲酯
Figure G2007800474769D00581
将3-[(2S)-1-(二氟甲氧基)丙-2-基]氧基-5-羟基-苯甲酸甲酯(0.25g，0.91mmol)、5-氯-N，N-二甲基-吡嗪-2-甲酰胺(168mg，0.91mmol)和碳酸钾(250mg，1.81mmol)在乙腈(5mL)中的混合物在微波反应器中，于140℃下搅拌5小时。将混合物在真空下减少并加入乙酸乙酯(50mL)。用水(50mL)、盐水(50mL)洗涤混合物，干燥(MgSO4)并真空下减少。将残余物在硅胶上层析，用在异己烷中的20-70％乙酸乙酯洗脱，得到要求的化合物(0.3g)。
1H NMRδ(CDCl3)：1.38(d，3H)，3.15(s，3H)，3.18(s，3H)，3.91(s，3H)，3.93-4.04(m，2H)，4.61-4.69(m，1H)，6.26(t，1H)，6.96(t，1H)，7.44-7.45(m，1H)，7.50-7.51(m，1H)，8.36(d，1H)，8.53(d，1H)；m/z 426(M+H)+
5-氯-N，N-二甲基-吡嗪-2-甲酰胺的制备在前文已有描述。
3-[(2S)-1-(二氟甲氧基)丙-2-基]氧基-5-羟基-苯甲酸甲酯
使3-[(2S)-1-(二氟甲氧基)丙-2-基]氧基-5-苯基甲氧基-苯甲酸甲酯(0.48g，1.1mmol)溶于乙醇(10mL)和THF(10mL)中，将烧瓶抽真空并用氩气冲洗(3次)。加入10％披钯炭(140mg)并将烧瓶进一步抽真空，最后用氢气冲洗。在室温下搅拌反应混合物20小时直到完成。将反应混合物抽真空并用氩气冲洗(3次)，然后经Celite
Figure G2007800474769D00592
过滤除去催化剂。真空浓缩滤液，得到要求的化合物(1.05g)。
1H NMRδ(CDCl3)：1.35(d，3H)，3.90(s，3H)，3.90-4.02(m，2H)，4.57-4.64(m，1H)，5.20(s，1H)，6.26(t，1H)，6.63(t，1H)，7.14-7.15(m，1H)，7.17-7.18(m，1H)；m/z 275(M-H)-
3-[(2S)-1-(二氟甲氧基)丙-2-基]氧基-5-苯基甲氧基-苯甲酸甲酯的制备在先前已有描述。
3-[(2S)-1-(二氟甲氧基)丙-2-基]氧基-5-(6-甲基磺酰基吡啶-3-基)氧基-苯甲酸的制备在下文描述。
3-[(2S)-1-(二氟甲氧基)丙-2-基]氧基-5-(6-甲基磺酰基吡啶-3-基)氧基- 苯甲酸
Figure G2007800474769D00593
将3-[(2S)-1-(二氟甲氧基)丙-2-基]氧基-5-羟基-苯甲酸甲酯(233mg，0.84mmol)、5-溴-2-甲基磺酰基-吡啶(CAS号98626-95-0)(200mg，0.84mmol)、碳酸铯(549mg，1.69mmol)和溴化三(三苯基膦)铜(I)(157mg，0.17mmol)在DMA(5mL)中的混合物在微波反应器中，于160℃下搅拌6小时。加入乙酸乙酯(50mL)和水并酸化水层，用乙酸乙酯(2×50mL)提取。用盐水洗涤合并的有机物，干燥(MgSO4)并真空下减压，得到要求的化合物(0.16g)。
1H NMRδ(d6-DMSO)：1.28(d，3H)，3.27(s，3H)，3.95-4.04(m，2H)，4.78-4.85(m，1H)，6.71(t，1H)，7.14-7.16(m，1H)，7.22-7.23(m，1H)，7.37-7.40(m，1H)，7.66-7.70(m，1H)，8.06(d，1H)，8.61(d，1H)，12.85(s，1H)；m/z 418(M+H)+
3-[(2S)-1-(二氟甲氧基)丙-2-基]氧基-5-羟基-苯甲酸甲酯的制备在先前已有描述。
实施例5：5-[3-[(2S)-1-(二氟甲氧基)丙-2-基]氧基-5-[(1-甲基吡唑-3-基) 氨基甲酰基]苯氧基]-N，N-二甲基-吡嗪-2-甲酰胺
Figure G2007800474769D00601
将3-[(2S)-1-(二氟甲氧基)丙-2-基]氧基-5-羟基-N-(1-甲基吡唑-3-基)苯甲酰胺(0.1g，0.29mmol)、5-氯-N，N-二甲基-吡嗪-2-甲酰胺(66mg，0.35mmol)和碳酸钾(81mg，0.59mmol)在乙腈(5mL)中的混合物在微波反应器中，于160℃下搅拌6小时。将生成的混合物在真空下减压并加入乙酸乙酯(50mL)。用水(50mL)、盐水(50mL)洗涤有机物，干燥(MgSO4)，过滤并真空下减少。将残余物在硅胶上层析，用在异己烷中的10-100％乙酸乙酯洗脱，得到要求的化合物(52mg)。
1H NMRδ(CDCl3)：1.30(d，3H)，3.08(s，3H)，3.11(s，3H)，3.69(s，3H)，3.85-3.97(m，2H)，4.56(六重峰，1H)，6.18(t，1H)，6.73(d，1H)，6.85(t，1H)，7.19-7.21(m，2H)，7.27-7.29(m，1H)，8.29(d，1H)，8.45(d，1H)，8.76(s，1H)；m/z 491(M+H)+
5-氯-N，N-二甲基-吡嗪-2-甲酰胺的制备在先前已有描述。
3-[(2S)-1-(二氟甲氧基)丙-2-基]氧基-5-羟基-N-(1-甲基吡唑-3-基)苯甲 酰胺
Figure G2007800474769D00611
使3-[(2S)-1-(二氟甲氧基)丙-2-基]氧基-N-(1-甲基吡唑-3-基)-5-苯基甲氧基-苯甲酰胺(0.1g，0.23mmol)溶于乙醇(3mL)和THF(3mL)中，将烧瓶抽真空并用氩气冲洗(3次)。加入10％披钯炭(0.01g)并将烧瓶进一步抽真空，最后用氢气冲洗。在室温下搅拌反应混合物20小时直到完成。将反应混合物抽真空并用氮气冲洗(3次)。经硅藻土滤除催化剂并真空浓缩滤液，得到要求的化合物(70mg)。
1H NMRδ(CDCl3)：1.28(d，3H)，3.71(s，3H)，3.80-3.95(m，2H)，4.51(六重峰，1H)，5.96-6.36(t，1H)，6.53(s，1H)，6.73(s，1H)，6.91(s，1H)，6.96(s，1H)，7.22(s，1H)，8.83(s，1H)；m/z 342(M+H)+
3-[(2S)-1-(二氟甲氧基)丙-2-基]氧基-N-(1-甲基吡唑-3-基)-5-苯基甲氧 基-苯甲酰胺
Figure G2007800474769D00612
将DIPEA(0.198mL，1.14mmol)加入到3-[(2S)-1-(二氟甲氧基)丙-2-基]氧基-5-苯基甲氧基-苯甲酸(0.10g，0.28mmol)、1-甲基吡唑-3-胺(CAS号1904-31-0)(39mg，0.4mmol)和HATU(0.227g，0.6mmol)在DMF(3mL)中的混合物中并在室温下搅拌20小时。加入乙酸乙酯(30mL)并用水(30mL)、盐水(30mL)洗涤混合物，干燥(MgSO4)，过滤并在真空下减压。将残余物在硅胶上层析化，用在异己烷中的0-100％乙酸乙酯洗脱，得到要求的化合物(0.1g)。
1H NMRδ(CDCl3)：1.36(d，3H)，3.68(s，3H)，3.82-3.95(m，2H)，4.48(六重峰，1H)，5.00(s，2H)，6.19(t，1H)，6.63(s，1H)，6.73(s，1H)，6.93(s，1H)，7.03(s，1H)，7.28(m，1H)，7.35(m，5H)，8.59(s，1H)；m/z 432(M+H)+
3-[(2S)-1-(二氟甲氧基)丙-2-基]氧基-5-苯基甲氧基-苯甲酸的合成在先前已有描述。
实施例6：3-[(2S)-1-(二氟甲氧基)丙-2-基]氧基-N-(1-甲基吡唑-3- 基)-5-(6-甲基磺酰基吡啶-3-基)氧基-苯甲酰胺
Figure G2007800474769D00621
将3-[(2S)-1-(二氟甲氧基)丙-2-基]氧基-5-羟基-N-(1-甲基吡唑-3-基)苯甲酰胺(100mg，0.29mmol)、5-溴-2-甲基磺酰基-吡啶(CAS号98626-95-0)(77mg，0.32mmol)、碳酸铯(191mg，0.59mmol)和溴化三(三苯基膦)铜(I)(55mg，0.06mmol)在DMA(5mL)中的混合物在微波反应器中，于160℃下搅拌6小时。加入乙酸乙酯(50mL)并用水(50mL)、盐水(50mL)洗涤，干燥(MgSO4)，过滤并真空下减少。将残余物在硅胶上层析，用在异己烷中的10-80％乙酸乙酯洗脱，得到要求的化合物(31mg)。
1H NMRδ(CDCl3)：1.30(d，3H)，3.16(s，3H)，3.72(s，3H)，3.85-3.95(m，2H)，4.53-4.59(m，1H)，6.18(t，1H)，6.71(d，1H)，6.75(t，1H)，7.09(t，1H)，7.22(d，1H)，7.25(t，1H)，7.37-7.39(m，1H)，7.99(d，1H)，8.39(d，1H)，8.62(s，1H)；m/z 495(M-H)-
3-[(2S)-1-(二氟甲氧基)丙-2-基]氧基-5-羟基-N-(1-甲基吡唑-3-基)苯甲酰胺的合成在先前已有描述。
生物学
试验：
式(I)化合物的生物效应可用以下方法试验测试：
(1)酶活性
通过温育GLK、ATP和葡萄糖可测量重组人胰GLK的酶活性。通过将试验偶联于G-6-P脱氢酶，NADP/NADPH系统并测量在340nm光密度随时间的线性增加，可测定产物形成速率(Brocklehurst等，Diabetes 2004，53，535-541)。如在Brocklehurst等(Diabetes 2004，53，535-541)中所述，在GLKRP的存在或不存在下，采用该试验可评价GLK被化合物的激活。
如由Brocklehurst等所述，在不存在GLKRP下评价本发明化合物并且激活的葡糖激酶的EC50值显示如下。
表C
  实施例号   EC50值(μM)
  1   0.069
  2   0.055
  3   0.065
  4   0.033
  5   0.079
  6   0.077
重组GLK和GLKRP的产生：
采用在Sambrook J，Fritsch EF & Maniatis T，1989中描述的已确立技术，用分别来自人胰和肝mRNA的PCR得到人GLK和GLKRPcDNA。PCR引物按照在Tanizawa等，Proc Natl Acad Sci 1991 Aug 15；88(16)：7294-7和Warner等，Mamm Genome，1995 Aug；6(8)：532-6中显示的GLK和GLKRP cDNA序列设计。
在Bluescript II载体中克隆
使用pBluescript II，在大肠杆菌中克隆GLK和GLKRP cDNA。
转化
通常经电穿孔实施大肠杆菌转化。使菌株DH5a或BL21(DE3)的400mL培养物在L-肉汤液体培养基中生长至OD 600为0.5并经在2000g离心收获。用冰冷的去离子水冲洗细胞两次，再悬浮于1mL 10％甘油中并以等分试样贮存于-70℃下。采用Millipore V系列(series)TM膜(0.0025mm孔径大小)将连接混合物脱盐。将40mL细胞与1mL连接混合物或质粒DNA在冰上0.2cm电穿孔池中温育10分钟，然后采用GenePulserTM装置(BioRad)以0.5kV cm-1，250mF脉冲。在用10mg/mL四环素或100mg/mL氨苄青霉素补充的L-琼脂上选择转化。
表达
GLK在大肠杆菌BL21细胞中的载体pTB375NBSE中表达，产生含有与N-末端甲硫氨酸紧相邻的6-His标记的重组蛋白。或者，另一种合适的载体为pET21(+)DNA，Novagen，登记号697703。6-His标记用于在填充购自Qiagen(登记号30250)的镍-次氮基三乙酸琼脂糖的柱上纯化重组蛋白。
GLKRP在大肠杆菌BL21细胞中的载体pFLAG CTC(IBI Kodak)中表达，产生含有C-末端FLAG标记的重组蛋白。蛋白经DEAESepharose离子交换作用初步纯化，随后在购自Sigma-Aldrich(登记号A1205)的M2抗FLAG免疫亲合柱上采用FLAG标记进行最后纯化。
(2)口服葡糖耐量试验(OGTT)
在试验前对喂饲高脂肪膳食(45％千卡脂肪)至少两周的有意识Zucker肥胖fa/fa大鼠(年龄12-13周或更大)实施口服葡糖耐量试验(G.JCoope et al，British Journal of Pharmacology，(2006)149，328-335)。动物在用于试验前禁食2小时。在以2g/kg体重的剂量口服给予葡萄糖溶液之前120分钟，口服给予受试化合物或媒介物。采用Accucheck血糖测量仪，从在给予葡萄糖之前或之后的不同时间点(时程为60分钟)采取的尾血样本测量血糖水平。生成血糖水平的时间曲线并计算120分钟时程的曲线下面积(AUC)(给予葡萄糖的时间为0时)。采用以媒介物-对照组作为0％减少的AUC测定血糖波动的％减少。
参考文献
1 Printz，R.L.，Magnuson，M.A.and Granner，D.K.(1993)营养学年评(Annual Review of Nutrition)13，463-96
2 DeFronzo，R.A.(1988)Diabetes 37，667-87
3 Froguel，P.，Zouali，H.，Vionnet，N.，Velho，G.，Vaxillaire，M.，Sun，F.，Lesage，S.，Stoffel，M.，Takeda，J.and Passa，P.(1993)新英格兰医学杂志(New England Journal of Medicine)328，697-702
4 Bell，G.I.，Pilkis，S.J.，Weber，I.T.and Polonsky，K.S.(1996)生理学年评(Annual Review of Physiology)58，171-86
5 Velho，G.，Petersen，K.F.，Perseghin，G.，Hwang，J.H.，Rothman，D.L.，Pueyo，M.E.，Cline，G.W.，Froguel，P.and Shulman，G.I.(1996)临床研究杂志(Journal of Clinical Investigation)98，1755-61
6 Christesen，H.B.，Jacobsen，B.B.，Odili，S.，Buettger，C.，Cuesta-Munoz，A.，Hansen，T.，Brusgaard，K.，Massa，O.，Magnuson，M.A.，Shiota，C.，Matschinsky，F.M.and Barbetti，F.(2002)Diabetes51，1240-6
6a Gloyn，A.L.，Noordam，K.，Willemsen，M.A.A.P.，Ellard，S.，Lam，W.W.K.，Campbell，I.W.，Midgley，P.，Shiota，C.，Buettger，C.，Magnuson，M.A.，Matschinsky，F.M.，and Hattersley，A.T.；Diabetes52：2433-2440
7 Glaser，B.，Kesavan，P.，Heyman，M.，Davis，E.，Cuesta，A.，Buchs，A.，Stanley，C.A.，Thornton，P.S.，Permutt，M.A.，Matschinsky，F.M.andHerold，K.C.(1998)新英格兰医学杂志(New England Journal ofMedicine)338，226-30
8 Caro，J.F.，Triester，S.，Patel，V.K.，Tapscott，E.B.，Frazier，N.L.andDohm，G.L.(1995)激素和代谢研究(Hormone & MetabolicResearch)27，19-22
9 Desai，U.J.，Slosberg，E.D.，Boettcher，B.R.，Caplan，S.L.，Fanelli，B.，Stephan，Z.，Gunther，V.J.，Kaleko，M.and Connelly，S.(2001)Diabetes 50，2287-95
10 Shiota，M.，Postic，C.，Fujimoto，Y.，Jetton，T.L.，Dixon，K.，Pan，D.，Grimsby，J.，Grippo，J.F.，Magnuson，M.A.and Cherrington，A.D.(2001)Diabetes 50，622-9
11 Ferre，T.，Pujol，A.，Riu，E.，Bosch，F.and Valera，A.(1996)美国国家科学院会议论文集(Proceedings of the National Academy ofSciences of the United States of America)93，7225-30
12 Seoane，J.，Barbera，A.，Telemaque-Potts，S.，Newgard，C.B.andGuinovart，J.J.(1999)生物化学杂志(Journal of BiologicalChemistry)274，31833-8
13 Moore，M.C.，Davis，S.N.，Mann，S.L.and Cherrington，A.D.(2001)Diabetes Care 24，1882-7
14 Alvarez，E.，Roncero，I.，Chowen，J.A.，Vazquez，P.and Blazquez，E.(2002)神经化学杂志(Journal of Neurochemistry)80，45-53
15 Lynch，R.M.，Tompkins，L.S.，Brooks，H.L.，Dunn-Meynell，A.A.and Levin，B.E.(2000)Diabetes 49，693-700
16 Roncero，I.，Alvarez，E.，Vazquez，P.and Blazquez，E.(2000)神经化学杂志(Journal of Neurochemistry)74，1848-57
17 Yang，X.J.，Kow，L.M.，Funabashi，T.and Mobbs，C.V.(1999)Diabetes 48，1763-1772
18 Schuit，F.C.，Huypens，P.，Heimberg，H.and Pipeleers，D.G.(2001)Diabetes 50，1-11
19 Levin，B.E.(2001)国际肥胖症杂志(International Journal of Obesity)25，supplement 5，S68-S72.
20 Alvarez，E.，Roncero，I.，Chowen，J.A.，Thorens，B.and Blazquez，E.(1996)神经化学杂志(Journal of Neurochemistry)66，920-7
21 Mobbs，C.V.，Kow，L.M.and Yang，X.J.(2001)美国生理学-内分泌学杂志(American Journal of Physiology-Endocrinology &Metabolism)281，E649-54
22 Levin，B.E.，Dunn-Meynell，A.A.and Routh，V.H.(1999)美国生理学杂志(American Journal of Physiology)276，R1223-31
23 Spanswick，D.，Smith，M.A.，Groppi，V.E.，Logan，S.D.and Ashford，M.L.(1997)Nature 390，521-5
24 Spanswick，D.，Smith，M.A.，Mirshamsi，S.，Routh，V.H.and Ashford，M.L.(2000)Nature Neuroscience 3，757-8
25 Levin，B.E.and Dunn-Meynell，A.A.(1997)Brain Research 776，146-53
26 Levin，B.E.，Govek，E.K.and Dunn-Meynell，A.A.(1998)BrainResearch 808，317-9
27 Levin，B.E.，Brown，K.L.and Dunn-Meynell，A.A.(1996)BrainResearch 739，293-300
28 Rowe，I.C.，Boden，P.R.and Ashford，M.L.(1996)生理学杂志(Journal of Physiology)497，365-77
29 Fujimoto，K.，Sakata，T.，Arase，K.，Kurata，K.，Okabe，Y.andShiraishi，T.(1985)生命科学(Life Sciences)37，2475-82
30 Kurata，K.，Fujimoto，K.and Sakata，T.(1989)新陈代谢：临床和实验(Metabolism：Clinical & Experimental)38，46-51
31 Kurata，K.，Fujimoto，K.，Sakata，T.，Etou，H.and Fukagawa，K.(1986)生理学和行为学(Physiology & Behavior)37，615-20
32 Jetton T.L.，Liang Y.，Pettepher C.C.，Zimmerman E.C.，Cox F.G.，Horvath K.，Matschinsky F.M.，and Magnuson M.A.，J.Biol.Chem.，Feb 1994；269：3641-3654
33 Reimann F.and Gribble F.M.，Diabetes 2002 51：2757-2763
34 Cheung A.T.，Dayanandan B.，Lewis J.T.，Korbutt G.S.，Rajotte R.V.，Bryer-Ash M.，Boylan M.O.，Wolfe M.M.，Kieffer T.J.，Science，Vol290，Issue 5498，1959-1962，8 December 2000

Claims (6)

1.化合物5-[3-[(2S)-1-(二氟甲氧基)丙-2-基]氧基-5-[(5-甲基吡嗪-2-基)氨基甲酰基]苯氧基]-N，N-二甲基-吡嗪-2-甲酰胺或其盐。
2.一种药用组合物，其包含与药学上可接受的稀释剂或载体一起的化合物5-[3-[(2S)-1-(二氟甲氧基)丙-2-基]氧基-5-[(5-甲基吡嗪-2-基)氨基甲酰基]苯氧基]-N，N-二甲基-吡嗪-2-甲酰胺或其药学上可接受的盐。
3.权利要求1的化合物，或其药学上可接受的盐在制备用于治疗通过GLK介导的疾病的药物中的用途。
4.权利要求1的化合物，或其药学上可接受的盐在制备用于治疗2型糖尿病的药物中的用途。
5.权利要求1的化合物，或其药学上可接受的盐在制备用于治疗肥胖症的药物中的用途。
6.一种药用组合物，其包含：
化合物5-[3-[(2S)-1-(二氟甲氧基)丙-2-基]氧基-5-[(5-甲基吡嗪-2-基)氨基甲酰基]苯氧基]-N，N-二甲基-吡嗪-2-甲酰胺或其药学上可接受的盐；和一种或多种用于治疗糖尿病和/或肥胖症的药物，及药学上可接受的稀释剂或载体。
CN2007800474769A 2006-10-26 2007-10-25 作为葡糖激酶(glk)激活剂的苯甲酰氨基杂环化合物 Expired - Fee Related CN101563330B (zh)

Applications Claiming Priority (5)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US86305606P 2006-10-26 2006-10-26
US60/863,056 2006-10-26
US95737007P 2007-08-22 2007-08-22
US60/957,370 2007-08-22
PCT/GB2007/004057 WO2008050117A1 (en) 2006-10-26 2007-10-25 Benzoyl amino heterocyclyl compounds as glucokinase (glk) activators

Related Child Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201010118676A Division CN101805299A (zh) 2006-10-26 2007-10-25 作为葡糖激酶(glk)激活剂的苯甲酰氨基杂环化合物

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN101563330A CN101563330A (zh) 2009-10-21
CN101563330B true CN101563330B (zh) 2012-06-27

Family

ID=41221547

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN2007800474769A Expired - Fee Related CN101563330B (zh) 2006-10-26 2007-10-25 作为葡糖激酶(glk)激活剂的苯甲酰氨基杂环化合物

Country Status (3)

Country Link
CN (1) CN101563330B (zh)
UA (1) UA95815C2 (zh)
ZA (1) ZA200902644B (zh)

Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2003015774A1 (en) * 2001-08-17 2003-02-27 Astrazeneca Ab Compounds effecting glucokinase
EP1600442A1 (en) * 2003-02-26 2005-11-30 Banyu Pharmaceutical Co., Ltd. Heteroarylcarbamoylbenzene derivative

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2003015774A1 (en) * 2001-08-17 2003-02-27 Astrazeneca Ab Compounds effecting glucokinase
EP1600442A1 (en) * 2003-02-26 2005-11-30 Banyu Pharmaceutical Co., Ltd. Heteroarylcarbamoylbenzene derivative

Also Published As

Publication number Publication date
UA95815C2 (en) 2011-09-12
ZA200902644B (en) 2010-09-29
CN101563330A (zh) 2009-10-21

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN101805299A (zh) 作为葡糖激酶(glk)激活剂的苯甲酰氨基杂环化合物
US7943607B2 (en) Heteroaryl benzamide derivatives for use as GLK activators in the treatment of diabetes
JP4651714B2 (ja) 糖尿病の治療においてｇｌｋ活性化剤として使用するためのヘテロアリールベンズアミド誘導体
US20110053910A1 (en) 2 -heterocyclyloxybenzoyl amino heterocyclyl compounds as modulators of glucokinase for the treatment of type 2 diabetes
US20100160286A1 (en) Heteroarylcarbamoylbenzene derivatives for the treatment of diabetes
US20070287693A1 (en) Benzamide Derivatives That Act Upon The Glucokinase Enzyme
JP2008516936A (ja) ２型糖尿病および肥満の処置において有用であるフェノキシベンズアミド化合物
CN101233128B (zh) 在糖尿病治疗中用作glk激活剂的杂芳基苯甲酰胺衍生物
CN101563330B (zh) 作为葡糖激酶(glk)激活剂的苯甲酰氨基杂环化合物
CN101218230A (zh) 在糖尿病治疗中用作glk激活剂的杂芳基苯甲酰胺衍生物
CN101568534A (zh) 用于治疗glk介导的疾病的苯甲酰基氨基杂环化合物
CN101228162A (zh) 作为葡糖激酶调节剂的2-苯基取代的咪唑并[4,5b]吡啶/吡嗪和嘌呤衍生物
MXPA06009510A (en) Compounds

Legal Events

Date Code Title Description
C06 Publication
PB01 Publication
C10 Entry into substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
C14 Grant of patent or utility model
GR01 Patent grant
C17 Cessation of patent right
CF01 Termination of patent right due to non-payment of annual fee

Granted publication date: 20120627

Termination date: 20121025