CN101536663B - 一种广西莪术水培开花的方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种广西莪术水培开花的方法，其包括以下步骤：(1)种球预处理：采集、筛选、分级、清洗和消毒广西莪术种球；(2)冷藏：将广西莪术种球在13～20℃，相对湿度(RH)70～95％的冷藏室内冷藏30～60天；(3)催芽：将种球从冷藏室中取出，放进25～30℃，相对湿度≥90％的温室中催芽10～30天；(4)培养花芽：将催芽后的种球放置于培养室中进行水培，至芽体膨大，绿色总苞片内现出紫红色花序，但花序未露出来；培养室的培养条件为：25～32℃，相对湿度70～90％，光照强度45μmol m^-2s^-1；(5)水培开花：将经步骤(4)处理后的种球置于自然条件下进行水培直至开花。本发明将原来只适合土栽和盆栽的方式种植开花的广西莪术实现了水培开花，使广西莪术成为一种水培花卉。

Description

一种广西莪术水培开花的方法

技术领域

本发明涉及一种植物水培的方法，尤其是涉及一种广西莪术水培开花的方法。

背景技术

广西莪术(Curcuma kwangsiensis)是姜科(Zingberaceae)姜黄属(Curcuma)多年生草本植物，又名毛莪术、桂莪术，属一种亚热带球根花卉，在华南地区栽培或野生。广西莪术生长要求阳光充足，不耐水湿，喜富含有机质、疏松肥沃、保水保肥力强而排水性良好的壤土，土壤以中性至微酸性最好。广西莪术株高0.5～1.1m，穗状花序春季从根茎抽出或秋季从叶鞘内抽出，花序奇特艳丽，形如宝塔，有淡雅香味，具有极高的观赏价值，是一种极具开发潜力的花卉资源，也符合国际园艺学会定义的新花卉植物。广西莪术在自然条件下的花期为4～6月和7～9月，11月份叶片开始黄化，11月至翌年2月地下种球处于休眠期，春季3～4月气温达25℃时花芽开始分化。

水培花卉属于无土栽培花卉，是一种不用土壤而用营养液及其配套设备栽培植物的农业新技术，是继20世纪70年代世界农业的“绿色革命”之后又兴起的新“栽培革命”。水培花卉以水作为花卉生长的基质，适当地添加营养液以人工创造的实际环境来取代自然土壤环境，满足花卉对矿质营养、水分和空气条件的需要，能人为地控制和调整，以促进花卉的生长和发育，并发挥它的最大生产能力。目前，世界上只有荷兰等少数几个国家在研究和种植水培花卉，我国的水培花卉还处于研究探索阶段，与花卉种植发达国家还存在有一定的差距。目前，我国已经成功培育了观叶类、观花类、仙人掌类等8个系列400多个品种的水培花卉，如：长寿花、东方百合、非洲紫罗兰、银皇后、三色竹芋等。

目前，对广西莪术的研究较多的是它的药用价值，作为观赏花卉的研究较少，至今未见有关广西莪术栽培方面的研究报导。广西莪术不耐水湿的生长特性，通常被认为其不易进行水培，因此目前的栽培方式仍采用土壤地栽或盆栽。本发明的发明人曾尝试将广西莪术种球直接采用水培方式进行栽培，但是不能使种球开花。采用水培的方式对广西莪术进行栽培，由于改变了广西莪术的生长基质，即使广西莪术种球经过低温冷藏打破种球的休眠，直接进行水培，虽然经过长时间培养可发叶芽，进行营养生长，但是广西莪术是不开花的。这是由于广西莪术种球生长的环境条件，包括温度、湿度、养分等，对广西莪术的花芽分化、花苞形成和花朵的开放有着重要的影响的缘故。

发明内容

本发明的目的是提供一种广西莪术水培开花的方法。该方法通过对广西莪术种球进行冷藏、催芽和水培处理后，使其能在水培的条件下也能开花，成为极具观赏性的高级水培花卉。

本发明的目的是通过以下技术措施来实现的：一种广西莪术水培开花的方法，其包括以下步骤：

(1)种球预处理：采集、筛选、分级、清洗和消毒广西莪术种球；

(2)冷藏：将广西莪术种球在13～20℃，相对湿度(RH)70～95％的冷藏室内冷藏30～60天；

(3)催芽：将种球从冷藏室中取出，放进25～30℃，相对湿度(RH)≥90％的温室中催芽10～30天；

(4)培养花芽：将催芽后的种球放置于培养室中进行水培，至芽体膨大，绿色总苞片内现出紫红色花序，但花序未露出来；培养室的培养条件为：25～32℃，相对湿度(RH)70～90％，光照强度45μmol m^-2s^-1；

(5)水培开花：将经步骤(4)处理后的种球置于自然条件下进行水培至开花。

广西莪术种球在11月份已经或开始进入休眠期，此时，将种球放在13～20℃的低温下贮藏，其呼吸作用相对较弱，此时淀粉水解成糖类，其中仅有少部分糖类用于维持种球的新陈代谢，大部分保存在种球中，为种球的萌发提供大量的能源物质，因此经过冷藏处理的种球可以在短期内打破种球的休眠；之后将冷藏后的种球放在25～30℃温度下催芽可促使种球发芽和诱导花芽分化；最后在温度为25～32℃，相对湿度(RH)70～90％，光照强度45μmol m^-2s^-1的培养室内培养至芽体膨大，绿色的总苞片内刚现出紫红色花序，但花序未露出来，此时花芽发育得较成熟，已形成不可逆转的花芽，就可放置在亚热带春季自然条件或人工同等条件下水培至开花。

本发明步骤(2)中冷藏的温度优选13～17℃，最佳为14～17℃。所述的冷藏时间优选40～60天，最佳为50～60天。

本发明步骤(4)中培养室培养的光照周期为12小时/天～24小时/天。

本发明步骤(5)所述的自然条件是指亚热带地区冬季或春季的自然条件，也可以是人工仿造的类似条件，即温度在10℃以上，湿度在40％以上，光强15μmol m^-2s^-1以上，光照周期为9小时/天以上。

本发明可作以下改进：为了保护种球在低温下能够长时间生存，以及在催芽时为种球提供充足的水分，在步骤(2)冷藏和步骤(3)催芽中均在种球上覆盖干净且疏松的培养介质；冷藏或催芽期间每天喷水两次。

所述的培养介质可以是经过消毒的沙、泥炭土和珍珠岩中的一种，也可以是它们中任意两种或三种的混合；湿润疏松的培养介质可为种球提供足够的氧气和水分，有利于种球的呼吸和花芽在生长过程中对水分的需求。而水分可使种球种皮软化，增加透水性和透气性，使胚易于突破，有助于胚细胞代谢活动的加强，增强呼吸作用、酶的活性以及各种生理生化反应；水分有利于种球内贮藏的有机物分解为简单的可溶性化合物以及有助于这些物质的运输和利用。种球萌发时，呼吸作用增强，需要吸入大量氧气，把细胞内贮藏的营养物质如葡萄糖逐渐氧化分解为二氧化碳和水，并释放出能量供各种生理活动利用。

本发明在步骤(4)的培养室水培和步骤(5)自然条件下的水培时，水培液面高度为种球高度的1/3～1/2左右，可为种球提供足够的水分，同时保证种球能吸入足够的氧气，有利于种球的花芽在生长过程中对水分的需求。而过多的水会使种球吸取的氧气大大减少，减弱了种球的呼吸，影响花芽的生长。

本发明还可作以下改进：在步骤(4)中的培养花芽和步骤(5)的水培时，均每隔8～12天添加营养液，可有效控制和降低种球的腐烂率，并有利于广西莪术开花。

所述的营养液选用MS营养液，其是一种低电导度营养液，含有植物所需的氮、磷、钾、锌、铜、钼、铁等大量元素和微量元素。由于不同浓度的营养液对广西莪术的生长开花有很大影响，浓度过低，影响广西莪术的正常吸收，甚至可能产生浓度差而导致广西莪术失水；高浓度时则会抑制生长，甚至使植物死亡。因此，所述的MS营养液的浓度为MS营养液母液浓度的1/4～1/32倍，优选浓度为MS营养液母液浓度的1/4～1/16倍。所述的MS营养液母液根据现有配方配制。

本发明步骤(1)所述的种球选择当年新球，并且是在当年10月和11月采集广西莪术地上部分枯萎后的种球，用于第二年的春节开花。

由于广西莪术的发芽率与蛋白质的含量高低有明显的相关性，而种球越大，其体内的蛋白质含量越高，因此，本发明所述的种球选用直径为2～6cm种球，其中优选直径为3～6cm种球，最佳选用4～6cm的种球，如果种球直径超过6cm也是可以的。

本发明所述的广西莪术水培开花的方法，有益效果如下：

下面具体的实验及实验数据可以使本技术领域技术人员更全面地理解本发明，但不以任何方式限制本发明：

一、实验内容：

将种球分为2类：去年老球；当年新球。当年新球按直径大小分为4级：1级(直径4～6cm)、2级(直径3～4cm)、3级(直径2～3cm)、4级(直径2cm以下)，挑选后的种球全部浸泡于800倍的百菌清溶液中10min，取出晾干备用。

测定指标：

种球贮藏和催芽使用SANYO Incubator MIR-553恒温培养箱，水培培养种球的培养室条件为：30±2℃，70±10％RH，光照强度45μmol m^-2s^-1，光照周期24小时/天。处理50个种球。记录从水培至始花(花序基部第一朵小花开放)、展叶(第1个叶片张开)和凋萎(花序上50％苞片凋萎为寿命终止)的天数，分别记为DTB(Days to flowering)、DTL(Days to leaf opening)和DTS(Days to flowering senescence)；测量花枝长度；花枝粗度。统计开花率(开花的种球数/处理的种球数)；腐烂率(腐烂的种球个数/处理的种球数)；花枝寿命(始花至凋萎天数)。

将苞片色泽分成3级：

0：仅花序顶部苞片为紫红色，其它部分为淡紫色或近于白色；

1：花序上1/3～2/3苞片为紫红色，色泽不够鲜艳明亮；

2：花序上2/3以上苞片均为鲜艳紫红色且色泽明亮。

统计分析

采用SPSS 11.0软件进行LSD分析，所得的结果均差异显著(P＜0.05)。

1.种球级别对广西莪术开花的影响

将4个级别的新种球和去年老种球全部于15℃下冷藏40天，再置于30℃催芽30天后，于培养室中水培，观察种球级别对广西莪术开花的影响(参见表1)。

表1种球级别对广西莪术开花的影响

种球级别	开花率(％)	水培至始花天数DTB	花枝寿命(天)	花枝高度(cm)	花枝粗度(cm)
						老球	0	-	-	-	-
1级	52.0	18	50	26.52	1.46
						2级	56.0	25	35b	22.82	1.29
3级	15	31	27	19.13	1.11
						4级	0	-	-	-	-

从表1可以看出，老种球和4级种球开花率为零，均未能开花。1、2级种球开花率最高，极显著高于3级种球。1级种球比2级、3级种球始花期分别提前7天、13天，花枝寿命分别长15天、23天，3个级别的种球始花期和花枝寿命差异显著。花枝高度和花枝粗度从1级种球到3级种球依次递减，且差异显著。

2.贮藏及催芽对广西莪术种球品质及开花的影响

(1)将当年新种球分别放于2℃、8℃、13℃、15℃、17℃、20℃、室温(21～32℃)40天，筛选最佳冷藏温度(参见表2)。

表2贮藏温度对广西莪术种球发芽率与腐烂率的影响

种球品质	2℃	8℃	13℃	15℃	17℃	20℃	21～32℃(室温)
								发芽率(％)	0	0	34	66	34	14	10
腐烂率(％)	34	22	0	0	0	0	0

从表2可知，当贮藏温度低至8℃时，广西莪术种球的发芽率为零，腐烂率为22％，随着贮藏温度的降低，种球腐烂率逐渐升高。贮藏温度达13℃时，贮后种球发芽率为34％，贮藏温度为15℃时，发芽率最高，达66％，随着贮藏温度的进一步升高，种球的发芽率下降。

(2)将2级新种球进行冷藏温度、催芽温度和时间的组合处理(参见表3，4)，然后置于培养室中水培。

表3冷藏和催芽处理对广西莪术开花率(％)的影响

从表3可见，相同的冷藏时间，30℃催芽的种球开花率高于25℃催芽的种球；相同冷藏时间和催芽温度下，催芽时间越长，水培开花率越高。相同催芽条件下，冷藏时间越长，水培开花率越高。因此，广西莪术种球经15℃冷藏30-60天后，30℃高温催芽，可极大地提高其开花率，尤其是15℃冷藏50天后，30℃催芽30天，广西莪术种球开花率最高达92.00％；而冷藏时间不足30天的种球，开花率为零。

表4冷藏和催芽处理对广西莪术种球DTF的影响

从表4可见，相同的催芽温度和催芽时间下，冷藏时间越长，DTF越短。冷藏30～60天的广西莪术种球，25℃催芽10天，其DTF从65天缩短到55天；25℃催芽20天，其DTF从62天缩短到32天；25℃催芽30天，其DTF从54天缩短到30天；30℃催芽30天，其DTF从25天缩短到12天。冷藏和催芽处理极大地提前了种球开花的时间。在培养室中水培的广西莪术从始花至盛花所需时间约为8～10天，在冬季常温下，广西莪术花枝寿命可达50天以上。冷藏30～60天，30℃催芽的种球盛花期均在春节期间，故生产上可选用此法进行迎春栽培。

表5冷藏和催芽处理对广西莪术DTL的影响

从表5可见，15℃冷藏10～60天，25℃催芽10天，广西莪术种球的DTL从75天降至51天，且所有种球均是先展叶后开花；相同冷藏时间下，随着25℃催芽时间延长，DTL缩短；当25℃催芽时间延长至30天时，广西莪术种球先开花后展叶，尤其是30℃催芽30天的种球开至盛花期后才开始展叶，整个水养期间观赏价值较高。

3.自然条件下的培养对不同发育时期的广西莪术开花的影响

将2级新球分批冷藏、催芽后，于培养室中水培一段时间后，挑选7个发育阶段的广西莪术(参见图1)：

阶段1：种球4冒出洁白的芽体1，芽长3～5cm；

阶段2：芽体1尖端转红，芽长6～8cm

阶段3：芽体1转绿，中部开始膨大；

阶段4：芽体1膨大，绿色的总苞片2内刚现出紫红色花序3，但花序3未露出来；

阶段5：紫红色花序3从苞片内露出，长约0.5cm；

阶段6：紫红色花序3长度达6～8cm；

阶段7：紫红色花序3基部第一个苞片2张开；

将以上7个阶段的广西莪术同时取出，放在亚热带地区无暖气的室内，RH 40～70％，自然光照进行条件下水培。

表6自然条件下的培养对不同发育时期广西莪术开花的影响

阶段	花枝长度(cm)	花枝粗度(cm)	花苞片数	DTB	DTS	开花率(％)	苞片色泽(级别)
								1	-	-	-	-	-	0	-
2	17.05	0.95	11	39	85	50	0
								3	17.5	0.9	13	31	82	66	1
4	19.2	0.83	17	28	81	100	1
								5	18.1	0.7	14	26	79	100	2
6	18.8	0.67	12	24	76	100	2

7

20.7

0.77

16

21

73

100

2

表6可见，阶段1置于所述自然条件下水培不能开花；阶段2、3在所述自然条件下可以开花，但开花率仅为67.5％，阶段4～7在所述自然条件下水培开花率均为100％。DTB和DTS由阶段1～7逐渐递减，表明广西莪术种球发育到较晚阶段置于自然条件下水养会显著加快始花和凋萎的进程，且色泽更加鲜艳，但对其它花枝长度、粗度、花苞片数无明显影响。如果发育阶段过早就置于自然条件下，广西莪术只进行营养生长，不能开花，即使开花，其苞片色泽也不够鲜艳，影响观赏价值。发育到较晚阶段置于自然条件下水培对开花品质有利，但成本增加，综合考虑，优选广西莪术种球在培养室中发育到阶段5(紫红色花序从苞片内露出，长约0.5cm)，再置于所述自然条件下进行水培其花枝品质最好。

4.营养液对广西莪术的生长影响

A、贮藏处理：将所有种球放入13℃冷藏室中进行冷藏处理30天。

B、催芽处理：种球冷藏30天后从冷藏室中取出，置于30℃的室内催芽30天。

C、水培生长：将催芽后的种球放置于容器中，并用少量的沙子使种球固定容器中，在27-28℃，3000LUX光强，每天24小时的条件下水培3天后，分别用不同浓度MS营养液水培。

将所有种球分为3组，其中每组处理2级种球5个，3级种球18个，4级种球24个，将3组种球水培3天后，分别浸泡于清水；1/4倍MS营养液；1/8倍MS营养液；1/16倍MS营养液；1/32倍MS营养液中，记为T1(对照)；T2；T3；T4；T5，实验其它过程加入清水。MS营养液母液根据现有配方配制。

表7不同营养水平MS营养液对广西莪术腐烂率和开花率的影响

从表7中表明，各处理的腐烂率都是2级种球＜3级种球＜4级种球，特别是4级种球的腐烂率很高，严重影响到广西莪术种球的正常生长和成活率。2级种球的发育情况良好，抗性也较好，因此腐烂率低。4级种球较弱，容易受到外界条件的影响而产生变化从而导致腐烂。而1/8倍MS营养液处理的3级种球的腐烂率相对其它处理较低。

表7各处理开花率规律基本为2级种球＞3级种球＞4级种球，2级种球内的营养物质含量最丰富，能更好地提供植株的生长和开花。其中以1/8倍MS营养液的开花率是最高的，1/4倍MS营养液处理其次。说明营养液浓度适中，不仅能控制和减少种球的腐烂，还有利于其开花。

表8中数据表明在各处理的2级种球中，又以1/8倍MS营养液处理的开花期和盛花期都最早，开花的质量综合也是最高的，其中1/4倍MS营养液处理的效果次之。对照效果最不理想，开花率和开花质量都是最差的。说明了植株在生长过程中需要吸收一定的营养才能较好、较稳定地从营养生长转化生殖生长。因此，从表8中得出，相同条件下，在1/8倍MS培养液中的广西莪术的生殖生长影响最好，1/4次之。而其它处理随着浓度的降低，从开花率、开花时间等开花质量都在呈现下降的趋势。

表8不同浓度的MS营养液对广西莪术2级种球开花的影响

处理	开花率(％)	始花期(天)	盛花期	盛花期花枝高度(CM)	盛花期花枝粗度(CM)	花苞片数	苞片色泽(级)
								T1	20	26	34	18	0.87	13	0
T2	60	21	26	19.3	1.07	14	2
								T3	100	18	25	21.3	1.05	17	2
T4	40	22	28	18.25	0.82	16	1
								T5	20	26	32	19.4	0.92	13	1

从表9显示出，从4周后的芽长高度分析，植株高度依此为T3、T2、T4、T5、T1，T3(即1/8倍MS营养液)对广西莪术种球正常生长的效果最好，植株叶芽生长高度最高，对照处理中植株的生长情况最差，植株长势教弱。表明各浓度MS营养液对广西莪术的生长都有一定的促进作用，能为广西莪术生长提供一定的营养物质，其中各浓度中的效果又以1/8倍MS营养液最佳，其次是1/4倍MS营养液，而1/16倍MS营养液、1/32倍MS营养液次之，对照中植株长势则最差。

从表9中还可以得知，植株在前4周的生长速度基本维持在一个较高的水平，而1/8倍MS营养液和1/4倍MS营养液处理中的叶芽生长速度在前期比较快，其它处理则相对以比较稳定的速度在增长。

表9不同浓度MS营养液对广西莪术种球芽长的影响

以上实验结果表明本发明具有以下有益效果：

(1)本发明将原来只适合土栽和盆栽的方式种植开花的广西莪术实现了水培开花，使广西莪术成为一种水培花卉。

(2)本发明同时还实现了广西莪术花期的调整，使原本要在4～6月和7～9月开花的广西莪术能够在春节期间开花及盛花，可为春节提供一种高档的年宵水培花卉。

(3)水培提高了广西莪术花卉的生产力：在广西莪术种球催芽后取出进行水培时，可密集放入浅口的培养器皿中，种球间不需留空隙，一个培养器皿中可放多个种球，例如用直径30cm的浅口培养器皿，每盆装15～20个球，而土培只有1～2个球。可见水培的培养能力是为土培的10倍以上。

(4)在广西莪术迎春水培生产中，适宜在广西莪术于地上部分枯萎时采挖种球，优选1～2级种球(种球直径3～6cm)，并优选15℃低温冷藏30～60天后，30℃催芽30天，再置于30℃培养室中水养至第4阶段，可成为高品质迎春水培花卉。

附图说明

图1是广西莪术的7个发育阶段的形态示意图；

其中，1：芽体；2：苞片；3：紫红色花序；4：种球。

具体实施方式

以下通过实施例对本发明内容做进一步阐述：

实施例一：

(1)种球预处理：采集当年10月份广西莪术地上部分枯萎后的种球，剪除枯根、老根，清洗干净，筛选，分级，选择直径为4～6cm的种球，然后浸泡在800倍的百菌清溶液中10min，取出晾干；

(2)冷藏：将上述经预处理后的广西莪术种球放置于培养盘中，在种球上覆盖经消毒且湿润疏松的沙，沙的湿润程度以手握成团，松开即散为宜；然后将培养盘放进15℃、RH为70％的冷藏室内冷藏60天，冷藏期间每天早晚各喷水一次，以保持冷藏室内RH为70％；

(3)催芽：将广西莪术种球从冷藏室中取出，种球依然覆盖有沙，放进30℃、RH≥90％的温室中催芽30天，催芽期间每天早晚各喷水一次，以保持温室内RH≥90％；

(4)培养花芽：将催芽后的种球放置于培养室中进行水培，水培液面深度为种球高度的1/3，培养条件为：27±2℃，RH 80±10％，光照强度45μmol m^-2s^-1，光照周期24小时/天，培养至芽体膨大，绿色的总苞片内刚现出紫红色花序，但花序未露出来的时候，此时花芽发育得较成熟。

(5)水培开花：将经步骤(4)处理后花芽发育较成熟的种球置于亚热带地区春节的自然条件下或者人工同等条件下进行水培直至开花，即将花芽发育较成熟的种球放入水容器中，水培液面深度为种球高度的1/3，培养的环境温度在10℃以上，湿度在40％以上，光强15μmol m^-2s^-1以上，光照周期为9小时/天以上。广西莪术的开花率83.3％，DTF12天，DTL36天，花序长度达30cm，整个花期为35～45天左右，苞片为鲜艳紫红色且色泽明亮。

实施例二：

(1)种球预处理：采集当年10月份广西莪术地上部分枯萎后的种球，洗去泥土、剪去须根，筛选，分级，选择直径为4～6cm的广西莪术种球，然后将其浸泡在800倍的百菌清溶液中10min，取出晾干；

(2)冷藏：将上述经预处理后的广西莪术种球放置于培养盘中，在种球上覆盖经消毒且湿润的泥炭土，泥炭土的湿润程度以手握成团，松开即散为宜；然后将培养盘放进15℃、RH为80％的冷藏室内冷藏50天，冷藏期间每天早晚各喷水一次，以保持冷藏室内RH为80％；

(3)催芽：将种球从冷藏室中取出，种球依然覆盖有泥炭土，放进30℃、RH≥90％的温室中催芽30天，催芽期间每天早晚各喷水一次，以保持温室内RH≥90％；

(4)花芽培养：将催芽后的种球放置于培养室中水培。水培液面深度为种球高度的1/3，培养条件为：30±2℃，RH 70±10％，光照强度45μmol m^-2s^-1，光照周期20小时/天，培养至芽体膨大，绿色的总苞片内刚现出紫红色花序，但花序未露出来的时候，此时花芽发育得较成熟。

(5)水培开花：将经步骤(4)处理后花芽发育较成熟的种球置于亚热带地区春节的自然条件下或者人工同等条件下进行水培直至开花，即将花芽发育较成熟的种球放入水容器中，水培液面深度为种球高度的1/2，培养的环境温度在10℃以上，湿度在40％以上，光强15μmol m^-2s^-1以上，光照周期为9小时/天以上。广西莪术的开花率92％，DTF18天，DTL40天，花序长度达28cm，整个花期为35～45天左右，苞片为鲜艳紫红色且色泽明亮。

实施例三：

(1)种球预处理：采集当年11月份广西莪术地上部分枯萎后的种球，洗去泥土、剪去须根，筛选，分级，选择直径为3～4cm的种球，然后将其浸泡在800倍的百菌清溶液中10min，取出晾干；

(2)冷藏：将上述经预处理后的广西莪术种球培养盘中，在种球上覆盖经消毒且湿润的珍珠岩，珍珠岩的湿润程度以手握成团，松开即散为宜；然后将培养盘放进15℃、RH为90％的冷藏室内冷藏40天，冷藏期间每天早晚各喷水一次，以保持冷藏室内RH为90％；

(3)催芽：将种球从冷藏室中取出，种球依然覆盖有珍珠岩，放进30℃、RH≥90％的温室中催芽30天，催芽期间每天早晚各喷水一次，以保持温室内RH≥90％；

(4)花芽培养：将催芽后的种球放置于培养室中水培。水培液面深度为种球高度的1/3，培养条件为：30±2℃，RH 70±10％，光照强度45μmol m^-2s^-1，光照周期16小时/天，培养至芽体膨大，绿色的总苞片内刚现出紫红色花序，但花序未露出来的时候，此时花芽发育得较成熟。

(5)水培开花：将经步骤(4)处理后花芽发育较成熟的种球置于亚热带地区春节的自然条件下或者人工同等条件下进行水培直至开花，即将花芽发育较成熟的种球放入水容器中，水培液面深度为种球高度的1/2，培养的环境温度在10℃以上，湿度在40％以上，光强15μmol m^-2s^-1以上，光照周期为9小时/天以上。广西莪术的开花率56％，DTF24天，DTL40天，花序长度达30cm，整个花期为35～45天左右，苞片为鲜艳紫红色且色泽明亮。

实施例四：

(1)种球预处理：采集当年11月份广西莪术地上部分枯萎后的种球，洗去泥土、剪去须根，筛选，分级，选择直径为3～4cm的种球，然后将其浸泡与800倍的百菌清溶液中10min，取出晾干；

(2)冷藏：将上述经预处理后的广西莪术种球培养盘中，在种球上覆盖经消毒的干净且湿润的沙，沙的湿润程度以手握成团，松开即散为宜；然后将培养盘放进15℃、RH为95％的冷藏室内冷藏30天，冷藏期间每天早晚各喷水一次，以保持冷藏室内RH为95％；

(3)催芽：将种球从冷藏室中取出，种球依然覆盖有珍珠岩，放进30℃、RH≥90％的温室中催芽30天，催芽期间每天早晚各喷水一次，以保持温室内RH≥90％；

(4)花芽培养：将催芽后的种球取出，放置于培养室中水培。水培液面深度为种球高度的1/3，培养条件为：30±2℃，RH 70±10％，光照强度45μmol m^-2s^-1，光照周期24小时/天，培养至芽体膨大，绿色的总苞片内刚现出紫红色花序，但花序未露出来的时候，此时花芽发育得较成熟。

(5)水培开花：将经步骤(4)处理后花芽发育较成熟的种球置于亚热带地区春节的自然条件下或者人工同等条件下进行水培直至开花，即将花芽发育较成熟的种球放入水容器中，水培液面深度为种球高度的1/2，培养的环境温度在10℃以上，湿度在40％以上，光强15μmol m^-2s^-1以上，光照周期为9小时/天以上。广西莪术的开花率46％，DTF 25天，DTL 48天，花序长度达32cm，整个花期为35～45天左右，苞片为鲜艳紫红色且色泽明亮。

实施例五：

(1)种球预处理：采集当年11月份广西莪术地上部分枯萎后的种球，洗去泥土、剪去须根，筛选，分级，选择直径为3～4cm的种球，然后将其浸泡与800倍的百菌清溶液中10min，取出晾干；

(2)冷藏：将上述经预处理后的广西莪术种球培养盘中，在种球上覆盖经消毒的干净且湿润的沙，沙的湿润程度以手握成团，松开即散为宜；然后将培养盘放进15℃、RH为85％的冷藏室内冷藏60天，冷藏期间每天早晚各喷水一次，以保持冷藏室内RH为95％；

(3)催芽：将种球从冷藏室中取出，种球依然覆盖有珍珠岩，放进25℃、RH≥90％的温室中催芽30天，催芽期间每天早晚各喷水一次，以保持温室内RH≥90％；

(4)花芽培养：将催芽后的种球取出，放置于培养室中水培。水培液面深度为种球高度的3/8，培养条件为：30±2℃，RH 70±10％，光照强度45μmol m^-2s^-1，光照周期18小时/天，培养至芽体膨大，绿色的总苞片内刚现出紫红色花序，但花序未露出来的时候，此时花芽发育得较成熟。

(5)水培开花：将经步骤(4)处理后花芽发育较成熟的种球置于亚热带地区春节的自然条件下或者人工同等条件下进行水培直至开花，即将花芽发育较成熟的种球放入水容器中，水培液面深度为种球高度的3/8，培养的环境温度在10℃以上，湿度在40％以上，光强15μmol m^-2s^-1以上，光照周期为9小时/天以上。广西莪术的开花率34％，DTF30天，DTL38天，花序长度达32cm，整个花期为35～45天左右，苞片为鲜艳紫红色且色泽明亮。

实施例六：

(1)种球预处理：采集当年11月份广西莪术地上部分枯萎后的种球，洗去泥土、剪去须根，筛选，分级，选择直径为3～4cm的种球，然后将其浸泡与800倍的百菌清溶液中10min，取出晾干；

(2)冷藏：将上述经预处理后的广西莪术种球培养盘中，在种球上覆盖经消毒的干净且湿润的沙，沙的湿润程度以手握成团，松开即散为宜；然后将培养盘放进15℃、RH为75％的冷藏室内冷藏50天，冷藏期间每天早晚各喷水一次，以保持冷藏室内RH为95％；

(3)催芽：将种球从冷藏室中取出，种球依然覆盖有珍珠岩，放进25℃、RH≥90％的温室中催芽30天，催芽期间每天早晚各喷水一次，以保持温室内RH≥90％；

(4)花芽培养：将催芽后的种球取出，放置于培养室中水培。水培液面深度为种球高度的3/7，培养条件为：30±2℃，RH 70±10％，光照强度45μmol m^-2s^-1，光照周期24小时/天；每隔10天添加1/8倍MS营养液；培养至芽体膨大，绿色的总苞片内刚现出紫红色花序，但花序未露出来的时候，此时花芽发育得较成熟。

(5)水培开花：将经步骤(4)处理后花芽发育较成熟的种球置于亚热带地区春节的自然条件下或者人工同等条件下进行水培直至开花，即将花芽发育较成熟的种球放入水容器中，水培液面深度为种球高度的1/2，培养的环境温度在10℃以上，湿度在40％以上，光强15μmol m^-2s^-1以上，光照周期为9小时/天以上。并每隔10天添加1/8倍MS营养液。广西莪术的开花率58％，DTF38天，DTL49天，整个花期为35～45天左右，苞片为鲜艳紫红色且色泽明亮。

实施例七：

(1)种球预处理：采集当年11月份广西莪术地上部分枯萎后的种球，洗去泥土、剪去须根，筛选，分级，选择直径为3～4cm的种球，然后将其浸泡与800倍的百菌清溶液中10min，取出晾干；

(2)冷藏：将上述经预处理后的广西莪术种球培养盘中，在种球上覆盖经消毒的干净且湿润的沙，沙的湿润程度以手握成团，松开即散为宜；然后将培养盘放进15℃、RH为80～90％的冷藏室内冷藏40天，冷藏期间每天早晚各喷水一次，以保持冷藏室内RH为80～90％；

(3)催芽：将种球从冷藏室中取出，种球依然覆盖有珍珠岩，放进25℃、RH≥90％的温室中催芽30天，催芽期间每天早晚各喷水一次，以保持温室内RH≥90％；

(4)花芽培养：将催芽后的种球取出，放置于培养室中水培。水培液面深度为种球高度的1/3，培养条件为：30±2℃，RH 70±10％，光照强度45μmol m^-2s^-1，光照周期24小时/天；每隔10天添加1/32倍MS营养液；培养至芽体膨大，绿色的总苞片内刚现出紫红色花序，但花序未露出来的时候，此时花芽发育得较成熟。

(5)水培开花：将经步骤(4)处理后花芽发育较成熟的种球置于亚热带地区春节的自然条件下或者人工同等条件下进行水培直至开花，即将花芽发育较成熟的种球放入水容器中，水培液面深度为种球高度的3/7，培养的环境温度在10℃以上，湿度在40％以上，光强15μmol m^-2s^-1以上，光照周期为9小时/天以上。并每隔10天添加1/32倍MS营养液。广西莪术的开花率16％，DTF42天，DTL50天，花序长度达30cm，整个花期为35～45天左右，苞片为鲜艳紫红色且色泽明亮。

实施例八：

(1)种球预处理：采集当年11月份广西莪术地上部分枯萎后的种球，洗去泥土、剪去须根，筛选，分级，选择直径为3～4cm的种球，然后将其浸泡与800倍的百菌清溶液中10min，取出晾干；

(2)冷藏：将上述经预处理后的广西莪术种球培养盘中，在种球上覆盖经消毒的干净且湿润的沙，沙的湿润程度以手握成团，松开即散为宜；然后将培养盘放进15℃、RH为70～80％的冷藏室内冷藏60天，冷藏期间每天早晚各喷水一次，以保持冷藏室内RH为70～80％；

(3)催芽：将种球从冷藏室中取出，种球依然覆盖有珍珠岩，放进25℃、RH≥90％的温室中催芽20天，催芽期间每天早晚各喷水一次，以保持温室内RH≥90％；

(4)花芽培养：将催芽后的种球取出，放置于培养室中水培。水培液面深度为种球高度的3/8，培养条件为：30±2℃，RH 70±10％，光照强度45μmol m^-2s^-1，光照周期24小时/天；每隔10天添加1/16倍MS营养液；培养至芽体膨大，绿色的总苞片内刚现出紫红色花序，但花序未露出来的时候，此时花芽发育得较成熟。

(5)水培开花：将经步骤(4)处理后花芽发育较成熟的种球置于亚热带地区春节的自然条件下或者人工同等条件下进行水培直至开花，即将花芽发育较成熟的种球放入水容器中，水培液面深度为种球高度的1/3，培养的环境温度在10℃以上，湿度在40％以上，光强15μmol m^-2s^-1以上，光照周期为9小时/天以上。并每隔10天添加1/16倍MS营养液。广西莪术的开花率34％，DTF32天，DTL40天，花序长度达30cm，整个花期为35～45天左右，苞片为鲜艳紫红色且色泽明亮。

实施例九：

(1)种球预处理：采集当年11月份广西莪术地上部分枯萎后的种球，洗去泥土、剪去须根，筛选，分级，选择直径为3～4cm的种球，然后将其浸泡与800倍的百菌清溶液中10min，取出晾干；

(2)冷藏：将上述经预处理后的广西莪术种球培养盘中，在种球上覆盖经消毒的干净且湿润的沙，沙的湿润程度以手握成团，松开即散为宜；然后将培养盘放进15℃、RH为80～90％的冷藏室内冷藏60天，冷藏期间每天早晚各喷水一次，以保持冷藏室内RH为80～90％；

(3)催芽：将种球从冷藏室中取出，种球依然覆盖有珍珠岩，放进25℃、RH≥90％的温室中催芽10天，催芽期间每天早晚各喷水一次，以保持温室内RH≥90％；

(4)花芽培养：将催芽后的种球取出，放置于培养室中水培。水培液面深度为种球高度的1/2，培养条件为：30±2℃，RH 70±10％，光照强度45μmol m^-2s^-1，光照周期16小时/天；每隔10天添加1/4倍MS营养液；培养至芽体膨大，绿色的总苞片内刚现出紫红色花序，但花序未露出来的时候，此时花芽发育得较成熟。

(5)水培开花：将经步骤(4)处理后花芽发育较成熟的种球置于亚热带地区春节的自然条件下或者人工同等条件下进行水培直至开花，即将花芽发育较成熟的种球放入水容器中，水培液面深度为种球高度的1/3，培养的环境温度在10℃以上，湿度在40％以上，光强15μmol m^-2s^-1以上，光照周期为9小时/天以上。并每隔10天添加1/4倍MS营养液。广西莪术的开花率16％，DTF55天，DTL51天，花序长度达35cm，整个花期为35～45天左右，苞片为鲜艳紫红色且色泽明亮。

实施例十：

(1)种球预处理：采集当年11月份广西莪术地上部分枯萎后的种球，洗去泥土、剪去须根，筛选，分级，选择直径为3～4cm的种球，然后将其浸泡与800倍的百菌清溶液中10min，取出晾干；

(2)冷藏：将上述经预处理后的广西莪术种球培养盘中，在种球上覆盖经消毒的干净且湿润的沙，沙的湿润程度以手握成团，松开即散为宜；然后将培养盘放进15℃、RH为80～90％的冷藏室内冷藏50天，冷藏期间每天早晚各喷水一次，以保持冷藏室内RH为80～90％；

(3)催芽：将种球从冷藏室中取出，种球依然覆盖有珍珠岩，放进25℃、RH≥90％的温室中催芽10天，催芽期间每天早晚各喷水一次，以保持温室内RH≥90％；

(4)花芽培养：将催芽后的种球取出，放置于培养室中水培。水培液面深度为种球高度的1/3，培养条件为：30±2℃，RH 70±10％，光照强度45μmol m^-2s^-1；每隔10天添加1/4倍MS营养液；培养至芽体膨大，绿色的总苞片内刚现出紫红色花序，但花序未露出来的时候，此时花芽发育得较成熟。

(5)水培开花：将经步骤(4)处理后花芽发育较成熟的种球置于亚热带地区春节的自然条件下或者人工同等条件下进行水培直至开花，即将花芽发育较成熟的种球放入水容器中，水培液面深度为种球高度的1/2，培养的环境温度在10℃以上，湿度在40％以上，光强15μmol m^-2s^-1以上，光照周期为9小时/天以上。并每隔10天添加1/4倍MS营养液。广西莪术的开花率16％，DTF58天，DTL56天，花序长度达32cm，整个花期为35～45天左右，苞片为鲜艳紫红色且色泽明亮。

本发明可用其他的不违背本发明的精神或主要特征的具体形式来概述。本发明的上述实施方案都只能认为是对本发明的说明而不是限制，因此在与本发明的权利要求书相当的含义和范围内的任何改变，都应认为是包括在权利要求书的范围内。

Claims (10)

1.一种广西莪术水培开花的方法，其特征是，其包括以下步骤：

(1)种球预处理：采集、筛选、分级、清洗和消毒广西莪术种球；

(2)冷藏：将广西莪术种球在13～20℃，相对湿度70～95％的冷藏室内冷藏30～60天；

(3)催芽：将种球从冷藏室中取出，放进25～30℃，相对湿度≥90％的温室中催芽10～30天；

(4)培养花芽：将催芽后的种球放置于培养室中进行水培，培养至芽体膨大，绿色总苞片内现出紫红色花序，但花序未露出来；培养室的培养条件为：25～32℃，相对湿度(RH)70～90％，光照强度45μmol m^-2s^-1；

(5)水培开花：将经步骤(4)处理后的种球置于自然条件下进行水培直至开花。

2.根据权利要求1所述的广西莪术水培开花的方法，其特征是，所述步骤(2)中冷藏的温度为13～17℃，所述的冷藏时间为40～60天。

3.根据权利要求1或2所述的广西莪术水培开花的方法，其特征是，所述步骤(2)中冷藏的温度为14～17℃，所述的冷藏时间为50～60天。

4.根据权利要求3所述的广西莪术水培开花的方法，其特征是，所述步骤(4)中培养室培养的光照周期为12小时/天～24小时/天。

5.根据权利要求4所述的广西莪术水培开花的方法，其特征是，所述步骤(2)冷藏和步骤(3)催芽中均在种球上覆盖干净且疏松的培养介质；冷藏或催芽期间每天喷水两次。

6.根据权利要求5所述的广西莪术水培开花的方法，其特征是，所述步骤(5)中广西莪术进行水培时，水培液面深度为种球高度的1/3～1/2。

7.根据权利要求6所述的广西莪术水培开花的方法，其特征是，在所述步骤(4)中的培养花芽和步骤(5)的水培时，均每隔8～12天添加营养液。

8.根据权利要求7所述的广西莪术水培开花的方法，其特征是，所述的营养液选用浓度为MS营养母液浓度的1/4～1/32倍的MS营养液。

9.根据权利要求8所述的广西莪术水培开花的方法，其特征是，步骤(1)所述的种球选择当年新球，并且是在当年10月和11月采集广西莪术地上部分枯萎后的种球。

10.根据权利要求9所述的广西莪术水培开花的方法，其特征是，所述的种球选用直径为2～6cm种球。

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